Способ определения полифенольных соединений в водных и водно-спиртовых экстрактах

 

Изобретение касается аналитической химии, в частности определения полифенольных соединений в водных и водно-спиртовых экстрактах. Цель - повышение точности анализа. Для этого анализируемую пробу высушивают до постоянной массы, обрабатывают диметилсульфоксидом, изопропилбензолом в объемном соотношении 1:(200-400):(3600-3800) и изобутиронитрилом. Далее смесь окисляют кислородом воздуха и по зависимости поглощения кислорода от времени определяют концентрацию полифенольных соединений по ф-ле C пф=W I .&Tgr;)/P где C пф - концентрация полифенольных соединений, моль/кг

W I - скорость инициирования 6,8 .10 -8 моль/л .с.

&Tgr; - период индукции, с

P - навеска анализируемой пробы, кг/л. Затем определяют полифенольные соединения относительно стандарта - галловой кислоты. Ошибка определения составляет 4%. 2 табл.

„.,Я0„„1578651

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛ ИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИК

А1 (51)5 С 01 N 33/18

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К А BTOPCKO9IV СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЬ Й КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4436941/31-04 (22) 06.06.88 (46) 15 ° 07.90. Бюл. У 26 (71) Институт химии нефти СО АН СССР (72) С.И.Писарева, В.Н,Буркова, Г.И.Калинкина и А.А.Сидоренко (53) 543.42.062(088,8) (56) Государственная фармакопея

СССР, ХТ изд., 1987, с. 286.

Карпова В.И,, В.Л.Шелюто. К динамике полифенольных соединений, флавоноидов и сапонинов в наумбургии:

Научные труды ВНИИФ, Современные методы исследования лекарственных растений, т. ХХ. М., 1983, с. 109116. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОЛИФЕНОЛЬНЫХ

СОЕДИНЕНИЙ В ВОДНЫХ И ВОДНО-СПИРТОВЫХ

ЭКСТРАКТАХ (57) Изобретение касается аналитической химии, в частности определения

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам определения полифенольных соединений в водных и водно-спиртовых экстрактах.

Целью изобретения является повышение точности способа.

Пример 1. Навеску (0,0025,г) водного экстракта тысячелистника азиатского, полученного методом быстродействующей реперполяции по ЦАНИИ, отфильтрованного после отстаивания через бумажный фильтр "черная лента" и высушенного лиофильно до постоянного веса, помещают в реакционный сосуд объемом 11-12 мл, растворяют в

ДМСО (0,5 мл) при соотношении экст2 полифенольных соединений в водных и водно-спиртовых экстрактах. Цель— повышение точности анализа. Для этого анализируемую пробу высушивают до постоянной массы, обрабатывают диметилсульфоксидом, изопропилбензолом в объемном соотношении 1:(200-400):

;(3600-3800) и изобутиронитрилом. Далее смесь оки ляют кислородом воздуха и по зависимости поглощения кислорода от времени определяют концентрацию полифенольных соединений по ф-ле

С„= (v. ° 1, ) /P, где С„ф- концентрация полифенольных соединений, моль/кг; скорость инициирования 6,8 х

-8 л х 10 моль/л с; — период индукции, с; Р— навеска анализируемой пробы, кг/л. Затем определяют полифенольные соединения относительно стандарта галловой кислоты. Ошибка определения составляет 47. 2 табл. ракт:ДМСО 1:200, добавляют инициатор — азобисизобутиронитрип (А11БН)

10,1 мг и кумол в соотношении,1 .!СО:

:кумол 1:19 (общий объем реакционной смеси равен 10 мл). Сосуд продувают кислородом и соединяют с гаэометрической установкой. Затем сосуд помещают в термостат с водой при 60 + 4 0,02 С и при встря:;иванни 5-7 циклов в секунду проводят измерение поглощения кислорода реакционной смесью. Строят график зависимости объема поглощенного кислорода от времени, определяют период индукцйи (). Концентрацию полифенолов определяют по формуле:

