Способ определения поражений билиарного тракта у детей

 

Использование: медицина, педиатрия, ранняя диагностика синдрома цитолиза при патологии билиаоного тракта у детей. Целью изобретения является повышение чувствительности способа. Сущность изобретения: определяют активность 5-нуклеотидазы в сыворотке крови и в дуоденальном содержимом у детей с патологией билиарного тракта, 1 з.п, ф-лы.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ C ССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4884739/14 (22) 07.08.90 (46) 07.12.92. Бюл, N 45 (71) Казанский государственный медицинский институт лм. С.В.Курашова (72) В,П.Булатов, Т.Б.Мороз и С.Л.Жабоева (56) Колб В.Г. Биохимические методы исследования функционального состояния печени, — Здравоохранение Белоруссии. 1985, N 5, с,82.

Изобретение относится к медицине, педиатрии, можег быть использовано для диагностики поражений гепатобилиарной системы.

Подавляю.цее большинство лабораторных тестов для оценки функционального состояния печени и в том числе билиарной системы характеризуются низкой специфичностью и чувствительностью.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа.

Для достижения цели определяют активность 5-нуклеотидазы в сыворотке крови и в дуоденальном содержимом в присутствии аденозин-5-фосфата в качестве субстрата, Принцип метода: определяют активность фермента путем измерения скорости гидролиза АМФ в присутствии ингибитора

5-нуклеотида ы ионами никеля с последующей регистрацией уровня неорганического фосфора (Ф) по M,М.Алимовой.

Способ осуществляется =ледующим образом.... ЫÄÄ 1780012 А1

cs»5 G 01 N 33/68, С 12 N N9/22 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПОРАЖЕНИЙ БИЛИАРНОГО ТРАКТА У ДЕТЕЙ (57) Использование: медицина, педиатрия, ранняя диагностика синдрома цитолиза при патологии билиаоного тракта у детей.

Целью изобретения является повышение чувствительности способа. Сущность изобретения: определяют активность 5-нуклеотидазы в сыворотке крови и в дуоденальном содержимом у детей с патологией билиарного тракта. 1 з.п. ф-лы.

Определение общей фосфогидролитической активности: 0,2 мл сыворотки крови (/» или дуоденального содержимого инкубируют при 37 С с 0 1 мл 20 мМ MnS04 и 1 5 мл

40 мМ вероналового буфера рН 7,5 в присутствии 0,2 мл 10 мМ АМФ. Реакцию останавливают 2 мл 10% ТХУ, Через 15 мин пробу центрифугируют, отделяют осадок, а в 1,5 мл супернатанта определяют Ф . 4

Определение активности неспецифиче- QQ ской щелочной фосфатазы проводят парал- (, лельно: 0,2 мл сыворотки крови или дуоденального содержимого смешивают с

0,1 мл 20 MM MnS04 и 1,3 мл 40 мМ веронолового буфера и рН 7,5, добавляют 0,2 мл

0.1 M раствора К С 2 и 0,2 мл АМФ. Реакцию останавливают 2 мл 10% ТХУ. отдаляютт осадок центрифугированием и в 1,5 мл;а супернатанта определяют Фн (фотометрирование) против раствора сравнения при

ii=660 нм).

Различие в активности опытной и контрольной проб в единицах освобожденного

Ф, дает активность 5 -нуклеотидазы и вы1780012

3 ра>каегся в нмолях субстрата гидролизованного г. 1 с в 1 л раствора (нкат), Расчет, стандартный раствор содержит в 1,2 мл 0,003 мг Фн или 3000 нг. а,м, фосфата — 30,97 О

1 нМ фосфата — 30,97 нг

3000 нг Фн соответственно 97 нМ

9,7 100 Е и ГВЛВНать фЕрМЕНта—

075 Есг 1800

1 (1

Х ронический холецистолан,".гит {25) Диски незия желчевыводящих путей по гипомоторному ти1 1 I2D)

1 lPискинезия желчевыводящих ,. путей по гепермоторному типу (10), Здоровые дети

594 11

398 +4

384»-4

Составитель С.Рыбалкин

Техред M,Ìîðãåíòýë Корректор Т.Палий

Редактор С,Кулакова

Заказ 4433 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„4!5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

=718,5 — —

1: 10

"-ст где ; — разнос ь акстинций опытной и контрольной проб, Гст ЗКСТИНЦИЯ СтаНДаРТНОГО РаСТВОРа, 1800 — „îýôôèöèåíò для пересчета ак- 15 тивнаст:.:. в секунду

0,075 — кратность разведения.

Акт1лвносгь 5 -нуклеотидазы у детей контрольной группы составила 154 нкат.

При воспалительных поражениях билиар- 20 ой слстемы активность 5 -нуклеотидазы2 97 + 14 н к ат (p <0,001).

8 группе детей с дискинезией желчевыьодящих путей ио гипомоторному типу активность 5 -нуклеотидазы в сыворотке 25 крови вазрасгала до 205»-0 5 нкат(р<0,001).

Увеличение активности фермента пря мо пропорцлональнодлительности заболеB:ill>iI.I, c ге leelH выраженности cL4i пТо иов 3О интоксикации и увеличению размеров печени.

У больных и гипермоторной формой дискинезии желчевыводящих путей средние показатели активности фермента составили

163» 1,5 HKGT и достоверно не отличались от контрольной группы.

B таблице 1 приведены данные об активности 5 -нуклеотидазы в дуоденальном содержимом у детей с билиарной патологией (в нкат).

Проведенные исследования показали, что при заболевании билиарной системы у детей повышение активности 5 -нуклеотидазь1 в дуоденальном содержимом происходит раньше, чем в сыворотке крови.

Формула изобретения

1, Способ определения поражений билиарного тракта у детей путем исследования активности фермента в сыворотке крови, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, исследуют активность 5-нуклеотидазы, и при ее увеличении в 1,5 раза и более относительно группы доноров определяют пора>кение билиарного тракта.

2. Способ по и 1, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа, активность 5-нуклеотидазы определяют в дуоденальном содержимом,