Иммуностимулирующий препарат для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных
Владельцы патента RU 2418579:
Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Ставропольский государственный аграрный университет" (RU)
Изобретение относится к области ветеринарии. Препарат содержит 2,4,6,8-Тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло-(3,3,0)-октадиселенон-3,7 в качестве источника селена. В качестве масла препарат содержит персиковое масло при следующем соотношении компонентов в мас.%: 2,4,6,8-тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 - 20-40, персиковое масло - остальное. Препарат обладает высоким иммуностимулирующим действием, выраженным антистрессовым эффектом, нетоксичен. 7 табл.
Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к ветеринарии, в частности к препаратам для нормализации обмена селена, обладающим антистрессовым эффектом и иммуностимулирующим действием для сельскохозяйственных животных.
Уровень техники
Известно лекарственное средство для лечения и профилактики болезней, вызываемых недостаточностью селена в организме сельскохозяйственных животных, содержащее в своем составе селенит натрия, селенит бария, аминоуксусную кислоту и вазелиновое масло, а компоненты взяты в следующем соотношении в мас.%:
| Селенит натрия | 1-2 |
| Селенит бария | 4-7 |
| Аминоуксусная кислота | 2-5 |
| Вазелиновое масло | До 100 |
(см. пат. RU № 2200013, кл. A61K 33/04, A61K 31/195, опубл. 20.10.2002 г.).
Недостатком данного средства является высокая токсичность, небольшой терапевтический индекс, невысокий эффект повышения иммунного статуса и антистрессового действия.
Известно средство для лечения и профилактики болезней, вызываемых недостаточностью селена в организме сельскохозяйственных животных и птиц. Сущность данного изобретения заключается в применении бис(бензоилметил)селенида в качестве средства для лечения и профилактики болезней, вызываемых недостаточностью селена в организме сельскохозяйственных животных, применяется для повышения продуктивности и в качестве лечебно-профилактического средства, при этом LD0=15 мг/кг, LD50=71 мг/кг, LD100=135 мг/кг (см. пат. RU № 2051681, кл. A61K 33/04, опубл. 10.01.1996 г.).
Недостатком данного средства является неудобство дозировки, а также недостаточность иммуностимулирующего и антистрессового эффектов.
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятым авторами за прототип является лекарственное средство карсел для профилактики и лечения акушерско-гинекологических заболеваний у коров, включающее в мас.%:
| Диацетофенонилселенид | 0,15-0,22 |
| Бета-каротин | 0,1-0,2 |
| Масло растительное | Остальное |
(см. пат. RU № 2323719, кл. A61K 31/00, A61P 31/04, опубл. 10.10.2007 г.).
Недостатком данного препарата является недостаточный антистрессовый эффект.
Раскрытие изобретения
Задачей предлагаемого изобретения является разработка препарата, содержащего селен в органической форме в виде селенсодержащего аналога мебикара и обладающего низкой токсичностью, высокой биологической доступностью, выраженным антистрессовым действием, и способствующего повышению резистентности организма сельскохозяйственных животных.
Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к уменьшению токсичности селена, увеличению биологической доступности, антистрессовому, иммуностимулирующему и антиоксидантному действию за счет того, что селен находится в органической форме в виде селенсодержащего аналога мебикара.
Технический результат достигается с помощью иммуностимулирующего препарата для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных, включающего селенсодержащий аналог мебикара (2,4,6,8-Тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло (3,3,0) октадиселенон-3,7) и персиковое масло при следующем соотношении компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-Тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло (3,3,0) | |
| октадиселенон-3,7 | 20-40 |
| персиковое масло | остальное |
Разработка и внедрение эффективных мер борьбы с алиментарными и эндокринными болезнями - условие повышения рентабельности животноводства, улучшения биологической полноценности молока, мяса, яиц и другой продукции, а также снижения бесплодия маточного поголовья (см. Сидоркин В.А., Клищенко О.А. // Ветеринария. - 2008. - № 10. - С.50-51).
Мебикар - белый кристаллический порошок.
