Препарат парвовируса для лечения опухолей

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к фармацевтической композиции для лечения опухолей. Фармацевтическая композиция для лечения опухолей, содержащая: (а) по меньшей мере 2х10⁹ БОЕ/мл парвовируса H1 (H-1PV) или родственного парвовируса грызунов, выбранного из группы, состоящей из вируса LuIII, мелкого вируса мышей (MMV), парвовируса мышей (MPV), мелкого вируса крыс (RMV), парвовируса крыс или вируса крыс (RV), и (б) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий 40 – 50% йодиксанола, вес/объем, 0,7 – 0,9 ммоль CaCl₂ x 2 H₂O, 50 – 60 ммоль NaCl, 0,9 – 1,2 ммоль KCl, 0,7 – 0,95 мг/мл трометамина и 0,05 – 0,15 мг/мл натрия кальция эдетата. Вышеописанная композиция обладает стабильностью при хранении. 4 з.п. ф-лы., 8 ил., 1 табл., 5 пр.

 

Настоящее изобретение относится к препарату парвовируса, в котором парвовирус присутствует в концентрации по меньшей мере 1×10⁹ БОЕ/мл в фармацевтически приемлемом носителе, содержащем 40-50% йодиксанола (вес/объем), 0,7-0,9 ммоль CaCl₂×2Н₂О, 50-60 ммоль NaCl, 0,9-1,2 ммоль KCl, 0,7-0,95 мг/мл трометамина (Tromethamine) и 0,05-0,15 мг/мл натрия кальция эдетата. Вязкость носителя составляет от 3 до 5 мПа⋅с при температуре от 37°С до 40°С.

Рак является второй по частоте причиной смертей в мире. По существующим оценкам, у половины мужчин и трети женщин в течение жизни будет диагностирована какая-либо форма рака. Более того, поскольку рак преимущественно является болезнью старения,, предсказывают (оценки ВОЗ 2008 г), что в связи с ростом относительного количества пожилых людей с 2007 до 2030 года количество смертей о рака в мире возрастет на 45% (с 7,9 миллионов до 11,5 миллионов смертей). Вместе с тем рак является наиболее дорогостоящим заболеванием. Согласно последним оценкам Национального института рака (National Cancer Institute), суммарные экономические затраты, связанные с раком, составили в 2007 году 226,8 миллиарда долларов, и, если не будут разработаны более эффективные средства, предотвращения раннего выявления и более эффективные средства лечения, ожидается, что это, и так уже тяжелое экономическое бремя, будет и дальше расти в течение следующих двух десятилетий. Несмотря на значительный прогресс в предотвращении, выявлении, диагностике и лечении многих форм рака, о чем свидетельствует увеличение в течение последних тридцати лет процентной доли пятилетней выживаемости при раке в США и Европе, до сих пор не найдены эффективные подходы к лечению некоторых типов опухолей, таких как опухоли поджелудочной железы, печени, легких, мозга, что требует разработки новых вариантов терапии. Быстро развивается такой многообещающий инструмент борьбы с раком как онколитические вирусы, которые уничножают опухолевые клетки на основе слабых мест, специфичных для рака, в то же время не воздействуют на нормальные клетки. В настоящее время не менее двенадцати различных онколитических вирусов проходят фазы I-III клинических испытаний в отношении различных злокачественных заболеваний в качестве отдельного средства или в комбинации с другими противораковыми агентами. Среди них в настоящее время оценивают безопасность и первые показатели эффективности штамма H-1PV онколитического парвовируса крыс в клинических исследованиях фаз I/IIa на пациентах с рецидивирующей полиморфной глиобластомой (GMB - glioblastoma multiforme) (Geletneky et al, BMC Cancer 2012, стр. 99).

