Способ получения производных триазола

 

Способ получения противогрибковых соединений производных триазола ф-лы 1 и их фармацевтически приемлемых солей, где R-фенил, замещенный 1-3 атомами; R₁-C₁-C₄ -алкил; Y-F или Cl, путем восстановления соединений ф-лы 2, где Z₁ и Z₂ или группа, которая может быть удалена восстановлением. Структура соединений ф-л 1 и 2: . 5 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к способу получения производных триазола, проявляющих противогрибковую активность, а именно к способу получения 2-арил-3-(3-галопиридин-4-ил или 5-галопиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)алкил-2-ольных производных, применимых для борьбы с грибковым инфекциям животных и человека.

Соединения настоящего изобретения обладают неожиданно высоким уровнем противогрибковой активности, в частности против грибков вида Aspergillus, что в основном относят за счет их неожиданно хороших фармoкинетичес-ких свойств, следствием чего являются более длительные периоды полураспада (значения t_1/2).

Изобретением предлагаются противогрибковые средствал формулы (1) и их фармацевтически приемлемые соли, где R фенил, замещенный 1-3 галозаместителями; R₁ С₁-С₄-алкил; Y F или Cl.

В формуле (1) галоид представлен F, Cl, Br или I, С₃-С₄-алкил имеют нормальное или изостроение. Рекомендуемые алкильные группы включают метил и этил.

Примеры R включают 2-фторфенил, 4-фторфенил, 2-хлорфенил, 4-хлорфенил, 2-бромфенил, 2-йодфенил, 2,4-дихлорфенил, 2-хлор-4- фторфенил, 2-фтор-4-хлорфенил, 2,5-дифторфенил, 2,4,6-трифторфенил и 4-бром-2,5-дифторфенили. Рекомендуется, чтобы R представлял фенил, замещенный 1-3 галоидными заместителями, более предпочтительно 1 или 2 галоидных заместителя. Еще более предпочтительно, чтобы R представлял фенил, замещенный 1 или 2 заместителями, каждый независимо выбранный из фтора и хлора.

Рекомендуемые и дивидуальные воплощения R включают 2-фторфенил, 4-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 2-хлорфенил и 2,4-дихлорфенил. Более предпочтительно, когда R представляет 2-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 2-хлорфенил или 2,4-дихлорфенил.

Предпочтительно R₁-метил.

Предпочтительно Y-R.

Фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) включают соли с кислотами, образованные присоединением кислот, дающих неядовитые соли, такие как хлоргидрат, бромгидрат, йодгидрат, сульфат или бисульфат, фосфат или гидрофосфат, ацетат, малеат, бумарат, лактат, тартрет, цитрат, глюконат, бензоат, метансульфонат, бензолсульфонат и п-толуолсульфонат (Berge и др. I. Pharm. Sci. 66, 1-19, 1977).

Соединения формулы (1) содержат по меньшей мере два хиральных центра (*) и существуют в виде по меньшей мере двух диастереомерных пар энантиомеров, например Изобретение включает как индивидуальные стереоизомеры соединений формулы (1), так и их смеси. Разделение диастереомеров может быть осуществлено обычнымы методами, например фракционной кристаллизацией, хроматографией или ВЭЖХ диастереомерной смеси соединения формулы (I), или его приемлимой соли, или его производного. Индивидуальный энантиомер соединения формулы (I) может быть также получен из соответствующего оптически чистого промежуточного соединения путем разрешения рацемата либо с помощью ВЭЖХ применением приемлемого хирального носителя, либо фракционной кристаллизацией диастемерных солей, образованных в реакции рацемата с приемлемой оптически активной кислотой, например 1R(-)- или 1S-(+)-10-камфорсульфоновой кислотой.

Предпочтительные соединения формулы (I) имеют 2R, 3S-конфигурацию, т.е.

NN
Особенно рекомендуемые индивидуальные воплощения соединений настоящего изобретения включают
2R, 3S-2-(2,4-дифторфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4- триазол-1-ил)бутан-2-ол,
2R, 3S-2-(2,4-дихлорфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4- триазол-1-ил)бутан-2-ол и их фармацевтически приемлемые соли.

Соединения формулы (I) могут быть синтезированы согласно схеме
NN где R, R₁, R₂ и Y принимают значения, указанные для соединения формулы (I); Z₂ и Z₃ каждый независимо выбирают из водорода и группы, которая может быть селективно удалена восстановлением, при условии, что Z₂ и Z₃не могут оба представлять водород, рекомендуется, чтобы Z₂ группа, которая может быть селективно удалена восстановлением, а Z₃ H. Предпочтительно, чтобы удаляемая селективным восстановлением группа была представлена галоидом, т.е. F, Cl, Br или I, и наиболее предпочтительно хлором.

Если указанная группа представлена галоидом, предпочтительно хлором, тогда в качестве способа восстановления рекомендуется гидрогенолиз. Согласно обычной методике соединение формулы (II) подвергают гидрогенолизу использованием приемлимого катализатора, например палладия на угле, и приемлемого растворителя, например этанола, возможно в присутствии доплнительного приемлемого основания, например ацетата натрия. Реакция может быть осуществлена при температуре от комнатной до температуры кипения растворителя и давлении 100-500 кПа, но обычно успешно протекает при комнатной температуре и атмосферном давлении.

