Способ получения инъектируемой контрастной среды
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК (5i)5 А 61 К 49/04
ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ
ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИ
К ПАТЕНТУ
0 0 3
0
В ,О
Cd (21)4742976/14 (86) РСТ/GB 88/00604 (22.07.88) (22)23.01.90 (46) 23.07.93. Бюл. М 27 (31) 8717625 (32) 24.07.87 (33) GB (71) Нюкомед АС (NO) (72) Йо Клавенесс и Пер Странде (NO) (56) G В, М 2157283, кл. С 07 С 103/46, 1985, (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНЪЕКТИРУЕМОЙ КОНТРАСТНОЙ СРЕДЫ
Изобретение относится к способам получения контрастных агентов для визуализации медицинских рентгеновских и ультразвуковых изображений.
Визуализацию патологических изменений в печени и селезенке улучшают, применяя контрастныеагенты, которые накапливаются в этих органах. Однако каждый из известных контрастных агентов имеет какие-либо недостатки.
Так как ретикулоэндотелиальная система печени и селезенки улавливает частицы в результате фагозитоза, контрастные агенты в форме частиц особенно хорошо приспособлены для визуализации этих органов.
Известны эмульсии иодированных масел, в частности иодированные сложные этиловые эфиры масла маковых зерен. Однако эти материалы неприемлемо токсичны.
С аналогичной целью используют липосомы, содержащие растворимые в воде иодированные контрастные агенты. Одна„„5U ÄÄ 1829940 АЗ (57) Использование: в диагностике. Цель; повышение стабильности среды. Сущность изобретения: получают частицы путем осаждения из раствора в смешивающемся с водой растворителе смешением с водой или механическим размолом соединения общей формулы R 2
R1-CO 0 СН-O-Cop
3 > в твердом виде с последующим суспендированием частиц в жидкости для инъекций.
2 з,п.ф-лы. ко, так как ограниченное количество иода можно ввести в каждую липосому, необходимо применять относительно большие количества липидов для того, чтобы добиться адекватногоувеличения контраста. Это приводит к эмболиям легочных капилляров, Кроме того, как установлено, эти липосомы относительно нестабильны при хранении, Субмикронные частицы двуокиси тория использовались для визуализации печени, и было установлено эффективное увеличение контрастности в клиническом испытании, но их использование прекращено из-за слишком продолжительного удержания частиц в печени. Это, вместе с присущей торию радиоактивностью, приводило к серьезным неблагоприятным побочным эффектам, таким, как неоплазма и фиброз.
Предложено использовать частицы, содержащие этиловый сложный эфир растворимого в воде рентгеновского контрастного агента, иодинамида. Однако этиловые слож1829940 ные эфиры не являются достаточно метаболически лабильными, поэтому следует ожидать, что они будут сохраняться в печени в течение продолжительного промежутка времени, Действительно, сложный эфир и иодированные этиловый сложный эфир масла маковых зерен дают увеличение липидных вакуолей в гепатоцитах при внутривенном применении. Такие морфологические изменения указывают на неблагоприятное воздействие на гепатоциты.
Особенно полезные контрастные агенты для визуализации печени и селезенки содержат липофильные, содержащие иод, сложные эф «ры в виде частиц, которые являются метадолически лабильными с образованием растворимых в воде материалов, по существу нетоксичных и не удерживаемых в органах, подлежащих визуализации.
В соответствии с настоящим изобретением предлагается способ получения среды с метаболически лабильными, нерастворимыми в воде, иодированными сложными эфирами общей формулы (I);
1
R1- СО 0- CH-О-СОЯ, где R1 — замещенная или незамещенная С1-20алифатическая, С7 zo-аралифатическая или
Св- о-арильная группа, или С«-zo-гетероциклическая группа, содержащая один или несколько гетероатомов, выбранных из О, S иМ;
Rz — водороц или замещенная или незамещенная алифатическая группа, арильная или аралифатическая группа;
Вз — R1, одинаковые или разные или Rz и йз вместе представляют замещенную или незамещенную С1-4-алкиленовую группу, молекула содержит по крайней мере один атом иода и при метаболизме переходит в продукты, которые растворимы в жидкости организма.
Там, где группа Вз не соединена с Rz, интаболическими продуктами будут
К1СООН, ВзСООН и ВгСНО. Если R3 и Rz вместе образуют алкиленовую группу, продуктами будут В1СООН и НООС(йз Rz)CHO.
Rz в общем случае является водородом и, необязательно, замещенной С1-в-алифатической группой, CI>-«o-арильной группой или С7-zo-аралифатической группой.
Алифатические группы могут быть линейными или разветвленными, насыщенными или ненасыщенными, и они включают, например, алкильные и алкенильные группы, например метильные, этильные, изопропильные, бутильные или аллильные группы. Аралифатические группы включают
55 монокарбоциклические арилалкильные группы, например бензильные группы.
Арильные группы включают моно- или бициклические арильные группы, например фенильные, толильные или нафтильные группы. Гетероциклические группы включают 5- или 6-элементные гетероциклические группы, в предпочтительном варианте содержащие один гетероатом, например фурильные, тиенильные или пиридильные группы.
К возможным заместителям в указанных углеводородных группах R1, Rz и Кз относятся гидро ксил ьн ые, этери фици рованные (простым эфиром) гидроксильные, этерифицированные (сложным эфиром) гидроксильные, этерифицированные (простым эфиром) тиоловые, N-алкиламино, С«-6-ациламино, N-C1 6-ацил-М-С1 б-алкиламино, карбамоиловые и N-C1-I>-алкилкарбамоиловые группы и атомы галогена. Необходимо отметить, что ароматические кольца, такие как фенил, могут нести С«-I>-алкильные группы, как в толиловой группе. Заместители могут содержаться в комбинации; таким образом, например, N-ациловые и N-алкильные группы могут нести окси-или этерифицированные (и ростым эфиром), или этерифицированные (сложным эфиром) гидроксильные группы, К этерифицированным (и ростым эфиром, гидроксильным группам относятся С1-5-алкоксигруппы, такие как метоксигруппы. К этерифицированным (сложным эфиром) гидроксильным группам относятся С«-I>-ацилоксигруппы, такие как ацетоксигруппы.
