Средство, обладающее цитотоксической активностью

Изобретение относится к области органической химии и фармации. Предложено применение 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она в качестве средства, обладающего цитотоксической активностью. Технический результат: соединение подавляло метаболическую активность клеточных линий почки эмбрионов свиньи, несущих онковирусы А и С (SPEV), глиомы крысы (С6), раковой опухоли шейки матки человека (HeLa). Изобретение может быть перспективно в медицинской практике для лечения раковых заболеваний и в получении средств, обладающих цитотоксическим действием, которые могут быть использованы в качестве активных компонентов противоопухолевых лекарственных средств, в том числе против лейкемии. 3 ил., 1 табл.

 

Изобретение относится к области органической химии, а именно - к средствам, обладающим цитотоксической активностью, в частности - способностью подавлять метаболическую активность клеточных линий почки эмбрионов свиньи, несущих онковирусы А и С (SPEV), глиомы крысы (С6), раковой опухоли шейки матки человека (HeLa), и может быть перспективно в медицинской практике для лечения раковых заболеваний.

Известны соединения, проявляющие цитотоксическую активность по отношению ко многим видам опухолевых клеток.

К таким соединениям относятся алкалоид ряда комбретастатин A-4 и его производные, а также 4-арилкумарины и другие. Однако, каждый из них имеет недостатки.

Недостатком комбретастатина A-4 (см., например, патент США № 4996237, по кл. МПК С07С 43/23, C07D 317/64, А61К 31/075, опубл.26.02.1991) и его производных (см. заявку США № 2009186857, по кл. МПК A61K 31/66, опубл. 23.07.2009) является низкая эффективность за счет нежелательных побочных эффектов при применении in vivo вследствие их самопроизвольного превращения из активной цис-формы в неактивную транс-форму (Curr. Opin. Pharmacol., 2001, 1,370).

4-Aрилкумарины проявляют низкую антипролиферацинную и апоптозиндуцирующую активность по сравнению с производными комбретастатина и колхицина (J. Med. Chem. 2003, 46, 5437; J. Med. Chem. 2011, 54, 3153).

Известно также соединение диэтил (3,5-бис(арилиден)-4-оксопиперидин-1-ил)(арил) метилфосфонатa формулы

где R1=Н, F, ОМе; R2=Н, F,

обладающее антипролиферативными свойствами и низкой острой токсичностью для лечения онкологических заболеваний, включая рабдомиосаркому, карциному кишечника, аденокарциному молочной железы (см. патент РФ №2603194 по кл. МПК C07F 9/59, опуб.27.11.2016).

Известны также халконы, проявляющие цитотоксические свойства (см. Shih H. et al. Rational design, synthesis and structure-activity relationships of antitumor (E)-2-benzylidene-1-tetralones and (E)-2-benzylidene-1-indanones //Bioorganic & medicinal chemistry letters. - 2000. - Т. 10. - №. 5. - С. 487-490). Анализ противоопухолевой активности 2-(R-бензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-онов, проведенный на клеточной линии Jukart (Т-лимфобластная лейкемия человека) показал, что значения концентрации полумаксимального ингибирования IC50 зависят от характера радикала в ароматическом кольце. Так, соединения формулы

где R представляет собой 3’-OCH3, или 3’-Cl, или 3’-NO2, или 3’-CH3, или 3’,5’-OCH3, или 3’,5’-CH3, или 3’,5’-Cl, или 3’,5’-NO2, показали хорошие результаты. Значение IC50 колебалось в пределах от 2 до 19 мМ (в зависимости от радикала).

Кроме этого, противоопухолевая активность соединений 2-(R-бензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-онов, где R представляет собой 3’-OCH3, или 3’-Cl, или 3’-NO2, или 3’-CH3, 4’-OCH3 была исследована и на других клеточных линиях - на лейкозных мышиных клетках Р388 (лимфоидная неоплазма мышей) и L 1210 (лимфатическая лейкемия), а также на человеческих клетках Molt 4/C8 и CEM T-лимфоцитах (Т-лимфобластная лейкемия).