Промежуточные соединения формулы (II), где один из Z₂ и Z₃представляет водород, а другой группу, которая может быть селективно удалена восстановлением, могут быть получены обычным образом согласно схеме 2:
где R, R₁, R₂ и Y принимают значения, указанные для соединения формулы (I), один из Z₂ и Z₃ представляет водород, а другой группу, которая может быть селективно удалена восстановлением.

В типичной методике соединение формулы (III) депротонизируют добавлением примерно одного эквивалента приемлемого основания, например диизопропиламида лития или бис(триметилсилил)амида натрия или калия, и образовавшееся промежуточное металлоорганическое соединение вводят in situ в реакцию с соединением формулы (III). Обычно реакцию проводят при температуре от -80 до -50^оС, предпочтительно при -70^оС, в приемлемом органическом растворителе, например тетрагидрофуране, толуоле или диэтиловом эфире, и в инертной атмосфере, например азоте или аргоне.

Исходные продукты формулы (IV) либо известны, либо могут быть синтезированы.

Промежуточные соединения формулы (II), где один из Z₂ и Z₃представляет водород, а другой группу, которая может быть селективно удалена восстановлением, могут быть также получены методом, показанным на схеме 3:

Реакцию рекомендуют проводить с применением в качестве исходного продукта эпоксида формулы (V). При использовании в процессе соединения формулы (VI) вероятно, что механизмом реакции диктуется по крайней мере частично образование в условиях реакции in situ соответствующего эпоксида формулы (V). С этой точки зрения этот процесс аналогичен процессу, использующему в качестве исходного продукта эпоксид формулы (V).

При использовании основной соли 1Н-1,2,4-триазола реакцию обычно проводят при температуре от комнатной до 100^оС, предпочтительно 60^оС при использовании натриевой соли 1Н-1,2,4-триазола и предпочтительно при комнатной температуре при использовании cоответствующей тетра-н-бутиламмониевой соли, в приемлемом органическом растворителе, например N,N-диметилформамиде или тетрагидрофуране. Или же реакция может быть осуществлена использованием 1Н-1,2,4-триазола в присутствии дополнительного приемлемого основания, например Na₂CO₃ или К₂СО₃, предпочтительно при 50-100% в приемлемом растворителе, например N,N-диметилформамиде, метаноле или водном ацетоне.

Исходные продукты формулы (XII) могут быть синтезированы обычными методами, такими как приведенные в препаративном разделе.

Промежуточные соединения формулы (III), где Z₂ и Z₃ каждый представлен группой, которая может быть селективно удалена восстановлением, могут быть получены методом, аналогичным показанным в предыдущей схеме, с использованием в качестве исходного продукта соответствующего эпоксида, который может быть синтезирован по обычной методике согласно схеме 4:
рбо- где R, R₁, R₂ и Y принимают значения, указанные для соединения формулы (I); Z₂ и Z₃ каждый представляет группу, которая может быть селективно удалена восстановлением; Z₄ хлор или С₁-С₄-алкоксигруппа.

Все приведенные реакции являются обычнымы, выбор соответствующих реагентов и условий проведения этих реакций, а также методов выделения целевых продуктов осуществляют в соответствии с литературными источниками.

Фармацевтически приемлемые соли, образованные добавлением кислот, могут быть легко получены совместным смешиванием растворов, содержащих свободное основание и целевую кислоту. Соль, как правило, осаждается из раствора, ее отделяют фильтрованием или же выделяют испарением растворителя.

Соединения формулы (I) и их соли относятся к противогрибковым средствам, применимым для лечения или профилактики грибковых инфекций животных и человека. Например, соединения применимы для лечения местных грибковых инфекций человека, вызванных среди прочих микроорганизмов грибками вида Candida, Trichophyton, Microsporum или Epidermophyton, или грибковых инфекций, вызванных Candida albicans (например, кандидозного стоматика или кандидоза влагалища). Соединения могут быть также использованы для лечения общих грибковых инфекций, вызванных, например, видами Candida (Candida albicans), Cryptococcus neoformans, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Coccidiodes, Paracoccidiodes, Histoplasma или Blastomyces.

Соединения, получаемые с помощью настоящего изобретения обладают неожиданно высокой активностью по отношению к клинически важным видам грибков Aspergillus, что относят за счет неожиданно хороших фармокинетических свойств соединений, в результате чего они характеризуются более длительными периодами полураспада (значениями t_1/2).

Выявление противогрибковой активности in vitro соединений может быть проведено путем определения минимальной ингибирующей концентрации (МИК), т. е. концентрации испытуемого соединения в приемлимой среде, при которой не происходит роста конкретного микроорганизма. На практике ряд пластинок с агаром, на которые нанесено испытуемое соединение в определенной концентрации, заражаются стандартной культурой, например Candida albicans, и каждую пластинку затем инкубируют 48 ч при 37^оС. После этого отмечают наличие или отсутствие на пластинке роста грибка, на основании чего и определяют МИК. Другие микроорганизмы, применяемые в подобных испытаниях, могут включать Aspergillus fumigatus вида Trikchophyton, вида Microsporum, Fridermophiton flocossum, Coccidioides immites и Torulopsis Qlabrata.