К атомам галогена относятся фтор, хлор, бром и иод. Более чем один атом галогена может содержаться в любой KQHKpeTHQI группе, как в трифторметильной группе. B особенно предпочтительном варианте молекула как целое несет несколько атомо иода, по крайней мере три.
В особенно предпочтительном варианте по крайней мере одна из групп R1 и R: является иодированной фенильной группой, в предпочтительном варианте трииодфенильной группой. Такую группу можнс выбрать из самых разнообразных групп, со. держащихся в производимой промышленностью карбоновой кислоте или амидных рентгеновских контрастных агентах. К таким группам относятся 2,4,6трииодфенильные группы, содержащие в
3- и/или 5-позициях группы, выбранные из карбамоиловой, N-алкилкарбамоиловой или
N-оксиалкилкарбамоиловой, ациламино, Nалкилациламино или ациламинометильной групп. В таких группировках ациловые группы в общем случае будут ацетильными груп1829940 пами, а N-алкилациламиногруппы будут в общем случае N-метилацетаминогруппами.
N-оксиалкилкарбамоиловые группы будут в общем случае содержать 1,3- или 2,3-диоксипропильные группы, как оксиалкиловая составляющая.
Важно, что контрастный агент, полученный согласно настоящему изобретению, является существенно нерастворимым в воде и, таким образом, при применении в форме частиц будет "захватываться" печенью или селезенкой. Могут также присутствовать относительно гидрофильные группы, такие как гидроксил, при условии, что осадок молекулы является достаточно липофильным, чтобы гарантировать минимальную общую растворимость в воде. Однако в результате метаболизма под воздействием ферментов (и это весьма важно) метаболические продукты обладают достаточной растворимостью в воде при физиологических рН, чтобы они могли быть выведены из обрабатываемых органов. Они также должны быть сами приемлемыми с физиологической точки зрения.
Установлено, что соединения в форме частиц при внутривенном применении накапливаются ретикулоэндотелиальной системой печени и селезенки, полученная в результате концентрация частиц значительно помогает визуализации этих органов. С другой стороны, фагоцитозные клетки печени (клетки Купффера) содержат липосомы, которые обладают широким спектром гидролических ферментов, включающих несколько эстераз. Таким образом, после того, как частицы участвовали в фагоцитозе, они поступают в липосомы и превращаются в растворимые в воде продукты, которые затем удаляются. Относительно быстрое превращение соединений в растворимые в воде продукты значительно снижает риск токсичной реакции.
По сравнению с липосомами частицы твердого контрастного агента обладают гораздо более высоким содержанием иода, Таким образом, чтобы добиться желаемого уровня контрастности, что обеспечивается конкретным количеством иода, гораздо меньшее количество материала необходимо испольэовать, при этом снижается риск образования закупорок капилляров легких.
Кроме того, материал в форме частиц, который является в общем случае кристаллическим, будет гораздо более стабильным при хранении, чем предложенные ранее липосомы.
Полученный агент, благодаря присутствию в них иода, обеспечивает в высшей степени эффективное усиление рентгено5
55 вского снимка. Благодаря присутствию относительно тяжелых атомов иода, эти частицы отражают ультразвук и могут быть также использованы для усиления ультразвуковых изображений, Средний размер частиц контрастного агента будет изменяться в общем случае в области 0,002 — 7 мкм в предпочтительном варианте 0,01 — 3 мкм.
Инъектируемой жидкостью, в которой суспендированы частицы, может быть любая стерильная, приемлемая с физиологической точки зрения, жидкость, такая, как физиологической точки зрения, жидкость, такая, как физиологический соляной раствор, который может содержать приемлемый с физиологической точки зрения стабилизирующий агент, такой, как поливинилпирролидон, например, имеющий молекулярную массу примерно 30 000 дальтон, или полисорбат, например полисорбат 80.
Контрастную среду можно использовать для усиления рентгеновских и ультразвуковых изображений печени и/или селезенки человека или другого животного, при этом их можно применять внутрисосудистым, в общем случае — внутривенным, способом перед получением изображения.
Соединения, используемые для получения среды, могут быть получены любым известным способом, В общем случае эти соединения могут быть получены при помощи этерификации (сложным эфиром) кислоты формулы RiCOOH или ее функционального производного с соединением формулы X — СНК О СОКз, в которой X является гидроксильной группой или заменяемой группой, такой, как атом галогена или метилсульфонил или толилсульфонилгруппой.
