Способ получения производных цефалоспорина, заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, или их фармацевтически совместимых солей с щелочными металлами

 

Изобретение относится к-полусинтетическим цефалоспориновым антибиотикам, в частности к получению производных цефалоспорина , заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, или их фармацевтически совместимых солей с щелочными металлами, которые обладают бактерицидной активностью, что может найти применение в медицине. Цель - расширение спектра бактерицидного действия. Синтез ведут взаимодействием 7-аминоцефалоспорина, заместитель которого имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, с N-ацилирующим реагентом в среде растворителя . Изучены минимальные концентрации торможения роста бактерий в жидкой среде, которые для новых соединений в основном составляют величины от 0,25 до 1 мг/мл против 32-128 мг/мл для известного антибиотика цефотзксима. Новые соединения эффективны против более широкого спектра бактерий по сравнению с цефотаксимом. Новые соединения нетоксичны, их суточная доза может составить 5-500 мг/кг. 4 табл. С

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ о I — N Я-Q -QCO-М N- Я г )

3 или

R OONH

C í2 ð

О А оса-мН - -N-q

1 (21) 4613835/04 (22) 30,03.89 (46) 07.01,93, Бюл, ¹ 1

{31) 175471, 197943

{32) 31.03.88, 24,05.88 (33) us (71) Ф.Хоффманн-Ля Рош (СН) (72) Харри Эллен Альбрехт, Деннис Далтон

Кис, Фредерик Мартин Концельман, Пзмла

Лорин Росмэн, Чунг-Чен Вай (US), Манфред

Вайгеле (ОЕ) и Роксана Йанг (US) (56) 1. Европейский патент № 0127543, кл. С 07 О 501/34, опубл. 1984. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ЦЕФАЛОСПОРИНА, ЗАМЕСТИТЕЛЬ

КОТОРЫХ ИМЕЕТ В ПОЛОЖЕНИИ 3 АЗОТСОДЕРЖАЩИЙ ГЕТЕРОЦИКЛ, ИЛИ ИХ

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИ СОВМЕСТИМЫХ

СОЛЕЙ С ЩЕЛОЧНЪ|МИ МЕТАЛЛАМИ (57) Изобретение относится к полусинтетическим цефалоспориновым антибиотикам, в частности к получению производных цефаИзобретение относится к способу получения новых антибиотиков цефалоспоринового ряда, а именно производных цефалоспорина, заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл общей формулы I

Н Н где A — карбоксильная группа — СООН и Ri— радикал формулы

„„5U 1787159 А3 (я)5 С 07 Р 501/06, 501/34, 501/46//

А 61 К 31/545 лоспорина, заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, или их фармацевтически совместимых солей с щелочными металлами, которые обладают бактерицидной активностью, что может найти применение в медицине. Цель — расширение спектра бактерицидного действия, Синтез ведут взаимодействием 7-аминоцефалоспорина, заместитель которого имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, с

N-ацилирующим реагентом в среде растворителя. Изучены минимальные концентрации торможения роста бактерий в жидкой среде, которые для новых соединений в основном составляют величины от 0,25 до

1 мг/мл против 32 — 128 мг/мл для известного антибиотика цефотаксима. Новые соединения зффективны против более широкого спектра бактерий по сравнению с цефотаксимом. Новые соединения нетоксичны, их суточная доза может сос1 авить 5 — 500 мг/кг.

4 табл. или А — карбоксилатная группа — COO u

R> — радикал формулы

1787159

Q+ l \ — N N— - Q !

СН, Н 20

Н Н

=. о.

; — 1ч Ф-Сн2К, О сооН где Q — радикал формулы

О j СООН

t 1 й„Ру / где йз и R4- независимо друг от друга водород.или галоген;

Rg — атил, галоидэтил, циклопропил или и-галоидфенил; илц Й1 — радикал формулы

О О где Х вЂ” кислород или сера;

R2 — водород, цианометил, феноксиметил, а -гидроксибензил, a -(N-(4-этил-2,3диоксопиперазинил-1-карбонил)амино)бензил или радикал формулы где Rn — C> — Сз-алкил, возможно замещенный карбоксигруппой, трет. бутоксикарбонильной группой или карбамоильной группой, или их фармацевтически совместных солей с щелочными металлами, которые обладают бактерицидной активностью и могут найти применение в медице.

Целью изобретения является получение новых антибиотиков цефалоспоринового ряда, обладающих более широким спектром бактерицидного действия;

Эта цель достигается основанным на известной реакции N-ацилирования 7-аминоцефало оринов (1) настоящим способом, который заключается в том, что соединение формулы 1! где Й имеет указанные значения, или его соль, подвергают взаимодействию с реакционноспособным производным кислоты формулы III

R2C00H где R2 имеет указанные значения, и выделяют целевой продукт в свободном виде или в виде фармацевтически совместимой соли с щелочным металлом.

Примеры, приведенные ниже, иллюстрируют изобретение.

Пример1. а). Получение (6R-(6 а, 7 f5 (Z)))-1-((7-(((2а мино-4-тиазол ил)1(1,1-ди метил-2-(1,1-диме"0 тилэтокси)-2-оксоэтокси)имино)ацетил) а мино)-8-оксо-5-тиа-1-азаби цикл о(4.2.0)окт-2-ен-3-ил)метил)-4-(3-карбокси-(2-фторэтил)6,8 -дифтор-1,4-дигидро-4-оксохинолин-7ил)-1-метилпиперазинйодида.

