Способ нормализации уровня 2 антиплазмина у новорожденных поросят с анемией
Владельцы патента RU 2349308:
Медведев Илья Николаевич (RU)
Беспарточный Борис Дмитриевич (RU)
Изобретение относится к области ветеринарии. Способ заключается в том, что назначают ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина. При этом дополнительно вводят гамавит 0,012 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина. Способ позволяет нормализовать уровень α2 антиплазмина у новорожденных поросят с анемией. 1 табл.
Изобретение относится к биологии и ветеринарии, а именно к гематологии.
Аналогов предлагаемого способа нормализации уровня α2 антиплазмина у новорожденных поросят с анемией не существует.
Имеются сведения о применении при анемии у поросят ферроглюкина (Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных. Под ред. В.М.Данилевского. М.: Агропромиздат, 1991. - 576 с.).
В качестве эффективных стимуляторов жизнедеятельности растущего организма в современной ветеринарии применяются фоспренил - препарат на основе фосфатов полипренолов, получаемых из хвои, и гамавит - комплексное сбалансированное средство на основе плаценты, содержащее нуклеинат натрия, набор аминокислот, витаминов и солей (Деева А.В., Салахова З.А., Лобова Т.П. и др. Повышение сохранности и продуктивности поросят при использовании фоспренила и гамавита. // Ветеринария. - 2006. - №4. - с.13-15).
Однако никогда ранее лечебный комплекс, состоящий из ферроглюкина, фоспренила и гамавита, не применялся у новорожденных поросят с анемией с целью нормализации уровня α2 антиплазмина.
Целью изобретения является повышение эффективности коррекции уровня α2 антиплазмина у новорожденных поросят с анемией.
Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации уровня α2 антиплазмина новорожденным поросятам с анемией назначаются ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавит 0,012 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.
Способ позволяет нормализовать уровень α2 антиплазмина у новорожденных поросят с анемией через 5 дней после завершения лечения, переводя его на уровень, близкий к таковому для здоровых поросят. При соблюдении рекомендаций заявляемого способа возможно поддержание в последующем активности уровня α2 антиплазмина в оптимальном состоянии, что позволит у новорожденных поросят существенно снизить риск тромботических осложнений, оздоровить стадо, увеличить привесы, снизить падеж и повысить качество и объем получаемой мясной продукции.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
Для диагностики у новорожденных поросят с анемией нарушения уровня α2 антиплазмина проводится его оценка по следующей методике.
α2 Антиплазмин (α2-АП) является наиболее важным ингибитором фибринолиза, в присутствии которого происходит быстрое формирование необратимого, лишенного активности комплекса "плазмин-α2-АП". Метод основан на определении способности α2-АП исследуемого образца плазмы инактивировать добавляемый в плазму очищенный плазмин. Содержание остаточного плазмина определяется по степени гидролиза хромогенного субстрата, специфичного по отношению к этому ферменту.
α2-АПобразец+плазминизбыток=[α2-АП-плазмин]+плазминостаток
Используются реактивы: 1. Плазмин свиньи, лиофилизированный. Разводится в буфере до концентрации 0,1 СТА Е/мл. 2. Хромогенный субстрат D-Norvalylcyclohexylalanil-lysil-p-nitroanilide. Разводится в дистиллированной воде до концентрации 3 ммоль/л. 3. Раствор буфера: КН2РО4 (100 ммоль/л), NaCl 9 г/л, глицерин (250 г/л), рН 7,5.
Для выполнения исследования необходима также стандартная или контрольная нормальная плазма с известным содержанием α2-АП или пулированная (взятая не менее чем от 10 здоровых поросят), активность α2-АП в которой принимается за 100%.
Применяется следующее оборудование: спектрофотометр с термостатируемой кюветой. Температура реакции +37°С. Используемая длина волны 405 нм. Ширина оптического пути кюветы - 1 см.
Материалом для исследования служит цитратная бедная тромбоцитами плазма.
