Штамм микромицета fusаriuм sамвuсinuм fuск. var мinus для оценки устойчивости картофеля к фузариозной гнили

 

Использование: сельское хозяйство, для селекции сортов картофеля, устойчивых к фузариозной гнили. Сущность изобретения штамм выращивают на агаризованной картофельной среде в течение 10 дн Для инфицирования клубней картофеля готовят суспензию концентраций 10 спор/мл. Штамм Fusarium sambuclnum ВНИИСХМ- ВИЗР Д-42 обладает более высокой вирулентностью нежели известный штамм № 34 и более высокой скоростью роста (90 мм на 10-й день против 55 мм соответственно) и спорообразованием (12,5-10 спор/мл против 2.4 105). 4 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

l .4 t h

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

l 1

i (21) 4854115/13 (22) 26.07.90 (46) 23,06.92. Бюл. № 23 (71) Институт экспериментальной ботаники им.В.Ф,Купревича и Всесоюзный научноисследовательский институт гигиены и токсикологии пестицидов, полимеров. пластических масс (72) Н.А.Дорожкин; Т.П,Алексеева, Т.Г.Омельянец, Г.П.Мельник и Г.Т.Архипчук (53) 576.8(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

¹ 1591909, кл. А 01 N 63/04, 1989. (54) ШТАММ МИКРОМИЦЕТА FUSARIUM

SAIVIBUCtNUM FUCK.VAR.MiNUS ДЛЯ

Изобретение относится к защите растений от болезней и может быть использовано в селекции сортов картофеля, устойчивых к фузариозной гнили.

Известен штамм Fusarium oxysporum (Schlecht) Snyd.et Hans,var.orthoceras (Арф.

et Wr.) — .возбудитель фузариозного увядания люпина.

Однако этот штамм не является возбудителем гнили картофеля и не может быть использован для определения устойчивости картофеля к фузариозу.

Наиболее близким к предлагаемому штамму Fusarium sambucinum var.minus

ВНИИСХМ-ВИЗР ¹ 42 для оценки устойчивости сортов картофеля к фузариозной гнили является штамм Fusarium sambuclnum

Fuck. № 34.

Недостатками известного штамма являются низкая вирулентность, заключающаяся в слабом поражении различных сортов картофеля; слабый линейный рост колонии;

„„SU „„1741706 А1 (я)5 А 01 -й 63/04, С 12 N 1/14

ОЦЕНКИ УСТОЙЧИВОСТИ .КАРТОФЕЛЯ К

ФУЗАРИОЗНОЙ ГНИЛИ (57) Использование: сельское хозяйство, для селекции сортов картофеля, устойчивых к фузариозной гнили. Сущность изобретения: штамм выращивают на агаризованной картофельной среде в течение 10 дн. Для инфицирования клубней картофеля готовят суспензию концентраций 10 спор/мл.

Штамм Fusarium sambucinum ВНИИСХМВИЗР Д-42 обладает более высокой вирулентностью нежели известный штамм N 34: и более высокой скоростью роста (90 мм на

10-й день против 55 мм соответственно) и спорообразованием (12,5 10 спор/мл против 2.4 105). 4 табл. слабая спорообразующая способность (2,4х х10 макроконидий в 1 мл на 10-е сутки), 5 требующая культивирования штаммов для получения необходимой концентрации (10 /мл) на картофельном агаре минимум 14 б

СУТ, и

Цель изобретения — получение нового штамма Fusarium sambucinum Fuck. var.

minus, для оценки картофеля на устойчи- д вость к фуэариозной гнили,. обладающего более высокой скоростью роста мицелия, вирулентностью и интенсивным спорообразованием. (, с

Поставленная цель достигается тем, что для оценки устойчивости картофеля к фузариозной гнили используется штамм

Fusarium sambucinum Fuck. var. minus ¹ Д

42, депонированный в объединенной коллекции микроорганизмов ВНИИСХМ-ВИЗР

27 апреля 1990 года под регистрационным номером Д 42, выделенный из клубня сорта

Лорх, пораженного сухой фузариозной гнилью, отобранного в Тамбовской области.

1741706

Идентифицирование штамма -проводилось по определителю В.И.Билай "Фузэрии" (1977).

Штамм Fusarium sambucinum Fuck. var.

minus N. Д 42 относительно к классу

Deutегоmycetes, порядку Hyphomycetes, роду Fusarium Lk. ex. Ег„секции Discolor Wr.

emend Bilai.

