Способ получения 6-деоксиантрациклингликозидов

 

Изобретение относится к производным 6-деоксиантрациютингликозидов, в частности к получению 6-деокси-4-, деметилдаунорубицина и 6-деокси-4-деметилдоксорубицина, которые обладают противоопухолевой активностью. Цель - разработка нового способа получения соединений с указанной активностью, имеющих повышенные терапевтические индексы. Получение целевых соединений ведут конденсацией при 6-деоксиантрадиклкна, растворенного в безводном дихлорметане, с 1-хлор-К,0- дитрифторацетилдаунозамином при молярном соотношении 1:3,75 в присутствии трифторметансульфоната Ag (Ю мин) с образованием смеси 7S:9S и 7R:9R N,A- трифторацетилзамещенных производных сГоответствующего деоксиантрациклингликозида. Затем 0-трифторацетильную группу удаляют обработкой метанолом в течение 24 ч при комнатной ратуре. Полученную диастереомерную смесь N-трифторацетильного производного деоксиантрациклингликозида подвергают хроматоградарованию на силикагеле (элюент - смесь дихлорметан: метанол; ацетон в объемном соотношении 20:1:1), вьщеляют 75:98 производное деоксиантрац1жлингликозида, которое после мягкого щелочного гидролиза превращается в 7S:9S гликозид. При необходимости полученные od.-гликозиды обрабатывают бромом в хлороформе с получением соответствуюшрнх 14-бромпроизводных, которые последующим гидролизом водным раствором формиата натрия при комнатной температуре превращают в соответствующий целевой продукт. 4 табл. (/

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ,:-, Fi:—

К ПАТЕНТУ (56) Патент СССР № 993822, кл. С 07 Н 15/252, 1980. (21) 3823254/23-04 (62) 3753950/23-04 (22) 13,12.84 (23) 21.06,84 (31) 8317037 (32.) 23.06.83 (33) ГВ (46) 07.10.88. Бюл. ¹ 37 (71) Фармиталиа Карло Эрба С.п.А. (тт) (72) Франческо Анджелуччи, Сердж

Пенко, Эрмес Ванотти и Федерико Аркамоне (ТТ) (53) 547.682,07(088.8) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 6-ДЕОКСИАНТРАЦИКЛИНГЛИКОЗИДОВ (57) Изобретение относится к производнь:м б-деоксиантрациклингликозидов, в частности к получению б-деокси-4-. деметилдаунорубицина и 6-деокси-4-деметилдоксорубицина, которые обладают противоопухолевой активностью, Цель— разработка нового способа получения соединений с указанной активностью, имеющих повышенные терапевтические индексы. Полученке целевых соединений

151) 4 С 07 Н 15/252, А 61 K 31/70 ведут конденсацией при 5-10 С 6-деоксиантрациклина, растворенного в безводном дихлорметане, с 1-хлор-N,Oдитрифторацетилдаунозамином при молярном соотношении 1:3,75 в присутствии трифторметансульфоната Ag (10 мин) с образованием смеси 78:98 и 7R:9R N,Отрифторацетилзамещенных производных соответствующего деоксиантрациклингликозида. Затем 0-трифторацетильную группу удаляют обработкой метанолом в течение 24 ч при комнатной температуре. Полученную диастереомерную смесь N-трифторацетильного производного деоксиантрациклингликозида подвергают хроматографированию на силикагеле (злюент — смесь дихлорметан:

",метанол".ацетон в объемном соотношении 20:1:1), выделяют 7S:98 производное деоксиантрациклингликозида, которое после мягкого щелочного гидролиза превращается в 7Б:9Б гликозид. При необходимости полученныеа.-гликозиды обрабатывают бромом в хлороформе с получением соответствующих 14-бромпроизводных, которые последующим гидролизом водным раствором формиата натрия при комнатной температуре превращают в соответствующий целевой продукт.

4 табл.

1429935

О ОН О Н2

0Н

0Н 0 НЗ

Из о брет ение относит ся к спо собу получения 6-деоксиантрациклингликози" дов общей формулы где R — водород или гидроксил

Х вЂ” водород, обладающих противоопухолевой активностью, Целью изобретения является разработка способа получения новых произ:, водных 6-деоксиантрациклингликозидов, обладающих таким же уровнем противоопухолевой активности, что и структурные аналоги даунорубицин и доксорубицин, но имеющих более высокие по сравнению с последними терапевтические индексы.