2,4,6,8-Тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадион-3,7 (C8H14N4O2).
Мебикар легко растворим в воде и органических растворителях, химически инертен и стоек при хранении, не взаимодействует с лекарствами, компонентами пищи, что позволяет применять его независимо от характера питания и лечения другими препаратами (см. Карпов A.M., Зимаков А.Ю., Макарчиков Н.С., Зимакова И.Е. Современные проблемы психиатрии. - 1994, с.156-158).
На доклинических испытаниях у мебикара не обнаружено тератогенного, мутагенного канцерогенного действий. Побочные эффекты крайне редки, за 20 лет применения отмечены единичные случаи возникновения диспептических расстройств и кожного зуда. Привыкания он не вызывает, противопоказаний к применению нет (см. Буров Ю.В., Тресков В.Г., Дроздов Е.С. и соавт. // Новые лекарственные препараты - Экспресс информ. - 1983. - № 11. - С.14-20).
Мебикар помимо психотропной активности обладает выраженным гиподинамическим действием и целым рядом фармакологических эффектов, в том числе ноотропным, антиоксидантным и др. - как на уровне отдельных органов, тканей, так и организма в целом (см. Венедиктова М.Г., Тагирова Т.С. Новые лекарственные препараты. - Экспресс информ. - 1983. - № 10. - С.15-16; Зимакова И.Е., Гумеров Р.Х., Карпов A.M. и др. // Terra medica nova. - 2000. - № 4. - С.30-31).
Введение мебикара по 15-20 мг/кг массы тела в течении 5 суток в месяц на протяжении пастбищного периода положительно влияло на иммунный статус и динамику массы тела ягнят, которая была выше, чем у контрольных на 5,7 кг (см. Даугалиева Э.Х., Филиппов В.В. Иммунный статус и пути его коррекции при гельминтозах сельскохозяйственных животных. - М.: Агропромиздат, 1991. - 188 с.).
В крови мышей, после введения мебикара, установлено статистически достоверное увеличение процента популяции В-лимфоцитов с C3-рецептором (см. Мамыкова О.И. // Селекция с.-х. животных на устойчивость к болезням и повышение резистентности в условиях промышленных технологий. - 1988. - Вып.8. - С.122).
Исследованиями многих отечественных и зарубежных ученых доказано, что селен является уникальным, незаменимым и высокоэффективным биологически активным элементом, оказывающим положительное влияние на продуктивность и показатели воспроизводства животных (см. Шакиров Ш., Портнов Д., Волков А. // Молочное и мясное скотоводство. - 2009. - № 6. - С.18-20).
Рассматривая механизм действия как антиоксиданта в биологических процессах, ученые установили, что он входит в состав фермента глутатионпероксидазы, которая помимо других своих функций восстанавливает гидроперекиси ПНЖК, чтобы не допустить дальнейшей цепной реакции перекисного окисления липидов, и перекиси водорода, чтобы не допустить с ее участием радикала гидроксила (см. Шацких Е., Лебедева И. // Птицеводство. - 2006. - № 3. - С.21).
Неорганические соединения селена - селенит натрия, селенит бария и др. довольно токсичны (1-2 класс токсичности), с низкой биодоступностью (20-30%) и менее эффективны, чем органические (см. Балым Ю.П., Беляев В.И., Ермакова Т.И. // Ветеринарная патология. - 2007. - № 2. - С.91-93).
Сущность получения иммуностимулирующего препарата для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных заключается в следующем.
Для получения селенсодержащего аналога мебикара раствор 1,98 г (10 ммоль) мебикара в 10 мл хлороформа в течение 3 минут приливают к раствору 3,6 г (30 ммоль) хлористого тионила в 5 мл хлороформа. Раствор перемешивают 30 минут при комнатной температуре, после чего добавляют 3,75 г (30 ммоль) твердого селенида натрия (Na2Se) и перемешивают 30 минут. Неорганические соли отфильтровывают, растворитель упаривают. Остаток перекристаллизовывают из спирта. Получают светлокоричневые кристаллы. Выход 2,2 г (68%), т.пл. 248-250°C.