H-1PV представляет собой маленькую (диаметром примерно 25 нм) безоболочечную икосаэдтическую частицу, содержащую одноцепочечную геномную ДНК размером 5,1 kb. Структура гнома H-1PV состоит из две транскрипционных единиц под контролем двух промоторов: раннего промотора Р4 и позднего промотора Р38. Р4 регулирует экспрессию гена, кодирующего неструктурные (NS) белки NS1 и NS2, а Р38 - экспрессию гена, кодирующего белки капсида (VP) VP1, VP2 и VP3. Вирус размножается преимущественно в быстро делящихся опухолевых клетках. Такая онкоселективность основана не на лучшем поглощении вируса раковыми клетками, а является следствием того, что для раковых клеток характерна гиперэкспрессия факторов, необходимых для репликации вирусной ДНК, таких как циклин A, E2F или CREB/ATF. Недавно была описана терапия рака с применением парвовируса и его комбинаций с химиотерапией или ингибитором дсацетилаз гистонов (HDAC) (международные заявки WO 2009/083232 A1; WO 2011/113600 А1). При локальной терапии опухолей путем инъекции или инфузии онколитического вируса часто возникает проблема прицельной доставки инокулята без потери активного вещества. В частности, из-за того, что при использовании катетера возникает зона пониженного сопротивления вдоль по пути катетера через ткань, распределение происходит вдоль канала, по которому проходит катетер. Это явление также известно как обратный ток. Соответственно, задачей настоящего изобретения состоит в том, чтобы обеспечить фармацевтическую композицию, лишенную такого недостатка как противоток при введении и стабильную при хранении в течение по меньшей мере 12 месяцев, даже в условиях повышенной температуры в течение нескольких дней и ультрафиолетового облучения.

Согласно изобретению, объекты, охарактеризованные в формуле изобретения, решают эту задачу.

Соответственно, согласно настоящему изобретению предложена фармацевтическая композиция, включающая: (а) парвовирус H1 (H-1PV) или родственный парвовирус грызунов, выбранный из группы, состоящей из вируса LuIII, мелкого вируса мышей (MMV - Mouse minute virus), парвовируса мышей (MPV - Mouse parvovirus), мелкого вируса крыс (RMV - Rat minute virus), парвовируса крыс или вируса крыс (RV - Rat virus) в концентрации по меньшей мере 1×10⁹ БОЕ/мл и (б) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий 40-50% йодиксанола (вес/объем), 0,7-0,9 ммоль CaCl₂×2H₂O, 50-60 ммоль NaCl, 0,9-1,2 ммоль KCl, 0,7-0,95 мг/мл трометамина и 0,05-0,15 мг/мл натрия кальция эдетата. Фармацевтически приемлемый носитель имеет вязкость от 3 до 5 мПа⋅с при температуре от 37°С до 40°С.

Краткое описание чертежей

Фигура 1: H-1PV в 48% Visipaque/раствор Рингера демонстрирует прицельное распределения инокулята вокруг кончика катетера без признаков случайной диффузии.

Фигура 2: H-1PV стабилен в течение более 24 месяцев в препарате 48% Visipaque/раствор Рингера

Фигура 3: Электронные микрофотографии, демонстрирующие отдельные частицы H-1PV в препарате 48% Visipaque/раствор Рингера

a) H-1PV образец 1, б) H-1PV образец 2

Фигура 4: Дизайн клинических исследований

Фигура 5: Концентрация вируса в комбинации йодиксанол/раствор Рингера [73,62% Visipaque™ 320 (GE Healthcare), смешанного с 26,38%» раствора Рингера]

Фигура 6: Воздействие повышенной температуры на H-1PV в комбинации йодиксанол/раствор Рингера

Фигура 7: Воздействие ультафиолета на H-1PV в двух вариантах комбинации йодиксанол/раствор Рингера (А, В) и в трис-ЭДТА буфере (С)

Таким образом, настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую: (а) парвовирус H1 (H-1PV) или родственный парвовирус грызунов, выбранный из группы, состоящей из вируса LuIII, мелкого вируса мышей (MMV), парвовируса мышей (MPV), мелкого вируса крыс (RMV), парвовируса крыс или вируса крыс (RV) в концентрации по меньшей мере 1×10⁹ БОЕ/мл и (б) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий 40-50% йодиксанола (вес/объем), 0,7-0,9 ммоль CaCl₂×2H₂O, 50-60 ммоль NaCl, 0,9-1,2 ммоль KCl, 0,7-0,95 мг/мл трометамина и 0,05-0,15 мг/мл натрия кальция эдетата.