Предварительно все смешиваемые реагенты подогреваются до +37°С. Ход определения приводится в таблице.
| Таблица. Схема определения уровня α2 антиплазмина у обследуемого | ||
| Последовательность операций | Исследуемый образец | Контроль (плазмин) |
| 1. Внести в кювету или пробирку: | ||
| исследуемую плазму | 20 мкл (0,02 мл) | - |
| физиологический (0,15 М) раствор хлорида натрия | - | 20 мкл (0,02 мл) |
| раствор плазмина | 1,0 мл | 1,0 мл |
| 2. Перемешать и инкубировать при +37°С в течение 1 мин | ||
| 3. Добавить хромогенный субстрат и включить секундомер | 0,1 мл | 0,1 мл |
| В течение 30 сек учитывают показатели поглощения и одновременно включают секундомер. Спустя 60 и 120 сек повторно определяют показатели поглощения. |
Вычисляют скорость изменения поглощения за 1 мин (ΔА/мин), которая пропорциональна активности α2-АП. Для этого рассчитывают разницу поглощения при 405 нм между 0 и 60 секундами инкубации, а также между 60 и 120 секундами. Определяют среднюю величину из двух показателей ΔА/мин.
Каждая серия анализов требует не менее одного значения для раствора плазмина (ΔА/минплазмин) и одного референтного значения, определяемого с использованием контрольной нормальной плазмы (ΔА/минконтроль) с известным значением α2-АП. Эти значения используют для вычисления внутрилабораторного коэффициента пересчета (Кп):
Содержание α2-АП в исследуемом образце плазмы в виде % от нормы в дальнейшем вычисляется по формуле: α2-АПобразец (% от нормы)=Кп×(ΔА/минплазмин-ΔА/минобразец)
В норме уровень α2-АП в плазме крови составляет 80-120%.
Снижение активности α2-АП может быть определено при активации фибринолиза, его повышение сопряжено с риском тромбоза.
При диагностике у новорожденных поросят с анемией повышения α2-АП необходимо назначение лечения согласно заявленному способу.
Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации уровня α2 антиплазмина новорожденным поросятам с анемией назначаются ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавит 0,012 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.
Пример 1. У новорожденного поросенка с анемией №18 была взята кровь и исследована по изложенной выше схеме.
У данного поросенка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, сопровождаясь изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 83,0 г/л, эритроцитов 4,12×1012/л, сидероцитов 1,2% при уровне железа в сыворотке 13,2 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 68,2 мкмоль/л.
При обследовании у поросенка была выявлена повышенная активность α2-АП (146%). Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней.
Через 5 дней после окончания лечения у поросенка нормализовалась красная кровь. Так, количество гемоглобина у него возросло до 116,0 г/л, эритроцитов - до 5,00×1012/л, сидероцитов до 7,2% при увеличении железа в сыворотке до 20,4 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 39,6 мкмоль/л. Однако у поросенка было достигнуто неполное снижение активности α2-АП (128%), не достигшее нормальных значений.
Наблюдение за поросенком в последующем зарегистрировало слабую положительную динамику α2-АП - через 1 месяц после окончания лечения α2-АП составил 124%.
Пример 2. У новорожденного поросенка с анемией №19 была взята кровь и исследована по изложенной выше схеме.
У данного поросенка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, сопровождаясь изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 82,0 г/л, эритроцитов 4,10×1012/л, сидероцитов 1,0% при уровне железа в сыворотке 12,6 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 68,9 мкмоль/л.
При обследовании у поросенка была выявлена повышенная активность α2-АП (145%). Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренил внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавит 0,012 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.
Через 5 дней после окончания лечения у поросенка нормализовалась красная кровь.
Так, количество гемоглобина у него возросло до 120,6 г/л, эритроцитов - до 5,33×1012/л, сидероцитов до 8,4% при увеличении железа в сыворотке до 28,4 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 33,6 мкмоль/л.
У поросенка была достигнута полная нормализация активности α2-АП (89%).
Наблюдение за поросенком в последующем не зарегистрировало отрицательной динамики α2-АП.
Использование предлагаемого способа оптимизации активности α2-АП в ветеринарии поможет избежать сосудистых нарушений у новорожденных поросят с анемией, оздоровить стадо, снизить падеж, увеличить привесы, повысить качество и объем получаемой мясной продукции и получать в последующем от этих поросят здоровое потомство.
Способ нормализации уровня α2 антиплазмина у новорожденных поросят с анемией путем применения ферроглюкина по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, фоспренила внутримышечно, троекратно в разных шприцах в разные точки, первый раз 0,07 мл/кг одновременно с препаратом железа, второй раз в дозе 0,06 мл/кг через пять дней после первой инъекции ферроглюкина, третий раз в дозе 0,05 мл/кг одновременно со второй инъекцией ферроглюкина и гамавита 0,012 мл/кг внутримышечно один раз в день, восемь дней, начиная с первой инъекции ферроглюкина.