2,4,6,8-Тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 (C8H14N4Se2).
Спектр ЯМР 1H (200 МГц; ДМСО-d6), δ, м.д., J (Гц): 2,39 (12Н, c, Me), 3,79 (2Н, с, СН). Масс-спектр (ЭУ, 70 эВ), m/z (Iотн (%)): 324 [M]+ (100).
Полученный селенсодержащий аналог мебикара - 2,4,6,8-Тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 в асептических условиях растворяют в стерильном персиковом масле и укупоривают, при этом берут следующее соотношение компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-тетраметил- | |
| 2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 | 20-40 |
| персиковое масло | остальное |
с последующей упаковкой и стерилизацией.
Осуществление изобретения
Примеры конкретного выполнения получения и испытания иммуностимулирующего препарата для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных.
Пример 1.
Иммуностимулирующий препарат для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных готовят путем растворения в асептических условиях 2,4,6,8-тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенона-3,7 в персиковом масле при следующем соотношении компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-тетраметил- | |
| 2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 | 10 |
| персиковое масло | остальное |
Полученный препарат при применении ягнятам двухмесячного возраста при анализе гематологических и биохимических показателей крови показал относительно небольшое увеличение количества лимфоцитов - на 1,21%, эритроцитов - на 0,78% и гемоглобина - на 1,74%, активности каталазы - на 3,18% и глутатионпероксидазы - на 4,42%, а также относительно небольшое уменьшение концентрации малонового диальдегида - на 2,93% и диеновых конъюгатов - на 3,62%, прирост живой массы оказался не столь значителен и составил 1,11% кг за месяц.
Пример 2.
Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-тетраметил- | |
| 2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 | 20 |
| персиковое масло | остальное |
Полученный препарат при применении ягнятам двухмесячного возраста повышает количество лимфоцитов - на 4,18%, эритроцитов - на 2,26%), гемоглобина - 4,58%), что свидетельствует о стабилизации гемопоэза, увеличивает активность антиоксидантных ферментов каталазы - на 11,27% и глутатионпероксидазы - на 13,48% и уменьшает концентрацию малонового диальдегида - на 10,37% и диеновых конъюгатов - на 9,11% в крови, а также способствует повышению прироста живой массы, который за месяц составил 1,39 кг.
Пример 3.
Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-тетраметил- | |
| 2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 | 30 |
| персиковое масло | остальное |
Полученный препарат при применении ягнятам двухмесячного возраста показал, что в крови нормализовался уровень селена, а также увеличилось количество эритроцитов - на 4,16%, лимфоцитов - на 5,38%, гемоглобина - 4,47%, увеличилась активность каталазы - на 14,81% и глутатионпероксидазы - на 19,22%, уменьшилась концентрация малонового диальдегида - на 25,35%) и диеновых конъюгатов - на 18,75%, прирост живой массы составил 1,42 кг за месяц.
Пример 4.
Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-тетраметил- | |
| 2,4,6,8-тетраазабицикло (3,3,0)октадиселенон-3,7 | 40 |
| персиковое масло | остальное |
Полученный препарат при применении ягнятам двухмесячного возраста показал ярко выраженный антиоксидантный эффект, заключающийся в увеличении активности каталазы - на 18,29%, глутатионпероксидазы - на 24,71% и уменьшении концентрации малонового диальдегида - на 31,42% и диеновых конъюгатов на 26,86%. Его введение сопровождалось увеличением количества лимфоцитов - на 6,72%, эритроцитов - на 5,12% и гемоглобина - 5,32%, а также значительным увеличением прироста живой массы, который составил 1,64 кг за месяц.
Пример 5.
Проводят аналогично примеру 1, но берут следующее соотношение компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-тетраметил- | |
| 2,4,6,8-тетраазабицикло (3,3,0)октадиселенон-3,7 | 50 |
| персиковое масло | остальное |
Полученный препарат при применении ягнятам двухмесячного возраста показал менее выраженный антиоксидантный эффект, чем в трех предыдущих примерах, и выразился он в увеличении активности каталазы - на 10,38%, глутатионпероксидазы - на 12,75% и уменьшении концентрации малонового диальдегида - на 9,84% и диеновых конъюгатов - на 7,87%. Прирост живой массы составил 1,26 кг за месяц.
