Способ количественного определения фторафура

 

Изобретение относится к аналитической химии, а именТно к анализу лекарственных препаратов гетероциклического ряда - фторафура, и может быть использовано в фармации. Цель изобретения - повышение чувствительности, точности и специфичности определения . Для этого раствор анализируемой пробы обрабатывают резорцином, выпаривают, к остатку добавляют концентрированную серную кислоту, нагревают , после охлаждения обрабатывают гидроксидом калия и измеряют оптическую плотность полученного раствора при 275 нм. Чувствительность 0,5мкг/мл относительная ошибка 1,5%. 1 табл. 9 IB

СОЮЗ СОВЕТСКИХ . СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСГ1УБЛИН

„„90„„1732243 А 1 щ) g G 01 И 21/78

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ

Н А ВТОРСНОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

2 (54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФТОРАФУРА (57) Изобретение относится к аналити- ческой химии, а именно к анализу ле" карственных препаратов .гетероциклического ряда - фторафура, и может быть использовано в фармации. Цель изобретения - повышение чувствительности, точности и специфичности определения. Для этого раствор анализируемой пробы обрабатывают резорцином, выпаривают, к остатку добавляют концентрированную серную кислоту, нагревают, после охлаждения обрабатывают . гидроксидом калия и измеряют оптичесГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

r1O ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

1 (21) 4844525/04 (22) 29. 03.90 (46) 07.05 92. Бюл. И 17 (71) Алма -Атинский государственный медицинский институт, Институт органического синтеза АН ЛатвССР и 1-й

Московский медицинский институт (72) М.10.Лидака, А.П.Арзамасцев, 3.M.ÁèñåHáàåâ и Л.Н.Кизерева (53) 543.42,063(088.8) (56) Раствор фторафура 43 для инъекций. ФС 42-1239-86.

Смолярская А.3. Романенко Н.В.

Особенности фармакокинетики фторафура. Экспресс-информация ВНИИМИ, Новые лекарственные препараты, 1979, N 1, с. 11-17.

Фторафур в капсулах по 0,4 r-.

ФС 42-2014-83.

Изобретение относится к фармацевтической химии, преимущественно к анализу лекарственных веществ гетероциклического ряда.

Фторафур-N - (2-Фура нидил-5-фтор- . урацил) - цитостатический препарат, относящийся к группе антиметаболитов.

Известны броматометрический метод, микробиологический метод, основанный на способности фторафура подавлять рост Streptococcus faecalis штамм

543.

Недостатком этих способов явля- ется неспецифичность и невысокая чувствительность, а при микробиологическом определении - трудоемкость, громоздкость и необходимость в создании специальных условий. кую плотность полученного раствора .при 27р нм. Чувствительность 0,5 мкг/мл г е

"относительная ошибка 1,Sа. табл. Q7

Наиболее- близким по технической сущности к достигаемому результату является способ определения фторафура по поглощению света в УФ-области спектра.

Недостаток способа - невысокая чувствительность и отсутствие специфичности вследствие того, что раствор фторафура бесцветен, а поглощение УФ-света в области 270 нм не отличает его от других веществ, способных поглощадь свет в этой области спектра.

Цель изобретения - повышение чувствительности, точности и специфичности определения фторафура; а также его лекарственных форм.

По Сст бв г юге °

И„° а

3 173

Поставленная цель достигается созданием условий для полного взаимодействия минимальных количеств фторафура с резорцином и получение окрашенного соединения, избирательно поглощающего свет в Уф"области спектра е

Сущность способа заключается. в том, что под воздействием концентрированной серной кислоты при нагревании происходит разложение фторафура до тетрагидрофурана и 5-фторурацила.

Тетрагидрофуран окисляется до янтарного ангидрида, который конденсиру-1 ясь, с резорцином образует промежуточное соединение. Избыток раствора гидроксида калия разрушает его, при этом образуется вещество желтого цве" та, имеющее хиноидное строение, способное при облучении Уф-светом проявлять зеленую флуоресценцию.

По сравнейию с известными.предлагаемый способ позволяет быстро и надежно определять препарат в концентрациях от 0,5 мкг в 1 мл и выше в субстанции, лекарственных формах, а также в извлечениях их внутренних органов и в биологических жидкостях..

