Способы получения и применения популяций мультипотентных и плюрипотентных клеток, устойчивых к заболеваниям и способных к дифференцировке

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к получению дифференцирующихся клеток путем клеточного перепрограммирования. Способ включает выращивание неплюрипотентных или соматических клеток в ростовой среде, стимулирующей рост, при этом выбранные клетки растут с оптимальной скоростью роста. Затем сверхэкспрессируют или вводят нуклеиновую(-ые) кислоту(-ы) или белок (белки), соответствующие транскрипционным факторам или детерминантам клеточного развития, обычно присутствующим в желаемых клетках и культивируют клетки в клеточной культуральной среде, где клетки растут со скоростью, которая меньше оптимальной скорости, и в присутствии средства (средств), стимулирующего(-их) дифференцировку. 1 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 ил., 27 пр.

 

Перекрестная ссылка на родственные заявки

Данная заявка на национальной фазе в соответствии с §371 закона №35 Кодекса США является продолжением в соответствии с §120 закона №35 Кодекса США международной заявки PCT/US2008/065007, поданной 28 мая 2008 года, и в соответствии с §119 закона №35 Кодекса США заявляет приоритет по отношению к предварительной заявке на патент США 60/932020, поданной 29 мая 2007 года, предварительной заявке на патент США 60/933133, поданной 5 июня 2007 года, предварительной заявке на патент США 60/933670, поданной 8 июня 2007 года, предварительной заявке на патент США 61/006449, поданной 14 января 2008 года, и предварительной заявке на патент США 61/064761, поданной 25 марта 2008 года, полное содержание которых включено в описание в качестве ссылки во всей их полноте.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Важнейшей проблемой для медицины в 21-м веке будет замена поврежденных, изношенных или генетически ослабленных клеток. Транскрипционные факторы, специфично связывающиеся с ДНК, играют ключевую роль в регуляции экспрессии генов. А именно, набор транскрипционных факторов в отдельной клетке определяет, какие клеточные программы активны, а какие нет. В этом качестве транскрипционные факторы играют решающую роль в определении и поддержании клеточной индивидуальности, а также определении клеточной уязвимости.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Возможность получать пролиферирующую, самообновляющуюся популяцию (популяции) мультипотентных и плюрипотентных клеток из неплюрипотентных, несамообновляющихся клеток может принести значительные положительные результаты во всех сферах, использующих клеточные методы лечения. Данные сферы применения включают в себя трансплантацию костного мозга, трансфузиологию и генную терапию и делают возможным получение индивидуальных для каждого пациента стволовых или других требуемых типов клеток. Аналогично, возможность инициировать дифференцировку клеток в нервные, мышечные и другие различные требуемые популяции клеток также имеет и будет иметь большое значение для медицины и промышленных процессов с участием животных. Соответственно, данное изобретение предлагает способы генетического получения и применения популяций мультипотентных клеток, популяций плюрипотентных клеток, популяций нейронов, популяций мышечных клеток и других требуемых популяций клеток, как, например, популяций клеток, устойчивых к ВИЧ (вирус иммунодефицита человека).

Данным изобретением предполагается, что эффективное введение или сверхэкспрессия определенных транскрипционных факторов, отдельно или в сочетании с другими детерминантами клеточного развития (notch, numb или numblike), делает возможным взаимное преобразование того, что было определено как временные (мультипотентные, плюрипотентные и/или самообновляющиеся) или постоянные (дифференцированные или соматические) клеточные фенотипы. Возможность надежно индуцировать фенотипические преобразования или клеточное перепрограммирование делает возможным получение стволовых клеток, замену клеток, тканей и органов, которые подходят отдельным пациентам. В сочетании с методами генной терапии и методами клеточного культивирования взаимопревращение типов клеток также предусматривает получение устойчивых к заболеваниям и генетически репарированных клеток, пригодных для трансплантации.

Цель данного изобретения - представить различные способы создания популяции (популяций) пролиферирующих, самообновляющихся мультипотентных и/или плюрипотентных клеток, а также других требуемых популяций клеток либо из делящихся, либо из неделящихся клеток без применения онкогенов. Популяции дифференцирующихся клеток включают клетки, экспрессирующие некоторые, но не все маркеры, связанные с принадлежностью к определенному типу клеток. В этом документе раскрывается, что экспрессия соответствующей изоформы Numb в сочетании с другими трансгенами (в особенности транскрипционными факторами) делает возможным получение популяций делящихся плюрипотентных клеток или популяций дифференцирующихся клеток. Более того, генетические векторы данного изобретения можно использовать для получения генетической модификации (например, экспрессии генных продуктов, недостающих у пациента) и для временной или постоянной индукции пролиферации, самообновления или характерного для стволовых клеток/клеток-предшественников поведения у эндогенных клеток in vivo, в частности таких клеток, обнаруживаемых в тканях, которые обычно не демонстрируют или больше не демонстрируют подобное поведение. Наконец, другие генетические векторы данного изобретения могут быть использованы для получения генетической модификации и/или для блокирования пролиферации, самообновления или характерного для стволовых клеток/клеток-предшественников поведения у клеток, аберрантно проявляющих такое поведение (например, у раковых клеток). Кроме того, целью настоящего изобретения является обеспечение терапевтических векторов, а также клеток, способных экспрессировать последовательности искусственных олигонуклеотидов для смягчения патологических процессов. Например, данное изобретение раскрывает применение искусственных олигонуклеотидов для уменьшения экспрессии генов, ключевых для инфицирования, размножения и распространения ВИЧ и других вирусов иммунодефицита.

Данное изобретение можно применять для любых подходящих клеток, включая клетки позвоночных, и включая клетки рыб, млекопитающих, птиц, земноводных и рептилий.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

Фиг. 1. Схематичная карта вектора, соответствующая векторной последовательности из Примера 13.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ

Все патенты, патентные заявки и публикации, которые цитируются в этой заявке, включены в данный документ по ссылке в их полном объеме.

Обсуждаемая в настоящем документе «ДНК» относится к дезоксирибонуклеиновой кислоте, а «РНК» относится к рибонуклеиновой кислоте. Обсуждаемая в настоящем документе «кДНК» относится к комплементарной ДНК, «иРНК» относится к информационной РНК; «миРНК» относится к малой интерферирующей РНК; «shRNA» относится к малым РНК, образующим шпильки; «микроРНК» относится к микро-РНК, таким как одноцепочечные молекулы РНК, как правило, около 20-30 нуклеотидов в длину, которые могут регулировать экспрессию генов; «ловушка», и «ловушка-РНК», и «РНК-ловушка» относятся к молекуле РНК, которая имитирует природный связывающий домен для лиганда.

Используемое в данном документе выражение «уменьшение интенсивности» включает снижение эффекта, или уменьшение повреждения, или сведение к минимуму эффекта или влияния действия, активности или функционирования, и включает, например, снижение вредных эффектов заболевания или состояния.

Используемое в данном документе выражение «торможение» включает замедление или снижение развития эффекта или действия, и включает, например, замедление развития заболевания, замедление скорости инфицирования, или иные действия, направленные на замедление или уменьшение прогрессирования или развития заболевания или состояния.

Используемое в данном документе выражение «индуцирующее средство» означает средство, которое содействует в качестве вспомогательного средства или само по себе эффективно, чтобы вызвать действие. Например, экзогенное средство, которое влияет на промотор, например, путем инициирования или усиления его активности, и тем самым влияет на экспрессию гена под контролем промотора, можно назвать индуцирующим средством. Например, в качестве индуцирующего средства можно применять тетрациклин; и в качестве индуцирующего средства можно применять доксициклин.

Последовательность нуклеиновой кислоты (например, последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая полипептид) называется «функционально связанной» с другой последовательностью нуклеиновой кислоты (например, с промотором), если первая последовательность нуклеиновой кислоты находится в функциональной связи со второй последовательностью нуклеиновой кислоты. Например, промотор функционально связан с кодирующей последовательностью, если промотор влияет на транскрипцию или экспрессию кодирующей последовательности. Используемое в данном документе выражение «находится под управлением» относится к гену или кодирующей последовательности, которая функционально связана с последовательностью промотора, а последовательность промотора влияет на транскрипцию и экспрессию кодирующей последовательности.

Используемое в данном документе выражение «маркер» представляет собой молекулу, которая является поддающейся обнаружению, или кодирует поддающуюся обнаружению молекулу, или воздействует на другие молекулы с тем, чтобы наличие маркера стало поддающимся обнаружению. «Маркерным белком» или «маркерным полипептидом» является белок или полипептид, который поддается обнаружению в лабораторных или клинических условиях и в вариантах осуществления может поддаваться визуальному обнаружению. «Маркерный ген» кодирует маркерный белок или маркерный полипептид.

Используемое в данном документе выражение «ВИЧ» («HIV») означает вирус иммунодефицита человека, и включает его разновидности, такие как, например, ВИЧ-1, ВИЧ-2. Другие вирусы иммунодефицита включают вирус иммунодефицита обезьян (SIV) и вирус иммунодефицита кошек (FIV). Ферменты, которые относятся к ВИЧ, могут называться «ферментами ВИЧ» и включают, например, интегразу, протеазу, обратную транскриптазу и трансактивирующий регуляторный белок (TAT).

Как полагают, инфицирование ВИЧ вовлекает в процесс рецепторы, называемые «рецепторами ВИЧ». Таких рецепторов может быть много, некоторые из них можно назвать «корецепторами ВИЧ». Обсуждаемые в настоящем документе корецепторы ВИЧ включают CXCR4 и CCR5.

В данном документе описывается теоретическая основа для вариантов осуществления данного изобретения, однако, данное обсуждение ни в коем случае не должно рассматриваться как обязательное или ограничивающее для данного изобретения. Специалисты в данной области поймут, что на практике можно осуществить различные варианты осуществления данного изобретения, независимо от модели, используемой для описания теоретических обоснований данного изобретения.

В предпочтительном варианте осуществления клетки «выбирают» из доступных популяций делящихся или неделящихся клеток с целью получения требуемой а) популяции пролиферирующих, мультипотентных или плюрипотентных клеток, дифференцирующихся б) популяций нервных клеток в) мышечных клеток, г) и/или любой другой требуемой популяции клеток; более того, требуемая популяция клеток может быть способна к дальнейшей дифференцировке in vitro, in vivo, и/или соответствующей для ткани и соответствующей для области дифференцировке in vivo.

Источники клеток, выбранные для применения в данном изобретении:

Выбранные клетки могут включать любую клетку, применимую в данном изобретении. Клетки, выбранные для применения в данном изобретении (в данном документе называемые: «выбранные клетки») могут изначально быть эндогенными клетками пациента, в том числе клетками, полученными из других систем органов; или происходить из экзогенных источников (в том числе клетки, полученные из клеточных линий, криоконсервированных источников, хранящихся в банках источников и доноров). Клетки также могут быть выбраны из клеток, генетически модифицированных искусственными или природными последовательностями нуклеиновых кислот. Используемое в данном документе выражение «выбранные клетки» не включает в себя эмбриональные стволовые клетки человека.

В вариантах осуществления данного изобретения для того, чтобы их можно было выделить без применения инвазивных процедур, выбранные клетки предпочтительно будут легко доступными клетками (например, лейкоциты периферической крови, циркулирующие стволовые кроветворные клетки, эпителиальные клетки (например, клетки буккального эпителия внутренней стороны щеки (например, Michalczyk et al., 2004)), жировая ткань (например, Gimble et al., 2007; Ma et al., 2007), клетки пуповинной крови (например, Zhao, et al., 2006, Tian et al., 2007) и др.). Тем не менее, стволовые клетки костного мозга, сперматогонии (например, Guan et al., 2006, Takahashi et al., 2007), первичные половые клетки (PGC), стволовые клетки, выделенные из околоплодных оболочек (например, Ilancheran et al., 2007.), амниотической жидкости (например, De Coppi et al., 2007), а также клетки, выделенные из кожи (например, Tumbar, 2006; Dunnwald et al., 2001; Szudal'tseva et al., 2007) и др., также охватываются настоящим изобретением. Такие клетки можно выделить из тканей, в которых они располагаются, с помощью средств, известных в данной области техники.

Клетки-сперматогонии можно выделить с помощью двухступенчатого ферментативного расщепления с последующим разделением в перколле. Затем клетки можно ресуспендировать в минимальной необходимой среде (MEM) с добавлением бычьего сывороточного альбумина до достижения конечной концентрации 106/мл. Подробнее: хирургическим путем получают доступ к фрагментам канальца и препарируют при помощи иглы перед обработкой с использованием 1 мг/мл трипсина, гиалуронидазы и коллагеназы, а затем 1 мг/мл гиалуронидазы и коллагеназы, в MEM, содержащей 0,10% бикарбоната натрия, 4 мМ L-глутамин, заменимые аминокислоты, 40 мкг/мл гентамицина, 100 ME на 100 мкг/мл пенициллина-стрептомицина и 15 мМ HEPES (N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-2-этансульфоновая кислота). В дальнейшем клетки-сперматогонии отделяют от фрагментов канальца путем центрифугирования при 30-кратной силе тяжести. После фильтрации через нейлоновые фильтры с порами размером 77 и/или 55 микрон клетки собирают и загружают на ступенчатый градиент плотности перколла. Фракции с чистотой более 40% клеток-предшественников/стволовых клеток/клеток-сперматогоний отмывают и ресуспендируют до концентрации клеток равной 106 клеток-предшественников/стволовых клеток/клеток-сперматогониев на милилитр. Затем клетки культивируют и/или хранят с помощью любой известной в данной области техники методики криоконсервации.

Выбранные клетки могут быть генетически модифицированными клетками, в частности клетками, которые были модифицированы любым известным в данном уровне техники способом с тем, чтобы кодировать терапевтические и используемые в коммерческих целях последовательности дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) или рибонуклеиновой кислоты (РНК).

В соответствии с аспектом настоящего изобретения предлагается способ получения требуемой популяции клеток (например, плюрипотентных, нейронов, мышечных клеток и т.д.) из выбранных клеток.

Получение популяций мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток:

Для получения а) популяции пролиферирующих, самообновляющихся плюрипотентных клеток выбранную клетку (клетки) и/или ее (их) потомство трансфицируют нуклеотидной последовательностью (последовательностями), включая последовательности, кодирующие «длинную (длинные)» (PRR insert+) изоформу (изоформы) гена numb млекопитающих. Приблизительно в то же время, выбранные клетки также можно трансфицировать искусственными олигонуклеотидами, нацеленными на короткие изоформы Numb или Numblike, затем культивировать в условиях, которые способствуют росту выбранных клеток с оптимальной скоростью роста. Выбранные клетки поддерживают в таких условиях в течение периода времени, достаточного для достижения требуемого количества клеток.