3 атмосфере аргона перемешивают 30 мин смесь из 272 мг(1 ммоль) 7-аминоцефалоспорановой кислоты, 0,67 мл (3,6 ммоль)

MSTFA и 3 мл сухого ацетонитрила, госле

25 добавки 0,25 мл (1,75 ммоль) йодтриметилсилана смесь перемешивают еще 30 мин, Смесь охлаждают и смешивают с 0;14 мл (1,75 ммоль) безводного THF. Через 10 мин добавляют раствор иэ 277 мг (0,75 ммоль)

6,8-дифтор-1-(2-фторэтил)-1,4-ди гидро-7-(4метил-1-пиперазинил)-4-оксо-3-хинол инкарбоновой кислоты, 0,17 мл N-метил-N-(триметилсилил)трифторацетамид (0,9 ммоль)

MSTFA и 3 мл сухого ацетонитрила. Всю

35 смесь перемешивают еще 2,5 ч при комнатной температуре, смешивают с 478 мг (1 ммоль) сложного 1,1-диметилэтилового эфира 2-(((1-(2-амино-4-тиаэолил)-2-((2-бензотиазолил)тио)-2-оксоэтилиден)амино)окси)ме40 тил-пропановой кислоты и 4 мл сухого ацетонитрила и смесь перемешивают 12 ч. Небольшое количество нерастворимого вещества удаляют фильтрованием, и фильтрат выпаривают при пониженном давлении

45 досуха. Остающееся масло растворяют в 4 мл ацетонитрила и после охлаждения смешивают с 0,16 мл метанола. Все перемешивают 1 мин, на 2 мин оставляют и полученный осадок отфил ьтровы вают. Последний и ро50 мывают 3 раза, каждый раз 3 мл ацетонитрила, и выпаривают при пониженном давлении. Таким путем получают 530 мл заглавного соединения;

NMR (Ме2$0-d6), д 1,36 (S, 12H, t-Bu u

СНз), 1,40 ($, ЗН, СНз), 3,12 (S, ЗН, ИСНз), 3,40-3,86(m, 9Н,4xNCH и СИ2 от SCH2), 3,96 (d, 1Н, .1овщ = 16 Гц, CH от SCH2), 4,40-4,66 (АВ, 2Н,,3общ = 13 Гц, МОН2), 4,62 — 5,06 (m, 4Н, NCH2CH2F),5,26(d, 1Н, J = 5 Гц, СН), 5,93

1787159 (dd, 1К, J = 5 и 7 Гц, СН), 6,68 (S, 1Н, Ar), 7,25 (Я, 2Н, NHz), 7,92 (d, 1Н, J = 12 Гц, Ar), 8,88 (S, 1Н,=СН вЂ” ), 9,44 (d, 1Н, J = 7 Гц, NH), Аналогичным образом получают:

b), (6R-транс)-4-(3-карбокси-1-(2-фторэтил)-6,7-дифтор-1,4-дигидро-4-оксохинолин-7-ил)-1-((2-кар бокс и-8-оксо-7({фе но ксиа цетил)амино)-5-тиа-1-азаби цикла(4,2.0)акт-2ен-3-ил)-метил)-1-метил пиперазинйодида, NMR (ядерный магнитный резонанс) 10 (Мег$0-б6) д 3,15 (S, ЗН. МСНз), 3,45-3,85 (m, 9Н, 4хйСНг и СН от ЯСНг), 3,95 (d, 1Н, Зо6щ=16,5 Гц, СН от ЯСНг),4,39 и 4,77(АВ, 2Н,,3общ = 13 Гц, ЙСНг), 4,61.и 4,64 (АВ, 2Н, Лобщ = 15 Гц, ОСНгСО), 4,83 — 5,07 (m, 4Н, 5CHzCHzF), 5,24(d, 1Н, J = 5 Гц, СН), 5,82 (dd, 1Н, J = 5 и 7 Гц, СК), 6,95 (d, 2Н, J = 8 Гц, Ar), 6,97 (t, 1Н, J = 8 Гц, Ar), 7,29 (t, 2Н, J = 8 Гц), 7,96 (d, 1Н, J = 12 Гц, Ar), 8,91 (S, 1Н, =СН вЂ” ), 9,18 (d, 1Н, J = 7 Гц, NH); инфракрасный спектр (lR) (KBr) 3400, 1788, 1728, 1700, 1612 см, масс-спектр m/z 716 (катион), с), (бй-(6 а, 7 P (Z))l-1-((7-(((2-амина-4-тиазолил) (метоксиимино)ацетил)амино)-2карбокси-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0)окт-2-ен-3-ил)метил)-4-(3-кар бокс и-1-атил-6фто р-1,4-ди гидро-4-оксо-7-хин ол и н ил)1-метилпиперазинйодида.

NMR (MezSO-d6) д 1,45 (brt, ЗК, СНз от

NEt), 3,15 (S, ÇH, ИСНз), 3,50 — 3,95 {m, 9Н, 4xNCHz и СН от ЯСНг), 3,85 (S, ÇH, ОСНз), 3,99 {d, 1 Н, 3общ = 16,5 Гц, СН от ЯСНг), 4,43 и 4,70 (АВ, 2Н, Абщ = 14 Гц, М СНг), 4,61 (brg, 2Н, СНг от NEt), 5,31 {d, 1К, J = 5 Гц, CH), 5,94 (dd, 1 Н, J = 5 и 8 Гц, СН), 6,76 (S, 1К, Ar), 7,30 (br, 2Н, МНг), 7,31 (d, 1H, J = 6,5 Гц, Ar), 8.03 (d, 1Н, J = 12,5 Гц, Ar), 9,03 (S, 1 Н, =С Н вЂ” ), 9,68(d,1Н, J =8 Гц, NH); 1R(KBr) 1785, 1720, 1680, 1628 см ", масс-спектр m/z = 729 (катион).

