Способ получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего и иммуномодулирующего средства
Владельцы патента RU 2259835:
Пермская государственная фармацевтическая академия (RU)
Государственное унитарное предприятие Межбольничная аптека Медицинского центра Управления делами Президента РФ (RU)
Блинова Ольга Алексеевна (RU)
Изобретение относится фармацевтической промышленности, а именно к способу получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего, иммуномодулирующего средства. Способ получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего, иммуномодулирующего средства характеризуется в четыре этапа, на первом этапе измельченную траву фиалки трехцветной и/или полевой экстрагируют сжиженным углекислым газом при определенных условиях с последующим отделением шрота от липофильной фракции экстракта, на втором этапе - обезжиренный шрот подвергают трехкратной экстракции методом ремацерации при определенных условиях с последующей очисткой объединенных экстрактов, фильтрованием, сгущением и получением жидкого спиртового экстракта, на третьем этапе - жидкий спиртовой экстракт используют для получения полисахаридного и флавоноидного комплексов путем осаждения полисахаридов трехкратным объемом 96% спирта с последующей сушкой при определенной температуре, на четвертом этапе - шрот после выделения полисахаридного и флавоноидного комплексов используют для получения пектинов путем обработки трехкратным объемом раствора оксалата аммония при определенной температуре, упаривания и сушки. Жидкий спиртовой экстракт упаривают до 1/5 объема, высушивают распылительной сушкой или лиофильной сушкой при определенных температурах. Каждый целевой продукт, полученный на каждом из этапов, может быть как самостоятельной лекарственной формой, так может быть использован для получения других лекарственных форм (таблетки, капсулы, суппозитории, пленки). Способ получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего, иммуномодулирующего средства характеризуется тем, что измельченную траву фиалки трехцветной и/или полевой экстрагируют 70% этиловым спиртом путем настаивания в течение определенного времени с последующей очисткой целевого продукта, отстаиванием при определенной температуре и фильтрованием. Способ позволяет получить средство с широким фармакологическим спектром действия и обеспечивает максимальное использование лекарственного растительного сырья. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 табл.
Изобретение относится к фармации, а именно к способу получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего, иммуномодулирующего средства из травы рода фиалка (трехцветной, душистой, полевой), обеспечивающего максимально полное использование лекарственного растительного сырья.
В современной медицинской практике широко используются фитопрепараты, обладающие противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим, иммуномодулирующим действием.
Относящиеся к группе витаминов Р, ряд веществ - флавоноидов - обладает способностью уменьшать проницаемость и ломкость капилляров, т.е. капилляроукрепляющим действием. В качестве лекарственных средств практическое применение имеют препараты рутин и кверцетин.
Используются фитосредства, обладающие иммуномодулирующим действием - "Ветарон", витамины Е,С и β-каротин; а также серия биологически активных добавок к пище на основе ламинарии с добавлением экстракта петрушки, кедрового ореха, семян тыквы, абрикосов и лецитина.
В настоящее время трава фиалки входит в состав отхаркивающего и мочегонного сборов, применяется в виде настоя, имеющего ряд существенных недостатков (кратковременность терапевтического действия, неточность дозирования, ограниченный срок хранения), а также служит сырьем для получения новогаленового препарата тривиолина, применяемого при кашле, безалкогольного бальзама "Гербамарин" в составе 38 трав. Указанные лекарственные формы наглядно демонстрируют ограниченное использование в производстве травы фиалки, обладающей широким спектром фармакологического действия.
1. В патенте РФ 2197977 от 2001 года описан способ получения средства, обладающего противовоспалительным действием из семян тыквы.
2. Известен способ получения иммуностимулирующего и противовоспалительного средства из смеси компонентов: травы эхиноцеи, корня солодки, травы чабреца и меда, патент РФ 2180586, 2000 год.
3. Известен способ получения иммуномодулирующего средства путем экстракции из семян чины посевной, патент РФ 2181052, 2001 год.
4. Известен способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью из листьев лопуха войлочного, патент РФ 2171680, 2000 год.