Термин «парвовирус» в том смысле, как он употребляется в данном документе, включает вирус дикого типа или его модифицированные производные, способные к репликации. Соответствующие модифицированные парвовирусы, пригодные для активного продуцирования указанных парвовирусов, которые могут применяться в терапии, можно легко идентифицировать при соответствующей квалификации, на основании сведений, изложенных в данном документе.

В соответствии с формулой данного изобретения, парвовирус в составе композиции включает парвовирус H1 (H1PV) или родственный парвовирус, такой как LuIII, мелкий вирус мышей (MMV), парвовирус мышей (MPV), мелкий вирус крыс (RMV), парвовирус крыс (RPV) или вирус крыс (RV).

В соответствии с изобретением, парвовирус присутствует в эффективной дозе в концентрации равной или большей 1×10⁹ БОЕ/мл и в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем, содержащим 40-50% йодиксанола (вес/объем), 0,7-0,9 ммоль CaCl₂×2H₂O, 50-60 ммоль NaCl, 0,9-1,2 ммоль KCl, 0,7-0,95 мг/мл трометамина и 0,05-0,15 мг/мл натрия кальция эдетата. В частном случае носитель содержит 45-49% йодиксанола (вес/объем), 0,75-0,85 ммоль CaCl₂×2H₂O, 50-55 ммоль NaCl, 0,95-1,1 ммоль KCl, 0,8-0,9 мг/мл трометамина и 0,05-0,1 мг/мл натрия кальция эдетата. В одном из наиболее предпочтительных варианов реализации носитель содержит 48% йодиксанола (вес/объем); 0,81 ммоль CaCl₂×2H₂O, 52,80 ммоль NaCl, 1,06 ммоль KCl, 0,88 мг/мл трометамина и 0,07 мг/мл натрия кальция эдетата.

Подразумевается, что «Фармацевтически приемлемый» включает любой носитель, не влияющий на биологическую активность активных ингредиентов и не токсичный для пациента, которому его вводят. В дополнение к определенному выше составу носителя, фармацевтический препарат согласно настоящему изобретению, может содержать дополнительные фармацевтические носители. Примеры подхожящих фармацевтических переносчиков хорошо известны в технике и включают в себя маннитол, сорбитол, глюкозу или сахарозу. Такие переносчики могут быть получены обычными способами. «Эффективная доза» относится к количествам активных ингредиентов, которые достаточны, чтобы повлиять на течение и тяжесть болезни, приводя к ослаблению или ремиссии такой патологии. «Эффективная доза», подходящая для лечения и/или предотвращения этих болезней или нарушений может быть определена методами, известными специалисту в данной области. Дополнительно, чтобы обеспечить стабильность препарата при хранении, активный ингредиент, т.е. парвовирус, должен присутствовать в концентрации по меньшей мере 1×10⁹ БОЕ/мл, в конкретных случаях, по меньшей мере 5×10⁹ БОЕ/мл, 1×10¹⁰ БОЕ/мл или 1×10¹¹ БОЕ/мл. В предпочтительном варианте реализации концентрация находится в пределах от 1×10⁹ БОЕ/мл до 1×10¹⁰ БОЕ/мл, конкретно: 1×, 2×, 3×, 4×, 5×, 6×, 7×, 8× или 9×10⁹ БОЕ/мл. В другом предпочтительном варианте реализации концентрация находится в пределах от 1×10¹⁰ БОЕ/мл до 1×10¹¹ БОЕ/мл, в частности: 1×, 2×, 3×, 4×, 5×, 6×, 7×, 8× или 9×10¹⁰ БОЕ/мл. Согласно настоящему изобретению, носитель имеет вязкость от 3,5 до 4,5 мПа⋅с при температуре от 37 до 40°С. Более предпочтителен носитель, имеющий вязкость от 4 до 5 мПа⋅с. Еще более предпочтителен носитель, имеющий вязкость примерно 4,5 мПа⋅с. Такая вязкость близка к вязкости крови (Rosenson et al., Clinical Chemistry, 42:8, стр. 1189-1195 (1996); http:www.ucke.de/christian/physik/medprak/Viskositaet.pdf: странице 84, Ьаблица 2).