d). (6R(6 а, 7P (Z)))-1-(7-((j(2-амино-4-тиазолил) (метоксиимино)ацетил)амино)-2кар бо кси-8-оксо-5-тиа-1-азаби цикл о(4.2.0) о кт-2-ен-З-ил)-метил)-4-(З-карбокси-6,8-дифтор-1-(2-фто рати л)-1,4-ди гидро-4-оксо-7хинолинил)-1-метилпиперазинйодида. NMR (МегЯО-dá) д 3,15 (S, ÇH, ИСНз), 3,50 — 3,90 (m, 9Н, 4XNCHz и СН от ЯСНг), 3,86 (S, ЗН, ОСНз), 3,96(d, 1Н,,3общ=17 Гц, СН от ЯСНг), 4,42 и 4,73 (АВ, 2Н, Лмщ = 14 Гц, МСНг), 4,85 — 5,10 (m, 4Н, NCHzCHzF), 5,29 (d, 1H, J =

5 Гц, СН), 5,93 (dd, 1Н, J = 5 и 7 Гц, CH), 6,86 (S, 1Н, Ar), 7,24 (S, 2Н, Нг), 7,98 (d, 1Н, J

12 Гц, Ar), 8,94 (S, 1Н, = CH — ), 9,67 (d, 1Н, - 7 Гц, NH); 1R (KBr), 3420, 1775, 1720, 1675, 1618 см, е), (6R-транс)-4-(3-карбокси-6,8-дифтор1-(2-фторэтил)-1,4-ди гидро-7-хи н ол и нил)-1((2-(1,1-диметилэтокси)карбон ил-7-(форми15

55 ламино)-3-карбокси-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0)окт-2-ен-Ç-ил)-метил)-1-метилпиперазинйодида, 1R (KBr) 3440, 1785, 1720, 1610 см масс-спектр m/z = 666 (катион).

Пример 2, Внутренней соли-мононатриевой соли (бй-(6 а, 7 j3 (Z)))-1((7-Щ(2амино-4-тиазолил)-(1-(1-карбокси-1-метил)эток- си)имино)ацетил)амино) 3-карбокси-8оксо-5-тиа-1-азаби цикл о(4.2.0)-окт-2-ен-3ил)метил)-4-(З-карбокси-1-{2-фторэтил)-6,3диф- тор-1,4-дигидро-4-оксохинолин-7-ил)1-мет- илпиперазингидроокиси

-СО, Na со,н

""< ) ° Р.3 С, со сн

F

Раствор 102 мг полученного по примеру

1 соединения в 0,4 мл анизола, 1,5 мл хлористого метилена и 1,5 мл трифторуксусной кислоты выдерживают 12 ч при 0 С. После фильтрования, выпаривания досуха при пониженном давлении добавки хлористого метилена и снова выпаривания досуха остаток растирают с простым эфиром, причем получают твердое вещество. Последнее растворяют в водном натрийфосфатном буферном растворе с рН 7 и очищают методом жидкостной хроматографии высокого давления с обратной фазой.

NMR (Мег$0-dá-ОгО) д l,37 (S, ÇH, СНз), 1,44 (S, ÇH, СНз), 3,10 (S, ÇH, ЙСНз), 3,39 и

3,88 (АВ, 2 Н, Лобщ = 16,5 Гц, S CHz), 3,40-3,70 (m, 8H, 4хМСКг), 4,12 и 5,17 (AB, 2Н, 3овщ12,5 Гц, ИСНг), 4,62 — 4,94 (m, 4Н, NCHzCHzF), 5,15 (d, 1Н, J = 5 Гц, СК), 5,73 (d, 1Н, J = 5 Гц, СН), 6,74 (S, 1H, Ar), 7,83 (d, 1 Н, J = 12 Гц, Ar), 8,47 (brs, 1Н,= СН вЂ” ), 1R (КВг) 3400, 1772, 1618, 1595 см масс-спектр m/z = 859 {M+H) .

Аналогичным образом получают

{6R-транс)-4-(З-карбокси-6,8-дифтор-1(2-фто рэтил)-1,4-ди гидро-7-хи нол и н ил)-1-(f

2-кар бо к си-7-(форм илами но)-8-оксо-5-тиа1-а за би цикл о(4.2.0)акт-2-е н-3-ил)метил)-1метилпиперазинтрифторацетата.

NMR {Me2SO-d6), д 3,14 (Я, ÇH, МСНз), 3,50 — 3,85 (rn, 9Н, 4xN CH и СНг от ЯСНг). 3,95 (d, 1H, .4ьщ = 16,5 Гц, СН от ЯСНг), 4,35 (б, 1Н, Аещ=13 Гц, СН от NCHz), 4,82-5,05(m, 5Н, NCHzCHzFи СНотNCHz),5,23(d, 1Н, J

-5 Гц, СН), 5,84 (dd, 1Н, J = 5 и 7 Гц, CH), 796(d, 1Н, J =13 Гц, Аг), 8,17{S, 1H, NCHO).

892(S, 1Н, =СН вЂ” ), 9 11(d, 1H J -7 Гц, NH);

1R 3400, 1780, 1720, 1685 см масс-спектр rn/z = 610 (катион).