Клетки выращивают при (оптимальной) скорости роста, которая достигается инкубацией с LIF (фактором, ингибирующим лейкоз), фактором стволовых клеток и/или с равносильными концентрациями IL-6, гипер-IL-6, IL-7, онкостатина-М и/или кардиотрофина-1; или такой скорости роста, которая достигается в присутствии других цитокинов, усиливающих клеточный рост (например, в условиях, описанных для культивирования плюрипотентных клеток, например, Guan et al., 2006). Скорость роста определяют по времени удвоения выбранных клеток в указанной ростовой культуральной среде. Подобным образом, для размножения и наращивания с оптимальной скоростью роста клеток, трансфицированных длинной (PRR+) изоформой (изоформами) Numb, могут быть пригодны условия культивирования, такие как описанные в патентах США 6432711 и 5453357. Другие приемлемые протоколы и стандартные концентрации цитокинов были разработаны Koshimizu et al., 1996; Keller et al, 1996; Piquet-Pellorce, 1994; Rose et al., 1994; Park и Han, 2000; Guan et al., 2006; Dykstra et al., 2006; Zhang et al., 2007. Как бы то ни было, осуществление на практике настоящего изобретения не ограничено деталями этих идей.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки культивируют в стандартной ростовой среде (например, в минимальной необходимой среде с добавками (например, глутамином и бета-меркаптоэтанолом) или без них). Среда может включать основной фактор роста фибробластов (bFGF), фактор стволовых клеток, фактор, ингибирующий лейкоз (LIF) и/или факторы с LIF-активностью (например, LIF, LIF-рецептор (LIFR), цилиарный нейротрофический фактор (CNTF), онкостатин М (OSM), OSM-рецептор (OSMR), кардиотрофин, интерлейкины (IL), такие как IL-6, гипер-IL-6, GP130 и др.), а также лошадиную сыворотку. LIF, а также другие факторы с LIF-активностью, предотвращают спонтанную дифференцировку клеток. При таких условиях ожидается, что выбранные клетки, трансфицированные PRR+ изоформой (изоформами) Numb, и их потомство станут мультипотентными, плюрипотентными и/или самообновляющимися.

В предпочтительном варианте осуществления выбранную (выбранные) клетку (клетки) и/или ее (их) потомство трансфицируют нуклеотидной последовательностью (нуклеотидными последовательностями), кодирующей (кодирующими) «длинную (длинные)» (PRR insert+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены. Многие из этих трансгенов приведены ниже вместе с их соответствующими идентификационными номерами (номерами доступа) в базе данных последовательностей NCBI.

В другом предпочтительном варианте осуществления выбранную (выбранные) клетку (клетки) и/или ее (их) потомство трансфицируют нуклеотидной последовательностью (нуклеотидными последовательностями), кодирующей (кодирующими) сегмент «длинной (длинных)» (PRR insert+) изоформы (изоформ) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены. Многие из этих трансгенов приведены ниже вместе с их соответствующими идентификационными номерами (номерами доступа) (кодами) в базе данных последовательностей NCBI.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (PRR+) изоформу Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе LIF.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (PRR+) изоформу Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе трансгены с LIF-активностью.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе LIFR.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе онкостатин M (OSM).

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе рецептор онкостатина М (OSMR).

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе кардиотрофин-1.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе CNTF.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCT3/4 и SOX2.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе NANOG, OCT3/4 и SOX2.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCT3/4, и SOX2, и трансген с LIF-активностью.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCT3/4, и SOX2, и трансген с LIF-активностью.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе Notch (например, Gaiano et al., 2000).

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCT3/4, SOX2 и Notch (например, notch 1 и/или notch 2).

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCT3/4, SOX2, NANOG и Notch.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCR3/4, SOX2, NANOG и трансгены с LIF-активностью.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCT3/4, SOX2, NANOG и множественные трансгены с LIF-активностью.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство трансфицируют последовательностями, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) Numb, а также последовательностями, кодирующими другие трансгены, в том числе OCT3/4, Notch, HOXB4 и SOX2.

В дальнейшем могут быть описаны или разработаны другие, отличающиеся от описанных в данном документе, комбинации генов, которые способны вызывать превращение клеток в мультипотентные, плюрипотентные, способные к самообновлению, или которые способны вызывать начало дифференцировки. Однако, настоящая заявка на патент охватывает такое «генетическое перепрограммирование» любой ядросодержащей клетки с помощью электропорации с введением нуклеиновой кислоты или белка (см. Gagne et al., 1991; Saito et al., 2001; Yuan, 2008; Huang et al., 2007; Xia and Zhang, 2007; Cemazar and Sersa 2007; Isaka and Imai, 2007; Luxembourg et al., 2007; Van Tendeloos, 2007; Takahashi, 2007 и др.), липосом, нанокапсул, нанохранилищ и т.д. (см. Goldberg et al., 2007; Li et al., 2007), и/или с помощью другого подхода, который позволяет избежать вирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки, поскольку такие средства повышают безопасность и эффективность.

Из категории случайного изменения, естественно, исключают подходы, включающие способы направленного воздействия на гены и сайтнаправленные способы, разработанные для введения или удаления ДНК в конкретных участках генома.

Также, данная заявка на патент охватывает генетическое перепрограммирование любой ядросодержащей клетки с помощью электропорации с введением нуклеиновой кислоты или белка, липосом, нанокапсул, нанохранилищ и т.д., и/или другого подхода, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки, поскольку такие средства повышают безопасность и эффективность. Такие подходы и способы включают все известные в данной области и применимые в данном изобретении.

В предпочтительном варианте осуществления нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие отдельному гену или его сегменту (в частности, упомянутым в данном документе, открытым по описанным в данном документе способам или открытым по другим опубликованным способам; или известным как индуцирующие мультипотентность, плюрипотентность и/или самообновление), - это единственная нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), которые сверхэкспессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток.

В предпочтительном варианте осуществления нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие отдельному гену или его сегменту (в частности, упомянутым в данном документе, открытым по описанным в данном документе способам или открытым по другим опубликованным способам; или известным как индуцирующие мультипотентность, плюрипотентность и/или самообновление), - это единственная нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), которые сверхэкспессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, и в способе задействуют электропорацию, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые соответствуют отдельному гену или его сегменту (в частности, упомянутым в данном документе, открытым по описанным в данном документе способам или открытым по другим опубликованным способам; или известным как индуцирующие мультипотентность, плюрипотентность и/или самообновление), можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые соответствуют отдельному гену или его сегменту (в частности, упомянутым в данном документе, открытым по описанным в данном документе способам или открытым по другим опубликованным способам; или известным как индуцирующие мультипотентность, плюрипотентность и/или самообновление), можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Nanog, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Nanog, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать вирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Oct4 и Sox2, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать вирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые соответствуют Oct4/Sox2, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать вирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие длинным (PRR+) изоформам Numb, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать вирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим длинным (PRR+) изоформам Numb, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток; а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать вирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Nanog.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Nanog, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Nanog, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Nanog, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие гену с LIF-активностью.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие гену с LIF-активностью, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим гену с LIF-активностью, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим гену с LIF-активностью, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Oct4.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Oct4, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Oct4, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Oct4, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Sox2.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Sox2, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Sox2, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Sox2, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие lin28.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие lin28, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим lin28, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие c-myc.

В предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие c-myc, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим c-myc, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим c-myc, можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Oct4 и Sox2.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Oct4 и Sox2, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Oct4 и Sox2, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Oct4 и Sox2, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие длинным (PRR+) изоформам Numb.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие длинным (PRR+) изоформам Numb, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим длинным (PRR+) изоформам Numb, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим длинным (PRR+) изоформам Numb, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Oct4, Sox2 и Nanog.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие Oct4, Sox2 и Nanog, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Oct4, Sox2 и Nanog, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим Oct4, Sox2 и Nanog, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие длинным (PRR+) изоформам Numb.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления единственной нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для получения мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток из выбранных клеток, являются нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие длинным (PRR+) изоформам Numb, а способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим длинным (PRR+) изоформам Numb, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), соответствующим длинным (PRR+) изоформам Numb, используют другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся клеток, а способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

Следует понимать, что любую описанную в настоящем документе комбинацию последовательностей нуклеиновых кислот или белков можно изменять путем исключения таких, которые соответствуют Numb и/или Numblike, до тех пор, пока не будет получена требуемая популяция клеток или достигнуто требуемое поведение.

Аналогично, следует понимать, что описанные в настоящем документе способы инициации дифференцировки применимы к любым индуцированным или неиндуцированным мультипотентным, плюрипотентным или самообновляющимся стволовым клеткам, другим клеткам-предшественикам или другим выбранным клеткам, а не только к клеткам, полученным описанным в данном документе способом.

Следует понимать, что любую описанную в настоящем документе комбинацию последовательностей нуклеиновых кислот или белков можно изменять путем исключения последовательностей нуклеиновых кислот или белков, соответствующих Numb и/или Numblike, до тех пор, пока не будет получена требуемая популяция клеток.

В другом варианте осуществления используют различные комбинации нуклеиновых кислот или белков, описанные в настоящем документе, за исключением нуклеиновых кислот или белков, соответствующих изоформам Numb и/или Numblike.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство - это клетки, которые были предварительно генетически модифицированы.

В предпочтительном варианте осуществления описанные в этом документе этапы трансфекции представляют собой временную трансфекцию.

В дополнительном предпочтительном варианте осуществления изобретения такую временную трансфекцию осуществляют с помощью векторов на основе вирусов, которые не встраиваются в геном хозяина.

В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения такую временную трансфекцию осуществляют с помощью стандартных методик трансфекции (электропорация, химически опосредованная трансфекция, сливающиеся или несливающиеся липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и т.д.).

В дальнейшем могут быть описаны или открыты другие комбинации генов, отличающиеся от описанных в данном документе, которые способны вызывать превращение клеток в мультипотентные, плюрипотентные и/или самообновляющиеся, а также вызывать начало дифференцировки. Однако, настоящая заявка на патент также охватывает генетическое перепрограммирование любой ядросодержащей клетки с помощью электропорации с введением нуклеиновой кислоты или белка (например, способы, описанные Gagne et al., 1991; Saito et al., 2001; Yuan, 2008; Huang et al., 2007; Xia and Zhang, 2007; Cemazar and Sersa 2007; Isaka and Imai, 2007; Luxembourg et al., 2007; Van Tendeloos, 2007; Takahashi, 2007 и др.), липосом, нанокапсул, нанохранилищ и/или с помощью другого подхода, который позволяет избежать вирусной интеграции или другого случайного изменения клеточного генома, поскольку такие средства повышают безопасность и эффективность способа.

В другом предпочтительном варианте осуществления трансфекцию последовательностями, кодирующими длинную (PRR+) изоформу numb (и/или искусственными нуклеотидами, нацеленными на numblike и короткие изоформы numb), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют человеческий LIF (например, Du and Shi, 1996), онкостатин-М, кардиотрофин-1, IL-11, IL-6, IL-6-P, гипер-IL-6, LIFR, gp130, OCT3 (OCT4), Nanog, SOX2 и/или FGF-4.

Одновременную трансфекцию любым подклассом данных определенных трансгенных последовательностей можно выполнить любыми известными в данной области техники способами, включая применение одного генетического вектора, множественных генетических векторов, серийную трансфекцию или отбор, основанный на определенных маркерных белках и/или устойчивостях к антибиотикам.

В другом предпочтительном варианте осуществления клетки, трансфицированные длинной (PRR+) изоформой (изоформами) numb, культивируют в клеточной культуре, способствующей оптимальной скорости роста, такой, как описано выше, и которая включает EGF, bFGF, онкостатин, LIF (например, Du and Shi, 1996), фактор стволовых клеток, IL-11, кардиотрофин-1, IL-6, гипер-IL-6, CNTF и/или растворимый gp130.

Оценка потентности и дифференцировки

Плюрипотентность и мультипотентность можно оценить любыми известными в данной области техники способами, в том числе: 1) трансплантацией, 2) культивированием в условиях, способствующих формированию эмбриоидного тельца, 3) введением клеток в эмбрионы животных (за исключением человека) на стадии бластоцисты с последующим развитием и 4) анализами экспрессии РНК (например, ОТ-ПЦР или анализы на основе микрочипов) на генную экспрессию, связанную с дифференцировкой, мультипотентностью, плюрипотентностью и т.д. (см. Guan et al., 2006), 5) образованием колоний, а также по морфологии, подобной эмбриональным стволовым клеткам. Один раскрываемый в данном документе подход для определения плюрипотентности у выбранных клеток и/или их потомства включает трансфекцию конструктом-репортером, который включает промотор Nanog, функционально связанный с геном флуоресцентного белка. Это позволяет осуществить идентификацию и накопление клеток, экспрессирующих Nanog, с помощью флуоресцентно-активированного клеточного сортинга (FACS) и т.д.

В предпочтительном варианте осуществления эндогенные клетки (например, клетки, окружающие место ожога или повреждения) трансфицируют in vivo генетическими векторами, кодирующими длинную (длинные) (PRR+) изоформу (изоформы) numb, самими по себе или в сочетании с другими трансгенами, упоминаемыми в настоящем документе, что будет временно способствовать возобновлению пролиферации или повышенной пролиферации клеток. Этот подход также может найти клиническое применение в ситуации с гипопластическими тканями, нарушениями, при которых количество стволовых клеток/клеток-предшественников аномально уменьшено, а также при других нарушениях, при которых подход может быть продемонстрирован как полезный.

Получение популяций дифференцирующихся клеток

Для получения популяций б) нервных, в) мышечных и г) других клеток, способных далее дифференцироваться под влиянием окружающей среды in vivo, выбранную клетку (клетки) и/или ее (их) потомство факультативно трансфицируют последовательностью (последовательностями) длинной (PRR+) изоформы Numb и/или последовательностями искусственных олигонуклеотидов и наращивают посредством выращивания в течение достаточного времени для достижения требуемого количества клеток-потомков in vitro (как описано выше).

