Способ профилактики и лечения дерматомикозов, вакцина "полидерм" для его осуществления и способ никольского получения такой вакцины

 

Вакцина содержит инактивированные полевые штаммы дерматофитов, в отличие от известных ассоциированных вакцин, содержащих лабораторные штаммы. При внутримышечном введении предлагаемая вакцина ареактогенна, не патогенна и создает иммунитет у многих видов восприимчивых животных против практически всех основных возбудителей дерматофитозов животных независимо от ареала обитания или географического района содержания, т.к. включает в себя практически полный набор экзоантигенов и эндоантигенов культур дерматофитов. 3 н. и 36 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к лечению и профилактике дерматомикозов - кожных грибковых заболеваний, в частности к вакцинам против дерматомикозов, содержащих антигенный материал из культур дерматофитов и способам получения таких вакцин. Возможно использование изобретения в области медицины для лечения и профилактики дерматомикозов человека.

Известны различные способы профилактики и лечения дерматомикозов с помощью вакцин, содержащих иммунологически эффективное количество антигенного материала из культур различных дерматофитов. Известны мопокомпонентные вакцины против дерматомикозов животных, для получения которых используют какой-нибудь один лабораторный штамм определенного дерматофита из числа дерматофитов, являющихся одними из основных возбудителей кожных заболеваний, например: штамм гриба Trichophyton equinum №2251/71 использован в вакцине для профилактики и лечения трихофитии лошадей [SU 548947, 1976]; штамм гриба Trichophyton mentagrophytes ВГНКИ №27-ДЕП - в вакцине против трихофитии крупного рогатого скота, овец, коз, кроликов [RU 2013445, 1994]: штамм гриба Trichophyton verrucosum ВГНКИ №ТВ-201 ВГНКИ-ДЕП - в вакцине против трихофитии крупного рогатого скота, кроликов [RU 2074251, 1997]. Для получения вакцин требуемый штамм выращивают в тепле около трех недель на питательной среде при температуре 26-28°С, снимают грибную массу, гомогенизируют и осуществляют еще ряд операций. Вакцинирование производят двухкратным внутримышечным введением готовой вакцины с интервалом 10-14 суток в дозах 1-2 мл.

Монокомпонентные вакцины не обеспечивают создания иммунитета против микроспории и трихофитии, обусловленных другими дерматофитами-возбудителями.

Известны ассоциированные (или поликомпонентные) вакцины против дерматомикозов, которые отчасти устраняют указанный недостаток монокомпонентных вакцин. Известна вакцина против трихофитии рогатого скота и других парнокопытных, содержащая антигены из штамма гриба Trichophyton verrucosum ВИЭВ №478 и из штамма гриба Trichophyton verrucosum ВИЭВ №145, взятые в равных соотношениях с конечной концентрацией 60-160 млн. микроконидий в 1 мл 4-5%-ного солевого раствора NaCl, и адьювант - гидроокись алюминия в количестве 0,5-0,6 мл на каждые 100 мл вакцины [RU 2093178, 1997]. Ассоциированная вакцина против трихофнтии и микроспории лошадей содержит антигены из штамма гриба Microsporum canis ВИЭВ №473 и штамма гриба Trichophyton equinum NЛ 2251/70, взятые в равных соотношениях с конечной концентрацией каждого штамма (1-8)·10⁷ микроконидий в 1 мл вакцины, и защитную среду на основе сахарозы и желатина [RU 2097065, 1997]. Известна также вакцина “Микродерм” против дерматофитозов животных, преимущественно плотоядных и грызунов, содержащая, мас.%: антиген из штамма гриба Trichophyton mentagrophytes ВГНКИ №27 с концентрацией 70-90 млн. микроконидий/см³ - 20,0-30,0; антиген из штамма гриба Microsporum canis ВГНКИ №2293 с концентрацией 70-90 млн. микронидий/см³ - 20,0-30.0; сахароза - 10.0-20.0: желатин - 1,5-4,0; дистиллированная вода - остальное [RU 2084240, 1997].