Согласно предпочтительному варианту реализации настоящего изобретения носитель представляет собой йодиксанол в растворе Рингера, полученный путем смешивания 73,62% VISIPAQUE™ 320 (GE Healthcare) с 26,38% раствора Рингера. VISIPAQUE™ 320 (GE Healthcare) содержит 652 мг/мл йодиксанола (соответствует 65,2% йодиксанола); таким образом, концентрация йодиксанола после смешивания с раствором Рингера составляет 48%). «Йодиксанол» является синонимом "Visipaque" (раствор для инъекций для клинического применения) или "Iodixanolum" (для применения в лабораторной практике). Его структурная формула:

Наименование в соответствии с номенклатурой ИЮПАК: 5-[ацетил-[3-[N-ацетил-3,5-бис(2,3-дигидроксипропилкарбомоил)2,4,6,-трийоданилино]2-гидроксипронил]амино]-1-N,3,N-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трийодбензен-1,3-дикарбоксиамид.

Регистрационный номер CAS (Химической реферативной службы) 92339-11-2. Также он является известным контрастирующим агентом, применяемым при компьютерной томографии.

Введение можно осуществлять различными способами, например, путем внутривенного, внутрибрюшинного, подкожного, внутримышечного, интрадермального или внутриопухолевого введения. Путь введения, конечно, зависит от вида терапии и вида соединений, содержащихся в фармацевтической композиции. Предпочтительными путями введения являются внутриопухолевое введение или внутривенное введение. Специалист сможет легко определить режим дозирования, лечащий врач сможет сделать это на основании данных о пациенте, наблюдений и других клинических факторов, включающих, например, размер, площадь поверхности тела, возраст, пол пациента, конкретный парвовирус, клетка и т.д. для введения, время и путь введения, тип и характеристики опухоли, общее состояние здоровья пациента и другие лекарственные средства, назначенные пациенту.

Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению пригодна для лечения любого типа опухоли, в частности (но не исключительно) опухоли мозга (например, глиомы и глиобластомы), карциномы поджелудочной железы, карциномы шейки матки, рака легких, рака головы и шеи, рака груди или рака толстого кишечника.

Пациенты, которых можно лечить фармацевтической композицией согласно настоящему изобретению, включают людей, а также животных, отличных от человека. Примеры последних включают, без ограничения, таких животных как коровы, овцы, свиньи, лошади, собаки и кошки.

На основании клинических данных, показанных в Примере 1, можно сделать вывод, что применение 48% Visipaque дает возможность: (i) точной визуализации инокулята методом компьютерной томографии (КТ); (ii) точной локальной доставки препарата благодаря высокой вязкости и (iii) отсутствия обратного тока даже в случае ручной инъекции без применения и длительной или автоматизированной инъекции, такой как доставка с конвекцией (CED - convection enhanced delivery). Скорее всего, такие положительные характеристики распределения обусловлены отличиям физических свойств 48% Visipaque от водных растворов. 48% Visipaque в растворе Рингера с показателем преломления 1,41 имеет при 37°С вязкость 4 мПа⋅с, в то время как вязкость воды при 37°С составляет примерно 0,7 мПа⋅с. Вязкость крови человека при 37°С составляет 3-5 мПа⋅с. Соответственно, инъекционный препарат близок к крови, т.е. значение его вязкости близко к физиологическому значению вязкости крови.

