Способ получения противовирусного средства

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности. Сущность изобретения: растворяют в воде цитратный буфер, натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон, N,N,Nʹ,Nʹ -тетраметионина хлорид, устанавливают pH 6,7 - 8,3, фильтруют, фасуют и стерилизуют. Полученное средство обладает противовирусным, противоопухолевым действием, стабильно при хранении. 2 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к производству и применению лекарственных средств акридинового ряда, являющихся супериндуктором интерферонов ( α , β и γ ) и обладающих ярко выраженным иммуностимулирующим действием.

Известны способы получения парентеральных лекарственных форм производных акридина, обладающих противовирусным действием.

Известный способ получения лекарственного средства включает последовательное дозированное растворение буферных веществ метилпарабина и пропилпарабина (1-окси-4-карбоксиметилбензола и 1-окси-4-карбоксипропилбензола), производного акридина, установление рН полученного раствора равным 9,0, фильтрацию, запайку ампул в атмосфере инертного газа (азота), их стерилизацию.

К недостаткам известного способа (прототипа) следует отнести: высокое значение рН растворов равное 9,0 приводит к быстрой инактивации лекарственного средства даже при хранении в темноте: высокая светочувствительность препарата (под действием света происходит его инактивация), которая требует специальных условий хранения и затрудняет применение.

Все лекарственные средства на основе производных акридина, например, такие как акрихин, этакридин, аминоакрихин, высоко чувствительны к действию света, что значительно усложняет их использование в медицинской и ветеринарной практике.

Это связано с тем, что акридиновое кольцо таких соединений поглощает свет части спектра (400-480 нм) и в водных растворах подвергается фотопревращениям (фотовосстановлению, димеризации и взаимодействию с другими компонентами водных растворов), что приводит к образованию физиологически неактивных, а часто и токсичных соединений.

Замещенные фенолы (а особенно фенолят анионы, присутствующие в растворах при рН = 9,0), используемые в прототипе в качестве буферных веществ, а также первичные и вторичные аминогруппы многих соединений, например трис-(оксиметил)аминометан(трис-буфер), этилендиаминтетрауксусная кислота (трилон Б) и т. п. , участвуют в реакциях фотопревращений акридинового кольца, резко ускоряя процессы его фотодеструкции.

Задачей изобретения является разработка упрощенного способа получения высокоэффективного лекарственного средства, устойчивого к действию света и стабильного при хранении.

Поставленная задача реализуется способом получения, включающим последовательное растворение буферного вещества и производного акридина, установление рН, последующую фильтрацию, фасовку и стерилизацию. В качестве буферного вещества используют цитратный буфер, в качестве производного акридина - натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон при массовом соотношении (производное акридина - цитратный буфер) 1: (0,01-0,1). Кроме того, в раствор дополнительно вводят N,N,N^',N^'-тетраметилтионина хлорид в соотношении 1: (0,001-0,01). После этого рН полученного раствора устанавливают 6,7-8,3.

Отличиями заявляемого способа от способа-прототипа являются: использование новых производного акридина и вспомогательных веществ; введение в смешанный раствор в определенном соотношении производного акридина и вспомогательных веществ; в качестве производного акридина использован - натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон, а в качестве вспомогательных - цитратный буфер и N,N ,N^',N^'-тетраметилтионина хлорид; установление рН полученного раствора от 6,7 до 8,3; цитратный буфер является исключительно инертным соединением, не способным к образованию долгоживущих радикалов и следовательно не увеличивающий скорость фотопревращений основного вещества - производного акридина; N, N, N^', N^'-тетраметилтионина хлорид служит внутренним светофильтром, поглощает попадающий в ампулу свет, имеет низкий энергетический уровень возбужденных синглетного и триплетного состояний, подвергается обратимым фотопревращениям (образование на свету лейкоформы, которая в темноте снова переходит в исходное вещество) и полностью предохраняет основное вещество - производное акридина от фотоинактивации.

Проведенные исследования показали, что для предохранения акридинов от фотодеструкции необходимо: исключение веществ способствующих фотопревращениям, таких как различные фенолы (особенно фенолят анионы, которые присутствуют в растворах при рН = 9,0) а также первичные и вторичные амины; введение в растворы веществ с одной стороны преимущественно поглощающих попадающий в раствор свет (внутренние светофильтры), а с другой - легче чем акридины, подвергающиеся фотопревращениям (т.е. имеющие значительно более низкие по энергии возбужденные триплетные состояния). Особый интерес представляет использование таких веществ, у которых возможны обратимые фотопревращения;
при высоких значениях рН растворов 9,0-10,0, производные акридинового ряда, имеющие в своем составе β-карбоксильные группы, подвергаются в процессе хранения декарбоксилированию. Так, из натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридона образуются 9-метил-10-акридон и карбонат натрия.

