Способ получения лекарственного средства для лечения язвенной болезни желудочно-кишечного тракта млекопитающих

 

Изобретение относится к фармации и может быть использовано для получения различных лекарственных форм препаратов, предназначенных для лечения язвенной болезни млекопитающих. Сущность изобретения: для получения лекарственного средства для лечения язвенной болезни желудочно-кишечного тракта млекопитающих проводят смещение эффективного количества кислотостойкого фактора роста фибробласта с фармацевтически приемлемым носителем, связующим или разбавителем. Изобретение позволяет получить препарат, способствующий фактически полному заживлению язвы. При сравнении с антогонистами H₂ -рецептора было установлено, что лучший результат для антагонистов был меньше или равнялся результату, достигаемому при использовании 10% от оптимального количества состава на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта. 7 з. п. ф-лы, 7 табл.

Изобретение относится к фармации и касается получения различных лекарственных форм препаратов для лечения язвенной болезни млекопитающих.

Известны препараты ранитидин и циметидин, полученные химическим путем, действие которых состоит в торможении желудочной секреции.

Хотя лечение этими антагонистами получило широкое распространение и оказалось относительно успешным, многие пептические язвы не поддаются лечению антагонистами Н₂-рецептора. Например, от 20 до 30% язв двенадцатиперстной кишки не вылечиваются после четырех-шестинедельного курса лечения циметидином или ранитидином. Кроме того, повторное возникновение язвенного состояния является вполне обычным явлением при лечении антагонистами Н₂-рецептора.

Было установлено, что фактор роста фибробласта является потенциальным фактором развития кровеносных сосудов, что среди прочего способствует реваскуляризации при лечении ран. Существует два типа фактора роста фибробласта, кислотный фактор роста фибробласта (aFGF) и основный фактор роста фибробласта (bFGF). Однако, aFGF и bFGF не устойчивы к воздействию кислот и/или тепла. Поэтому до настоящего изобретения использование фактора роста фибробласта в кислотных и/или тепловых средах, как это имеет место при лечении пептических язв, было невозможно.

Настоящее изобретение предусматривает способ получения лекарственного средства для лечения млекопитающих, страдающих заболеванием, восприимчивым к воздействию фактора роста фибробласта, который включает смешение эффективного количества кислотостойкого фактора роста фибробласта с фармацевтически приемлемым носителем, связующим или разбавителем. В частности, настоящим изобретением предусматривается способ получения лекарственного средства для лечения млекопитающих, страдающих язвенной болезнью желудочно-кишечного тракта, который включает смешение эффективного количества кислотостойкого фактора роста фибробласта с фармацевтически приемлемым носителем, связующим или разбавителем.

Состав на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта предпочтительно применяется в фармацевтически приемлемом носителе вместе с одним или несколькими следующими веществами: а) стабилизаторами, б) противосекреторными средствами, такими как антагонисты Н₂-рецептора, в) цитозащитными средствами, г) антацидными средствами.

Составы на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта в соответствии с настоящим изобретением при введении млекопитающим, страдающим язвенными болезнями желудочно-кишечного тракта, позволяют добиться фактически полного заживления язвы. При сравнении с вышеописанными антагонистами Н₂-рецептора было установлено, что лучший результат для антагонистов был меньше или равнялся результату, достигаемому при использовании 10% от оптимального количества состава на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта.

Изобретением предусматривается использование определенных фармацевтических составов, включающих кислотостойкий фактор роста фибробласта или его соль, а также один или несколько агентов, которые стабилизируют, потенцируют или каким-либо другим образом влияют на лечебную эффективность кислотостойкого фактора роста фибробласта. Такие агенты включают: 1) стабилизаторы, такие как гликозаминогликан, который включает гепарин, глюканатсульфат, такой как декстрансульфат, сульфированные циклодекстрины, такие как бета-циклодекстритетрадекасульфат и β -1,3-глюкансульфат, (II) противосекреторные средства, такие как антагонисты Н₂-рецептора (например, циметидин, ранитидин, фамотидин, роксатидинацетат), антагонисты рецептора мускарина (например, пирензепин), (III) цитозащитные средства, такие как производные спизофурона и простагландина, и (IV) антацидные средства, такие как гель гидроокиси алюминия, бикарбонат натрия и сукралфат. Такие агенты можно вводить отдельно или в виде компонента этого состава.