Таким образом, наиболее оптимальными являются примеры 2, 3 и 4, так как применение препарата способствовало наибольшему увеличению прироста живой массы, концентрации селена, активности антиоксидантных ферментов и уменьшению концентрации побочных продуктов перекисного окисления липидов.
Иммуностимулирующий препарат для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных, изготовленный согласно примеру 3 при следующем соотношении компонентов в мас.%:
| 2,4,6,8-тетраметил- | |
| 2,4,6,8-тетраазабицикло(3,3,0)октадиселенон-3,7 | 30 |
| персиковое масло | остальное |
был подвергнут изучению на острую токсичность и влияние на организм кроликов и ягнят (табл.1, 2, 3, 4, 5, 6, 7).
| Таблица 1 | ||||||
| Острая токсичность иммуностимулирующего препарата для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных, мг/кг по действующему веществу | ||||||
| Параметры токсичности | ||||||
| Вид животных | МПД | LD16 | LD50 | LD84 | LD100 | SLD50 |
| Белые крысы | 97,9 | 271,6 | 337,3 | 458,4 | 548,1 | ±2,92 |
Для оценки влияния препарата на гематологические показатели и определения приблизительных фармакологических доз использовали лабораторных белых мышей, которые были разделены на четыре группы (n=10). Животным первой группы препарат не вводили, они служили контролем. Мышам второй, третьей и четвертой групп ввели внутримышечно испытуемый препарат в дозах 2, 6 и 10 мг/кг живой массы соответственно. Через три дня после введения препарата получили кровь путем декапитации для гематологических исследований.
При анализе полученных данных (табл.2, 3) наблюдается более высокое содержание эритроцитов в крови мышей, которым вводили препарат, по сравнению с контрольной группой. Так, во второй группе этот показатель был выше, чем в контроле на 3,7%, а в третьей и четвертой - на 8,2 и 6,0% соответственно. Усиление продукции эритроцитов способствует синергическому повышению содержания гемоглобина с увеличением дозы препарата, концентрация которого в третьей и четвертой группе была больше, чем в контрольной на 10,5 и 3,6% соответственно, а во второй группе в это время ниже, чем в контроле на 1,4%.
| Таблица 2 | |||||
| Гематологические показатели белых мышей при введении иммуностимулирующего препарата для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных (n=10) | |||||
| № группы | Доза, мг/кг | Эритроциты, 1012/л | Цветовой показатель, ед. | Гемоглобин, г/л | Лейкоциты, 109/л |
| 1 | - | 7,81±0,24 | 1,14±0,05 | 156,1±6,48 | 7,34±0,27 |
| 2 | 0,016 | 8,11±0,32 | 1,10±0,03 | 153,8±9,23 | 7,45±0,29 |
| 3 | 0,032 | 8,53±0,37 | 1,19±0,06 | 174,5±7,12 | 7,51±0,34 |
| 4 | 0,064 | 8,36±0,23 | 1,12±0,05 | 161,9±8,69 | 8,53±0,56 |
Количество лейкоцитов у всех групп находилось в пределах физиологической нормы, и значительных перепадов (не более 5,3% в обе стороны) у контрольной, второй и третьей группы не наблюдалось, а у четвертой группы данный показатель был выше на 13,9%. Так как это увеличение не является критическим и не выходит за пределы нормы, его можно определить как активацию защитных сил организма в ответ на повышенную дозу препарата.