W где 1

Р имК вероятность выхода радикалов в объем из "клетки"

D растворителя при t = 60 С равна 1,1; константа скорости распада инициатора при 60 С равна

1 10 1/с; концентрация инициатора

АИБН с молекулярной массой

164 при навеске 10,1 мг в10 мл реакционной смеси равна иниц, 10 1 1000 „9 — - — —,— — = 6, 16 -10 моль/л;

10 ° 1000 164

w; = 1,1,-1 10 6,16 ° 10 = 6,8 х х 10 моль/л .с9

6 8 ° 10 630

С = - - — - - — — = 0,17 моль/кг. пф 2,5 10-

3 15 л

С =-- — > сэ р где С вЂ” концентрация полифенолов пф в моль/кг;

7 — период индукции, с, равный

10,5 60 630;

P — навеска анализируемой пробы, 0,0025 г или в расчете на

10 мл растворителя 2,5 х х 10 кг/л;

w - скорость инициирования, которую определяют по формуле

Процентное содержание полифенолов в растительных экстрактах относительно стандарта галловой кислоты определяют по формуле

% ПФ = — — — - 100%.

С экст

Г, к .-ты

Результаты представлены в табл. 1.

Для оценки точности способа определяют содержание галловой кислоты, %, в модельных смесях, Пример 38. К 2,5 мг высу.пенного лиофильно водного экстракта добавляют 0,125 мг галловой кислоты (5,0%) и обрабатывают по примеру 1.

Суммарная концентрация палифенольных соединений равна 0,55 моль/кг.

78651 ный фильтр "черная лента и высушенного лиофильно до постоянного веса, обрабатывают по примеру 1 ° Концентрация полифенолов

6 8 10 38.60 с

С - - - — — — — --- — 0,62 моль/кг, 2,5.10 кг/л

Остальные примеры на оптимальные и запредельные параметры соотношений экстракт;ДМСО-кумол приведены в . табл. 1 (примеры 26-36).

Пример 37, Навеску (0,00025 г) стандарта галловой кислоты (ГОСТ 272655) обрабатывают по примеру 1.

6 8.10 60.45 моль/кг, Остальные примеры на оптимальные

35 и запредельные параметры соотношений экстракт:ДМСО:кумол приведены в табл. 1 (примеры 2-12).

П р.и м е р 13. Навеску (0,0025 г)

20%-ного водно-спиртового экстракта тысячелистника азиатского, полученного методом реперполяции по Чулко.ву Н.А., профильтрованного через бумажный фильтр "черная лента" и высушенного лиофильно до постоянного

45 веса, обрабатывают по примеру 1. Концентрация полифенолов

6 8 -10 моль/л. с . 25 60 с ф 2, 5 -10 кг7л

0,41 моль/кг, 50

Остальные примеры на оптимальные и запредельные параметры соотношений экстракт:ДМСО:кумол приведены в табл. 1 (примеры 14-24}.

Пример 25. Навеску (0,0025 г)

40Х-ного водно-спиртового экстракта тысячелистника азиатского, полученно,го методом реперколяции по Чулкову Н.А., отфильтрованного через бумажУ ПФ = - -- 1007 = 7 5

0 55

7,3

Галлавой кислоты 7,5-2,3 = 5,2%

Аналогично проводят анализ модельных смесей с добавкой стандарта 10, 15, 20Х (табл. 2, примеры 39-41).

Пример 42. К 2,5 мг высушенного лиофильно 20Х-ного водно-спиртового экстракта добавляют О, 125 мг галловой кислоты (5,0%) и обрабатывают по примеру 1. Суммарная концентрация полифенольных соединений

О,?9 моль/кг. ,% ПФ = - — 100% = 10 8Х.