5. Известен способ получения средства, обладающего противовоспалительной активностью из надземной части панцерии шерстистой, патент РФ 2160599.
Найденные в патентной и научно-технической литературе и перечисленные аналоги не позволяют получить средства, обладающие широким фармакологическим спектром, включающем противовоспалительное, ранозаживляющее, капилляроукрепляющее, иммуномодулирующее действие на организм.
Задачей настоящего изобретения является создание способа получения средства, обладающего одновременно противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим и иммуномодулирующим действием, из травы рода фиалка при условии обеспечения ресурсосберегающей технологии, позволяющей максимально полно использовать лекарственное растительное сырье.
Поставленная задача решается за счет того, что предложен способ получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего и иммуномодулирующего средства из травы рода фиалка, включающего экстракцию измельченного сырья сжиженным углекислым газом под давлением 5,8-6,0 Н/м2 при 18-20°С в течение 15-30 минут с последующим отделением шрота, затем шрот подвергают трехкратной экстракции методом ремацерации, причем первую и вторую проводят водой при 80-90°С в течение 1-2 часов, третью - 40-70% этанолом при 40-60°С в течение 0,5-1 часа - с последующей очисткой объединенных экстрактов при 8-10°С, фильтрованием, сгущением и получением жидкого спиртового экстракта, который упаривают до 1/5 объема, высушивают распылительной сушкой при 50-60°С или лиофильной сушкой при -193°С, жидкий спиртовый экстракт используют для получения полисахаридного и флавоноидного комплексов путем осаждения полисахаридов трехкратным объемом 96% этанола с последующей сушкой при 50-60°С, а шрот используют для получения пектинов путем обработки трехкратным объемом 0,5% раствора оксалата аммония при 70-80°С, упаривания и сушки; из измельченного сырья также получают средство, обладающее противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим и иммуномодулирующим действием, в виде настойки путем настаивания сырья в 70% этаноле в течение 7 дней и последующей очисткой целевого продукта и фильтрацией.
Технический результат, полученный при использовании изобретения, заключается в создании фитосредства широкого фармакологического спектра действия, полученного из травы рода фиалка заявленным способом, обеспечивающим также максимально полное использование лекарственного растительного сырья.
Заявленный способ иллюстрируется примерами.
Пример 1.
10,0 кг травы фиалки, измельченной до 1,0 мм, загружают в контейнер и помещают в камеру для замачивания сжиженным газом под давлением 5,8-6,0 Н/м2 при температуре 18-25°С в течение 15-30 минут. Затем сырье передают в камеру при пониженном давлении, в которой происходит измельчение за счет разности давления внутри и на поверхности материала. После этого сверху на сырье подают 100-120 кг сжиженного углекислого газа. Шрот обогревают в теплообменнике для удаления паров углекислого газа. Полученное извлечение фильтруют, затем помещают в теплообменник, удаляют из него пары углекислого газа, поступающие в конденсатор для сжижения и в сборник. Полученный экстракт содержит β-каротиноиды, эфирное масло и обладает противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим и иммуномодулирующим действием.
Пример 2.
Шрот заливают 100 л воды очищенной, нагревают до температуры 90°С, выдерживают при перемешивании в течении 1 часа. Извлечение сливают в сборник.
Шрот заливают 50 л воды очищенной, нагревают до температуры 90°С, выдерживают при перемешивании 0,5 часа. Извлечение сливают в сборник.
Шрот укладывают в перколятор, заливают 100 л 70% этиловым спиртом до "зеркала", нагревают до температуры 40°С, выдерживают при периодическом перемешивании в течение 1 часа. Извлечение сливают в сборник, спирт отгоняют.
Полученные извлечения сливают, очищают отстаиванием при температуре 8-10°С, фильтруют через друк- или пресс-фильтр, сгущают под вакуумом до соотношения 1:1 для получения жидкого экстракта, обладающего противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим и иммуномодулирующим действием.