После этого факультативного этапа выбранные клетки и/или их потомство отмывают от цитокинов и средств, включая среду для оптимального роста/наращивания, и факультативно трансфицируют нуклеотидной последовательностью (последовательностями), кодирующей ген Numblike и/или «короткую» (PRR-) изоформу (изоформы) Numb, и/или искусственные олигонуклеотиды, которые целенаправленно действуют на длинные (PRR+) изоформы, и т.д. (например, Zaehres et al., 2005), затем культивируют при условиях, которые способствуют дифференцировке выбранных клеток в требуемый тип (типы) клеток.

В большинстве случаев клетки затем культивируют в присутствии 5-10% фетальной бычьей сыворотки и средства (средств), способствующего дифференцировке выбранных клеток и/или их потомства в требуемую популяцию клеток. Присутствие фетальной бычьей сыворотки и средства (средств) обеспечивает рост или пролиферацию со скоростью, которая меньше оптимальной скорости роста или скорости наращивания, а также способствует дифференцировке клеток в требуемую популяцию клеток. Средства или конкретные условия культивирования выбирают в соответствии с требуемой популяцией клеток, как это описано ниже.

Получение популяций нейронов или нервных клеток

Если требуемая популяция клеток - это популяция нервных клеток, то успешно трансфицированные клетки культивируют в условиях, которые способствуют росту при скорости, которая меньше оптимальной скорости, а также в присутствии средства (средств), которое способствует дифференцировке клеток в нервные клетки. Условия, способствующие дифференцировке в нейроны, были описаны в многочисленных публикациях, включая (Benninger et al., 2003; Chung et al. 2005; Harkany et al., 2004; Ikeda et al., 2004; Ikeda et al., 2005; Wernig et al., 2002; и Wernig et al., 2004). Более того, сочетание воздействия ретиноевой кислоты с присутствием дополнительных цитокинов способствует специфической дифференцировке в тип нервных клеток in vitro (например, Soundararajan et al., 2006; Soundararajan et al., 2007; патент США 6432711).

В предпочтительном варианте осуществления дифференцировка нейронов или нервных клеток in vitro происходит в присутствии 50 нг/мл фактора роста нервов (NGF).

В предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией клеток является популяция нейронов, то трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют Nurr1, REN, нейрогенин-1, нейрогенин-2, нейрогенин-3, Mash1, Phox2b, Phox2a, dHand, Gata3, Shh, FGF8, Lmx1b, Nkx2.2, Pet1, Lbx1 и/или Rnx.

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией нейронов является популяция дофаминергических нейронов, то трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют Mash1, Ngn2, Nurr1, Lmx1b и/или Ptx-3.

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией нейронов является популяция серотонинергических нейронов, то трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют Mash1, Phox2b, Lmx1b, Nkx2.2, Gata2, Gata3 и/или Pet1.

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией нейронов является популяция холинергических нейронов, то трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют MASH1, Phox2a и/или REST4.

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией нейронов является популяция ГАМК-эргических нейронов, то трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют MASH1, Phox2a и/или REST4, факультативно с последующим культивированием в средах, дополненных LIF, нейротрофином-3 (NT3) и/или фактором роста нервов (NGF).

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией нейронов является популяция норадренергических нейронов, то трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют Mash1, dHand, Phox2a, Phox2b, Gata2 и/или Gata3.

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией нейронов является популяция ГАМК-эргических нейронов, то трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют PITX2, Dlx2, Dlx5, антисмысловую РНК Hes1 и/или другие искусственные олигонуклеотиды, целенаправленно воздействующие на HES1.

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией является популяция нейронов или популяцией нервных клеток, то клетки, трансфицированные короткими (PPR-) изоформами numb (и/или numblike), культивируют в среде для культивирования клеток, которая способствует дифференцировке, например описанной выше, и которая включает один или несколько из следующих средств: ретиноевая кислота, NT3, NGF, глиальный нейротрофический фактор (GDNF) и интерферон-гамма (IFN-гамма).

Получение популяций мышечных клеток

Если требуемая популяция клеток - это популяция мышечных клеток, то успешно трансфицированные клетки культивируют в присутствии средства, способствующего дифференцировке клеток в мышечные клетки, и росту при скорости, меньше оптимальной скорости. Условия, которые способствуют дифференцировке в мышечные клетки, также были ранее описаны (Nakamura et al., 2003; Pal and Khanna, 2005; Pipes et al., 2005; Albilez et al., 2006; Pal and Khanna, 2007; Behfar et al., 2007; патент США 6432711). Более того, воздействие на выбранные клетки и/или их потомство гексаметилен-бис-акриламидом или диметилсульфоксидом в присутствии дополнительных цитокинов способствует инициации дифференцировки в клетки мышечного типа in vitro.

В предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией является популяция клеток сердечной мышцы, то клетки, трансфицированные короткими (PRR-) изоформами numb (и/или numblike), культивируют в среде для культивирования клеток, которая способствует дифференцировке в кардиомиоциты (Не et al., 2003; Guan et al., 2007 и др.), или которая включает определенные средства в концентрациях, которые способствуют дифференцировке в кардиомиоциты (например, 0,75%-1% диметилсульфоксид (DMSO), 20% нормальная бычья сыворотка (NBS), 10(-7) мМ ретиноевая кислота (RA) и 20% среда, кондиционированная кардиомиоцитами) (Hua et al., 2006).

В другом предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией является популяция кардиомиоцитов, то клетки также трансфицируют нуклеотидными последовательностями, которые включают последовательности, выбранные из тех последовательностей, которые кодируют Gata4, Gata5 и Gata6.

В предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией клеток является популяция мышечных клеток, то трансфекцию последовательностями, которые кодируют короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют специфический для мышечного типа bHLH, MyoD, миогенин, Myf5, Myf6, Mef2, миокардин, Ifrd1 и/или другие транскрипционные факторы мышечных клеток.

В предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией клеток является популяция гладкомышечных клеток, то трансфекцию последовательностями, которые кодируют короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют нуклеотидную последовательность специфического для клеток мышечного типа миокардина.

В предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией клеток является популяция клеток скелетной мышцы, то трансфекцию последовательностями, которые кодируют короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют нуклеотидные последовательности специфического для клеток мышечного типа MyoD и миогенина.

В предпочтительном варианте осуществления, если требуемой популяцией клеток является популяция олигодендроцитов, то трансфекцию последовательностями, которые кодируют короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют специфические для олигодендроцитов нуклеотидные последовательности OLIG1, OLIG2 и Zfp488.

Одновременную трансфекцию любым подклассом данных определенных трансгенных последовательностей, приведенных выше, можно выполнить любыми известными в данной области техники способами, включая применение множественных генетических векторов, серийную трансфекцию, а также отбор, основанный на определенных маркерных белках и/или устойчивости к антибиотикам.

Если требуемой популяцией клеток является популяция кроветворных клеток, то среда для дифференцировки включает специфические средства в концентрациях, которые способствуют дифференцировке в кроветворные клетки-предшественники (например, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), тромбопоэтин и т.д. (например, Ohmizono, 1997; Wang et al., 2005; Srivastava et al., 2007; Gupta et al., 2007) или дифференцированные кроветворные клетки (в соответствии с известными в уровне техники способами получения дифференцированных типов кроветворных клеток из недифференцированных или плюрипотентных клеток).

Если требуемая популяция клеток - это популяция половых клеток, то среда дифференцировки включает специфические средства в концентрациях, которые способствуют дифференцировке в половые клетки (например, Nayernia et al. 2006а, 2006b).

Если требуемая популяция клеток - это популяция клеток эндодермы или инсулярных клеток поджелудочной железы, то среда дифференцировки включает специфические средства в концентрациях, которые способствуют дифференцировке в клетки эндодермы и инсулярные клетки поджелудочной железы (например, Xu et al., 2006; Denner et al., 2007; Shim et al., 2007; Jiang et al., 2007).

В предпочтительном варианте осуществления дифференцировка выбранных клеток и/или их потомства может происходить в среде для дифференцировки без трансфекции numblike, короткими изоформами Numb или другими трансгенами, при этом среда для дифференцировки может оставаться неизменной.

В вариантах осуществления будут использовать один вектор, который контролирует экспрессию нуклеотидной последовательности (последовательностей), кодирующей «длинную» изоформу (изоформы) гена numb млекопитающих (и/или искусственные олигонуклеотиды, целенаправленно воздействующие на numblike или короткие изоформы numb) одним регулируемым промотором (например, тетрациклин-регулируемым промотором), тогда как Numblike и короткие изоформы Numb (и/или искусственные олигонуклеотиды, целенаправленно воздействующие на длинные (PRR+) изоформы) экспрессируются под контролем другого отдельного, но также регулируемого промотора. Следовательно, длинная (PRR+) изоформа (изоформы) numb может экспрессироваться (и/или короткие изоформы репрессироваться), если требуется наращивание выбранных клеток и в питательную среду добавлен индуктор (например, тетрациклин); затем могут экспрессироваться numblike и короткие изоформы (и/или длинная (PRR+) изоформа (изоформы) numb подавляться), если требуется дифференцировка.

Аналогично, белки и пептиды, соответствующие изоформам Numb, Notch, OCT3/4, SOX2 и другим последовательностям ДНК, приведенным в данном документе, можно вводить подобным образом в выбранные клетки и/или их потомство посредством электропорации (например, Koken et al., 1994; Ritchie and Gilroy, 1998), с помощью наночастиц, катионных липидов, сливающихся липосом (например, Yoshikawa et al., 2005; 2007) и т.д., вместо или в сочетании с генетической трансфекцией. В целом, электропорация предусматривает высокоэффективную трансфекцию (и высокий выход требуемых клеток) без геномной интеграции трансгена и, следовательно, связана в повышенной безопасностью.

ДНК или РНК, кодирующие белок (белки) или полипептид (полипептиды), которые способствуют пролиферации, мультипотентности, плюрипотентности или дифференцировке выбранных клеток, можно выделить в соответствии со стандартными методиками генной инженерии (например, путем выделения такой ДНК из библиотеки кДНК конкретной линии клеток) и поместить ее в соответствующий вектор экспрессии, который затем трансфицируют в выбранные клетки.

В другом предпочтительном варианте осуществления требуемой популяцией являются клетки эндодермы или инсулярные клетки поджелудочной железы, а трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют Foxa2, Sox17, HLXB9 и/или Pdx1.

В другом предпочтительном варианте осуществления требуемой популяцией являются гепатоциты, а трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют печеночный ядерный фактор (hepatic nuclear factor) HNF-1, HNF-3, FTNF-4, FTNF-6 и creb-связывающий белок.

В другом предпочтительном варианте осуществления требуемой популяцией являются кроветворные клетки, а трансфекцию последовательностями, кодирующими короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, выбранные из тех, которые кодируют Runx1/AML1 и NOV(CCN3), и/или культивированием клеток в присутствии колониестимулирующих факторов, специфичных для требуемых популяций клеток. Если требуется приживление трансплантата, то вводят изоформу Runx1/AML1a; если требуется дифференцировка, то вводят изоформу b (Creemers et al., 2006).

В другом предпочтительном варианте осуществления, требуемой популяцией являются хондроциты, а трансфекцию последовательностями, которые кодируют короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая последовательности, которые кодируют Sox9, CREB-связывающий белок, Gata6 и/или Runx2.

В другом предпочтительном варианте осуществления требуемой популяцией являются костные клетки (особенно остеобласты), а трансфекцию последовательностями, которые кодируют короткие изоформы numb (и/или numblike), дополняют или заменяют временной или постоянной трансфекцией другими последовательностями, включая Runx2.

В предпочтительном варианте осуществления генетические векторы, кодирующие длинные изоформы Numb (такие как те, что описаны в настоящем документе), вводят в эндогенные клетки in vivo временно или под контролем регулируемого промотора с тем, чтобы заставить такие клетки временно пролиферировать.

В предпочтительном варианте осуществления эндогенные клетки (например, клетки эпендимальной зоны центральной нервной системы) трансфицируют in vivo генетическими векторами, которые кодируют самую короткую изоформу numb или белок (белки) numblike, отдельно или в сочетании с другими трансгенами, указанными в настоящем документе, с тем, чтобы временно или постоянно способствовать повторному запуску дифференцировки или повышенной дифференцировке (особенно нейрональной дифференцировке) и миграции клеток-предшественников/эпендимальных клеток в центральную нервную систему. Это обновление или повышение измеряют по величине числа клеток, проявляющих впервые возникшую экспрессию маркеров, связанных с дифференцировкой. Этого можно достигнуть путем введения в систему органов генетических векторов с использованием способов, пригодных для данной цели (смотри примеры).

В предпочтительном варианте осуществления эндогенные клетки (например, клетки эпендимальной зоны центральной нервной системы) трансфицируют in vivo генетическими векторами, которые кодируют длинную изоформу (изоформы) numb и/или другие приведенные в настоящем документе трансгены, с тем, чтобы временно способствовать возобновлению пролиферации или повышенной пролиферации стволовых клеток (с последующей дифференцировкой клеток-потомков). Это возобновление или повышение измеряют по величине числа клеток, проявляющих впервые возникшую экспрессию маркеров, связанных с делением предшественников. Этого можно достигнуть путем введения в систему органов генетических векторов с использованием способов, пригодных для данной цели (смотри примеры).

Аналогично, этот подход также является пригодным для индукции повторного запуска дифференцировки или повышенной дифференцировки из популяций прочих стволовых клеток в прочих тканях (таких, как кожа и т.д.). Этот подход можно использовать, например, в клинических условиях в ситуации с пораженией центральной нервной системы, нарушениями других тканей, у которых нормальная дифференцировка или миграция нарушены, диспластическими нарушениями и другими нарушениями, если данный подход является полезным.

В предпочтительном варианте осуществления нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие одному гену или его сегменту (в частности, упоминаемые в этом документе, открытые по описанным в этом документе способам, открытые по другим опубликованным способам; и/или известные как способные инициировать требуемый вид дифференцировки), - это единственная нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для инициации дифференцировки у выбранных клеток.

В предпочтительном варианте осуществления нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), соответствующие одному гену или его сегменту (в частности, упоминаемые в этом документе, открытые по описанным в этом документе способам, открытые по другим опубликованным способам; и/или известные как способные инициировать требуемый вид дифференцировки), - это единственная нуклеиновая кислота (нуклеиновые кислоты) или белок (белки), которые сверхэкспрессируются и/или которые вводят для инициации дифференцировки у выбранных клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

В отдельном предпочтительном варианте осуществления вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые соответствуют отдельному гену или его сегменту (в частности, упоминаемые в этом документе, открытые по описанным в этом документе способам, открытые по другим опубликованным способам; и/или известные как способные инициировать требуемый вид дифференцировки), можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция дифференцирующихся клеток.