В качестве прототипа заявляемой вакцины выбрана известная вакцина “Поливак-ТМ” для профилактики и лечения дерматофитозов животных, содержащая антигенный материал в количестве 40-120 млн. микроконидий / 1 см³ из культур дерматофитов Trichophyton verrucosum ВКПГF №931/410 и/или Trichophyton mentagrophytes БКПГF №930/1032 и/или Trichophyton eguinum БКПГF №929/381 и/или Microsporum canis ВКПГF №928/393 и/или Murosporum canis var. obesum. ВКПГF №727/1311 и/или Microsporum canis var. ductortum №728/120 и/или Microsporum gypseum ВКПГ N 729/59, инактиватор (тимерсал, формалин или 2-пропиодактон) и физиологически приемлемый носитель.

В качестве прототипов заявляемых способа получения вакцины и способа лечения и профилактики выбрано техническое решение по международной заявке PCT/IB00/01196 [публикация WO 01/15725 от 08.03.2001]. Такая ассоциированная живая вакцина для защиты позвоночных животных от грибковых кожных инфекционных заболеваний в частности содержит эффективное количество иммуностимулирующего материала из нескольких инактивированных тепловой обработкой культур дерматофитов из группы: Candida; Еipidermophyton, включая Epidermophyton floccusum: Keratinomyces (известный также как Trichophyton ajelloi); Microsporum, включая штаммы Microsporum canis DSM №13016 и DSM №13017: Trichophyton. включая штамм Trichophyton equinum DSM №13018. Указанный материал суспендирован в жидкой фазе в количестве 10²-10¹⁰ микроконидий в 1 мл. Культуры дерматофитов содержатся в вакцине живыми и/или жизнеспособными. Вакцина придает иммунную защиту позвоночным животным класса млекопитающих: семейство псовых, семейство кошачьих, кролики, семейство жвачных, лошади, свиньи, человек. Способ получения вакцины предусматривает раздельный отбор иммунологического материала нескольких культур дерматофитов, которые в комбинации способны придать иммунную защиту животным от дерматомикозов, объединение отобранных культур дерматофитов, инактивацию отобранных культур дерматофитов тепловой обработкой при такой температуре и в течение такого времени, чтобы не разрушить существенных антигенные свойства культур дерматофитов. В частности, культуры дерматофитов подвергают тепловой обработке при температуре 40-60°С в течение 30-1440 минут, предпочтительно в течение около 60 минут. Способ профилактики или лечения дерматомикозов позвоночных животных включает применение эффективного режима доз вакцины, в частности внутримышечным введением.

Известные ассоциированные вакцины применяют в иммунологически эффективной дозе, преимущественно двукратно внутримышечным введением. Несмотря на то, что известные ассоциированные вакцины достаточно эффективны от основных кожных заболеваний, они не способны придать иммунитет от других заболеваний, например фавуса, т.к. в последнее время увеличилось число дерматомикозов, вызванных другими возбудителями: Achorion schoenleinii (известный также как Trichophyton schoenleinii), Alternaria species. Тем более, что основные дерматофиты-возбудители различны для различных климатических и географических ареалов обитания или географического района содержания животных, а спектр возбудителей дерматомикозов расширяется и в настоящее время известно более 400 видов грибов, вызывающих заболевания у человека и животных.

Технологический процесс приготовления лабораторных штаммов, используемых в вышеперечисленных известных ассоциированных вакцинах, относительно сложен и требует значительных затрат времени, так, только технологический этап выращивания лабораторного штамма требует специальной питательной среды, особого благоприятного теплового режима и занимает 20-25 суток.

Техническая задача, на решение которой направлена группа изобретений: расширение функциональных возможностей и повышение эффективности применения живых вакцин, содержащих культуры дерматофитов, снижение их стоимости и упрощение технологического процесса получения таких вакцин.

