Способ определения карбенициллина в растворе
Авторы патента:
Использование: в фармакологии. Сущность изобретения: определение проводят в фосфатном буфере pH 4,1-4,7, нагревая пробу на водяной бане в присутствии лимонной кислоты с концентрацией 2-5 мг/мл и сульфата меди с концентрацией 200-400 мкг/мл, с последующим измерением флуоресценции образца. Способ позволяет повысить чувствительность анализа. 6 табл.
Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения карбенициллина в лекарственных формах.
Карбенициллин - отечественный препарат, относящийся к классу -лактамных антибиотиков. В настоящее время широко используются для количественного определения антибиотиков и карбенициллина, в частности, титрометрические методы, микробиологические методы, спектрофотометрические методы. Было показано, что для количественного определения антибиотиков можно использовать собственную флуоресценцию вещества, однако карбенициллин в водной среде самостоятельно флуоресцирует довольно слабо. В известной монографии показана возможность определения карбенициллина тонкослойной хроматографией с денситометрией флуоресцирующих пятен, но к сожалению у данного метода очень не высокая чувствительность - около 150 мкг. Был разработан чувствительный способ определения некоторых -лактамных антибиотиков, основанный на кислотном гидролизе и измерении флуоресценции в щелочной среде, но для карбенициллина чувствительность данного метода оказалась не столь высокой. В качестве прототипа был выбран метод флуориметрического определения карбенициллина по Belal F. Целью изобретения является повышение чувствительности флуориметрического определения карбенициллина, что достигается гидролизом в фосфатном буфере рН 4,4 в присутствии лимонной кислоты и сульфата меди (II). Сущность заявленного способа определения карбенициллина заключается в том, что к пробе карбенициллина прибавляют фосфатный буфер рН 4,4, лимонную кислоту и раствор сульфата меди (II), после чего нагревают на кипящей бане 30 мин и после охлаждения измеряют флуоресценцию. Для достижения поставленной цели были определены оптимальные условия определения карбенициллина. В табл.1 показаны спектры возбуждения и испускания флуоресценции карбенициллина, определенные на флуориметре БИАН-130 М, в качестве регистрирующего прибора использовали зашунтированный цифровой вольтметр с сопротивлением шунта 300 кОм. Как видно из табл.1, максимум флуоресценции достигается при длине волны возбуждения 365 нм и длине волны эмиссии 470 нм. Далее была исследована зависимость флуоресценции карбенициллина от рН фосфатного буфера, которая представлена в табл.2. Из табл. 2 следует, что оптимальные значения рН буферного раствора находятся в пределах 4,1 - 4,75. Далее также были определены оптимальные концентрации лимонной кислоты и сульфата меди (II), представленные в табл.3 и 4 соответственно. Анализ табл.3 и 4 приводит к заключению, что при концентрации лимонной кислоты 2-5 мг/мл и концентрации сульфата меди 200-400 мкг/мл достигается максимальная флуоресценция карбенициллина. Сравнение предложенного способа определения карбенициллина и ранее известных представлены в табл.5. Как видно из табл.5 предложенный способ позволяет с высокой чувствительностью (1 мкг/мл) определять карбенициллин, в то время как известные способы флуориметрического определения карбенициллина не приводят к желаемому результату. Линейная зависимость флуоресценции от содержания карбенициллина в пробе лежит в пределах 1-50 мг. Воспроизводимость заявленного способа определения карбенициллина была оценена на серии из 5 определений и представлена в табл.6. П р и м е р. Реактивы и материалы: 0,1 М калий-фосфатный буфер рН 4,4; 1,0%-ный раствор сульфата меди (II); 5,0%-ный раствор лимонной кислоты. Карбенициллин, расфасованный в стеклянные флаконы по 1 г, берут точную навеску 10 мг и растворяют в мерной колбе на 100 мл, доводя до метки дистиллированной водой. В пробирку к 4,0 мл 0,1 М фосфатного буфера рН 4,4 прибавляют 0,5 мл 5%-ного раствор лимонной кислоты, 0,1 мл 1,0% раствора сульфата меди и 0,5 мл пробы, содержащей карбенициллин. Далее содержимое пробирки перемешивают и подогревают на водяной бане при 100оС 30 мин. После охлаждения измеряли флуоресценцию при длине волны возбуждения 365 нм и длине волны эмиссии 470 нм в кювете объемом 5 мл. В качестве контроля вместо пробы карбенициллина прибавляли дистиллированную воду, после чего проводили аналогичные измерения. Количество карбенициллина в пробе определяли по градуировочному графику, построенному на стандартных растворах.Формула изобретения
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАРБЕНИЦИЛЛИНА В РАСТВОРЕ, включающий кислотный гидролиз при 100oС в течение 30 мин раствора карбенициллина, флуориметрирование и расчет относительного контроля, отличающийся тем, что гидролиз раствора карбенициллина проводят в фосфатном буфере с рН 4,1 - 4,75, содержащем лимонную кислоту в концентрации 2 - 5 мг/мл и сульфат меди (II) в концентрации 200 - 400 мкг/мл.РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2
Похожие патенты:
"антигерпетическое средство "мегосин" // 1720649
Лекарственный препарат // 391832
Способ получения каротина // 102026
Изобретение относится к мясной промышленности, а именно к производству продуктов из крови убойных животных, в качестве лечебно-профилактических средств для детей
Изобретение относится к новым полиеновым соединениям формулы I, где R1 - COR9; R2, R4, R6 - водород; R3, R5, R10, R11 - водород или низший алкил; R7 - циклоалифатический радикал или низший алкил; R8 - радикал -O-CH2-OCH2-CH2-O-CH3 или OR11; R4 и R6 взятые вместе могут образовывать с соседним бензольным циклом нафталиновый цикл; R9 - O-R10, а также их солям и их оптическим и геометрическим изомерам
Изобретение относится к новым и улучшенным композициям, предназначенным для лечения, и к способам лечения людей, а также животных с целью снижения повреждения ДНК, усиления репаративной способности ДНК и стимуляции иммунной функции клетки
Изобретение относится к группе производных аминоэтилфеноксиуксусной кислоты, представленной следующей формулой: где R1 представляет собой атом водорода, низшую алкильную группу или аралкильную группу; R2 представляет собой атом водорода или атом галогена; причем атом углерода с пометкой (R) означает атом углерода в (R)-конфигурации; атом углерода с пометкой (S) означает атом углерода в (S)-конфигурации, или их фармацевтически приемлемым солям, фармацевтическим композициям, стимулирующим действие на 2- и 3-адреноценторы, включающая в качестве активного ингредиента производных аминоэтилфеноксиуксусной кислоты, средству для успокоения боли и способу успокоению боли
Изобретение относится к медицине и касается приминения 1-гидрокси-4-циклогексиламиноадамантана гидрохлорида в клинической практике для лечения астенических состояний, нарколепсии, предупреждения и купирования психического и физического переутомления
Изобретение относится к медицине и пищевой промышленности и может быть использована при изготовлении диетических продуктов питания