Для получения сухого экстракта жидкий экстракт упаривают до 1/5 объема, высушивают с помощью вакуум-сушильного аппарата, распылительной сушилки при 50-60°С или лиофильной сушкой при -193°С до образования сухой сыпучей массы. Содержание фенольных соединений в экстракте составляет 3,0-3,5%, полисахаридов 23-25%, он обладает той же активностью, что и жидкий экстракт.
Сухой шрот в количестве 10,0 кг обрабатывают трехкратным объемом 0,5% раствора оксалата аммония при 70-80°С. Извлечение фильтруют, упаривают и высушивают.
Пример 3.
К 10 л жидкого экстракта травы фиалки добавляют 30 л 96% спирта этилового, оставляют до образования осадка в течение 1 часа при периодическом перемешивании, затем осадок отфильтровывают, высушивают при температуре 50°С в вакуум-сушильном шкафу, получают полисахаридный комплекс, обладающий противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим и иммуномодулирующим действием.
Пример 4 (сухой экстракт).
10,0 кг травы фиалки, измельченной до размера частиц 2-5 мм, укладывают в экстрактор с мешалкой и паровой рубашкой, заливают 150 л воды очищенной, нагревают до температуры 85±5°С, выдерживают при периодическом перемешивании в течение 0,5 часа. Извлечение в объеме 100 л сливают в сборник.
Шрот заливают 100 л воды очищенной, нагревают до температуры 85±5°С, выдерживают при перемешивании в течение 0,5 часа. Извлечение в объеме 100 л сливают в сборник.
Шрот заливают 100 л воды очищенной, нагревают до температуры 85±5°С, выдерживают при перемешивании в течение 0,5 часа. Извлечение в объеме 100 л сливают в сборник.
Полученные извлечения в объеме 300 л сливают, очищают отстаиванием при температуре 8°С, фильтруют через друк- или пресс-фильтр, сгущают под вакуумом при температуре 60°С до получения 20 кг извлечения. Извлечение высушивают с помощью вакуум-сушильного аппарата, распылительной сушилки при 50-60°С или лиофильной сушкой при -193°С до образования сухой сыпучей массы. Содержание фенольных соединений в экстракте составляет 3,0-3,5%, полисахаридов 23-25%, он обладает той же активностью, что и жидкий экстракт.
Пример 5 (настойка).
10 кг травы фиалки измельченной до размера частиц 2-5 мм укладывают в перколятор, заливают 140 л 70% этилового спирта до "зеркала" и настаивают в течение 7 дней.
Извлечение в объеме 100 л сливают, очищают отстаиванием при температуре 8°С, фильтруют через друк- или пресс-фильтр.
Полученная настойка представляет собой темно-коричневую жидкость со специфическим запахом и вкусом. Содержание флавоноидов не менее 0,1% в пересчете на рутин.
Пример 6 (полисахариды).
К 10 л жидкого экстракта травы фиалки добавляют 30 л 96% спирта этилового, оставляют до образования осадка в течение 1 часа при периодическом перемешивании, затем осадок отфильтровывают, высушивают при температуре 50°С в вакуум-сушильном шкафу.
Пример 7 (пектины).
Сухой шрот в количестве 2,0 кг обрабатывают трехкратным объемом 0,5% раствора оксалата аммония при 70-80°С. Извлечение упаривают и высушивают, получают пектиновый комплекс, обладающий противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим и иммуномодулирующим действием.
Каждый целевой продукт, полученный на каждом из этапов, может быть как самостоятельной лекарственной формой, так и может быть использован для получения других лекарственных форм.
Пример 8 (таблетки с обезжиренным шротом).
10,0 кг обезжиренного шрота высушивают, измельчают с помощью шаровой мельницы. Отвешивают 0,016 кг (0,010-0,020 кг) магния карбоната основного, 0,028 (0,02-0,03) кг крахмала картофельного, 0,003 (0,002-0,004) кг талька, 0,006 (0,004-0,008) кг титана двуокиси, 0,003 (0,002-0,004) кг кальция стеарата, 0,200 (0,15-0,25) кг сухого обезжиренного шрота травы фиалки, перемешивают до однородности. Получают таблетки массой 0,3 г при давлении прессования 80-160 МПа.
