Способ диагностики аллергии

Авторы патента:

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

Изобретение относится к медицине, а именно аллергологии, и может быть использовано для выявления причинно-значимых аллергенов у больных с аллергическими заболеваниями. Целью изобретения является повышение точности и ускорение диагностики . По методу Airman P.P. (1972) определяют активность глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы до и после инкубации крови с аллергеном в концентрации 100- 10 pNU/мл в течение 20-40 мин. При увеличении активности фермента на 40% от исходного и более диагностируют аллергию к исследуемому аллергену

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (51)5 G 01 N 33/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

12,5

14.0

4.15

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4719269/14 (22) 14.07.89 (46) 15.10.91. Бюл. ¹ 38 (71) Ленинградский педиатрический медицинский институт (72) И.M.Âîðîíöîâ и Н.М.Севрук (53) 615.475(088,8) (56) Фрадкин В.А. Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови. вЂ” М„ Медицина, 1985, с.6 вЂ” 18. (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АЛЛЕРГИИ (57) Изобретение относится к медицине, а именно аллергологии, и может быть испольИзобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано для выявления причинно-значимых аллергенов у больных с аллергическими заболеваниями.

Целью изобретения является повышение точности и ускорение диагностики, Способ осуществляют следующим образом, Выявление активности глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы в полиморфно-ядерных лейкоцитах проводят по методу Altman F.P. (1972).

В ячейки планшета для иммунологических реакций вносят по 0.02 мл растворов аллергенов, разведенных до 10 в 199 сре-з де на растворе Хенкса (используются коммерческие серии аллергенов, содержащие

10000 pNU/ìë). В другую ячейку планшета вносят 0,02 мл 199 среды на растворе Хенкса..Затем в эти ячейки вносят по 0,04 мл гепаринизированной крови (гепарин из расчета 10 ед/мл) и проводят инкубацию в те„„SU „„1684688 А1 эовано для выявления причинно-значимых аллергенов у больных с аллергическими заболеваниями. Целью изобретения является повышение точности и ускорение диагностики, По методу Altman F.P. (1972) определяют активность глюкозо-6-фосфат-дегидрогенаэы до и после инкубации крови с аллергеном в концентрации 10010 pNU/ìë в течение 20 вЂ” 40 мин. При увеличении активности фермента на 40 (, от исходного и более диагностируют аллергию к исследуемому аллергену. чение 20-30 мин при 37 С. После инкубации делают мазки крови на предметных стеклах и высушивают. Затем готовят инкубационную смесь для выявления активности глюкоэо-6-фосфат-дегидрогеназы, для чего в химический стаканчик последовательно вносят:

Вода дистиллированная, мл 3,0

0-глюкозо-6-фосфат-натриевая соль, М.м = 358,2 (Serva), мг 44,0

j3--Н икотинамид адениндинуклеотидфосфат натриевая соль

M.ì = 801,4 (Serva), мг 57,5

0,2 М раствор трис-HCI буфер, рН = 7,60,мл

Натрия цианид,мг

Декстран, M.ì. = 500000 (Pharmacla Sweden), г 3.0

0,15 -ный раствор ТНСТ (тетранитросиний тетразолий).

М,м. = 907,7 (Serva). мл

1;ь-ный раствор ФМС (фенаэинметасульфат), nx1+nx2 I-пх3

100 (К2 -К1)+100

t.1 И

М.л1 вЂ” 308 3). л1л 0,51

Вода дигтиллирпвдннэя до об((сего с бьемд, мл 25,0

14а предметное гтекло с гухим нефиксировэнным мазком крови наносят 1,0- 1,5 мл приготовленной ех temporae инкубационной среды и помещают в термостэт на 20 мин при t:= 37"С. Затем стекла проглыяают в дистиллированной воде, фикгируют мазок

2 3 мин в 10;(,-ном зэбуференном формалин» и повторно промь(вакыт дистиллированной водой, Стекла выгушивэют. Ядра клеток дпкрашивдюг 3 мин 0,1%-ным рэс(вором неитральнпго крэгного нэ 0,1 М ацетэтном буфере рН - 5.0. Г1ромывают высушивают, микрог.копируют.

B (le!I(1 (t lH3Io T среднии ци сохимический коэффициент (СЦК), условно принимая интенсивность образования гранул диформаэдна (1 неигрофилэх зэ слабо (!пложительную 1, положит ель!!у(о 2, резко положительную 3 (де CljK ср(.днии цитохимический козффиц(1Р. Нт: п количес1во неитрофилов с данной

c(c;rIet! t,to интенсивности обрдэовэния гра нул, 1,?, 3 etc пень интенсивности образо(дния грднул;

100 коли lerlno просмотренных в мазке клеток

О прирос (е эк(ивност(1 фермен (а судят пп разнице знач lltll1 СIIK после инкубэции с аллерсеном (I исходнпи активнпсти фс рмента, вырдж»HIIol1 в Ilpolt(.ítnë: оо птношеНИК1 К ИГХОДНОИ (Iрирпсг эк((1лнс!сти ф»рл1! нтэ.%

Дпмэшняя nl,l(it, с .pl!!i 25

Т и же. серии 261

To we, серии 236

f t iIIä ((р»скэ)

Яй!(о (курllllo» ц»!!(,н(1(,)

Vonît,о

11ыльцд б»резы

Т1 c (ò !,ot! (Ппльнэя жидлосгь

По даннь!м с.с1(; (едпс!э(«! Ilt I!if л! .нд сан

;.иб(1л(1зэ((!1я к сл»дуг(!!(I:Itl (1!!Р(»!.ндг! д(!

