Способ получения биологически активного вещества из животного сырья

 

Использование: в медицине, а именно, химико-фармацевтической промышленности. Сущность изобретения: рога сайги измельчают и экстрагируют 0,25% -ной смесью раствора аммиака и бензилбензоата (в соотношении 3:1) при соотношении сырье-экстрагент 1:3 в течение 45-50 ч. при периодическом перемешивании, далее экстракт отделяют, а осадок повторно экстрагируют 3-кратным количеством экстрагента в течение 21-27 ч. при перемешивании, затем экстракты объединяют, отстаивают в течении 10-14 ч. надосадочную жидкость кипятят в течение 2,5-3,5 ч. и очищают. Технический результат сайвилен не токсичен, обладает стимулирующим, адаптогенным, антистрессовым действием, расширяет ассортимент биологически активнных веществ из животного сырья.

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается получения биологически-активных веществ из животного сырья, обладающих адаптогенным действием.

Известен способ получения биологически-активных веществ из ткани животных. Ткань после голодания животного подвергают глубокому замораживанию, затем измельчают и экстрагируют 0,1 N соляной кислотой. Экстракт центрифугируют. Целевой продукт используют для увеличения привеса животных.

Известно обладающее общетонизирующим действием лекарственное средство, представляющее собой экстракт из пантов самца северного оленя (авт.св. N 350480, 1972).

Наиболее близким по технической сущности является способ получения пантакрина. Для получения целевого продукта панты измельчают, обрабатывают острым паром 25-30 мин и затем экстрагируют 4-кратным количеством 96^о спирта при 78^оС в течение 6 ч. Последующую 3-разовую экстракцию проводят 3-кратным количеством 80^о этанола по 6 ч каждая. Экстракты объединяют, этанол отгоняют и остаток таблетируют. Пантокрин используется как тонизирующее средство при переутомлении, неврастении, неврозах, при слабости сердечной мышцы, гипотонии.

Недостатком известного способа является воздействие высоких температур, что влияет на биологическую активность целевого продукта (авт. св. N 196049, 1967).

Целью изобретения является расширение арсенала биологически-активных веществ, выделенных из животного сырья.

Заявленное изобретение касается получения биологически-активного препарата из рогов сайги, названного сайвиленом и обладающего адаптогенным действием.

Для достижения поставленной цели измельченные рога сайги экстрагируют 0,25% смесью раствора аммиака и бензилбензоата (в соотношении 3:1), взятых в соотношении сырье:экстрагент 1:3, настаивая в течение 45-50 ч, периодически перемешивая. Затем экстракт сливают, а осадок повторно экстрагируют 3-кратным количеством того же экстрагента в течение 24 ч при периодическом перемешивании. Далее экстракты объединяют, отстаивают в течение 10-14 ч, надосадочную жидкость отделяют, кипятят в течение 2,5-3,5 ч и очищают.

Пример конкретного осуществления способа. 100 г измельченного сырья - рогов сайги заливают экстрагентом, представляющим собой 0,25% смесь раствора аммиака и бензилбензоата (в соотношении 3:1). Экстракцию проводят в соотношении сырье:экстрагент 1:3, настаивая в течение 48 ч при периодическом перемешивании. После настаивания извлечение сливают, материал отжимают и повторно экстрагируют тем же экстрагентом 3-кратным количеством. Настаивание проводят в течение 24 ч в периодическом перемешивании. Второе извлечение сливают, материал отжимают. Экстракты объединяют, отстаивают в течение 12 ч, надосадочную жидкость кипятят в течение 3 ч при добавлении 5% по отношению к объему жидкости каолина. Полученную суспензию отстаивают в течение 48 ч. Осветленную жидкость сливают, не взмучивая, и фильтруют на нутч-фильтре. Прозрачный фильтрат сгущают под вакуумом до консистенции густого экстракта и сушат. Выход экстрактивных веществ составляет 9-11% в пересчете на сухое измельченное сырье.

Полученный предложенным способом препарат сайвилен представляет собой порошок светло-коричневого цвета со специфическим запахом, солоноватого вкуса, растворимый в воде. Количественный состав в процентном соотношении: 95,7 - органические вещества и 4,3 - общей золы.