Если X представляет заменяемую группу, функциональной производной кислоты формулы R>COOH будет в общем случае соль, такая, как соль калия. Такую реакцию в общем случае осуществляют в растворе, например в полярном растворителе, таком, как диметилформамид. Этерификацию можно также осуществить в результате взаимодействия соединения XCHRz О СОКз, в котором X является ОН, с кислотой R>COOH в присутствии связывающего агента, такого, как диимид, например дициклогексилкарбоимид, или с галоидангидридом R Hal является атомом галогена, таким, как хлор, Если две группы Rq и Вз должны быть одинаковыми, этерификацию можно осуществить при помощи взаимодействия соединения формулы RzCHXz, в которой Х является заменяемой группой, с функцио1829940 нальным производным кислоты RICOOH, таким, как соль. Частицеподобная форма контрастного агента, являющегося предметом настоящего изобретения, может быть в предпочтительном варианте получена при помощи осаждения из раствора в смешивающемся с водой растворителе, таком, как этанол, при помощи смешения с водой, которая может в общем случае содержать стабилизирующий агент, такой, как поливинилпирролидон, при энергичном перемешивании, например, с использованием ультразвука. На этом пути можно получить частицы со средним диаме" ром порядка 1,0 мкм. Механическое измельчение, например, до соответствующего размера частиц можно использовать. Далее, частицы могут быть суспендированы в жидкости для инъекции, указанные выше. Следующие примеры приведены исключительно с целью иллюстрации. Общая процедура для синтеза альфахлоралкиловых сложных эфиров из альфа(арилтио)ал киловых сложных эфиров. Сульфонил хлорид в сухом дихлорметане (2 М) добавляли по каплям при температуре 0 С в раствор альФа-(арилтио)алкилового сложного эфира (1,0 эквивалент) в сухом дихлорметане (0,5 М). Смесь перемешивали при окружающей температуре перед добавлением по каплям при 0 С в сухом дихлорметане (2М). Перемешивание продолжали в течение 1 ч при окружающей температуре перед тем, как растворитель удаляли и остаток подвергали дистилляции под вакуумом, Промежуточное соединение 11-(фенилтио)этил пи валат. 1-Хлорэтил фенил сульфид (11,0 г, 61,9 ммоль) в сухом ДМ Ф (110 мл) при 0 C добавляли в раствор пиваловой кислоты (5,75 г, 56,3 ммоль) и трет-бутилата калия (6,32 г, 56,3 ммоль) в сухом ДМФ (110 мл). Смесь перемешивали при окружающей температуре в течение 24 ч перед тем, как добавить воду, и продукт экстрагировали диэтиловым простым эфиром, Эфирный раствор промывали 1 М раствором гидрата окиси натрия и четыре раза соляным раствором перед тем, как его сушили (сульфат магния) и выпаривали. После дистилляции получали 8,47 г (63 ), температура точки кипения 80 С(0,06 мм рт.ст.) 1Н вЂ” ЯMP (ДМСΠ— d6); дельта = 1,10 (синглет, (СНз)з); 1,46 (дублет, J = 7 Гц, СНз); 6,20 (квартет, J = 7 Гц, СН); 7,3 — 7,5 долей на миллион (мультиплет, 5Н). Промежуточное соединение 2 1-хлорэтилпивалат, Соединение из заголовка примера получали из промежуточного соединения 1 при 55 помощи общей процедуры, подробно описанной выше. Количество SOzCI2 (23,1 ммоль, 1,1 эквивалента). Время реакции 2 ч. Выход 49 . Температура точки кипения 40 С (10 мм рт.ст.). 1Н вЂ” ЯМР (ДМСΠ— d6): дельта = 1,16 (синглет, (СНз)з); 1,74 (дублет, J = 6 Гц, СНз); 6,55 долей на миллион (квартет, J = 6 Гц, СН). Промежуточное соединение 3 (фенилтио)метил фенилацетат. Карбонат цезия (12,9 г, 39,6 ммоль) добавляли в раствор фенилуксусной кислоты (5,40 r, 39,6 ммоль) в сухом ДМФ (60 мл). Смесь перемешивали при 60 С течение 15 мин и охлаждали до 0 С перед тем, как пс каплям добавить фенилсульфид хлорметил; (5,76 г, 36 ммоль). Перемешивание продолжали при 0 С в течение 30 мин, затем при окружающей температуре в течение 3,5 ч и, наконец, при 70 С в течение 30 мин, перед тем, как добавить воду, и продукт экстрагировали в диэтиловом простом эфире. Эфирный раствор промывали 1 М раствором гидрата окиси натрия и 4 раза соляным раствором, сушили (сульфат магния) и выпаривали. Сырой продукт использовали для получения промежуточного соединения 4 без дополнительной очистки, Выход 8,10 г (87 ). 1Н-ЯМР (СОС!з):дельта = 3,65 (синглет, СНАЯ); 5,39 (син глет, СН ); 7,2 — 7,4 долеР на миллион (мультиплет, 5Н). Промежуточное соединение 4 хло рметил фен ила цетат. Соединение из заголовка примера получали из промежуточного соединения 3 при помощи общей процедуры, описанной выше. Количество: SOzClz (19,0 ммоль, 1,3 эквивалента). Время реакции 2,5 ч. Выход (общий для двух стадий): 1,46 г (507;). Температура. точки кипения 68 — 72 С (0,001 мм рт.ст.) IH — ЯМР (СОС!з): дельта = 3,69 (синглет, CH2); 5.68 (синглет, CH2CI); 7,2 — 7,4 долей на миллион (мультиплет, 5Н). Промежуточное соединение 5 (фен илтио)метил-2-тиофен карбоксилат. Карбонат цезия (8,14 г, 25,0 ммоль) добавляли в раствор фенилуксусной кислоты (3,20 г, 25,0 ммоль) в сухом ДМФ (40 мл), Смесь перемешивали при 60 С в течение 25 мин и охлаждали до 0 С перед тем, как по каплям добавляли метил фенилсульфид (3,60 г, 22,7 ммоль), Перемешивание продолжали при 0 С в течение 30 мин, затем при окружающей температуре в течение 2 ч, и наконец, при 70 С в течение 15 мин перед тем, как добавляли воду, и продукт экстрагировали в диэтиловом простом эфире, Эфирный раствор промывали 1 M раствором гидрата окиси натрия и 4 раза соляным 1829940 10 раствором, сушили (сульфат магния) и выпаривали. Сырой продукт использовали при получении промежуточного соединения 6 без дополнительной очистки. Выход: 4,76 r (80 ). 