Известны также замещенные соединения (см. патент РФ №2203883 по кл. МПК С07С49/84, опуб. 10.05.2003) общей формулы

где Ar - фенил, который может быть незамещенным, либо замещенным одним, двумя либо тремя заместителями, независимо выбираемыми из числа Cl, Br, F, -OMe, NO2, CF3, C1-4 низшего алкила, -NMe2, -NEt2, -SCH3, -NHCOCH3; 2-тиенил, 2-фурил; 3-пиридил; 4-пиридил либо 3-индолил; R - -OCH2R1, где R1 выбирают из числа -СН= СМе2, -СМе=СН2, -C≡CH; при условии, что в случае, когда Ar представляет собой фенил, С4-алкилфенил, 4-метоксифенил или 3,4-диметоксифенил, R может быть любым за исключением 3-метил-2-бутенилоксигруппы.

Упомянутые соединения обладают антипролиферативной активностью как в отношении чувствительных раковых клеток, так и клеток, устойчивых к традиционным химиотерапевтическим лекарственным препаратам.

Изобретение направлено на решение проблемы расширения арсенала средств, обладающих цитотоксическим действием, которые могут быть использованы в качестве активных компонентов противоопухолевых лекарственных средств.

Заявляемая проблема решается применением 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она в качестве средства, обладающего цитотоксической активностью.

Соединение 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-он было получено с использованием микроволновой активации (излучение мощностью 600 Вт) (см. А.Л.Иванова и др. Арилидентетрагидронафталиноны в реакциях с С-нуклеофилами. ХХ Молодёжная школа-конференция по органической химии, 18-21 сентыбря 2017, Казань. Тезтсы докладов, 2017, стр. 139).

Соединение было получено путём проведения реакции 3,4-дигидронафтален-1(2H)-она и 4-формилбензойной кислоты.

Изобретение иллюстрируется чертежами, где представлены графики метаболической активности клеточных линий при воздействии на них соединения 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она, при этом:

- на фиг. 1 представлен график метаболической активности клеточной линии С6;

- на фиг. 2 представлен график метаболической активности клеточной линии SPEV;

- на фиг. 3 представлен график метаболической активности клеточной линии HELA.

Получение соединения и испытание его цитотоксической активности иллюстрируется следующими примерами.

Пример. Синтез 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она

К 1.07 г (7.5 ммоль) 4-формилбензойной кислоты (77) добавляют 1.00 мл (7.5 ммоль) 3,4-дигидронафтален-1(2H)-она (57) и 0.1 мл пиперидина в 0.5 мл ледяной уксусной кислоты. Реакционную смесь подвергают воздействию микроволнового излучения мощностью 600 Вт в течение 30 минут. Образовавшиеся кристаллы обрабатывают изопропиловым спиртом, промывают водой и сушат. Получают 1,65 г (87.3%) 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она, Т. пл. 163-164 °C. Спектр ЯМР1Н (ацетон-d6), δ, м.д.:3.03 (т. 2Н, СН2(тетр)), 3.18 (т. 2Н, СН2(тетр)), 7.90 (с. 1Н, Нвин),7.38-8.15 (м. 9Н, Ar). Найдено, %: С 77.43, Н5.13.C18H14O3. Вычислено, %: С77.68, Н 5.07.

Цитотоксичность 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она определяли с помощью МТТ-теста на культурах клеток почек эмбрионов свиньи, несущих онковирусы А и С (SPEV), клеток глиомы крысы (С6) и раковой опухоли шейки матки человека (HeLa). В основе МТТ-теста лежит способность живых клеток восстанавливать желтый бромид 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-2,5-тетразолия (МТТ) в пурпурно-синие внутриклеточные кристаллы МТТ-формазана, растворимые в ДМСО. Уменьшение оптической плотности опытных проб по сравнению с контрольными, регистрируемое на планшетном спектрофотометре, свидетельствует о цитотоксическом действии изучаемых веществ на клетки.