Пример 1, 6-Деокси-4-деметилдаунорубицин (Ia) B — Н, Х вЂ” Н.

К охлажденному до 5-10 С раствору

90 мг (0,24 ммоль) 6-дезоксикарминомицинона, синтезированного в безводном дихлорметане, добавляют одновременно при сильном перемешивании раствор 2,4 мг (0,6 ммоль) 1-хлор-N- ОдитрифтЬрацетилдаунозамина в диэтиловом эфире и раствор 154 мг (О 6 ммоль) трифторметансульфоната серебра в дихлорметане, Спустя 5 мин, прибавляют еще

0,3 ммоль галоидсахарида и 0,3 ммоль трифторметансульфоната серебра. Через 5 мин реакционную смесь промывают коллидином, отфильтровывают, промывают насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, водой, высушивают и концентрируют в вакууме. Полученное масло красноватого цвета разбавляют 100 мл метанола и выдерживают в течение суток при комнатной температуре с целью удаления О-трифторацетильной группы, Полученный сырой продукт очищают хроматографированием на силикагеле с применением в качестве элюента смеси хлористого метилена с метайолом и ацетоном в объем5

30 ном соотношении соответственно 20: 1: 1 с получением oL-гликозида антрациклина формулы (7а), состоящеro нз 7H:9S и 7S:9iS изомеров, имеющих следующие характеристики: изомер 7Б:9S 20 мг, т,пл, 210-212 С, 11 0,27 при ТСХ на кизельгелевых пластинках (Иерк Г . ) с применением в качестве элюента смеси хлористого метилена с ацетоном в объемном соотношении (4:1), m/z 593 (N ), ПМР (2000 11Гц, CDCl>): inter а1 ia 8 1,44 (дублет, 7.=6,6 Гц, ÇH, ОН ) „2, 42 (сии глет, ÇH, CO CH ); 3, 053,25 (два дублета I=19 Гц, Н-10);

4,22 (синглет, lH, ОН-9); 5,01 (триплет, I 3 6 Гц, 1Н, Н-7); 5 20 (триплет, 7=2,7 Гц, 1Н, Н-l ); 6,66 (бинарный дублет, I=9 Ги, 1Н, NH); 7,80 (синглет, 1Н, Н-6); 12,62 (синглет, lH, ОН-4); 13,06 (синглет, 1Н, ОН-П).

25 мг изомера 7R:9R с т.пл, 174178 С, R 0,23 при ТСХ на кизельгелевых пластинках (Иерк Г,,) с применением в качестве элюскта смеси хлористого метилена с ацетоном в объемном соотношении 4:I, m/r, 593 (М ), ПИР (200 MI ö, Cl С7з): inter alia R 1,44 (дублет, 7.=6,5 Гц, ЗН, ОН-5"); 2,41 (синглет, ÇH, СОСН ); 2,96 (дублет, I=19 Гц, 1Н, Н-1О аксиальный); 3,30. (двойной дублет, I=!,19 Гц, 1Н, Н-10 экваториальный); 4,25 (синглет, 1Н, ОН-5); 5,07 (триплет, 7=3, 3 Гц, 1Н, kl-7); 5.27 (триплет, I=1 8 Гц, 1Н, H-1); 6,64 (бинарный дублет, I=9 Гц, 1Н, 11Н); 7, 74 (синглет, 1Н; Н-6); 12,60 (синглвт, 1Н, ОН-4); 13, 10 (синглет, 1H, OH-1 l ), Мягким щелочным гидролизом указанного изомера 78:9S Формулы (Та) удаляют 11-трифторацетильную группу с получением заглавного соединения с количественным выходом 98%, R< 0,47 при

ТСХ на кизельгелевых пластинах с применением в качестве элюента смеси хлористый метилен-метанол-уксусная кислота-вода в объемном "оотношении

80:20: 7: 3.

Пример 2, б-,еокси-4-деметилдоксорубицин (Iá ), R — ОН, X — Н.

Раствор 6-дезокси-4-деметилдаунорубицина, синтез которого описан в примере l, в смеси метанола с диоксаном обрабатывают бромом с. образованием 14-бромпроизводного. Действием на полученное 14-бромпроизводное водного раствора Формата натрия при ком1429935

Продолжение табл.2

155

0,86

Тб

Доксорубицин 7,5

150

255

10,00

Таблица 1

Соединение

Соединение

/с, 7"

Оптималь— ная доза, мг /кг

0,78

3,1

225

3,3

183. Даунорубицин 15, 0

13,0

5,1.

