Способ определения обострения хронического панкреатита

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургической гастроэнтерологии, и касается вопросов определения обострения хронического панкреатита. С целью повышения точности способа в крови больного определяют активность глутатионпероксидазы и редуцированный глутатион, рассчитывают их соотношение и при его значении 1,86-4,00 определяют обострение хронического панкреатита. Предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет в медицинской практике на 6-10 дней раньше определить с точностью до 95% обострение хронического панкреатита.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ

РЕСПУБЛИН (51)5 G 01 N 33/48

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К A ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР (21) 4384195/30-14 (22) 29.02.88 (46) 15.10,90. Бюл, Р 38 (71) Рижский медицинский институт (72) В,.Р.Пурмалис, Г.В ° Пупелис, P.А,Пупеле и Р.,Ф.Клейна (53) 616,07 (088,8) (56) Филин В.И. Острые заболевания и повреждения поджелудочной железы, 1982, с ° 56-60. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБОСТРЕНИЯ

ХРОНИЧЕСКОГО ПАНКРЕАТИТА (57) Изобретение относится к медицине, в частности к хирургической

Изобретение относится к медицине, в частности к хирургической гастроэнтерологии и касается вопросов раннего определения обострения хронического панкреатита, Цель изобретения вЂ” повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

У больного с подозрением на обострение хронического воспалительного процесса в поджелудочной железе берут кровь из локтевой вены (5-6 мл) в пробирку с несколькими каплями гепарина для предупреждения свертывания и перемешивают стеклянной палочкой при комнатной температуре.

Глутатионпероксидазу и редуцированный глутатион определяют одновреме нно.

Определение глутатионпероксидазы.

„„ЯО„„1599773 А 1 гастроэнтерологии, и касается вопросов определения обострения хронического панкреатита. С целью повьппения точности способа в крови больного определяют активность глутатионпероксидазы и редуцированный глутатион, рассчитывают их соотношение и при еro значении 1,86-4,00 определяют обострение хронического панкреатита.

Предлагаемый способ по сравнению с известным позволяет в медицинской практике на 6-10 дней раньше. определить с точностью до 957 обострение хронического панкреатита, В две пробирки набирают одинаковое количество состава: 1 3 мп 0,1 М раствора трис-буфера (рН 7,3), который содержит 5 мМ аэида натрия (ИаМ ) и 2 мМ раствора ЭДТА. К буферному раствору добавляют 0,5 мл 2,5 мМ свежеприготовленного раствора.редуцированного глутатиона (РГ) и 0,2 мп крови. В одну из пробирок (А) добавляют 0,5 мл тридестиллированной водругgto пробирку (Б) добавляют

0,5 мп 1,8 мМ раствора гидроперекиси водорода (Н О ). Реакция длится 1 мин.

Прекращают реакцию добавлением осаждающего раствора по 3 мл в каждую пробирку. Осаждающий раствор состоит .из 1,67 r ледяной метафосфорной кислоты, 0,2 г ЭДТА, 30,0 r натрия хлористого (NaC1) на 100 мл дистиллированной воды. Через 5 мин содержимое пробирок фильтруют. К 8 мл 0,3 мМ

1599773 раствора двузамещенного фосфата натрия в дистиллированной воде добавляют 2 мл фильтрата и 1 мл реагента

Эллмана (40,0 мг РТНБ растворенной в 200 мл 1%-ного раствора цитрата натрия). Окрашенную смесь анализируют спектрофотометрически при длине волны 412 нм. Активность глутатионпероксидазы (ГП) определяют по разни- 20 це экстинкций окраски при 412 нм между контрольной пробиркой и пробиркой с индуцированной реакцией перекисного окисления в течение lмин при комнатной температуре в 1 мл кро- 25 ви и выражают в милимолях редуцированного глутатиона (использованного в данной реакции в течение 1 мин в

1 мл крови).

Расчет. производят по формуле кон

Ф1

412 нм;

F. „„- экстракция в контрольной пробирке; 25

Е вЂ” экстинкция в пробирке с проб индуцированной реакцией, Е вЂ” экстинкция при неферментаНефсрм. оксида тивной оксидации, величина константная и составляет 0,03 ед.

Пересчет на милимоль редуцированного глутатиона на 1 мл крови производят по следующей формуле:

Акт ГП = Е 41, K ммоль Редуциророванного глутатиона, использованного за 1 мин реакции в 1 мл

40 крови, Поправочный коэффициент

0 .24 х10 х1 1» 2 .75 5 вЂ” I l

30 где 0,24 вЂ” мкг сульфгидр. групп соответствует показанию 0,1 45 на шкале спектрофотометра;

11 - разбавление при окрашивании;

2,75 вЂ” переход на все количество в пробирке; 50

5 - переход на 1 мл крови;

33 вЂ” мол. масса сульфгидр. группы.

