Способ получения комплексного соединения платины (ii) с н- днк, обладающего противоопухолевой активностью

 

Изобретение касается комплексных соединений пластины (2+), в частности получения комплекса соединения платины (2+) с н-ДНК, обладающего противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель - повышение активности и снижение токсичности целевого продукта. Для этого ведут реакцию цис-дихлордиаминоплатины с дезоксирибонуклеиновой кислотой (выделенной из селезенки крупного рогатого скота, марки А) в присутствии NaCI и цитрата натрия при молярном соотношении 6:4:30:3, при нагревании до 78+0,5°С в течение 15-20 мин в водной среде. Полученный продукт обеспечивает 95%-ное торможение роста опухоли при 100%-ной выживаемости животных. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

lyly :ЦЩЩ,6 q

МАТ PT„-",Д.. (=; ) II7-„, Би 1ОТ

q ПАТЕНТУ

6 (21) 4462342/04 (22) 15.07.88 (46) 30,04.93. Бюл. N 16 (71) Институт физической химии АН УССР им. Л.B. Писа ржевского и Киевский государственный институт усовершенствования врачей (72) И.И.Волченскова, Н,Н,Майданевич, Л.И.Бударин, С.А,Шалимов, Е.П.Трохименко и Л.В.Кейсевич (73) И.И.Волченскова, Н.Н.Майданевич, Л.И.Бударин, С.А.Шалимов, Е,П.Трохименко и Л.В. Кейсе вич (56) Блохин Н.Н. и Переводчикова Н,И, Химиотерапия опухолевых заболеваний. М.:

Медицина, 1984, с.95-100.

Вестник AMH СССР. 1986, N12,,с,7989.

Координационные соединения металлов в медицине. Киев: Наукова Думка, 1986, с.120-174.

Авторское свидетельство СССР

N. 1754722, кл, С 07 F 15/00, 1988.

Изобретение относится к способу получения нового комплексного соединения платины, обладающего противоопухолевой активностью.

Целью изобретения является получение нового платинооргэнического комплексного соединения с более высокой активностью и более низкой токсичностью по сравнению с известными противоопухолевыми препаратами.

Способ получения полиплатиллена заключается в том, что предварительно нагретые до температуры плавления н-4НК водные цитратно-солевые растворы цис„„. ЖÄÄ 1813089 АЗ (я)з С 07 F 15/00, А 61 К 31/295 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПЛЕКСНОГО СОЕДИНЕНИЯ ПЛАТИНЫ (li) С н — ДНК, ОБЛАДАЮЩЕГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ

АКТИВНОСТЬЮ (57) Изобретение касается комплексных соединений пластины (2+), в частности получения комплекса соединения платины (2+) с н-ДНК, обладающего противоопухолевой активностью, что может быть использовано в медицине. Цель — повышение активности и снижение токсичности целевого продукта, Для этого ведут реакцию цис-дихлордиаминоплатины с дезоксирибонуклеиновой кислотой (выделенной из селезенки крупного рогатого скота, марки А) в присутствии NaCl и цитрата натрия при молярном соотношении 6;4,30:3, при нагревании до 78+0,5 С в течение 15 — 20 мин в водной среде, Полученный продукт обеспечивает 95% ное торможение роста опухоли при 100%-ной выживаемости животных. 2 табл, дихлордиамминплатины и н-ДН К смешивают в моля рном соотношении

Pt:Р:NaCl:NagCyt=6:4:30:3 и термостатируют при этой температуре до окончания реакции.

Нативную ДНК растворяют в цитратносолевом растворе (15 ммоль/л NaCl 1,5 ммоль/л МазСут) при комнатной температуре и нагревают в термостате до Тпл, Цис-дихлордиамминплатину (П) растворяют в таком же цитратно-солевом растворе, предварительно нагретом до температуры плавления н-ДНК.

1813089

Окончание взаимодействия ДДП и нДН К контролируют спектрофотометрически по достижению параметров УФ-спектра поглОщвния Q gc, = 266,2+0,1 нм и Е266.2 =

10000+100 л.моль см .