1787159

Пример 3. Получение внутренней мо нон атрие вой соли (6R-(6 а, 7p(Z))-1-(7-Е((2амино-4-тиазолил)(метоксиимино)-ацетил)а мино)-2-ка рба к с и-8-оксо-5-тиа-1-а за би цикла (4.2.0)окт-2-ен-З-ил)метил)-4-(З-карбок- 5 си-6,8-дифто р-1-(2-фторэтил)-1,4-ди гидро-4оксо-7-хинолинил)1-метилпиперазингидроокиси о носн, C0 Na г и со1 он . р

Суспензию 900 мг полученного по при- 15 меру Id соединения в воде нейтрализуют при помощи 0,1 н водного раствора гидроокиси натрия, и полученный раствор сушат вымораживанием.. Остаток очищают методом жидкостной хроматографии высокого 20 давления с С в-обратной фазой íà WatersPrep-500A-колонке с водой ацетонитрилом с градиентами 0-40о/ в качестве раствори-. теля. Выпаривание и сушка вымораживанием соответствующих фракций дают 344 мг 25 заглавного соединения: NMR (MezSO-d6) д 3,10 (S, ЗН, МСНз), 3,40-3,76 {m, 9Н, 4xNCH и СНг от SCH), 3,84(d, 1Н, J = 16 Гц, СН от

SCHWA),3,84($,3Н, ОСНз),4,10и5,19(АВ,2Н, 3общ = 14 Гц), 4,70 — 4,94 (m, 4Н, МСН СН Р), 30

5,13 (d, 1Н, J = 5 Гц, СН), 5,65 (dd, 1Н, J = 5 и 7 Гц, СН), 6,74 (S, 1 Н, Аг), 7,23 (S; 2Н, К Н р), 7,82 (d, 1Н, J = 12 Гц, Ar); 8,55 (S, 1 Н, =СН вЂ” ), 9,58 {d, 1 Н, J = 7 Гц, NH); 1R (KBr) 3410, 1772, 1772, 1665, 1618 см "; масс-спектр m/z = 787 35 (М+Н) .

Пример 4. Получение динатриевой соли (6R-(6 а, 7P (Z)))-7-(((2-амино-4-тиазол ил)(метокси ими но)ацетил)а мино)-3-(((Е4-{3карбоксил-1-атил-б-фтор-1,4-дигидро-4-ок- 40 со-7-хинолинил)-1-пиперазинил)карбонил)окси)метил)-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0) окт-2-ен-2-карбоновой кислоты. о носн, со, r

2Na

Смесь 59,4 мг (0,086 ммоль) трифторацетата (6R-транс)-7.-амино-3-((((4-(3-карбокси- 50

1-атил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пиперазинил)-карбонил)окси)метил)8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0)окт-2-ен-2карбоновой кислоты и 1 5 мл THF охлаждают при перемешивании до 0 — 5 С. Затем 55 добавляют раствор 26 мг (0,309 ммоль) би-, карбоната натрия в 2 мл воды в сопровождении раствора 38 мг (0,108 ммоль) сложного -2-бензотиазолилового эфира (Z)2-амино- а - (метоксиимино)-4-тиазолэтантионовой кислоты в 0,75 мл THF. Через 25 мин охлаждающую ванну удаляют и реакционную смесь перемешивают 16,5ч. Затем смесь выпаривают при пониженном давлении для удаления THF. Остающийся водный раствор промывают этилацетатом и потом регулируют добавкой 0,025-молярного водного раствора вторичного кислого фосфата натрия до рН 7,55. Раствор. подвергают хроматографии на 1,75 г колонки с С в-силикагелем (Waters). Продукт элюируют при помощи ступенчатых градиентов. 0,025-молярного натрийфосфатного буферного раствора-ацетонитрила с 0-30 jp ацетонитрила.

Соответствующие фракции соединяют и частично выпаривают при пониженном давлении для удаления ацетонитрила. Подкисление 1 н.водной соляной кислотой до рН 2 дает осадок, который дважды центрифугируют и промывают водой. Осадок растворяют в воде добавкой бикарбоната натрия до рН 7,5. После добавки ацетона осаждается натриевая соль. Продукт выделяют и промывают центрифугированием с ацетоном.

После сушки при пониженном давлении получают 36,2 мг заглавного соединения: 1R (КВг) 3420, 1762, 1675, 1622 см масс-спектр (FAB) m/z = 803 (М+Н) .

Пример 5. Получение динатриевой соли (6R-(6 а, 7Р (Z)))-7-(((2-амино-4-тиазолил){метоксиими но)ацетил)а мино)-3-((((4-(3карбокси-1-циклопропил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пиперазинил)карбонил)окси)метил)-8-оксо-5-тиа-1-азаби цикл о(4.2.0)-окт-2-ен-2-карбоновой кислоты а

НОСН2 со

"" (,3 " : . со о

2Na

183,7 мл (0,262 ммоль) трифторацетата (6Rтранс)-7-а мино-3-((((4-(3-к арбо кси-1-ци клоп ропил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-хинолин}-1-пиперазинил)карбонил)окси)метил)-8оксо-5-тиа-1-азабицикла-(4.2;0)окт-2-ен-2карбоновой кислоты суспендируют в 4,5 мл

THF и охлаждают до 0 С. После добавки раствора 79,9 мг (0,95 ммоль) бикарбоната натрия в 4,5 мл воды промывают 1,5 мл воды. Смесь перемешивают 18 мин, После добавки 93,9 мг (0,268 ммоль) сложного $-2бензотиазолилового эфира (Z)-2-амина- а(метокс и и м и н о)-4-тиа зол эта н тио н о вой кислоты в 1,5 мл THF и 0,7 мл THF удаляют через 15 мин охлаждающую ванну и перемешивают реакционную смесь 17 ч при комнатной температуре. Смесь выпаривают при пониженном давлении и остающийся

1787159

Суспензию 552 мг {0,786 ммоль) используемого по примеру 5 трифторацетата в 14 мл THF охлаждают во льду и смешивают с раствором 240 мл {2,85 ммоль) бикарбоната натрия в 15 мл воды. Смесь перемешивают

20 мин и затем смешивают с раствором 384 мг (0,804 ммоль) сложного 1,1-диметилэтилового эфира 2-(((1-(2-амина-4-тиазолил)-2-((2бензотиазолил)тио)-2-оксоэтилиден)амино

)окси)метил-пропановой кислоты в 6 мл

THF. Смесь перемешивают 15 мин при охлаждении льдом и затем около 12 ч при комнатной температуре. Для удаления THF смесь выпаривают при пониженном давлении. Остающийся водный раствор промывают этилацетатом и подкисляют до рН 2,7.