В соответствии с настоящим изобретением различные язвенные болезни желудочно-кишечного тракта можно лечить путем введения млекопитающему эффективного количества состава на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта. Такие язвенные болезни включают региональный илеит, неспецифические язвенные колиты и пептические язвы (двенадцатиперстной кишки или желудка).

Состав на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта также можно использовать для лечения других состояний у млекопитающих, которые были бы восприимчивы к лечению фактором роста фибробласта, если бы отсутствовала кислотная среда. Например, при лечении рака мочевого пузыря часто возникают изъязвления тканей этого органа, которые можно лечить фактором роста фибробласта, если фактор роста фибробласта будет кислотостойким. Раны от повязок также могут создавать кислотную среду, которая была бы восприимчива к воздействию кислотостойкого фактора роста фибробласта.

Установлено, что кислотостойкий фактор роста фибробласта в соответствии с настоящим изобретением является весьма устойчивым в кислотных средах, особенно при использовании совместно с одним или несколькими стабилизаторами. Природный фактор роста фибробласта млекопитающих и фактор роста фибробласта, модифицированный с приобретением кислотостойкости, характеризуются очень низкой токсичностью.

Приготовление лекарственных форм на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта проводится обычными методами. Например, таблетки и капсулы получают в результате применения таких добавок, как фармацевтически приемлемые носители например, лактоза, кукурузный крахмал, кремниевый ангидрид, микрокристаллическая целлюлоза, сахароза), связующие вещества (например, альфа-крахмал, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, поливинилпирролидон), дезинтеграторы (например, кальциевая карбоксиметилцеллюлоза, крахмал, полузамещенная гидроксипропилцеллюлоза), поверхностно-активные вещества (например, твин 80 (Као-Атлас), плюроник F68 (Асаши Денка, Япония), сополимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена), антиокислители (например, α -цистеин, сульфит натрия, аскорбат натрия), смазки (например, стеарат магния, тальк) и подобные вещества.

Ректальные препараты также готовят обычными методами, например, в результате применения маслянистой основы, такой как глицерид высших жирных кислот (например, масло какао естественного происхождения, Витепсолз), полусинтетическая основа (фирма "Динамит нобель", Федеративная Республика Германии), глицерид средних жирных кислот (например, Миглиолз) (фирма "Динамит нобель") или растительное масло (например, кунжутное масло, соевое масло, кукурузное масло, хлопковое масло, оливковое масло).

Если из этого состава формируется инъецируемый водный раствор, то этот раствор готовят обычными методами с использованием такого растворителя, как водный растворитель (например, дистиллированная вода, физиологический раствор, раствор Ринджера) или масляный растворитель (например, кунжутное масло, оливковое масло). При желании можно использовать одну или несколько добавок. Такие добавки включают разжижающее средство (например, салицилат натрия, ацетат натрия), буфер (например, цитрат натрия, глицерин), изотонический агент (например, глюкоза, инвертаза), стабилизаторы (например, сывороточный альбутин человека, полиэтиленгликоль), консервант (например, бензиловый спирт, фенол) или анальгетики (например, хлористый бензалконий, новокаин).

Если из этого состава формируется твердый препарат для инъекций, то такой препарат можно получить обычными методами с использованием, например, разбавителя (например, дистиллированная воды, физиологический раствор, глюкоза), инертный наполнитель (например, карбоксиметилцеллюлоза (СМС), аргинат натрия), консервант (например, бензиловый спирт, хлористый бензалконий, фенол) или аналгетики (например, глюкоза, глюконат кальция, новокаин).

Необходимая доза кислотостойкого фактора роста фибробласта является очень незначительной по сравнению с другими фармацевтическими препаратами, такими как Н₂-блокаторы, и зависит от ряда факторов, включая болезнь, подлежащую лечению, а также от того, используется ли он отдельно или в сочетании со стабилизаторами, противосекторными средствами, цитозащитными средствами и антацидными средствами и от количества пищи, принимаемой больным.