Заявляемое вещество получают в водном растворе и в твердом виде как индивидуальное вещество или как смесь с

Na С1+ИазСуэ5,5 Н20, Пример 1. Высокомолекулярную н-ДНК с температурой плавления 78,0+О, C в количестве 0,500 г растворяют при комнатной температуре в 0,375 л водного раствора, содержащего 15 ммоль/л NaCI + 1,5 ммоль/л NaaCyt в дальнейшем такой раствор будет называться цитратно-солевым) и нагревают раствор с термостате до

78,0+0,5 С со скоростью 1 С в минуту.

Препарат ДДН в количестве 0,675 г растворяют в 0,375 л цитратно-солевого раствора, предварительно нагретого в термостате до 78,0+0,5 С.

Приготовленные растворы н-ДНК и

ДДП смешивают при 78,0+0,5 С, тщательно перемешивают и термостатируют при

78,0+0,5 С еще в течение 15 мин, Пример 2, Опыт проводят как в примере 1, только реакционную смесь подвергают лиофильной сушке по методике изготовления сухой плазмы крови, Раствор полиплатиллена, полученный по реакции при постоянном вращении, охлаждают до минус 40 С в течение 40 мин, выдерживают при этой температуре 12 ч, а затем температуру повышают до минус

20 С, образец откачивают в течение 40 ч, нагревают до плюс 40 С и снова откачивают

26 ч, Полученный после лиофильной сушки лиофилизат представляет собой сложное вещество, состоящее из полиплатиллена, NaCI u NaaCyt 5,5 Н20 в мольном соотношении Р1:Р:NaCI:NàçCót =- 6:4:30;3, Пример 3. Опыт проводят как в примере 2, только из полученного после лиофильной сушки сложного вещества (лиофилизата) удаляют NaCI u NagCyt 5,5 Н20. Для этого к 0,250 г лиофилизата добавляют 50 мл дистиллированной воды и тщательно перемешивают. Полученную известь центрифугируют при комнатной температуре со скоростью 7000 об/мин в течение 15 мин на центрифуге ОПн-8. Осадок отделяют от надосадочного раствора декантацией, промывают водой, спиртом, эфиром и сушат на воздухе. Сухое вещество хранят.при комнатной температуре в закрытой стеклянной посуде. Выход чистого полиплатиллена составляет 607, от теоретического.

Для экспериментальной проверки заявляемого способа получения полиплатиллена было проведено еще 22 опыта, 10 из которых показали положительные результаты, В положительных опытах получен продукт, УФ-спектры которого имеют параметры, характерные для заявляемого соединения. Результаты опытов сведены в табл. 1, где приведены характеристики полученных продуктов в зависимости от способа их получения. Способы получения охарактеризованы следующими параметрами; выбором концентрации исходных растворов ДДН и н-ДНК, молярным соотн ошен ием P t: Р: И а С1МазС ут 5,5 Н20, временем и температурой проведения реакции, Из табл. 1 следует, что выбор исходных концентраций ДДН и н-ДНК в пределах ошибки опыта не влияет на характеристики полученного продукта (опыты 1 — 6). Максимальная концентрация ДДН ограничена ее растворимостью, составляющей 0,2523 мас.% при 250 С, Минимальная концентрация ДДП ограничена минимально возможной для хорошей спектрофотометрической регистрации концентрацией н-ДНК, состав. ляющей 3,0 мкгlмл. Опыты 7-12 показался, что отклонение от соотношенйя

Pt:Р:МаС1;NagCyt в сторону избытка одно о из компонентов не позволяет получить целевое соединение полиплатиллен с выше указанными параметрами УФ-спектра, Результаты опытов 13 — 16, указывают. что взаимодействие реагентов по реакции протекает быстро и заканчивается за время, не превышающее 5 минут. Увеличение времени термостатирования реакционной смеси до 30 минут не влияет на параметры продукта реакции.

Результаты опытов 17 — 22 говорят о существенном влиянии температуры проведения реакции на такой параметр продукта реакции как Е266,2. Из зависимости Е266,2 от температуры видно, что для получения заявляемого соединения полиплатиллена термостатирование реакционной смеси надо вести при 78+0,5 С. 3а пределами указанного температурного интервала нельзя получить продукт с необходимыми параметрами УФ-спектра.

