Способ резекции печени у мелких лабораторных животных

Авторы патента:

Ермолаев Павел Александрович (RU)

Храмых Татьяна Петровна (RU)

Барская Любовь Олеговна (RU)

Полуэктов Владимир Леонидович (RU)

G09B23/28 - в медицине

Владельцы патента RU 2601160:

государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ОмГМУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии и патофизиологии, и может быть использовано для изучения механизмов развития ранних и поздних осложнений после выполнения атипичной предельно допустимой резекции печени. Способ предполагает удаление 80% от общей массы печени у крыс. Для этого, после мобилизации в операционное поле срединной и левой долей печени, на 1 мм проксимальнее границы предполагаемой линии резекции накладывают 2-4 матрацных шва на каждую долю. После этого острым путем проводят резекцию указанных долей печени с последующей обработкой раневой поверхности электрокоагулятором. Предложенная резекция, являясь максимально приближенной по объему и тяжести к операции расширенной гемигепатэктомии у человека, позволяет изучать механизмы развития ранних и поздних послеоперационных осложнений, динамику морфо-функциональных изменений в оставшейся части печени, что стратегически важно при планировании объема резекции и трансплантации печени. 2 ил.

На сегодняшний день в экспериментальной хирургии известен способ анатомической (типичной) резекции печени у мелких лабораторных животных, который предусматривает удаление до 70% ткани печени, разработанный Higgins G.M. и Anderson R.M. [6, 7]. При проведении таких резекций у крыс практических отсутствует летальность в раннем послеоперационном периоде. В свое время, данная модель была предложена для изучения регенерации печени. Выполнение же субтотальной 90%-ной резекции у крыс печени по Weinbrein и соавт. сопровождалась 100%-ной летальностью в первые сутки [6, 7] и в настоящее время служит моделью для изучения фульминантной печеночной недостаточности.

В то же время в клинической хирургии нередко возникает необходимость выполнения предельно допустимых резекций печени с удалением 80-85% массы печени, что связано с высоким риском развития специфических и неспецифических послеоперационных осложнений и высокой летальностью.

Патофизиологические аспекты воздействия на организм обширных резекций печени в различные сроки послеоперационного периода остаются малоизученными, а также отсутствуют общепринятые протоколы интенсивной терапии после подобных вмешательств [4]. Изучение в эксперименте ранее неизвестных механизмов повреждения и компенсации внутренних органов и систем организма в различные сроки после расширенной гемигепатэктомии является основой для разработки патогенетически обоснованных методов коррекции нарушений гомеостаза, развивающихся после обширных резекций печени.

Таким образом, в экспериментальной хирургии в настоящее время отсутствует способ предельно допустимой резекции печени, адекватный по объему и тяжести к операции расширенной гемигепатэктомии у человека.

Прототипом изобретения является операция расширенной гемигепатэктомии у человека, выполняемая по критериям единой терминологии резекций печени (Brisbane, 2000) [5]. Однако у белых беспородных крыс особенности анатомического строения печени, а именно ее деление на доли, не позволяют выполнить в эксперименте анатомическую предельно допустимую резекцию печени (80-85%).

Поэтому задачей заявляемого изобретения является разработка способа атипичной предельно допустимой резекции печени у мелких лабораторных животных для изучения механизмов развития ранних и поздних послеоперационных осложнений.

Поставленная задача решалась тем, что в асептических условиях беспородным белым крысам-самцам массой 242±27 г выполняли срединную лапаротомию под ингаляционным наркозом диэтиловым эфиром с сохранением спонтанного дыхания. В серии острых экспериментов (n=10) проводили гепатэктомию и, взвешивая полученную печень, определяли ее среднюю массу. Средняя масса печени составила 10,7±1,31 г. Исходя из полученной массы печени рассчитывали массу уходящей части органа пропорцией:

10,7 г - 100%

X г - 80%.

