Способ коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - с12, с30, с200
Владельцы патента RU 2306953:
Белоус Александр Сергеевич (RU)
Покровская Татьяна Григорьевна (RU)
Артюшкова Елена Борисовна (RU)
Покровский Михаил Владимирович (RU)
Кочкаров Владимир Исхакович (RU)
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции эндотелиальной дисфункции. Для этого моделируют эндотелиальную дисфункцию белым крысам внутрибрюшинным введением ингибитора эндотелиальной синтазы N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг в течение 7 суток. Последующую коррекцию эндотелиальной дисфункции осуществляют введением гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200 в течение 7 суток. Способ обеспечивает эффективную коррекцию эндотелиальной дисфункции в специфических условиях эксперимента. 2 табл.
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.
Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции эндотелиальной дисфункции с помощью статинов, относящихся к гиполипидемическим препаратам, описанный Rikitake Y, Liao J.K. в статье «Rho GTPases, statins, and nitric oxide», Circ. Res., 2005, №9, V. 97(12), P.1232-1235, который заключается в использовании статинов для коррекции эндотелиальной дисфункции.
Основным недостатком способа является то, что коррекция эндотелиальной дисфунции связана с повышением активности эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) и является холестеролнезависимым, «плейотропным», то есть дополнительным механизмом действия данной группы препаратов. К тому же основным компонентом коррекции эндотелиальной дисфункции статинами является увеличение биодоступности оксида азота, связанное с гиполипидемическими эффектами статинов.
В то время как основным механизмом действия смеси растворов гомеопатичесих разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 является увеличение количества eNOS, приводящее к повышению содержания оксида азота в магистральном сосудистом русле и коррекции эндотелиальной дисфункции. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции, связанной с недостаточным количеством эндотелиальной NO-синтазы, с помощью статинов неудовлетворительны.
Техническим результатом изобретения является способ коррекции эндотелиальной дисфункции, включающий использование смеси растворов гомеопатичесих разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С 12, С30, С200, приводящий к повышению количества eNOS. Технический результат достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте внутрибрюшинным введением лабораторному животному в течение 7 суток блокатора синтеза NO L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг, проводится ее коррекция введением смеси растворов гомеопатических разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200 добавлением в поилки в количествах, принятых в гомеопатии, со свободным доступом к питью, замена воды в поилках производиалсь 1 раз в сутки с количественным учетом выпитой жидкости (20±3 мл в среднем на одно животное).
СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ
Опыты проводят на белых крысах самцах линии Wistar массой 250-300 г. N-нитро-L-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводится внутрибрюшинно в дозе 25 мг/кг/сут. На 7 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Bioshell". Функциональные пробы: эндотелий зависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетилхолина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелий независимая вазодилатация (ЭНЗВ) - внутривенное введение нитропрусеида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.
При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при р<0,05.
ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ.
Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 84,3±4,4, для диастолического давления (ДАД) - 38,7±2,8 и для среднего артериального давления (СрАД) 53,9=1=2,7 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту. Восстановление АД происходило в среднем за 42,2±0,8 сек после нормализации сердечного ритма. ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 83,0±3,7, ДАД до 42,1±4,4 и СрАД до 55,7±3,5 мм рт.ст. с последующим полным восстановлением в среднем в течение 45,1±1,0 сек. Блокада NO-синтазы с помощью длительного, ежедневного, в течение 7-суток внутрибрюшинного введения L-NAME (N-нитро-L-аргинин метиловый эфир в дозе 25 мг/кг) вызывало артериальную гипертензию (САД - 190,3±6,7, ДАД - 145,0±3,9, СрАД - 160,1±4,6 мм рт.ст.) и приводила к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 110,6±5,2, ДАД до 82,8±6,6, СрАД до 92,1±6,1 мм рт.ст.) и НП (САД до 88,7±4,7, ДАД до 50,8±4,2 и СрАД до 63,4±4,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными.
Одновременное введение L-NAME и смеси растворов гомеопатичесих разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200 («BD Transduction Labs, USA) добавлением в поилки со свободным доступом к питью не приводило к снижению показателей исходных значений АД (САД - 184,3±7,0, ДАД - 136,7±6,5 мм рт.ст.). (табл. 1.).
| Таблица 1 | ||||
| Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании дефицита оксида азота и коррекции эндотелиальной дисфункции смесью растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30,С200. | ||||
| Группы животных | Функциональные пробы | САД, мм рт.ст. | ДАД, мм рт.ст. | ЧСС, уд. в мин |
| Интактные | Исходные | 137,7±3,7 | 101,9±4,3 | 420,0±9,0 |
| ЭЗВ с АХ | 84,3±4,5 | 38,7±2,8 | 416,0±14,0 | |
| ЭНЗВ с НП | 83,0±3,7 | 42,1±4,4 | 415,0±10,0 | |
| Получавшие L-NAME (25 мг/кг) | Исходные | 190,3±6,7* | 145,0±3,9* | 428,0±11 |
| ЭЗВ с АХ | 110,6±5,2* | 82,8±6,6* | 426,0±14,0 | |
| ЭНЗВ с НП | 88,7±4,7 | 50,8±4,2 | 426,0±13,0 | |
| L-NAME (25 мг/кг) + смесь растворов гомеопатических разведении поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - С12, С30, С200 | Исходные | 184,3±7,0 | 136,7±6,5 | 417,1±13,1 |
| ЭЗВ с АХ | 91,0±2,1** | 53,1±4,6** | 401,0±12,0 | |
| ЭНЗВ с НП | 94,3±4,6 | 57,8±5,9 | 427,0±13,7 | |
| * - р<0,05 в сравнении с группой интактных; ** - р<0,05 в сравнении с группой L-NAMF. |
Принципиальная разница в ЭЗВ и ЭНЗВ у интактных животных и животных с введением ингибитора NO-синтазы L-NAME закономерно привело нас к необходимости выведения специального показателя, характеризующего степень эндотелиальной дисфункции, являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.
Мы рассчитывали это отношение у каждого животного интактной группы и крыс после моделирования блокады NO-синтазы и получили разницу данного показателя в 5 раз - соответственно 1,1 у интактных и 5,4 у животных, получавших L-NAME.
Таким образом, для дальнейшей оценки влияния АХ и НП при ЭЗВ и ЭНЗВ нами использовано это отношение как показатель коррекции эндотелиальной дисфункции. Так, в группе, где на фоне введения ингибитора N0-синтазы L-NAME вводилась смесь растворов гомеопатичесих разведении поликлепальных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200 (табл. 2.).
Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию эндотелиальной на фоне введения L-NAME смеси растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200.
Способ коррекции эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте белым крысам самцам линии Wistar с эндотелиальной дисфункцией, на фоне ее моделирования внутрибрюшинным введением ингибитора эндотелиальной синтазы N-нитро-L-аргинин метилового эфира в дозе 25 мг/кг в течение 7 суток, ежедневно вводят добавлением в поилки к питью смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200 в течение 7 суток.