Клетки линий SPEV, С6 (глиома) и HeLa клон 11, суспендированные в питательной среде, вносили в лунки 96-луночных полистироловых планшетов (в одну лунку вносили 200 мкл среды и примерно 50000 клеток соответствующей линии). Питательная среда представляла собой среду ДМЕМ с добавлением 10% эмбриональной телячьей сыворотки, а также антибиотиков пенициллина (50 м.ед./мл) и стрептомицина (50 мкг/мл) для предотвращения бактериальной контаминации. Культуры выращивали в атмосфере СО2-инкубатора в течение 2-х суток до образования монослоя клеток с 70%-ой плотностью насыщения.

Тестируемые вещества растворяли в ДМСО до наибольшей концентрации. Предельная концентрация соединения 1 составила 55,56 мг/мл, соединения 2 - 50 мг/мл, а соединения 3 - 52,63 мг/мл.

После 48 часов инкубации к культурам клеток добавляли методом раститровки различные концентрации исследуемых соединений. Каждую концентрацию применяли в трех повторностях. В качестве начального разведения образцов использовали разведение 1:100 в питательной среде. В контрольные лунки добавляли растворитель ДМСО в концентрации 1%. Планшеты с внесенными соединениями снова помещали в СО2-инкубатор на 24 часа.

Для определения дыхательной активности реактив МТТ растворяли в забуференном физиологическом растворе до концентрации 1 мг/мл.

После 72 часов инкубации клеточных линий с тестируемыми веществами лунки планшетов освобождали от среды и вносили в них по 100 мкл раствора МТТ. Планшеты помещали на 1 час в СО2-инкубатор, затем жидкость из лунок удаляли, вносили в них по 200 мкл раствора ДМСО и инкубировали 10 мин при 37°С в термостате.

С помощью спектрофотометра планшетного формата определяли оптическую плотность полученных образцов при длине волны 540 нм и вычитали измеренное фоновое поглощение при длине волны 690 нм. Дыхательную активность контрольных образцов принимали за 100%.

В Таблице и на фиг. 1, 2, 3 представлены результаты определения метаболической активности клеточных линий C6, SPEV и HeLа при воздействии на них 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она в максимальной использованной концентрации.

Таблица. Влияние 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она на метаболическую активность клеточных линий C6, SPEV и HeLa.

№ соединения Концентрация, мкг/мл Метаболическая активность клеточных линий, %
С6 SPEV HeLa
1 555.6 93.6 2.9 3.4

Из приведенных данных следует, что соединение 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-он в максимальной использованной концентрации практически полностью подавляет метаболическую активность клеточных линии SPEV и HeLa (до 2.9% и 3.4%, соответственно).

Проведенный нами виртуальный скрининг биологической активности полученных структур при помощи программы PASS также подтвердил вероятность проявления противоопухолевой (Ра = 70%) и антилейкемической (Ра = 71%) активности.

Применение 2-(4-карбоксибензилиден)-3,4-дигидронафтален-1(2Н)-она в качестве средства, обладающего цитотоксической активностью.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены антитело и его антигенсвязывающий фрагмент, способные к специфическому связыванию с участком бета цепи семейства TRBV9 Т-клеточного рецептора человека.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены антитело и его антигенсвязывающий фрагмент, способные к специфическому связыванию с участком бета цепи семейства TRBV9 Т-клеточного рецептора человека.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению пептидных антираковых агентов, и может быть использовано в медицине в лечении или уменьшении интенсивности онкологического заболевания.