Определение редуцированного глутатиона.

1 1,8 мл дистиллированной воды

I добавляют 0,2 мл цельной крови, к полученному гемолизату добавляют 3 мл осаждающего раствора (аналогичный раствор используется при определении

ГП) и через 5 мин фильтруют. Окрашивают аналогично. Контроль ведут как анализ, только вместо крови берут дистиллированную воду. Результат анализируют на спектрофотометре при длине волны 41? нм и выражают в ммоль/мл крови. Расчет производят по формуле. конц PI E 411 I;, Поправочный коэффициент

О 24х10к2 5м5

Формула та же, что при определении активности ГП только вместо 2,75вЂ” переход на все количество в пробирке, в этой формуле 2,5, После определения фермента глутатионпероксидазы (ГП) и редуцированного глутатиона (РГ) вычисляют индекс соотношения ГП/РГ и при индексе соотношения ГП/РГ от 1,86 до 4,0 диагностируют обострение хронического воспалительного процесса в поджелудочной железе.

Пример 1. Больная А., 68 лет, поступила в клинику с жалобами на боль в спине и поясничной области.

В анамнезе приступы боли в верхней половине живота после приема жирной пищи, I

Объективно: все клинические анализы в пределах нормы, кроме незначительной протеинурии (0,01%). При пальпации вЂ” живот мягкий, болезненность в эпигастральной области, в правом подреберье и правой латеральной области. Индекс соотношения

ГП/РГ при поступлении 4,0. Больная получила консервативную терапию в течение 7 дней. Рентгенологически выявлена желчнокаменная болезнь.

Произведена холецистэктомия и внутриоперационная холангиография. Во время операции обнаружено уплотнение поджелудочной железы в области головки. Взята биопсия поджелудочной железы, Иорфологический анализ биоптата выявил сужение концевых .железистых отделов из-за набухания клеток, базальное .расположение ядер и резкую вакуолизацию с накоплением липидов. В очагах резкого просветления апикальной части клеток отсутствие гранул зимогена, зимоген выявлен в просветах ацинусов. Расширены

1599773 вставные внутридольковые и междольковые протоки. В непосредственной близости участков нарушения микроциркуляции наблюдались мелкие очаго1 вые некрозы клеток экзокринной части поджелодочной железы. Послеопера.ционное течение осложнилось болевым синдромом, рвотами, вздутием живота.

Через )-6 сут после операции индекс соотношения ГП/РГ был 3,4, а через

7-13 сут. после операции не снижался и составил 3,55, что свидетельствовало об обострении, хронического сопутствующего панкреатита, который четко выявило морфологическое обсле" дование биоптата ПЖ и который не был установлен до операции клинически„ хотя индекс ГП/РГ указывал на обострение хронического воспаления поджелудочной железы.

Индекс соотношения ГП/РГ составил

4,0, что свидетельствовало о наличии обострения хронического панкреатита и о том, что не рекомендуется прово" дить операцию. Однако больная была прооперирована, что привело в послеоперационном периоде к тяжелым осложнениям.

Пример 2, Больная Г., 68 лет, поступила в клинику на плановуЮ операцию по поводу аденомы Фатерова соска, доказанной зндоскопически и морфологически. В анамнезе у больной хронический панкреатит. Произведена

35 панкреатодуоденальная резекция.

Во время операции обнаружен хронический индуративный панкреатит, подтвержден морфологическим анализом операционного препарата. Новый способ до операции выявил индекс ГП/РГ

2,3, что указывало на обострение хронического панкреатита. Другие клинические признаки обострения панк-. 45 реатита на выявлены ° Однако больной произвели операцию, Послеоперационный период осложнился выраженным болевым синдромом и кишечной атонией, заживление вторичным натяжением.

Через 1-6 сут после операции индекс

ГП/РГ был 3,13, а через 7-13 суток после операции индекс ГП/РГ был 2,11, что свидетельствовало о послеоперационном панкреатите.

r1 р и м е р 3, Больная В., 49 лет, поступила в клинику с жалобами на боль в правом подреберье, подложечной области, тошноту, рвоту.

Объективно: клинические анализы в пределах нормы, пальпаторно болезненность в правой подреберной области и эпигастральной области. Индекс

ГП/РГ 1,86. Установлено обострение хронического холецистопанкреатита, начата консервативная терапия H течение 15 дней. Начальные симптомы регрессировали. Индекс ГП/РГ снизился до 1,79. Ввиду положительной динамики после консервативной терапии больной произведена операция холецистэктомия в плановом порядке.