Таким образом, масса уходящей части печени составила ≈ 8,5 г. Предельно допустимую резекцию печени выполняли путем прошивания и пересечения паренхимы печени независимо от ее долей, т.е. выполняли атипичную (неанатомическую) резекцию печени, удаляя 80% ее массы, т.е. 8,5 г.

На фиг. 1 схематично показано долевое строение печени крысы и ее синтопия, где: 1 - вырезка круглой связки, 2 - левая доля печени, 3 - хвостатая доля печени, 4 - пищевод, 5 - желудок, 6 - селезенка, 7 - большой сальник, 8 - двенадцатиперстная кишка, 9 - холедох, 10 - воротная вена, 11 - правая доля печени, 12 - срединная доля печени.

На фиг. 2 схематично показан объем предельно допустимой резекции печени крыс, обозначения те же, что и на фиг. 1.

Способ резекции печени у мелких лабораторных животных осуществляется следующим образом: оперативный доступ - срединная лапаротомия. Оперативный прием: после мобилизации в операционное поле срединной и левой долей печени на 1 мм проксимальнее границы предполагаемой линии резекции необходимо наложить по 2-4 матрацных шва на каждую долю. После этого острым путем удаляют ≈ 8,5 г печени и, для окончательной остановки кровотечения и желчеистечения, обработать раневую поверхность электрокоагулятором. Перитонизацию раневой поверхности осуществить прядью большого сальника. Выход из операции: рану ушить послойно.

Технический результат: разработан способ атипичной предельно допустимой резекции печени (80% от массы этого органа) у мелких лабораторных животных.

В настоящее время нами выполнено более 100 экспериментальных операций на крысах данным способом. Летальность составила 20% в течение 7 суток. На данной модели нами изучалась детоксикационная функция печени, структурные изменения в оставшейся части печени, повреждение желудочно-кишечного тракта [1, 2, 3]. Также проводится набор экспериментального материала для оценки повреждения сердечнососудистой системы в ранние сроки после атипичной предельно допустимой резекции печени.

Способ является максимально приближенным по объему и тяжести к операции расширенной гемигепатэктомии у человека. Способ позволяет изучать механизмы развития ранних и поздних послеоперационных осложнений у человека. Кроме того, данный способ позволяет изучать динамику морфо-функциональных изменений в оставшейся части печени, что стратегически важно при планировании объема резекции и трансплантации печени.

Список литературы

1. Барская Л.О., Храмых Т.П., Полуэктов В.Л. Острое повреждение желудка после расширенной гемигепатэктомии // Вестник уральской медицинской академической науки. - 2012. - №2. - С. 85.

2. Барская Л.О., Храмых Т.П., Полуэктов В.Л., Заводиленко К.В. Ранние морфо-функциональные изменения в печени после обширной резекции (экспериментальное исследование) // Анналы хирургической гепатологии. - 2012. - №4.

3. Барская Л.О., Храмых Т.П., Полуэктов В.Л., Заводиленко К.В., Подойников М.В., Михеенко И.Л., Полуэктов В.В. Некоторые патогенетические факторы острого повреждения желудка после расширенной гемигепатэктомии // Сибирский медицинский журнал. - 2012. - №8.

4. Макарова В.В. Послеоперационные осложнения при резекции печени: дис. канд. мед. наук: 14.00.27. - М., 2007. - 121 с.

5. Операции на печени. Руководство для хирургов / В.А. Вишневский, В.А. Кубышкин, А.В. Чжао, Р.З. Икрамов М.: «МИКЛОШ», 2003. - 157 с.).

6. М.-А. Aller, L. Lorente, I. Prieto, L.M. Moquillaza, J. Arias. Hepatectomies in the rat: A look at the caudate process through microsurgery / Digestive and Liver Disease 41 (2009) p. 695-699.

