Способ определения оптимальной лечебно-профилактической дозы цитотоксичных сывороток

 

Изобретение относится к лекарствам и медикаментам, применяемым в ветеринарии и медицине, а именно к определению дозировки антиретикулярной и других цйтотоксических сывороток. Цель изобретения - повышение чувствительности способа. Определяют оптимальную лечебно-профилактическую дозу цитотоксических сывороток постановки внутрикожных проб на 1-2 животных с различными разведениями сывороток до предельного, вызывающего местную реакцию через 3-6 ч, которую принимают за титр, используемый для определения дозы на 1 кг массы животного, затем дозу уточняют по изменению реактивности организма на подкожное введение разных доз, близких к расчетной, причем за оптимальную принимается доза, вызывающая максимальное повышение реактивности по внутрикожной пробе до и через 1-2 дня после введения цитотоксической сыворотки. Данный способ позволяет в 2 раза сократить потери телят от респираторных заболеваний и на 1-3 кг повысить их приросты. ел с

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (505 А 61 К 39/00

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ч с

1 1

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 (21) 4779919/15 (22) 09,01.90 (46) 15.08.92. Бюл. М 30 (71) Алма-Атинский зооветеринарный институт (72) Г.И. Лопатников, M.Ä. Минжасов. А.И.

Гулаев, 3.А. Шарифуллин и М,М. Илибаева (56) Иоффе В.И. и др. Общая иммунологическая реактивность организма. Л.; Медицина, 1979, с. 40-50, Нестерова А.И. и др. Лечебное действие антиретикулярной цитотоксической сыворотки. М.: Медгиз, 1946, с. 30, (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОПТИМАЛЬНОЙ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ

ДОЗЫ ЦИТОТОКСИЧЕСКИХ СЫВОРОТОК (57) Изобретение относится к лекарствам и медикаментам, применяемым в ветерина-. рии и медицине; а именно к определению дозировки антиретикулярной и других цитоИзобретение относится к лекарствам и медикаментам, применяемым в ветеринарии и медицине, а именно, к определению дозировки антиретикулярной (АЦС) и других видоспецифических цитотоксических сывороток.

:;Целью изобретения является повышение чувствительности способа. Техника ориентировочного определе.ния дозировки заключается в следутющем.

Цитотоксическая сыворотка. например

АЦС или пневмотропная цитотоксическая сыворотка, разводится изотоническим раствором, например физиологический раствор натрия xnîðèäà в разведении 1:600, что соответствует примерному титру реакции связывания комплемента (РСК) 1:60-1:80, в. Ж „1754112 А1

2 токсических сывороток. Цель изобретения— повышенйе чувствительности способа. Определяют оптимальную лечебно-профилактическую дозу цитотоксйческих сывороток постановки внутрикожных проб на 1 — 2 животных с различными разведениями сывороток до предельйого, вызывавщего местную реакцию через 3-6 ч, которую принимают за титр, используемый для определения дозы на 1 кг массы животного, затем дозу уточняют по изменению реактивности организма на подкожное введение разных доз, близких к расчетной, причем эа оптимальную принимается доза, вызывающая максимальное повышение реактивности по внутрикожной пробе до и через 1 — 2 дня после введения цитотоксической сйворотки.

Данный способ позволяет в 2 раза сократить потери телят от респираторнйх заболеваний и на 1 — 3 кг повысить их приросты. отношении 1:800, 1:1000, 1:1200 и т,д. Одно- с4 временно готовятся такие же разведения (Л аналогичной неиммунной нормальной сыворотки (контроль).

Титрация может проводиться непосред- ственно в хозяйстве на 1-2 клинически здо° вюзи ровых животных. При этом на одном и том . же животном ставится до 10 и более проб различных разведений сывороток с таким ) же количеством контролей. Местом введения у крупных животных, например крупный рогатый скот, лошади, является область шеи, у овец †.бесшерстный участок кожи, область паха, локтевого сустава, подхвостовые складки, После подготовки операционного поля и дезинфекции мест инъекции спиртом рек1754112 тификатом различные разведения АЦС или другой цитотоксической сыворотки вводятся начиная с наибольшего разведения внутрикожно в дозе по 0,2 мл. Одновременно в симметричные участки кожи в тех же дозах и разведениях вводится нормальная, неиммунная, сыворотка. У крупных животных, крупного рогатого скота, перед введением препаратов йроизводится измерение кожной складки при помощи штангенциркуля, Учет результатов реакции проводится при введении сывороток при помощи иглы через 3-6 ч, а при помощи безигольного инъектора — через 6-9 (сроки естественного угасания реакции на r обой раздражитель).

За титр цитотоксической сыворотки принимается предельное ее разведение, при внутрикожном введении которого в дозе 0,2 мл на месте инъекции возникает реакция (утолщение кожной складки, отек, эритема), при полном отсутствии реакции или при выраженности ее не менее чем в 3 раза слабее, на месте введения аналогичной нормальной сыворотки.

На основании полученного титра проводится ориентировочный расчет лечебнопрофилактической дозировки этих препаратов, при этом на каждый 1 кг живой массы берется 2 мл титровых единиц, например при титре АПС или пневмотропной сыворотки тканей овец или крупного рогатого скота величиной 1;1000, лечебно-профилактическая доза на 1 кг веса животного будет равна 2 мл:1200=0,0017 и т.д. Оттитрованная таким способом сыворотка перед применением разводится изотоническим раствором (например 1:10) и вводится подкожно в дозах сучетом ее титра, разведения и живой массы животных. Например, при титре сыворотки 1:1000, разведении 1:10 и веса телят 50 кг она составит в среднем на

1 животное:0,002 млх10х50=1,0 мл.