Штамм имеет следующую характеристику, Описание культурально-морфологических признаков штамма Fusarium

sambucinum Fuck. yar. minus N.. Д 42 на разных средах проводили при 25ОС на 10-й день культивирования.

Культурально-морфологические признаки штамма Fusarium sambucinum Fuck. ч эг. minus N.Ä 42.

На плотных средах штамм N. Д 42 образует зонированную колонию, на картофельно.-глюкозном агаре окраска ее беловато-охряная. Воздушный мицелий пушистый, рыхлый, поднимается над субстратом на 3 мм; строма кофейно-коричневая. На сусло-агаре мицелий пышный, светло-коричневый, строма темно-красная; на картофельном агаре мицелий стелющийся, телесно-розового цвета, строма бледно-розовая; на среде Чапека мицелий пышный, палевого цвета, поднимается над субстратом на 3 мм, строма светло-коричневая; на овсяном эгаре мицелий стелющийся, бледно-ржавого цвета, строма телесно-розовая.

Макроконидии образуются в воздушном мицелии и пионнотах, веретеновидно серповидные, с короткой, внезапно суживающейся в виде сосочка верхней кареткой. с ясно выраженной ножкой у основания. Преобладают мэкроконидии с тремя перегородками.

Размеры конидий на разных агаризованных средах на 10-й день роста; на картофельно-глюкозном агаре — с тремя перегородками 12-45 х 3-5,5 мкм, с пятью—

20-50 х 3-5,5 мкм; на сусло-агаре — с тремя перегородками 19,2-44,8 х 3-5,5 мкм, на картофельном агаре — с тремя перегородками — 12,8 — 38,4 х3 — 5,0 мкм, с пятью — 19,2—

44,8. х 3 — 5,5 мкм; на среде Чапека — с тремя перегородками 19,2-38,4 х 3-5,5 мкм; на овсянной агаризованнай среде — с тремя перегородками — 12,8 — 41,6 х 3-5,5 мкм, Линейный рост колоний на агаризованных средах: на картофельноглюкозном агаре — на 5-й день роста — 83 мм. на 10-й — 90 мм; на сусло-агаре — на 5-й день — 37 мм: на 10-й — 64 мм; на картофельном

arape — на 5-й день-64 мм; на 10-й- 90 мм; на,среде Чапека.— на 5-й день — 62; на 10-й — 90 мм; на овсянной агаризованной среде — на 5-й день — 60 мм; на 10-й — 90 мм.

Спорообразовэние штамма на разных агариэованных средах, на картофельно5 глюкозном агаре на 10-й день 7,9 х 10 мак5 роконидий в 1 мл; на сусло-агаре — 3,1 х 10 макроконидий в 1 мл; на картофельном агаре — 2,5 х .0, макроконидий в 1 мл; на среде

Чапека — 1,9 х 10 макроконидий в 1 мл; на

10 овсяной агаризованной среде — 4,6 10 мак6 роконидий в 1 мЯ.

Спорообразование начинается на картофельном arape с 2-го дня роста, максимум спорообраэования на 21-й день, 15 Физиолого-биохимические свойства штамма Fusarium sambucinum var. minus М

Д42, Из источников углерода усваивает глюкозу, галактозу, сахарозу, мальтозу, фрукто20 зу, арабинозу, рамнозу. Хорошо усваивает нитратный, нитритный и аммонийный азот.

Растет в широких пределах рН вЂ” от 2,0 до

9,0.

Признаки штамма устойчивые. Штамм

25 хранят при температуре 20-25 С на твердых агаризованных средах. периодически пересевают.

Штамм Fusarium sambucinum чаг.

minus М Д 42 не вирулентен для теплокров30 ных животных.

Пример 1. Использование штамма

Fusarium sambucinum var. minus N. Д 42 для определения устойчивости сортов картофеля к фузариоэной гнили.

35 Оценку устойчивости сортов картофеля к фузариозной гамАн проводят путем искусственного заражения клубней суспензией конидий гриба в концентрации 1 х 10 в 1 мл воды 10-14-дневной культурой гриба, выра40 щенной на картофельном агаре(вместо картофельно-глюкозного агара). В пробирку с культурой гриба добавляют стерильную воду до верхнего уровня среды и делают смыв с косяка с помощью микробиологической

45 петли, Подсчет конидий в полученной суспензии проводят в счетной камере (Горяева), после чего доводят концентрацию до 10 конидий в 1 мл воды.