Изучение этих процессов показало, что снижение значения рН до 8,3 полностью тоpмозит декарбоксилирование. В проведенных опытах растворы производных акридина, имеющие рН ≅ 8,3, выдерживают хранение при комнатной температуре без разложения в течение 2,5 лет (срок наблюдения).

Заявляемые количества вспомогательных веществ по отношению к производному акридина обусловлены тем, что при более высоком содержании не наблюдается увеличение положительного эффекта, а при более низком - эффект практически отсутствует.

Выбор внутреннего светозащитного компонента - N,N,N^', N^'-тетраметилтионина хлорида в первую очередь определялся его фотохимическими свойствами, а также тем , что вещество уже около 80 лет с успехом используется в медицинской практике при парентеральном способе введения в концентрациях более, чем в тысячи раз превышающих предлагаемые для использования в данной лекарственной форме (Государственная фармакопея СССР. Х издания. ФС 407-"Метиленовый синий").

Используемый для стабилизации рН растворов цитратный буфер, не содержит способствующих фотодеструкции групп (фенольных гидроксилов и первичных (вторичных аминогрупп) и, следовательно, не вызывает повышения светочувствительности производного акридина, а также совершенно безвреден.

Заявляемый интервал рН растворов обусловлен тем, что при более высоких значениях рН, чем 8,3 наблюдается снижение стабильности лекарственного средства, а при более низких значениях, чем 6,7, наблюдается появление взвеси плохо растворимого в воде 10-метиленкарбокси-9-акридона.

Данные по эффективности лечения предлагаемым лекарственным средством различных заболеваний, в том числе и тяжелых, не поддающихся лечению известными препаратами, приведены в табл.1-3.

Препарат не вызывает побочных эффектов, кожно-раздражающего действия, хорошо переносится подопытными животными. LD₅₀ при внутривенном способе введения (белые крысы) составляет 400-450 мг/кг, при внутримышечном - 600-680 мг/кг, при внутрибрюшинном - 1100-1200 мг/кг.

П р и м е р. В 900 мл воды для инъекций (апирогенной воды) растворяют 4,0 г цитрата натрия, затем 100 г натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридона. При перемешивании к полученному раствору добавляют 0,05 г N,N,N^', N^'-тетраметилтионина хлорида (метиленового синего). рН полученного раствора доводят 10%-ной соляной кислотой до 7,5 (исходное рН смеси 10,35). Раствор фильтруют через мембранный фильтр "Владипор" МФА-ЭМ N 1 с размером пор 0,2 мкм. Объем отфильтрованного раствора доводят до 1000 мл водой для инъекций. Разливают во флаконы (марка стекла НС-1) по 10 мл. Герметично укупоривают под обкатку. Стерилизуют в автоклаве. Получают 98 флаконов (2 флакона - брак, не выдержали стерилизации) лекарственного средства, содержащих по 10 мл 10%-ного стерильного прозрачного раствора, устойчивого к действию света и выдерживающих хранение при комнатной температуре в течение 2,5 лет (срок наблюдения).

Выход конечной продукции в лабораторных условиях 97-98, в заводских - 95-97%.

В предлагаемом способе получения лекарственного средства возможно варьировать концентрацию основного вещества от 0,1% до 25%, а также объем ампул и флаконов, без изменения приемов изготовления, и нет необходимости в проведении каких-либо стадий в атмосфере инертного газа.

Предлагаемый способ, в отличие от способа-прототипа, позволяет получить высокоэффективное, стабильное при длительном хранении, не подвергающееся инактивации на свету лекарственное средство.

Формула изобретения

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТИВОВИРУСНОГО СРЕДСТВА путем растворения буферного вещества, производного акридина, установления рН, фильтрации, фасовки и стерилизации, отличающийся тем, что, с целью повышения фармакологической активности целевого продукта и одновременного придания противоопухолевой активности, в раствор дополнительно вводят N,N,N',N'-тетраметилтионина хлорид, затем устанавливают рН 6,7 - 8,3, при этом в качестве производного акридина используют натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон, в качестве буферного вещества - цитратный буфер.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что массовое соотношение производного акридина и буферного вещества 1 : (0,01 - 0,1).

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что массовое соотношение производного акридина и N,N,N',N'-тетраметилтионина хлорида 1 : (0,001 - 0,01).

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4