В отдельном предпочтительном варианте вместе с нуклеиновой кислотой (нуклеиновыми кислотами) или белком (белками), которые соответствуют отдельному гену или его сегменту (в частности, упоминаемые в этом документе, открытые по описанным в этом документе способам, открытые по другим опубликованным способам; и/или известные как способные инициировать требуемый вид дифференцировки), можно использовать другую нуклеиновую кислоту (нуклеиновые кислоты) или белок (белки) до тех пор, пока из выбранных клеток не будет получена популяция дифференцирующихся клеток, а используемым способом является электропорация, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища и/или другой подход, который позволяет избежать ретровирусной/лентивирусной интеграции или другого случайного изменения генома клетки.

Следует понимать, что любую описанную в настоящем документе комбинацию последовательностей нуклеиновых кислот или белков можно изменять путем исключения таких, которые соответствуют Numb и/или Numblike, до тех пор, пока не будет получена требуемая популяция клеток или достигнуто требуемое поведение.

Аналогично, следует понимать, что описанные в настоящем документе (или в любом другом месте) способы инициации дифференцировки применимы к любым индуцированным или неиндуцированным мультипотентным, плюрипотентным или самообновляющимся стволовым клеткам или другим выбранным клеткам, а не только к клеткам, полученным описанным в данном документе способом.

Источники выбранных клеток

Популяция выбранных клеток может происходить от различных стволовых клеток, клеток-предшественников или соматических клеток. Однако, в частности, исключение составляют соматические клетки, не имеющие ядра (например, зрелые эритроциты человека). Выбранные стволовые клетки могут быть получены от существующих линий клеток или выделены из хранящихся, находящихся в банке или криоконсервированных источников. Типичные источники стволовых клеток включают костный мозг, периферическую кровь, плацентарную кровь, амниотическую жидкость (например, De Coppi et al., 2007), пуповинную кровь (например, Zhao, et al., 2006; Tian et al., 2007), жировую ткань (например, Gimble et al., 2007; Ma et al., 2007), эмбрионы животных (за исключением человека) и другие клетки. Подобным образом можно выбрать циркулирующие лейкоциты и другие нестволовые клетки и поместить в такие условия, которые описаны выше, эффективные для приобретения клетками, таким образом, мультипотентности, плюрипотентности и/или способности к самообновлению. Примеры других доступных соматических клеток, которые могут использоваться в этом изобретении, включают лимфоциты и эпителиальные (например, буккального эпителия внутренней стороны щеки) клетки. Выделение и сбор клеток, выбранных для применения в рамках настоящего изобретения, можно проводить любым способом, известным в данной области техники.

В вариантах осуществления на животных столовые клетки, выделенные из предстательной железы, яичек, мозга эмбриона и кишечника, также раскрываются как предпочтительные источники выбранных клеток.

В предпочтительном варианте осуществления выбранные клетки и/или их потомство культивируют в трехмерном формате.

Дальнейшей целью настоящего изобретения является обеспечение клеток для применения при получении совместимых с пациентом и специфичных для пациента тканей и органов для трансплантации пациентам, признанных нуждающимися в таких органах и тканях. В настоящем документе раскрывается, что плюрипотентные, мультипотентные и/или дифференцирующиеся клетки, полученные по описанным в данном документе способам (или похожим способам), используют в сочетании с методиками, направленными на получение таких органов и/или тканей (например, Boland et al., 2006. Xu et al., 2006; Campbell and Weiss, 2007). Такое использование, в частности, охватывается настоящим изобретением.

Например, плюрипотентные, мультипотентные и/или

дифференцирующиеся клетки, полученные или обработанные по описанным в данном документе способам (или другим опубликованным способам), можно выращивать с использованием двухмерных или трехмерных каркасов, сконструированных так, чтобы они повторяли нормальную структуру ткани и/или органа (например, Yarlagada et al., 2005; Kim et al, 1998; WO/2003/070084; EP1482871; WO03070084; патенты США 2395698; 7297540; 6995013; 6800753; Isenberg et al., 2006).

Аналогично, каркасы, на которые должны заселяться плюрипотентные, мультипотентные и/или дифференцирующиеся клетки, можно получить из трупного органа (органов) или ткани (тканей), после этого трупные органы и ткани (например, кости, сердце, почки, печень, легкие и т.д.) можно обработать таким образом, чтобы удалить иммунные клетки организма, находящихся в этих тканях, а также другие нежелательные или вспомогательные клетки хозяина (например, с помощью ионизирующего облучения, стерилизации (например, Mroz et al., 2006) и/или различных способов удаления клеток (патенты Соединенных Штатов 6734018; 6962814; 6479064; 6376244; патенты США 5032508; 4902508; 4956178; 5281422, 5554389; 6099567; и 6206931; 4361552 и 6576618; 6753181; заявка на патент США с серийным номером 11/162715; WO/2001/048153; WO/2002/024244; WO 003002165; WO/2001/049210; WO/2007/025233; Европейские патенты EP1482871; ЕР1246903; ЕР1244396; ЕР0987998; ЕР1244396; ЕР1333870; Rieder et al., 2004; Ott et al., 2008; Taylor et al., 1998)).

Подобным образом ожидается, что плюрипотентные, мультипотентные и/или дифференцирующиеся клетки настоящего изобретения можно использовать в областях применений с использованием «струйной печати» в целях тканевой инженерии (например, Boland et al., 2006. Xu et al., 2006; Campbell et al., 2007). Следовательно, такое применение клеток, полученных или обработанных в соответствии со способами, описанными в настоящем документе, является охваченным.

В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения выбранные клетки и/или их потомство культивируют в висячих каплях.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения, выбранные клетки можно предварительно генетически модифицировать.

В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения, выбранные клетки можно модифицировать с помощью ДНК или РНК, кодирующих белок (белки) или полипептид (полипептиды), которые способствуют дифференцировке клетки в требуемую популяцию клеток.

Скрининг популяций клеток

В одном варианте осуществления способы данного изобретения включают скрининг клеток из линий клеток, донорских источников, пуповинной крови и аутологичного или донорского костного мозга, крови, сперматогониев, первичных половых клеток, клеток буккального эпителия внутренней стороны щеки или любых других источников клеток, пригодных в настоящем изобретении. Выбранные клетки можно подвергнуть скринингу для подтверждения успешной трансфекции полезной последовательностью (полезными последовательностями) или терапевтическим вектором (терапевтическими векторами), а также успешной инициации дифференцировки с помощью любого известного в данной области способа (Guan et al., 2006; патент США 6432711). В некоторых вариантах осуществления клетки подвергают скринингу с помощью стандартных способов, основанных на гибридизации нуклеиновых кислот и ПЦР, или с помощью способов быстрого типирования. В предпочтительных вариантах осуществления клетки подвергают скринингу в отношении экспрессии генов-репортеров. В некоторых вариантах осуществления клетки подергают скринингу по экспрессии маркерного гена, кодируемого вектором (векторами), экспрессирующим трансгены, такого как ген устойчивости к антибиотикам или ген флуоресцентного белка (например, GFP).

Скрининг на терапевтические векторы и полезные последовательности

Клетки можно подвергнуть скринингу на присутствие полезной последовательности (полезных последовательностей) и терапевтического вектора (терапевтических векторов) с помощью любого способа (любых способов), известного (известных) в данной области техники для определения специфических последовательностей. Каждый образец клеток можно одновременно подвергать скринингу на ряд последовательностей. Альтернативно, можно одновременно проводить скрининг множества образцов.

Клеточную дифференцировку можно отслеживать несколькими способами: включая (i) морфологическую оценку, (ii) использование полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР), нозерн-блоттинг или методики с микрочипами для отслеживания изменений экспрессии генов, (iii) анализ клеточной экспрессии специфических маркеров, таких как бета-тубулин III (для нейронов) и т.д. (Ozawa, et al., 1985). В некоторых вариантах осуществления клетки подвергают скринингу на успешную инициацию дифференцировки с помощью флуоресцентно-активированного сортинга клеток (FACS) на основе экспрессии специфических для данного типа клеток маркеров или трансгенных маркеров (например, экспрессии белка устойчивости к антибиотикам или флуоресцентного белка) под контролем промоторов, специфических для клеток данного типа, таких как миозиновый промотор в мышечных клетках; промотор человеческого сердечного α-актина в кардиомиоцитах; инсулиновый промотор в клетках, продуцирующих инсулин; промотор нейрон-специфической енолазы (NSE) для дифференцировки в нейроны или промоторы, связанные с нейромедиаторами, такие как промотор тирозин-гидроксилазы у дофаминергических нейронов; и т.д.).

В некоторых вариантах осуществления клетки подвергают скринингу с помощью стандартных способов, основанных на гибридизации нуклеиновых кислот и ПЦР. В частном предпочтительном варианте осуществления клетки подвергают скринингу с помощью способов быстрого типирования.

Скрининг на типы общих антигенов лейкоцитов (HLA)

В определенных вариантах осуществления выбранные клетки отбирают на основании совместимости при HLA-типировании. Генотип HLA можно определить любыми известными специалистам в данной области способами.

Клетки, используемые для скрининга, могут включать клетки, взятые непосредственно от донора, или из линий клеток, созданных из донорных клеток, или других применимых источников клеток. Клетки можно подвергнуть скринингу на полезную последовательность (полезные последовательности) и/или терапевтический вектор (терапевтические векторы), а также HLA-тип одновременно или по отдельности. Те клетки, которые успешно трансфицированы полезной последовательностью и проявляют соответствующий генотип HLA, можно подготовить для трансплантации пациенту.

В определенных вариантах осуществления трансфицированные клетки трансплантируют без HLA-типирования. В других вариантах осуществления клетки подвергают HLA-типированию на предмет совместимости.

Скрининг на средства, способствующие проявлению клеточного фенотипа

Настоящее изобретение также предусматривает способы скрининга белков и средств на их способность индуцировать фенотипические изменения или дифференцировку выбранных клеток и/или их потомства в требуемые популяции клеток. Коротко, векторы, кодирующие комплементарные ДНК (кДНК) из соответствующих библиотек кДНК, трансфицируют в выбранные клетки и/или их потомство. После идентификации специфической кДНК, которая индуцирует дифференцировку или другие фенотипические изменения, такую кДНК можно выделить и клонировать в соответствующий вектор экспрессии для продуцирования белка в соответствующих клетках (например, клетках COS) in vitro. Затем супернатант, содержащий белок, можно вносить в культуры выбранных клеток для определения того, индуцируют ли дифференцировку какие-либо секретируемые белки из таких клеток. С другой стороны, в культуры выбранных клеток можно вносить предполагаемые средства для определения того, индуцируют ли дифференцировку какие-либо секретируемые белки из таких клеток (см. патент США 6432711).

Настоящее изобретение также предусматривает способы скрининга нуклеиновых кислот на их способность индуцировать мультипотентность, плюрипотентность и/или самообновление, или инициировать дифференцировку выбранных клеток и/или их потомства. В этих способах векторы, кодирующие выбранные кДНК (или кДНК из соответствующих библиотек кДНК, или другие последовательности), вводят в выбранные клетки и/или их потомство с использованием электропорации, нанокапсул, нанохранилищ, липосом, ретровирусов, лентивирусов и/или любых других возможных средств трансфекции. После идентификации специфической кДНК, которая индуцирует фенотипические изменения, мультипотентность, плюрипотентность и/или способность к самообновлению, такую кДНК можно выделить и клонировать в соответствующий вектор экспрессии. Анализы определения таких изменений включают описанные в тексте данной заявке.

Также белок, соответствующий идентифицированной кДНК, можно продуцировать в соответствующих клетках (например, клетках COS) in vitro, для определения того, можно ли супернатант, содержащий белок, вносить в культуры выбранных клеток и может ли она индуцировать изменения.

Наконец, белки можно вводить в выбранные клетки и/или их потомства с помощью электропорации, нанокапсул, нанохранилищ, липосом, ретровирусов, лентивирусов и/или других возможных средств трансфекции, а полученные клетки можно оценить, как описано в настоящем документе, на мультипотентность, плюрипотентность, способность к самообновлению или инициацию дифференцировки.

Трансплантация клеток пациентам

После скрининга выбранные клетки и/или их потомство можно подвергнуть криоконсервации, сохранять в виде линий клеток в культуре или ввести пациенту. Выбранные клетки можно подвергнуть криоконсервации или сохранять в культуре с помощью любых средств, известных в данной области техники, и хранить для будущих процедур трансплантации.

Предпочтительно, клетки, которые необходимо подвергать скринингу, получают из доступных источников, позволяющих легкий сбор.

Касательно получения клеток, устойчивых к ВИЧ: целевые соматические и стволовые клетки данного изобретения могут быть клетками любого типа, способными к дифференцировке в клетки, которые могут инфицироваться ВИЧ, которые могут поддерживать транскрипцию и/или репликацию ВИЧ, которые могут изменять иммунный ответ на ВИЧ или которые могут тормозить прогрессирование в СПИД. Такие стволовые клетки включают, но без ограничений, плюрипотентные клетки, полученные из сперматогониев, первичные половые клетки, стволовые кроветворные клетки, клетки периферической крови, клетки плацентарной крови, клетки амниотической жидкости, клетки пуповинной крови, клетки буккального эпителия внутренней стороны щеки, клетки жировой ткани (в том числе стволовые клетки, полученные из этих тканей), перепрограммированные клетки, индуцированные мультипотентные клетки, индуцированные плюрипотентные клетки и т.д., эмбрионы животных (за исключением человека) и/или любой другой тип клеток, которые могут образовывать гемоциты и иммуноциты, клетки-мишени ВИЧ и другие клетки.

Терапевтический вектор (терапевтические векторы) экспрессирует «полезную последовательность (полезные последовательности)», предназначенную для превращения трансфицированных или инфицированных клеток в менее способные к поддержанию репликации и транскрипции ВИЧ. Генетические векторы, экспрессирующие «полезную последовательность (полезные последовательности)», а также любой вирус, полученный из такого генетического вектора, называются в настоящем документе «терапевтический вектор».

После скрининга клетки, трансфицированные требуемым терапевтическим вектором (терапевтическими векторами) и экспрессирующие полезную последовательность (с или без совместимого генотипа HLA), можно наращивать ex vivo (in vivo) посредством стандартных способов культивирования делящихся клеток и поддерживать в виде стабильных линий клеток (патенты США 6432711 и 5453357, включенные в настоящий документ посредством ссылки). С другой стороны, эти клетки можно ввести пациенту и наращивать in vivo.