Полученный осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат IlpN пониженном давлении над сульфатом кальция. Получают 540 мг промежуточного продукта, который растворяют при охлаждении в 2,4 мл и 6 мл трифторуксусной кислоты и выдерживают . около 12 ч при 0 С. Смесь выпаривают затем

5 при пониженном давлении, смешивают с

10 мл хлористого метилена и потом снова выпаривают при пониженном давлении. После добавки 4 мл хлористого метилена и 16 мл этилацетата остаток затвердевает. Последний отфильтровывают, промывают этилацетатом и сушат на воздухе, получают 520 мг заглавного соединения в форме трифторацетата. Этот продукт растворяют с четырехэквивалентным бикарбонатом натрия в

5 0,025-молярном натрийфосфатном буферном растворе с рН 7,5 и очищают методом хроматографии на С18-силикагеле с буферным раствором-ацетонитрилом с рН 7,5 в качестве растворителя. Соответствующие фракции соединяют и подкисляют до рН 3, 40 со н О затем 3 ч при комнатной температуре, 50

Смесь выпаривают при пониженном давлеводный раствор экстрагируют этилацетатом. Этилацетатный экстракт промывают два раза водой,. Водные фазы соединяют (рН 8,7) и смешивают. с 0,025-молярным водным раствором кислого фосфата натрия до рН 7,8, Раствор выпаривают при пониженном давлении (для удаления следов этилацетата) и затем подвергают хроматографии на колонке, содержащей 9 r С1а-силикагеля (Waters), Колонку промывают водным буферным раствором фосфата натрия с рН 7,8 и затем элюируют со ступенчатым градиентом воды-ацетонитрила (Π— 30% ацетонитрила) под давлением. Соответствующие фракции соединяют, выпаривают и сушат вымораживанием, получают 127,6 мг (59,7%) заглавного соединения. 52 мг этого соединения растворяют в 0,5 мл воды и добавкой бикарбоната натрия устанавливают величину рН 8. Для осаждения продукта добавляют 24 мл холодного ацетона. После центрифугирования избыточную жидкость удаляют, и остающееся твердое вещество растирают с холодным ацетоном, фильтруют и сушат при пониженном давлении над полупятиокисью фосфора. Получают 38 мг заглавного соединения: 1R (KBr) 3410, 2540, 1762, 1672, 1622; масс-спектр (FAB) 837 (M+Na) 815 (М+Н) .

Пример 6. Получение {6R-транс)-3-((((4(3-кар бо кси-1-циклоп ро пил-6-фто р-1,4-дигидро-4-оксо-7-хиноли нил)-1-пиперазинил)карбонил)окси)метил)-8-оксо-7-((феноксиацетил)амин о)-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0)-окт2-ен-2-карбоновой кислоты, о

Г

Г

Со 4 о

Раствор 184 мг (0,262 ммоль) используемого в примере 5 трифторацетата в 5 мл

THF перемешивают при 0 — 5 С и смешивают с раствором 101 мг (1,2 ммоль) бикарбоната натрия в 4,5 мл воды и затем с холодным раствором 54 мг (0,314 ммоль) феноксиацетилхлорида в 1,5 мл THF по каплям. Всю смесь перемешивают при 0 — 5 С 20 мин и нии (для удаления THF). Водный остаток разбавляют водой, промывают этилацетатом, охлаждают во льду.и подкисляют для осаждения продукта до рН 2,5. Полученный осадок отфильтровывают и промывают водой и этилацетатом; получают 130 мг заглавного соединения. Последнее очищают методом жидкостной хроматографии высокого давления с С<а-обратной фазой на ко5

35 лонке с силикагелем при применении градиента натрийфосфатного буферного раствора-ацетонитрила с рН 7,5. После выпаривания и сушки вымораживанием соответствующих фракций остаток растворяют в воде. Раствор фильтруют и затем подкисляют для осаждения продукта до рН

2,5, Масс-спектр (FAB) m/z = 722 (М+Н) .

Пример 7. Получение (6R--(6 а, 7,8 (Z)jj-7-(((2-ами но-4-тиазолил)-((1-кар бокс и-1

-метил-это кс и) и мино)а цетил)а мино)-3-((((4(3-карбокси-1-циклопропил-6-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-хинол и н ил)1-и и пе разин ил)карбонил)-окси)метил)-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0)-окт-.2-ен-2-карбоновой кислоты со,н

F оо,Н о 1

*13 ° Lf1 ..- ь со,н о

1787159 причем осаждается заглавное соединение.

Последнее отфильтровывают, промывают водой и сушат при пониженном давлении:

1R 1782, 1703, 1628, см масс-спектр (FAB) m/z = 843 (M+H)+, 5

Пример 8. Получение (6Я-(6 й,7 P(2)))7-(((2-амино-4-тиазолил)-((карбоксиметокси)и мино)а цетил)ами но)-3-Щ(4-(3-ка рбо кси-1циклоп ро пил-6-фто р-1,4-ди гидро-4-оксо-7хинолинил)-1-пиперазинил)карбонил)окси)-10 метил)-8-оксо-5-тиа-1-а заби цикл о-(4.2,0)окт-2-.ен-2-карбоновой кислоты - СО,Н

Pll . ll 15

Аналогичным образом, как в примере 7, однако при применении соответствующего сложного тиэфира, получают заглавное сое- 20 динение: 1R 1780, 1698, 1628 см ; массспектр (FAB) 815 (М+Н) .