Морфологический анализ пункционного биоптата выявил, что просветы концевых железистых отделов (ацинусов) сужены иэ-за набухания клеток, как панкреатоцитов, так и центроацинозных клеток. Контуры клеток нечеткие, ядра расположены базально, Цитоплазма клеток резко вакуолизирована, определялись большие вакуоли до 1/3 площади клеток, где выявлены капли липидов. Данные морфологического анализа биоптат подтвердили правильность дооперационного диагноза и выбранной тактики подготовительной консервативной терапии до снижения величины индекса ГП/РГ ниже 1,86, что указывает на эатихание обострения хронического панкреатита и благоприятного момента для плановой санации желчных путей. У данной больной послеоперационный период протекал без осложнений. Выписка на 9-е сутки после операции

Приведенный пример показывает высокую эффективность использования индекса ГП/РГ в качестве показателя клинического течения обострения хронического панкреатита, обеспечивающего возможность выбора правильной лечебной тактики.

Применение способа в медицинской практике позволяет повысить точность определения обострения хронического панкреатита до 957. на 6-10 дней раньше, чем при использовании известного способа.

Формул а изобретения

Способ определения обострения хронического панкреатита путем иссле-. дования ферментативной активности крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа, определяют активность глутатионпероксидазы и редуцированный

1599773

Составитель Н.Валеева

Редактор Л,Г1чолинская Техред М„Дидык Корректор О,Кравцова

Тираж 511

Заказ 3139

Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ужгород, ул. Гагарина,!01 глутатион, рассчитывают соотношение первого показателя ко второму и при его значении 1,86 вЂ” 4,00 определяют обострение хронического панкреатита.

Способ определения обострения хронического панкреатита

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для диагностики пиелонефрита

Способ определения восстановления кровотока при инфаркте миокарда на гистологическом препарате // 1599699

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии

Устройство для дисперсионного исследования аэрозолей // 1599429

Изобретение относится к медицинской технике и может быть использовано при дисперсном исследовании аэрозолей

Способ определения степени тренированности спортсменов, специализирующихся в видах спорта с проявлением выносливости // 1598971

Изобретение относится к спортивной медицине и может быть использовано при этапных обследованиях спортсменов, а также в процессе отбора в сборные команды

Способ приготовления гистологических препаратов лимфоузлов // 1597667

Изобретение относится к области медицины, а точнее к гистологии, и может быть использовано для окраски препаратов лимфоузлов

Способ определения синдрома холестаза // 1597666

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии

Способ оценки биологической активности препаратов из комплекса нуклеотидов // 1597665

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии

Способ прогнозирования гнойно-септических заболеваний у детей // 1597664

Изобретение относится к области медицины, а именно к инфекционным заболеваниям

Способ оценки эффективности лечения гипоплазии зубной эмали // 1597191

Изобретение относится к медицине, в частности к стоматологии, и может быть использовано для выявления высокоэффективных препаратов, предназначенных для повышения резистивности твердых тканей зубов при некариозных поражениях в условиях клиники и эксперимента

Способ скрининга нематицидов // 1596251

Изобретение относится к области биотехнологии и касается защиты растений от нематод

Способ контроля состояния сельскохозяйственных и пищевых веществ или лекарственного препарата и устройство для его осуществления // 2100805

Способ определения в пробе цельной крови распределения вероятностей в популяции эритроцитов их подмножеств и устройство для его осуществления // 2100807

Способ определения гетероциклических нитросоединений в биологическом материале // 2100808

Способ выявления лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах // 2101699

Изобретение относится к медицине, а именно к анатомии, топографической анатомии, патологической анатомии и может быть использовано для изучения лимфоидных узелков в тотальных анатомических препаратах макромикроскопическом поле видения в норме, в возрастном аспекте, в эксперименте и патологии

Способ ионного парамагнитного резонанса на нервном волокне // 2101700

Изобретение относится к медицине, в частности к способам неинвазивной диагностики функционирования биологических мембран и соответствующей оценке метаболических процессов в организме на клеточном уровне

Способ прогноза хронического рецидивирующего течения заболевания у лиц, перенесших первичную рожу // 2101701

Изобретение относится к медицине, а именно инфекционным болезням и дерматологии, и может найти применение как в стационарных, так и поликлинических условиях

Способ определения реактивного лизиса клеток // 2101702

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской биохимии, и может быть использовано для определения реактивного лизиса клеток в содержащей комплемент биологической жидкости в клинической практике и в научных исследованиях

Способ определения наличия активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите // 2101703

Изобретение относится к медицине и предназначено для оценки активности воспалительного процесса при ревматоидном артрите путем биохимического исследования сыворотки крови

Способ дифференциальной диагностики миокардита и миокардитического кардиосклероза // 2102749

Устройство для локального подведения биологически активных веществ // 2102750