M3ItlHpè п(,lilt! г! .I!(1l1 " . 7 . реслp., куриныл1 яйцам, чтп поctT(!с111....(!.нп кпжt l,lt1(1 (;t nрификдI(!1(1IIГ! I It °,I (1 1."<, . С C! !! I!

I g! . К1 значение СЦК исходное;

К2 значение СЦК после инкубации крови с аллергеном

Диэгностически значимым считается прирост активности фермента нэ 40% от исходного и больше.

Способ подтверждается следующими примерами, Пример 1. Больная Л., 11 лет. Диагноз: астматический бронхит, атопический (сенсибилиэация к пыли), легкое течение, внеприступный период. Сопутствующий диагноз: аллергический ринит. Пищевая аллергия (сенсибилизация к группе облигатIIbIX аЛЛЕРГЕНОВ).

1 !

Из энамнезэ известно, что у ребенка с зтя гощенной а гопической наследственно2(1 стью первые проявления пищевой аллергии

1эблюдались с 2-месячного возраста в виде

=еборрейной экземы. которая в дальнеиIIJeM трансформировалась B нейродермит. (Эбострение кожных проявлений отмечалогь при употреблении в пищу цитрусовых. шоколада. фруктовых соков, яиц, рыбы.

С 7 лет отмечалась заложен ность носа с периодическими приступами многократного чихания. С 9 лет появились явления бронхидльной обструкции впервые после работы в школьной библиотеке, которые купировались зуфиллином. солутэном. С 11 лет типичные приступы затрудненного дыхания. !

Проведено обследование согласно предлагаемому способу.

Получены следующие результаты: исходная активность глюкозо-б-фосфат-деI идрогеназы вЂ” СЦК вЂ” ?,14.

1I) Активность фермента после стимуляции дллер(енэми;

СЦК % прироста активности

3,58 67,2

2,84 23,4

2,81 31,3

3.32 55.1

3,2 1 55,0

2,31 7,9

2,37 10,7

2.29 7.0

Пример 2. Ьольная Л., 7 лет. Диагноз. бронхиэльнэя эс1ма типичная, атопическая

1сенсибилизэция к домашней пыли). средне(яжелое течение. Внеприступный перис>д, Из анамнеза известно, что у ребенка с лясощенно(1 а опической наследственно108 1г1 .1 элции с эллергенами домашнс11 пыли О1ме чЛЛСЯ ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЙ ЗффЕК1.

Было проведено обследование ПОЛ, 1 ны следующие результаты: исходная lv11111 ность глюкозо-6-фосфат-дегидроген,i.çû

СЦК = 1,21. активность фермента после сти муляции аллергенами:

t0 прироста активности

87,6

72,7

24,8

22.3

СЦК

2.27

2,09

1,51

1.48

ДОма1пняя пыль сЕрии 257

То же, серии 261

То же, серии 236

Тест контрольная жидкОсть

Мятлик

Тимофеевка

Овсяница

Береза!

Составитель Л. Александрова

Редактор А. Маковская Техред М.Моргентал Корректор С. Черни

Заказ 3503 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент". г, Ужгород, ул.Гагарина. 101 стью впервые явления брон иэльнои Об струкции появились в возраст» 1 года на фоне ОРВИ. Типичные приступы удушья стали возникать с 1,5 лет на фоне полного благополучия дома во время игры г. игрушками, часто в ночное время, Приступы возникают с предвестников в виде yp,à слизистой носа. чихания После проведения двух курсов специфическои гипосенсибили

По данным обследования выявлена сснсибилизация к следующим аллсргенэм: домашней пыли серии 257 и домашнеи пь1ли серии 261, что подтверждено кожными сн,1 рификационными пробами с данными эллергенами.

Пример 3. Больной Я., 13 лет. Диагноз: поллиноз, риноконьюнктивальный синдром. Из анамнеза известно, что у мальчика

По данным обследования выявлена сенсибилизация к аллергенам пыльцы мятлика, тимофеевки, овсяницы; не выявлена сенсибилизация к аллергену пыльцы березы. что подтверждено кожными скарификационными пробами с данными аллергенами.

Формула изобретения

Способ диагностики аллергии по изменению цитохимических характеристик с 9 лет в летние месяцы. начиная с июня, ; отмечаются риниты, коньюнктивиты. В лесу. за городом -- ухудшение; HB Одуванчик отмечался отек Квинке.

Проведено обследование согласно способу, Получены следующие результаты. исходная активность глюкозо-6-фосфл г-дс25 гидрогеназы вЂ” СЦК = 1,16, после стимуляции аллергенами пыльцы; !

