Способ определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных

 

Изобретение относится к области ветеринарии. Начиная с 25-30-го дня послеродового периода исследуют содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента в крови; затем у животных с содержанием общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и имеющих величину альбумино-глобулинового коэффициента в пределах 1,0-2,2, которые проявляют стойкий рефлекс неподвижности, дополнительно определяют рН и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета и при значении рН на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрическом показателе преломления цервико-вагинального секрета, равном 1,3342-1,3352, а также при содержании собственно поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5% диагностируют наличие функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках циклирующих коров и судят о благоприятных условиях для оплодотворения. Способ позволяет доступно в условиях животноводческих хозяйств диагностировать функциональное состояние яичников у самок сельскохозяйственных животных, более точно выявлять охоту и овуляцию у жвачных животных. 5 табл.

Изобретение относится к области ветеринарии, а именно к акушерству и гинекологии, и предназначено для определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных, в частности, может быть использовано при выявлении оптимального времени осеменения у циклирующих коров в послеродовой период.

Способ позволяет доступно в условиях животноводческого хозяйства диагностировать функциональное состояние яичников у коров.

Имеется способ определения оптимального времени осеменения самок жвачных животных, который предполагает исследование пробы цервико-вагинального секрета из половых путей коров с помощью рефрактометрии (Антонюк B.C., Жаркин В. В., Горбунов Ю.А. Способ определения оптимального времени осеменения крупного рогатого скота. А.с. 1146036, СССР). По измерению рефрактометрического показателя преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете судят об оптимальном времени осеменения коров, чему соответствует показатель преломления ЦВС, равный 1,3351-1,3370.

Известен способ определения функционального состояния яичников у животных с удлиненным влагалищем (Василенко Т.Ф. Способ определения функционального состояния яичников у животных с удлиненным влагалищем. Патент РФ 2155016), например коров, который включает взятие мазка из верхнебокового свода влагалища на уровне шейки матки путем снятия клеточной массы со стенок пипеткой для искусственного осеменения с обработанным шероховатым концом (5-7 см). Пипетку вводят через вагинальное зеркало с подсветкой под визуальным контролем. Затем пробы тонким слоем наносят на предметное стекло, клеточный материал фиксируют, окрашивают, дифференцируют и подсчитывают разные типы клеток. Для диагностирования животных определяют процентное содержание собственно поверхностных клеток с четким ядром и "голых" ядер и их "теней". При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и "голых" ядер и их "теней" не более 1,3% диагностируют предовуляторный период полового цикла и судят о благоприятных условиях для оплодотворения коров. При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и "голых" ядер и их "теней" в пределах 3,1-8,5% диагностируют беременность и судят о благоприятных условиях для развития плода. Данный способ был взят в качестве прототипа.

Основным недостатком представленных выше способов является то, что определение функционального состояния яичников у коров осуществляется на основе исследования отдельно взятого показателя, характеризующего только состояние вагинальной среды, т.е. эти способы позволяют выявлять предовуляторный период половой охоты, но не достаточно полно определяют функциональное состояние яичников у коров.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа с использованием нескольких показателей, позволяющего доступно в условиях животноводческих хозяйств диагностировать функциональное состояние яичников у самок сельскохозяйственных животных и судить о наличии функционально зрелого фолликула в яичниках коров и, следовательно, более точно выявлять охоту и овуляцию у циклирующих самок жвачных животных (коров).

В этом состоит технический результат, находящийся в причинно-следственной связи с существенными признаками изобретения.

Технический результат способа достигается таким образом, что начиная с 25-30-го дня послеродового периода осуществляется забор проб крови из яремной вены коров через три часа после утреннего приема корма и исследуется содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента в крови; потом животных с высоким содержанием общего холестерина и имеющих величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в оптимальных пределах значений для данного показателя отбирают для последующего обследования, при этом отбор коров осуществляют при наличии стойкого рефлекса неподвижности в предовуляторный период эстрального цикла, когда животные допускают на себя садку других коров стада, и в этот период выполняют забор цервико-вагинального секрета из влагалища и затем исследуют параметры, характеризующие состояние вагинальной среды - рН и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете; одновременно проводят взятие мазков со стенок верхнебокового свода краниального отдела влагалища и подсчитывают процентное содержание различных типов клеток согласно прототипу. Животных, имеющих содержание общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в пределах 1,0-2,2 и которые в предовуляторный период половой охоты проявляют стойкий рефлекс неподвижности и допускают на себя садку других коров стада, отбирают для последующего обследования; для диагностирования коров определяют рН и рефрактометрический показатель цервико-вагинального секрета и подсчитывают содержание поверхностных эпителиальных клеток на влагалищных мазках; при этом при величине рН цервико-вагинального секрета на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрического показателя преломления цервико-вагинального секрета, равного 1,3342-1,3352 и при процентном содержании собственно-поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5%, диагностируют наличие функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках циклирующих коров.