Предлагается способ лечения и профилактики дерматомикозов позвоночных животных, осуществляемый внутримышечным введением иммунологически эффективного количества вакцины в виде суспензии инактивированного живого и/или жизнеспособного антигенного материала из культур нескольких различных видов в физиологически приемлемом носителе, не патогенной для вакцинируемого позвоночного животного. Новым является то, что в качестве антигенного материала используют культуры дерматофитов, которые выдавливают из предварительно отделенных внешних придатков кожи позвоночных животных вместе с жидкостью, содержащейся в названных внешних придатках кожи, с последующей инактивацией полученной суспензии.

В качестве внешних придатков кожи можно использовать шерсть и/или волосы (также когти, ногти, перья, чешую) позвоночного животного: а) того же и/или другого класса или подкласса или отряда или семейства или подсемейства или рода или вида позвоночных животных, чем вакцинируемое позвоночное животное; б) лучше обитающего в том же географическом ареале обитания или географическом районе содержания, что и вакцинируемое позвоночное животное, т.к. состав дерматофитов на различных животных из одного географического района практически совпадает; в) отделенные от кожи здоровых позвоночных животных и/или позвоночных животных, зараженных дерматомикозом, причем и здоровое и больное животное из одного географического района несет на себе примерно одинаковый состав дерматофитов, и на больном животном просто больше содержится тех дерматофитов, которые вызвали заболевание.

Лучше, когда антигенный материал содержит хотя бы три культуры дерматофитов из группы: Achorion schoenleinii, Altemaria species, Candida species, Epidermophyton species, Microsporum species, Trichophyton species, которые являются возбудителями основных кожных заболеваний практически во всех географических регионах.

Лучше, когда вакцину вводят вместе с адьювантом в эффективном количестве.

Лучше, когда вакцину вводят двукратно с интервалом 10-14 суток, причем повторно вакцину лучше вводить в другую мышцу вакцинируемого позвоночного животного.

Лучше вводить вакцину, содержащую антигенный материал из культур дерматофитов в количестве 10²-10¹⁰ микроконидий в 1 мл. В общем случае эффективное количество вакцины подбирают в зависимости от этиологиии кожного заболевания, возраста, пола, состояния животного, наличия других заболеваний и целей вакцинации (лечение или профилактика).Такое количество для позвоночных животных обычно составляет 0,25-2,00 мл.

Предлагается также вакцина для лечения и профилактики дерматомикозов позвоночных животных, содержащая иммунологически эффективное количество живого и или жизнеспособного антигенного материала из культур дерматофитов в виде комбинации из нескольких различных видов дерматофитов (не патогенная комбинация), а также инактиватор и физиологически приемлемый носитель. Новым является то, что в качестве культур дерматофитов вакцина содержит культуры дерматофитов, выдавленные из отделенных от кожи позвоночных животных внешних ее придатков вместе с жидкостью, содержащейся в названных внешних придатках кожи, например в шерсти и/или волосах (также как когтях, ногтях, перьях, чешуе).

Лучше, когда в состав антигенного материала входят хотя бы три культуры широко распространенных дерматофитов-возбудителей из группы: Achorion schoenleinii, Alternaria species, Candida species, Epidermophyton species, Microsporum species, Trichophyton species.

Лучше, когда культуры дерматофитов инактивированы пастеризацией без разрушения существенных антигенных свойства культур дерматофитов, в частности при температуре 50-82°С в течение 30-240 минут, лучше двукратной по 30-120 минут с интервалом 12-48 часов.

Лучше, когда антигенный материал культур дерматофитов содержится в количестве 10²-10¹⁰ микроконидий в 1 мл.

В качестве инактиватора можно использовать форматин до 1,5 мас.%. Возможно использование тимерсал, 2-пропиолактона в эффективных количествах.

Хотя бы частью физиологически приемлемого носителя может являться жидкость, выдавленная из внешних придатков позвоночных животных и/или физиологический раствор.

Вакцина широкоуниверсальна и может быть предназначена для лечения и профилактики дерматомикозов птиц, млекопитающих. Предполагается, что вакцину можно использовать для рыб, человека.