Пример 9 (суппозитории).
Расплавляют 1,0 кг твердого кондитерского жира, добавляют 0,05 кг моноглицеридов дистиллированных, полученную основу смешивают с 0,1 кг углекислотного экстракта травы фиалки. Суппозиторную массу разливают в гнезда формы, охлаждают, вынимают и упаковывают по 10 доз в пакеты из полиэтилена или цефлена.
Пример 10 (мягкие желатиновые капсулы).
Для приготовления капсульной желатиновой массы отвешивают 27,0 г (25-30 г) желатина, 9,0 г (7-11 г) глицерина, 64,0 г (62-66 г) воды. Желатин заливают водой температуры 15-18°С, оставляют для набухания на 1,5 (1-2) часа, добавляют глицерин и нагревают до 60-65 (45-75)°С при перемешивании с помощью якорной мешалки со скоростью 25-30 об/мин в течение 1,5 (1-2) часов до образования однородной массы. Затем желатиновую массу отстаивают при той же температуре в течение 1 часа для удаления пузырьков воздуха. Углекислотный экстракт травы фиалки помещают в дозирующую емкость аппарата для получения капсул, желатиновую массу также загружают в две обогреваемые емкости с температурой 65-70°С. При одновременном вытекании препарата и желатиновой массы периодически происходит отрыв капель с образованием шарообразных капсул, заполненных экстрактом. Капсулы охлаждают в несмешивающейся с водой жидкости (вазелиновом масле) при температуре 6-10°С, затем промывают в органическом растворителе (гексане или петролейном эфире) и высушивают.
Пример 11 (олеогель).
Отвешивают 5,0 (5,0-7,0) кг натрийкарбоксиметилцеллюлозы, 2,0 (1-2) кг глицерина, 2,0 (1-3) кг твина - 80, 0,1 (0,1-0,5) кг углекислотного экстракта фиалки и 91 (85-95) кг воды очищенной. В воде, нагретой до температуры 50-60°С, равномерно распределяют натрийкарбоксиметилцеллюлозу, перемешивают при помощи мешалки со скоростью 60-70 об/мин до полного растворения, затем добавляют глицерин, твин-80 и углекислотный экстракт фиалки, перемешивая до охлаждения.
Пример 12 (пленки лекарственные).
Отмеривают 96 л воды очищенной, нагревают до 50-60°С, при механическом перемешивании равномерно распределяют 3,0 кг натрийкарбоксиметилцеллюлозы. После полного растворения полимера добавляют 2,0 кг глицерина и 4 л жидкого экстракта травы фиалки. Пленочную массу оставляют для деаэрации на 1-2 часа, затем разливают на гидрофобные подложки и высушивают при температуре 40-45°С в течение 20 часов. Высушенные пленки снимают с подложки, разрезают на дозы 1*2 см и упаковывают по 10 штук в пакеты из полиэтилена или цефлена.
Пример 13 (сироп).
Отмеривают 32 л воды очищенной, нагревают до кипения и высыпают 64 кг сахара-песка, перемешивая до полного растворения. Сиропу дают вскипеть, снимают пену и снова доводят до кипения, добавляют 1 мг консерванта (кислота сорбиновая натрия бензоат). Полученный сироп фильтруют через марлю и охлаждают. После охлаждения добавляют 4 л жидкого экстракта травы фиалки, затем разливают во флаконы по 100 мл и укупоривают.
Пример 14 (гранулы шипучие).
Отвешивают 47,5 (45-50) кг сахарной пудры, 1,5 (1-2) кг кислоты лимонной, 1,0 (0,5-1,5) кг экстракта фиалки сухого, перемешивают и равномерно смачивают сахарным сиропом, затем гранулируют и высушивают. Отдельно отвешивают 47,5 (45-50) сахарной пудры, 1,5 (1-2) натрия гидрокарбоната, 1,0 (0,5-1,5) экстракта фиалки сухого, перемешивают и равномерно смачивают сахарным сиропом, затем гранулируют и высушивают. Обе части перемешивают и фасуют в пакеты.