1Н вЂ” ЯМР (СОС!з): дельта = 5,59 (синглет, СН2); 7,0 — 7,9 долей на миллион (мультиплет, 8Н). Промежуточное соединение 6 (хлорметил 2-тиофенкарбоксилат. Соединение из заголовка примера получали из промежуточного соединения 5 с использованием общей процедуры, описанной подробно выше, Количество: SOzClz (18,6 ммоль, 1,2 эквивалента). Время реакции 1 ч. Выход 83 . Температура точки кипения 67-69 С (0,12мбар). 1Н вЂ” ЯМР (СОС!з): дельта = 5,90 (синглет, СНг); 7,0 — 8,0 долей на миллион (мультиплет, ЗН). Промежуточное соединение 7 (фенилтио)метил 4-метокси-3-метилбензоат. Карбонат цезия (13,00 г 40,0 ммоль) добавляли в раствор 4-метокси-3-метил бензойной кислоты (6,65 г, 40,0 ммоль) в сухом ДМФ (50 мл) при окружающей температуре. Смесь перемешивали при 65 С в течение 20 мин и охлаждали до 0 С, перед тем как по каплям добавляли хлорметил фенилсульфид (5,76 г, 36 ммоль) в сухом ДМФ (10 мл), Перемешивание продолжали при 0 С в течение 30 мин, затем при окружающей температуре в течение 2 ч и, наконец, при 70 С в течение 1 ч перед тем, как добавляли воду и продукт экстрагировали в диэтиловом простом эфире. Эфирный раствор промывали 1 М раствором гидрата окиси натрия и 4 раза соля н ым раствором, сушили (сульфат магния) и выпаривали. Сырой продукт использовали для получения промежуточного соединения 8 без дополнительной очистки. Выход 9,60 г (83 ), 1H-ЯМР (СЭС!з): дельта = 2,25 (синглет, СНз); 3,85 (синглет, ОСНз); 5,63 (синглет, СНг); 7,2 — 7,6 долей на миллион (мультиплет, 8Н). Промежуточное соединение 8 хлорметил 4-метокси-З-метилбензоат. Соединение из заголовка примера получали из промежуточного соединения 7 с использованием общей процедуры, описанной подробно выше, Количество; $0гС!г (30,0 ммоль, 1,2 эквивалента). Время реакции 1,5 ч. Выход 90 . Температура точки кипения 100— 102 С (10 мм рт.ст,). 1 Н вЂ” ЯМ Р (CD Ñ !з); дельта = 2,26 (синглет, СНз); 3,87 (синглет, ОСНз); 5,94 (синглет, CHz); 7,1 — 7,6 долей на миллион (мультиплет, ЗН). Промежуточное соединение 9 1-хлор-2-фенилэтил ацетат. Получали в соответствии с процедурой, описанной Нейеншвандером, Маркусом и др., Helv. Chim. Acta, т, 61 (1978), с. 2047. Неочищенный продукт использовали в примере 12 без дополнительной очистки. Выход 81, 1Н вЂ” ЯМР (СОС!з): дельта = 1,98 (синглет, СНз); 3,25 (мультиплет, CH2); 6,52 (мультиплет, СН); 7,1 — 7,3 долей на миллион (мультиплет, 5Н). Пример 1. Пивалоилоксиметил 5-(Nацетиламино) -3-(N-ацетил-N-метиламино)2,4,6-трииодбензолкарбоксилат. Хлорметилпивалат (12,0 мл, 82,6 ммоль) в сухом ДМФ (130 мл) по каплям добавляли в течение 20 мин при 50 С в раствор 5-(Nа цетиламино)-3-(й-ацетил-N-метил амина)2,4,6-трииодбензолкарбоксилата калия (50,9 г, 75,0 ммоль) и иодида натрия (600 мг, 4,0 ммоль) в сухом диметилформамиде (ДМФ) (750 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 4 ч, а растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлороформе (400 мл), промывали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната натрия. После сушки сульфатом магния растворительудаляли при пониженном давлении, а остаток подвергали рекристаллизации из ацетона, чтобы получить соединение из заголовка примера: 26,6 г (53 ); температура точки плавления 232 — 234 С, 1Н-ЯМР (СОС!з): дельта = 1,26 (синглет, С(СНз)); 1,82 (синглет, (СНз)СОСНз); 2,22 (синглет, NCOCH3); 3,08 (синглет, МСНз); 6,02 (синглет, СНг); 8,15 долей на миллион (синглет, NH). Пример 2, Ди-(5-ацетиламино)-3-(Nацетил-N-метиламино) -2,4,6-трииодфенилкарбонилокси/метан. Дииодметан (300 мкл, 3,8 ммоль) по каплям добавляли в течение 5 мин при 6QOC в раствор 5-(N-а цетиламино-3- (N-ацетил-Nметиламино)-2,4,6-трииодбензокарбоксилата калия (5,0 г, 7,5 ммоль) в сухом ДМФ (75 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 4 дней и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растирали с теплым диоксаном и фильтровали, чтобы получить соединение из заголовка примера: выход 3,35 г (67 ). 1НЯМР (ДМСО-б6); дельта = 1,70 (синглет, N (СНз)СОСНз); 2,10 (синглет, МСОСНз): 3,00 (синглет, ИСНз); 6,28 (синглет, CHz); 6,28 (синглет, CHz); 10.13 долей на миллион (синглет, NH). Пример 3. 1-(Пивалоилилокси)этил 5-(N-ацетиламино)-3- (N-ацетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензол карбоксилат. 1-Хлорэтил пивалат (0,40 г, 3,3 ммоль) (промежуточное соединение 2) в сухом ДМФ (6 мл) по каплям добавляли при 50 С 1829940 12 в раствор 5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-Nметиламино)- 2,4,6-трииодбензолкарбоксилата калия (2,00 г, 3,0 ммоль) и иодида натрия (24 мг, 0,16 ммоль) в сухом ДМФ (30 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 20 ч, а растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлороформе (40 мл) и промы вали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната натрия. После сушки сульфатом магния растворитель удаляли и ри пониженном давлении, чтобы получить соединение из заголовка примера: выход 1,85 г (81 ). Чистота (при помощи ВЭЖХ) 97р,, После рекристаллизации из ацетона получали чистоту 98ф, (ВЭЖХ). 