Преимущества спектрофотометрического метода количественного определения фторафура видны из таблицы.

2243 4

60 с. После охлаждения в колбы вносят по 20 мл 104-ного раствора гидроксида калия марки х.ч., хорошо перемешивают и определяют оптическую плотность окрашенных в желтый цвет растворов на спектрофотометре в кювете 10 мм при длине волны 275 нм.

Окрашивание полученного раствора устойчиво в .течение 1 сут..

Параллельно с определением исследуемых растворов фторафура проводят определение стандартного раствора препарата, с которым проделывают те

15 же манипуляции. Раствором сравнения служат реактивы, используемые при . определении препарата, в тех же. количествах и подвергшиеся такой же обработке, что и исследуемое вещество.

20 Оптическая плотность окрашенных растворов подчиняется закону БугераЛамберта-Бера в пределах концентраций -0,5-100 мкг в 1 мл.

Расчет концентраций проводят по

25 формуле где Dä - оптическая плотность раст30 вора, полученного при обра" ботке исследуемого препаратар

Пока эатели

Способы ю ю в Фееююююю

Извест- Предланый гаемый

35 .

Нижний предел определяемого содержания, мкг/мл 20. . Время определения, мин . 10 10

0 5

Относительная ошибка, 3 2 0 1 5

Способ осуществляют следующим об- разом.

В термостойкие плоскодонные колбы. Вместимостью 50 w вносят от 0 1 50 до 2 мл 0,01>-ного водного раствора фторафура, прибавляют по 0,4 мл

2,53-ного раствора резорцина и .выпаривают смесь на водяной бане. К су- хим остаткам прибавляют по. 0,5 мл концентрированной серной кислоты марки х.ч. и нагревают колбы на элек-. троплитке, накрытой асбестовой сеткой при температуре 130 С в течение

Примечание: для приготовления стаН» дартного 0,013-ного раствора Фторафу» ра в мерную колбу вместимостью 1 л. вносят навеску 0,1000 r препарата, прибавляют 2,6 мл 13"ного раствора гидроксида калия, перемешивают смесь до растворения Фторафура и доводят водой раствор в колбе до метки, повторив перемешивание раствора .. Раствор сохраняют в холодильнике.

Вет

Сет б в г оптическая плотность раст" вора, полученного при обра" ботке стандартного раствора препарата; концентрация стандартного раствора препарата; количество исследуемого пре" парата, г, или объем раствора, мл; разведение исследуемого препарата; объем стандартного раство" ра фторафура, мл; количество препарата, со" держащегося в анализируемой лекарственной Форме.

5 173224

Для определения фторафура во внутренних .органах животных, леченных этим препаратом, часть органов гомогенизируют, берут точные навески, обрабатывают 2-3 мл 954-ного этанола о 5 и. оставляют на 1 ч при перемешивании, Суспензию центрифугируют, спиртовое извлечение отделяют, а осадок вновь обрабатывают этанолом. Процесс извлечения фторафура и отделение белков повторяют, объединенные спиртовые извлечения доводят до определенного объема, отбирают аликвоту и определяют в ней содержание фторафура.

Пример 1. Определение фторафура в 404-ном растворе для инъекций, 1 мл раствора из ампулы переносят в мерную колбу, вместимостью

100 мл, доводят содержимое колбы ди- 20 стиллированной водой до метки, хорошо перемешивают, отбирают из колбы

1 мл раствора в термостойкую колбу на

50 мл, прибавляют 0,4 мл 2,53-ного раствора Резорцина и выпаривают смесь 25 досуха. К остатку прибавляют 0,5 мл концентрированной серной кислоты и нагревают колбу на электроплитке, накрытой асбестовой сеткой при температуре 130 С в течение 60 с. После gp охлаждения в колбу вносят 20 мл

104-ного раствора гидроксида калия, хорошо перемешивают. и измеряют оптическую плотность окрашенного в желтый цвет раствора на спектрофотометре в кювете 10 мм при длине волны

275 нм.

