Способ приготовления препарата для стимуляции роста животных
Владельцы патента RU 2487721:
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана" (RU)
Изобретение относится к области ветеринарии и предназначено для стимуляции роста животных. Способ включает сбор в период интенсивного сокодвижения лекарственного сырья - стеблей и коры Acer Platanoides. Сырье измельчают до 5-35 мм, нагревают в течение 1,5-3 часов при 160-280°С. Одновременно летучие частицы, получающиеся при разложении сырья во время ее нагрева, охлаждают, конденсируют. Выделяют легкую фракцию, которую добавляют в предварительно подготовленный искусственный желудочный сок в соотношении 1:10 соответственно. Полученный раствор выдерживают в течение 18-20 дней при температуре 38-39°С при периодическом перемешивании, фильтруют, доводят кислотность концентрированным раствором едкого натрия или калия до рН 4,5-5,0, снова выдерживают в течение суток при температуре 38-39°С, фильтруют, разливают в флаконы. Затем стерилизуют в течение 15-20 мин при температуре 110-120°С и давлении 1 атм, после чего флаконы плотно закрывают. Полученный заявленным способом препарат безвреден, обеспечивает повышение живой массы, сохранность и среднесуточные приросты у животных. 1 з.п. ф-лы, 9 табл.
Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для приготовления лекарственных препаратов из растительного сырья.
Одной из важных проблем ветеринарии является разработка эффективных и безопасных препаратов, способствующих не только сохранности поголовья, но и ускоряющих рост и откорм сельскохозяйственных животных.
В настоящее время с целью ускорения роста и откорма животных, широко стали применять различные антибиотики, бактериальные и витаминные препараты, гормоны, минеральные и органические соединения, а также средства стимулирующие рост и откорм, в особенности больных, переболевших и ослабленных животных - тканевые препараты (лизаты) [1].
Известно, что для ускорения роста и продуктивности животных применяют антибиотики тетрациклинового ряда, однако их использование в качестве стимуляторов роста имеет свои определенные недостатки. В частности, применение антибиотических средств, способствует подавлению физиологической микрофлоры пищеварительного тракта, длительное применение их может привести к выработке устойчивости (резистентности) микроорганизмов к применяемым антибиотикам и в случае возникновения патологии приводит к невозможности их применения. На повторное применение некоторых антибиотиков отмечают аллергические реакции. Кроме того, применение антибиотиков ограничивает употребление в пищу продуктов животного происхождения на время применения этих препаратов, и в течение 6-8 дней после их использования [2].
Известна пропионово-ацидифильная бульонная культура (ПАБК) состоящая из пропионовокислых бактерий с ацидофильной палочкой в 1 мл которой содержится до 2000 мкг витамина В12, B1 и В2. ПАБК в кишечнике действует антимикробно и противобродильно, повышает устойчивость сапрофитной микрофлоры кишечника к патогенным микробам и токсинам, улучшает обмен веществ, нормализует работу желудочно-кишечного канала и ускоряет рост животных [1]. Недостатками указанного препарата являются невозможность его применения парентеральными способами введения (подкожно, внутримышечно, внутрибрющинно) что затрудняет точное дозирование препарата, длительность применения его для достижения желаемого результата, непродолжительность срока годности препарата от даты изготовления.
Известен сухой бактериально-витаминный препарат (СБВП) состоящий из штамма пропионовокислых бактерий и витамина В12, выделенный из рубца крупного рогатого скота [3]. СБВП применяют для ускорения роста и откорма поросятам и молодняку птиц. Однако, для получения препарата необходимо наличие мясокомбинатов, численность которых в последние годы сократилось, что затрудняет доставку материала для выделения пропионовокислых бактерий и витамина В12. Другим недостаткам препарата можно отнести невозможность его парентерального применения, невозможность применения старшим возрастным группам, ограничение вида животных которым можно применять препарат. К недостаткам в применении витаминов в качестве кормовых добавок, например Витамицина [3], для ускорения роста и откорма животных, можно отнести, невозможность равномерного распределения их в кормосмесях, даже, несмотря на совершенство технологического процесса, или же отсутствие смесителей кормов в коллективно-феремерских, семейных и личных подсобных хозяйствах с небольшим количеством поголовья скота.