СЦК % прироста активности

2,46 112

2,60 124

2,91 150,8

1,49 28,4 нейтрофилов крови в присутствии аллерге35 íà, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и ускорения диагностики, определяют активность глюкозо-6фосфат-дегидрогенаэы до и после инкубации крови с аллергеном, и при увели10 чении активности фермента на 407; от исходного и более диагностируют аллергию к исследуемому аллергену.

Способ исследования изделий на стойкость к воздействию биологической среды // 1684679

Изобретение относится к испыташям бытовых и медицинских электронных приборов, предназначенных для постоянного пользования на поверхности кочи человека

Способ определения степени тяжести послеродового эндометрита // 1684678

Изобретение относится к медицин, р частности к гинекологии, и может быть использовано при определении степени тяжести послеродового эндометритт, эффективности проводимого лечения

Способ лечения желчно-каменной болезни // 1683753

Изобретение относится к медицине, в частности к гастроэнтерологии и хирургии

Способ диагностики электрической нестабильности миокарда у больных ишемической болезнью сердца // 1682929

Изобретение относится к области медицины , в частности к кардиологии

Способ диагностики флюороза // 1681839

Изобретение относится к медицине, а именно к гигиене труда и профзаболеваний

Способ определения содержания плазминогена в биологической жидкости // 1681255

Способ прогнозирования латентного течения пиелонефрита у детей // 1681254

Способ диагностики лекарственной непереносимости // 1681253

Изобретение относится к области медицины , в частности к аллергологии, и может быть использовано для диагностики лекарственной непереносимости

Способ получения средства для визуальной индикации холестерина на поверхности кожи // 1675770

Изобретение относится к области биологической и биоорганической химии, в частности к способам получения средства для визуальной индикации холестерина на поверхности кожи, Для получения средства для визуальной индикации холестерина вещества (нистатин, стрептолизин 0, холестериноксидаза) сшивают с виэуазирующими веществами(пероксидзза, щелочная фосфотаза, а -химотрипсин, (3 -галактозидаза) с помощью бифункционального сшивакж1его агента - мета-п-тол лсульфонат N-циклогексил-N -{2-мссфолинил-{4)-этил -карбодиимида. ФАКСИМИЛЬНОЕ ИЗОБРАЖЕНИЕБиблиография:Страница 1Реферат:Страница 1Формула:Страница 1Описание:Страница 1 PA4A/PA4F - Прекращение действия авторского свидетельства СССР на изобретение на территории Российской Федерации и выдача патента Российской Федерации на изобретение на оставшийся срок Номер и год публикации бюллетеня: 21-1994 (73) Патентообладатель: ЛОПУХИН Ю.М

Способ определения галактозы в сыворотке крови // 2101705

Изобретение относится к биохимии и ветеринарии и касается способа определения гексоз, например галактозы, в сыворотке крови для ранней диагностики нарушений минерального обмена

Способ определения мочевины и креатинина в биологических жидкостях // 2101706

Изобретение относится к медицине и касается видов патологии или состояний организма, связанных с нарушениями азотистого обмена, особенно при различных видах почечной патологии, обширных хирургических ранах, ожогах

Способ прогнозирования течения ишемической болезни сердца // 2102756

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии, терапии

Способ оценки состояния больного // 2103692

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии и может быть использовано для диагностики и прогнозирования состояния больного в послеоперационном периоде и при развитии острого воспалительного процесса

Способ прогнозирования продолжительности жизни онкологических больных четвертой стадии заболевания после диагностических хирургических вмешательств // 2104536

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при проведении больным с неблагоприятным прогнозом адъювантных методов терапии

Способ диагностики сахарного диабета // 2104537

Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано для проведения дифференицальной диагностики инсулинзависимого и инсулиннезависимого диабета, состояния их компенсации

Способ прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными заболеваниями печени // 2104538

Изобретение относится к медицине, а именно гепатологии, и предназначено для прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными поражениями органа

Способ оценки микросомальной системы печени при действии ксенобиотиков алкилирующего типа // 2104539

Изобретение относится к области исследования или анализа материалов особыми способами, а именно к способам исследования крови при действии ксенобиотиков, и может быть использовано для оценки микросомальной системы печени после воздействия малых доз иприта и люизита при реальных путях поступления ОВ (отравляющих веществ) в организм, а также при решении задач по уничтожению ХО (химического оружия) в районах военно-химических объектов, в частности по обследованию здоровья населения и обслуживающего персонала в местах по хранению и уничтожению ХО

Прибор для мониторинга параметров взвешенных частиц // 2106627

Изобретение относится к оптико-электронной промышленности и может быть использовано для комплексного исследования параметров взвеси частиц микронных и субмикронных размеров (10-8 - 10-4 м): распределения частиц по группам с определенными размерами, химического состава частиц, скоростей изменения этих характеристик

Способ лечения ишемической болезни сердца // 2107910

Изобретение относится к медицине, в частности, к кардиологии, и может быть использовано для лечения любых клинических вариантов ишемической болезни сердца