| Таблица 3 | |||||||||
| Лейкограмма крови белых мышей после введения иммуностимулирующего препарата для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных (n=10), %. | |||||||||
| № группы | Доза, мг/кг | Базофилы | Эозинофилы | Нейтрофилы | Лимфоциты | Моноциты | |||
| М | Ю | П | С | ||||||
| 1 | - | - | 1 | - | - | 23,1±4,2 | 2,21±1,02 | 68,42±5,5 | 2,03±0,23 |
| 2 | 0,016 | - | - | - | - | 22,5±1,8 | 1,09±0,19 | 71,2±7,6 | 2,07±0,41 |
| 3 | 0,032 | 1 | - | - | - | 22,1±2,2 | 2,01±0,73 | 73,1±6,2 | 1,98±0,29 |
| 4 | 0,064 | - | 1 | - | 1 | 22,8±6,1 | 2,07±0,54 | 72,8±8,1 | 2,11±1,15 |
В эксперименте по определению влияния препарата на продуктивность и биохимический статус молодняка овец использовали три группы ягнят (n=20) возрастом 60±9 дней. Ягнятам первой группы ввели препарат внутримышечно в дозе 6 мг/кг по действующему веществу. Вторая группа препарат не получала и служила контролем. Вводили препарат двукратно с интервалом в 45 дней. Кровь брали до введения препарата и через 15 дней в течение двух месяцев. Взвешивали животных до введения, через 30 дней и в конце опыта.
Оценка гематологических показателей (табл.4) показала, что количество эритроцитов в крови ягнят из второй группы увеличилось через 30 дней после введения на 7,14%, составило 10,22 млн/мкл, и это значение было самым высоким на протяжении всего опытного периода. В целом от начала и до завершения эксперимента в данной группе увеличение составило 12,21%. В контрольной группе произошли менее значительные изменения, там число эритроцитов возросло на 2,98%.
Уровень гемоглобина повышался постепенно в крови животных из опытной группы на протяжении двух месяцев, в течение которых проводился опыт. Так, в первой группе увеличение по данному показателю составило 6,03. У контрольных ягнят уровень гемоглобина возрос на 0,24%.
В первой группе отмечено увеличение количества лейкоцитов на 4,33% соответственно, а в контрольной группе - на 2,72%.
| Таблица 4 | |||||
| Гематологические показатели и уровень глюкозы в крови ягнят (n=20) | |||||
| № группы | Эритроциты, 1012/л | Лейкоциты, 109/л | Гемоглобин, г/л | Цветовой показатель, ед. | Глюкоза, ммоль/л |
| До введения препаратов | |||||
| 1 | 9,49±0,51 | 7,95±0,43 | 101,15±5,67 | 0,99±0,07 | 2,88±0,24 |
| 2 | 9,44±0,54 | 7,58±0,41 | 98,98±6,21 | 0,97±0,07 | 2,93±0,15 |
| Через 15 дней после введения препаратов | |||||
| 1 | 9,71±0,58 | 7,99±0,46 | 102,13±5,72 | 0,95±0,06 | 2,92±0,26 |
| 2 | 9,49±0,51 | 7,60±0,39 | 99,03±6,29 | 0,95±0,05 | 2,84±0,13 |
| Через 30 дней после введения препаратов | |||||
| 1 | 10,22±0,60 | 8,14±0,56 | 106,19±6,35 | 0,91±0,07 | 3,11±0,29 |
| 2 | 9,47±0,56 | 7,97±0,45 | 98,84±6,14 | 0,94±0,04 | 2,79±0,18 |
| Через 45 дней после введения препарата | |||||
| 1 | 10,01±0,55 | 8,29±0,57 | 104,92±5,91 | 0,93±0,06 | 3,04±0,24 |
| 2 | 9,65±0,59 | 8,01±0,43 | 99,37±6,22 | 0,92±0,05 | 3,00±0,27 |
| Через 60 дней после первого введения | |||||
| 1 | 10,81±0,67 | 8,31±0,59 | 107,65±6,04 | 0,87±0,05 | 3,19±0,22 |
| 2 | 9,73±0,57 | 8,04±0,43 | 99,22±5,78 | 0,91±0,05 | 2,97±0,25 |
Как видно из данных таблицы 5, количество общего белка у ягнят возрастало, но в группе, которой вводили препарат, это возрастание было более значительным, чем в контрольной, в которой увеличение за время опыта составило всего 0,73%. В группе ягнят, которым применяли препарат, за аналогичный промежуток времени данный показатель возрос на 7,5%.