Пример 9, Получение (6R-(6 а, 78 (2)))-7-((((2-ами но-2-оксоэтокси)им инол)-(2амина- 4-тиазолил)ацетил)амино)-3-((((4-(3- 25 ка рбо к си.-1-цикла пропил-6-фтор-1,4-ди гидро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пиперазинил)- карбонил) окси)метил)-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0) окт-2-е н-2-ка рбо новой кислоты

НН1 30 но о 1 ...-(3 ."" ф, Аналогичным образом, как в примере 5, 35 однако при применении в качестве ацилирующего агента $-2-бензтиазолилового эфира (Z)-2-амин о-а-(2-а мино-2-о ксоэтокси)имино/-4-тиозолэтанэтионовой кислоты, получают заглавное соединение: 1Я 18-780, 1685, 1628 40 см, масс-спектр (FAB) m/z = 814 (M+H)).

Пример 10. Получение (6R-транс)-3-(4(П(3-карбокси-1-циклоп роп ил-б-фтор-1,4дигидро-4-оксо-7-хинолинил) 1-пиперазинил) карбонил)окси)-метил-7-(формиламино)- 45

8-оксо-5-тиа-1-аз аби цикл о)(4.2.0)окт-2-е н-2карбоновой кислоты о ин СО,H о гд и

1 Сон р

Соль трифторацетатной кислоты, используемую в примере 5, ацилируют уксусномуравьиным ангидридом в водном 55 растворе ТГФ в присутствии бикарбоната натрия с получением заглавного соединения: 1R 3420, 1782, 1700, 1625 см ; массспектр (FAB) m/z = 616 (М+Н) .

Пример 11. Получение (6R-транс)-3(П(4-(3-ка рбокси-1-цикло про пил-6-фто р-1,4дигидро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пиперазинил)карбонил)окси)метил-7-(циа ноацетил)" амин о)-8-оксо-5-тиа-1-азаби цикл о(4.2.0)окт2-ен-2-карбоновой кислоты р О

ИН СОан .., Н

Соль трифторацетатной кислоты, используемую в примере 5, ацилируют цианоацетилхлоридом в присутствии триэтиламина растворенном в метиленхлориде с получением заглавного соединения: 1Я 2255, 1782, 1702, 1665 см1, масс-спектр (FAB) m/z = 655 (М+Н)+.

Пример 12. Получение (6R-(6 а-7 P (Я)))-3-((((4-(3-ка р бокси-1-цикл о и ро и ил-6» фтор-1,4-ди гидро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пи- перазинил)карбонил)окси)метил)-7-(((((4атил- 2,3-диоксо-1-пиперазинил)карбонил)амино)фенилацетил)амина)-8-оксо-5тиа-1-азаб ици кл о(4.2.0)окт-2-ен-2-ка рбоновой кислоты

g (,Х, СО Н.

О Х

Соль трифтофцетатной кислоты, используемую в примере 5, ацилируют s водном растворе ТГФ методом ОСС-NHBT (R)-1-((4-этил-2,3-ди оксо п и перази н ил) ка рбонил)амино бензолацетатной кислоты в присутствии бикарбоната натрия с получением заглавного соединения; 1R 1783, 1712, 1690, 1628 см ", масс-спектр (FAB) m/z = 889 (М+Н) .

Пример 13. Получение (6R-(6 а, 7 Р (Щ-7-П((2-амино-4-тиазолил)(метоксиимино)ацетил)а мино)-3-(П((1-(3-ка рбокси-1-атил-6фтор-1,4-ди гидро-4-оксо-7-хи нолинил)-3и ирролиди нил)амино)ка рбон ил)окси)метил)8-оксо-5-тиа-1-азаби цикл о(4,2.0)окт-2-ен-2карбоновой кислоты

"-(3 т 3 . ". „ххах

Аналогичным образом, как в примере 5, однако с применением в качестве исходного продукта трифторуксусной соли (6Я-транс)7-ам и но-3-(Ш(1-(3-карбо кси-1-этил-6-фтор-1,4ди гидро-4-оксо-7-хиноли нил)-3-и и ррол идинил)амина)карбонил)окси)метил)-8-оксо-513

1787159 сои о

Соединение А: (6R-(6 а, 7 p(2)jj-1-(7-Щ(2амино-4-тиазолил)(метоксиимино)ацетил)амин о)-2-ка рбо кси-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0)окт-2-е н-3-ил)-метил)4-(3-к а рбо кси-6, 35 8-дифтор-1-(2-фторэтил)-1,4-дигидро-4-оксо-7-хинол инил)-1-метил пиперазинйодид.

Соединение В: (6R-транс)-4-(3-карбокси-1-(2-фторэтил)-6,8-дифтор-1,4-дигидро-4оксохин олин-7-ил)-1-((2-харбокси-8-оксо-740 ({феноксиацетил)амино)-5-тиа-1-азабицик, л о(4.2.0)о кт-2-ен-3-ил)метил)-1-метил пи перазинйодид

Соединение С: (бй-(6 а, 7 P (2)))-1-((7((((2-амина-4-тиазолил)(1-(1-карбокси-1-меАналогичным способом, как в примере

5. однако с применением в качестве исходного продукта трифторуксусной соли (6Rтранс)-7-а мино-3-(((((1-3-ка рбо к си-1-ц и кл опропил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-хинолин ил)-3-и и р рол иди н ил)а мино)ка рб он ил)окси)метил)-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2. О) .. окт-2-ен-2-карбоновой кислоты получают заглавное соединение.