Испытания соединений in vivo может быть проведено путем внутрибрюшинных или внутривенных инъекций ряда дозировочных уровней или пероральным введением мышам, зараженным штаммом Candida albicans или Aspergillus fumigatus. Активность в этом случае основана на выживаемости группы обработанных соединением мышей после смерти группы необработанных мышей. При этом замечают уровень дозировки, при которой соединение обеспечивает 50%-ую защиту от летального действия инфекции (ЗД₅₀). В модели инфекции видами Aspergillus ряд мышей, вылеченных от инфекции после последовательности дозировок, позволяет осуществить дальнейшее определение активности.

Для лечения человека противогрибковые соединения формулы (I) могут быть использованы в чистом виде, но, как правило, их вводят в смеси с фармацевтичвеским носителем, выбранным с учетом намеченного пути введения и обычной фармацевтической практики. Соединения могут быть введены перорально в виде таблеток, содержащих такие наполнители, как крахмал или лактоза, или в капсулах или пузырьках в чистом виде или в смеси с наполнителями, или в виде элексиров, растворов или суспензий, включающих вкусовые и окрашивающие добавки. Соединения могут быть инъектированы перентерально, например, внутривенно, внутримышечно или подкожно. Для парентерального введения соединения лучше всего использовать в виде стерильного водного раствора, который может включать и другие вещества, например достаточное количество солей или глюкозы для придания раствору изотоничности с кровью.

Растворимость соединения формулы (I) в водной среде может б ыть улучшена за счет образования комплекса с гидроксиалкильным проивзодным циклодекстрина при получении соответствующей фармацевтической композиции. Рекомендуется, чтобы применяемым циклодекстрином был альфа-, бета- или гамма-циклодекстнин, наиболее предпочтителен бета-циклодекстрин. Рекомендуемым гироксилкальным производным является гидроксипропильное производное.

При пероральном и парентеральном введении больному ежедневный дозировочный уровень противогрибковых соединений формулы (I) и их солей составляет 0,01-20 мг/кг (в единственной или поделенной дозировке). Так, таблетки или капсулы соединений содержат от 5 мг до 0,5 г активного соединения для введения одной дозировочной формы или двух или более форм за раз в зависимости от назначения. В любом случае лечаший врач сам определяет реальную дозировку, наиболее приемлемую для индивидуального больного, которая меняется в зависимости от возраста, веса и реакции конкретного больного. Указанные дозировки являются примерами усредненных дозировок, в отдельных случаях они могут быть выше и ниже.

Противогрибковые соединения формулы (I) могут быть использованы в виде свеч или вагинального суппозитария или могут быть нанесены местно в виде лосьона, раствора, крема, мази или порошка-дуста. К примеру, соединения могут быть введены в крем, представляющий собой водную э мульсию полиэтиленгликолей или жидкого парафина, или же они могут быть введены в концентрации 1-10% -ой мази на основе белого воска или белого мягкого парафина в смеси со стабилизаторами или консервантами, если таковые необходимы.

Нижеследующие примеры иллюстрируют синтез соединений формулы (I). Энантиомерная пара В (о ней упоминается в любом из последующих примеров или препаративных примерах, в продуктах примеров 1, 3, 4 и 5, в каждом из которых получена только одна энантиомерная пара из двух возможных является рацемической смесью 2R, 3S- и 2S, 3R-энантиомеров.

П р и м е р 1. 2-(2,4-Дифторфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил) бутан-2-ол.

Раствор 3-(4-хлор-5-фторпиримидин-6-ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1- (1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ола в виде энантиомерной пары В (см. препаративный пример 1). 0,307 г (0,8 ммоль) в этаноле (20 мл) гидрируют при атмосферном давлении и комнатной температуре в присутствии 10% палладия на угле (30 мг) и ацетата натрия (0,082 г, 1 ммоль). Спустя 5 ч добавляют еще 10% палладия на угле (10 мг) и гидрирование продолжают еще 1 ч. Катализатор удаляют фильтрованием, фильтрат концентрируют в вакууме. "Импульсной" хроматографией остатка на окиси кремния с элюированием смесью этилацетат-метанол (97:3) получают после объединения и испарения соответствующих фракций и промывания диэтиловым эфиром заглавное соединение в виде энантиомерной пары В (0,249 г, 89%), т.пл. 127^оС.