Уровень глюкозы в контрольной группе практически не изменялся на протяжении всего эксперимента, а вот в опытной группе данный показатель увеличился. В первой группе повышение составило 9,72%.
| Таблица 5 | |||||
| Содержание общего белка и его фракций в сыворотке крови ягнят (n=20) | |||||
| № группы | Общий белок, г/л | Белковые фракции, % | |||
| альбумины | глобулины | ||||
| α | β | γ | |||
| До введения препаратов | |||||
| 1 | 64,18±3,95 | 38,93±2,29 | 19,34±1,19 | 12,54±0,76 | 27,13±2,07 |
| 2 | 65,11±4,11 | 39,42±2,12 | 19,62±1,03 | 13,35±0,88 | 26,68±0,76 |
| Через 15 дней после введения препаратов | |||||
| 1 | 65,02±4,25 | 39,26±2,35 | 20,71±1,28 | 12,32±0,81 | 27,35±1,98 |
| 2 | 65,24±4,16 | 39,27±2,23 | 20,46±1,21 | 13,71±0,91 | 26,73±0,82 |
| Через 30 дней после введения препаратов | |||||
| 1 | 68,14±4,51 | 42,89±2,40 | 17,41±1,42 | 11,13±0,97 | 28,69±1,95 |
| 2 | 65,17±4,24 | 39,76±2,31 | 19,21±1,30 | 13,48±0,82 | 27,12±0,69 |
| Через 45 дней после первого введения | |||||
| 1 | 68,77±4,38 | 42,97±2,61 | 18,26±1,25 | 11,53±1,16 | 28,49±1,91 |
| 2 | 65,54±4,32 | 40,19±2,37 | 19,52±1,15 | 12,76±0,94 | 26,43±1,03 |
| Через 60 дней после первого введения | |||||
| 1 | 69,44±4,57 | 44,01±2,59 | 17,15±1,43 | 10,51±1,21 | 29,64±2,02 |
| 2 | 65,59±4,29 | 40,14±2,25 | 19,17±1,37 | 12,89±0,99 | 26,57±1,79 |
Концентрация диеновых конъюгатов за 60 дней в первой группе уменьшилась - на 31,42%, в то время как во второй группе, наоборот возросла на 13,51% (табл.6). Уровень малонового диальдегида в контрольной группе также увеличился на 7,24%. У ягнят, получавших препарат - на 25,80%. Произошло это потому, что введение селенсодержащих препаратов привело к активации антиоксидантных ферментов. После применения препарата произошло значительное увеличение активности глутатионпероксидазы. В группе, которой применяли препарат, этот показатель увеличился на 27,75, а в контрольной группе зарегистрировано уменьшение на 5,79%.
Уже через 15 дней после применения препаратов в опытных группах был ликвидирован дефицит селена, уровень которого в первых пробах крови был ниже физиологического в 8 раз и более. Так, у ягнят, которым вводили препарат, к концу опыта уровень селена увеличился в 14,1 раза от исходного содержания.