Способ осуществляется следующим образом: примерно с 25-30-го дня послеродового периода осуществляют забор проб крови из яремной вены коров через три часа после утреннего приема корма и определяют содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента в крови; затем животных с содержанием общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и имеющих величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в пределах 1,0-2,2, а также при наличии стойкого рефлекса неподвижности (животные допускают на себя садку других коров стада) отбирают для дальнейших обследований; в предовуляторный период половой охоты у коров из влагалища, используя гинекологическое зеркало для животных с удлиненным влагалищем, проводят забор цервико-вагинального секрета, который собирают в стеклянный бюкс с нижней бранши зеркала, затем бюкс закрывают притертой крышкой и через 10-15 мин в условиях лаборатории исследуют параметры, характеризующие состояние вагинальной среды - рН с использованием рН-метра и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете на рефрактометре. Одновременно осуществляют взятие мазков: пипетку для искусственного осеменения с обработанным шероховатым концом вводят через вагинальное зеркало с подсветкой под визуальным контролем. Затем пробы тонким слоем наносят на предметное стекло, клеточный материал фиксируют, окрашивают, дифференцируют и подсчитывают разные типы клеток по прототипу. При этом оптимальному времени осеменения (наличию функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках коров) соответствует величина рН цервико-вагинального секрета на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета, равный 1,3342-1,3352, и процентное содержание собственно-поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5%.

Эксперименты по определению оптимального времени половой охоты и овуляции у коров проводили на поголовье фермы Выльгородской научно-экспериментальной биологической станции (ВНЭБС) Коми научного центра УрО РАН (г. Сыктывкар). Апробацию предлагаемого способа осуществляли на коровах животноводческих комплексов совхозов "Пригородный" и "Сыктывкарский". Использовали высококлассных племенных коров холмогорской породы со среднегодовой молочной продуктивностью 4000 кг и выше при удовлетворительных условиях содержания и кормления, прогулках на выгульных площадках.

Поскольку имеются данные о наличии зависимости между сроками возобновления эстральной активности в яичниках коров после родов и содержанием холестерина крови (Grummer R.R., Carroll D.J. A review of lipoprotein cholesterol metabolism: importance to ovarian function// J. Anim. Sci. - 1988. - V.66, 12. - P. 3160-3173; Kafidi N., Leroy R., Chapaux Ph., Iatasse L., Hanzen Ch. , Laurent Y., Antoine 0. Etude de 1'influence de facteurs alimentaires sanitaires on d'exploitation, sur la production laifiere et les performances de reproduction du betail laifier. Analyse statistigue// Ann. Med. Vet. - 1990. - V. 734, 35. - Р. 83-91) и выявлена взаимосвязь между сроками нормализации биоритма эстральной активности у коров и альбумино-глобулиновым коэффициентом крови (Rowlands G.J., Manston R., Stark AJ., Russtll AM., Collis K.A,, Collis S.C. Changes in albumin, globulin, glucose and cholesterol concentrations in the blood of dairy cows in late pregnancy and early lactation and relationships with subsequent fertility// J. Agr. Sci. - 1980. - V. 94, 3. - Р. 517-527), были проведены исследования содержания уровня общего холестерина крови и величин альбумино-глобулинового коэффициента у коров в разные периоды репродуктивного цикла.

В конце беременности и в определенные интервалы после родов у клинически здоровых животных фермы ВНЭБС определяли содержание общего холестерина крови. На восьмом-девятом месяце беременности и в начале первого месяца после родов у животных выявлены низкие концентрации холестерина крови в пределах 3-4 ммоль/л. При прохождении послеродового периода у коров без явных осложнений к концу первого - началу второго месяца после родов отмечали проявление первого эстрального цикла, при этом содержание холестерина крови увеличивалось и составило 5,4-6,2 ммоль/л (табл.1, подгруппа 1). У животных с увеличенным содержанием холестерина крови отмечали возобновление первого астрального цикла с нормальной половой охотой - с явной стадией возбуждения в начале охоты и наличием стойкого рефлекса неподвижности в предовуляторный период в конце охоты.

Увеличенное содержание холестерина в крови коров также отмечали во время прохождения овуляторного 'стрального цикла непосредственно перед оплодотворением. Однако начиная с 25-го дня после родов примерно у 30-65% животных от обследованных определяли достоверно низкие значения холестерина (р<0,001), которые в среднем на 27% ниже величин холестерина в крови у коров с нормальным течением обменных процессов и послеродового периода (табл.1 и 2, вторые подгруппы). В послеродовой период у животных, имеющих содержание холестерина крови ниже оптимальных величин, отмечали возобновление овуляторных эстральных циклов в более поздние сроки после родов, а следовательно, у них удлиняется период от родов до оплодотворения (Василенко Т.Ф. Содержание холестерина в крови холмогорских коров. В кн.: Усвоение питательных веществ у жвачных животных. Сыктывкар, 1987. С. 92-97. (Труды Коми филиала АН СССР, 85).