Приведенные лишь данные позволяют заключить, что смешением предварительно нагретых до температуры плавления н-ДНК водных цитратно-солевых растворов нДНК и цис-дихлородиаммин-платины (1!) в молярном соотношении Pt:P:NaCI:NàçÑót=6:4:30:3 с последующим термостатированием при этой температуре в течение времени, не-: обходимом для окончания реакции, позволяет

18 13089 получить соединение, характеризуемое формулой {(Р1С!(ИНз)(Н20)))п- ДНК с нижеописанными физико-химическими свойствами, Соединение представляет собой биологически активное высокомолекулярное вещество. которое способно эффективно тормозить рост опухоли и увеличивать продолжительность жизни организма при низкой токсичности и тем самым превосходит известные противоопухолевые препараты.

Заявляемое вещество, полиплатиллен, существует в растворе и в твердой фазе в виде смеси с хлоридом натрия и цитратом натрия (формула цитрата натрия йазС60тН6 5,5 НгО, сокращенно — NaoCyt) и как индивидуальное вещество. Смесь полиплатиллена с хлоридом натрия и цитратом натрия представляет собой порошок желтого цвета. Индивидуальное соединение— мелкокристаллический светлокоричневый

20 порошок. Оно устойчиво в растворах и в твердом виде, способно длительное время храниться в воздухе и в холодильнике без изменения свойств, Состав и строение соединения определены нэ основе химико-аналитических и физико-химических исследований твердых образцов и растворов.

Элементный анализ соединения в сме25 си. с солями натрия и в.индивидуальном состоянии подтверждает состав синтезированного целевого продукта ролиплатиллена. Для смеси {(РтС!(ИНз)(Н20)6 )}n-и-ДНК+

Следовательно, в среднем, на 2000 нуклеотидных. квартетов ДНК, состоящих иэ пар аденин-тимин, гуанин-цитоэы, приходится примерна 12000 комплексных частиц (РТС!(МНз)(Н20) 1+ 30п NaCI + ЗпйазС607Н6 5,5 Н20.

Найдено, %: Pt 20.41: С! 22,10; С 11,29; 35

N 5,07; Р 1,99; Н 2,06: Na 15,40.

Вычислено.%: Pt 20,23: CI 22.10; С

11,83; N5,08; P 2.14; Н 2,19; Na15,51.

Для индивидуального соединения полиплатиллена 40

Найдено,%: Pt 39,81; CI 7;40; С 15,62; и . 10,11; Р 4,38; Н 2,83, Вычислено,%: Pt 39.58; O 7 21; С 15.83;

N 9,95; Р 4,19; Н 2,67, Измеренная вискозиметрическим ме- 45 тадрм молекулярная масса полиплатиллена составляет 6,2 106 дальтонав. Рассчитанная на основе даиных о среднестатической молекулярной массе полипропиллена и массы ега среднестатической мономерной едини- 50 цы формулы (среднестатическая величина и-2100+100)

{(Р(С!(ИНз)(Н20))6(С39Н49032!ч15Р4)).

Полученный в индивидуальном виде полиплатиллен плохо растворяется в воде. его растворимость повышается в присутствии солей натрия (NaCI + МазСут). Так при 20 С растворимость препарата в дистиллированной воде составляет всего 0,0005%, а в растворе, содержащем 18 ммаль/л NaCI и 1,8 ммоль/л NaCyt — 0,005%. Значительно лучше, чем индивидуальное вещество, раство. ряется полиплэтиллен, полученный в смеси с NaCI + МазСут: растворимость такого образца в воде при 2 С равна 0,015%. Однако и эта величина на порядок ниже максимально достижимой концентрации соединени11, полученного в растворе, Пониженная растворимость твердых образцов говорит о необратимой десольватации полиплатиллена при его выделении иэ водного раствора, что обуславливает необходимость использовать суспензии твердых образцов при биологических Испытаниях.

Раствор чистого полиплатиллена практически не проводит электрический ток, чта свидетельствует об отсутствии электролити.ческой диссоциации при его растворении.

УФ-спектры образцов палиплатиллена, полученных в водном растворе и выделенных в твердом виде индивидуально или как смесь с NaCI+NagCyt, nocne растворения в ваде характеризуются максимальным поглощением kaKc. = 266,2 нм, тогда как для свободной н-ДНК + а<с. = 258,0 нм. Молекулярный коэффициент поглощения полиплатилленэ в расчете на моль нуклеотида, Е 266,2