Например, для лечения язвенной болезни желудочно-кишечного тракта можно приготовить водный раствор (рН 7,4), содержащий 0,5 мг мутеина CS23 рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека, 0,23 мг декстрансульфата натрия со средним молекулярным весом 7500 и 15 мг цитрата натрия на мл раствора.

Рекомбинантный основной фактор роста фибробласта человека (rhb FGF), использованный в следующих примерах, получен известным способом в результате применения трансформированного штамма Escherichia coli K12 ММ294 (рТВ669), образец зарегистрирован в Институте ферментации, Осака (IFО), Япония, 11 августа 1986 г. под N IFO 14532, и в Институте исследования ферментации (FRI), Япония, 21 августа, 1986 г, под N FERM Р-8918, после чего этот депозит был преобразован в депозит Будапештского банка в соответствии с Будапештским договором под номером ВР-1281).

Мутеин CS23 рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека, использованный в следующих примерах, был получен в соответствии с описанием, приведенным в "Biochemical and Biophysiol, Research Communications", т. 151, стр., 701-708, 1988, с применением трансформированного штамма Escherichia coli ММ294 (рТВ 762) этот образец был зарегистрирован в Институте ферментации, Осака, Япония, 27 мая 1987 г, под номером IFO 14613, и в Институте исследования ферментации, Япония, 11 июня 1987 г. под номером FERM Р-9409, после чего этот депозит был преобразован в депозит Будапештского банка в соответствии с Будапештским договором под номером ВР-1645).

Примеры использования полученных составов.

П р и м е р 1. В следующих экспериментах животная модель, описанная С. Сзабо, шт. Мэриленд, в "American journal of Pcuthology", стр.273-276, 1978, использовалась для вызывания язв двенадцатиперстной кишки у здоровых крыс. В частности, крысам вводили цистамин в количестве 25 мг на 100 г веса тела (BW) путем внутрижелудочного промывания, осуществляемого через рот 3 раза за один день. Через двадцать четыре часа примерно 10% крыс погибло от перфорированной язвы. На третий день у каждой крысы производили небольшую лапаротомию с целью определения того, имеется ли язва двенадцатиперстной кишки. Крысы без каких-либо внешних признаков язвы двенадцатиперстной кишки, которые составили примерно 1-2% от выжившых крыс, выводились из исследования. Таким образом, все крысы, включенные в исследование, имели язвы, и их отбор производился путем рандомизации во избежание систематической ошибки оценки, обусловленной субъективным фактором.

Все крысы, использованные в исследовании, имели начальный вес тела, равный 160 г. В четырех группах крыс, прошедших курс лечения в течение 21 дня, а затем умерщвленных, были получены следующие результаты. Все измерения производились в момент умерщвления через 21 день курса лечения.

Группа I. Отсутствие лечения с помощью препарата на основе фактора роста фибробласта.

Четыре крысы, имевшие язвы, не получали лечения с помощью препарата на основе фактора роста фибробласта. Частота заболевания, глубина и зона поражения язвами в статистическом отношении были аналогичны подобным показателям у 50 других крыс, не получавших лечения в ранее выполнявшихся исследованиях.

Средняя глубина язвы^* = 1,625 (SD = 1,302¹SE.M. = 0,460)² Средняя площадь язвы = 8,83 мм² (SD = 9,75S.E.M. = 3,45) Вес тела, г: 189 176 177 180 = 182 Группа II. Мутеин CS23 рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека в количестве 10 нанограмм.

Вторая группа из четырех крыс получала мутеин CS23 рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека в количестве 10 нанограмм на 100 г веса тела, который вводился перорально дважды в день. Эта доза регулировалась в соответствии с весом тела каждого животного два раза в неделю.

Средняя глубина язвы = 1,00 (SD = =1,414S.E.M. - 0,707) Средняя площадь язвы = 3,14 мм² Вес тела, г: 232 212 204
216
216
Группа III. Мутеин CD23 рекомбинатного основного фактора роста фибробласта человека в количестве 100 нанограмм.