Применение минеральных и органических соединений преимущественно сводится во внесении их в корма в качестве добавок в виде порошкообразной массы, что также невозможно равномерно распределить по всей массе корма, в результате одни животные получают его больше, а другие недостаточно. Завышенные дозы способствуют торможению роста и развития животного, а занижение дозы приводит к отсутствию желаемого результата. Или же существенным их недостатком является длительность в применении кормовой смеси в течение всего жизненного цикла.
Известно, что для увеличения прироста живой массы сельскохозяйственных животных, снижения затрат корма на килограмм прироста массы и сокращения сроков откорма рекомендуют применять гормональные препараты [4]. К недостаткам применения гормонов в качестве стимуляторов роста можно отнести: во-первых, то что гормональные препараты эффективны только в определенных условиях, что необходимо учитывать на практике, во-вторых, все гормональные препараты токсичны, что обнаруживается не сразу, а развивается постепенно и спустя длительный период после использования препарата, в третьих поступление их в организм из вне ингибирует выработку собственных гормонов, в четвертых могут весьма существенно изменить такие жизненно важные процессы, как иммунобиологическая реактивность организма и иммуногенез, функцию половых желез и вызвать явления анафилаксии.
Применение в ветеринарии лекарственных средств, полученных на основе экстрактов из различных бактерий, растений и тканей животного происхождения, а также их синтетических аналогов [5;6], предусматривает использование их в зависимости от вида животного, либо в течение всего жизненного цикла или же несколькими продолжительными курсами, что усложняет их включение в производственный процесс. Кроме того, биологические препараты на основе животных тканей, сложно получить с идентичной активностью от партии к партии, что может привести к появлению побочных иммунных реакций организма.
Наиболее близким по технической сущности решением к изобретению является способ приготовления средства для лечения кожи, включающее собранное в период интенсивного сокодвижения и измельченное на частицы размером 5-15 мм лекарственное сырье, его нагревание и охлаждение (патент RU №2167670, A61K 35/78. опубл. 27.05.2001 г.).
Недостатком данного способа является невозможность использования полученного средства для повышения роста животных. Другим недостатком прототипа является невозможность применения его парентеральными способами введения (подкожно, внутримышечно).
В основу заявляемого изобретения положена задача создания из растительного сырья такого лекарственного средства для стимуляции роста и способа его применения, который бы давал возможность его дозированного, парентерального (подкожно, внутримышечно) применения и обеспечивал бы стимуляцию роста как у нормально развивающихся животных, так и у животных с признаками постнатальной незрелости, без проявления токсичности и побочных эффектов присущих указанным аналогам.
Поставленная задача в способе приготовления препарата для стимуляции роста животных, включающем собранное в период интенсивного сокодвижения и измельченное на частицы размером 5-35 мм лекарственное сырье, ее нагревание и охлаждение, достигается тем, что в качестве лекарственного сырья используют стебли и кору Acer Platanoides, а нагревание сырья проводят в течение 1,5-3 часов при температуре 160-280°С, с одновременным охлаждением летучих частиц, получающихся при разложении сырья во время ее нагрева, их конденсацией и последующим выделением легкой фракции, которую добавляют в предварительно подготовленный искусственный желудочный сок в соотношении 1:10 соответственно, полученный раствор выдерживают в течение 18-20 дней при температуре 38-39°С, при периодическом перемешивании после чего фильтруют, доводят концентрированным раствором его едкого натрия или калия до рН 4,5-5,0, снова выдерживают в течение суток при температуре 38-39°С, фильтруют, разливают во флаконы, затем стерилизуют в течение 15-20 мин при температуре 110-120°С и давлении 1 атм., после чего флаконы плотно закрывают и используют для инъекций. А искусственный желудочный сок получают путем смешивания 0,5% раствора соляной кислоты с 0,5% раствором свежего пепсина в соотношении 1:1.
Благодаря использованию в качестве лекарственного сырья стеблей и кору Acer Platanoides, нагревания сырья в течение 1,5-3 часов при температуре 160-280°С, с одновременным охлаждением летучих частиц, их конденсацией и выделением легкой фракции и добавления ее в предварительно подготовленный искусственный желудочный сок в соотношении 1:10 соответственно, выдержке в течение 18-20 дней при температуре 38-39°С при периодическом перемешивании, фильтрации полученного раствора и доведения его кислотности до рН 4,5-5,0 раствором едкого натрия или калия, дальнейшей выдержке раствора в течение суток при температуре 38-39°С, фильтрации, разлива его в флаконы, стерилизации в течение 15-20 минут при температуре 110-120°С и давлении 1 атм. С дальнейшей плотной укупоркой их и использованием для инъекций, и использования в качестве искусственного желудочного сока смесь 0,5% раствора соляной кислоты с 0,5% раствора свежего пепсина в соотношении 1:1, что позволило создать растительный препарат для стимуляции роста животных, дающий возможность его использования для парентерального применения (подкожно, внутримышечно), не обладающего токсичностью и увеличивающий прирост массы тела животных.
