Способ получения ристомицина

 

ОП ИСАЙКЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

М АВТОРСКОМУ (:ВИДЕТЕПьСтВУ

I8O753

Союз Соеетекиз

Соцнеенетичеоких

Рееву.rÿN

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 05.1V,1962 (№ 772724/31-16) Кл. 301т, 6

30t с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 26.т1!.1966. Бюллетень № 8

МПК А 61k

А 61k

УДК 615 779 932 616 9-08 (088.8) Комитет оо делом изобретений и открытий ори Совете Министров

СССР

Дата опубликования описания 17 V 1966

Авторы изобретения

Г. Ф. Гаузе, Е. С. Кудрина, P. С. Ухолина, Г. В. Гаврилина, М. Г. Бражникова, H. Й. Ломакина, М. Ф. Лаврова, М. С. Юрина, В. А. Шорин, Л. Е. Гольдберг и С. П. Шаповалова

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РИСТОМИЦИНА

Изобретение относится к способам получения антибиотика ристомицина, используемого для лечения инфекционных болезней, вызванных грамположительными бактериями.

Сущность предлагаемого способа заключается в том, что продуцент Proactinomyces

fructifera, var. ristom cini выращивают на питательной среде, содержащей минеральные соли, источники азота и углсводного питания.

Культуральную жидкость пропускают через ионообменную смолу, например типа СБС-3 или СДВ-3 в Н"-форме, катионит обрабатывают раствором аммиака в ацетоне, удаляют пирогенные вещества и выделяют антибиотик в виде осноьания.

Пример. Культуру продуцента Ргоас11поmyces fructiiera, var. ristomycini штамм 5339 выращивают методом погружешюго роста на питательной среде следующего состава (в %): соевая мука 0,5, глюкоза 1,0, нитрат калия 0,2, хлористый натрий 0,3 и карбонат кальция 0,3.

Через 3 — 4 суток ферментации при 28 С содержание антибиотика в культуральной жидкости достигает 400 лскг/л и ее пропускают через колонки с катионитом СДВ-3 или СБС-3 в

Н+-форме (размер частиц 0,1 — 0,5 лслс) со скоростью 500 лсл/слс- в 1 час. При этом 1 г сухой смолы адсорбирует около 50 лсг ристомицина. Для удаления окрашенных примесей катионит промывают 0,05 М уксусноаммонпйным буферным раствором при рН 7,0. Эгпоцию антибиотика производят 10 — 15-кратным объемом 0,1 н. раствора аммиака в ацетоне.

Элюат упаривают под вакуумом при температуре не выше 40=C, растворяют остаток в метаноле, подкисленном до рН 3,0, и осахкдают ристомицин добавлением 10-кратного объема ацетона. Средний выход антибиотика 160 лсг из 1 л нативного раствора.

Для удаления пирогенных веществ в 5%ный водный раствор ристомицина добавляют

15 размельченный феррицианид цинка (2 г на

20 лсл раствора) и оставляют на ночь. Раствор отфильтровывают, добавляют равный объем метанола и пропускают через колонку с промытой кислотой окисью алюминия. Элюцию производят 3 — 4 объемами 50%-ного метанола. Элюаты упаривают, остаток растворяют в

6-кратном количестве воды, обрабатывают активированным углем, отфильтровыва ют через свечу Шамберлена ¹ 5 и медленно, по каплям добавляют 1 н. раствор едкого патра при энергичном перемешивании. Значение рН при кристаллизации должно быть 7,6 — 7,8.

Раствор оставляют на сутки прп 0 С, отфильтровывают антибиотик и промывают охлаж30 денной водой.

180753

Предмет изобретения

Составитель В. А. Таратута

Редактор А. И. Пименова Техред Л. К. Ткаченко Корректоры: О. Б. Тюрина и С. H. Соколова

Заказ 1122/IO Тираж 670 Формат бум. 60 90 /8 Объем 0,1 изд. л. Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, д. 2

Способ получения ристомиципа, отличаюи4ийся тем, что продуцент Proactinomyces fructifera, var ristomycini выращивают на питательной среде, содержащей минеральные соли,, источники азота и углеводного питания, культуральную жидкость пропускают через ионообменную смолу, например типа СБС-3 или СДВ-3 в Н+-форме, катпопит обрабатывают раствором аммиака в ацетоне, удаляют пирогенные вещества и выделяют антибиотик в виде основания.