Параллельно проводят определение со стандартным раствором фторафура, для чего навеску препарата 0,1000 r : 0 вносят в мерную колбу вместимостью ! .1 л, прибавляют 2,6 мл 14-ного раст.вора гидроксида калия, доводят.дистиллированной водой до метки, тщательно перемешивают и для анализа отбирают 1 мл полученного раствора.

Пример 3. Определение Фторафура в печени животных, Навески гомогенизированной печени массой 2 r обрабатывают 5 мл

953-ного этанола, оставляют на 1 ч при периодическом перемешивании, белки отделяют центрифугированием при 5000 об/мин в течение 10 мин, спиртовые извлечения отделяют, а осадки вновь обрабатывают 5 мл этанола, и эта процедура повторяется рновь

Слитые вместе спиртовые извлечения вносят в термостойкие колбы на 50 мл и проводят определение фторафура спектрофотометрическим методом по приведенной методике.. С целью снижения ошибки из-за экстрактивных веществ из печени параллельно проводят те же операции с 2 г печени животных, которым фторафур не вводят. Величи50

I.

Раствором сравнения служат реактивы, используемые при определении препарата, в количествах, используемых при определении фторафура, под" вергшиеся такой же обработке.

Оптическая плотность окрашенного раствора, полученного при анализе инъекционного раствора фторафура по

:описанной методике, равна 0,79, оптическая плотность раствора, полу ченного при анализе стандартного раствора препарата, равна 0,20.

3 6

Концентрацию фторафура в растворе для инъекций рассчитывают по формуле

«О 79 0 01 1 100 о

Х= - ---- -------- =3,95/.

0,20 1

Пример 2. Определение фтораФура в капсулах по 0,4 r.

Около 0,25 г (точная навеска) препарата вносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 5 мл

0,01 н. раствора гидроксида калия, перемешивают в течение 5 мин и дово" дят дистиллированной водой содержимое колбы до метки. Колбу с раствором энергетично встряхивают и для отделения от стеарата кальция раствор фильтруют через бумажный фильтр.

Первые 30-50 мл Фильтрата отбрасывают,,отбирают последующие 10 мл, вносят в термостойкую колбу на 50 мл и далее поступают как описано в методике спектрофотометрического определения препарата, Одновременно проводят определение с 1 мл 0,013-ного стандартного раствора фторафура.

Оптическая плотность раствора полученного из капсул фторафура, равна 0,196, окрашенного раствора. из . стандартного 0,01%-ного раствора

0,200. Навеска препарата 0,2492 r.

Содержание фторафура в капсуле рас считано по Формуле

0 -1q6 0 01 ° 250 ° 0,4 («» 01393 га

0,200 0,.2492 ° 10

1732243

Предлагаемая методика высокочувствительна, специфична, занимает несколько минут, относительная ошибка составляет +1,53. формула изобретения

0 05 ° 0 01 ° 10 ° 1

Х= а а =0,00125 г

О, 20 10 ° 2 (I,25 мг).

Составитель Э. Бисенбаев

1 едактор О. Головач Тахред Я,Олийиык, .Корректор М. Самборска

Заказ 1578 Тираж . Подписное

РЧИИПИ Государственного комитета ио изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, 3-35, Раушская иаб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

7 ны оптической плотности растворов, полученных иэ спиртовых извлечений печени, не содержавшей фторафура, вычитаются из оптической плотности, полученной в результате определения печени, содержавшей фторафур.

Проведено определение фторафура с 1 мл 0,014-ного стандартного раствора фторафура. Оптическая плотность раствора, полученного в результате анализа гомогената печени с фторафуром, за вычетом значения оптической плотности из гомогената, не содержавшего фторафура, равна 0,06; 0,06; и

0,04, D «0,05. Оптическая плотность раствора, полученного при анализе

0,013-ного стандартного раствора фторафура равна 0,20. Содержание фторафура в печени рассчитывают по формуле

Способ количественного определе10 ния фторафура, включающий измерение оптической плотности раствора, о .тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности, точности и специфичности определения, 1g анализируемую пробу обрабатывают резорцинам, выпаривают, к остатку прибавляют концентрированную серную кислоту, нагревают, после охлаждения дЬбавляют раствор гидроксида калия и

20 измеряют оптическую плотность полученного раствора.