Пример 15 (таблетки шипучие).
Отвешивают 48,0 (45-50) кг сахарной пудры, 1,0 (0,5-1,5) кг кислоты лимонной, 1,0 (0,5-1,5) кг экстракта фиалки сухого, перемешивают и равномерно смачивают сахарным сиропом, затем гранулируют и высушивают. Отдельно отвешивают 47,0 (45-50) сахарной пудры, 2,0 (1-3) натрия гидрокарбоната, 1,0 (0,5-1,5) экстракта фиалки сухого, перемешивают и равномерно смачивают сахарным сиропом, затем гранулируют и высушивают. Обе части перемешивают, опудривают 0,2 (0,1-0,3) кг кальция стеарата и таблетируют при давлении прессования 80-160 МПа.
Пример 16 (болюсы, пилюли, драже).
Отвешивают 1,0 г сахарных гранул, 63,0 г сахара, 5,0 сахарной пудры, 32,0 г патоки, 15,0 г воды очищенной, 1,0 г растительного масла, 0,2 г парафина, 0,2 г воска пчелиного. Сироп готовят в варочных котлах с паровой рубашкой или в варочных баках со змеевиком. Сахарный песок загружают в аппарат через решетку с расстоянием между прутьями не более 5 мм, куда предварительно вливают воду. Раствор упаривают при давлении пара 0,4-0,45 МПа при температуре 110-112°С в течение 30-35 мин. В конце упаривания вводят патоку и раствор перемешивают. Готовый сироп пропускают через фильтр, затем добавляют экстракт фиалки сухой, перемешивают и перекачивают в сборник для охлаждения. Гранулы загружают в дражировочный котел, покрывают сиропом, затем обсыпают сахарной пудрой, подсушивают. Эти операции повторяют до образования драже массой 0,2-0,3 г.
Пример 17 (карамель).
Отвешивают 63,0 г сахарною песка, 32,0 патоки, 0,43 г кислоты аскорбиновой, 0,69 г кислоты лимонной, 1,0 г экстракта фиалки сухого, 15,0 мл воды очищенной. В котле нагревают воду до кипения, растворяют сахарный песок. Полученный сироп упаривают под давлением 0,4-0,45 МПа при температуре 110-112°С в течение 30-35 мин, затем добавляют патоку, кислоту лимонную, аскорбиновую, экстракт фиалки, тщательно перемешивают. Карамельную массу выливают на металлическую поверхность, охлаждают 5-10 минут, передают на формование карамели. Карамель отсеивают от крошки и упаковывают.
Определение противовоспалительной активности экстракта фиалки сухого
Изучение противовоспалительных свойств экстракта осуществляли на модели острого воспалительного отека, вызванного субплантарным введением в заднюю лапу крысы 0,1 мл 1% водного раствора каррагенина. Исследование проводили на 30 белых беспородных крысах обоего пола массой 260-320 г. Увеличение объема стопы оценивали онкометрически до и через 4 часа после введения каррагенина. Данные представлены в таблице 1.
В результате исследования обнаружено, что в контрольной группе прирост объема стопы составил 105,9±4,4%.
Раствор экстракта фиалки вводили через зонд в желудок в дозе 0,3 мг/кг за 1 час до введения флогогенного агента. Контролем служили животные, которым вместо раствора экстракта вводили физиологический раствор. Результат оценивали по приросту объема стопы, выраженному в %. Результаты исследования представлены в таблице 2. Как следует из представленных данных, экстракт фиалки сухой проявляет четко выраженный противовоспалительный эффект, оцениваемый по достоверному уменьшению прироста объема стопы.
Изучение ранозаживляющей активности экстракта фиалки сухого
Следующий этап исследований включал изучение ранозаживляющей активности, об эффективности которого судили по скорости течения репарации срастающихся тканей. Объективным показателем этого процесса является прочность послеоперационного рубца, которую определяли тензиометрически.
