Лекарственное средство, обладающее противоопухолевыми свойствами
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается лекарственного средства, обладающего стимулирующим действием в отношении образования лимфоцитов с иммунофенотипом, сходным с клетками лимфокин-активированных киллеров. Сущность изобретения заключается в том, что предложенное средство содержит натрия нуклеинат от 2 до 50 мг/мл, натрия хлорид от 3 до 10 мг/мл и апирогенную воду, при этом рН составляет от 6,0 до 7,5. Препарат активирует киллерные клетки, способные эффективно лизировать опухолевые клетки. 1 з.п. ф-лы, 3 пр., 2 табл.
Изобретение относится к области медицины и фармацевтической промышленности и касается лекарственного средства, обладающего противоопухолевыми свойствами.
Нуклеинат натрия - натриевая соль низкомолекулярной дрожжевой РНК известна в медицине более 100 лет и раньше в прошлом и позапрошлом веках и в нашем XXI веке этот препарат широко применяется в медицине при самых различных заболеваниях. В том числе и как высокоактивное иммуномодулирующее средство (http://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_999.htm). Он широко изучался и изучается в настоящее время в различных лабораториях, что позволило установить его широкие биологически потенции - как иммуномодулирующего препарата, восстанавливающего нарушения клеточного, фагоцитарного и гуморального звеньев иммунитета, как умеренного индуктора интерферона и, естественно, средства противовирусной терапии, как нормализатора нарушенного метаболизма клеток, активатора заживления различных трофических язв, тканевой и клеточной регенерации. Как детоксицирующего средства, способного снижать токсичность цитостатиков, антибиотиков, гормонов, различных бактериальных экзотоксинов. Как средства, не обладающего аллергизирующими свойствами и в то же время в определенной степени снижающего выраженность замедленной и немедленной аллергии, препарата безвредного, нетоксичного.
Тем не менее, глубокое исследование нуклеината натрия, выполненное в самое последнее время на новых биологических моделях, позволило обнаружить у препарата не известную ранее способность нуклеината натрия вызывать формирование лимфоцитов с фенотипом ЛАК клеток (лимфокин активированных клеток), лизирующих опухолевые мишени, и при этом оказывать выраженное активирующее влияние на НК клетки в модельных системах, что обосновывает успешность применения нуклеината натрия в онкологии.
В качестве ближайшего аналога может быть использование в качестве активаторов лимфокин-активированных клеток ФГА, ИЛ-2 и других цитокинов (3. Абелев Г.И., Вядро М.М., Кадагидзе З.Г. "Иммунотерапия опухолей" // 1985. - ИНИТ, сер. Онкология - Т.14).
Задачей изобретения является поиск других высокоэффективных активаторов, которые могут быть использованы в онкологии.
Указанная задача решается предлагаемым средством, в форме раствора для парентерального введения, которое включает нуклеинат натрия, натрия хлорид и апирогенную воду, при этом pH составляет от 6,0 до 7,5.
Предпочтительно раствор содержит нуклеинат натрия от 2 о 50 мг/мл, натрия хлорид от 3 до 10 мг/мл. Для получения средства предпочтительно использование нуклеината натрия, полученного из хлебопекарских дрожжей, в соответствии с патентом РФ №2244008 с приоритетом от 05.02.2004 г. «Усовершенствованный способ получения нуклеината натрия».
Предложенная согласно изобретению парентеральная форма стимулирует образование лимфоцитов с иммунофенотипом, сходным с клетками лимфокин-активированных киллеров (ЛАК), способных эффективно лизировать опухолевые клетки.
Возможность осуществления изобретения может быть проиллюстрирована нижеприведенными примерами.
Пример 1.
Натрия нуклеинат - 2,0 мг/мл
Натрия хлорид - 9,0 мг/ мл
Вода для инъекции до 1 мл
Пример 2.
Натрия нуклеинат - 50,0 мг/ мл
Натрия хлорид - 5,0 мг/ мл
Вода для инъекции до 1 мл
Пример 3.
Данные экспериментов, демонстрирующих цитотоксическое влияние активированных НН мононуклеарных лейкоцитов периферической крови (МЛПК) на клетки-мишени опухолевой линии К-562 (эритробластного лейкоза человека).
МЛПК обладают естественной (спонтанной) противоопухолевой активностью в отношении опухолевых клеток К562. Однако их цитотоксичность явно недостаточна для достижения эффекта и составляет 24,4%-49,5% при соотношении мишени/эффекторы 1/5 (табл.1 и 2). Лимфоциты, полученные из МЛПК в результате экстракорпоральной активации нуклеинатом натрия, характеризуются значительно большей активностью. Цитотоксичность активированных киллерных клеток составляет 43,3% (20 мкг/мл) и от 69,7% до 74,7% (1-100 мкг/мл). Таким образом, активация МЛПК при помощи НН приводит к генерации киллерных клеток, способных эффективно лизировать опухолевые клетки.
| Таблица 1 | |||
| Цитотоксическая активность МЛПК доноров в присутствии НН в течение 48 часов | |||
| Концентрация препаратов в культуре МЛПК | Цитотоксическая активность МЛ по отношению к линии клеток К562, % | ||
| Соотношение мишени:эффекторы | |||
| 1:2 | 1:5 | 1:10 | |
| НН (20 мкг/мл) | 16,1±1,2* | 43,3±2,7* | 75,5±3,6* |
| Контроль (исходные МЛ) | 7,3±1,1 | 24,4±2,3 | 33,4±2,3 |
| * - Р<0,05 по сравнению с контрольной группой по критерию Вилкоксона и t-критерию Стьюдента. |
| Таблица 2 | |||
| Цитотоксическая и пролиферативная активность МЛПК доноров в присутствии НН при 48-часовой инкубации | |||
| Препарат, вводимый в культуру МЛПК | Дозы, мкг/мл | Цитотоксическая активность NK по отношению к линии клеток К562, % (соотношение 5:1) | Пролиферативная активность, % |
| 100 | 74,7±4,2* | н/о | |
| НН | 10 | 70,1±3,8* | 61,3±3,2* |
| 1 | 69,7±3,7* | 56,2±3,3* | |
| Контроль | - | 49,5±3,1 | 16,1±1,3 |
| * - Р<0,05 по сравнению с контрольной группой по критерию Вилкоксона и t-критерию Стьюдента. |
Полученные данные свидетельствуют о перспективности использования препарата нуклеината натрия в терапии онкологических больных.
1. Лекарственное средство для парентерального введения, обладающее стимулирующим действием в отношении образования лимфоцитов с иммунофенотипом, сходным с клетками лимфокин-активированных киллеров, характеризующееся тем, что оно содержит натрия нуклеинат, натрия хлорид и апирогенную воду при следующем содержании компонентов:
| натрия нуклеинат | 2-50 мг/мл |
| натрия хлорид | 3-10 мг/мл |
| апирогенная вода | до 1 мл |
| при рН | от 6,0 до 7,5 |
2. Средство по п.1, характеризующееся тем, что оно представляет собой раствор для инъекций.