Выбранные клетки можно подвергнуть криоконсервации с помощью любых средств, известных в данной области техники, и хранить для будущих процедур трансплантации.

Трансплантация требуемых популяций клеток пациентам

В определенных вариантах осуществления популяции клеток перед трансплантацией обогащают стволовыми клетками. В данной области техники хорошо известны различные способы отбора стволовых клеток. Например, образцы клеток можно обогатить с помощью моноклональных антител с флуоресцентными метками, которые распознают маркеры клеточной поверхности недифференцированных кроветворных стволовых клеток (например, CD34, CD59, Thyl, CD38 low, C-kit low, lin-minus) для проведения сортинга посредством флуоресцентно-активированного сортинга клеток (FACS).

В других вариантах осуществления образец выбранных клеток трансплантируют без обогащения.

В некоторых вариантах осуществления перед трансплантацией терапевтических стволовых клеток уменьшают количество или устраняют эндогенные стволовые клетки костного мозга. Терапевтические стволовые клетки определяют как такие стволовые клетки, которые содержат полезную последовательность (полезные последовательности) или терапевтический вектор (терапевтические векторы).

В некоторых вариантах осуществления процесс трансплантации может включать следующие фазы: (1) кондиционирование, (2) инфузия стволовых клеток, (3) нейтропеническая фаза, (4) фаза приживления трансплантата и (5) период после приживления трансплантата.

В некоторых вариантах осуществления перед трансплантацией уменьшают количество или устраняют эндогенные стволовые клетки, которые в норме образуют требуемые клетки (например, стволовые клетки костного мозга). Для обработки костного мозга для надлежащего приживления трансплантата можно применять химиотерапию, облучение и т.д. и/или способы, аналогичные описанным в патенте США 6217867. Наконец, терапевтические стволовые клетки можно трансплантировать пациенту с использованием любого известного в данной области техники способа.

Конструирование векторов, кодирующих Numb, Numblike и другие трансгены

В одном варианте осуществления трансфекцию последовательностью (последовательностями) нуклеиновых кислот, кодирующей изоформу (изоформы) numb/numblike, выполняют посредством вирусной трансфекции. Выражение «вектор (векторы), кодирующий Numb/Numblike» относится к векторам, включающим последовательность (последовательности) нуклеиновых кислот, кодирующей изоформу (изоформы) numb/numblike и/или искусственные олигонуклеотиды, целенаправленно воздействующие на изоформы numb или numblike, а также любые дополнительные последовательности трансгенов, искусственные олигонуклеотиды и т.д. и любой супернатант, связанный с вирусными компонентами, введенными в эти векторные последовательности.

Вектор (векторы), кодирующий Numb/Numblike, может включать вектор экспрессии. Соответствующие векторы экспрессии - это векторы, которые можно использовать для трансфекции ДНК или РНК в эукариотические клетки. К таким векторам относятся, прокариотические векторы, такие как, например, бактериальные векторы; эукариотические векторы, такие как, например, дрожжевые векторы или векторы на основе грибов; а также векторы на основе вирусов, такие как, но без ограничений, векторы на основе аденовирусов, векторы на основе аденоассоциированных вирусов и векторы на основе ретровирусов. Примеры векторов на основе ретровирусов, которые можно использовать, включают, но без ограничений, векторы, полученные на основе вируса лейкоза мышей Молони [Moloney], вируса саркомы мышей [Moloney], вируса саркомы Рауса [Rous], FIV (вирус иммунодефицита кошек), HIV (ВИЧ), SIV (вирус иммунодефицита обезьян, ВИО) и гибридные векторы.

Раскрывается, что вектор (векторы), кодирующий Numb/Numblike, можно применять для трансфекции клеток in vitro и/или in vivo. Трансфекцию можно осуществить с помощью любых известных в данной области техники средств, в частности с помощью вируса, полученного из клеток, пакующих вирусы. Такой вирус может быть заключен в капсид с тем, чтобы оставаться способным инфицировать различные типы клеток. Тем не менее, любая методика на основе заключения в капсид, позволяющая инфицировать выбранные типы клеток и/или их потомство, практически осуществима в контексте данного изобретения.

Конструирование генотерапевтического вектора (генотерапевтических векторов) для вируса иммунодефицита человека (ВИЧ)

«Терапевтический вектор (терапевтические векторы)» может включать вектор экспрессии. Соответствующие векторы экспрессии - это векторы, которые можно использовать для трансфекции ДНК или РНК в эукариотические клетки. Такие векторы включают прокариотические векторы, такие как, например, бактериальные векторы; эукариотические векторы, такие как, например, дрожжевые векторы или векторы на основе грибов; а также векторы на основе вирусов, такие как, но без ограничений, векторы на основе аденовирусов, векторы на основе аденоассоциированных вирусов и векторы на основе ретровирусов. Примеры векторов на основе ретровирусов, которые можно использовать, включают, но без ограничений, векторы, полученные на основе вируса лейкоза мышей Молони [Moloney], вируса саркомы мышей [Moloney], вируса саркомы Рауса [Rous], FIV (вирус иммунодефицита кошек), HIV (ВИЧ), SIV (вирус иммунодефицита обезьян, ВИО) и гибридные векторы.

В настоящем изобретении раскрывается, что терапевтический вектор (терапевтические векторы) можно использовать для трансфекции клеток-мишеней in vitro и/или in vivo. Трансфекцию можно осуществить с помощью любых известных в данной области техники средств, в частности с помощью вируса, полученного из клеток, пакующих вирусы. Такой вирус может быть заключен в капсид с тем, чтобы оставаться способным инфицировать CD34+ клетки и/или CD4+ клетки. Однако, в некоторых случаях трансфицируют другие типы клеток без участия белков CD4 или CD34. Тем не менее, любая методика заключения в капсид, позволяющая инфицирование таких типов клеток, таким образом, может быть включена в раскрытие настоящего изобретения.

Псевдотипирование различными белками оболочки расширяет перечень клеток-хозяев, подвергающихся трансдукции с помощью векторов на основе вирусов и терапевтических векторов, и позволяет сконцентрировать вирус до высоких титров, в частности при псевдотипировании гликопротеином оболочки вируса везикулярного стоматита (VSV-G) (Li et al., 1998; Reiser et al., 2000).

Векторная конструкция

В данном изобретении используемые векторы на основе вирусов могут быть различных типов, в том числе гибридными векторами. Например, векторами могут быть векторы на основе лентивирусов третьего поколения, которые могут включать лишь малую часть нативного генома (Zufferey et al., 1998). Получение вектора (векторов), кодирующего (кодирующих) трансгены, также может включать самоинактивацию транспортных векторов (Zufferey et al., 1998; Miyoshi et al., 1998), исключая образование полноценной векторной РНК после инфицирования клеток-мишеней.

Можно использовать векторы на основе вирусов, не способные реплицироваться вследствие нарушения экспрессии определенных вирусных белков, необходимых для нормальной репликации. Однако, существует возможность того, что вспомогательный вирус может запустить репликацию терапевтического вируса. Вероятность такого явления можно снизить путем применения самоинактивирующихся векторов.

В предпочтительном варианте осуществления трансгенные последовательности управляются убиквитиновым промотором, промотором U6, промотором EF-1 альфа, промотором CMV, регулируемыми промоторами и/или промоторами, специфическими для требуемого типа клеток.

Вирусный тропизм

В предпочтительном варианте осуществления вирус, полученный на основе вектора (векторов), кодирующего изоформы Numb/Numblike, терапевтического вектора (терапевтических векторов) и/или другого трансгенного вектора (других трансгенных векторов) этого изобретения, псевдотипируют гликопротеином оболочки вируса везикулярного стоматита для концентрирования вируса до высоких титров и облегчения инфицирования CD34+ клеток.

Выбор последовательности

Применение любой последовательности с 70% или большей идентичностью (или комплементарностью) к любой последовательности, имеющей отношение к последовательности NUMB или Numblike (с возможностью поиска с помощью базы данных Entrez-Pubmed), охватывается данным изобретением при условии использования в соответствии со способом, описанным в настоящем изобретении.

Настоящее изобретение также частично имеет отношение к генетическому вектору, который включает в себя последовательности, способные значительно уменьшать восприимчивость клеток млекопитающих к инфицированию вирусами ВИЧ-1 и ВИЧ-2 (оба в данном документе именуются как ВИЧ).

Настоящее изобретение раскрывает новую комбинацию искусственных олигонуклеотидов для уменьшения экспрессии генов, ключевых для ВИЧ/механизма заболевания СПИД.

Целесообразность комбинирования искусственных олигонуклеотидов для осуществления "нок-дауна" корецептора посредством экспрессии последовательностей TAR (трансактивируемые регуляторные элементы)- и RRE (Rev-чувствительные регуляторные элементы)-ловушек вытекает из представленного в данном документе утверждения, что терапевтические подходы на основе комбинирования множества генов, осуществляющие одновременно целевое воздействие на 1) инфицирование ВИЧ, 2) транскрипцию ВИЧ и 3) репликацию ВИЧ у отдельных клеток, вероятно, дадут лучшие терапевтические эффекты, чем любой из этих подходов по отдельности.

Терапевтический вектор (терапевтические векторы) экспрессирует "полезную последовательность (полезные последовательности)", предназначенную для превращения трансфицированных или инфицированных клеток в менее способные к поддержанию репликации и транскрипции ВИЧ. Генетический вектор, экспрессирующий "полезную последовательность (полезные последовательности)", а также любой вирус, полученный от такого генетического вектора, в данном документе обозначается выражением "терапевтический вектор".

Данное изобретение отчасти направлено на генетическую модификацию клеток, восприимчивых к инфицированию ВИЧ или способных размножать ВИЧ. Такие клетки в данном документе обозначаются выражением "клетки-мишени".

Настоящее изобретение предлагает композицию и способ применения терапевтических векторов на основе вирусов с целью уменьшения восприимчивости зрелых или незрелых клеток-мишеней, лейкоцитов, гемоцитов, любых стволовых клеток/клеток-предшественников и/или их потомства к инфицированию ВИЧ.

Из этого следует, что настоящее изобретение также предлагает композицию и способ применения терапевтических векторов на основе вирусов с целью уменьшения восприимчивости перепрограммированных клеток, индуцированных мультипотентных клеток, индуцированных плюрипотентных клеток и/или их потомства к инфицированию ВИЧ.

Дальнейшей целью данного изобретения является уменьшение способности зрелых или незрелых клеток-мишеней, стволовых клеток/клеток-предшественников (включая перепрограммированные клетки, индуцированные мультипотентные клетки, индуцированные плюрипотентные клетки) и/или их потомства к поддержанию репликации и транскрипции вируса иммуннодефицита.

Другой целью данного изобретения является достижение эффективной, долгосрочной экспрессии терапевтических последовательностей в зрелых или незрелых клетках-мишенях, других покоящихся клетках, в стволовых клетках/клетках-предшественниках и/или их потомстве.

В одном аспекте данное изобретение представляет способ предупреждения или лечения ВИЧ-инфекции. Способ включает трансплантацию стволовых клеток, трансфицированных терапевтическим вектором (терапевтическими векторами) или последовательностью (последовательностями), пациентам с ВИЧ-инфекцией.

Полезная последовательность (полезные последовательности) может (могут) быть последовательностями, которые уменьшают способность ВИЧ к инфицированию клетки, транскрибированию вирусной ДНК или репликации в пределах инфицированной клетки, или последовательностью, которая усиливает способность клетки нейтрализовывать ВИЧ-инфекцию.

В определенных вариантах осуществления полезная последовательность (полезные последовательности) представляет (представляют) собой искусственный олигонуклеотид (искусственные олигонуклеотиды), который (которые) препятствует (препятствуют) проникновению ВИЧ, включая миРНК, shRNA, антисмысловую РНК или микроРНК, направленные против любого из корецепторов ВИЧ (включая, но не ограничиваясь CXCR4, CCR5, CCR2b, CCR3 и CCR1).

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) включает (включают) в себя искусственные олигонуклеотиды, целенаправленно воздействующие на один или несколько корецепторов ВИЧ, включая CXCR4, CCR5, CCR1, CCR2, CCR3, CXCR6 и/или BOB.

В другом предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) включает (включают) в себя искусственные олигонуклеотиды, целенаправленно воздействующие на главные корецепторы ВИЧ - CXCR4 и CCR5

В дальнейшем предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) включает (включают) в себя искусственные олигонуклеотиды, целенаправленно воздействующие на один или несколько ферментов ВИЧ, такие как обратная транскриптаза, интеграза и протеаза ВИЧ.

Подходящими последовательностями для искусственных олигонуклеотидов являются последовательности, 1) прогнозируемые компьютерными алгоритмами как эффективные в уменьшении целевых последовательностей, и 2) способные к успешному уменьшению количества целевого фермента на >70% в стандартных количественных исследованиях РНК и в исследованиях ферментативной активности или до степени, ниже терапевтической.

Фраза "целевая последовательность" указывает на то, что у конкретной последовательности есть последовательность нуклеотидных оснований, обладающая по меньшей мере 70% идентичностью к вирусной геномной нуклеотидной последовательности или ее комплементарной цепи (например, такой же как она сама или комплементарной к такой вирусной геномной последовательности), или соответствующая последовательность РНК. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения данное выражение указывает на то, что последовательность по меньшей мере на 70% идентична вирусной геномной последовательности конкретного вируса, против которого направлен олигонуклеотид, или его комплементарной последовательности.

Любой из многочисленных типов искусственных олигонуклеотидов может быть экпрессирован в результате трансфекции терапевтического вектора, и настоящее изобретение направлено на все возможные комбинации таких олигонуклеотидов.

В предпочтительном варианте осуществления последовательности искусственных олигонуклеотидов управляются клеткой-мишенью, специфическим промотором (специфическими промоторами).

В другом предпочтительном варианте осуществления последовательности искусственных олигонуклеотидов управляются промотором (промоторами) U6.

Искусственные олигонуклеотиды подобным же образом могут быть включены в тот же самый терапевтический вектор (терапевтические векторы) с РНК-ловушкой.

РНК-ловушка

РНК-ловушки являются последовательностями РНК, которые эффективны в связывании с определенными белками и ингибировании их функции.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) включает (включают) в себя множество последовательностей РНК-ловушек.