Эксперимент проводили на крысах в асептических условиях под кратковременным эфирным наркозом, на спине животных делали разрез кожи до подкожной клетчатки длиной 4 см (у каждой крысы выполняли 2 разреза, параллельных друг другу), затем раны зашивали одним рядом узловых шелковых швов (шелк №3). Расстояние между швами составляло 4-5 мм. Раны опытных животных ежедневно обрабатывали: группу сравнения - мазью "Календула", исследуемую группу - 1% раствором экстракта фиалки, контрольную группу животных не обрабатывали. Животных умерщвляли путем декапитации через 5 и 7 суток после операции. О ранозаживляющей активности судили по результатам измерения прочности рубца на разрыв.
Результаты изучения ранозаживляющей активности экстракта фиалки сухого представлены в таблице 3.
Как следует из данных, представленных в таблице 3, к 7 суткам раствор экстракта достоверно увеличивает силу разрыва рубца в сравнении с контролем. Результаты исследования показали, что экстракт фиалки обладает ранозаживляющей активностью.
Изучение Р-витаминной (капилляроукрепляющей) активности экстракта сухого и настойки фиалки
Изучение Р-витаминной экстракта фиалки сухого и настойки фиалки проводили с помощью аппарата Нестерова типа НПК-5 для определения проницаемости кожи на 24 белых беспородных крысах-самках. У крыс удаляли шерсть, затем кюветки, края которых слегка смазывали вазелином, накладывали на поверхность кожи и создавали под кюветками отрицательное давление в 100 мм рт. ст. Через 30 секунд проверяли наличие петехий. Определяли уровень, при котором под кюветками появляются первые петехии. Исследования прекращали при появлении под каждой кюветкой не менее 5 петехий. Физиологический раствор (контроль), рутин, экстракт фиалки сухой и настойку вводили перорально из расчета 100 мг на 1 кг массы тела животного в течение 3 дней, предшествовавших началу эксперимента. Данные представлены в таблице 4.
Как следует из представленных данных, экстракт сухой и настойка фиалки обладает четко выраженным капилляроукрепляющим действием.
Определение иммуномодулирующей активности препаратов фиалки
Иммуномодулирующую активность препаратов фиалки испытывали на мышах. Мыши линии BALB/C были разделены на 4 группы (по 15 мышей). Первая группа получала с кормом в течение 5 недель сухой экстракт фиалки, вторая группа - жидкий экстракт фиалки, третья группа - настойку фиалки, четвертая группа - контроль.
Иммуномодулирующую активность изучаемых препаратов оценивали по пролиферативной активности лимфоцитов селезенки - спленоцитов, а именно по их способности трансформироваться в бластные клетки in vitro под действием фитогемаглютинина (ФГА), степень бласттрансформации лимфоцитов определяли по включению Н3-тимидина в ДНК клетки.
Индекс пролиферации (ИП) определяли по формуле
Данные представлены в таблице 5.
Как следует из представленных в таблице 5 данных, изученные препараты из травы фиалки, полученные заявленным способом, стимулируют пролиферативную активность лимфоцитов селезенки мышей: экстракт фиалки сухой в 1,8 раз, экстракт фиалки жидкий - 1,5 раза и настойка фиалки - в 1,4 раза по сравнению с контролем.