Авторы изобретения обнаружили, что концентрация вируса влияет на стабильность препарата (Фиг. 5). Чтобы обеспечить стабильность при хранении в течение по меньшей мере 12 месяцев, концентрация вируса должна быть по меньшей мере 1×10⁹ БОЕ/мл в раствора 48% йодиксанол/раствор Рингера, полученной путем смешивания 73,62%) (вес/объем) VISIPAQUE™ 320 (GE Healthcare) с 26,30% (вес/объем) раствора Рингера. Полученный раствор содержит 48% йодиксанола (вес/объем) 0,81 ммоль CaCl₂×2H₂O, 52,80 ммоль NaCl, 1,06 ммоль KCl, 0,88 мг/мл трометамина [трис(гидроксиметил)аминометан] и 0,07 мг/мл натрия кальция эдетата.

В предпочтительном варианте реализации стабильность при хранении составляет по меньшей мере 18 месяцев, по меньшей мере 24 месяца, по меньшей мере 30 месяцев, по меньшей мере 36 месяцев или даже до 48 месяцев.

Как можно заключить из Фиг, 6 и Фиг, 7, вирус в 48% растворе йодиксанола в растворе Рингера сохраняет активность в течение нескольких дней даже после подъема температуры и УФ-облучения.

Приведенные ниже примеры дают более детальное объяснение сущности изобретения.

Пример 1

48% раствор Visipaque препятствует обратному току

Было инициировано клиническое исследование фазы I/IIa еа 18 пациентах, страдающих рецидивирующими злокачественными глиомами. Целью данных исследований было определение безопасности, биораспределения, максимально переносимой доза и показателей противоопухолевой активности парвовируса Н-1. Согласно данным доклинических исследований, применение вируса может включать не только внутриопухолевое введение, но и внутривенное введение.

Введение парвовируса Н-1 (препарат, соответствующий стандарту Надлежащей производственной практики (GMP) в 48% Visipaque проводили в двух группах пациентов: группа I, состоящая из 12 пациентов и группа II, состоящая из 6 пациентов. Пути введения в группе 1 и группе 2 различались (Фигура 4).

В пределах каждой из групп использовали идентичный режим введения, но, при отсутствии событий, ограничивающих величину дозы, дозу будут увеличивать. В группе 1 было четыре уровня доз вводимого парвовируса Н-1 (называемого также «исследуемый лекарственный продукт», ИЛП (IMP), в группе II таких уровней было 2 (Таблица 1).

В группе 1 пациенты получали ИЛП в первый день путем инъекции в опухоль под контролем компьютерной томографии. В этот день пациенту путем инъекции вводили 50% от общей предполагаемой дозы. По окончании периода наблюдения продолжительностью 9 дней, на 10-й день производили резекцию опухоли. После удаления опухоли вторую половину дозы вводили в стенки образовавшейся после резекции полости путем обычной инъекции. Этой инъекцией во время хирургического вмешательства завершали введение ИЛП и не осуществляли дополнительного введения вируса.

В группе 2 первое введение ИЛП осуществляли внутривенным путем. Пациенты получали 50% от предполагаемой дозы путем 5 инфузий с первого по пятый день, каждая из инфузий содержала 10% от общей дозы. После последней инфузий на пятый день следовал период наблюдения до девятого дня, и на 10-й день осуществляли резекцию опухоли, аналогично группе 1. По аналогии с группой 1, пациенты получали вторую половину дозы путем инъекции в ткань, окружающую образовавшуюся после удаления опухоли полость; больше в ходе исследования пациентам не делали инъекций вируса.