В дальнейшем варианте осуществления последовательности РНК-ловушек фланкируются последовательностями, обеспечивающими стабильность последовательности ловушки.

В другом предпочтительном варианте осуществления последовательности РНК-ловушек являются последовательностями RRE- и/или TAR-ловушек.

В предпочтительном варианте осуществления последовательности RRE- и TAR-ловушек являются последовательностями TAR и RRE, полученными из ВИЧ-2.

В другом предпочтительном варианте осуществления последовательности ловушек также включают в себя последовательности ловушек-элементов Psi.

В предпочтительном варианте осуществления каждая из последовательностей ловушек находятся под управлением промотора U6.

В другом предпочтительном варианте осуществления последовательности ловушек находятся под управлением специфических для клеток-мишеней промоторов.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор целенаправленно воздействует на множество стадий жизненного цикла ВИЧ, кодируя искусственную нуклеотидную последовательность (искусственные нуклеотидные последовательности) в комбинации с последовательностями TAR- и/или RRE-ловушек ВИЧ-2.

В другом предпочтительном варианте осуществления вектор включает в себя последовательности олигонуклеотидов микроРНК.

В другом предпочтительном варианте осуществления вектор включает в себя последовательности олигонуклеотидов shRNA.

В другом предпочтительном варианте осуществления вектор включает в себя последовательности олигонуклеотидов миРНК.

В другом предпочтительном варианте осуществления вектор включает в себя последовательности олигонуклеотидов для РНК-интерференции.

В другом предпочтительном варианте осуществления вектор включает в себя последовательности рибозимов.

В другом предпочтительном варианте осуществления вектор включает в себя комбинацию классов искусственных олигонуклеотидов.

В дальнейшем варианте осуществления последовательности искусственных нуклеотидов целенаправленно взаимодействуют с корецепторами ВИЧ, такими как CCR5, CXCR4 и т.д.

В дальнейшем варианте осуществления последовательности искусственных нуклеотидов целенаправленно воздействуют на такие ферменты ВИЧ, как интеграза, протеаза, обратная транскриптаза, TAT и т.д.

В дальнейшем варианте осуществления последовательности рибозимов целенаправленно взаимодействуют с такими корецепторами ВИЧ, как CCR5, CXCR4 и т.д. или такими ферментами ВИЧ, как интеграза, протеаза, обратная транскриптаза, TAT и т.д.

В предпочтительном варианте осуществления вирус создают с помощью терапевтического вектора (терапевтических векторов) и вирус является псевдотипированным.

В предпочтительном варианте осуществления вирус создают с помощью терапевтического вектора (терапевтических векторов), и вирус не является псевдотипированным, и данный вирус демонстрирует изначально присущий ВИЧ-тропизм.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) является (являются) вектором на основе вируса.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) является (являются) вектором на основе лентивируса.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) является (являются) вектором на основе лентивируса третьего поколения.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) включает (включают) комбинацию классов искусственных олигонуклеотидов.

В предпочтительном варианте осуществления экспрессия искусственных нуклеотидных последовательностей находится под управлением промотора EF-1 альфа или других, соответствующих для клеток-мишеней промоторов.

В предпочтительном варианте осуществления экспрессия искусственных нуклеотидных последовательностей находится под управлением промотора U6 или других, соответствующих для клеток-мишеней промоторов.

В предпочтительном варианте осуществления экспрессия искусственных нуклеотидных последовательностей находится под управлением комбинации промотора EF-1 альфа и промотора U6 и/или других, соответствующих для клеток-мишеней промоторов.

В предпочтительном варианте осуществления EF-1 альфа управляет экспрессией микроРНК, в то время как промотор U6 управляет экспрессией РНК-ловушки.

В предпочтительном варианте осуществления EF-1 альфа управляет экспрессией миРНК, в то время как промотор U6 управляет экспрессией РНК-ловушки.

В предпочтительном варианте осуществления EF-1 альфа управляет экспрессией shRNA, в то время как промотор U6 управляет экспрессией РНК-ловушки.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) включает (включают) в себя множество последовательностей микроРНК, направленных против CXCR4, множество последовательностей микроРНК, направленных против CCR5, последовательность RRE-ловушки ВИЧ-2 и последовательность TAR-ловушки ВИЧ-2, и вектор является вектором на основе вируса.

В предпочтительном варианте осуществления лечение с включением терапевтического вектора (терапевтических векторов) комбинируют с другими методами лечения против ретровирусов, включая фармакотерапии. Фармакотерапии против ретровирусов, подходящие для комбинирования с терапевтическим вектором (терапевтическими векторами), являются такими, которые обладают аддитивными или синергическими эффектами в комбинации с терапевтическим вектором.

Целевые клетки для генной терапии при ВИЧ могут включать, но не обязательно ограничиваться ими, зрелые Т-лимфоциты периферической крови, моноциты, тканевые макрофаги, предшественники Т-клеток, клетки-предшественники макрофагов-моноцитов и/или мультипотентные кроветворные стволовые клетки, такие как клетки, обнаруживаемые в пуповинной крови, периферической крови и занимающие участки костного мозга.

Настоящее изобретение также относится к трансфекции CD4+ Т-клеток, макрофагов, предшественников Т-клеток, предшественников макрофагов-моноцитов, CD34+ стволовых клеток/клеток-предшественников и/или любой другой покоящейся клетки, делящейся клетки, стволовой клетки или клетки-предшественника, способных к дифференцировке in vitro или in vivo в клетки-мишени для ВИЧ, CD4+ Т-клетки, макрофаги, предшественники Т-клеток, предшественники макрофагов-моноцитов и/или CD34+ стволовые клетки/клетки-предшественники. Трансфицированные клетки, таким образом, могут быть эндогенными клетками in situ или экзогенными клетками, полученными из других частей организма или даже от других индивидуумов-доноров. Клетки, выбранные с этой целью, в данном тексте обозначаются выражением "выбранные клетки".

Подобным же образом самообновляющиеся, мультипотентные и/или плюрипотентные стволовые клетки (включая перепрограммированные и индуцированные плюрипотентные клетки) представляют другую логичную цель для генной терапии ВИЧ, и данное изобретение, в частности, охватывает их применение.

В одном варианте осуществления этого процесса выбранные клетки (например, кроветворные стволовые клетки, стволовые клетки кожи, клетки пуповины, первичные половые клетки (PGC), сперматогонии, любая доступная соматическая клетка и т.д.) 1) размножают в культуре с использованием одного или нескольких цитокинов, таких как фактор стволовых клеток, фактор, ингибирующий лейкоз (LIF), кардиотропин-1, IL-11, IL-6, IL-6 R, GP-130, CNTF, IGF-I, bFGF и/или онкостатин-М, и 2) трансфицируют терапевтическим вектором (терапевтическими векторами) или полезной последовательностью (полезными последовательностями) до дифференцировки с использованием любых известных в данной области техники способов, таких как способы, описываемые в патенте США 5677139, который включен в данный документ по ссылке, или посредством способов, аналогичных описываемым в патенте США 5677139 касательно других клеток-мишеней.

В отдельных вариантах осуществления перед трансфекцией может потребоваться осуществление различных этапов.

В отдельных вариантах осуществления с целью создания популяций плюрипотентных стволовых клеток может потребоваться выполнение только этапов инкубирования, указанных выше.

Соответствующие концентрации LIF и фактора стволовых клеток для размножения/пролиферации стволовых клеток/клеток-предшественников, а также другие условия культивирования клеток были описаны ранее (например, патенты США 6432711 и 5453357, включенные в данный документ по ссылке). Другие соответствующие протоколы и стандартные концентрации цитокинов были изложены Koshimizu et al., 1996; Keller et al., 1996; Piquet-Pellorce, 1994; Rose et al., 1994; Park and Han, 2000; Guan et al., 2006; Dykstra et al., 2006).

Популяция клеток-мишеней может включать соматические клетки, стволовые клетки и клетки-предшественники. Стволовые клетки могут быть получены из существующих линий клеток или выделены из сохраненных, находящихся в банке или криоконсервированных источников. Типичные источники стволовых клеток включают костный мозг, периферическую кровь, плацентарную кровь, амниотическую жидкость, пуповинную кровь, жировую ткань, эмбрионы животных (за исключением человека) и т.д.

Соматические клетки, в частности циркулирующие лейкоциты и другие клетки, не являющиеся клетками-предшественниками/стволовыми клетками, можно также поместить в те же самые условия культивирования, как описано выше для стволовых клеток/клеток-предшественников, эффективные для того, чтобы в результате они приобрели свойства стволовых клеток/клеток-предшественников.

Изобретение также раскрывает получение (например, заявка на патент США 20030099621) клеток-мишеней из стволовых клеток/клеток-предшественников, которые можно сделать относительно устойчивыми к инфицированию ВИЧ и/или репликации ВИЧ.

Тем не менее, подразумевается, что любой способ дифференцировки ранее размноженных стволовых клеток/клеток-предшественников/лейкоцитов в требуемые клетки-мишени можно использовать в рамках объема данного изобретения до тех пор, пока не будут получены функциональные клетки-мишени, относительно устойчивые к инфицированию ВИЧ, и/или репликации ВИЧ, и/или транскрипции ВИЧ.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор на основе вируса упаковывается одним или несколькими белками оболочки нативных вирусов ВИЧ, придающих терапевтическому вирусу способность инфицировать любую клетку, которую способны инфицировать нативные штаммы ВИЧ.

Клетки, выбранные для применения в данном изобретении, в некоторых случаях будут доступны (например, стволовые клетки пуповины, стволовые клетки костного мозга, сперматогонии и первичные половые клетки яичка, стволовые клетки, выделенные от амниотической жидкости, стволовые клетки, выделенные из кожи, и т.д.). Такие клетки можно выделить из тканей, в которых они находятся, любыми известными в данной области техники средствами.

Другие выбранные клетки могут включать перепрограммированные клетки, индуцированные мультипотентные клетки, индуцированные плюрипотентные клетки и т.д.

В соответствии с аспектом настоящего изобретения приводится способ получения требуемой линии клеток, типа клеток или класса клеток из выбранных клеток. В целом, способ включает культивирование выбранных клеток и/или их потомства в условиях, стимулирующих рост выбранных клеток с оптимальной скоростью роста. Получаемую в результате популяцию клеток затем культивируют в условиях, стимулирующих клеточный рост при скорости, которая обычно меньше оптимальной скорости, и в присутствии средства, стимулирующего дифференцировку клеток в требуемую линию клеток, тип клеток или класс клеток (например, CD4+ Т-клетки).

Настоящее изобретение также раскрывает размножение выбранных клеток и/или их потомства в культуре до или после трансфекции терапевтическим вектором любыми известными в данной области техники средствами (например, заявка на патент США 20060099177). Такие способы также включают инкубацию с LIF, фактором стволовых клеток, IL-6, IL-7, онкостатином-М и/или кардиотропином-1 и другими цитокинами, усиливающими рост, и т.д.

Настоящее изобретение далее раскрывает направленную дифференцировку клеток, трансфицированных терапевтическим вектором (терапевтическими векторами), в требуемые типы клеток посредством дальнейшей инкубации в средах, содержащих соответствующие цитокины и факторы роста, такие как колониестимулирующие факторы, такие как M-CSF (CSF-1), GM-CSF, IL-7, любой цитокин, стимулирующий дифференцировку CD4+ Т-клеток, и т.д.

Трансфекция

Генетическая модификация выбранных клеток и клеток-мишеней, будь то экзогенные клетки или эндогенные клетки, может быть выполнена согласно любому опубликованному или неопубликованному способу, известному в данной области техники (например, патенты США №№6432711, 05593875, 05783566, 5928944, 05910488, 05824547 и т.д.), или другими общепринятыми средствами. Подходящие способы трансформации клеток-хозяев можно найти в руководстве Sambrook et al. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory press (1989)) и других лабораторных пособиях.

Успешно трансфицированные клетки можно идентифицировать с помощью протоколов отбора с вовлечением маркеров, таких как гены устойчивости к антибиотиком, в дополнение к исследованиям экспрессии РНК и морфологическим анализам. Клоны от успешно трансфицированных клеток, экспрессирующие соответствующую экзогенную ДНК на соответствующих уровнях, можно сохранить как линии клеток посредством криоконсервации (с использованием любого соответствующего способа криоконсервации, известного в данной области).

Селектируемые маркеры (например, гены устойчивости к антибиотикам) могут включать маркеры, придающие устойчивость к лекарственным средствам, таким как G418, гигромицин, ампициллин и бластицидин и т.д. Клетки, содержащие представляющий интерес ген, можно идентифицировать посредством отбора с помощью лекарственного средства, где клетки, в которые был включен селектируемый маркерный ген, выживают, а другие погибают.

В данном документе описывается теоретическое обоснование для вариантов осуществления данного изобретения, однако это обсуждение ни в коем случае нельзя рассматривать как имеющее обязательную силу или ограничивающее настоящее изобретение. Специалисты в данной области техники поймут, что на практике можно осуществить различные варианты осуществления данного изобретения, независимо от модели, используемой для описания теоретического обоснования данного изобретения.

Далее данное изобретение будет описано и проиллюстрировано на основе приведенных ниже примеров; однако, объем настоящего изобретения не следует ограничивать ими.

Пример 1: Построение трансгенных векторов, подходящих для применения в настоящем изобретении.

Подходящие векторы на основе лентивирусов EGFP-Numb и EGFP-Numblike и EGFP-X (где X является любым трансгеном, описанным в настоящем изобретении) можно получить посредством клонирования в соответствующий вектор на основе вирусов (например, двухгенный вектор HIV-EGFP-HSA (Reiser et al., 2000)). Для ПЦР-амплификации кДНК изоформ Numb и Numblike и клонирования в генетический вектор можно выбрать праймеры-адаптеры. При подготовке к клонированию генный вектор расщепляют ферментами. Затем кДНК каждого трансгена вставляют в кодирующий участок nef, ранее занимаемый кДНК ЧСА. УЗФБ (EGFP - усиленный зеленый флуоресцентный белок) и промотор, соответствующий для популяции клеток (например, CMV-ie или EF-1 альфа), были ранее вставлены в вирусный кодирующий участок. Генетические конструкты могут включать основную часть вектора и трансактиватор, который регулирует промотор, функционально связанный с гетерологичными последовательностями нуклеиновой кислоты.

