Средство, его применение и способ повышения устойчивости организма млекопитающих к переохлаждению
Владельцы патента RU 2665963:
Российская Федерация, от имени которой выступает ФОНД ПЕРСПЕКТИВНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ (RU)
Группа изобретений относится к созданию лекарственного средства для повышения устойчивости млекопитающих к переохлаждению. Средство содержит фармацевтическую композицию препаратов, содержащую 0,78-1,18 мас.% пропранолола, 0,015-0,024 мас.% резерпина, 0,078-0,12 мас.% ивабрадина, 0,098-0,18 мас.% дифенгидрамина, 0,025-0,035 мас.% перициазина, 0,25-0,35 мас.% серотонина гидрохлорид, 0,07-0,12 мас.% пропицила, 0,07-0,16 мас.% сульфата магния, 98-98,61 мас.% фармацевтически приемлемого растворителя. Также предлагается способ повышения устойчивости организма млекопитающих к переохлаждению, заключающийся в введении терапевтически эффективного количества средства. Техническим результатом является повышение резистентности клеток жизненно важных органов и тканей к переохлаждению. 3 н.п. ф-лы, 2 ил., 2 пр.
Область техники
Изобретение относится к областям медицины, в частности к неотложной медицине, анестезиологии/реаниматологии, к авиационной и космической медицине, водолазной медицине, а также фармацевтической технологии.
Уровень техники
Задача сохранения жизни млекопитающих, в том числе человека, оказавшегося в условиях низких для выживания температур весьма актуальна в настоящее время. Ведется поиск лекарственных средств для повышения резистентности организма млекопитающих к переохлаждению, которые должны сохранить жизнь пострадавших и снизить пагубные последствия гипотермии.
Известен патент РФ №1520688 [1], в котором целью изобретения является удлинение сроков пребывания млекопитающих в условиях низких температур. Для повышения устойчивости млекопитающих к общему охлаждению животным за 15-30 мин до охлаждения вводят 20-50%-ный раствор полиэтиленоксида (ПЭО) мол.м. 400 или 1500 в дозе 0,001 0,0004 г на 1 г живого веса. Введение этих растворов не вызывает отрицательных явлений, наблюдаемых при введении алкоголя (нарушение координации движений, терморегуляции организма). К недостатку способа относится выявленные колебания токсичности ПЭО-400 и ПЭО-1500 [2].
Известен патент РФ №2010569 [3] согласно которому повышение резистентности к переохлаждению, в частности, в воде достигается введением комбинации реланиума 5 мг/кг с оксибутиратом натрия 500 мг/кг за 30 мин до начала охлаждения. Для практического использования рекомендуется совместный прием внутрь 10 мг реланиума с 2 г. оксибутирата натрия непосредственно перед охлаждением. Увеличение резистентности организма к переохлаждению в воде под действием средства происходит за счет повышения устойчивости нервных центров к действию холода; увеличения резистентности сердца к охлаждению; положительного воздействия на терморегуляторные механизмы. К недостатку этого и последующего изобретения относится высокая летальность в процессе саморазогрева.
В патенте РФ №2268049 [4] приведено аналогичное средство, которое было использовано для восстановления температуры тела в постгипотермическом периоде. В патенте приведены предложения для практического применения фармакологического средства, ускоряющего восстановление температуры тела и уменьшающего летальность в постгипотермическом периоде, после окончания охлаждения организма в холодной воде. Это достигается совместным приемом внутрь реланиума с натрия оксибутиратом перед началом охлаждения в воде. Дозы обоих компонентов рецептуры могут варьировать в терапевтическом диапазоне.