После резекции опухоли вирус повторно вводили в стенки полости от опухоли.

Как показано на Фигуре 1, при применении в качестве носителя 48%) Visipaque (VISIPAQUE™ 320, GE Healthcare, Германия) и раствора Рингера (IDT Biologika GmbH, Germany), у всех 12 пациентов не наблюдалось сколько-нибудь значительного обратного тока. КТ делали не позже, чем через 30 минут после завершения инъекции. Объем инъекции составлял от 0,5 до 1,2 мл на один введенный катетер (трем пациентам вводили 2 катетера). Инъекцию осуществляли вручную в течение 30 минут на один катетер; во всех случаях применяли стандартные катетеры для пункции кисты с одним отверстием на конце. На Фигуре 1 видно также прицельное распределение инокулята вокруг кончика катетера без следов случайной диффузии.

Эти клинические данные позволяют сделать вывод, что применение 48% Visipaque дае возможности: (i) точной визуализации инокулята методом компьютерной томографии (КТ); (ii) точной местной доставки препарата за счет высокой вязкости и (iii) отсутствия обратного тока даже в случае ручной инъекции без применения и длительной или автоматизированной инъекции, такой как доставка с конвекцией. Скорее всего, такие благоприятные характеристики распределения обусловлены отличием физических свойств 48% Visipaque от водных растворов. 48% Visipaque в растворе Рингера с показателем преломления 1,41 имеет при 37°С вязкость 4 мПа⋅с, в то время как вязкость воды при 37°С составляет примерно 0,7 мПа⋅с. Вязкость крови человека при 37°С составляет 3-5 мПа⋅с. Следовательно, состав для инъекции близок к крови, т.е., имеет то же значение (параметра вязкости), что и физиологическое его значение для крови.

Пример 2

Стабильность

Активность вируса H-1PV, измеряемая в тесте образования бляшек, сохраняется в течение более 2 лет (при хранении при температуре -20°С или при температуре меньшей или равной -60°С в 48% растворе йодиксанола/раствор Рингера, полученном путем смешивания 73,62% (вес/объем) VISIPAQUE™ 320 (GE Healthcare) с 26,30% (вес/объем) раствора Рингера (Delta Select GmbH, Dreieich, Германия). Тест образования бляшек проводили по существу как описано Tattersall и Bratton (J. Virol. 46 (1983), 944-55). Монослойную культуру клеток линии NB-324K выращивали в минимальной среде Игла (MEM), содержащей 5% фетальной бычьей сыворотки (ФБС), 100 мкг/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 2 мМ L-глутамина. Клетки, достигшие 60% конфлюэнтного монослоя инфицировали серийными разведениями H-1PV и инкубировали в течение 1 часа при 37°С. Затем инокулят замещали агаровой аппликацией (1,7% агар на среде MEM с 5% ФБС). На четвертый день после инфицирования живые клетки окрашивали в течение 18-24 часов путем нанесения агара (Becton Dickinson, Germany), c 0,02% раствор нейтрального красного (Sigma, Germany). Чашки с культурой инкубировали при 37°С в атмосфере 5% СО₂. Подсчет бляшкообразующих единиц осуществляли на пятый день после инфицирования па световом коробе, их концентрацию выражали в БОЕ/мл.

Результаты показаны на Фиг. 5. Можно видеть, что при концентрациях, меньших 1×10⁸ БОЕ/мл, вирус более нестабилен в 48% растворе йодиксанола в растворе Рингера, чем при больших концентрациях порядка 1×10⁹ или 1×10¹⁰ БОЕ/мл.