0 79

7,3

% содержания галловой кислоты в смеси

10,8 5,6 5,2%, Аналогично проводят анализ модельных смесей с добавкой стандарта 15, 20 и 25Х (табл. 2, примеры 43-45).

Пример 46. К 2,5 мг высушенного лиофильно водно-спиртового экстракта тысячелистника азиатского добавляют 0,05 мг галловой кислоты

1578651

Таблица!

Содержание полифенолов в водных н водно-спиртовых растительных экстрактах при различных параметрах предлагаемого способа

Соотношение Кснцентэкстракт; рация ПФ, :ДМСО:кумол моль/кг г:мл:мл

Пример, !!>

Концентра ция ПФ в оптимальПримечание

Содержание ПФ, 2 относительно галловой кислоты по способу

Модельные смеси экстракт+ галловая кислота

Введено Опредс- Ошибка ных условиях, моль/кг станлапта, 7. лспо предла- !нзвестгаемому !ному опрел пения отн,й стандарта 1

1, l а 1: 200: 3800 О, 17

2 1:300:3700 О, 17

3 1:400:3600 0> 17

4 1: 150: 3850 О, 05

5,0

S,0

5,0

5,0

5,2

5,1

5,0

1,0

4,0

2,0 о

ВО,О

О,17

2,3

7,5

Навеска частично растворима

Влияние ДМСО на кинетику окисления кумола

Нввеска частично растворима большая ошибка определения

Наэеска частично растворима, большая o»:»áка определения

Влияние ДМСО на кинетику окисления, большая ошибка определения

5 1: 450: 3550 О, 12

6 1:!90:3810 О, 15

7 1: 180:3820 О, 14

8 1: 170:3830 О, 12

9 1: 110;3890 0,03

5,0

2,2

76,0

5,0

5,0

2,О

2,1

60,0

56,0

5,0

s,о

2,2

2,1

60,0

58!О

10 1:420:3580 О, 12

11 I 430:3570 0> 12

12 1:440:3560 0,14

13 1:200:3800 0,41

14 1:300:3700 0,42

15>

15а 1:400:3600 0,40

16 1: 150:3850 О, 15

7О,О

ВО,О

8O,О

2,0

2,0

5,0

5,0

5,0

5,0

5,0

l,5

1,о

1,О

5,1

4,9

О;41

5,6

8,5

5,0

5,0

5,2

I,О

4,0

ВО,О

Навеска частично не растоорима

Влияние ДМСО нв кинетику окисления кумола, большая ошибка определения

Навеска частично растворима, большая ошибка определения

Навеска частично растворима, большая ошибка определения

17 1:450:3550 0,25

5,0

1,5

7О,О

18 1: 190: 3810 0, 24

19 1:180:3820 0,23

5,0

5,0

1,5 ,-,0

7О,О

60,0

56,0

20 1: 170: 3830 О, 20

5,0

2,2

21 1: 110: 3890 О, 12

22 1:420:3580 0,31

5,0

5,0

2,4

1,8

52,0

64,0

Влияние ДМСО на кинетику окисления кумола большая ошибка определении

То же

23 I:430:3570 0,29

2,О

5,0

60,0

24 1:440:3560 0,27

25 1:200:3800 0,62

26, 26в 1:300:3700 0,63

5,0

5,0

1,7

4,9

66,0

2,0

0,62

8,5

10,8

5,0

5,0 (2,07) и обрабатывают по примеру 1.

Суммарная концентрация полифенольных соединений 0,77 моль/ кг.

7 ПФ = -2-- 100X = 10 57.

0 77

?,3

Определено галловой кислоты 10,5—

8,5 = 2,0Х.

Аналогично проводят анализ модельных смесей с добавкой стандарта 5, 8 и 107. (табл. 2, примеры 47-49).

В табл. 1 (пример 1а) приведены результаты опытов по о1тределению полифенольных соединений известным способом в водных (примеры 15а, 26a), в водно-спиртовых экстрактах и с добавками галловой кислоты (табл.1, примеры 38а-49а).