1НЯМР (DMCO-d6): дельта = 1,19 (синглет, (СНз)з); 1,59 (дублет, J = 6 Гц, СНз); 1,66 (синглет, М(СНз)СОСНз); 2,04 (синглет, МСОСНз); 2,96 (синглет, ИСНз); 7,06 долей на миллион (мультиплет, СН). Пример 4. 1-(Ацетилокси)атил 5-(Nацетиламино)-3- (N-ацетил-N-метиламино)2,4,6-трииодбензол карбоксилат. 1, Хлорэтилацетат (Нейеншвандер, Маркус и др., Helv. Chim. Act, т. 61 (1978), с. 2047) (4,38 r, 35,7 ммоль) в сухом ДМФ (50 мл) по каплям добавляли при 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоксилата калия (21,64 г, 32,5 ммоль) и иодида натрия (0,26 г, 1,75 ммоль) в сухом ДМФ (320 мл). Остаток удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 20 ч и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлороформе (300 мл) и промывали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната натрия. После суш ки сул ьфатом магния раствор обрабатывали активированным углеродом, а растворитель удаляли при пониженном давлении, чтобы получить соединение из заголовка примера: выход 20,61 r (89 ). Чистота (при помощи ВЭЖХ) 92 . После препаративной ВЭЖХ получали чистоту 99 . 1Н-ЯМР (ДМСО-d6): дельта = 1,60 (дублет, J = 6 Гц, СНз); 1,66 (синглет, М(СНз)СОСНз); 2,04 (синглет, СОСНз); 2,11 (синглет, ОСОСНз); 2,96 (синглет, СНз); 7,08 (квартет, J = 6 Гц, СН); 10,11 долей на миллион (синглет, NH). Пример 5. Пивалоилоксиметил 5-(Nацетиламино)-3- (метиламинокарбонил)2,4,6-трииодбензолкарбоксилат. Хлорметилпивалат (7,62 г, 50,6 ммоль) в сухом ДМФ (84 мл) по каплям добавляли при 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3- (метил ам и нока рбон ил)-2,4,6-трииодбе н зол ка рбоксилата калия (30,00 г, 46,0 ммоль) и иодида натрия (0,37 r, 2,5 ммоль) в сухом ДМФ (450 мл). Осадок удаляли фильтрацией после 55 перемешивания в течение 4 ч, а растворитель удаляли при пониженном давлении, Остаток растирали и промывали несколько раз в воде и, наконец, подвергали рекристаллизации из изопропанола. Выход 32,30 r (96 ). Чистота (при помощи ВЭЖХ) 98 . 1Н вЂ” ЯМР (ДМСО-d6): дельта = 1,20 (синглет, (СНз)з); 2,02 (синглет, СНзСО); 2,73 долей на миллион (дублет, J = 5 Гц, ИСНз); 5,95 (синглет, СН ); 8,4 — 8,7(сультиплет, МНСНз); 10,00 (синглет, NH). Пример 6. (2-Тиенилкарбонилокси)метил 5-(N-ацетиламино)-3- (N-ацетил-Nметиламино)-2,4,6-трииодбензол карбокси лат. Хлорметил 2-тиофенкарбоксилат (0.63 г, 3,6 ммоль) (промежуточное соединение 6) в сухом ДМФ (70 мл) по каплям добавляли и ри 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-N-метиламино) -2,4,6-трииодбензолкарбоксилата цезия (3,00 r, 3,9 ммоль) и иодида натрия (28 мг, 0,19 ммоль) в сухом ДМФ (45 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 4 ч и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлороформе (50 мл) и промывали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната натрия. После сушки сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении, чтобы пол. учить соединение из заголовка примера; выход 2,46 г (89 ). Чистота (при помощи ВЭЖХ) 97 . 1Н вЂ” ЯМР (ДМСΠ— d6): дельта = 1,66 (синглет, й(СНз)СОСНз); 2,04 (синглет, МСОСНз); 2,96 (синглет, йСНз); 6,18 (синглет, CHz); 7,2 — 8,1 (мультиплет, ЗН); 10,11 долей на миллион (синглет, NH). Пример 7. Фенилацетилоксиметиг 5-(N-ацетиламино) -3-(N-ацетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоксилат, Хлорметил фенилацетат (1,02 г, 5, ммоль) (промежуточное соединение 4) в сухом ДМФ (50 мл) по каплям добавляли при 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-N-метиламино) -2,4,6-трииодбензолкарбоксилата цезия (3,80 г, 5.0 ммоль) и иодида натрия (37 мг, 0,25 ммоль) в сухом ДМФ (70 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 4 ч, а растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлороформе (50 мл) и промывали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната натрия. После сушки сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении, чтобы получить соединение из заголовка примера: выход 2,50 r (64 ). Чистота (при помощи ВЭЖХ) 97 . 1Н вЂ” ЯМР (СОС!з): дельта = 1,78 (синглет, М(СНз)СОСНз); 2,21 (синглет, МСОСНз); 3,05 (синглет, МСН ); 3,72 (синг13 1829940 14 лет, NCH2); 3,72 (синглет, СНг); 6,01 (синглет, ИОСНг); 7,30 (синглет, САН@ 7,79 долей на миллион (синглет, NH). Пример 8. 4-Метокси-3-метилбензоилоксиметил 5-(N-эцетиламино)-З М-ацетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоксилат. Хлорметил 4-метокси-3-метилбензоат (промежуточное соединение 8) (2,38 г, 11,0 ммоль) в сухом ДМФ (100 мл) добавляли по каплям при 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3- (N-ацетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоксилата калия (6,70 r, 10,0 ммоль) и иодида натрия (75 мг, 0,50 ммоль) в сухом ДМФ (140 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 4,5 ч и 16 ч при комнатной температуре, а растворитель удаляли при пониженном давлении, Остаток растворяли в хлороформе (100 мл) и промывали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната натрия. После сушки сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении, чтобы получить соединение из заголовка примера, Выход 7,00 г (87,). Чистота (при помощи ВЭЖХ) 93 д, 1H — ЯМР (СОС!