7. N. Madrahimov, O. Dirsch, С.Broelsch, U. Dahmen Marginal hepatectomy in the rat. From anatomy to surgery / Annals of Surgery V. 244, number 1, July 2006.

Способ предельно допустимой резекции печени у крыс для изучения ранних и поздних послеоперационных осложнений, включающий в себя удаление 80% от общей массы печени, отличающийся тем, что, после мобилизации в операционное поле срединной и левой долей печени, на 1 мм проксимальнее границы предполагаемой линии резекции накладывают 2-4 матрацных шва на каждую долю, после этого острым путем проводят резекцию указанных долей печени с последующей обработкой раневой поверхности электрокоагулятором.

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для моделирования туберкулеза женских половых органов. Для этого кроликам вводят суспензию культуры Mycobacterium tuberculosis Erdman в дозе 107 КОЕ/0.2 мл под серозную оболочку маточной трубы на расстоянии 5 см от маточного рога.

Способ выявления противосудорожного действия цитиколина и вальпроата натрия при их совместном применении на модели острых генерализованных судорог, вызванных пентилентетразолом у крыс самцов линии вистар // 2600477

Изобретение относится к медицине, а именно к нейрохимии, патофизиологии, неврологии и психиатрии. На модели острых генерализованных судорог, вызванных пентилентетразолом у крыс самцов линии Вистар, разработан способ противосудорожного воздействия при совместном использовании цитиколина и вальпроата натрия.

Способ моделирования неалкогольной жировой болезни печени у крыс // 2600476

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной гепатологии, и может быть использовано для моделирования неалкогольной жировой дистрофии печени для последующей разработки новых лечебных подходов к коррекции данного патологического состояния.

Способ моделирования электротермохимического ожога верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (варианты) // 2598961

Группа изобретений относится к экспериментальной медицине и предназначена для получения модели электротермохимического ожога верхних отделов желудочно-кишечного тракта.

Способ моделирования неалкогольного стеатогепатита у крыс // 2598351

Изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии, ветеринарии и может быть использовано для моделирования неалкогольного стеатогепатита. Для этого используют лабораторных крыс.

Способ введения объем-образующих веществ в предпузырное пространство малого таза у лабораторных животных // 2595492

Изобретение относится к медицине, экспериментальной хирургии. Производят пункцию предпузырного пространства через запирательную мембрану.

Устройство для пункции проксимального конца бедренной кости // 2594980

Изобретение относится к медицине. Устройство для пункции проксимального конца бедренной кости содержит трубку с заостренным рабочим концом и канюлей на другом конце.

Способ моделирования локального некроза стенки кишки в эксперименте // 2594978

Изобретение относится к медицине, экспериментальной хирургии. Моделируют некроз серозно-мышечного слоя стенки кишечника экспериментального животного.

Способ оценки терапевтического воздействия эндометриальных стволовых клеток человека на поврежденный эндометрий в эксперименте. // 2593895

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для оценки терапевтического воздействия клеточного продукта (КП) на основе эндометриальных стволовых клеток (ЭСК) на поврежденный эндометрий.

Способ моделирования последовательного применения чрескостного и интрамедуллярного блокируемого остеосинтеза // 2593583

Изобретение относится к экспериментальной травматологии и ортопедии и может быть применимо для моделирования последовательного применения чрескостного и интрамедуллярного блокируемого остеосинтеза.

Способ тестирования препаратов с предполагаемым психотропным или актопротекторным действием // 2601376