Использование предлагаемого способа позволяет определять содержание полифенольных соединений в растительных экстрактах с относительной .ошибкой «+ 4,07, что в 8-10 раз точнее, чем по известному способу..Формула иso бре те ния

Способ определения полифенольных соединений в водных и водно-спиртовых экстрактах с использованием обработки пробы окислителем, о т л и ч а юшийся тем, что, с целью повьппения точности .способа, анализируемую пробу высушивают, растворяют в диметилсульфоксиде, добавляют изопропилбензол, окисляют кислородом в присутствии азобисизобутиронитрила и по скорости поглощения кислорода реак20 ционной смесью определяют количество полифенолов.

1578651

Продолжение табл. I

Соотношение экстракт:

;F0:кумол г:мл;мл

Концентра ция ПФ в оптимальных условиях, моль/кг

Примечание

Содерпанне ПФ, Х относительно галловой кислоты по способу

Концентрация ПФ, моль/xr

Модельные смеси экстракт+

+галловвя кислота

Пример, 8>

Введено стандарта, Х

Определено

Ошибка опредепредла- иэвестгаемоиу !ному станНаптвв Х пения, отн.Х

27 1:400:3600 0,62

28 1:150:3850 0,30

5,0

5,0

4,8

2,0

4,0

60,0

Навеска частично расгворима, большая .ошибка определения

Влияние ДМСО на кинетику окисления кумола, большая о!вибка определения

Навеска нерастворима, большая ошззбке определения

То ке

Навеска нерастворима, большая ошибка определенин

Влияние ДМСО па кинетику окисления кумола, большая ошибка определения

То ке

29 1:450:3550 0,41

5,0

2,5

50,0

30 1:190:3810 0,44

31 1:180!3820 0,40

5,0

5,0

2,3

2,2

54,0

56,0 32 1: 170:3830 0,35

33 1:110:3890 0,21 !

5,0

5,0

2,0

1,8

60,0

64,0

34 1:420!3580 0,50

35 1:430:3570 0>48

5,0

5,0

2,0

2,0

60>0

56,0

5,0 2,1

36 1:440:3560 0>47

37 Галловая кислота

1:200:3800 7,3

1:300:3700 7 3

1:400:3600 7,2

58,0

7,3!

Твблипв2

Результаты вивлиэв модельных смесей

Модвльивв смесь Пример

Олисьшвемый способ

Введено Определено Овибкв стандарта, стандарта, олрвделвХ Х иии, оти.Х

Введено Опрвделвстандарта, ио стан. Х двртв, Х

Овибкв определении, оти.I

Водный экстракт + гвлловвл кислота

20Х-ай водно-спиртовой экстракт + гвлловвл хислотв

40Х-иый водно-спиртовой экстракт + гвлловвл кислота

Составитель С>Хованская

Техред М.Ходанич Корректор М Ложо

Редактор Е.Копча

Заказ 1914 Тираж 512 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб>э д. 4/ 5

< Проиэводственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина, 101

ЗВ,ЗВв

ЗУ,ЗУв

40,40в

41,4!в

42,42в

43,43в

44,44в

45,43в

46,4Ьв

47,47в

48,48в

4У,4Ув

I0 !

3 !

5

В

5,2

У,7 !

4,5

2 ° 5

5,2 !

4,5

20,3

24,0

2,0

4,9

8,2

9,8

+4,0

-3,0

-3,3

+2,5

+4,0

-3,3

+1 ° 5

+4,0

О

-2,5

+2>5

-2>0

10 !

I5

26

5

8 !

4

8,5

I I,2

l4

4>5

14,0 !

4,4

20,2

0,6

3,4

6,9

7>3

-20

-15

-25,3

-30

-I О

-6,Ь

-27

-!9,2

-35

-32

-13,8

-27