Известно изобретение (патент РФ №2270008) [5], которое относится к созданию лекарственных средств для повышения устойчивости человека и животных к гипотермии. Средство содержит никотиновую и глютаминовую кислоты, рибофлавин, аскорбиновую кислоту, убихинон, янтарную кислоту, полиэтиленоксид и воду в определенном соотношении. Предложен также способ повышения устойчивости человека и животных к гипотермии, заключающийся в том, что для активации жизненно важных биохимических процессов за 30 минут до выполнения работ, связанных с гипотермией, и после их окончания вводят вышеназванное средство. Результаты исследований показывают, что среднее время охлаждения по сравнению с контролем у полиэтиленоксида мол.м. 400 лучше в 1,34 раза, у предлагаемого средства в 2,25 раза, при этом среднее время пребывание в воде 4,0±0,5°C составляет для человека 32,1 минут. К недостатку состава средства можно отнести его воздействие только на обеспечение поддержания тепла за счет утилизации АТФ и запасенной энергии, для обеспечения работы жизненно важных органов и нет данных по восстановлению организма в постгипотермическом периоде. Кроме того, недостатком смеси, судя по ее составу, можно считать увеличение потребления кислорода, которое она должна вызывать, что, в конечном счете, приведет к еще более быстрому энергетическому истощению и переохлажденного организма [6].
Задачи, на решение которых направлено изобретение, заключаются в создании нового средства и его применения для повышения устойчивости организма млекопитающих к переохлаждению, где новое средство, способ и применение свободны от вышеперечисленных недостатков, что на сегодняшний день является актуальной проблемой для лечения подобных заболеваний.
Технический результат состоит в том, что заявленное средство позволяет повышать резистентность клеток жизненно важных органов и тканей к переохлаждению.
Сущность изобретения Основным аспектом изобретения является средство для повышения резистентности (устойчивости) организма млекопитающих к переохлаждению. Средство содержит фармацевтическую композицию препаратов, входящих в группу, состоящую из адреноблокатора (1), симпатолитика, истощающего и способствующего разрушению депо катехоламинов (2), антигистаминовый препарат с противорвотным эффектом или без оного (3), ингибитора If-каналов синусного узла (4), дозозависимо воздействующего серотонинергического средства (5), нейролептического средства с гипотермическим эффектом (6), средства, дозозависимо угнетающего синтез или воздействие основных тиреоидных гормонов (7), препарата, содержащего ионы магния или иные ингибиторы NMDA-рецепторов, обеспечивающие предотвращение эксайтотоксичности (8), где композиция дополнительно содержит фармацевтические приемлемый растворитель. При этом фармацевтическая композиция содержит следующее соотношение компонентов, мас. %:
| бета-блокатор пропранолол | 0,78-1,18 мас. % |
| симпатолитик резерпин | 0,015-0,024 мас. % |
| антиангинальный препарат ивабрадин | 0,078-0,12 мас. % |
| антигистаминовый препарат дифенгидрамин | 0,098-0,18 мас. % |
| нейролептический препарат с гипотермным | |
| действием перициазин | 0,025-0,035 мас. % |
| серотонинергическое средство серотонин гидрохлорид | 0,25-0,35 мас. % |
| антитиреоидное средство пропицил | 0,07-0,12 мас. % |
| сульфат магния | 0,07-0,16 мас. % |
| фармацевтически приемлемый растворитель | 98-98,61 мас. % |
Следующий аспект изобретения состоит в том, что адреноблокатор является пропранололом или его эффективным аналогом, в качестве антигистаминного препарата с противорвотным эффектом используют дифенгидрамин, в качестве ингибитора If-каналов синусного узла используют ивабрадин, в качестве дозозависимо воздействующего серотонинергического средства выбирают серотонина гидрохлорид или его эффективный аналог, в качестве нейролептического средства с гипотермическим эффектом выбирают перициазин, в качестве средства, дозозависимо угнетающего синтез или воздействие основных тиреоидных гормонов выбирают пропицил, в качестве средства, обеспечивающего предотвращение эксайтотоксичности вследствие гиперактивации NMDA-рецепторов выбирают сульфат магния или его эффективный аналог.
Другим аспектом изобретения является способ повышения резистентности организма млекопитающих к переохлаждению, по которому терапевтически эффективное количество средства вводят однократно млекопитающему в период перед охлаждением или непосредственно во время охлаждения организма.
Другим аспектом изобретения является применение средства для повышения резистентности организма млекопитающих к переохлаждению.