Для уточнения дозировки вычисленная путем титрации с применением внутрикожной пробы доза уточняется путем изучения изменения общей иммунологической реактивности под действием различных доз изучаемой сыворотки, Уточнение дозировки проводится на не-. скольких группах животных — аналогов (например, 6 групп по 2 — 3 животных в каждой группе) путем введения им различных доз изучаемой цитотоксической сыворотки. При этом за среднюю берется доза, вычисленная для данных животных на основании титрации. Так, если при титре кожной пробы

1:1000 (что, примерно, соответствует титру

PCK 1;100) средняя доза для животных весом в 50 кг составляет 1,0 мл сыворотки, разведенной 1:10, то вводимые в разных

20 группах дозы могут составлять: 1 группа—

0,4 мл, 2 группа — 0,6 мл, 3 группа — 0,8 мл, 4 группа — 1,0 мл, 5 группа — 1,2 мл, 6 группа — 1,4 мл.

Перед подкожным введением сыворотки и затем на 2 или 3-й {можно на 6-й) день после ее введения у животных проверяется общая реактивность путем постановки внутрикожной пробы с применением гистамина или любой, специфической для данного вида животных, цитотоксической сыворотки.

Применяется она в дозе 0,2 мл в удвоенном титре (например, при титре 1:1000 в разведении 1:500). В такой же дозе и титре, для контроля вводятся нормальные сыворотки.

Первичное и повторное введения сывороток проводятся в удаленные друг от друга симметричные участки кожи, например при первичной постановке внутрикожной пробы и затем. после учета реакции, подкожном введении сыворотки с правой стороны шеи, повторная постановка внутрикожной пробы проводится с левой стороны, Учет реакции в обоих случаях проводится в те же сроки и по

25 тем же критериям, кэк и при указанной титрации сыворотки, а результаты, полученные при первичной и повторной постановке пробы, сопоставляются.

За оптимальную дозу сыворотки прини30 мается количество ее, при подкожном введении которого обеспечивается на месте внутрикожной инъекции возникновение наиболее выражейной, по сравнению с первичной, реакции на повторное введение

35 цитотоксической сыворотки.

Проводят исследования 3 серий кроличьих (2 серий АЦС для крупного рогатого скота и овец и одна остеотропная для овец) цитотоксических сывороток, а также

40 овечьей и ослинной антипульмональных (пневмотропных) сывороток для крупного рогатого скота. Всего в процессе отработки методики титрации и уточнения дозировки было использовано 20 овец и 172 головы

45 крупного рогатого скота (в том числе на 75 телятах). Исследования показали, что данная внутрикожная проба по своей чувствительности более чем в 10 раз превосходит известный метод РСК (например, при титре, 50 PCK равном 1:100-1:110 титр внутрикожной пробы колеблется в пределах 1;12001:1280). Постановка реакции не требует специальных условий, легко выполнима, а читка ее почти полностью исключает субъекти55 виэм, так как пределы разведений сывороток, обеспечивающих выраженную местную реакцию, четко прослеживаютея. Например, при титрации АЦС или пневмотропной цитотоксической сыворотки на животных с хорошей реактивностью (здоровые телята в

1754112

Составитель Е.Дмитриченко

Редактор Н.Швыдкая Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор О.Кравцова

Заказ 2831. Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101 возрасте 3 — 12 мес) при полном отсутствии изменений на месте введения нормальной сыворотки (контроль), среднее утолщение кожной складки на их введение могут составлять в разведениях; 1:800 — 4 мм, 1;1000 — 4 мм, 1:1200 — 3,5 мм, 1:1400 — 0 мм, 1;1600 — 0 мм, 1:1800 — 0 мм (с колебаниями у различных животных — 1 мм). У слабых животных реакция может проявляться утолщением кожной складки на 2-3 мм, однако в разведении 1:1400 она также полностью исчезает. За титр в данных случаях принимается разведение 1;1200.

При подкожном введении различных доз этих сывороток (титр 1;1280 в разведении 1:10) 32 телятам весом 60-70 кг разница в утолщении кожной складки на внутрикожное введение этих препаратов (разведение

1:640) до и на 2 — 3-й день после подкожного их применения составила; при дозе 0,2 мл—

0,0 мм; 0,4 мл — 0,0 мм; 0.6 мл — 1,0 мм; 0,8—

2.3 мм; 1,0 мп — 2,5 мм; 1,2 мл — 1,0 мм; 1,4 мл — 0,5 мм; 1,6 мл — 0,0 мм (колебания у разных животных — 2 мм), Проведенные данные подтверждают наличие корреляционной зависимости между живой массой организма и необходимой дозировкой.

Надежность данных методов определения дозировки сывороток подтверждена результатами применения пневмотропной цитотоксической сыворотки в расчетных дозах на поголовье свыше 3200 телят различного возраста. Использование его позволяет бо5 лее чем в 2 раза сократить потери телят от респираторных болезней и на 1-3 кг повысить их среднемесячные привесы.

Формула изобретения

Способ определения оптимальной ле10 чебно-профилактической дозы цитотоксических сывороток путем постановки реакции связывания комплемента с антигенами; в качестве которых используют применяемые для гипериммунизации материалы, о т л и15 ч а ю шийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, дополнительно проводят постановку внутрикожных проб на

1 — 2 животных с различными разведениями сывороток до предельного, вызывающего

20 местную реакцию через 3 — 6 ч, которую принимают за титр, используемый для определения дозы на 1 кг массы животного, а затем дозу уточняют по изменению реактивности организма на подкожное введение разных

25 доз, близких к расчетной, причем за оптимальную принимают дозу, вызывающую максимальное повышение реактивности по внутрикожной пробе до и через 1-2 дня после введения цитотоксической сыворот30 ки.