Способ приготовления препарата для стимуляции роста животных описан ниже.
Для получения препарата используют стебли и кору Acer Platanoides в период интенсивного сокодвижения. Сбор (при необходимости сушку и хранение) растительного сырья производят общепринятыми методами, регламентируемыми ГФ и ГОСТом. Растительное сырье - стебли и кору Acer Platanoides измельчают на частицы размером - 5-35 мм и укладывают в колбу из химически и термостойкого материала (колба плоскодонная ТС, П-2-500-34). Присоединяют к ней холодильник Либиха или шариковый холодильник и устанавливают над пламенем горелки газового прибора с помощью специального держателя в наклонном положении под углом 55-60(на высоте 6-8 см., от пламени горелки. К свободному концу холодильника подставляют стеклянную емкость для сбора конденсата. Одновременно холодильник присоединяют к водопроводной сети и осуществляют подачу воды снизу-вверх. Содержимое колбы нагревают при температуре от 160 до 280°С. Образующаяся в процессе пиролиза растительного сырья парогазовая смесь, при прохождении через холодильник, превращается в конденсат и накапливается в емкости для сбора. Накопившийся в емкости для сбора конденсат состоит из двух фракций - верхний, жидкий слой и нижний - смолистое вещество. Верхний жидкий слой конденсата отделяют от нижнего смолистого вещества и переносят в другую емкость. Далее верхний, жидкий слой конденсата, подвергают кислотно-ферментативному гидролизу. Для чего готовят искусственный желудочный сок, состоящий из 0,5% соляной кислоты (ХЧ) и 0,5% свежего пепсина, к которому приливают жидкий слой конденсата при соотношении: одна часть конденсата с десятью частями желудочного сока. Емкость закрывают неплотно ватно-марлевой пробкой и ставят в термостат с температурой 38-39°С, на 18-20 дней. Содержимое емкости взбалтывают ежедневно, 1-2 раза. По истечении указанных сроков содержимое емкости фильтруют через бумажные фильтры в отдельную емкость. Посредством титрования концентрированным раствором едкого натра или калия, доводят кислотность содержимого до рН 4,5-5,0 и обратно ставят в термостат на 24 часа, при том же температурном режиме. По истечении 24 часов, полученное таким образом средство, повторно фильтруют через бумажные фильтры, разливают во флаконы и стерилизуют в автоклаве под давлением 1 атм. (110-120°С) в течение 15-20 минут или 3-х кратной тиндализацией в водяной бане при температуре 70-80°С по 60 минут ежедневно в течение 3-х дней. Флаконы укупоривают резиновыми пробками и закрывают алюминиевыми колпачками. Препарат представляет собой жидкость от темно-желтого, до коричневого цвета и имеет слабовыраженный специфический запах. Допускается наличие незначительного осадка, который при легком встряхивании исчезает. Препарат вводится парентерально (подкожно, внутримышечно) в организм животного. Хранится препарат в темном месте, при температуре от+2 до +15°С в течение 12 месяцев.
Изобретение позволяет получить высокоэффективное, экологически чистое лекарственное средство из недефицитного растительного сырья для инъекций, и расширить ассортимент лекарственных препаратов применяемых в ветеринарии. Полученный таким образом препарат позволяет осуществить индивидуальный подход при подборе дозы в каждом конкретном случае.
Ниже представлены результаты исследований по оценке использования предлагаемого препарата для стимуляции роста животных, приготовленного из жидкой фракции продуктов сухой возгонки стеблей и коры Acer Platanoides, на 0,5% искусственном желудочном соке.
Экспериментальные исследования проведены в соответствии с требованиями нормативного документа «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [7].
Определение переносимости и безвредности препарата
Вначале изучена переносимость и безвредность /токсичность/ предлагаемого препарата на лабораторных животных. При этом в первой и во второй серии опытов были использованы лабораторные белые мыши обоего пола с массой тела 20-22 г. Изучаемый препарат вводили мышам однократно, в первой серии внутримышечно в области бедра, а во второй серии опытов подкожно, в области спины, в дозах 0,1, 0,25 и 0,5 мл на животное. Наблюдения вели в течение 14 суток, причем в течение первых суток после введения препарата животные находились под непрерывным наблюдением. Животным контрольных групп вводили в аналогичных дозах - воду для инъекций.