Предлагается способ получения вакцины для лечения и профилактики дерматомикозов позвоночных животных, включающий отбор антигенного материала нескольких культур дерматофитов, которые в комбинации способны придать иммунную защиту позвоночным животным от дерматомикозов и не патогенны, и инактивацию отобранных культур дерматофитов так, чтобы не разрушить существенные антигенные свойства отобранных культур дерматофитов. Новым является то, что культуры дерматофитов отбирают их выдавливанием из предварительно отделенных внешних придатков кожи позвоночных животных вместе с жидкостью, содержащейся в названных внешних придатках кожи, с последующей инактивацией полученной суспензии.

В качестве внешних придатков кожи лучше использовать шерсть и/или волосы (можно также когти, ногти, перья, чешую), отделенные от кожи позвоночных животных одного и того же и/или другого класса, или подкласса, или отряда, или семейства, или подсемейства, или рода, или вида позвоночных животных, чем позвоночное животное, для которого предназначена вакцина, и/или обитающих в том же географическом ареале обитания или географическом районе содержания, что и позвоночное животное, для которого предназначена вакцина.

В качестве внешних придатков кожи используют шерсть и/или волосы, отделенные от кожи здоровых позвоночных животных и/или позвоночных животных, зараженных дерматомикозом.

Предварительно отделенные внешние придатки кожи лучше подвергнуть антисептической обработке с последующей промывкой физиологически приемлемой жидкостью до полного удаления остатков антисептика, например физиологический раствор. После промывки обработанные внешние придатки кожи лучше хранить до выдавливания в физиологически приемлемой жидкости. Антисептическую обработку можно проводить водным раствором щелочи в эффективном количестве, лучше использовать 2%-й водный раствор гидроокиси натрия при отношении отделенных внешних придатков кожи к водному раствору 1 мас.ч. : 5-9 мас.ч., проводя антисептическую обработку, выдерживая отделенные внешние придатки кожи в указанном водном растворе в течение 3-15 минут при температуре 17-25°С.

Перед выдавливанием отделенные внешние придатки кожи лучше измельчить, в частности до размера частиц 2-4 мм.

Для инактивации можно использовать тепловую обработку полученной суспензии пастеризацией, в частности при температуре 50-82°С в течение 30-240 минут, лучше двукратно но 30-120 минут с интервалом 12-48 часов.

Для инактивации в полученную суспензию также можно ввести инактиватор в эффективном количестве, например формалин до 1,5 мас.%.

Для удаления нерастворимых мелких частиц стержней волос и т.п. суспензию до инактивации лучше профильтровать.

Предлагаемая ассоциированная живая вакцина, полученная заявляемым способом, содержит инактивированные полевые штаммы дерматофитов, в отличие от известных ассоциированных вакцин, содержащих лабораторные штаммы, что уже само по себе определяет относительную простоту технологического процесса ее получения, определяющую в конечном счете более низкую стоимость вакцины. Более высокая эффективность предлагаемой вакцины определяется наличием более широко набора в составе антигенов из культур дерматофитов.

Вышеописанные изобретения группы, как показано выше, связаны единым изобретательским замыслом и, в частности, любая развивающая и/или уточняющая совокупность существенных признаков одного из изобретений группы может быть использована для получения или осуществления другого изобретения группы или предназначена для использования другого изобретения группы.

Изобретение поясняется на примерах лечения в ветеринарной клинике домашних животных, проживающих в Приморском крае.

В описанных ниже примерах вакцину “Полидерм” готовили следующим образом.