Найдено, C 55,08, H 4,0, N 19,96
Вычислено для C₁₆H₁₄F₃N₅O, C 55,01, H 4,01, N 20,05
В 4 мл метанола рстворяют образец заглавного соединения в виде энантиомерной пары В (0,105 г, 0,3 ммоль) и 1R-(-)-10-камфоросульфоновой кислоты (0,07 г, 0,3 ммоль) и смесь выдерживают 2 ч при 0^оС. Фильтрованием образовавшегося кристаллического вещества получают 1R-(-)-10-камфоросульфонат 2R, 3S-2-(2,4-дифторфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил) бутан-2-ола, 0,5 метанола (0,06 г), т.пл. 176^оС, (α)_D²⁵- 49,5^оС (с 2 мг/мл в метаноле).

Найдено, C 53,09; H 5,36; N 11,43
Вычислено для C₂₆H₃₀F₃N₅O₅S 0,5CH₃OH, C 53,27; H 5,36; N 11,73.

Абсолютная конфигурация соединения подтверждена рентгеноструктурным анализом единичного кристалла.

Фильтрат от кристаллизации испаряют в вакууме и распределяют между дихлорметаном (10 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (15 мл). Органический слой слушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении. Остаток и 1S-(+)-10-камфоросульфоновую кислоту (0,46 г, 0,2 ммоль) растворяют в метаноле (3 мл) и выдерживают 2 ч при 0^оС. Фильтрованием кристаллического продукта получают 1S-(+)-10-камфоросульфонат 2S, 3R-2-(2,4-дифторфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2, 4-триазол- 1-ил)бутан-2-ола, 0,5 метанола (0,052 г), т.пл. 176^оС. (α)_D²⁵+54,5^оС (с 2 мг/мл в метаноле).

Найдено, C 53,27; H 5,31, N 11,64
Вычислено для С₂₆Н₃₀F₃N₅O₅ ˙ 0,5CH₃OH, С 53,27, H 5,36, N 11,73.

Образец 1R-(-)-10-камфоромульфонатной соли (1,22 г, 2,1 ммоль), полученной описанным способом, распределяют между дихлорметаном (20 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3 мл). Органический слой промывают водой (5 мл), сушат над сульфатом магния, фильтруют и после испарения в вакууме получают 2R, 3S-2-(2,4-дифторфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4- триазол-1-ил)-бутан-2-ол (0,64 г), т. пл. 127^оС, (α)_D²⁵-62^оС (с 1 мг/мл в метаноле).

Образец 1S-(+)-10-камфоросульфатной соли (1,17 г, 2 ммоль), полученной приведенным способом, обрабатывают описанным способом и получают 2S, 3R-2-(2,4-дифторфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1- (1Н-1,2,4-триазол-1-ил)-бутанол (0,63 г), т.пл. 127^оС, (α)_D²⁵+59,5^оС (с 2 мг/мл в метаноле).

П р и м е р 2. 2-(2,4-Дифторфенил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1- (1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол, энантиомерная пара А.

Заглавное соединение синтезировано способом, аналогичным способу примера 1, использованием в качестве исходного продукта энантиомерной пары А 3-(4-хлор-5-фторпиримидин-6-ил)-2-(2,4- дифторфенил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)-бу- тан-2-ола (см. пропаративный пример 1). Получен продукт с т.пл. 137^оС.

Найдено, C 54,89, H 4,06, N 19,82
Вычислено для C₁₆H₁₄F₃N₅O, C 55,01, H 4,01, N 20,05.

П р и м е р 3. 3-(5-Хлорпиримидин-4-ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1- (1Н-1,2,4-триазол-1-ил)-бутан-2-ол, энантиомерная пара В.

NN NN
Раствор энантиомерной пары В 3-(4,5-дихлорпиримидин-6-ил)-2-(2,4- дифторфенил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ола (см. препаративный пример 5). 0,58 г (1,46 ммоль) в этаноле (20 мл) гидрируют при атмосферном давлении и комнатной температуре в присутствии 10% палладия на угле (45 мг) и ацетата натрия (122 мг, 1,5 ммоль) в течение 7 ч. Затем катализатор отфильтровывают, а фильтрат концентрируют при пониженном давлении. "Импульсной" хроматографией остатка с элюированием этилацетатом получают после объединения и испарения соответствующих фракций заглавное соединение (0,35 г, 72%), т.пл. 128^оС.

Найдено, C 51,68, H 3,89, N 18,58
Вычислено для C₁₆H₁₄ClF₂N₅O 0,3 H₂O, C 51,76, H 2,94, N 18,87
П р и м е р 4. 3-(5-Хлорпиримидин-4-ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1- (1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол, энантиомерная пара А.

Заглавное соединение получено методом, аналогичным методу примера 3, использованием в качестве исходного продукта энантиомерной пары А 3-(4,5-дихлорпиримидин-6-ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1-(1Н- 1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ола, (см. пропара- тивный пример 5). Полученный в виде смолы продукт охарактеризован с помощью ¹Н-ЯМР спектроскопии. ¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ 1,5 (д,3Н), 4,4 (кв. 1Н), 4,67 и 4,82 (АВ кв, 2Н), 6,35 (с,1Н) (ОН) 6,45 (м,1Н), 6,62 (м,1Н), 7,07 (м,1Н), 7,6 (с,1Н), 8,05 (с,1Н), 8,8 (с,1Н) ч/млн.