-1

= 10000 л см моль, а у н-ДНК вЂ” Е258,0

7000 л,моль см . Смещение максимума поглощения в длинновалнавую область на

8,2 нм у полиплатиллена по сравнению с н-ДНК говорит о связывании макромолекулы с платйносодержащими группировками в результате образования ковалентных связей между ионом металла и данорными атомами азота оснований ДНК. Более высокая величина длинноволнового смещения УФмаксимума поглощения у полиплатиллена, Ю= 8,2 нм, по сравнению с аналогичнойвеличиной Al; — 7,7 нм для соединения PtÎHДНК, свидетельствует о том, чта, в среднем, ковалентные связи между платиной и основаниями ДНК в полиплатиллене прочнее, чем в соединении РсОН-ДНК; Сопровождающий эта связывание гиперхромный эф- фект составляет 30%, указывая на сильные конформационные изменения двойной спирали ДНК при взаимодействии с металлом., Изменения а ИК-спектрах полиплатиллена па сравнению со свободной ДНК свидетельствуют а том, что металл в нем связывается не только с азотистыми основа1813089 ниями ДНК, но и с атомами кислорода фос. фатных групп. При 1225 и 1060 см находятся полосы валентных колебаний фосфодиэфирных мостиков ДНК. В области

1500-1700 см наблюдаются полосы валентных колебаний C=C, C=N, С=О азотистых оснований ДНК, в области 3000-3700 см-1 полосы валентных колебаний групп С-Н, NH, Q-H, входящих в состав Д НК и молекул воды. Кроме того, при 340 см наблюдается валентное колебание PtCI, при 1340 см деформационное колебание координиро-. ванной. молекулы ИНз.

По данным термического анализа чистый полиплатиллен не теряет молекулу воды даже при нагревании до 200 С, что свидетельствует о ее прочном связывании. Смесь полиплатиллена с NaCI+ МазСус 5,5 НрО при прогревании до 200 С теряет кристаллизационную воду цитрата натрия, Найдено, что потеря воды для смеси полиплатиллен +

NaCI + йазСус 5,5 НгО составляет 5,10, а . вычисленное количество кристаллизационной воды равно 5,13 .

Спектры отражения твердого полиплатиллена имеют значения коэффициентов спектрального отражения, R,, в экстремальных точках, отличие от значений R для

ДДП. Для смеси полиплатиллен + NaCI + йазСус 5,5 Н20 8267,1 = 8,97; R333=26.28; в то время как для ДДП R242.2 = 9,7, Вг8о,7 = 13,6; йззз,з = 10,4; йз4о = 17,10; R41 4;8=14,80; 8514,4

- 50,57.

Спектры отражения подтверждают, что полиплатиллен представляет собой вещество, содержащее комплекс платины. состав координационной сферы которого изменен за счет замещения одной молекулы аммиака и одного аниона хлора молекулой воды и фрагментами ДНК. Данные элементного анализа, вискозиметрии, кондуктометрии, УФ- и ИК-спектров поглощения, а также спектров отражения свидетельствуют о том, что синтезированное соединение действительно высокомолекулярное вещество — поли{гексакис(хлороамминакваплатина(П)))-дезоксирибонуклеат формулы

{(РсС1(й Нз)(Н20))6)п-/с-ДН К °

8 табл. 2 представлены результаты испытаний токсичности и противоопухолевой активности заявляемого соединения и соедйнения PtOH-ДНК, выбранного в качестве . базового. Опыты проводили на мышах и крысах обоего пола разведения питомника

"Столбовая"..

Токсичность изучали на группах живоTHblx из половозрелых нелинейных мышей весом 30,0+2,0 r, прошедших карантин 20 дней (в каждой группе было по 10 животных), Препараты вводили внутрибрюшинно трехкратно с интервалом в два часа по 0,5 мл. Для инъекций PtOH-ДНК использовали

5 водные растворы, а для инъекций полиплатиллена — цитратно-солевые растворы (водный раствор, содержащий 15 ммоль/n NaCI и 1,5 ммоль/л МазСус) или водные суспензии его твердых образцов, представляющих со10 бой индивидуальное вещество или его смесь с NaCI+ ИазСус.

Суммарные дозы препаратов составляли 34,0, 68,0, 84,0, 102,0 и 136,0 мг/кг. Количество погибших животных в каждой группе

15 отмечали через каждые 24-48 часов расчет токсичной дозы, ЛД8о, проводили по методике. Летальную дозу, ЛД1оо, определяли экспериментально.