Предварительно собирали, состригая шерсть с нескольких собак и кошек разных пород, возраста, здоровых и с различной этиологогией кожных грибковых заболеваний, содержащихся в Приморском крае. Собранную шерсть в количестве 100 г при нормальной влажности предварительно подвергали антисептической обработке 2-процентным водным раствором гидроокиси натрия в количестве 700 мл в течение 5 минут при нормальной температуре (18-22°С), а затем при той же температуре промывали 4-кратно физиологическим раствором. Обработанную таким образом шерсть хранили в физиологическом растворе, после чего извлекали оттуда, давали стечь физиологическому раствору и измельчали, разрезая до размера частиц 2-3 мм. Измельченные частицы помещали в винтовой пресс, где выдавливали из них жидкость с усилием, достаточным для выдавливания большей части жидкости, содержащейся в шерсти. Полученную суспензию, содержащую в частности физиологический раствор, фрагменты мицелия, споры и другие фрагменты грибов, фильтровали через двойную сетку Дэви. Полученный фильтрат фиксировали фенолом до 0,5 мас.%, разливали по стеклянным флаконам емкостью 10-20 мл, которые герметично закрывали резиновыми пробками с алюминиевыми колпачками, и пастеризовали двукратно при 72-80°С по 1 часу с интервалом 24 часа, контролируя, чтобы суспензия между циклами остывала до температуры не ниже нормальной (18-22°С). Готовую вакцину проверяли лабораторно на стерильность и на отсутствие патогенности. Лабораторные анализы показали наличие, как в собранной шерсти, так и в готовой вакцине, более 36 полевых штаммов грибов, в частности: Achorion schoenleinii (известный также как Trichophyton schoenleinii); Alternaria species, Candida species: Epidermophyton species, включая Epidermophyton floccusum; Microsporum species, включая Microsporum canis; Trichophyton species, включая Trichophyton equinum; Trichophyton ajelloi. Концентрация вакцины составляла около 10⁸ микроконидий в 1 мл. Для получения требуемой концентрации вакцину можно разбавлять физиологическим раствором. Вакцину хранили перед использованием до 2 месяцев в темном месте при температуре 0-4°С.

Пример 1. Собака, порода пекинес. Возраст - 4 года, кобель. Диагноз - сикоз (выпадение шерсти по всему телу, зуд, образование асбестовидных корок и гнойников с неприятным запахом).

До вакцинации вакциной “Полидерм” в течение 3 лет проводили лечение стандартными вакцинами, а также инъекцией “Ивомек”. Были кратковременные и нечеткие улучшения. Во время пребывания хозяев в Израиле, проводили лечение собаки там, также почти безрезультатно.

Две дозы вакцины “Полидерм” по 1 мл с адьювантом по 0,25 мл (концентрат витаминов A, D₃, Е) ввели внутримышечно в заднебедренные мышцы двукратно в две разные лапы с интервалом в 14 суток. После первой инъекции исчез зуд, на открытых поражениях образовались корки, уменьшилось сечение шерсти. После второй инъекции выздоровление наступило через 24 суток. После этого обращений с этим животным к ветеринару не отмечено.

Пример 2. Кошка, порода персидская, возраст 2 года. Диагноз - парша (желтые корки на части тела, зуд, шелушение, частичное выпадение шерсти).

До вакцинации вакциной “Полидерм” два раза проводили лечение стандартными вакцинами. Были кратковременные и нечеткие улучшения.

Две дозы вакцины “Полидерм” по 0,8 мл с адьювантом по 0,25 мл (концентрат витаминов A, D₃, Е) ввели внутримышечно в заднебедренные мышцы 2 раза в две разные лапы с интервалом в 10 суток. После первой инъекции исчез зуд, часть желтых корочек исчезла, уменьшилось сечение шерсти. После второй инъекции выздоровление наступило окончательно через 20 суток. При последующем осмотре через один год признаков парши и других дерматологических заболеваний у животного не обнаружено.

Описанные примеры далеко не исчерпывают всех вариантов использования заявляемою изобретения. Живая вакцина “Полидерм” при внутримышечном введении ареактогенна, не патогенна и создает иммунитет у многих видов восприимчивых животных против практически всех основных возбудителей дерматофитозов животных, независимо oт ареала обитания или географического района содержания, т.к. включает в себя практически полный набор экзоантигенов и эндоантигенов культур дерматофитов. В частности, вакцина “Полидерм” успешно использовалась заявителем для лечения и профилактики таких дерматомикозов, как лишай, облысение, неукратимый зуд, стойкий длительный неприятный запах, у различных животных: кролики, морские свинки, крысы, мыши, норки, коровы, козы, морские котики, белухи, попугаи, домашняя птица. Вакцину вводили двукратно внутримышечно дозами по 0,25-2,00 мл с интервалом 10-14 суток. Выздоровление наступало через 18-24 суток. Технологический процесс получения вакцины “Полидерм” малотрудоемок и занимает относительно малое время, что в свою очередь определяет низкую стоимость вакцины.