Для регистрации картины интоксикации учитывали общее состояние животных, поведенческие реакции, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных.
По завершении эксперимента отдельных животных подвергали эвтаназии с помощью эфира диэтилового, проводили диагностическое вскрытие с целью макроскопического исследования внутренних органов.
Проведенными исследованиями установлено, что введение препарата внутримышечно в дозах 0,1, 0,25 и 0,5 мл, и подкожно в дозах 0,25, 0,5 и 1,0 мл на животное, в течение первых суток вызывало у мышей незначительное изменение поведенческих реакций, проявляющееся в виде группирования животных (забивались в угол), снижения двигательной активности и некоторое учащение дыхания. Наблюдаемое состояние сохранялось у животных в течение 2-3-х часов, после чего поведенческие реакции приходили в норму.
Однократное внутримышечное и подкожное введение препарата мышам в максимально допустимых дозах не приводило к гибели животных (табл.1).
В конце эксперимента, при патологоанатомическом вскрытии специально убитых мышей, отклонений в развитии внутренних органов у опытных животных по сравнению с контролем не обнаружено. Ввиду отсутствия гибели животных, определить параметры токсичности не представлялось возможным.
| Таблица 1 | ||||||
| Переносимость и острая токсичность предлагаемого препарата для лабораторных белых мышей | ||||||
| № серии опыта | Группы | Кол-во | Пол | Путь введения | Доза, мл | Кол-во животных (пало/выжило) |
| I | опытная | 6 | 0,1 | 0/6 | ||
| 6 | самки | в/м | 0,25 | 0/6 | ||
| 6 | 0,5 | 0/6 | ||||
| контрольная | 6 | 0,5 | 0/6 | |||
| опытная | 6 | 0,1 | 0/6 | |||
| 6 | самцы | в/м | 0,25 | 0/6 | ||
| 6 | 0,5 | 0/6 | ||||
| контрольная | 6 | 0,5 | 0/6 | |||
| II | опытная | 6 | 0,25 | 0/6 | ||
| 6 | самки | п/к | 0,5 | 0/6 | ||
| 6 | 1,0 | 0/6 | ||||
| контрольная | 6 | 1,0 | 0/6 | |||
| опытная | 6 | 0,25 | 0/6 | |||
| 6 | самцы | п/к | 0,5 | 0/6 | ||
| 6 | 1,0 | 0/6 | ||||
| контрольная | 6 | 1,0 | 0/6 |
Определение хронической токсичности
Хроническая токсичность препарата при многократном его внутримышечном применении изучена на 40 лабораторных белых крысах с исходной массой 170-180 г. Из общего числа животных по принципу аналогов были сформированы 4 группы по 10 особей в каждой: одна контрольная и три опытные. Предлагаемый препарат вводили внутримышечно в следующих дозах: первой опытной группе по 0,5; второй - 2,5 и третьей - 5,0 мл/кг массы тела, один раз в сутки, на протяжении 14 дней. Крысы контрольной группы получали воду для инъекций внутримышечно в дозе 5,0 мл/кг. За животными вели наблюдения в течение 30 суток.
Критерием токсичности служили изменения общего состояния животных, особенности поведения, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, количество павших и выживших крыс, время восстановления функций организма. Кроме того, токсичность оценивали по изменению гематологических показателей. Для изучения динамики изменения массы тела, животных взвешивали в начале опыта, а затем один раз в две недели.
Как показали проведенные исследования, продолжительное (многократное) внутримышечное введение препарата в дозах от 0,5 мл/кг до 5,0 мл/кг не вызывало гибели животных ни в одной из опытных групп. Для объективной оценки токсических свойств изучаемого средства была дана оценка токсического влияния препарата на показатели крови крыс при ежедневном (в течение 14 суток) применении (табл.2).