Примеры векторов на основе ретровирусов, которые можно использовать, включают векторы, полученные на основе вируса лейкоза мышей Молони, вируса саркомы мышей Молони, вируса саркомы Рауса, FIV и ВИЧ, но не ограничиваются ими. Соответствующие векторы экспрессии - это такие векторы, которые можно использовать для трансфекции ДНК или РНК в эукариотические клетки. Такие векторы включают, но не ограничиваются ими, прокариотические векторы, например, бактериальные векторы; эукариотические векторы, например, дрожжевые векторы и векторы на основе грибов; и векторы на основе вирусов, такие как, но без ограничений, векторы на основе лентивирусов, векторы на основе аденовирусов, векторы на основе аденоассоциированных вирусов и векторы на основе ретровирусов.

Неспособный к репликации вектор pcDNA 6.2/EmGFP-Bsd/V5-DEST является примером подходящего вектора экспрессии (Invitrogen) и позволяет экспрессировать искусственные олигонуклеотиды (например, микроРНК), перемещенные из вектора pcDNA 6.2 GW/miR, имеющего способность расщеплять целевые последовательности. Эти векторы включают фланкирующие последовательности и петельные последовательности из эндогенной микроРНК, управляющие вырезанием сконструированной микроРНК из более длинного транскрипта Pol II (пре-микроРНК).

Сочетание множества последовательностей микроРНК, направленных против специфических эндогенных разновидностей РНК, увеличивает вероятность успеха в ослаблении экспрессии последовательности-мишени. Последовательности микроРНК могут быть функционально связаны с регулируемыми или тканеспецифическими промоторами.

При использовании векторов на основе лентивирусов для экспрессии генов полученный (полученные) в результате вектор (векторы), кодирующий (кодирующие) Numb/Numblike, и/или другой трансгенный вектор (другие трансгенные векторы) этого изобретения становятся способными устойчиво трандуцировать как делящиеся, так и неделящиеся типы клеток.

В предпочтительном варианте осуществления полученный (полученные) в результате вектор (векторы), кодирующий (кодирующие) Numb/Numblike, и/или другой трансгенный вектор (другие трансгенные векторы) этого изобретения содержат множество последовательностей искусственных олигонуклеотидов, находящиеся под управлением одного или нескольких промоторов, для снижения экспрессии определенных изоформ numb и/или numblike.

Пример 2: Другой пример подходящего вектора - вектор на основе ретровируса. Ретровирусы - это РНК-вирусы, которые содержат РНК-геном. Гены gag, pol и env фланкируются последовательностями длинных терминальных повторов (LTR-последовательностями). 5' и 3' LTR-последовательности способствуют транскрипции и полиаденилированию иРНК.

Вектор на основе ретровируса может обеспечить регулируемый трансактивирующий элемент, участок внутренней посадки рибосомы (IRES), маркер отбора и целевой гетерологичный ген, управляемый регулируемым промотором.

В качестве альтернативы, под контролем множества промоторов могут экспрессироваться множество последовательностей. Наконец, вектор на основе ретровируса может содержать действующие в цис-положении последовательности, необходимые для обратной транскрипции и интеграции. При инфицировании происходит обратная транскрипция РНК в ДНК, которая эффективно интегрируется в геном хозяина. Рекомбинантный ретровирус данного изобретения генетически модифицирован таким образом, чтобы некоторые из ретровирусных, инфекционных генов природного вируса были удалены и в некоторых случаях заменены целевой последовательностью нуклеиновой кислоты для генетической модификации клетки. Последовательности могут быть экзогенной ДНК или РНК, в ее естественной или измененной форме.

Пример 3: Служащие в качестве примера способы создания вектора (векторов), кодирующего (кодирующих) Numb/Numblike, и/или другого трансгенного вектора (других трансгенных векторов) данного изобретения.

Способы создания получаемого (получаемых) в результате вектора (векторов), кодирующего (кодирующих) Numb/Numblike, и/или другого трансгенного вектора (других трансгенных векторов) данного изобретения включают способы, указанные в Viral Power Lentiviral Expression Systems Manual от Invitrogen, 2007. Вкратце, кассету EmGFP-bsd клонируют как фрагмент PmlI-BlpI в вектор pLenti6/R4R2/V5-DEST, в то время как кассеты miR-длинная (PRR+) изоформа numb или miR-короткая изоформа numb/numblike одновременно переносят BP-реакцией в pDONR221. Затем кассеты с регулируемым промотором (регулируемыми промоторами) и miR-изоформами скрещивают посредством Multisite LR реакции, в модифицированный вектор pLenti6/EmGFP-bsd/R4R2-DEST.

Таким образом можно создать множество векторов, включающих различные сочетания искусственных олигонуклеотидов и трансгенных кассет.

Последовательность вектора pLenti6/R4R2/V5-DEST (SEQ ID NO: 1):

Пример 4: Дополнительные способы создания терапевтического вектора (терапевтических векторов).

"Пакующие линии клеток", происходящие от линий фибробластов человека и/или животных, получают в результате трансфекции или инфицирования линий нормальных клеток вирусными структурными генами gag, pol и env. С другой стороны, пакующие линии клеток продуцируют РНК, лишенную psi-последовательности, таким образом вирусные частицы, полученные от пакующей клетки, не содержат генов gag, pol или env. Как только ДНК терапевтического вектора, содержащая psi-последовательность (наряду с терапевтическим геном), будет введена в пакующую клетку посредством трансфекции или инфицирования, пакующая клетка сможет производить вирионы, способные к переносу терапевтической РНК в конечную клетку-мишень (например, CD4+ клетку).

"Диапазон инфективности" терапевтического вектора (терапевтических векторов) определяется пакующей линией клеток. Доступен ряд пакующих линий клеток для получения вируса, подходящего для инфицирования широкого диапазона типов клеток человека. При этом, эти пакующие линии клеток способны заключать в капсид векторы на основе вирусов, происходящие от вирусов, которые в природе обычно инфицируют различные виды животных. Например, векторы, происходящие от SIV или MMLV, могут быть упакованы заключающими в капсид линиями клеток GP120.

Далее приведен служащий в качестве примера протокол получения супернатанта с компонентами терапевтического вируса:

1. Двадцать микрограммов вектора на основе ретровируса смешивают с 2-3 микрограммами вирусной ДНК, содержащей селектируемый маркерный ген (например, ген устойчивости к антибиотикам) легким постукиванием в 0,8-1 миллилитре забуференного солевого раствора Hepes (pH=7,05) в пластмассовой пробирке объемом 1,5 мл.

2. Семьдесят микролитров 2М CaCl2. добавляют к смеси повторным легким постукиванием.

3. Когда в пробирке начинает появляться синий осадок, продукт следует осторожно нанести на 30% конфлюэнтный слой пакующих клеток (от любого из ряда коммерческих продавцов). Смесь ДНК следует наносить только после того, как из пакующих клеток будет удалена среда.

4. Пакующие клетки ставят на инкубацию на 20-30 минут при комнатной температуре (25 градусов Цельсия), а затем их возвращают в инкубатор, где поддерживается температура 36-38 градусов Цельсия, на 3,5 часа.

5. В течение 3 минут добавляйте 3,5-4 миллилитра забуференного Hepes солевого раствора, содержащего 15% глицерин, затем промойте клетку модифицированной по способу Дульбекко средой Игла (DMEM)+10% FBS х2.

6. Снова добавьте DMEM+10% FBS и инкубируйте клетки в течение 20 часов при 37 градусах Цельсия.

7. Удалите и профильтруйте среду, содержащую терапевтические вирусные частицы.

Лишний супернатант с вирусными компонентами сразу помещают на хранение или концентрируют и хранят при -80 градусах Цельсия. Супернатант может храниться с 5-8 микрограммами полибрена для увеличения эффективности инфицирования клетки-мишени. В ином случае полибрен может быть исключен или добавлен непосредственно перед инфицированием.

8. Устойчивые линии клеток-продуцентов можно создать посредством разделения пакующих линий клеток 1 на 20 или 1 на 40 и затем инкубированием этих клеток в течение до 10 дней (меняя питательную среду каждые три дня) в среде, содержащей лекарственные средства для отбора (например, определенные антибиотики, соответствующие трансфицированным генам устойчивости).

9. Через 10 дней отдельные колонии собирают, делят на аликвоты и замораживают для хранения.

Исследование инфективности/титра ретровируса выполняют нанесением определенного объема супернатанта с вирусными компонентами на слой конфлюэнтных "тестовых" клеток, таких как клетки NIH 3Т3, высеянных с конфлюэнтностью 20%. После 2-3 делений клеток (24-36 часов для клеток NIH 3Т3) производят подсчет колоний "тестовых" клеток, инкубированных при 37 градусах в среде, содержащей антибиотик. Титр супернатанта рассчитывают на основе этого подсчета колонии с помощью следующей формулы:

Колониеобразующие единицы/мл = идентифицированные колонии × 0,5 (фактор разделения) / объем вируса (мл)

Точность этого расчета возрастает, если производится тестирование больших объемов супернатанта по многим чашкам «тестовых» клеток.

Нанесение супернатанта с компонентами терапевтического вируса на клетки-мишени можно выполнить различными средствами, в зависимости от клинической ситуации.

Пример 5: Ростовая среда для выбранных клеток

Выбранные клетки можно наращивать/выращивать в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM), дополненной глютамином, бета-меркаптоэтанолом, 10% (по объему) лошадиной сывороткой и человеческим рекомбинантным фактором, ингибирующим лейкоз (LIF). LIF устраняет необходимость поддержания выбранных клеток на фидерных слоях клеток (которые также можно использовать) и является важным для поддержания выбранных клеток в недифференцированном, мультипотентном или плюрипотентном состоянии, такие клетки можно поддерживать в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM), дополненной глютамином, бета-меркаптоетанолом, 10% (по объему) лошадиной сывороткой и человеческим рекомбинантным фактором, ингибирующим лейкоз (LIF). LIF устраняет необходимость поддержания клеток на фидерных слоях клеток (которые также можно использовать) и является необходимым для поддержания клеток в недифференцированном состоянии (в соответствии с патентом США 6432711).

Чтобы инициировать дифференцировку выбранных клеток в нейроны, клетки трипсинизируют, и отмывают от LIF, и помещают в DMEM, дополненную 10% FBS (эмбриональная бычья сыворотка). После ресуспендирования в DMEM и 10% FBS 1×106 клеток высеивают в 5 мл DMEM, 10% FBS, 0,5 микроМ ретиноевую кислоту в 60-миллиметровых бактериологических чашках Петри Fisher, где клетки, как ожидается, сформируют небольшие агрегаты. Агрегация способствует надлежащей дифференцировке клеток. Высокоэффективную трансфекцию соответствующими нейрональными транскрипционными факторами можно осуществить до или после высеивания в DMEM, FBS и ретиноевую кислоту. (Подробнее см. патенты США 6432711 и 5453357).

Пример 6: Соответствие HLA. Выбранные клетки (например, пуповинная кровь или клетки из любого другого подходящего источника и/или их потомство) можно подвергнуть скринингу, генетически модифицировать (факультативно), нарастить и индуцировать для начала дифференцировки в требуемый тип (требуемые типы) клеток (факультативно). Затем клетки трансплантируют согласно стандартным протоколам трансплантации стволовых клеток. В определенных случаях клетки можно трансплантировать пациентам без соответствия HLA.

Пример 7: В некоторых редких случаях может потребоваться ввести пациентам векторы, кодирующие трансген, чтобы стимулировать или ингибировать клеточное деление или клеточную дифференцировку in vivo.

Пример 8: Генетическая модификация выбранных клеток.

Генетическую модификацию in vitro экзогенных или эндогенных клеток пациента можно выполнить согласно любому опубликованному или неопубликованному способу, известному в данной области техники (например, патенты США №№6432711, 05593875, 05783566, 5928944, 05910488, 05824547 и т.д.), или другими общепринятыми средствами. Подходящие способы трансформации клеток-хозяев можно найти у Sambrook et al. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory press (1989)) и в других лабораторных пособиях.

Успешно трансфицированные клетки идентифицируют по протоколам отбора с вовлечением маркеров, таких как гены устойчивости к антибиотикам, в дополнение к исследованию экспрессии РНК и морфологическим анализам. Клоны от успешно трансфицированных клеток, экспрессирующие соответствующую экзогенную ДНК на соответствующих уровнях, могут быть сохранены как линии клеток посредством криоконсервирования (с использованием любого соответствующего способа криоконсервации, известного в данной области техники).

Селектируемые маркеры (например, гены устойчивости к антибиотикам) могут включать гены, придающие устойчивость к таким лекарственным средствам, как G418, гигромицин и метотрексат. Клетки, содержащие интересующий ген, могут быть идентифицированы посредством отбора при помощи лекарственного средства, при котором клетки, включившие селектируемый маркерный ген, выживают, а другие погибают.

Данное изобретение раскрывает выбор генетически модифицированных клеток как "выбранные клетки" данного изобретения. Выражение генетическая модификация относится к изменению клеточного генотипа посредством введения природных или искусственных нуклеиновых кислот в выбранные клетки и/или их потомство или иммортализованные линии клеток и/или их потомство с помощью любых известных в данном области техники средств. В качестве альтернативы, условия культивирования, которые индуцируют устойчивые изменения в паттернах генной экспрессии, как описывается в данном документе, представляют собой генетическую модификацию. Модификация стволовых клеток, независимо от того, получены ли они из мозга хозяина, эндогенных донорских источников, экзогенных донорских источников или линий клеток, представляет собой возможный подход для лечения определенных заболеваний человека, особенно заболеваний нервной системы человека.

Генетические модификации, на которые распространяется данное раскрытие, включают, но не ограничиваются следующим: генетические модификации, выполненные in vivo; модификации, изменяющие активность или количество метаболических ферментов, экспрессируемых эндогенными или экзогенными выбранными клетками и/или их потомством; модификации, изменяющие активность, количество или антигенность клеточных белков; модификации, изменяющие активность или количество белков, вовлеченных в проводящие пути сигнальной трансдукции; модификации, изменяющие HLA-тип; модификации, изменяющие клеточную дифференцировку; модификации, изменяющие неопластический потенциал; модификации, изменяющие клеточную дифференцировку; модификации, изменяющие количество или активность структурных белков; модификации, изменяющие количество или активность связанных с мембраной белков (структурных или ферментных); модификации, изменяющие активность или количество белков, вовлеченных в репарацию ДНК и обслуживание хромосом; модификации, изменяющие активность или количество белков, вовлеченных в клеточный транспорт; модификации, изменяющие активность или количество ферментов; модификации, изменяющие активность или количество белков, вовлеченных в формирование и обслуживание синапса; модификации, изменяющие активность или количество белков, вовлеченных в разрастание нейрита или разрастание и формирование аксона; модификации, изменяющие количество или активность ферментов, продуцирующих антиоксиданты, в пределах клетки; модификации, приводящие к измененной посттрансляционной модификации клеточных белков; модификации, изменяющие активность или количество белков, вовлеченных в другие аспекты клеточной репарации, и изменения, которые увеличивают продолжительность жизни клетки (например, продуцирование теломеразы). Такие белки, как те, что упомянуты выше, могут кодироваться посредством ДНК или РНК, происходящей от генома человека или других геномов животных, растений, вирусов или бактерий. Данное изобретение также распространяется на de novo разработанные последовательности.