Третья группа из четырех крыс получала мутеин CS23 рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека в количестве 100 нанограмм на 100 г веса тела, который вводился перорально дважды в день. Эта доза также регулировалась в соответствии с весом тела каждого животного два раза в неделю.

Средняя глубина язвы = 0,25 (SD = 0,5 S.E.M. = 0,25)
Средняя площадь язвы = 0,392 мм² (все язвы были полностью извлечены за исключением одной маленькой язвы, заживление которой все еще продолжается у одной крысы).

*Термин "средняя глубина язвы", используемый в этом описании изобретения, означает следующее: 1 - проникновение в эпителий на глубину нескольких клеток, 2 - проникновение глубже слизистой оболочки и внедрение в клетки мышечной ткани, 3 - проникновение сквозь слой мышечной ткани и 4 - пенетрация (непосредственно перед перфорацией). 1) Стандартное отклонение. 2) Стандартная ошибка средней. Вес тела, г: 198
205
254
215
Х = 218
Группа IV. Мутеин CS23 рекомбинатного основного фактора роста фибробласта человека в количестве 500 нанограмм.

Последняя группа из пяти крыс получала мутеин CS23 рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека в количестве 500 нанограмм на 100 г веса тела, который вводился перорально дважды в день. Эта доза также регулировалась в соответствии с весом тела каждого животного два раза в неделю.

Средняя глубина язвы = 0,6(SD = 1,342, S.E.M. = 0,6) Средняя площадь язвы = 1,88 мм² Вес тела, г: 207
214
295
196
216
= 208
Как видно из приведенных выше данных, перорально вводимый мутеин CS23 рекомбинатного основного фактора роста фибробласта человека приводит к быстрому заживлению язв, вызванных цистамином. Даже лучшее сочетание блокаторов H-2 позволяет получить результаты, которые ниже или равняются аналогичным показателям, достигаемым в группе, получавшей мутеин CS23 рекомбинатного основного фактора роста фибробласта человека в количестве 10 нанограмм.

П р и м е р 2. Мутеин CS23 рекомбинатного основного фактора роста фибробласта человека вводили в среду "Dubbecco MEM", содержащую 10% сыворотки эмбриона теленка, с целью достижения концентрации, равной 10 мкг/мл, куда далее добавляли соль лекстрансульфата (полученную из фирмы "Сейкагагу коджио" Япония), в результате чего конечная концентрация этой соли составила 25 мкг/мл. Эту среду выдерживали в термостате при температуре 37^оС в течение 24 ч. Соли декстрансульфата представляли соли натрия, средний молекулярный вес которых равнялся 5000, 7500 или 500000 соответственно. В качестве контрольной группы применяли такую же среду, в которую не добавляли декстрансульфат натрия. Значения остаточной активности через 24 ч приведены в табл. 1. В контрольной группе не наблюдалось сколь-либо значительной активности мутеина CS23 в то время, как в испытуемых группах активность фактора роста фибробласта оставалась стабильной.

П р и м е р 3. В следующих экспериментах животную модель, описанную К. Такаги и др., журнал "Jpn. J.Pharmacol", 19, стр.418-426, 1969, использовали для вызывания язв желудка, двенадцатипеpстной кишки или толстой кишки у здоровых крыс. Использовали самцов крыс "Jcl. Sprague-Dawley" в семинедельном возрасте весом около 250 г. Крысам давали наркоз в виде простого эфира и делали разрез в области брюшной полости. Круглую металлическую форму с диаметром 6 мм помещали в непосредственное соприкосновение с серозной оболочкой на стыке между передней стенкой корпуса и пазухой в желудке, стенкой двенадцатиперстной кишки на расстоянии 7 мм в направлении привратника желудка, или стенкой толстой кишки на расстоянии примерно 5 см в направлении соединения подвздошной кишки и слепой кишки. В форму выливали ледяную уксусную кислоту (50 мкл) и оставляли на месте в течение 20 с. После удаления уксусной кислоты обработанную поверхность промывали 100 мкл физиологического раствора и брюшную полость закрывали. Составы на основе фактора роста фибробласта, суспендированные в 5% растворе аравийской камеди, вводили перорально два раза в день (в 9 ч утра и в 4 часа дня) в течение 6 дней, начиная со следующего дня после операции. Животных умерщвляли посредством асфиксии CO₂ через 7 дней после операции. Площади (мм²) и глубину изъязвления (оценки от 0 до 3,0: отсутствие повреждения, 1 : эрозия слизистой оболочки, 2 : средняя язва, 3 : глубокая язва или перфорация) измеряли под расчленяющим микроскопом с окуляром, имеющим 1 мм сетку ( x 10). Индекс язвы выводили из произведения площади и глубины.