| Таблица 2 | ||||
| Влияние предлагаемого препарата на показатели крови крыс в хроническом опыте | ||||
| Показатель | Контрольная группа | 1-я опытная | 2-я опытная | 3-я опытная |
| На 15 сутки | ||||
| Эритроциты, 1012/л | 6,27±0,46 | 5,97±0,16 | 5,76±0,27 | 5,56±0,30 |
| Лейкоциты, 109/л | 9,17±0,47 | 7,60±0,65 | 7,80±0,67 | 7,73±0,36 |
| Гемоглобин, г/л | 86,4±2,55 | 85,3±2,55 | 85,2±2,55 | 85,07±0,7 |
| На 30 сутки | ||||
| Эритроциты, 1012/л | 6,18±0,51 | 6,29±0,24 | 6,47±0,09 | 6,19±0,16 |
| Лейкоциты, 109/л | 8,57±1,10 | 8,50±0,19 | 8,03±1,39 | 8,67±1,02 |
| Гемоглобин, г/л | 90,8±1,77 | 93,2±1,30 | 92,0±3,83 | 91,2±5,30 |
Из таблицы видно, что на 15 сутки эксперимента происходит незначительное дозозависимое снижение числа эритроцитов, лейкоцитов и уровня гемоглобина во всех опытных группах по сравнению с контрольной. Выявленные изменения со стороны изучаемых показателей были не достоверными и имели функциональный характер, так как в конце экспериментального периода содержание клеток белой крови восстановилось до значений контрольных животных, а количество эритроцитов и гемоглобина несколько превосходили аналогичный показатель контрольной группы.
При изучении общетоксического действия предлагаемого препарата на показатели роста и развития крыс в динамике установили, что ежедневное введение препарата в течение 14 суток приводит к снижению росто-весовых показателей животных опытных групп по сравнению с контрольными (табл.3). Особенно выражено отставание прироста живой массы у крыс, получавших препарат в максимальной дозе.
| Таблица 3 | |||||
| Влияние предлагаемого препарата на динамику живой массы крыс в хроническом опыте | |||||
| Группа | Масса тела, г | Среднесуточный прирост массы одного животного за 30 дней | |||
| на начало опыта | на 15 сутки | на 30 сутки | (г) | % к контролю | |
| Контрольная | 175,4±3,69 | 197,3±2,06 | 242,3±11,4 | 2,23 | 100,0 |
| 1-я опытная | 174,6±4,92 | 194,7±8,16 | 240,0±8,75 | 2,18 | 97,8 |
| 2-я опытная | 175,2±3,07 | 192,3±5,34 | 238,0±7,72 | 2,09 | 93,7 |
| 3-я опытная | 175,8±2,89 | 188,3±6,68 | 236,6±9,27 | 2,03 | 91,0 |
В следующие две недели с момента прекращения использования препарата, разница в живой массе между контрольной и опытными группами несколько сократилась. Так, к концу экспериментального периода среднесуточный прирост у крыс первой опытной группы составил 2,18, второй - 2,09 и третьей - 2,03 г., что было ниже рассматриваемых показателей контрольных животных на 2,2; 6,3 и 9,0% соответственно.
При вскрытии крыс, с целью макроскопического исследования внутренних органов, во все сроки наблюдаемого периода патологических изменений в органах, которые можно было бы связать с токсическим действием препарата на их организм, не выявлено. Внутренние органы при визуальном осмотре имели одинаковый цвет и размеры, свойственные ткани органа и возрасту животного.
Были определены аллергизирующие свойства препарата
Определение аллергизирующих свойств препарата проводили в реакции общей анафилаксии (анафилактический шок) с использованием 40 лабораторных белых мышах обоего пола с исходной живой массой 18-20 г.Из общего числа животных было сформировано 4 группы по 10 особей в каждой (две контрольные и две опытные). Анафилактогенные свойства предлагаемого препарата изучали в двух дозах, для чего грызунам первой опытной группы исследуемый препарат вводили в эффективной терапевтической дозе (0,5 мл/кг), а животным второй опытной - на порядок выше, т.е. соответствующей по уровню десяти терапевтическим дозам (5 мл/кг). Животным опытных групп, с учетом доз, предлагаемый препарат инъецировали трехкратно: первая инъекция подкожно, а две последующие внутримышечно в область бедра через каждые 48 часов. Животным контрольной группы аналогично вводили воду для инъекций. На 14-21 сутки после сенсибилизирующих инъекций, животным всех четырех групп вводили изучаемый препарат внутривенно, в боковую вену хвоста в разрешающей дозе (равен суммарной сенсибилизирующей дозе).