Таким образом, заявленный способ позволяет осуществить комплексную переработку травы рода фиалка с получением целевого продукта, обладающего широким фармакологическим спектром, что позволяет расширить арсенал противовоспалительных, ранозаживляющих, капилляроукрепляющих, иммуномодулирующих фитосредств.
| Таблица 1 Моделирование острого воспалительного отека при введении каррагенина(контроль) | |||
| №п/п | Исходный объем стоны | Объем стопы через 4 часа | Прирост объема,% |
| 1 | 0,95 | 1,85 | 94,7 |
| 2 | 0,90 | 1,80 | 100,0 |
| 3 | 0,75 | 1,65 | 100,0 |
| 4 | 1,0 | 2,0 | 100,0 |
| 5 | 0,90 | 1,85 | 105,5 |
| 6 | 0,65 | 1,40 | 115,4 |
| M±m= 105,9±4,4 |
| Таблица 3 Определение ранозаживляющей активности экстракта фиалки сухого | ||
| Состав | Сила разрыва рубца (г) через | |
| 5 суток | 7 суток | |
| Контроль (без обработки) | 290,0±24,3 | 521,7±45,8 |
| Мазь "Календула" | 466,7±24,3 | 630,0±70,0 |
| Раствор экстракта фиалки | 398,3±82,3 | 871,6±58,7 |
| р<0,05 |
| Таблица 4 Определение капилляроукрепляющей активности экстракта сухого и настойки фиалки | ||||
| № п/п | Отрицательное давление, выбывающее нарушение проницаемости капилляров, мм рт. ст. | |||
| контроль | рутин | Экстракт фиалки сухой | Настойка фиалки | |
| 1 | 300 | 430 | 580 | 530 |
| 2 | 312 | 460 | 590 | 530 |
| 3 | 320 | 440 | 500 | 560 |
| 4 | 310 | 450 | 575 | 550 |
| 5 | 300 | 435 | 610 | 540 |
| 6 | 290 | 420 | 600 | 570 |
| Таблица 5 Определение иммуномодулирующей активности препаратов фиалки | ||||
| Изучаемое средство | Пролиферативная активность спленоцитов, индекс пролиферации | Относительная активность, % к контролю | ||
| Экстракт фиалки сухой | 75,2±4,9* | 180 | ||
| Экстракт фиалки жидкий | 62,4±5,1* | 150 | ||
| Настойка фиалки | 57,8±42* | 140 | ||
| Контроль | 41,3±3,7* | 100 |
1. Способ получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего, иммуномодулирующего средства, характеризующийся в четыре этапа: на первом этапе измельченную траву фиалки трехцветной и/или полевой экстрагируют сжиженным углекислым газом под давлением 5,8-6,0 Н/м2 при 18-20°С в течение 15-30 мин с последующим отделением шрота от липофильной фракции экстракта, на втором этапе обезжиренный шрот подвергают трехкратной экстракции методом ремацерации, причем первую и вторую проводят водой при 80-90°С в течение 1-2 ч, третью - 40-70%-ным этанолом при 40-60°С в течение 0,5-1 ч с последующей очисткой объединенных экстрактов при 8-10°С, фильтрованием, сгущением и получением жидкого спиртового экстракта, на третьем этапе жидкий спиртовой экстракт используют для получения полисахаридного и флавоноидного комплексов путем осаждения полисахаридов трехкратным объемом 96%-го спирта с последующей сушкой при температуре 50-60°С, на четвертом этапе шрот после выделения полисахаридного и флавоноидного комплексов используют для получения пектинов путем обработки трехкратным объемом 0,5%-го раствора оксалата аммония при 70-80°С, упаривания и сушки.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что жидкий спиртовой экстракт упаривают до 1/5 объема, высушивают распылительной сушкой при 50-60°С или лиофильной сушкой при -193°С.
3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что каждый целевой продукт, полученный на каждом из этапов, обладает противовоспалительным, ранозаживляющим, капилляроукрепляющим, иммуномодулирующим действием.
4. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что каждый целевой продукт, полученный на каждом из этапов, может быть как самостоятельной лекарственной формой, так может быть использован для получения других лекарственных форм (таблетки, капсулы, суппозитории, пленки).
5. Способ получения противовоспалительного, ранозаживляющего, капилляроукрепляющего, иммуномодулирующего средства, характеризующийся тем, что измельченную траву фиалки трехцветной и/или полевой экстрагируют 70%-ым этиловым спиртом путем настаивания в течение 7 дней с последующей очисткой целевого продукта, отстаиванием при температуре 8°С и фильтрованием.