Изобретение относится к экспериментальной медицине и касается исследований соединений с психотропными и актопротекторными свойствами на доклиническом этапе наблюдения. Способ включает формирование контрольной и экспериментальных групп животных (крыс), введение им препарата и тестирование животных. При этом предварительно для каждого животного обеих групп определяют значения когнитивных способностей, исследовательской активности, мотивационно-энергетических показателей и уровня тревожности. В соответствии с этим разделяют животных на три типа, определяющие возможность их эффективного использования для тестирования препаратов того или иного действия. Первый тип включает особей с изначальным когнитивным показателем от 0 до 45%, имеющих интегральный показатель исследовательской активности в пределах от 60 до 100%. Второй тип включает особей с изначальным когнитивным показателем от 45 до 60%, имеющих интегральный показатель исследовательской активности в пределах от 45 до 60%. Третий тип включает особей с изначальным когнитивным показателем от 60 до 100%, имеющих интегральный показатель исследовательской активности в пределах от 0 до 45%. Животных первого типа используют для исследования психотропных препаратов. Животных второго типа используют для изучения как психотропных, так и актопротекторных препаратов. Животных третьего типа используют предпочтительно для изучения актопротекторных препаратов. Тестирование по предварительному отбору лабораторных животных производят на одном и том же инструментальном средстве, выполненном с возможностью произвольного изменения его архитектуры, в виде приподнятого крестообразного лабиринта, открытого поля или универсальной проблемной камеры. При этом регистрируют качественные и количественные показатели как врожденного, так приобретенного поведения. Способ обеспечивает достоверное тестирование и открывает дополнительные возможности для выявления биологических свойств известных препаратов, а также новых соединений с предполагаемым психотропными и актопротекторными свойствами. 3 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 4 пр.

Способ изготовления анатомического препарата полого органа // 2601377

Изобретение относится к области медицины, а именно к патологической анатомии. Для изготовления анатомического препарата полый орган или его фрагмент выделяют из эвисцерированного комплекса органов, промывают полость проточной водой, препарируют, после чего его полость заполняют универсальным водостойким клеем на основе акриловой водной дисперсии, например клеем «Момент монтаж», до тех пор, пока внешний рельеф полого органа, его консистенция и степень наполнения не будут соответствовать аналогичным прижизненным характеристикам. Отверстия полого органа, через которые заполняли полость, прошивают, тампонируют ватой и перевязывают, после чего полый орган оставляют в герметичной емкости в парах консервирующего бактерицидного вещества, например 10%-ного водного раствора формалина, до полной фиксации. Способ позволяет изготовить анатомический препарат полого органа, который по внешнему рельефу и консистенции максимально напоминает соответствующий полый орган при жизни, при увеличении срока эксплуатации изготовленного анатомического препарата и повышении безопасности технологического процесса за счет отказа от использования токсичных и легковоспламеняющихся растворителей. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.

Способ моделирования абсцесса мягких тканей // 2601378

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной и гнойной хирургии, и может быть использовано для поиска новых способов лечения абсцессов мягких тканей. Для моделирования абсцесса животному вводят возбудитель патологического процесса в подкожное пространство. При этом предварительно в это пространство вводят катетер с раздуваемым баллоном. Баллон раздувают в объеме 2 мл раствором 0,9% хлористого натрия. Конец катетера укрывают с помощью кожной дупликатуры. Через трое суток опорожняют баллон и удаляют катетер. Затем в образовавшуюся полость в качестве возбудителя патологического процесса вводят суспензию Staphylococcus aureus с микробной нагрузкой 2 мл × 106 КОЕ. Способ, являясь малотравматичным, не требующим сложных манипуляций, обеспечивает формирование отграниченного гнойного воспаления мягких тканей на пятые сутки эксперимента. 6 ил., 1 пр.

Способ повышения уровня работоспособности лабораторных животных в эксперименте // 2601393

Изобретение относится медицине, а именно к экспериментальной фармакологии, и касается выявления и изучения средств для повышения физической работоспособности у лабораторных животных в эксперименте. Способ включает введение животному актопротектора, в качестве которого используют N-дифенилфосфорил-N′-алкил(С6-С10)мочевин со структурной формулой Ph2P(О)NHC(О)NHCH2CH=CH2 и брутто-формулой C16H17N2O2P. Соединение вводят в виде раствора внутрижелудочно через зонд в дозе 10-15 мг/кг веса животного за 20-40 минут до проведения теста Порсолта и теста на вертикальном экране-сетке. Способ обеспечивает повышение уровня работоспособности лабораторных животных в условиях повышенной физической нагрузки, что может позволить в дальнейшем использовать указанное соединение в медицинской и/или спортивной практике. 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

