Способ определения парацетамола

 

Способ определения парацетамола заключается в том, что в качестве растворителя используют изопропиловый спирт, пробу обрабатывают 0,6 мл 8%-ного раствора гидроксида калия, 0,8 мл хлороформа, нагревание проводят 15-20 мин при 70-80°С. Интенсивность флуоресценции измеряют при длине волны возбуждения 407 нм и длине волны излучения 512 нм всредедиметилформамид - 10%-ный раствор гидроксида аммония, взятых в соотношении 9:1,5 табл,

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 G 01 N 21/64

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) 6 "," ... -.:,".. ,lfl

° «и ; т- вн а

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕН

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4910836/25 (22) 15,02.91 (46) 23.03,93. Бюл,N. 11 (/1) Курский государственный медицинский институт (72) Е.В.Будко, A.À,Õàáàðoâ и А.P.Êóçíåöîâ (56) Государственная фармакопея СССР, Иэд.Х, — M.: 1968, ст516 — 517.

Авторское свидетельство СССР

N 1065347,кл. G 01 N 21/64, 1984. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПАРАЦЕТАМОЛА

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам анализа парацетамола, и может быть использовано в фармацевтическом и биофармацевтическом анализе, Целью изобретения является снижение предела обнаружения парацетамола.

Для достижения поставленной цели предлагается способ, который заключается в том, что анализируемую пробу растворяют в изопропиловом спирте для обработки используют 8% раствора КОН прибавляют 0,6 мл 8% раствора гидроксида при объемном отношении КОН: хлороформ — 3 — 4, нагревают на водяной бане, температура 70-80 С в течение 15 — 20 мин. Интенсивность флуоресценции измеряют при длинах волн возбуждения 407 нм и излучения 512 нм в среде диметилформамид 10% раствор гидроксида аммония, взятых в соотношении 9:1, „,>5U„, 1803833А1 (57) Способ определения парацетамола заключается в том, что в качестве растворителя используют изопропиловый спирт, пробу обрабатывают 0,6 мл 8%-ного раствора гидроксида калия, 0,8 мл хлороформа, нагреван ие проводят 15 — 20 ми и и ри 70 — 80 С.

Интенсивность флуоресценции измеряют при длине волны возбуждения 407 нм и длине волны излучения 512 нм в средедиметилформамид — 10%-ный раствор гидроксида аммония, взятых в соотношении 9:1, 5 табл, и н

В табл,1 показана зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации и объема гидроксида калия и от объема хлоро- и форма. Максимальная интенсивность флуо- QQ ресценции соответствует использованию

8% раствора гидроксида калия, взятому в количестве 0,6 мл. При увеличении объема О хлороформа от 0,8 до 1,2 мл интенсивность флуоресценции не изменяется, выбран объема 0,8 мл. В соответствии с табл.2 макси- (A мал ьные значения интенсивности фпуоресценции достигаются при нагрева- ) ь нии пробы на водяной бане температуры д

80 — 80 С за 20 — 15 мин, В табл.3 представлена зависимость интенсивности флуоресценции от объемного соотношения диметилформамида и 10% раствора гидроксида аммония в смеси, В табл.1-3 показаны результаты исследования проб с концентрацией парацетамола 10 мкг/мл. В табл.4 и 5 даны результаты определения па1803833 рацетамола в субстанции и в пробах цельной крови соответственно.

Пример 1. Определение парацетамола в субстанции.

Точную навеску парацетамола (0,50,002 г) внося в мерную колбу емкостью 100 мл и растворяют в иэопропиловом спирте, объем раствора доводят до метки (растеор А). 1 мл раствора 3 вносят в мерную колбу емкостью 50 мл и объем раствора доводят до метки изопропиловым спиртом (раствор Б). К 1 мл раствора Б прибавляют 0,6 мл 8% раствора гидроксида калия, 0,8 мл хлороформа, пробу нагреваю на водяной бане температуры 7080 С в течение 15-20 мин. Объем доводят до

5 мл смесью диметилформамида и 10% раствора гидроксида аммония (9:1) и измеряют интенсивность флуоресценции при 407м нм (возбуждение) и 512 нм (излучение). Концен- 20 трация вещества в пробе определяется по калибровочному графику, Предлагаемый способ позволяет определять 0,02-40 мкг/мл. Результаты определения представлены в табл.4. 25

Пример 2. Определение парацетамола в жидкости организма.

Готовили пробы крови, содержащие известное количество парацетамола. К 1 мл пробы прибавляли 8 мл изопропилового 30 спирта, встряхивали, центрифугировали, . жидкую фазу упаривали и переносили на хроматографическую пластинку параллельно со свидетелем. После разделения зону, выявленную по свидетелю в УФ-свете сдли- 35 ной волны 254 нм, переносили в пробирку, прибавили 1 мл изопропилового спирта, 0,6

8 раствора гидроксида калия, 0,8 мл хлороформа, Пробу нагревали при температуре

70-80 С 15 — 20 мин, объем доводили до 5 мл диметилформамидом и 10% гидроксидом аммония (9:1), Интенсивность флуоресценции измеряли при 407 нм (возбуждение) и

512 нм (излучение) против серии стандартных и,контрольного растворов, Результаты представлены в табл.5.

Таким образом, способ по сравнению с известным более чувствителен (определяемый минимум концентраций снижен от 0,1 до 0,02 мкг/мл, что составляет 5 раз) и может быть использован для определения количества парацетамола в жидкостях организма и лекарственных средствах с пониженным содержанием препарата.

Формула изобретения

Способ определения парацетамола, включающий растворение анализируемой пробы в спирте и обработку пробы гидроксидом калия и хлороформом с последующим нагреванием раствора, облучение раствора светом и регистрацию интенсивности флуоресценции раствора, по величине которой проводятопределение, отл и ча ющий с я тем, что, с целью снижения предела обнаружения, пробу растворяют в иэопропиловом спирте, для обработки используют 8% -ный раствор гидроксида калия при объемном соотношении последнего и хлороформа 3:4, а нагревание проводят при 70 — 80 С, возбуждают флуоресценцию раствора видимым светом с длиной волны ih = 407 нм, а регистрацию флуоресценции проводят на длине волны Ж = 512 нм в смеси диметилформамида и 10 -ного раствора гидроксида аммония, взятыми в соотношении 9:1.

1803833

Таблица 1

Таблица 2

1803833

Таблица 3

Таблица 4

Таблица 5

Составитель О.Бадтиева

Техред М. Моргентал Корректор Н.Ревская

Редактор

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул, Гагарина, 101

Заказ 1053 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5