| Таблица 6 | |||||||
| Показатели системы антиоксидантной защиты ягнят (n=20) | |||||||
| Группа | Селен, мкмоль/л | Активность каталазы, мкМ H2O2/л·мин·103 | Активность пероксидазы, ед. опт. пл./л·сек | Активность глутатионпероксидазы, мкМ G-SH/л·мин·103 | Глутатион восстановленный, ммоль/л | Диеновые конъюгаты, ед. опт. пл. / мг липидов | Малоновый диальдегид, мкмоль/л |
| До введения препаратов | |||||||
| 1 | 0,11±0,02 | 17,94±0,43 | 38,16±1,79 | 6,92±0,22 | 0,51±0,05 | 0,35±0,03 | 0,62±0,05 |
| 2 | 0,12±0,04 | 18,15±0,48 | 37,89±2,12 | 6,73±0,19 | 0,56±0,09 | 0,32±0,02 | 0,64±0,05 |
| Через 15 дней после введения препаратов | |||||||
| 1 | 1,05±0,05* | 19,58±0,54* | 39,12±1,84 | 8,21±0,28* | 0,51±0,06 | 0,29±0,04 | 0,59±0,05 |
| 2 | 0,11±0,03 | 18,11±0,46 | 37,53±2,05 | 6,76±0,20 | 0,57±0,07 | 0,37±0,03 | 0,67±0,07 |
| Через 30 дней после введения препаратов | |||||||
| 1 | 1,06±0,06* | 21,03±0,67* | 41,41±1,86 | 9,89±0,34* | 0,54±0,06 | 0,21±0,03* | 0,48±0,06* |
| 2 | 0,15±0,04 | 18,19±0,51 | 38,37±1,56 | 6,48±0,23 | 0,55±0,07 | 0,35±0,02 | 0,65±0,05 |
| Через 45 дней после введения | |||||||
| 1 | 0,81±0,07* | 20,29±0,52* | 40,92±1,73 | 9,13±0,27* | 0,53±0,03 | 0,25±0,03* | 0,50±0,04* |
| 2 | 0,13±0,04 | 18,31±0,47 | 38,24±1,58 | 6,52±0,19 | 0,54±0,05 | 0,38±0,03 | 0,65±0,05* |
| Через 60 дней после первого введения | |||||||
| 1 | 1,59±0,11* | 20,92±0,59* | 41,46±1,88 | 9,62±0,31* | 0,54±0,05 | 0,24±0,04* | 0,46±0,05* |
| 2 | 0,14±0,03 | 18,23±0,41 | 38,17±1,51 | 6,34±0,28 | 0,57±0,06 | 0,37±0,02 | 0,69±0,06* |
| Примечание: * p<0,05 - разница статистически достоверна между данной и контрольной группой |
За период наблюдения прирост живой массы у ягнят, получавших препарат, составил 5,74 кг, а у контрольных 4,57 кг (табл.7). В контрольной группе общий привес был на 20,38% меньше, чем в опытной.
| Таблица 7 | |||
| Динамика живой массы ягнят, кг (n=20) | |||
| Группа | Возраст, месяцев | ||
| 2 | 3 | 4 | |
| 1 | 11,79±0,76 | 14,52±0,59 | 17,53±0,81 |
| 2 | 11,88±0,69 | 13,89±0,86 | 16,37±0,74 |
Таким образом, установлено, что применение препарата для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных способствует активизации ферментативного звена системы антиоксидантной защиты организма ягнят, что выражается в увеличении активности каталазы, пероксидазы, глутатионпероксидазы и снижении концентрации малонового диальдегида, диеновых конъюгатов в крови. При воздействии препарата на организм наблюдается увеличение количества лейкоцитов, эритроцитов и повышение уровня гемоглобина, нормализация белкового и углеводного обмена. Его введение сопровождалось повышением прироста живой массы ягнят, что свидетельствует о положительном влиянии на мясную продуктивность овец. Уже через 15 дней после введения препарата нормализовался селеновый статус животных.
Преимущества данного препарата в том, что селен в его составе взят в виде селенсодержащего аналога мебикара-селеноорганического соединения, за счет чего значительно снижается токсичность, в сравнении с неорганическими аналогами, а препарат обладает выраженным иммуностимулирующим и антистрессовым действием.
Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими техническими решениями имеет следующие технические преимущества:
- уменьшение токсичности;
- повышение иммуностимулирующего действия;
- выраженный антистрессовый эффект;
- повышение усвояемости и биологической доступности для организма.
Иммуностимулирующий препарат для нормализации обмена селена и коррекции стрессовых состояний для сельскохозяйственных животных, включающий органический источник селена и масло, отличающийся тем, что в качестве источника селена содержит 2,4,6,8-тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло-(3,3,0)-октадиселенон-3,7, а в качестве масла - персиковое масло при следующем соотношении компонентов, мас.%:
| 2,4,6,8-Тетраметил-2,4,6,8-тетраазабицикло- | |
| (3,3,0)-октадиселенон-3,7 | 20-40 |
| персиковое масло | остальное |