Результаты по выявлению аллергизирующих свойств препарата представлены в таблице 4.
| Таблица 4 | ||||
| Результаты выявления аллергизирующих свойств предлагаемого препарата в реакции общей анафилаксии | ||||
| Группа животных | Доза препарата, мл/кг | Количество животных в опыте | Пало всего, гол. | |
| в начале | в конце | |||
| Контрольная | - | 10 | 10 | 0 |
| Опытная | 0,5 | 10 | 10 | 0 |
| Контрольная | - | 10 | 10 | 0 |
| Опытная | 5,0 | 10 | 10 | 0 |
Результатами проведенных исследований установлено, что введение сенсибилизации животных не способствовало возникновению анафилактического шока не только при использовании терапевтической дозы, но и дозы соответствующей 10-кратной.
Таким образом, данным тестом также установлено, что изучаемый препарат не обладает сенсибилизирующими свойствами, ввиду чего не провоцирует аллергические реакции.
Было изучено ростостимулирующее свойство предлагаемого препарата на белых крысах.
Ростостимулирующие свойства препарата изучали на лабораторных белых крысах 50-суточного возраста, полученных из одного помета. Всего было использовано 8 крыс обоего пола с исходной массой тела 74,0 г., распределенных в 2 группы, по принципу аналогов. Животные первой группы служили контролем, они препарат не получали и им вводили физиологический раствор. Животным второй опытной группы трехкратно, внутримышечно вводили предлагаемый препарат через каждые 48 часов один раз в сутки в дозе 0,5 мл/кг. Животных взвешивали перед началом опыта, а затем на 30 и 60 сутки. По результатам взвешиваний рассчитывали абсолютный прирост живой массы тела, среднесуточный прирост и прирост массы тела в процентах по отношению к исходным данным.
Проведенными исследованиями установлено, что темпы роста у крыс опытной группы выше, чем у сверстников из контрольной группы (табл.5).
Так из анализа результатов проведенных исследований видно, что на 30 сутки эксперимента у животных, получивших препарат, живая масса и среднесуточный прирост выше, чем у контрольных на 15,7 г, и 0,53 г, а относительный прирост на 21,9%.
Существенная разница по показателям привесов в пользу подопытных животных, получивших изучаемый препарат, была сохранена и в конце эксперимента (60 сутки). Живая масса крысят опытной группы при взвешивании превосходила массу контрольных животных на 17,7 г, среднесуточный прирост на 0,3 г и относительный прирост на 24,8%.
| Таблица 5 | ||||
| Динамика массы тела молодняка белых крыс при внутримышечном применении предлагаемого препарата | ||||
| Сроки исследования, сутки | Группы | Живая масса, г | Среднесуточный прирост, г | Относительный прирост за период, % |
| Фон | 1 | 74,0±4,47 | ||
| 2 | 73,8±3,74 | |||
| 30 | 1 | 148,7±2,56 | 2,49±0,16 | 100,9 |
| 2 | 164,4±2,16 | 3,02±0,18 | 122,8 | |
| 60 | 1 | 224,3±2,16 | 2,50±0,12 | 203,1 |
| 2 | 242,0±3,41 | 2,80±0,08 | 227,9 |
Было изучено ростостимулирующее свойство предлагаемого препарата на кроликах.
Ростостимулирующие свойства препарата изучали на кроликах породы Шиншилла в условиях вивария патофизиологии КГАВМ им. Н.Э.Баумана. В опыте использовали 6 крольчат в возрасте 60 суток с исходной массой 890-940 г, из которых было сформировано 2 группы (контрольная и опытная) по 3 животных в каждой. Животным опытной группы подкожно инъецировали изучаемый препарат в дозе 0,5 мл/кг живой массы, трехкратно 1 раз в сутки через каждые 72 часа. Кролики контрольной группы препарат не получали и им подкожно применяли изотонический раствор хлорида натрия трехкратно, 1 раз в сутки через каждые 72 часа, в дозе 0,5 мл на животное на одно введение.
Крольчат взвешивали перед началом опыта и по завершении его при достижении молодняка 4-х месячного возраста.
Экспериментально установлено, что молодняк опытной группы, которому применяли препарат, развивался лучше и имел более высокие показатели прироста живой массы (табл.6).
| Таблица 6 | ||||
| Показатели прироста живой массы крольчат при применении предлагаемого препарата | ||||
| Сроки исследования, сутки | Группы | Живая масса, г | Среднесуточный прирост, г | Относительный прирост за период, % |
| Фон | 1 | 919,67±10,3 | ||
| 60 | 2 | 917,67±17,6 | ||
| 120 | 1 | 1980,0±28,28 | 17,67±0,43 | 115,3 |
| 2 | 2076,0±18,55* | 19,31±0,39* | 126,2 | |
| Примечание: * - Р<0,05 |
Взвешиванием установлено, что крольчата опытной группы в возрасте 4 месяца весили 2076 г, тогда как контрольные - 1980 г. Таким образом, масса опытных животных была выше контрольных на 96 г. Среднесуточный прирост был также достоверно выше, чем у молодняка контрольной группы.