Перечень фигур
Фиг. 1. Проверка результатов применения средства на животных, погруженных в стандартный модельный наркоз, имитирующий потерю сознания и используемый в качестве контроля к действию пониженной температуры окружающей среды (0°С). Период охлаждения обозначен горизонтальной линией. Действие фармацевтической композиции на: А) температуру ядра тела, Б) частоту сердечных сокращений (ЧСС), В) оксигенацию гемоглобина.
Фиг. 2. Проверка результатов применения средства, выполненного на основе фармацевтической композиции для повышения резистентности организма млекопитающих к действию пониженной температуры окружающей среды (0°С). Период охлаждения обозначен горизонтальной линией. Действие фармацевтической композиции на: А) температуру ядра тела, Б) частоту сердечных сокращений (ЧСС), В) оксигенацию гемоглобина.
Описание изобретения
Разработан подход, направленный на предотвращение чрезмерно быстрой гипотермии биообъекта в условиях низких для выживаемости температур с сохранением основных жизненных показателей на уровне стабильного жизнеобеспечения.
В процессе разработки средства для повышения резистентности организма млекопитающих, в том числе для профилактики или лечения переохлаждения был обнаружен состав средства, который приводил к действительным результатам: по восстановлению частоты сокращения сердца (ЧСС), по поддержанию и последующему восстановлению температуры ядра тела млекопитающего, что подтверждает действенность средства для повышения резистентности организма млекопитающих к переохлаждению. Данный вариант включает, но не ограничивают объема изобретения. К нему относится средство, содержащее фармакологическую композицию из восьми препаратов используемых в терапевтически эффективном количестве.
При этом фармацевтическая композиция, состоящая из восьми препаратов, содержит адреноблокатор, симпатолитик, антигистаминовый препарат, ингибитор If-каналов синусного узла, серотонинергическое средство, нейролептическое средство с гипотермическим эффектом, антитиреоидное средство, препарат, содержащий ионы магния.
Известно, что адренолитическое средство пропранолол входит в группу адреноблокаторов, в состав которой также входят: картеолол, надолол, пенбутолол, пиндолол, пропранолол, соталол, тимолол, карведилол, лабеталол, метопролол, атенолол, эсмолол, ацебуталол и др. В качестве антиангинального препарата, селективно ингибирующего If-каналы синусового узла, используют ивабрадин. Дифенгидрамин входит в группу седативных агентов, блокирующих гистаминовые Н1-рецепторы и холинорецепторы вегетативных нервных узлов. Пропицил используют как антитиреоидное средство, подавляющее систему интратиреоидной пероксидазы. Перициазин используют как препарат с выраженным противорвотным, антихолинергическим, гипотермным и седативным эффектом, умеренно выраженным адренолитическим и экстрапирамидным действием. Основным фармакологическим свойством резерпина является его симпатолитическое действие, обусловленное эффектом истощения катехоламиновых депо с последующим их разрушением за счет инактивирующего действия моноаминоксидазы (МАО). Сульфат магния в составе композиции применяют как неспецифический ингибитор NMDA-рецепторов для предотвращения эксайтотоксичности, спровоцированной гиперактивацией данных рецепторов при переохлаждении. При этом фармацевтическая композиция содержит следующее соотношение компонентов, мас. %:
| бета-блокатор пропранолол | 0,78-1,18 мас. % |
| симпатолитик резерпин | 0,015-0,024 мас. % |
| антиангинальный препарат ивабрадин | 0,078-0,12 мас. % |
| антигистаминовый препарат дифенгидрамин | 0,098-0,18 мас. % |
| нейролептический препарат с гипотермным | |
| действием перициазин | 0,025-0,035 мас. % |
| серотонинергическое средство серотонин гидрохлорид | 0,25-0,35 мас. % |
| антитиреоидное средство пропицил | 0,07-0,12 мас. % |
| сульфат магния | 0,07-0,16 мас. % |
| фармацевтически приемлемый растворитель | 98-98,61 мас. % |
Дозы препаратов, входящих в средство, не выходят за пределы терапевтических диапазонов (Машковский М.Д., 1985, т. 1). Композицию целесообразно вводить млекопитающему непосредственно в качестве профилактического средства или во время экстренного лечения млекопитающего от переохлаждения. В предлагаемом средстве вместо действующих и перечисленных препаратов могут быть использованы его аналоги, как по фармакологической группе, так и по оказываемому эффекту.