Исследования показателей альбумино-глобулинового коэффициента крови животных фермы ВНЭБС в предовуляторный период эстрального цикла перед осеменением с последующим оплодотворением и на первых месяцах плодоношения показали, что эти величины должны находится в пределах оптимальных значений для данного показателя (табл. 3). Следовательно, способность организма коров удерживать величины альбумино-глобулинового коэффициента крови в пределах оптимальных значений - 1,0-2,2 - является одним из условий, необходимых для нормального функционирования отдельных структур яичника в предовуляторный период.

Исследования клеточного содержимого мазков из краниального отдела влагалища рН и рефрактометрического показателя преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете у коров фермы ВНЭБС в предовуляторный период эстрального цикла в ходе проведения осеменения с последующим оплодотворением показали, что количество собственно-поверхностных клеток выстилающего эпителия находилось в пределах 7,5%, а промежуточных клеток составляло менее 1,2%. Величины рН цервико-вагинального секрета изменялись в пределах от 5,0 до 6,8, а рефрактометрического показателя в более узких границах - от 1,3342 до 1,3352 (табл.4).

Пример. Предлагаемый способ определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных с исследованием содержания общего холестерина и величин альбумино-глобулинового коэффициента в крови и показателей, характеризующих состояние вагинальной среды - рН, и рефрактометрический показатель секрета половых путей и процентное содержание поверхностных эпителиальных клеток на влагалищных мазках был апробирован на коровах животноводческого комплекса совхоза "Сыктывкарский". С целью контроля правильного отбора коров для проведения искусственного осеменения были проведены обследования 7 животных в предовуляторный период эстрального цикла, когда животные проявляли стойкий рефлекс неподвижности и допускали на себя садку других коров стада. Исследовали содержание общего холестерина и альбумино-глобулиновое отношение в крови с одновременным определением рН и рефрактометрического показателя цервико-вагинального секрета и особенностей клеточного состава влагалищных мазков (табл.5). Уровень сывороточного холестерина был ниже нормы у двух животных - 2 и 4. Величина альбумино-глобулинового отношения была выше нормы у двух животных - 1 и 3, и у одного животного - 4 заметно снижена по сравнению с оптимальным уровнем. Показатели рН и рефрактометрического показателя соответствовали оптимальным значениям у всех 7 животных, в то время как клеточный состав мазков из краниального отдела влагалища не соответствовал норме у 6 коров, из них выраженную форму воспаления (эндометрит) диагностировали у двух. Из 7 обследованных животных только у одной коровы все исследуемые параметры находились в пределах значений, оптимальных для нормального функционирования отдельных структур яичников, и именно это животное оплодотворилось.

Принимая во внимание результаты проведенных экспериментов, можно сделать следующий вывод, что отбор коров, имеющих высокое содержание общего холестерина крови и оптимальные значения величин альбумино-глобулинового коэффициента крови, начиная с 25-30 дня после родов, и проявляющих стойкий рефлекс неподвижности в период истинной половой охоты (предовуляторный период эстрального цикла), в сочетании с оптимальными значениями величин рН и рефрактометрического показателя преломления ЦВС и процентного содержания собственно поверхностных клеток влагалищного эпителия на мазках, позволяет выявлять животных с функционально зрелым фолликулом в яичниках и с высокой способностью к оплодотворению. Исследование предлагаемых параметров можно также использовать для точной диагностики нарушений обмена веществ или заболеваний репродуктивной системы (эндометриты) у коров в ранние сроки после родов.

Формула изобретения

Способ определения функционального состояния яичников у сельскохозяйственных животных, включающий взятие мазков со стенок верхне-бокового свода влагалища, подсчет процентного содержания отдельных типов поверхностных эпителиальных клеток и суждение о фазах репродуктивного цикла и функциональном состоянии яичников у коров, отличающийся тем, что предварительно, начиная с 25-30-го дня послеродового периода, исследуют содержание общего холестерина и показатели альбумино-глобулинового коэффициента крови, затем у животных с содержанием общего холестерина на уровне 5,3-7,5 ммоль/л и имеющих величину альбумино-глобулинового коэффициента в пределах 1,0-2,2, которые проявляют стойкий рефлекс неподвижности, дополнительно определяют рН и рефрактометрический показатель преломления цервико-вагинального секрета и при значении рН на уровне 5,0-6,8 и рефрактометрическом показателе преломления цервико-вагинального секрета, равном 1,3342-1,3352, а также при содержании собственно-поверхностных клеток с четким ядром на влагалищных мазках до 7,5% диагностируют наличие функционально активного фолликула со зрелой яйцеклеткой в яичниках циклирующих коров и судят о благоприятных условиях для оплодотворения.

РИСУНКИ

Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5