Пример 16, Получение (6R-)6 а, 7 Р (Z)/(pà ц)-7-((((2-а мино-4-тиа зол ил(метокси имино)ацетил)ами но)-3-((((4-(3-карбокси1- этил-6,8-дифтор-1,4-дигидро-4-оксо-7-хи- 4 нолинил)-2-метил-1-пиперазинил)карбонил)окси)метил} 8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4,2.0) окт-2-ен-2-карбоновой кислоты о

55 тиа-1-азаби цикло(4.2.0)окт-2-ен-2-карбоновой кислоты получают заглавное соединение: 1Я 1780, 1710, 1630 см, масс-спектр (FAB) а/z = 814 (M+H)+.

Пример 14, Получение (6R-(6 а, 7Р (R))j-3-Я(4-3-карбокси-1-циклопропил-6-фтор1,4- дигидро-4-оксо-7-хинолинил)-1-пиперазин ил)карбонил)окси)метил)-7-гидроксипенила цетил) ам и í ol-8-оксо-5-ти а-1-аз а би ци.кло (4.2.0)окт-2-ен-2-карбоновой кислоты

0 с со о рн ! („.14 а г, Аналогичным способом, как в примере

12, однако при применении в качестве кислоты R-/-/-миндальной кислоты получают заглавное соединение: 1R 1782, 1700, 1625 см, масс-спектр (FAB) m/z = 722 (M+H) .

Пример 15. Получение (бй-(6 а,7 Р (Z)))-7-((((2-амина-4-тиазолил)(метоксиимино ) а цетил)ам и но)-3-(((((1-(3-карбокси-1-цислопропил-6,8-дифтор-1,4-гидидро-4-оксо-7-хиноли нил)-3-пи ррол иди нил)амина) ка рбон ил)окси)метил)-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2.0)окт-2-ен-2-карбоновой кислоты иосн со,н о,н о с "з

При условиях реакции, аналогичных примеру 5, получают заглавное соединение:

1R 1780, 1720, 1688, 1622 см 1, масс-спектр (FAB) m/z = 791 (М+Н) .

Пример А, Получение сухих ампул для внутримышечного назначения.

Изготовляют обычным образом лиофилизат с 1 r активного вещества и вводят в ампулу. Стерильная ампула с водой содержит 10% пропиленгликоля. Перед назначением лиофилизат разбавляют 2,5 мл 2%-го водного раствора.лидокаингидрохлорида.

В качестве активного вещества можно применять один из полученных по примерам 1 — 15 конечных продуктов, Соединения формулы 1 и соответствующие соли или гидраты этих продуктов явля- . ются антибиотиками, особенно с бактерицидной активностью. Их можно применять в,качестве реактивов для борьбы с бактериальными инфекциями (включая инфекции мочевых и дыхательных путей) у млекопитающих, напр. у собак, кошек, лошадей и т,д., а также у человека, Эти цефалоспорины являются эффективными против широкой области как грамотрицательных, так и грамположительных бактерий.

Активность в пробирке соединений по изобретению против большого количества грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, выраженная как минимальная концентрация торможения в микрограммlмл и определенная при применении метода последовательного разведения (в жидкой среде), показана ниже: тил) этокси)имино)ацетиламино)-8-оксо-5тиа-1-азабицикло-(4,2.0)окт-2-ен-3-ил)метил )4-(3-ка рбокси-1-(2-фторэтил)-6,8-дифтор1,4-дигидро-4-оксохинолин-7-ил)-1-метилпиперазингидро-окись-внутренняя сольмононатриевая соль, Соединение D: (6R-(6 а, 7P (Z)jj-1-((7-(((2амин о-4-тиазолил)(метоксиимино)ацетил)амино)-2-карбокси-8-оксо-5-тиа-1-азабицикno(4.2.0j-окт-2-ен-3-ил)метил)-4-(3-карбокси1-этил-б-фто р-1,4-ди гидро-4-оксо-7-хинол инил)-1-метил пипе рази нйодид.

Соединение Е: (6R-транс)-4-(3-карбокси6,8-дифтор-1-(2-фторэтил)-1,4-дигидро-7-хинолинил}-1-((2-карбокси-7-(формиламино)-81787159

16

10

20 цикл опропил-б-фтор-1,4-дигидро-4-оксо-7- 25 хин ол и и ил)-1-и и пе рази нил)карбон ил)о кси)метил)-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло(4.2,0) окт2-ен-2-карбоновой кислоты.

Для борьбы с бактериальной инфекцией й2 СОИН.

®/

-М N-Q

l сн б

-ОсО-N Я-9

\ или

COOH оксо-5-тиа-1-азаби цикл о(4,2.0)окт-2-ен-3ил) метил)-1-метил пи перазинтрифторацетат.

Минимальная концентрация торможения (MHK) в пробирке (мг/мл) метод последовательного разведения в жидкой среде приведена в табл.1 — 3.

Активность в пробирке соединений по изобретению против большого количества грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, выраженная как минимальная концентрация торможения в микрограмм/мл и определенная при применении метода последовательного разведения (в среде агара), показана ниже.

Соединение F: динатриевая соль (6R-/6 а, 7 j3 (Z)))(2-а ми но-4-тиазол ил)-(метоксиимино) а цетил)ам и но)-3-Щ(4-(3-карбокси-1-этил-6фта р-1,4-ди гидро-4-оксо-7-хин ол и н ил)-1пиперазинил)карбонил)окси)метил)-8-оксо5-тиа-1-азаби цикл о(4.2.0)окт-2-ен-2-карбоНОВОЙ кислоты.