з): дельта = 1,77 (синглет, М(СНз)СОСНз); 2,20 (синглет, !чСОСНз); 2,26 (синглет, СН)з; 3,05 (синглет, МСНз); 3,87 (синглет, ОСНз); 6,25 (синглет, ОСНОВ); 7,1 — 7,7 (мультиплет, ЗН). Пример 9. Пиловалоилоксиметил 3-(альфа)-3-(N-ацетил -N-метиламино)-5-(метиламинокарбонил)-2,4,6-трииодбензоила м и н о) -(N-а ц ет ил а м и н о)-5-(N-(2-о кс и атил)аминокарбонил) -2,4,5-трииодбензолкарбоксилат. Хлорметилпивалат (0,83 г, 5,5 ммоль) в сухом ДМФ (50 мл) по каплям добавляли при 50 С в раствор 3-(альфа-3-(N-ацетил-N- метиламино)-5-(метиламинокарбонил)-2,4,6трииодбензоиламино)(й-ацетиламино) (-5/N-(2-оксиэтил)-аминокарбонил)- 2,4,6-трииодбензолкарбоксилата цезия (7,00 г, 5,0 ммоль) и иодида натрия (37 мг, 0,25 ммоль) в сухом ДМФ (70 мл). Растворитель удаляли и ри пониженном давлении после перемешивания в течение 7 ч. Остаток растирали, промывали и фильтровали несколько раз, сначала СНС!з и, наконец, Н О. Выход 5,70 r (82 ). Чистота (при помощи ВЭЖХ) 95 . А нализ: СзОН31!6М506 Рассчитано: С 26,05, Н 2,26, 55,06 . Найдено: С 25,98, 54,90 . Как 1Н-, так и 13С-ЯМР аналогичны как для соединения из заголовка примера, так и для исходного материала (как свободной карбоновой кислоты), за исключением самой карбоновой кислоты, которая этерифицируется в соединение из заголовка примера. 1Н-ЯМР (ДМСО-dá) пивалоилоксиметильной группы соединения из заголовка примера имеет вид: дельта = 1,18 (синглет, (СНз)з); 5,93 долей на миллион (синглет, СН2). Химический сдвиг СНг-группы находится в соответствии с примером 1 (дельта =5,98 долей на миллион в ДМСО-d6), а не с хлорметилпивалатом, который является исходным материалом (дельта = 5,84 долей на миллион). Пример 10. Ацетилоксиметил 5-(Nацетиламино)-3-(N-ацетил- N-метиламино)2,4,6-трииодбензолкарбоксилат. Хлорметилацетат (Нейеншвандер, Маркус и др., Не!ч. Chim. Acta, т. 61 (1978), с, 2047) (2,30 г, 21,2 ммоль) в сухом ДМФ (100 мл) по каплям добавляли п ри 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3- (N-ацетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоксилата цезия (13,4 г, 17,7 моль) и иодида натрия (133 мг, 0,89 ммоль) в сухом ДМФ (210 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 21 ч, а растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлороформе (200 мл) и промывали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната натрия. После сушки сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении, чтобы получить соединение из заголовка примера: выход 2,50 г (64 о ) Анализ: С1ьН ь|зйгОв: Рассчитано: С 25,74, Н 2,16, N 4,00 . Найдено: С 25,63, Н 2,19, N 4,19, 1Н вЂ” ЯМР (ДМСΠ— d6): дельта = 1,67 (синглет, й(СНз)СОСНз); 2,05 (синглет, МСОСНз); 2,14 (синглет, ОСОСНз); 2,98 (синглет, МСНз); 5,94 (синглет, CHz); 9,93 долей на миллион (синглет, NH). Пример 11, Ацетокси-фенилметил5-(N-ацетиламино)-3-(N -ацетил-N-метилами но)-2,4.6-три иодбе н зол ка рбо ксил ат. Хлорметил фенилацетат (Нейеншвандер, Маркус и др., Helv. Chim. Acta, т. 61 (1978), с. 2047) (1,59 г, 8,6 ммоль) в сухом ДМФ (20 мл) по каплям добавляли при 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-Nметиламино) -2,4,6-трииодбензолкарбоксилата цезия (7,28 г, 9,6 ммоль) иодида натрия (64 мг, 0,42 ммоль) в сухом ДМФ (100 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 20 ч, а растворитель удаляли при пониженном давлении, Остаток растворяли в хлороформе (200 мл) и дважды промывали насыщенным раствором кислого карбоната натрия и дважды водой. После сушки сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении. чтобы получить соединение из заголовка примера; выход 4,80 r (72 ). 1Н вЂ” ЯМР (СОС!з): дельта = 1,78 (синглет, !ч(СНз)СОСНз); 2,20 (синглет, ИСОСНз); 2,20 (синглет, ОСОСНз); 3,04 (синглет, СНз); 7,3 — 7,7 (мультиплет, 5Н); 7,97 1829940 16 (синглет, СН); 8,39 долей на миллион (синглет, NH), П р и и е р 12. 1-Ацетилокси-2-фенилэтил-5- (N-а цетил амин о)-3-(N-а цетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоксилат. 1-Хлор-2-фенилэтил ацетат (и ромежуточное соединение 9) (4,2 г, 21,1 ммоль) в сухом ДМФ (25 мл) по каплям добавляли при 50 С в раствор 5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-N-метиламино)- 2,4,6-трииодбензолкарбоксилата калия (15,6 г, 23,2 ммоль) и иодида натрия (158 мг, 1,0 ммоль) в сухом ДМФ (300 мл). Осадок удаляли фильтрацией после перемешивания в течение 21 ч и растворитель удаляли пр пониженном давлении, Остаток растворяли в хлороформе (200 мл) и промывали четыре раза насыщенным раствором кислого карбоната, После сушки сульфатом магния растворитель удаляли при пониженном давлении, чтобы получить соединение из заголовка примера: выход 6,70 г (40 ) 1Н-ЯМР (CDClg),дельта = 1,80 (синглет, К(СНз)СОСНз); 2,20 (синглет, МСОСНз); 3,05 (синглет, КНСз); 3,30 (мультиплет, CH2); 7,1— 7,3 (мультиплет, 5Н и СН), Получение частиц 1, Поливинилпирролидон (1,00 г, мол,м, 30 000 дальтон) растворяли в дистиллированной воде (25,0 мл) и фильтровали через мембранный фильтр с размером пор 0,2 мкм, Фильтрованный раствор продукта из примера 1 (0,1 г) в 96 этаноле (5,0 мл) медленно добавляли в раствор поливинилпирролидона при энергичном ультразвуковом перемешивании. Образовавшиеся микрочастицы центрифугировали и дважды промывали. Размер и распределение размеров. частиц можно анализировать при помощи светового или электронного микроскопа. Средний диаметр частиц составлял 1,0 мкм, который являлся также диаметром основной фракции. Получение частиц 2. При помощи механического измельчения продукта из примера 1 получали частицы со средним диаметром 8 мкм. Получение частиц 3. Поливинилпирролидон (1,00 г, мол.