Средство проверено в экспериментах на 20 белых клинически здоровых крысах линии Wistar массой 200-250 граммов, распределенных на 2 группы по 10 животных в каждой. Приведенные ниже примеры включают, но не ограничивают варианты использования аналогов действующих веществ, входящих в состав средства.
Примеры.
Пример 1. Использование в качестве контроля животных с модельным наркозом с последующим охлаждением на льду.
В эксперименте использовали крыс линии Wistar, массой 200-250 г, крысы нативные, содержание в стандартных условиях вивария. В течение 0,5 ч регистрируют контрольные физиологические показатели температуры (ректально), частоты сердечных сокращений, частоты дыхания индивидуально у каждого животного с помощью прибора MouseOxPlus. Проводят проверку действия модельного наркоза в качестве контроля к переохлаждению.
До охлаждения проводят внутримышечные инъекции золетила (13 мг/кг) и рометара (7 мг/кг). Проводят контроль изменения частоты сердечных сокращений (ЧСС), температуры тела млекопитающего, фиксируют данные по оксигенацию гемоглобина после введения лекарственных веществ. После этого крысу укладывают на лед.
На фиг. 1 приводятся результаты по охлаждению животного с модельным наркозом.
Было обнаружено, что при охлаждении животных, находящихся в модельном наркозе падение температуры было стремительным (фиг. 1А) и без прекращения охлаждения, т.е. убирания со льда, животные погибали. Снижение ЧСС также носило плавный характер и происходило одновременно со снижением температуры (фиг. 1Б). Показатели сатурации были неровными (фиг. 1В).
Пример 2. Проводят проверку действия фармкомпозиции для повышения резистентности организма млекопитающих к переохлаждению. Приготавливают раствор фармкомпозиции в объеме 5 мл, содержащей смесь из восьми препаратов при соотношении компонентов: Пропранолол - 0,983 мас. %, Ивабрадин - 0,098 мас. %, Дифенгидрамин - 0,118 мас. %, Резерпин - 0,0197 мас. %, Серотонина гидрохлорид - 0,295 мас. %, Перициазин - 0,029 мас. %, Пропицил - 0,098 мас. %, Магния сульфат - 0,098 мас. %. В качестве фармацевтически приемлемого растворителя используют физ. раствор, раствор Рингера и другие сбалансированные солевые растворы.
До охлаждения проводят внутрибрюшинное однократное введение 1 мл средства. После этого крысу укладывают на лед. Проводят контроль изменения частоты сердечных сокращений (ЧСС), температуры тела млекопитающего, фиксируют данные по оксигенацию гемоглобина после введения лекарственных веществ.
На фиг. 2 приведены результаты проверки воздействия фармакологического средства, содержащего композицию из восьми препаратов. На фиг. 2Б приведена диаграмма изменения ЧСС после введения лекарственных веществ. Сразу после введения наблюдается быстрое снижение ЧСС приблизительно в 3-4 раза (с 400-420 до 100-120 ударов/мин) после чего величина ЧСС поддерживается на постоянном уровне около 100-120 ударов/мин в течение всего времени регистрации, как во время, так и после охлаждения: около 7-ми часов. На фиг. 2А приведена диаграмма изменения температуры ядра тела после введения лекарственных веществ при помещении крысы на лед. Измерения проводились одновременно с регистрацией ЧСС, представленной на фиг. 2Б. Плавное снижение температуры до 18°C-19°C в течение 3 ч. происходит на фоне значительно сниженной ЧСС. После охлаждения примерно до 18°C, животное убирали со льда и оставляли при комнатной температуре в режиме саморазогрева. Охлаждение не оказывало влияние на ЧСС и она оставалась на значительно сниженном стационарном уровне в течение 2 часов, также как и температура и после того как лед был убран, при этом температура у животного восстанавливалась очень медленно. На фиг. 2В приведены данные по оксигенацию гемоглобина после введения лекарственных веществ. Из рисунка видно, что по сравнению с модельным наркозом сатурация носила стабильный характер. Представлены усредненные данные по экспериментам на ≥5 животных.