П р и м е р ы 5-9. Нижеследующие сведенные в табл.1 соединения общей формулы

получены способом, аналогичным способу примера 3, использованием в качестве исходных продуктов, соответствующих 2-арил-3-(4-хлор-5-фторпиримидин-6-ил)-1- (1Н-1,2,4-триазол-1-ил)- бутан-2-олов.

¹Колоночную хроматографию проводят на окиси кремния использованием в качестве элюента смеси этилацетат-метанол (96:4).

²Колоночную хроматографию проводят на окиси кремния использованием в качестве элюента изобутилметилкетона.

³Данные об исходном соединении см. препаративный пример 2.

⁴Данные об исходном соединении см. препаративный пример 3.

⁵Данные об исходном соединении см. препаративный пример 4.

⁶Полученную энантиомерную пару разделяют с помощью ВЭЖХ с использованием хирального носителя (Хирацель R OG ) и элюированием смесью изопропанол-гексан (1:1).

П р и м е р 10. Водный солевой раствор 2R, 3S-2-(2,4-дифторфенил- 3-(5-фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан- 2-ола и гидроксипропил-β-циклодекстрина.

В мерную колбу на 10 мл помещают гидроксипропил-β-циклодекстрин (молярное замещение 0,41, 1 г) и растворяют в дистиллированной воде (около 7 мл). Добавляют хлорид натрия (90 мг) и растворяют, после чего дистиллированной водой объем доводят до 10 мл. К полученному раствору добавляют 2R, 3S-2-(2,4-дифторфенил)-3-(5- фторпиримидин-4-ил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол (100 мг) (см. пример 1) в сосуде, смесь обрабатывают ультразвуком 15 мин и затем перемешивают 2 дня механическим вращением. Добавляют дополнительное количество гидроксипропил- β-циклодекстрина (200 мг) и смесь перемешивают механическим вращением сосуда 1 ч с получением целевого раствора.

Нижеследующими препаративными примерами иллюстрируется синтез некоторых новых исходных соединений, применяемых в рабочих примерах.

Препаративный пример 1. 3-(4-Хлор-5-фторпиримидин-6-ил)-2-(2,4- дифторфенил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол.

(1)-6-Этил-5-фторпиримидин-4-(3Н)-он.

К раствору метоксида натрия (8,64 г, 160 ммоль) в метаноле (50 мл) при 0^оС прибавляют раствор этилового эфира α-фторпропионилуксусной кислоты 12,96 г (80 ммоль) и ацетата формамидина (8,32 г, 80 ммоль) в метаноле (50 мл) и полученную смесь перемешивают 1 ч при 0^оС, около суток при комнатной температуре и наконец 30 мин при кипении. Смесь охлаждают и избыток метоксида натрия нейтрализуют добавлением ледяной уксусной кислоты (10 г). Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении, остаток растворяют в горячем этилацетате, нерастворимый ацетат натрия отфильтровывают и фильтрат концентрируют при пониженном давлении. "Импульсной" хроматографией остатка с элюированием этилацетатом получают после объединения соответствующих фракций и их испарения, а также промывания диэтиловым эфиром заглавное соединение (5,5 г, 48%), т.пл. 105-106^оС.

Найдено, C 50,38, H 4,85, N 19,63
Вычислено для C₆H₇PN₂O, C 50,7, H 4,93, N 19,72.

ЯМР (CDCl₃): δ= 1,25 (Т,3Н, J 10 Гц), 2,65 (кв. 2Н, J 10 Гц), 7,1 (т, 1Н), J 8 Гц), 8,3 (д, 1Н, J 8 Гц), 8,33 (с, 1Н) ppm,
Препаративный пример 1. Хлор-5-фторпиримидин-6-ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1-(1Н-1,2,4- триазол-1-ил)бутан-2-ол.

CO₂H l₃
F
Заглавное соединение также получено методом, приведенном в препаративном примере 6.

(II) 4-Хлор-6-этил-5-фторпиримидин.

Смесь продукта стадии (I) (6,4 г, 45 ммоль) и фосфорилхлорида (30 мл) кипятят 3 ч. Избыток фосфорилхлорида отгоняют при пониженном давлении, а остаток переносят в ледяную воду. Полученную воду и смесь экстрагируют хлористым метиленом (3 х 50 мл), объединенные органические экстракты промывают водой и сушат над сульфатом магния. Растворитель удаляют при пониженном давлении и перегонкой полученного масла при пониженном давлении получают заглавное соединение (4,1 г, 66%), т.кип. 74^оС при 22 мм Но, охарактеризованного с помощью 1Н-ЯМР спектроскопии.

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,3 (т, 3Н, J 10 Гц), 2,9 (кв. 2Н, J 10 Гц), 8,68 (с 1Н) ч/млн.

(III) 3-(4-Хлор-5-фторпиримидин-6-ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1-(1Н- 1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол.