Препарат сайвилен, полученный предложенным способом, не токсичен, обладает стимулирующим действием, а также проявляет адаптогенный и антистрессорный эффекты.

Острую токсичность сайвилена изучали на интактных мышах линии BAlB/c, гибридных BDF,F₁ (массой 18-22 г) и белых беспородных крысах (массой 90-100 г), морских свинках (массой 200-300 г) и кроликах породы шиншилла (массой 2,5-3,5 кг) по методу Першина Г.Н.

2- и 3%-ные водные растворы вводили однократно внутрижелудочно мышам в дозах: 200, 300, 400, 500 мг/кг; крысам - 100, 200, 300 мг/кг; морским свинкам - 100, 200, 350 мг/кг и кроликам - 250, 360, 450 мг/кг. Контрольные животные получали равный объем дистиллированной воды, соответствующий ему в исследуемом препарате. Эксперименты показали, что ЛД₅₀ для сайвилена не определяется. Даже в дозах 500, 450, 350 и 300 мг/кг при внутрижелудочном введении мышам, кроликам, морским свинкам и крысам соответственно препарат не вызвал гибели. При наблюдении за состоянием и поведением животных в течение 30 сут после дачи сайвилена не обнаружено отклонений от физиологической нормы. Таким образом сайвилен не токсичен.

Стимулирующее действие сайвилена исследовали по методу плавания (Брехман И.И., 1968 г.) путем регистрации спонтанного времени плавания испытуемых животных до полного утомления (до момента гибели).

Сайвилен вводили перорально однократно мышам в дозах 4, 6, 8, 10 мг/20 г; крысам в дозах 4, 6, 8, 10, 14, 20, 30, 40 мг/100 г. Контрольные животные получали воду в объеме содержания ее в исследуемом препарате.

Стимулирующий эффект в опытах на мышах был в пределах 54-62%, на крысах 54-70% . При многократном введении препарата наилучший эффект наблюдался в дозе 30 мг/100 г, продолжительность плавания подопытных животных превысила контроль на 175% и на 112% в сравнении с панкреатином.

Проведенные сравнительные исследования стимулирующего действия сайвилена с настойкой панкреатина показали преимущества испытуемого препарата в пределах 21-112%.

Адаптогенный эффект установлен на мышах линии С₅₇. Изучали сопротивляемость организма к физическому фактору - охлаждению. Препарат вводили однократно внутрижелудочно в дозах 4, 6, 8 мг/20 г.

Контрольные животные получали равный объем воды. Затем животных помещали в морозильную камеру с температурой - 12^оС с постоянным воздухообменом. Об адаптогенном действии препарата судили по продолжительности жизни животных по сравнению с контролем. Мыши, получавшие препарат в дозе 4 мг/20 г прожили на 45% дольше по сравнению с контролем и на 25% по сравнению с животными, которым вводили пантокрин.

Антистрессорный эффект изучен методом иммобилизации крыс сроком на 24 ч. Сайвилен в дозе 30 мг/100 г уменьшал количество язв на 35%.

Препарат сайвилен, полученный предложенным способом, высокоэффективен, не токсичен, обладает стимулирующим, адаптогенным и антистрессорным действием.

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНОГО ВЕЩЕСТВА ИЗ ЖИВОТНОГО СЫРЬЯ путем экстракции измельченного сырья органическим растворителем с последующим отделением целевого продукта, отличающийся тем, что в качестве сырья используют рога сайги, при этом экстракцию проводят 0,25%-ной смесью раствора аммиака и бензилбензоата, взятых в соотношении 3:1, при соотношении сырье: экстрагент 1: 3 в течение 45-50 ч при периодическом перемешивании, затем экстракт отделяют, а осадок повторно экстрагируют 3-кратным количеством экстрагента в течение 21-27 ч при перемешивании, далее экстракты объединяют, отстаивают в течение 10-14 ч, надосадочную жидкость кипятят в течение 2,5 - 3,5 ч и очищают.