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкологии, и может быть использовано для лечения пациентов с диагнозом лейкоз. Способ иммунотерапии раковых заболеваний заключается в том, что для пациентов с диагнозом лейкоз получают 5 мл костного мозга от здорового донора, затем выделяют из него мононуклеарные клетки, далее культивируют их в полной культуральной среде следующего состава: среда DMEM/F12 1:1 с HEPES с добавлением 2 ммоль/мл или 3,65 мг/10 мл L-глутамина, 100 ед./мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина, 10% эмбриональной сыворотки, в условиях Т=37°С и 5% CO2 в течение 48-72 часов, затем выделяют из полученной культуральной среды экзосомосодержащий осадок путем дифференциального центрифугирования, растворяют его в фосфатно-солевом буфере в соотношение 1:5 - 1:20 и далее полученный раствор вводят per os пациенту с диагнозом лейкоз 1 раз в три дня после еды в утренние часы.

Группа изобретений относится к лечению рака. Предложены: терапевтическая композиция для ингибирования метилтрансферазы гистона человека EZH2, содержащая N-(4,6-диметил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил)метил)-5-(этил(тетрагидро-2H-пиран-4-ил)амино)-4-метил-4’-(морфолинометил)-[1,1’-дифенил]-3-карбоксамид или его соль и один или более других терапевтических агентов, выбранных из противораковых агентов или глюкокортикоидов (предпочтительно дексаметазон или преднизон); способ лечения с её использованием; способ лечения рака; способ ингибирования пролиферации раковой клетки (варианты).

Группа изобретений относится к онкологии и фармакологии. Предложено применение ингибитора MDM2 (MDM2i) для лечения рака, где MDM2i следует вводить один раз каждые 3 недели (q3w), где MDM2i представляет собой (S)-5-(5-хлор- 1-метил-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-3-ил)-6-(4-хлорфенил)-2-(2,4-диметокси-пиримидин-5-ил)-1-изопропил-5,6-дигидро-1Н-пирроло [3,4-d] имидазол-4-он или (S)-1-(4-хлорфенил)-7-изопропокси-6-метокси-2-(4-{метил-[4-(4-метил-3-оксо-пиперазин-1-ил)-транс-циклогексилметил]амино}фенил)-1,4-дигидро-2H-изохинолин-3-он; применение первого MDM2i, который вводят в дозе от 100 до 800 мг один раз каждые 3 недели per os; применение второго MDM2i, который вводят в дозе от 500 до 4000 мг один раз каждые 3 недели per os (варианты).

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены антитело и его антигенсвязывающий объект, способные к специфическому связыванию с участком бета-цепи семейства TRBV9 Т-клеточного рецептора человека.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, гематологии и кардиологии, и может быть использовано для ведения пациентов с хроническим миелолейкозом при назначении ингибиторов тирозинкиназы (ИТК).

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены анти-PDL-1 моноклональные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты.

Изобретение относится к соединениям формулы I или их фармацевтически приемлемым солям, которые обладают ингибирующей активностью в отношении киназы CDK4. В формуле I R1 и R2 связаны с соседним атомом N, образуя замещенный С1-С8-алкилом или незамещенный 3-12-членный насыщенный гетероцикл, причем упомянутый гетероцикл относится к кольцевой структуре, содержащей 0-3 гетероатома, выбранных из группы, состоящей из N или О, в дополнение к атому азота, присоединенному к исходному ядру; R3 выбран из С1-С8-алкила, CN, CONR13R14, C(O)R15; R13 и R14 независимо выбраны из Н или незамещенного С1-С8-алкила; R15 выбран из незамещенного 3-12-членного насыщенного гетероцикла, причем упомянутый гетероцикл содержит по меньшей мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из N и О; R4 представляет собой Н; R5 представляет собой Н; X представляет собой CR16; А, В и Z независимо выбраны из N или CR16; R16 представляет собой Н или С1-С4-алкил; L отсутствует или представляет собой С1-С6-алкилен; Y представляет собой где когда W представляет собой О, то R6 отсутствует, когда W представляет собой N, то R6 представляет собой Н, незамещенный С1-С8-алкил или C(O)R24; R24 представляет собой незамещенный С1-С8-алкокси; R7 может быть 0-3 заместителями, представляющими собой незамещенный С1-С8-алкил; Ya представляет собой N; n и t независимо представляют собой 0, 1 или 2.