В результате проведенных опытов уста20 новлено, что для соединения PtOH-ДНК

ЛД5o = 66,0, ЛД8о = 100 мг/кг. Токсичность полиплатиллена зависит от формы его введения. Для препарата, полученного в растворе, ЛДьо = 102,0, à ЛД оо = 136,0 мг/кг;

25 для препарата, выделенного индивидуально или в смеси с NaCI + МазСус 5,5 НгО = 82,5, ЛД5о = 120,0 мг/кг, Из сравнения приведенных величин следует, что токсичность полиплатиллена значительно ниже. чем у

30 соединения РсОН-ДНК. Особенно снижена токсичность у полиплатиллена. полученного в растворе, Согласно гистологическим исследованиям гибель животных, получавших токси35 ческие дозы препаратов обусловлена энтеротоксичностью. Имеет место выраженная дисплазия клеток эпителия в кишечн.ике, нарушение его регенераторной функции, сокращение количества митозов.

40 Незначительные изменения отмечены в почках: небольшой отек стромы. зернистая дистрофия канальцев, мелкоочаговые кровоизлияния.

Противоопухолевую активность каждо45 го из препаратов оценивали из экспериментов, проведенных на пяти группах животных (в каждой группе по 10 животных), Белым беспородным крысам весом 150-200 г под кожу бедра трансплантировали 2 .10 — 2

50 10- клеток перевивного штамма лейкоза

Швеца. Животные I группы служили для контроля, 11 группа получала соединение PtOHДНК, Ш - полиплатиллен, полученный в, растворе,IV — полиплатиллен, полученный в

55 смеси с NaCI+Na3Ñót 5,5 Н О. Ч вЂ” полиплатиллен, полученный в индивидуальном виде. Препараты вводили внутрибрюшинно трехкратно на 4-6 сутки после транспланта1813089

10 ции опухоли, т.е. в период логарифмической фазы ее роста, второй и третий раз — с интервалами 24-48 ч соответственно. Суммарные дозы препаратов составляли 27,3 мг/кг в расчете на чистый препарат.

Противоопухолевую активность оценивали по следующим физиологическим показателям: — по объему опухоли, V (смз); — по степени угнетения роста опухоли (Т /С о ) — выживаемости животных на 10-е сутки (ВЖ, ); — продолжительности жизни животных (ПЖЖ, сутки).

Расчеты производили по следующим формулам:

/3 Rç sR = m +аг+пч

2 3 где m1, гпг, аз — три взаимно-перпендикулярных измерения опухолевого узла;

-Т С /кон /оп 00 /кон где V«H и /оо — объем опухоли в контрольной и опытной группах соответственно;

А 100 вж = где А — число животных на 10-е сутки после трансплантации опухоли, N — число животных в данной группе.

ПЖЖ определяли по числу суток, прошедших от момента перевивки опухоли до гибели последнего животного в данной группе, Данные о биологической активности полиплатиллена. приведенные в таблице, подтверждены актом испытаний противоопухолевой активности и токсичности, Анализ данных, представленных в табл.

2 показывает, что препарат PtOH-ДНК по сравнению с контролем тормозит рост опухоли на 94 . Его применение позволяет получить 100 -ную выживаемость животных. B то же время продолжительность жизни животных при его применении уменьшается на 3-е суток по сравнению с контролем, т,е. с нелеченными животными.

Противоопухолевая активность полиплатиллена не зависит от формы ведения препарата. Во всех случаях он тормозит рост апухоли на 95, обеспечивает 100 -ную выживаемость животных. В то же время продолжительность их жизни увеличивается по сравнению с контролем на 7-8 суток, а по сравнению с PtOH-ДНК вЂ” вдвое, т.е. на

10+1 суток.

Сравнительный анализ данных, приведенных в таблице, позволяет заключить, что заявляемое соединение, полиплатиллен, менее токсично, чем препарат POOH-ДНК, особенно если его применять в виде препарата, полученного в растворе. По уровню противоопухолевой активности и выживае5 мости не уступает соединению РсОН-ДНК, а по такому показателю, как продолжительность жизни, существенно превосходи его, так как увеличивает продолжительность жизни в два раза, 10 Таким образом, создание высокомолекулярного соединения платины (II) с ДНК, полиплатиллена, привело к получению вещества более эффективного, чем известные противоопухолевые препараты, так как по

15 показателям физиологической активности, характеризующим его противоопухолевый эффект, предлагаемый препарат превосходит или сопоставим с известными веществами и выгодно отличаается от них из-за

20 уменьшения токсичности.