Промытые. обработанные спиртом и

50 обожженные над спиртовкой клубни повреждают штаммом на глубину 10 мм в пуповинной части, В полученные углубления пипеткой вводят до полного наполнения приготовленную суспензию. Для каждого

55 образца берут 10 клубней. В контрольные образцы с механическими повреждениями вводят стерильную воду, Клубни укладывают в выстланные фильтровальной бумагой зксикаторы, нижняя часть которых заполнена стерильной водой. Зксикаторы накрыва1741706 ют крышками и помещают в термостат или помещение с температурой 23-25 С.

Учет загнивания на клубнях проводят через 20 дней после их продольного разреза путем измерения диаметра и глубины загнивания.

Индекс поражения рассчитывают по формуле

Х=

10.0 где ci -фраметр зоны загнивания, мм; и -" глубина зоны загнивания, мм.

В зависимости от индекса поражения оценку проводят по шкале: 0 — нет загнивания; балл 1 — очень слабое поражение, индекс поражения до 2,0; балл 2 — заражение слабое, индекс поражения 2,1-3,0; балл 3— заражение среднее, индекс поражения 3,14,0; балл 4 — заражение сильное, индекс. поражения 4,1-6,0; балл 5 — заражение очень сильное, индекс поражения выше 6,0.

По полученным результатам устанавливают группу поражаемости сортов и сеянцев картофеля: абсолютноустойчивые— поражение отсутствует; высокоустойчивые —. балл 1; относительноустойчивые — балл 2; среднеустойчивые — балл 3; восприимчивые — балл 4; сильновосприимчивые — балл 5.

В табл.1 приведены данные по выражению 13 сортов картофеля известными штаммами Fusarium sambucinum N 34 и предлагаемым штаммом Fusarium

sambucinum var.minus N. Д 42.

Двухфакторный дисперсионный анализ данных по индексу поражения клубней картофеля при заражении штаммами Fusarium

sambuclnum N 34 и Fusarium sambucinum

var. minus N Д 42 позволяет говорить о достоверности различий и существенно более высокой вирулентности штамма

Fusarium sambucinum var. minus М Д 42.

В табл,2 приведены данные по баллу поражения различных сортов картофеля в зависимости от результатов заражения . штаммами Fusarium sambucinum N 34 и

Fusarium sambucinum var.minus N. Д 42, Полученные результаты свидетельствуют о большей поражаемости сортов картофеля штаммом Fusarium sambucinum ч.minus К Д42.

Формула изобретения

Штамм микромицета Fusarium

sambucinum Fuck var. minus ВНИИСХМВИЗР N. Д-42 для оценки устойчивости картофеля к фузариозной гнили.

Пример 2. В сравнении с известным штаммом Fusarlum sambuclnum М 34 штамм Fusarium sambuclnum var.minus М Д

42 обладает более высокой скоростью роста

5 на разных твердых агаризованных средах на 5-й и 10-й дни роста (за исключением сусло-а гара).

В табл.3 показаны результаты линейного роста Fusarium sambucinum N., 34и

10 Fusarium sambucinum var. minus М Д 42 на разных агаризованных средах.

Пример 3, В сравнении с известным штаммом Fusarlum sambuclnum N 34 штамм Fusarlum sambucinurn чаг. minus N

15 Д 42 обладает более интенсивным спорообраэованием.

В табл.4 показаны результаты спорообразования штаммов Fusarium sambuclnum й= 34 и Fusarium sambuclnum чаг minus.N. Д

20 42 на твердых агаризованных средах.

Данные табл.4 показывают, что штамм

N Д 42 образует в 10 раз больше конидий в

1 мл суспензии при росте на картофельной среде на 10-й день роста.

25 Для получения инокулюма, используемого для инфицирования клубней картофеля, предлагается картофельная среда с добавлением 2 агара вместо картофельноглюкоэной агаровой среды. которая реко30 мендуется для штамма F.sambucinum N 34, У предлагаемого штамма F.sàmbucinum

var,minus ¹ 42 необходимая концентрация (10 /мл) для инфицирования клубней карто6 феля установлена уже на 10-й день, что по35 зволяет сократить срок культивирования штамма, Таким образом,.предлагаемый штамм гриба F.sambucinum var.minus N Д 42 обладает более высокой вирулентностью, скоро40 стью роста и интенсивностью спорообразования по сравнению с извести ы м штаммом N. 34, используемым для оценки устойчивости картофеля к фузариозной гнили, 45

1741706

Таблица1

Таблицэ2

Балл п р

34

5

2

4

5

1

3

Таблица3

1741706

Таблица4

Составитель Т..Алексеева

Техред М.Моргентал

Корректор Л.бескид

Реда кто р А. Козо риз

Заказ 2231 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб,, 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101