Способ моделирования состояния ингибирования функциональной активности гликопротеина-р ингибитором дипептидилпептидазы 4 // 2602688

Изобретение относится к экспериментальной медицине, фармакологии и предназначено для изучения принадлежности лекарственных препаратов к субстратам эффлюксного белка-транспортера гликопротеина-Р (P-gp, АВСВ1 белок), а также использования в качестве контроля ингибирующей активности P-gp при установлении веществ аналогичного типа действия. Для этого моделируют в эксперименте состояние ингибирования функциональной активности P-gp. В качестве препарата-ингибитора используют ингибитор дипептидилпептидазы-4 вилдаглиптин, который вводят кролику внутрижелудочно в дозе 5 мг/кг массы тела в течение 14 дней. При этом в качестве маркерного субстрата P-gp используют фексофенадин, который вводят животному внутрижелудочно в дозе 67,5 мг/кг до и после 14-дневного введения вилдаглиптина с последующей оценкой содержания фексофенадина в плазме крови. Способ обеспечивает создание такой модели, при которой проявляется селективный эффект в отношении P-gp в отсутствии влияния на CYP3A4 без возникновения клинически значимых побочных эффектов. 3 табл.

Универсальный обучающий адаптер авд // 2603425

Группа изобретений относится к медицинской технике. Обучающая адаптерная система для дефибриллятора содержит пару электродов пациента, детектор, выполненный с возможностью детектировать надлежащее размещение пары электродов пациента на имитации пациента, соединитель, расположенный для электрического соединения с дефибриллятором, имитатор ЭКГ, шунтирующий резистор дефибрилляционной энергии и контроллер. Контроллер соединен с парой электродов пациента и находится в соединении с детектором. Контроллер выполнен с возможностью электрически соединять соединитель с имитатором ЭКГ и шунтирующим резистором в ответ на сигнал от детектора. Раскрыты обучающий адаптер и способ использования дефибриллятора. Изобретения обеспечивают безопасное использование внешнего дефибриллятора для обучения. 3 н. и 16 з.п. ф-лы, 6 ил.

Способ оценки биоинертности медицинских имплантов in vivo // 2603717

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для оценки биоинертности материалов для изготовления медицинских имплантов. Для этого имплантируют в печень и почки крыс по два образца исследуемого материала с последующим послойным ушиванием раны без дренажа. Затем на 14 и 30 сутки животных выводят из эксперимента и берут образцы ткани для гистологического исследования, вырезая поперечно к направлению имплантата через всю толщу органа. Измеряют толщину формирующихся реактивных тканевых зон и капсул, после чего проводят подсчет относительного количества клеточных элементов, характеризующих различные стадии раневого процесса. Для этого исследуют полиморфноядерные лейкоциты всех типов, лимфоциты, гистиоциты, фибробласты. Устанавливают биологическую инертность материала на основании выраженности лейкоцитарной инфильтрации, отсутствии в инфильтратах полиморфноядерных лейкоцитов, определяемой толщине соединительнотканной капсулы и завершенности коллагеногенеза. 1 пр.

Способ моделирования язвенного колита // 2604044

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии и патофизиологии, и касается моделирования язвенного колита. Самцам крыс линии «Wistar выполняют ишемизацию стенки толстой кишки. Для этого на уровне нисходящего отдела толстой кишки, на протяжении 3 см от основания мочевого пузыря, пристеночно выделяют, перевязывают и пересекают с сопровождающими венами прямые ветви левой артерии толстой кишки и краниальной прямокишечной артерии. После этого в течение семи послеоперационных суток обеспечивают свободный доступ к пище и к 1%-ному водному раствору декстрана сульфата натрия. Способ позволяет получить модель язвенного колита толстой кишки, приближенную к клиническому течению заболевания, воспроизводимость модели при этом составляет 90%. 7 ил.