(III). К раствору ДАЛ (20 ммоль) в ТГФ1 (50 мл) в атмосфере азота при -70^оС по каплям в течение 15 мин прибавляют раствор продукта стадии (II) 3,2 г (20 ммоль) в ТГФ1 (30 мл). Полученную смесь перемешивают при той же температуре 3 ч, после чего прибавляют раствор 1-(2,4-дифторфенил)-2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)-этанона (4,46 г, 20 ммоль) в ТГФ (50 мл) и смесь выдерживают 1 ч при -70^оС и затем еще 1 ч при -50^оС. Реакционную смесь нейтрализуют добавлением раствора ледяной уксусной кислоты (1,2 г) и воды (10 мл) и смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры. Органическую фазу отделяют, водную фазу экстрагируют этилацетатом (20 мл), объединенные органические слои сушат над сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Колоночной хроматографией остатка на окиси кремния с элюированием смесью этилацетат-диэтиловый эфир (3:2) вначале получают после объединения и испарения соответствующих фракций, а также промывания диэтиловым эфиром энантилмерную пару. В заглавного соединения (0,94 г, 12%), т.пл. 92^оС.

Найдено, C 49,93, H 3,57, N 18,17
Вычислено для C₁₆H₁₃ClF₃N₅O, C 50,06, H 3,39, N 18,25.

Дальнейшим элюированием после объединения и испарения соответствующих фракций получают энантиомерную пару А заглавного соединения, загрязненного исходным кетоном. Неоднократной перекристаллизацией продукта из диэтилового эфира получают продукт с т.пл. 132^оС.

Найдено, C 49,93, H 3,58, N 18,23.

Вычислено для C₁₆H₁₃ClF₃N₅O, C 50,06, H 3,39, N 18,25
(I) ТГФ может быть заменен толуолом.

Препаративные примеры 2-4.

Нижеследующие, сведенные в табл.2 соединения общей формулы
NN получены методом, аналогичным методу препаративного примера 1 (III), использованием в качестве исходных продуктов 4-хлор-6-этил-5-фторпиримидина и соответствующего 1-арил-2-(1Н- 1,2,4-триазол-1-ил)этанона.

Препаративный пример 5. 3-(4,5-Дихлорпиримидин-6-ил)-2-(2,4- дифторфенил)-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол.

(I) 6-Этилпиримидин-4-(3Н)-он.

К раствору метоксида натрия (4,19 кг, 77,6 моль) и ацетата формамидина (3 кг, 28,8 моль) в метаноле (45 л) при (-5)-(10)^оС медленно добавляют раствор метилового эфира пропионилуксусной кислоты (2,5 кг, 19,2 моль) в метаноле (10 л), поддерживая температуру в ходе добавления ниже 20^оС. Полученную смесь перемешивают примерно сутки при комнатной температуре, после чего добавлением концентрированной соляной кислоты устанавливают рН 7. Реакционную смесь концентрируют при пониженном давлении до объема примерно 10 л, разбавляют водой (10 л) и экстрагируют 2-бутаноном (2 х 30 л). Объединенные органические экстракты концентрируют при пониженном давлении до объема примерно 2 л и разбавляют этилацетатом (4 л). Целевой продукт кристаллизуется из раствора (2,4 кг, 70%) и после перекристаллизации из изопропанола получают продукт с т.пл. 132-134^оС.

Найдено, C 58,45, H 6,37, N 22,41.

Вычислено для C₆H₈N₂O, C 58,06, H 6,5, N 22,57.

(II) 4,5-Дихлор-6-этилпиримидин.

К раствору 6-этилпиримидин-4-(3Н)-она (продукт стадии I) (18,6 г, 150 ммоль) к концентрированной соляной кислоте (120 мл) при 30-40^оС прибавляют в течение 30 мин 30%-ный водный раствор перекиси водорода 18 мл (некоторое повышение температуры) и полученную смесь перемешивают около суток при 40^оС. Смесь концентрируют при пониженном давлении, остаток суспендируют, растворяют в толуоле и толуол удаляют при пониженном давлении. Остаток растворяют в хлорокиси фосфора (150 мл), кипятят 3 ч, после чего избыток хлорокиси фосфора удаляют при пониженном давлении. Остаток переносят в лед с водой, экстрагируют хлористым метиленом (3 х 50 мл), объединенные органические экстракты промывают водой (30 мл) и сушат над сульфатом магния. Растворитель удаляют при пониженном давлении и перегонкой полученного масла при пониженном давлении получают заглавное соединение (5,4 г, 20%), т.пл. 104^оС при 22 мм Но, охарактеризованного с помощью 1Н-ЯМР-спектроскопии.

Препаративный пример 5 3-(4,5-Дихлорпиримидин-2-(2,4-дифторфенил)-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил-бутан-2- ол


NN
¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 1,3 (Т, 3Н, J 10 Гц), 3,04 (кв. 2Н, J 10 Гц), 8,75 (с, 1Н) ч/млн.

(III) 3-(4,5-Дихлорпиримидин-6-ил)-2-(2,4-дифторфенил)-1-(1Н- 1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол.