По аналогии с вышеописанной известной вакциной [WO 01/15725, 2001] предполагается, что заявляемая вакцина, приготовленная из волоса человека, может быть эффективно использована для профилактики и лечения различных дерматологических заболеваний, например таких как дерматомикоз волосистой части головы, включая фавус (парша), паховый дерматомикоз, эпидермофития стопы и др.

Формула изобретения

1. Способ лечения и профилактики дерматомикозов позвоночных животных внутримышечным введением иммунологически эффективного количества вакцины в виде суспензии инактивированного живого и/или жизнеспособного антигенного материала из культур нескольких различных видов в физиологически приемлемом носителе, не патогенной для вакцинируемого позвоночного животного, отличающийся тем, что в качестве антигенного материала используют культуры дерматофитов, которые выдавливают из предварительно отделенных внешних придатков кожи позвоночных животных вместе с жидкостью, содержащейся в названных внешних придатках кожи, с последующей инактивацией полученной суспензии.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве внешних придатков кожи используют шерсть и/или волосы позвоночного животного того же и/или другого класса, или подкласса, или отряда, или семейства, или подсемейства, или рода, или вида позвоночных животных, чем вакцинируемое позвоночное животное.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве внешних придатков кожи используют шерсть и/или волосы позвоночных животных, обитающих в том же географическом ареале обитания или географическом районе содержания, что и вакцинируемое позвоночное животное.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве внешних придатков кожи используют шерсть и/или волосы, отделенные от кожи здоровых позвоночных животных и/или позвоночных животных, зараженных дерматомикозом.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что антигенный материал содержит хотя бы три культуры дерматофитов из группы: Achorion schoenleinii, Alternaria species, Candida species, Epidermophyton species, Microsporum species, Trichophyton species.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что вакцину вводят вместе с адъювантом в эффективном количестве.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что вакцину вводят двукратно с интервалом 10-14 суток.

8. Способ по п.7, отличающийся тем, что повторно вакцину вводят в другую мышцу вакцинируемого позвоночного животного.

9. Способ по п.1, отличающийся тем, что вводят вакцину, содержащую антигенный материал из культур дерматофитов в количестве 10²-10¹⁰ микроконидий в 1 мл.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что за одно введение вводят 0,25-2,00 мл вакцины.

11. Вакцина для лечения и профилактики дерматомикозов позвоночных животных, содержащая иммунологически эффективное количество живого и/или жизнеспособного антигенного материала из культур дерматофитов в виде комбинации из нескольких различных видов дерматофитов, а также инактиватор и физиологически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве культур дерматофитов вакцина содержит культуры дерматофитов, выдавленные из отделенных от кожи позвоночных животных внешних ее придатков вместе с жидкостью, содержащейся в названных внешних придатках кожи.

12. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что содержит инактивированные культуры дерматофитов, выдавленные из шерсти и/или волос позвоночных животных.

13. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что содержит хотя бы три культуры дерматофитов из группы: Achorion schoenleinii, Alternaria species, Candida species, Epidermophyton species, Microsporum species, Trichophyton species.

14. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что содержит культуры дерматофитов, инактивированные пастеризацией без разрушения существенных антигенных свойств культур дерматофитов.

15. Вакцина по п.14, отличающаяся тем, что пастеризация осуществлена при температуре 50-82°С в течение 30-240 мин.

16. Вакцина по п.15, отличающаяся тем, что пастеризацию осуществляют двукратно по 30-120 мин с интервалом 12-48 ч.

17. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что содержит антигенный материал культур дерматофитов в количестве 10²-10¹⁰ микроконидий в 1 мл.

18. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что в качестве инактиватора содержит формалин до 1,5 мас.%.

19. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что хотя бы частью физиологически приемлемого носителя является жидкость, выдавленная из внешних придатков позвоночных животных.

20. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что хотя бы частью физиологически приемлемого носителя является физиологическая жидкость.

21. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что предназначена для лечения и профилактики дерматомикозов птиц.

22. Вакцина по п.11, отличающаяся тем, что предназначена для лечения и профилактики дерматомикозов млекопитающих.

23. Способ получения вакцины для лечения и профилактики дерматомикозов позвоночных животных, включающий отбор антигенного материала нескольких культур дерматофитов, которые в комбинации способны придать иммунную защиту позвоночным животным от дерматомикозов и не патогенны, инактивацию отобранных культур дерматофитов так, чтобы не разрушить существенные антигенные свойства отобранных культур дерматофитов, отличающийся тем, что культуры дерматофитов отбирают их выдавливанием из предварительно отделенных внешних придатков кожи позвоночных животных вместе с жидкостью, содержащейся в названных внешних придатках кожи, с последующей инактивацией полученной суспензии.

24. Способ по п.23, отличающийся тем, что в качестве внешних придатков кожи используют шерсть и/или волосы, отделенные от кожи позвоночных животных одного и того же и/или другого класса, или подкласса, или отряда, или семейства, или подсемейства, или рода, или вида позвоночных животных, чем позвоночное животное, для которого предназначена вакцина.

25. Способ по п.23, отличающийся тем, что в качестве внешних придатков кожи используют шерсть и/или волосы, отделенные от кожи позвоночных животных, обитающих в том же географическом ареале обитания или географическом районе содержания, что и позвоночное животное, для которого предназначена вакцина.

26. Способ по п.23, отличающийся тем, что в качестве внешних придатков кожи используют шерсть и/или волосы, отделенные от кожи здоровых позвоночных животных и/или позвоночных животных, зараженных дерматомикозом.

27. Способ по п.23, отличающийся тем, что предварительно отделенные внешние придатки кожи подвергают антисептической обработке с последующей промывкой физиологически приемлемой жидкостью до полного удаления остатков антисептика.

28. Способ по п.27, отличающийся тем, что в качестве физиологически приемлемой жидкости используют физиологический раствор.

29. Способ по п.27, отличающийся тем, что после промывки обработанные внешние придатки кожи хранят до выдавливания в физиологически приемлемой жидкости.

30. Способ по п.27, отличающийся тем, что антисептическую обработку проводят водным раствором щелочи в эффективном количестве.

31. Способ по п.30, отличающийся тем, что в качестве водного раствора щелочи используют 2%-ный водный раствор гидроокиси натрия при отношении отделенных внешних придатков кожи к водному раствору 1 мас.ч.: 5-9 мас.ч., а антисептическую обработку таким раствором проводят, выдерживая отделенные внешние придатки кожи в указанном водном растворе в течение 3-15 мин при температуре 17-25°С.

32. Способ по п.23, отличающийся тем, что перед выдавливанием отделенные внешние придатки кожи измельчают.

33. Способ по п.32, отличающийся тем, что измельчение проводят до размера частиц 2-4 мм.

34. Способ по п.23, отличающийся тем, что для инактивации используют тепловую обработку полученной суспензии пастеризацией.

35. Способ по п.34, отличающийся тем, что пастеризацию суспензии осуществляют при температуре 50-82°С в течение 30-240 мин.

36. Способ по п.35, отличающийся тем, что пастеризацию суспензии осуществляют двукратно по 30-120 мин с интервалом 12-48 ч.

37. Способ по п.23, отличающийся тем, что для инактивации в полученную суспензию вводят инактиватор в эффективном количестве.

38. Способ по п.37, отличающийся тем, что в качестве инактиватора используют формалин до 1,5 мас.%.

39. Способ по п.23, отличающийся тем, что суспензию до инактивации фильтруют.