217

250

Тб 5,0

11,2 Доксорубицин 16,9

Доксорубицин

20,0

215

15,5

Со един ение

Доксорубицин

7,5

1,7

2,3

99

72

94

100

Iá

0,66

145

Даунорубицин

4,40

160

4,00

140 натной температуре в течение 100 ч получают 6-деокси-4-деметилдоксорубицин с т.пл. 167-170 С.

R<=0,47 при ТСХ (Мерк Fz<4) в сис- 5 теме растворителей СН Cl :MeOH:AcOH:

:Н О (8:2:0,7:0,3 об/об).

Цитотоксическая активность соединений (Ia) и (m) испытывалась против клеток HELa и клеток мьппиной лейке- 10 мии Р388 в опытах in vitro в сравнении. с даунорубицином и доксорубицином. В табл. 1 даны результаты испытания ингибирования роста колоний в опытах in vitro. 15

Клетки Клетки мышиной

EL8., ID, лейкемии Р388, нг/мл ТЭ, нг/мп

Даунорубицин 14,5 . 5,5 25

«Доза, дающая 50Х-ное понижение числа клеток по сравнению с необработанными контрольными.

Противоопухолевую активность в опы1 .тах in vivo изучали на мышах CDE-1 с асцитической лейкемией Р388 (10 клетки на мьппь) ..

Соединения суспендировали в 10X-ном твине-80 и делали инъекции внутри- 40, брюшинно. В табл. 2 показана противоопухолевая активность против асцитической лейкемии Р388 (обработка внут.рибрюшинно в 1 день после заражения) .

Таблица 2 45 !

Средняя продолжительность жизни в процентах по сравнению с контролем.

В табл. 3 приведены результаты ис пытантФ, проведенных на жшах С Н/Ме с "i.v ° " пересаженной макроскопической лейкемией и обработанных "i,ч," день спустя после трансплантации опухоли.

Т а б л и ц а 3

"Средняя продолжительность жизни по сравнению с контролем.

Кроме того, соединение Хб испыты" вали в отношении С Н твердой раковой опухоли молочной железы, результаты представлены в табл. 4.

Т аб лица 4

Доза, Подавление мг/кг, не- роста опуходеля Х

"Обработка in vivo в течение 4 недель.

""Подавление роста опухоли оцени" вали дпя каждой группы относительно ее собственной контрольной группы, вес опухоли в конце обработки (вес опухоли в начале обработки на 100), 1429935

Формул а из об р ет ения

О 0Н О

t .HzR

0Н

ОН О НЗ

НО НХ где R — водород или гидроксил;

Х вЂ” водород, отличающийся тем, что. рацемический 6-деоксиантрациклин формулы

О ОБ О

25.

СН

OH растворенный в дихлорметане, конденсируют при 5-10 С с 1-хлор-11,0-дитрифторацетилдаунозамином при молярСоставитель Г,Коннова

7 exp ep, H . ÄHä üæ

Редактор Л, Гратилло

Корректор Г, Решетник

Заказ 5149/58 Тираж 348

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, д. 4/5

Подписное

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Способ получения 6-деоксиантрациклингликозидов общей формулы

5 пом соотношении 6-деоксиантрациклина формулы IT и 1-хлор-N,О-дитрифторацетилдаунозамином I:3,75 в присутствии трифторметансульфоната серебра в течение 10 мин с образованием смеси

7S:9S и 7R 9R N,О-трифторацетилзамещенных производных соответствующего деоксиантрациклингликозида общей формулы I, после чего 0-трифторацетильную группу удаляют обработкой метанолом в течение 24 ч при комнатной температуре, полученную диастереомерную смесь N-трифторацетильного производного деоксиантрациклингликоэида общей формулы I подвергают хроматографированию на силикагеле с применением в качестве элюента смеси дихлорметан:

:метанол: ацетон, взятых в объемном соотношении 20:1:1, выделяют 78:9S производные общей формулы 1, где R—

Н; Х вЂ” трифторацетил, который после мягкого щелочного гидролиза превращается в 7S:9Б гликозид общей формулы

I, где R — Н; Х вЂ” Н, при необходимости полученные Ы.-глик< зиды обрабатывают бромом в хлороформе с получением соответствующих !4-бромпроизводных, последующим гидролизом которых водным раствором формиата натрия при комнатной температуре превращают в соответствующий 6-деоксиантрацикпингликозид общей формулы Т, где R - ОН;

Х вЂ” Н,