Способ определения гликемии в трупной крови

 

Использование: относится к области медицины, а именно к судебной медицине. Цель изобретения: повышение точности. Сущность изобретения: определяют концентрацию гликированного гемоглобина и при увеличении концентрации его в 2 - 3 раза по сравнению с нормой определяют гликемию. Положительный эффект: изобретение позволяет определить гликемию за истекшие 3 - 4 месяца жизни.

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине.

Целью изобретения является повышение точности.

П р и м е р 1. Мужчина 60 лет, смерть наступила от острой кровопотери в результате разрыва внутренних органов при автомобильной травме. Кровь взята шприцом из бедренной вены. Исследование проводят спустя 1-1,5 ч после взятия крови. Для определения концентрации общего гемоглобина в 5 мл трансформирующего раствора, состоящего из ацетоциангидрина-0,5 мл, калия железистосинеродистого - 200 мг, натрия двууглекислого - 1 г и дистиллированной воды до 1 л, добавляют 10 мкл цельной жидкой трупной крови, дают постоять 20 мин и затем колориметрируют на спектрофотометре СФ-26 против холостой пробы при длине волны 620 нм. Экстинкция общего гемоглобина равна 0,226, затем по калибровочному графику находят концентрацию общего гемоглобина, она равна 8,4 г% ; что соответствует 1,30˙ 10^-3 моль/л. Затем определяют концентрацию гликированного гемоглобина. Для этого в пробирку наливают 0,1 мл цельной трупной крови, добавляют 0,9 мл дистиллированной воды и 0,5 мл 0,2 н. раствора трихлоруксусной кислоты. Пробирку закрывают резиновой пробкой, в которую вставлена инъекционная игла. Пробу перемешивают и ставят в штатив, помещенный в кипящую водяную баню. Через 10 мин иглы вынимают. Пробу нагревают еще 50 мин (общее время нагрева 60 мин). Затем пробу вынимают и после охлаждения к ней добавляют 0,5 мл 40% -ного раствора трихлоруксусной кислоты. После перемешивания пробу центрифугируют 10 мин при 6000 об/мин. Затем в обычную пробирку отбирают 1 мл надосадочной жидкости и добавляют 1 мл концентрированной соляной кислоты и 1 мл 0,02 М раствора тиобарбитуровой кислоты. Пробу перемешивают, пробирку закрывают стеклянной пробкой "слезкой" и инкубируют 6 мин на кипящей водяной бане. После инкубации измеряют величину экстинкции окрашенного комплекса при длине волны 432,5 нм. Окраска стабильна в течение 1 ч. Контрольная проба содержит 1 мл дистиллированной воды, 1 мл концентрированной соляной кислоты и 1 мл 0,02 М раствора тиобарбитуровой кислоты, контроль нагревают 6 мин на кипящей водяной бане.

Содержание гликированного гемоглобина в крови выражают в процентах от суммарного гемоглобина. Определение концентрации гликированного гемоглобина проводят по калибровочному графику, построенному по стандартным растворам кетоаминного соединения - фруктозоглицина, величина экстинкции которого соответствует величине экстинкции гликированного гемоглобина.

Величина экстинкции гликированного гемоглобина равна 0,078, что по калибровочному графику соответствует концентрации 3,0˙ 10^-4 моль/л. Далее подставляют в формулу (% ) = 100% = 100% = 5.76 % .

П р и м е р 2. Мужчина 52 лет, смерть наступила внезапно от ишемической болезни сердца. Кровь взята шпpицом из печеночных вен (а)= портальной вены (в) и подвздошной вены (с). Исследования проводят соответственно описанным методикам. Содержание гликированного гемоглобина соответственно равно: а) 4,16% в) 3,46% с) 5,17% Содержание глюкозы в тех же образцах крови соответственно равно: а) 76 мг% в) 3315 мг% с) 84 мг% , что показывает резкое отличие содержания глюкозы в различных отделах сосудистой системы трупа, в то время как количество гликированного гемоглобина примерно одинаково во всех образцах.

Использование изобретения позволит определить гликемию за истекшие 3-4 месяца жизни.

Формула изобретения

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛИКЕМИИ В ТРУПНОЙ КРОВИ путем биохимического исследования крови, отличающийся тем, что, с целью повышения точности, определяют концентрацию гликированного гемоглобина и при увеличении концентрации его в 2 - 3 раза по сравнению с нормой определяют гликемию за истекшие 3 - 4 месяца жизни.