м. 40000 дальтон) растворяли в дистиллированной воде (25,0 мл) и фильтровали через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм. Фильтрованный раствор (0,22 мкм) продукта из примера 2 (0,2 г) в метаноле (5,0 мл) медленно добавляли в раствор поливинилпирролидона при энергичном перемешивании ультразвуком. Образовавшиеся микрочастицы центрифугировали и дважды промывали. Размер и распределение частиц по размеру можно анализировать при помо5 55 щи светового и электронного микроскопа. Средний диаметр частиц составлял 0,2 мкм, который также является диаметром основной фракции. Получение частиц 4. Поливинилпирролидон (1,00 г, мол.м. 40000 дальтон) растворяли в дистиллированной воде (25,0 мл) и фильтровали через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм. Фильтрованный раствор (0,22 мкм) продукта из примера 3 (0,1 г) в 96 этаноле (5,0 мл) медленно добавляли в поливинилпирролидоновый раствор при энергичном перемешивании ультразвуком. Образовавшиеся микрочастицы центрифугировали v промывали дважды. Размер и распределе ние частиц по размеру можно анализировать при помощи светового и электронного микроскопа. Средний диаметр составил 2,0 мкм, который является также диаметром основной фракции. Фармацевтическая форма 1, Частицы из примера получения частиц 1 (1,0 г) диспергировали в стерильном фильтрованном изотонном растворе 0,9 хлорида натрия (воде для инъекций (100 мл) при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии. Фармацевтическая форма 2, Частицы из примера получения частии 1 (1,0 r) суспендировали в стерильном, филь. трованном 0,9 растворе хлорида натрия/воде для инъекций (100 мл), содержащем поливинилпирролидон (4,0 r, мол.м. 40000) при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии. Фармацевтическая форма 3. Частицы из примера получения частии 1 (1,0 г) суспендировали в стерильном, фильтрованном 0,97, растворе хлорида натрия/воде .для инъекций (100 мл). содержащем поливинилпирролидон (4,0 г, мол.м. 40000 дальтон), регулируя рН в области 7,4 добавлением 0,1 N раствора гидрата окиси натрия, при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии. Фармацевтическая форма 4. Частицы из примера получения частиц 3 (1,0 r) диспергировали в стерильном, фильтрованном, изотонном 0,9 растворе хлорида натрия/воде для инъекций (100 мл) при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии. Фармацевтическая форма 5. Частицы из примера получения частиц 3 (1,0 г) суспендировали в стерильном, фильтрованном 0,9 растворе хлорида натрия/воде для инъекций (100 мл), содержащем поливинилпирролидон (4,0 г, мол.м. 40000 дальтон) при энергичном пере1829940 18 мешивании до получения гомогенной суспензии. Фармацевтическая форма 6, Частицы из примера получения частиц 3 (1,0 г) суспендировали в стерильном, фильтрованном 0,9% растворе хлорида натрия (воде для инъекций (100 мл), содержащем поливинилпирролидон (4,0 г, мол,м. 40000 дальтон), регулируя до рН 7,4 при помощи добавления 0,1 N раствора гидрата окиси натрия при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии. Фармацевтическая форма 7. Частицы из примера получения частиц 4 (1,0 г) диспергировали в стерильном, фильтрованном, изотонном 0,9% растворе хлорида натрия/воде для инъекций (100 мл) при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии. Фармацевтическая форма 8, Частицы из примера получения частиц 4 (1,0 r) суспендировали в стерильном, фильтрованном 0,9% растворе хлорида натрия/воде для инъекций (100 мл), содержащем поливинилпирролидон (4,0 г, мол.м. 40000 дальтон) при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии, Фармацевтическая форма 9. Частицы из примера получения частиц 4 (1,0 г) суспендировали в стерильном, фильтрованном 0,9% растворе хлорида натрия/воде для инъекций (100 мл), содержащем поливинилпирролидон (4,0 г, мол,м. 40000 дальтон), регулируя рН в области 7.4 добавлением 0,1 N раствора гидрата окиси натрия при энергичном перемешивании до получения гомогенной суспензии, Биоразрушение ин витро. Порошкообразный продукт из примера 1 суспендировали в серонорме (5 мг/мл) (серонорм является торговым названием никомеда АС) при рН 7,4 и перемешивали при 37 С, В качестве контрольного осуществляли также эксперимент B буферированном фосфатом соляном растворе (ПБС) при рН 7,4, В различные моменты времени отбирали пробы из верхнего слоя после центрифугирования колбы (4000 об/мин, 10 мин). Высвобождение изопака (5-(N-ацетиламин о)-3-(N-а цетил-N-метил а мино)-2,4,6-трииодбензолкарбоновой кислоты) анализировали при помощи ВЭЖХ. Более 50% материала подвергалось гидролизу в течение 6 ч, а спустя 24 ч