Способ определения активного вещества в дифильных мазевых основах

 

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способа определения активного вещества в мягких лекарственный формах. Дифильные мазевые основы экстрагируют в течение 20 - 90 мин в 0,9%-ном растворе хлорида натрия при pH 7,0 - 8,0. Отстаивают, отбирают водную фазу и определяют специфическую активность непосредственно после экстрагирования. Изобретение позволяет повысить точность определения. 3 табл.

Изобретение относится к медицине, фармацевтической промышленности и касается способа экстрагирования активного вещества из дифильных мазевых основ, содержащих, в частности интерферон.

Известен способ определения интерферона в мази, включающий обработку ее липазой с последующим определением активности интерферона путем определения противовирусной активности на клеточных культурах (Гребенюк В.Н. и др. Испытание безвредности реактогенности и лечебной эффективности мази, содержащей свиной лейкоцитарный интерферон. - Антибиотики, N 3, 1981, с. 145-149).

Недостатком данного способа является низкая точность и высокая стоимость определения содержания интерферона.

Наиболее близким аналогом предлагаемого решения является мазь следующего состава: ланолина 7 частей, вазелина 1 часть и с последующим втиранием 0,5 мл воды на 1 г основы, из которой экстрагирование интерферона проводится эфиром для наркоза и определения его противовирусной активности в жидкой фазе (В. В. Парфенов, В. Н. Гребенюк и др. Генноинженерный человеческий интерферон-альфа (реаферон) в виде мази при лечении некоторых заболеваний кожи и слизистых оболочек. - Антибиотики и химиотерапия, N 9, 1990, с. 38-40).

Недостатком данного способа является малый процент выхода противовирусной активности интерферона из предлагаемой мази и сложность вычислений, связанные с использованием формулы, предложенной авторами.

Технический результат изобретения заключается в повышении точности способа.

Задачей изобретения является разработка универсального способа экстрагирования активного вещества из дифильных мазевых основ, содержащих иммунобиологические (интерферон, лактобактерин, бифидумбактерин, бактериофаги и др. ) или фармацевтические (лидаза, коллагеназа, гиалуроновая кислота и др.) субстанции.

Существенные признаки, характеризующие изобретение, заключаются в следующем: ограничительные признаки - экстрагирование активного вещества и контроль его активности в водной фазе.

Отличительные признаки: активное вещество из лекарственной формы экстрагируют в течение 20 - 90 минут в физрастворе с pH 7,0 - 8,0.

Из изученного широкого ряда растворителей (физиологический раствор, вода дистиллированная, эфир, гексан и т.д.) только физиологический раствор способен растворить гидрофильно-липофильную основу, содержащую активное вещество, например интерферон, лидазу и др., что обеспечивает максимальный выход (100%) специфической активности в водную фазу.

Экстрагирование проводят в течение 20-90 минут с помощью 0,9%-ного раствора хлорида натрия с pH 7,0 - 8,0, что способствует полному извлечению специфической активности из дифильной основы в водную фазу.

Сущность способа заключается в том, что к дифильной мазевой форме, изготовленной на гидрофильно-липофильной основе и содержащей активное вещество (мазь, эмульсии и др.) добавляют 0,9%-ный раствор хлорида натрия с pH 7,0 - 8,0 и после расслоения эмульсии на два слоя: жировой и водный, который впоследствии собирают и определяют в нем специфическую активность исследуемого вещества.

Опыты проводились с использованием мазей, содержащих иммунобиологическое вещество - человеческий лейкоцитарный интерферон (ЧЛИ) с противовирусной активностью 2000, 4000 и 8000 ME в грамме основы, а также фармацевтическое вещество - лидазу с удельной активностью 64-128 УЕ в грамме основы. В качестве наполнителей использовали дифильные основы, содержащие вазелин и ПАВ (твердый эмульгатор Т-2, моноглицириды дистиллированные).

Исследования велись по двум направлениям: влияние природы растворителя и времени экстрагирования.

Пример 1.

3 навески мази с интерфероном по 1 г каждая помещали во флакон, в который вносили 9,0 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида с pH 7,0-8,0 и экстрагировали интерферон в водную фазу при периодическом встряхивании в течение 20-90 минут. После расслоения эмульсии на две фракции: жировую и водную, содержащую активное вещество, собирали и определяли в ней уровень противовирусной активности интерферона. Результаты представлены в таблице 1.

Проводилось сравнение трех растворителей - раствор гексана (жирорастворитель) с последующим экстрагированием из мазевой основы физиологическим раствором, эфир для наркоза и предлагаемый 0,9%-ный раствор хлорида натрия.

Также проведены исследования по определению удельной активности гиалуронидазы из дифильных мазевых основ, содержащих лидазу в зависимости от природы растворителя.

Пример 2.

Аналогично примеру 1, только в качестве специфической активности в мазях содержалась лидаза (фермент гиалуронидаза). Результаты представлены в таблице 2.

Влияние времени экстрагирования на выход активного вещества из дифильных мазевых основ представлено в таблице 3.

Из полученных результатов следует, что полное высвобождение противовирусной активности интерферона, а также удельной активности лидазы из дифильных мазевых основ (100%), было достигнуто в опыте при следующих условиях: растворитель - 0,9%-ный раствор натрия хлорида с pH 7,0 - 8,0, время экстрагирования от 20 до 90 минут.

Формула изобретения

Способ определения активного вещества в дифильных мазевых основах, включающий экстрагирование и контроль его активности в водной фазе, отличающийся тем, что активное вещество из лекарственной формы экстрагируют в течение 20 - 90 мин в 0,9%-ном растворе хлорида натрия при рН 7,0 - 8,0.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3

PD4A - Изменение наименования обладателя патента Российской Федерации на изобретение

(73) Новое наименование патентообладателя:Федеральное государственное унитарное предприятие "Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам "Микроген" Министерства здравоохранения Российской Федерации

Извещение опубликовано: 10.03.2005        БИ: 07/2005

MM4A Досрочное прекращение действия патента из-за неуплаты в установленный срок пошлины заподдержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 26.08.2007

Дата публикации: 27.12.2011

---