Способ оценки когнитивных способностей крыс в проблемной камере григорьева // 2604048

Изобретение относится к физиологии и фармакологии поведения, в частности экспериментальному исследованию высших функций мозга, а именно когнитивных способностей животных, а также в психофармакологии для тестирования когнотропных препаратов, которые улучшают умственные способности. Оценку когнитивных способностей крыс осуществляют в проблемной камере Григорьева, состоящей из шести циклов тестирования - 6-ти помещений крысы в камеру, пока без ошибок или с ошибками будут найдены все 6 выходов. При этом правильные безошибочные побежки всегда оценивают в 100%, независимо от номера поискового цикла, а ошибочные побежки во втором поисковом цикле оценивают 16,6%, в третьем - 33,3%, в четвертом цикле - 50%, пятом - 66,6%, в шестом последнем цикле - 83,3%, принимая во внимание уменьшение числа неблокированных выходов из камеры. Когнитивные способности крысы рассчитывают, суммируя в % результаты правильных побежек и неправильных побежек. Причем при допущении неправильных побежек, соответствующий процент умножают на количество неправильных побежек, а затем сумму делят на количество всех побежек. При этом результат ниже 50% свидетельствует о рефлекторном характере поведения, выше 50%, но не достигая 100% - на тенденцию к обучению и приобретению опыта, 100% уровень указывает на высокий уровень когнитивных способностей тестируемой крысы. Способ позволяет с высокой степенью достоверности оценить когнитивные способности крыс в ПК Григорьева за счет того, что вероятность случайного выбора является переменной от начала и до конца тестирования. Это тот самый рубеж, с которого стоимость ошибки начнет увеличиваться до 66,6% на пятом цикле и до 83,3% на шестом, где потребность в когнитивных способностях максимально увеличена. Тестирование при полной блокаде всех дверок запрещено, поскольку нет выбора и нет возможности решения проблемы. Поэтому 7-го цикла, когда все дверки заблокированы, нет. У тестируемых животных в такой безвыходной ситуации возникает и развивается поведенческая депрессия и формируется состояние «learned helplessness (выученной беспомощности)» и наступает смерть (7). По данным наших публикаций, высокий индивидуальный уровень когнитивных способностей имеют только 10-12% тестируемых крыс. Именно их и можно причислить к статусу «интеллектуально одаренных» животных, другим этого не дано. Возможно, ввиду малочисленности этой группы животных проблема наличия или отсутствия когнитивных способностей до настоящего времени является дискуссионной. Когнитивные способности являются самыми главными в высшей нервной деятельности, это - память, внимание, планирование и прогнозирование, умение решать проблемы и осуществлять целенаправленную деятельность. Создание и тестирование когнотропных лекарств является одной из самых актуальных задач в психофармакологии и психиатрии. Использование этого способа может стать значимым и валидным тестом в экспериментальных исследованиях при поиске когнотропных лекарств.

Способ моделирования фиброзно-кистозной болезни молочной железы в эксперименте // 2605655

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной онкологии и маммологии, и может быть использовано в качестве модели фиброзно-кистозной болезни молочной железы. Способ включает внутримышечное введение девственным самкам крыс синэстрола в дозе 0,5 мл 2% масляного раствора в комбинации с 0,5 мл 2,5% масляного раствора прогестерона. Введение осуществляют в 1, 7, 14, 21, 28 и 35 дни эксперимента. Способ обеспечивает получение морфологических изменений молочной железы, подобных таковым изменениям у женщин, что позволяет детально изучать патогенез заболевания и способствовать разработке путей первичной профилактики рака молочной железы. 4 ил.