Уксусная кислота, наносимая на серозную оболочку желудка, двенадцатиперстной кишки и толстой кишки, вызывала возникновение круглой язвы. Как видно из табл.2-4, индексы язвы контрольной группы для каждого типа язвы через 7 дней после операции представляли 6,7 ± 1,1; 5,7 ± 1,1 и 14,2 ± 1,6 соответственно. Контрольная группа получала один носитель, представляющий 50 мМ цитратного буфера (pH 7,0), содержащего 150 мМ NaCl, испытуемая группа rhbFGF получала рекомбинатный основный фактор роста фибробласта человека перорально в количестве 30 мкг на кг веса тела, испытуемая группа CS23 получала CS23 (мутеин CS23 рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека) перорально в количестве 30 мкг на кг веса тела, и испытуемая группа CS23-DS получала смесь CS23 и DS (декстрансульфат) со средним молекулярным весом, равным 7500, в количестве соответственно 30 мкг и 13,8 мкг на кг веса тела. CS23 и CS23-DS ускоряли заживление язв желудка, двенадцатиперстной кишки и толстой кишки, причем воздействие на язвы двенадцатиперстной и толстой кишки имели статистическую значимость (табл.2-4). Влияние rhbFGF на заживление язв было менее значительным, чем в случае CS23 и CS23-DS.

П р и м е р 4. В следующих экспериментах язвы толстой кишки вызывали путем локального нанесения N-этилмалеимида (NEM) на поверхность слизистой оболочки толстой кишки. Использовали самцов крыс "Jcl. Sprague-Dawley" в семинедельном возрасте весом около 250 г. Крысам вводили 50 мкг 3% NEM, растворенного в 1% метилцеллюлозе, непосредственно в толстую кишку на расстоянии 6 см от заднего прохода с помощью эластичного катетера Нелатона. Составы на основе фактора роста фибробласта, растворенные в 50 мм цитратного буфера (pH 7,0), содержащего 150 мм NaCl или 20 мм трис-HCl буфера (pH 7,0), в объеме 0,2 мл/ крысу, вводили в толстую кишку на расстоянии 7 см от заднего прохода с помощью эластичного катетера Нелатона два раза в день (в 9 ч утра и в 4 ч дня) в течение 10 дней, начиная со дня после вызывания язвы путем обработки N-этилмалеимидом. Животных умерщвляли посредством асфиксации CO₂ через 11 дней после обработки N-этилмалеимидом. Площадь (мм²) и глубину изъязвления (оценки от 0 до 3: 0 - отсутствие повреждения, 1 - эрозия слизистой оболочки, 2 - средняя язва, 3 - глубокая язва или перфорация) измеряли под расчленяющим микроскопом с окуляром, имеющим 1 мм сетку ( x 10). Индекс язвы выводили из произведения площади и глубины.

В эксперименте 1 контрольная группа получала только один носитель, представляющий 50 мм цитратного буфера (pH 7,0), содержащего 150 мм HaCl, испытуемая группа rhbFGF получала рекомбинатный основный фактор роста фибробласта человека в количестве 2 мкг на крысу, испытуемая группа CS23 получала CS23 в количестве 2 мкг на крысу, и испытуемая группа CS23-DS получала смесь CS23 со средним молекулярным весом 7500 в количестве соответственно 2 мкг на крысу и 0,92 мкг на крысу. В эксперименте 2 контрольная группа получала только 20 мм трис-HCl буфера (pH 7,0), испытуемая группа rhaFGF получала рекомбинантный кислотный фактор роста фибробласта человека, полученный в количестве 2 мкг на крысу.