Настоящая группа изобретений относится к адоптивной терапии. Предложены химерные рецепторы антигена (CAR), содержащие мезотелин-связывающий домен, а также кодирующие их нуклеиновые кислоты, вектор и клетка.

Группа изобретений относится к области медицины и фармацевтики. Первое изобретение представляет собой способ профилактики или лечения рака или ракового метастаза у субъекта, включающий введение терапевтического количества соединения формулы II, или его фармацевтически приемлемой соли, IIгде в формуле II: Q представляет собой замещенную или незамещенную бициклическую группу, которая состоит из одного бензольного кольца и насыщенного или ненасыщенного пятичленного цикла, который содержит один или более гетероатомов; R1 представляет собой C1-4-алкил; R2 представляет собой водород, C1-4-алкил, C2-4-алкенил, C2-4-алкинил, C2-4-алкилкарбонил или C6-10-арил; R3 представляет собой водород, метил или этил.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены биспецифическое антитело и слитый белок для специфического связывания с GD2 и CD3.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу получения генетически сконструированных Т-клеток для иммунотерапии, и может быть использовано в медицине.

Изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложен способ лечения немелкоклеточного рака легких у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества ингибитора взаимодействия рецептора PD-1 и его лиганда PD-L1.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии и биотехнологии. Предложены варианты антител к C10orf54 или их антигенсвязывающие фрагменты, которые содержат вариабельные домены тяжелой и легкой цепей, каждый из которых характеризуется наличием соответствующих CDRs1-3.

Изобретение относится к области медицины и биотехнологии, а именно к созданию клеточных продуктов из клеточных линий клеток линий меланомы кожи человека. Клеточный продукт состоит из равных долей лизатов клеточных линий меланомы кожи человека, депонированных в специализированной коллекции культур клеток позвоночных Российской коллекции клеточных культур под соответствующими регистрационными номерами: 226 АВ mel - под номером РККК(П)725Д, 283 mel - под номером РККК(П)726Д, Mel 311 - под номером РККК(П)703Д, 515 mel - под номером РККК(П)757Д, mel 520 DVA - под номером РККК(П)779Д, 685 mel GSN - под номером РККК(П)781Д, 686 mel FLA - под номером РККК(П)782Д, 860 mel BII - под номером РККК(П)783Д, mel 929 SVU - под номером РККК(П)780Д.

Настоящее изобретение относится к пиразолопиримидиновому производному общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, обладающим активностью в отношении JAK3 и BTK, а также к фармацевтической композиции на их основе.

Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к фармацевтической композиции для лечения и/или предотвращения злокачественной опухоли. Композиция содержит в качестве активного ингредиента антитело или его фрагмент с иммунологической реакционноспособностью в отношении белка CSPG5 или его фрагмента, состоящего по меньшей мере из 7 или более последовательных аминокислотных остатков, где белок CSPG5 состоит из любой из аминокислотных последовательностей, представленных SEQ ID NO: 8, 4, 6, 10 и 12, или аминокислотной последовательности с идентичностью аминокислот с этими аминокислотными последовательностями 80% или более.

Изобретение относится к области органической химии и фармации. Предложено применение 2--3,4-дигидронафтален-1-она в качестве средства, обладающего цитотоксической активностью. Технический результат: соединение подавляло метаболическую активность клеточных линий почки эмбрионов свиньи, несущих онковирусы А и С, глиомы крысы, раковой опухоли шейки матки человека. Изобретение может быть перспективно в медицинской практике для лечения раковых заболеваний и в получении средств, обладающих цитотоксическим действием, которые могут быть использованы в качестве активных компонентов противоопухолевых лекарственных средств, в том числе против лейкемии. 3 ил., 1 табл.

Наверх