К раствору ДАЛ (13,6 ммоль) в ТГФ (50 мл) при -70^оС по каплям прибавляют 4,5-дихлор-6-этилпиримидин (продукт стадии II 2,37 г (13,3 ммоль) и полученный раствор перемешивают при той же температуре 10 мин. К реакционной смеси добавляют раствор 1-(2,4- дифторфенил)-2-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)этанона (2,97 г, 13,3 ммоля) в ТГФ (50 мл) с такой скоростью, что температура реакционной смеси не превышает -50^оС. После перемешивания 1 ч при -70^оС и еще час при -50^оС реакционную смесь нейтрализуют добавлением 10%-ной водной уксусной кислоты (11 мл). Органическую фазу отделяют, водную фазу экстрагируют этилацетатом (2 х 20 мл) и объединенные органические слои сушат над сульфатом магния. После удаления растворителя при пониженном давлении остаток промывают диэтиловым эфиром (25 мл) и непрореагировавший исходный кетон (1,7 г) удаляют фильтрованием. Фильтрат концентрируют при пониженном давлении и "импульсной" хроматографией остатка на окиси кремния с элюированием смесью этилацетат-диэтиловый эфир (63:35) вначале получают после объединения и испарения соответствующих фракций и промывания диэтиловым эфиром энантиомерную пару В заглавного соединения (670 мг, 13%), т.пл. 124^оС.

Найдено, C 47,78, H 3,33, N 17,13
Вычислено для C₁₆H₁₃Cl₂F₂N₅O, C 48,0, H 3,25, N 17,5.

Дальнейшим элюированием после объединения, испарения соответствующих фракций и промывания диэтиловым эфиром получают энантиомерную пару А заглавного соединения (527 мг, 10%), т.пл. 137^оС.

Найдено, C 48,02, H 3,3 N 17,39.

Вычислено для C₁₆H₁₃Cl₂F₂N₅O, C 48,00, H 3,25, N 17,5.

Препаративный пример 6. 6-Этил-5-фторпиримидин-4(3Н)-он.

Препаративный пример 6. Этил-5-фторпиримидин-4(3Н)-он.

CH _Cl

(I) 2,4-Дихлор-5-фторпиримидин.

К хлорокиси фосфора (141,4 г) при 25^оС добавляют 5-фторурацил (20 г) в виде порошка, полученную взвесь нагревают до 90^оС и затем в течение 1 ч прибавляют N,N-диметиланилин (37,3 г). После этого реакционную смесь кипятят 5 ч и отгонкой удаляют 70 г хлорокиси фосфора. Затем смесь охлаждают до 25^оС и порциями в течение 1 ч переносят в охлажденную до 0^оС 3н. HCl. Заглавное соединение экстрагируют из полученной смеси дихлорметаном (2 х 70 мл). Объединенные дихлорметановые соли промывают водой (50 мл) и концентрированием в вакууме получают масло (24 г), охарактеризованное с помощью ¹Н-ЯМР-спектроскопии.

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,5 (с, 1Н) ч/млн.

MC: m/e 166.

(II) 2,4-Дихлор-1,6-дигидро-6-этил-5-фторпиримидин.

К стружкам магния (4,27 г) в тетрагидрофуране (56 мл) в течение 5 ч прибавляют раствор бромэтана (19 г) в ТГФ (19 мл). К полученной взвеси при 0^оС в течение 1 ч прибавляют раствор продукта стадии (I) 24 г в 1,2-диметоксиэтане (70 мл). Реакционную смесь нейтрализуют при 10^оС добавлением ледяной уксусной кислоты (10 г) и получают раствор заглавного соединения, который непосредственно используют на следующей стадии.

(III) 2,4-Дихлор-6-этил-5-фторпиримидин.

К раствору, полученному в качестве продукта на стадии (II), в течение 2 ч прибавляют раствор перманганата калия (23 г) в воде (260 мл), поддерживая температуру реакционной смеси ниже 20^оС. Затем добавляют 5н. соляную кислоту с последующим прибавлением раствора метабисульфита натрия (14 г) в воде (42 мл). После обесцвечивания смеси продукт экстрагируют этилацетатом (250 мл). Последующим концентрированием органического слоя получают масло. Масло распределяют между дихлорметаном (50 мл) и 2н. раствором гидрокиси натрия (105 мл), органический слой промывают 5%-ным рассолом (100 мл) и после концентрирования получают раствор заглавного соединения, который непосредственно используют на следующей стадии.

(IV) 2-Хлор-6-этил-5-фторпиримидин-4-(3Н)-он.

К полученному в качестве продукта на стадии (III) раствору добавляют воду (6 мл), смесь перемешивают при 80^оС с медленным прибавлением в течение 2 ч 4н. раствора гидроокиси натрия. После этого реакционную смесь охлаждают и промывают дихлорметаном (15 мл). Водный слой добавляют к дихлорметану (60 мл) и прибавлением концентрированной соляной кислоты устанавливают рН 1. Органический слой отделяют и добавлением концентрированного водного раствора аммиака устанавливают рН 3. Осадок хлорида аммония отфильтровывают, фильтрат концентрируют до объема 15 мл и разбавляют этилацетатом (150 мл). Раствор концентрируют до объема 30 мл, образовавшиеся кристаллы заглавного соединения отфильтровывают и после высушивания (8 г) характеризуют с помощью ¹Н-ЯМР и масс-спектрометрии. ¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 7,3 (обмениваемые) 2,4 (м, 2Н), 1,1 (т, 3Н) ч/млн.