Результаты проверки средства показывают, что в лечении млекопитающих от переохлаждения, при введении в состояние гипотермии, и при выходе из состояния гипотермии были получены результаты, указывающие на то, что по сравнению с контрольными крысами, вводимая однократно смесь, состоящая из восьми препаратов, способствует выживанию получивших данную смесь животных.
Промышленная применимость
Средство, приведенное в изобретении, позволяет млекопитающим переносить многочасовое охлаждение за счет перевода организма в стационарное состояние со сниженной ЧСС и температурой. Разработанное средство характеризуется тем, что после удаления источника охлаждения происходит саморазогрев организма с постепенным возвратом в нормотермное состояние. Общим для изобретения является использование адаптационных возможностей организма к критическим воздействиям за счет эндогенных механизмов терморегуляции. В экспериментах установлено, что разработанное средство статистически достоверно повышает резистентность организма млекопитающих к переохлаждению при введении в состояние гипотермии, и при выходе из состояния гипотермии.
Источники информации
1. Мазалов В.К. и др. СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ МЛЕКОПИТАЮЩИХ К ОБЩЕМУ ОХЛАЖДЕНИЮ. Патент РФ №1520688 (27.08.1995).
2. Гучок Г.М. Сравнительное исследование токсичности этиленгликоля, ПЭО-400 и ПЭО-1500 для крыс и мышей в раннем постнатальном онтогенезе. // Криобиология и криомедицина. 1980. 7. С. 34-39.
3. Бажанов Н.О. и др. СРЕДСТВО, ПОВЫШАЮЩЕЕ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОРГАНИЗМА К ГИПОТЕРМИИ. Патент РФ №2010569 (15.04.1994).
4. Бажанов Н.О. СРЕДСТВО, ПОВЫШАЮЩЕЕ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ ОРГАНИЗМА В ПОСТГИПОТЕРМИЧЕСКОМ ПЕРИОДЕ. Патент РФ №2268049 (20.01.2006).
5. Доронин Ю. К. и др. СРЕДСТВО И СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ ЧЕЛОВЕКА И ЖИВОТНЫХ К ГИПОТЕРМИИ АКТИВИРОВАНИЕМ ЖИЗНЕННО ВАЖНЫХ БИОХИМИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ. Патент РФ №2270008 (20.02.2006).
6. Кулинский В.И., Ольховский И.А. Две адапатционные стратегии в неблагоприятных условиях - резистентная и толерантная. Роль гормонов и рецепторов. // Успехи современной биологии. 1992. Т. 112 (5-6). С. 697-715.
1. Средство для повышения устойчивости организма млекопитающих к переохлаждению, характеризующееся тем, что оно содержит фармацевтическую композицию препаратов, содержащую следующее соотношение компонентов, мас. %:
| бета-блокатор пропранолол | 0,78-1,18 мас. % |
| симпатолитик резерпин | 0,015-0,024 мас. % |
| антиангинальный препарат ивабрадин | 0,078-0,12 мас. % |
| антигистаминовый препарат дифенгидрамин | 0,098-0,18 мас. % |
| нейролептический препарат с гипотермным | |
| действием перициазин | 0,025-0,035 мас. % |
| серотонинергическое средство серотонин гидрохлорид | 0,25-0,35 мас. % |
| антитиреоидное средство пропицил | 0,07-0,12 мас. % |
| сульфат магния | 0,07-0,16 мас. % |
| фармацевтически приемлемый растворитель | 98-98,61 мас. % |
2. Способ повышения устойчивости организма млекопитающих к переохлаждению характеризующийся тем, что терапевтически эффективное количество средства по п. 1 вводят млекопитающему однократно.
3. Применение средства п. 1 в качестве препарата для повышения устойчивости организма млекопитающих к переохлаждению.