Было изучено ростостимулирующее свойство препарата на поросятах-сосунах.
Исследования проведены на базе свинокомплекса КФХ «Пашков Игорь Сергеевич» Верхнеуслонского района Республики Татарстан.
Объектом исследования служили 12 поросят-сосунов суточного возраста, крупной белой породы, полученные от одной свиноматки. Для проведения опыта поросята были распределены в 2 группы по принципу аналогов (контрольная и опытная) по 6 животных в каждой. Поросята находились на подсосе и содержались в одном станке вместе с матерью.
Схема проведения опыта была согласована с зооветеринарными специалистами хозяйства.
Согласно схеме, поросятам контрольной группы на третьи и десятые сутки после рождения, для профилактики анемии внутримышечно вводили тетрагидровит и железосодержащий препарат урсоферран-100, что предусмотрено планом ветеринарных мероприятий принятой в хозяйстве. В отличие от этого, поросятам опытной группы в те же сроки также применяли вышеуказанные препараты и кроме того, на 2, 5 и 8 сутки жизни, они получали дополнительно предлагаемый препарат. Препарат вводили в область шеи внутримышечно, один раз в сутки, в дозах 0,5; 1,0 и 1,0 мл на одно животное.
Взвешивание контрольных и опытных животных проводили на 2 сутки жизни (фон) и на 21 сутки (день отъема поросят от матерей) по завершении эксперимента. По результатам взвешиваний рассчитывали абсолютный и среднесуточный прирост живой массы тела. Учитывали сохранность. Для объективной оценки влияния препарата на организм поросят проводили морфологические исследования крови, включавшие подсчет количества эритроцитов и лейкоцитов в камере Горяева, уровня гемоглобина-гемоглобинцианидным методом.
При анализе прироста живой массы, выявлено, что поросята опытных групп отличались относительно высокой энергией роста по отношению к контрольным животным (табл.7).
Из таблицы видно, что при отъеме поросят от матери, средняя живая масса по опытной группе выше, чем контрольной на 11,6%.
Среднесуточный прирост живой массы составил у опытных животных 197,6 г, при 168,6 г у контрольных.
При исследовании крови установлено, что применение препарата
| Таблица 7 | ||||||
| Показатели живой массы и сохранности поросят-сосунов при применениипредлагаемого препарата | ||||||
| Группы | Количество поросят в опыте | Средняя живая масса по группе, кг | Среднесуточный прирост, г | Сохранность, % | ||
| в начале | в конце | в начале опыта | в конце опыта | |||
| Контрольная | 6 | 5 | 1,78±0,12 | 5,32±0,48 | 168,6 | 83,3 |
| Опытная | 6 | 6 | 1,79±0,05 | 5,94±0,42 | 197,6 | 100,0 |
оказывает позитивное влияние на организм поросят-сосунов опытной группы, что сопровождается достоверным повышением у них количества эритроцитов и уровня гемоглобина по отношению к контрольным животным. В частности, в конце экспериментального периода содержание числа эритроцитов и уровня гемоглобина у поросят опытной группы было выше, чем у сверстников из контрольной группы, на 9,2 и 7,8% соответственно (табл.8). По содержанию лейкоцитов достоверных различий между группами не выявлено.
| Таблица 8 | |||
| Влияние предлагаемого препарата на гематологические показатели поросят | |||
| Группы животных | Исследуемые показатели | ||
| Эритроциты, 1012/л | Лейкоциты, 109/л | Гемоглобин, г/л | |
| Фон | |||
| Контрольная (n=6) | 4,88±0,12 | 13,2±0,69 | 84,21±0,88 |
| Опытная (n=6) | 4,86±0,16 | 13,0±0,66 | 84,19±1,32 |
| 21 сутки | |||
| Контрольная (n=5) | 5,56±0,14 | 14,88±0,81 | 96,7±2,39 |
| Опытная (n=6) | 6,07±0,11* | 14,46±0,23 | 104,2±1,96* |
| Примечание: * - Р<0,05 |
Один поросенок из контрольной группы пал и сохранность животных по данной группе составила 83,3%, при 100% в опытной.