МС: m/e 176.

(V) 6-Этил-5-фторпиримидин-4-(3Н)-он.

К продукту стадии IV (6 г) в этаноле (60 мл) добавляют ацетат натрия (5,5 ) и 5%-ный палладий на угле (0,6 г). Смесь гидрируют 3 ч под давлением в 3 атм. Катализатор отфильтровывают, фильтрат концентрируют до объема в 10 мл и затем смешивают с водой (2 мл) и дихлорметаном (80 мл). Добавляют толуол (32 мл), раствор концентрируют до объема в 5-6 мл и затем смешивают с дополнительным количеством толуола (8 мл). Выделившиеся кристаллы заглавного соединения отфильтровывают и характеризуют с помощью ¹Н-ЯМР и масс-спектрометрии (вывод 3,9 г).

¹Н-ЯМР (ДМСО-d₆) δ: 8 (с, 1Н), 2,5 (м, 2Н), 1,15 (т, 3Н) ч/млн.

MC: m/e 142.

Препаративный пример 7. 2-Хлор-4-этил-5-фторпиримидин.

(I) Диэтиловый эфир 2-метил-2-(2-хлор-5-фторпиримидин-4-ил) пропандиовой кислоты.

Проводят реакцию при -10^оС в ТГФ (200 мл) между гидридом натрия (60%-ная дисперсия в масле, 2,8 г) и диэтиловым эфиром метилмалоновой кислоты (6 г). Через 30 мин при -10^оС в течение 30 мин прибавляют раствор 2,4-дихлор-5-фторпиримидина 5 г (см. препаративный пример 6) в ТГФ (200 мл). Реакционную смесь распределяют между дихлорметаном (200 мл) и водой (200 мл), подкисляют уксусной кислотой и слои разделяют. Органичепский слой концентрируют при пониженном давлении и полученное масло хроматографируют на окиси кремния с элюированием дихлорметаном. В результате после объединения и испарения соответствующих фракций получают заглавное соединение (9 г), охарактеризованное с помощью ¹Н-ЯМР и масс-спектрометрии.

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,5 (д, 1Н), 4,6 (м, 4Н), 1,9 (с, 3Н), 1,3 (т, 3Н) ч/млн.

MC: m/e 304.

(II) 2-Хлор-4-этил-5-фторпиримидин.

Продукт стадии I (3,2 г) растворяют в уксусной кислоте (25 мл) и разбавляют 5н. соляной кислотой (10 мл). Смесь нагревают при 100^оС 16 ч, охлаждают и распределяют между водой (30 мл) и дихлорметаном (45 мл). Дихлорметановый слой отделяют, сушат и концентрированием при пониженном давлении получают масло. Заглавное соединение выделено хроматографией на окиси кремния с элюированием дихлорметаном. Продукт охарактеризован с помощью ¹Н-ЯМР и масс-спектрометрии (выход 350 мг).

¹Н-ЯМР (CDCl₃) δ: 8,4 (с, 1Н), 2,9 (м, 2Н), 1,3 (т, 3Н) ч/млн.

MC: m/e 160.

Выявление активности in vivo на мышах против Aspergillus fumigatus.

По общей методике испытаний группу мышей заражают штаммом Aspergillus fumigatus. Затем кадая мышь получает испытуемое соединение в стандартной дозировке в 20 мг/кг дважды в день в течение 5 дн. На десятый день определяют состояние мышей.

Активность определяется выживанием мышей после смерти мышей в группе, получавшей лечение, а ткже числом излеченных мышей.

Результаты, полученные в сравнительном исследовании с применением двух соединений, охарактеризованных в рабочих примерах, и двух соединений, приведенных в заявке на Европейский патент N 89307920, приведены в табл.3.

Формула изобретения

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ТРИАЗОЛА общей формулы I

где R фенил, замещенный 1-3 атомами галоида;
R₁ C₁ C₄-алкил;
Y F или Cl,
или их фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что восстанавливают соединения общей формулы II

где R, R₁, Y имеют указанные значения;
Z₁ и Z₂ каждые независимо выбирают из водорода или группы, которая может быть селективно удалена восстановлением, при условии, что Z₁ и Z₂ не могут оба обозначать водород,
с последующим, в случае необходимости, превращением полученного соединения I в его фармацевтически приемлемую соль.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что группы, которые могут быть селективно удалены восстановлением, обозначают галоид.

3. Способ по п.2, отличающийся тем, что галоид представлен хлором.

4. Способ по пп.1-3, отличающийся тем, что восстановление проводят путем гидрогенолиза с применением в качестве катализатора палладия на угле.

5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что процесс ведут в присутствии ацетата натрия.

6. Способ по любому из пп.1 5, отличающийся тем, что получают соединение общей формулы IA, которое имеет 2 R, 3 S-конфигурацию

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3