Выявленный комплекс свойств: высокие показатели степени торможения роста опухоли, выживаемости животных и продолжительности их жизни при одновременном

25 снижении токсичности делает предложенное соединение перспективным для созда-. ния препаратов, эффективных для лечения злокачественных опухолей, Дополнительным преимуществом пред30 лагаемого противоопухолевого вещества является обеспечение им возможности расширить ряд высокомолекулярных платиносодержащих протиеоопухолевых препаратов и тем самым обеспечить пре35 одоление эффекта привыкания организма к платиновым противоопухолевым средствам.

Способ обеспечивает также получение вещества в растворе и в твердой фазе как

40 индивидуального соединения в чистом виде и как смеси его с хлоридом и цитратом натрия.

Формула изобретения

Способ получения комплексного соеди45 нения платины И) с н-ДНК, обладающего противоопухолевой активностью, взаимодействием цис-дихлордиаминплатины с . дезоксирибонуклеиновой кислотой, выделенной из селезенки крупного рога50 того скота, марки А при нагревании до

78,0+0,5оС в водной среде, о т л и чающ и йс я тем, что, с целью получения соединения с более высокой активностью и более низкой токсичностью, процесс проводят в при55 сутствии хлористого натрия и цитрата натрия при молярном соотношении платины, фосфора, н-ДНК, хлористого натрия и цитрата натрия равном 6:4:30;3 в течение

15-20 мин.

1813089

Таблица 1

Характеристика способа

Опыт

Характеристика пол ченного и о кта

Малярное соотношение

РеР:NaCI:

NaaCyt

Время проведения реакции,мин

Температура проведения реакции,. оС

Е 266.2 л, мОль см

-ДНК

ДДП

4,0

6,0

2,0

3,0

0,67

1,0

0,6

0,4 0,04

0,004

0,06

0,006

5,0

4,0

3,0

6,0

6,0

4,0

4,0

4,0

4,0

6,0

6,0

6,0

4,0

6,0

266,2

266,2

266,2

266,2

266,2

266,2

266,2

266.2

266,3

266,2

6,0

4.0

6,0

4,0

6,0

4,0

6,0

4,0

4,0

6;О

4,0

6,0

6,0

4,0

4,0

6,0

6,0

2

4

6

9

1,1

12

13

16

17

18

19

21

Концентрация исходных растворов, ммоль/л

6:4:30:3

6:4 .ЗО:3

6:4:30:3

6:4:30:3

6:4:30:3

6:4:30:3

5:4:30:3

6:3:ЗО:3

6:4;29:3

3:4:31:3

6:4:30:2

6:4:30:4

6:4:30:3

6:4:30:3

6:4:30:3

6. 4. 30:3

6:4:30:3

6:4:30:3

6:4:30:3

6:4:30:3

6:4:30:3

6:4:ЗО:3

78

78

78

78

78

78

78

78

78

78

78

78

78

78

78

78

74

76

77

79

266.2

266,3

266,2

266,3

266,2

266,2

264,7

268,3

266,6

266,0

266,5

266,6

10600

1813089

Таблица 2

По !! группе По !!! группе животных(вве- животных

По группе животных (контроль) Показатель дено

РтО Н-ДН К) 9,1х3=27,3

9,1х3=-27,3

9,1х3=27,3

9,1х3=27,3

82,5

102,0

66,0

82,5

136,0

120,0

120,0

100,0

Объем опухоли, см

0,70+0,03

0,73+0,03

0,75+0,03

1,00+0,05

15,00+0.75

Степень торможения рос95

95

94 та опухоли, Т/С %

100

100

100

100

100

2 1,0+ 1,0

21,0+1,0

21,0+1,0

11,0+1,0

14,5+0,5

Составитель О.Смирнова

Техред M.Ìîðãåíòàë КоРРектоР О. Густи

Редактор

Заказ 1589 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб.. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород, ул.Гагарина, 101

Введенная доза,мг/кг

Токсическая доза,ЛД о, мгlкг

Летальная доза, ЛД1со, мг/кг

Выживаемость, Продолжительность жизни, с ки (введен полиплатиллен,полученный в аство е

По IV группе жи вотн ы х (введен полиплатиллен полученный в смеси) По Ч группе животных (введен чистый полиплатиллен)