гидролизовалось 90%, в ПБС гидролиза нельзя было обнаружить. Порошкообразный продукт из примера 3 суспендировали в серонорме (0,5 мг/мл) при рН 7,4 и перемешивали при 37 С. В качестве контрольного осуществляли также 55 эксперимент в буферированном фосфатом соляном растворе (ПБС) при рН 7,4, В различные моменты времени отбирали из верхнего слоя пробы после центрифугирования колбы (4000 об/мин, 10 мин), Высвобождение изопака (5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-N-метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоновой кислоты) анализировали при помощи ВЗЖХ. В течение 24 ч гидролизовалось 4,1% материала. В ПБС в течение 72 часов гидролизовалось только 0,12%. Порошкообразный продукт из примера 10 суспендировали в серонорме (0,5 мг/мл) при рН 7,4 и перемешивали при 37 С. В качестве контрольного осуществляли также эксперимент в буферированном фосфатом соляном растворе (ПБС) при рН 7,4. В различные моменты времени брали пробы из верхнего слоя после центрифугирования колбы (4000 об/мин, 10 мин). Высвобождение изопака (5-(N-ацетиламино)-3-(N-ацетил-N-метила мино)-2,4,6-трииодбензол карбоновой кислоты) анализировали при помощи ВЭЖХ. Материал полностью подвергался гидролизу спустя 2 ч в серонорме. В ПБС в течение 72 ч гидролизовалось только 58%. Порошкообразный продукт из примера 4 суспендировали в серонорме (0,5 мг/мл) при рН 7,4 и перемешивали при 37 С, В качестве контрольного осуществляли также эксперимент в буферированном фосфатом соляном растворе (ПБС) при рН 7,4,В различные моменты времени отбирали пробы из верхнего слоя после центрифугирования колбы (4000 об/мин, 10 мин). Высвобождение изопака (5-(Nа цетил а мин о)-3-(N-а цетил-N-метил ам ино) -2,4,6-трииодбензолкарбоновой кислоты) анализировали при помощи ВЭЖХ. 29О/ материала подвергалось гидролизу в течение 2 ч инкубирования, и гидролиз завершался спустя 24 ч в серонорме. В ПБС в течение 24 ч гидролизовалось 34%, Метаболизм ин вива, Частицы из примера фармацевтической формы 2 вводили в виде инъекции внутривенно в хвостовую вену крыс. Доза 200 мг/кг, скорость инъектирования 1 мл/мин, концентрация 10 мг/мл. Через 30 мин после инъекции дозу примерно в 35% обнаруживали в печени, Этот остаток дает 0,9 мг 1/г печени. Содержание иода постепенно снижалось до 7% спустя 6 ч. Через 24 ч после инъекции иод уже нельзя было обнаружить в печени. Брали пробы желчи и мочевины в течение первых 3 ч после инъекции. Удаление через эти каналы составило 49 и 16% от инъектированной дозы соответственно. Весь иод выводился в виде изопака (5-(Nацетиламино)-3) N-a цетил-N-метиламино)1829940 2! R1-СО 0 СН-0-GOR Формула изобретения 1. Способ получения инъектируемой контрастной среды путем введения йодсодержащего контрастного агента в носитель, отличающийся тем, что, с целью повышения стабильности, в качестве йодсодержащего агента используют соединение общей формулы! 45 Составитель B. Брусиловская Техред М. Моргентал Корректор М, Андрушенко Редактор Г. Бельская Заказ 2483 Тираж Подписное ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5 Производственно-издательский комбинат "Патент", r. Ужгород, ул.Гагарина, 101 2,4,6-трииодбензолкарбоновой кислоты). В течение 24 ч весь иод выводился через мочевину или фекалий в равных количествах (примерно 50% через каждый). Частицы из фармацевтической формы 8 вводили через инъекцию внутривенно в хвостовую вену крыс, Доза 200 мг/кг, скорость инъекции 1 мл/мин, концентрация 10 мг/мл. Через 30 мин после инъекции более 50% дозы обнаруживали впечени,,Этот остаток дает 1,8 мг 1/г печени. Содержание иода постепенно снижалось до 1 — 2% спустя 72 ч. Через одну неделю после инъекции иод вообще не обнаруживали в печени. Бьзли пробы желчи и мочевины в течение первых 3 ч после инъекции. Выделения через эти каналы составляли 9,5 и 42% от инъектированной дозы соответственно. Весь иод выводился в виде изопака (5-(N-ацетиламино)-3-(Nацетил-N- метиламино)-2,4,6-трииодбензолкарбоновой кислоты). В течение 7 дней весь иод выводился через мочу или фекалий в равных количествах (примерно 50% в каждой). где R< — замещенная или незамещенная С вЂ” 5 Сго-алифатическая, Ст — Сго-аралифатическая или Св — Czo-арильная группа; или С1 — Сго-гетероциклическая группа, содержащая один или несколько гетероатомов, выбранных из О, $ и N; 10 Rz — водород, или замещенная, или незамещенная алифатическая, арильная или аралифатическая группа; Кз — имеет указанные значения R1 или отличается от него или 15 Кг и Вз вместе представляют замещенную или незэмещенную C> — С4-алкиленовую группу, содержащее по крайней мере один атом йода и при метаболизме превращающееся в 20 продукты, растворимые в жидкости организма, частицы которого получают осаждением из раствора в смешивающемся с водой растворителе путем смешения с водой или механическим размолом соединения общей 25 формулы l в твердом виде. с последующим суспендированием частиц в жидкости для инъекций. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве соединения общей фор30 мулы!используютсоединение, в котором Ri и/или Кз является иодированной фенильной группой, 3. Способ по п.2, отличающийся тем, что R> и/или Вз является трииодофе35 нильной группой.