Изучение ростостимулирующих свойств предлагаемого препарата напоросятах-гипотрофиках.
Исследования проведены на базе свинокомплекса КФХ «Пашков Игорь Сергеевич» Верхнеуслонского района Республики Татарстан.
В опыте использованы 10 поросят крупной белой породы в возрасте 28 суток, с признаками выраженной гипотрофии. Поросята первой группы в количестве 5 голов служили контролем и им препарат не применяли. Поросятам второй группы (опытной) внутримышечно вводили испытуемый препарат 3-х кратно, один раз в сутки, через каждые 72 часа, в дозе 0,3 мл/кг живой массы. Поросят содержали в одной секции, и они получали одни и те же корма. Поросят взвешивали перед началом опыта и по завершении его. Длительность эксперимента составила 30 суток.
Из представленных в таблице данных видно, что применение препарата способствует увеличению абсолютной живой массы поросят опытной группы по отношению к контролю на 10,8% и среднесуточного прироста на 16,1% соответственно (табл.9).
Сохранность, как по опытной, так и по контрольной группе составила 100%.
| Таблица 9 | ||||||
| Показатели прироста живой массы поросят-гипотрофиков при применении предлагаемого препарата | ||||||
| Группы | Количество поросят в опыте, голов | Средняя живая масса по группе, кг | Среднесуточный прирост, г | Сохранность, % | ||
| в начале | в конце | в начале опыта | в конце опыта | |||
| Контрольная | 5 | 5 | 4,13±0,15 | 12,9±0,27 | 292,3 | 100,0 |
| Опытная | 5 | 5 | 4,12±0,19 | 14,3±0,32* | 339,3 | 100,0 |
| Примечание: * -Р<0,01 |
Таким образом, эффективность использования предлагаемого препарата в качестве стимулятора роста для животных разных видов подтверждена на практике. При этом была показана безвредность препарата для лабораторных и сельскохозяйственных животных. Использование препарата обеспечивает повышение абсолютной живой массы у лабораторных и сельскохозяйственных животных, повышает сохранность и среднесуточные приросты.
Источники информации:
1. Червяков Д.К. / Д.К.Червяков, А.Н.Терезова // Фармакология с рецептурой «Колос», 1981. - 368 с.
2. Мозгов И.Е. / И.Е.Мозгов // Фармакология. Изд. 5-е. М., «Колос», 1969. - 448 с.
3. Червяков Д.К., Лекарственные средства в ветеринарии / Д.К.Червяков, П.Д.Евдокимов, А.С.Вишкер // Справочник. Изд-2, перераб. и доп. М., «Колос», 1977. - 496 с. с ил.
4. Мозгов И.Е. / И.Е.Мозгов // Фармакология. - 7-е, доп.и перераб. - М.: Колос, 1979. - 416 с, ил.
5. Иммунология, 1990, т.6, - С.21-23.
6. Наука и жизнь, №9, 1996, - С.64.
7. Хабриев Р.У. / Р.У.Хабриев // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 832 с.: ил.
1. Способ приготовления препарата для стимуляции роста животных, включающий собранное в период интенсивного сокодвижения и измельченное на частицы 5-35 мм лекарственное сырье, его нагревание и охлаждение, отличающийся тем, что в качестве лекарственного сырья используют стебли и кору Acer Platanoides, а нагревание сырья проводят в течение 1,5-3 ч, при температуре 160-280°С, с одновременным охлаждением летучих частиц, получающихся при разложении сырья во время его нагрева, их конденсацией и последующим выделением легкой фракции, которую добавляют в предварительно подготовленный искусственный желудочный сок в соотношении 1:10 соответственно, полученный раствор выдерживают в течение 18-20 дней при температуре 38-39°С при периодическом перемешивании, после чего фильтруют, доводят кислотность концентрированным раствором едкого натрия или калия до рН 4,5-5,0, снова выдерживают в течение суток при температуре 38-39°С, фильтруют, разливают в флаконы, затем стерилизуют в течение 15-20 мин при температуре 110-120°С и давлении 1 атм., после чего флаконы плотно закрывают.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что искусственный желудочный сок получают путем смешивания 0,5%-ного раствора соляной кислоты с 0,5%-ным раствором свежего пепсина в соотношении 1:1.