Пример 3

Отдельные частицы H-1PV: Изображения, полученные методом электронной микрофотографии показывают, что вирус в препарате согласно изобретению не происходит агрегации вируса H-1PV

Для качественного анализа лекарственного средства, содержащего вирус, были сделаны электронные микрофотографии. Для этого 5 мкл суспензии вируса наносили на готовую для использования медную сетку с углеродным покрытием, и инкубировали в течение 2 минут. Затем сетку промывали 5 мкл высокоочищенной воды и в течение 30 сек. покрывали 2% уранилацетатом. Капли снимали с сетки фильтровальной бумагой Whatman 50; сетку сушили в течение приблизительно 1 минуты. Фотографии делали при помощи трансмиссионного электронного микроскопа производства Zeiss при 20100-кратном увеличении.

Пример 4

Влияние повышения температуры на H-1PV в растворе 48% Visipaque/раствор

Рингера

Параметры:

Объем: 100 мкл

Посуда: 500 мкл пробирка с винтовой крышкой

Температура: 37°С, 50°С

Время инкубации: 1 час, 4 часа

Дальнейшее хранение: 4°С

Концентрация H1-PV: 2,3×10¹⁰ БОЕ/мл:

Результаты показаны на Фиг, 6.

На Фиг. 6 показано, что вирус остается живым после 1-4-х часовой обработки при 37°С и 50°С. Вирус H-1PV стабилен даже после 4 недель хранения при 4°С.

Пример 5

Влияние УФ облучения на вирус H-1PV в 48% растворе Visipaque/Рингер

Деактивация ультрафиолетом вируса H-1PV в смеси Visipaque/Рингер (48% йодиксанола) и в смеси Visipaque/Рингер (24% йодиксанола)

Возможный перевод обозначений: Vg - суммарная ДНК в суспензии вируса, отнесенная к массе вирусного генома; РР - суммарный белок в суспензии вируса, отнесенный к массе вирусного капсида.

Опыт №1 (УФ 254 им; 0,35 мВт/см²)

Опыт №2 (УФ 254 нм; 0,35 мВт/см²)

Опыт №3 (УФ 254 нм; 0,35 мВт/см²)

Опыт №4 (УФ 254 нм; 2,4 мВт/см²)

Результаты показаны на Фиг. 7. В смеси Visipaque(48% йодиксанол)/р-р Рингера вирус H-1PV защищен от действия ультрафиолета. В смеси Visipaque(24% йодиксанол)/р-р Рингера после обработки ультрафиолетом обнаруживается полулогарифмическое падение стабильности вируса. В водном препарате (трис-ЭДТА буфер, обозначенный как VTE) вирус мог быть инактивирован.

1. Фармацевтическая композиция для лечения опухолей, содержащая: (а) по меньшей мере 2×10⁹ БОЕ/мл парвовируса H1 (H-1PV) или родственного парвовируса грызунов, выбранного из группы, состоящей из вируса LuIII, мелкого вируса мышей (MMV), парвовируса мышей (MPV), мелкого вируса крыс (RMV), парвовируса крыс или вируса крыс (RV), и (б) фармацевтически приемлемый носитель, содержащий 40-50% йодиксанола, вес/объем, 0,7-0,9 ммоль CaCl₂×2H₂O, 50-60 ммоль NaCl, 0,9-1,2 ммоль KCl, 0,7-0,95 мг/мл трометамина и 0,05-0,15 мг/мл натрия кальция эдетата.

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, где фармацевтически приемлемый носитель содержит 48% йодиксанола, вес/объем, 0,81 ммоль CaCl₂×2H₂O; 52,80 ммоль NaCl; 1,06 ммоль KCl; 0,88 мг/мл трометамина и 0,07 мг/мл натрия кальция эдетата.

3. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, в которой концентрация парвовируса находится в пределах от 2×10⁹ БОЕ/мл до 1×10¹⁰ БОЕ/мл.

4. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-3 для применения в лечении опухоли путем внутриопухолевых или внутривенных инъекций.

5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-3 для применения в соответствии с п. 4, причем опухоль представляет собой опухоль мозга, карциному поджелудочной железы, карциному шейки матки, рак легких, рак головы и шеи, рак груди или рак толстого кишечника.