Соединение 6: динатриевая соль (6R-(6 а, 7 p(Z)))-7-(((2-амина-4-тиазолил)(метоксиими но)ацетил)амино)-3-К((4-(3-карбокси-1у млекопитающего можно проводить лечение соединением по изобретению с суточной дозой около 5-500 мг/кг, предпочтительно около 10-100 мг/кг, особенно около 10-55 мг/кг. Все нормы назначения, которые до сих flop принимают во внимание для терапии пенициллином и цефалоспорином, можно использовать также для новых цефалоспоринов по изобретению. Следовательно, видами назначения являются напр. внутривенные, внутримышечные и кишечные назначения, например, в форме свечей, Продукты по изобретению могут применяться как лечебные средства, напр. в форме фармацевтических препаратов, они или их соли содержатся в смеси с подходящим для кишечного или парентерального назначения фармацевтическим, органическим или неорганическим инертным веществомносителем, например вода, желатина, гуммиарабик, молочный сахар, крахмал, стеарат магния, тальк, растительные масла, полиалкиленгликоли, вазелин и т.д. Фармацевтические препараты могут существовать в твердой форме, например, как таблетки, драже, свечи, капсулы, или в жидкой форме, например, как растворы, суспензии или эмульсии. В случае необходимости они стерилизуются и/или содержат вспомогатель40

55 ные вещества,. как консерванты, стабилизаторы, смачиватели или эмульгаторы, соли для изменения осмотического давления, анаэстатические средства или буферные растворы. Они могут содержать также еще другие терапевтически ценные вещества.

Карбоновые кислоты формулы 1 и их соли или гидраты принимаются во внимание предпочтительно для парентерального назначения и приготовляются для этой цели предпочтительно как лиофилизаты или сухие порошки для разбавления обычными агентами, как вода и изотонический раствор хлористого натрия, агент растворения, как пропиленгликоль. Легко гидролизуемые сложные эфиры формулы 1 также принимаются во внимание для кишечного назначения.

Формула изобретения

Способ получения производных цефалоспорина, заместитель которых имеет в положении 3 азотсодержащий гетероцикл, общей формулы I

К Н

О М Сн2К1, А где А — карбоксильная группа -C0OH; Rl— радикал формулы

-ОСО- NH Й-G

) или А — карбоксилатная группа -СОО ;

Rl — радикал формулы: щ/ \

-N N-Q у ) сн где Q — радикал формулы

Х М Рс где Яз и 84 — независимо друг от друга водород или галоген;

Rg — атил, галоидзтил, циклопропил или п-галоидфенил, или Rj — радикал формулы

1787159

17 или

Таблица 1

Таблица 2

0 0

" -г

1 MH о---..- - -... ./ Ъ 5 где Х вЂ” кислород или сера;

RQ — водород, цианометил, феноксиметил, а -гидроксибензил, а -(N-(4-атил-2,3диоксопиперазинил- 1-карбонил)амино)бензил или радикал формулы 10 х3Г ни 8 Р

О 6 у

15 где Ве — С1— - Сз-алкил, который может быть замещен карбоксильной группой, трет.бутоксикарбонильной группой или карбамоильной группой, или их фармацевтически совместимых 20 солей с щелочными металлами, о т л и ч а юшийся тем, что соединение формулы li н н .ни S

И CH2R„)

COOH где R> имеет указанные значения, или его соль, подвергают взаимодействию с реакционноспособным производным кислоты формулы 1И

R2COOH, где Rz имеет указанные значения, и целевой продукт выделяцу в свободном виде или в виде фармацевтически совместимой соли с щелочным металлом, Приоритет по признакам;

31.03.88 при R> — радикал формулы

O>/ \ е/ \ — ч м-q или -м к-g, сн

Сн5 "Л

Rz, А и 0 имеют указанные значения.

24.05.88 при R> — радикал формулы г

-ОС О- u-а, -Осо-нн й-6

) ю

О О

Р

- 0CO- hl iV—

N Х

I

Ь

R2, А, Q и Х имеют указанные значения, 1787159

Таблица 3

Таблица 4

МНК в пробирке мгlмл, метод последовательного разведения в среде агара

Сое инение

Культура

0,0625

0,0625

0,0625

0,125

0,0625

0.125

0,0313

0,125

0,25

0,0625

0,0625

0,25

Е. coll 257

Е. coll АТСС 25922

Е. coll ТЕМ-1

Clt. freundli В$-16

К. pneumoniae А

Enter с1оасае 5699

Enter. сlоасае Р99

Ser. marcescens SM

Ser, marcescens 1071

Prot. чШ9аг1з АТСС 6380

Prot. vulgarls 1028 ВС

Prot. а!гаЬ111з 90

Ps. aeruglnosa АТСС

27853

Ps. aeruginosa 5712

Ps. aeruginosa 8780

Ps. aeruglnosa 765

Ps, aeruglnosa l8SH

Staph. aureus Smith

Staph, aureus АТСС

29213

Staph. aureus 10598

Staph. aureus 67

Staph. aureus 753

Str. pneumon1ae 6301

Str. pyogenes 4

Str, faecalls АТСС

29212

0,25

0,25

0,25

0,5

0,5

0,5

0.5

0,25

0,5

0,625

0,125

0,25

16

8

1

2

1

0,5

2

4

0,0157

0,0157

1

1

0,0157

0,0157

0,5

0,25

Составитель 3.Латыпова

Техред M,Ìîðãåíòàë Корректор М,Максимишинец

Редактор

Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Заказ 267 Тираж Подписное . ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5