Как видно из табл.5, нанесение N-этилмалеимида на слизистую оболочку толстой кишки вызвало образование глубоких язв. Индекс язвы контрольной группы через 11 дней после введения N-этилмалеимида равнялся 231,6 ± 51,1 в эксперименте 1 и 191,6 ± 84,5 в эксперименте 2. Все препараты rhbFGF, CS23, CS23-DS и rhaFGF ускоряли заживление язв толстой кишки.

П р и м е р 5. В следующем примере животная модель, описанная в примере 1, использовалась для вызывания язв двенадцатиперстной кишки у здоровых крыс. Сами крысы получали 3 дозы цистимина-HCl в количестве 25 мг/100 г пероральным способом. Через 3 дня крыс с пенетрирующими язвами двенадцатиперстной кишки (определяемыми с помощью лапаротомии) произвольно отбирали в контрольную и лечебные группы. Крысы (6-8 шт в группе) получали (1) только один носитель, (2) rhbFGF (нестабильный) нестабильный тип рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека, или (3) CS23 (мутеин CS23 кислотостойкого рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека) в количестве 100 нг/100 г через желудочный зонд два раза в день до осуществления аутопсии на 21 день, когда производили измерение язв и удаление гистологических участков. Этот эксперимент повторяли трижды и его результаты приведены в табл.6.

Как видно из табл.6, гистология крыс, получавших фактор роста фибробласта, позволила обнаружить следующее: выраженное развитие кровеносных сосудов, незначительную моноклеарную инфильтрацию клеток и плотную грануляционную ткань на месте язвы, зажившие язвы, которые были полностью эпитализированы, гипертрофическую слизистую оболочку в желудке и в двенадцатиперстной кишке. Эти результаты отсутствовали у крыс, лечение которых производилось только одним носителем.

П р и м е р 6. В следующем примере животную модель, описанную в примере 1, использовали для вызывания язв двенадцатиперстной кишки у здоровых крыс. Самки крыс получали 3 дозы цистамина-HCl в количестве 25 мг /100 г пероральным способом. Через три дня крыс с пенетрирующими язвами двенадцатиперстной кишки (определяемыми с помощью лапаротомии) произвольно отбирали в контрольную и лечебные группы. Крысы (3-4 в группе) получали (1) только один носитель (2) CS23 (мутеин CS23 кислотостойкого рекомбинантного основного фактора роста фибробласта человека) в количестве 100 нг/100 г и (3) циметидин в количестве 10 мг/100 г через желудочный зонд два раза в день до осуществления аутопсии на 21 день, когда производили измерение язв и удаление гистологических участков. Результаты приведены в табл.7.

Как видно из табл.7, использование состава на основе кислотостойкого фактора роста фибробласта по настоящему изобретению в процессе лечения язв вызвало значительное улучшение по сравнению со стандартным лечением циметидином.

Формула изобретения

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЯЗВЕННОЙ БОЛЕЗНИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА МЛЕКОПИТАЮЩИХ, отличающийся тем, что, с целью повышения фармакологической активности средства, проводят смешение эффективного количества кислотостойкого фактора роста фибробласта с фармацевтически приемлемым носителем, связующим или разбавителем.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что кислотостойкий фактор роста выбирают из группы, включающей природный кислотный фактор роста фибробласта, стабилизированный природный фактор фибробласта, фактор роста фибробласта, модифицированный с образованием кислотостойкой формы, стабилизированный модифицированный фактор роста фибробласта.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что кислотостойкий фактор роста фибробласта представляет собой мутеин Cs23 рекомбинатного основного фактора роста фибробласта человека.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что язвенная болезнь желудочно-кишечного тракта представляет региональный илеит.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что язвенная болезнь желудочно-кишечного тракта представляет неспецифический язвенный колит.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что язвенная болезнь желудочно-кишечного тракта представляет пептическую язву.

7. Способ по п.6, отличающийся тем, что пептическая язва является язвой двенадцатиперстной кишки.

8. Способ по п.6, отличающийся тем, что пептическая язва является язвой желудка.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2