Кроме того, данное изобретение имеет отношение к in situ генетической модификации выбранных клеток и/или их клеток-потомков для лечения заболевания. Эндогенные стволовые клетки можно модифицировать in situ посредством прямой инъекции или введением ДНК- или РНК-векторов, включая вирусы, ретровирусы, липосомы и т.д. в вещество ткани или в соответствующую часть желудочковой системы мозга. С 1992 года мы таким образом модифицировали тысячи стволовых клеток/клеток-предшественников и множество тысяч клеток-потомков. Наши данные показывают, что данный способ модификации клеток-предшественников дает в результате огромное разнообразие модифицированных типов клеток по всей нервной системе, и этот способ никогда не приводил к отрицательным последствиям.

Пример 9: Введение генетических векторов в хозяина

В предпочтительном варианте осуществления эндогенные клетки трансфицируют in vivo векторами, такими как те, что описаны в данном документе, посредством введения терапевтического вектора (терапевтических векторов) в кровь, ткани, нервную систему, костный мозг и т.д. хозяина. Самый лучший результат может быть достигнут путем модификации большого количества эндогенных клеток-мишеней. Это может быть достигнуто при использовании устройства наподобие катетера соответствующего размера или иглы для введения терапевтического вектора (терапевтических векторов) в систему венозного или артериального кровообращения, в определенную ткань, например мышечную ткань, или в нервную систему. В предпочтительном варианте осуществления вирус псевдотипируют гликопротеидом VSV-G оболочки и нативными белками env ВИЧ-1.

Пример 10: Инъекция в нервную систему

Трансплантация выбранных клеток (из ростовой среды или среды для дифференцировки) в эмбриональную нервную систему или генетическая модификация эндогенных эмбриональных клеток с помощью генетических векторов может быть выполнена следующим образом: в стерильных условиях матку и плоды визуализируют ультразвуком или другим радиологическим устройством. В качестве альтернативы матка может быть подвергнута хирургическому воздействию с целью облегчения прямой идентификации эмбриональных опознавательных точек черепа. Выбранные клетки можно затем ввести с помощью инъекции (с использованием катетера или иглы соответствующего размера) в желудочковую систему, герминативную зону (герминативные зоны) или в вещество нервной системы. Инъекции могут быть выполнены в определенных случаях через брюшную стенку матери, маточную стенку и плодные оболочки в плод. Точность инъекции контролируют прямым наблюдением, ультразвуком, контрастом, способами, основанными на применении радиационных изотопов, или любыми другими известными средствами рентгенологического контроля.

В соответствующих стерильных условиях прямую идентификацию эмбриональных ориентиров черепа осуществляют визуально, а также посредством физического осмотра и пальпации вместе со стереотаксическим наведением и наведением по излучению. После культивирования клеток соответствующее количество выбранных или дифференцирующихся клеток можно ввести путем инъекции или другими средствами в желудочковую систему, герминативные зоны или в вещество нервной системы. Точность инъекции контролируют прямым наблюдением, ультразвуком или другим рентгенологическим контролем.

При определенных неврологических заболеваниях нервной системы у взрослых, таких как болезнь Хантингтона и болезнь Паркинсона, избирательно затрагиваются клетки определенной части мозга. В случае болезни Паркинсона - это допаминергические клетки черной субстанции. При таких специфичных для определенного места заболеваниях, поражающих взрослых, локализованную трансплантацию клеток можно осуществить с помощью трансплантации под рентгенологическим контролем дифференцирующихся клеток в стерильных условиях. Рентгенологический контроль может включать использование КТ (компьютерная томография) и/или МРТ (магнитно-резонансная томография), и можно воспользоваться методиками, основанными на контрасте или на применении радиоактивных изотопов, для отслеживания вводимых материалов.

При определенных неврологических заболеваниях, таких как некоторые нарушения, связанные с накоплением метаболитов, затрагиваются клетки, находящиеся в разных областях нервной системы, и самый лучший результат может быть достигнут с помощью генетического модифицирования эндогенных клеток или посредством введения выбранных клеток настоящего изобретения (или из культуральных ростовых сред, или из среды для дифференцировки) в ткань в больших количествах диффузным способом. В нервной системе эти заболевания можно лучше всего лечить внутрижелудочковыми инъекциями (с использованием устройства типа катетер или иглы соответствующего размера) (особенно на ранних стадиях развития), которые делают возможной диффузную модификацию эндогенных клеток или диффузное приживление выбранных клеток, выделенных из ростовых сред и/или сред для дифференцировки. Тем не менее, это распространяется также и на инъекцию клеток в кровеносную систему с той же целью. Однако, что касается любого нарушения, затрагивающего несколько органов или диффузно организм (например, нарушения, связанные с накоплением лизосом, гемоглобинопатии, мышечная дистрофия), то клетки, выделенные из ростовой среды и/или среды для дифференцировки, можно также предпочтительно ввести непосредственно в кровоток и/или висцеральные органы, такие как печень, почки, кишечник, селезенка, надпочечники, поджелудочная железа, легкие и тимус, с помощью эндоскопического контроля и любого подобного катетеру устройства соответствующего размера, что делает возможным диффузное приживление клеток во всем организме, а также специфическое введение и инфильтрацию клеток в выбранные органы.

Пример 11: Доставка клеток с помощью инъекции в кровяной ток и органы кровообращения.

Заболевания одной системы органов можно лечить с помощью генетически модифицированных клеток из другой системы органов. Также, в некоторых случаях может стать очевидным, что выбранные клетки могут интегрироваться и дифференцироваться самостоятельно in vivo в достаточных количествах, если они введены в артериальный, венозный или печеночный кровяной ток после культивирования в ростовых средах и/или средах для дифференцировки. Настоящее изобретение распространяется и на этот подход. При лечении диффузных нарушений мышц (например, мышечные дистрофии), органов, тканей или крови (например, наследственный сфероцитоз, серповидноклеточная анемия, другие гемоглобинопатии и т.д.) можно, например, использовать инъекцию клеток, выделенных из ростовых сред или сред для дифференцировки, в пациента, в частности, в систему кровообращения пациента. Полагают, что этот подход также облегчает ишемические повреждения, такие как инфаркт миокарда, инсульт и т.д., а также травматические повреждения мозга и других тканей. Для практического осуществления настоящего изобретения подходит инъекция таких клеток, полученных в соответствии с данным изобретением, непосредственно в систему кровообращения с помощью иглы или катетера так, чтобы клетки были способны к «хоумингу» в костный мозг, мышцу, почки, легкие и/или любую другую систему органов, а также инъекция непосредственно в пространство костного мозга. Аналогично, инъекции клеток непосредственно в участок поражения при рентгенологическом, ультразвуковом или флуороскопическом контроле, или без него, также подходят для осуществления на практике настоящего изобретения.

Способы выделения выбранных клеток, пригодные для настоящего изобретения, включают описанные Zhao et al., 2006.

В предпочтительном варианте осуществления генетические векторы, кодирующие изоформы numb и/или numblike, включают регулируемые промоторы, функционально связанные с трансгенами Numb или numblike.

В другом предпочтительном варианте осуществления метод трансфекции можно выбрать из таких методов трансфекции, которые предусматривают временную, а не постоянную экспрессию изоформ numb и numblike.

Пример 12. Генетические модификации, служащие в качестве примера

Предполагается, что сотни болезней и клинических состояний можно излечить и/или облегчить с помощью способов настоящего изобретения, включая болезнь Канавана (ASP); болезнь Тея-Сакса (HEXA); синдром Леш-Нихана (HRPT); болезнь Хантингтона (HTT); мукополисахаридоз VII типа; болезнь Ниманна-Пика типа А и типа В; болезнь Сандгоффа (HEXB); болезнь Фабри (GLA); болезнь Ниманна-Пика типа С (NPC1); болезнь Гоше (GBA); болезнь Паркинсона (PARK2 и т.д.); болезнь фон Гиппеля-Линдау, серповидноклеточную анемию (HBB) и другие талассемии, а также подобные заболевания, но не ограничиваясь ими. Эти трансгены могут представлять собой кодирующий участок или части кодирующего участка нормальных генов.

Тем не менее, следует понимать, что объем данного изобретения не нужно ограничивать описанными выше конкретными вариантами осуществления и примерами. Данное изобретение можно осуществлять на практике не только так, как конкретно описано, и оно все так же будет оставаться в пределах объема прилагаемой формулы изобретения.

Пример 13: Служащая в качестве примера последовательность вектора, способного превратить клетки в плюропотентные и экспрессирующие последовательности нуклеиновой кислоты длинной изоформы Numb, Oct-4, Sox-2 и EmGFP под контролем чувствительных к тетрациклину промоторов, представляет собой (SEQ ID NO: 2):

Схематическая карта, соответствующая векторной последовательности, приведенной выше, показана на Фигуре 1.

Вектор можно полностью построить с помощью синтеза гена de novo или частично с помощью клонирования последовательностей кДНК Numb, Sox и OCT3/4 в положение, занимаемое LacZ в векторе pcDNA4tolacZ от Invitrogen. Точно так же помещают ген tetR в вектор Invitrogen pcDNA6/TR. Кодирующие последовательности упоминаемых генов также подходят для клонирования в вектор pcDNA4lacZ.

В качестве альтернативы, ген tetR можно трансфицировать в клетки-мишени отдельно с помощью вектора pcDNA6/TR в комбинации с вектором, включающим в себя приведенную здесь последовательность минус ген tetR и его PCMV-промотор.

Аналогично, можно использовать множество векторов до тех пор, пока не станут присутствовать элементы, подобные элементам, включенным в вышеупомянутую последовательность. Это может уменьшить вероятность конкуренции промоторов. Понятно, что вместо промоторов, чувствительных к тетрациклину можно использовать другие промоторные элементы, зависящие от условий.

Пример 14. Ожидается, что внутривенное и другое введение плюрипотентных стволовых клеток, полученных согласно описанным в данном документе способам (или другим опубликованным способам), один или несколько раз могут обеспечить организму клетки для замены, и что результатом такого введения может стать увеличение продолжительности жизни или улучшение здоровья пациента, страдающего от возрастного старения.

Пример 15. Получение половых клеток.

Данное изобретение распространяется на получение половых клеток из мультипотентных, плюрипотентных и/или самообновляющихся стволовых клеток, полученных согласно описанным в данном документе способам (или согласно другим опубликованным способам). Получение таких половых клеток может быть полезным для лечения бесплодия и получения эмбрионов in vitro (например, Hubner et al., 2003; Kehler et al., 2005; Nayernia et al., 2006a; Nayernia et al., 2006b; Drusenheimer et al., 2007; Moore et al., 2007 и т.д.)

Пример 16: Создание трансгенных животных.

Настоящее изобретение распространяется на создание трансгенных животных. Как и в случае других плюрипотентных клеток, плюрипотентные клетки, полученные по описанным в данном документе способам (или другим опубликованным способам), можно использовать для получения трансгенных животных любым известным в данной области техники способом.

Пример 17: Построение терапевтических векторов

Примеры векторов на основе ретровирусов, которые можно использовать, включают векторы, полученные на основе вируса лейкоза мышей Молони, вируса саркомы мышей Молони, вируса саркомы Рауса, FIV и ВИЧ, но не ограничиваются ими. Соответствующие векторы экспрессии - это векторы, которые можно использовать для трансфекции ДНК или РНК в эукариотические клетки. Такие векторы включают, но не ограничиваются ими, прокариотические векторы, например, бактериальные векторы; эукариотические векторы, например, дрожжевые векторы и векторы на основе грибов; векторы на основе вирусов, такие как (не ограничиваются ими) векторы на основе лентивирусов, векторы на основе аденовирусов, векторы на основе аденоассоциированных вирусов, и векторы на основе ретровирусов.

Неспособные к репликации векторы pcDNA 6.2 GW/miR и pcDNA 6.2/EmGFP-Bsd/V5-DEST являются примерами подходящих векторов экспрессии (Invitrogen) и позволяют экспрессировать искусственные олигонуклеотиды (например, микроРНК), у которых есть способность расщеплять целевые последовательности. Эти векторы включают в себя фланкирующие последовательности и петельные последовательности из эндогенной микроРНК, управляющие вырезанием сконструированной микроРНК из более длинного транскрипта PolII (пре-микроРНК).

В качестве альтернативы включение psi-последовательности ВИЧ позволяет терапевтическому вектору конкурировать с геномом природного ВИЧ за упаковку в вирусные частицы, также ингибируя передачу ВИЧ.

Благодаря комбинированию множества последовательностей микроРНК, направленных против единственной мишени, увеличивается вероятность успеха в ослаблении экспрессии последовательности-мишени. Последовательности микроРНК могут быть функционально связаны с тканеспецифичными промоторами, такими как промотор EF-1 альфа, специфический для любых Т-клеток промотор или специфический для макрофагов промотор, с обеспечением экспрессии в требуемых типах клеток.

При использовании векторов доставки (DEST) на основе лентивирусов от Invitrogen для генной экспрессии получаемый (получаемые) в результате терапевтический вектор (терапевтические векторы) становится (становятся) способным (способными) к устойчивой трансфекции как делящихся, так и неделящихся типов клеток.

В предпочтительном варианте осуществления терапевтический вектор (терапевтические векторы) содержит (содержат) множественные последовательности искусственных олигонуклеотидов, находящиеся под управлением одного или нескольких промоторов для уменьшения экспрессии CXCR4, CCR5 и/или любого другого клеточного белка, который, как известно, играет роль корецептора для ВИЧ-инфекции у клеток-мишеней.

В одном терапевтическом векторе (созданном в 2006 г.) четыре последовательности микроРНК, целенаправленно воздействующие на корецепторы CXCR4 и CCR5, клонировали в вектор pcDNA 6.2 GW/miR наряду с последовательностями РНК-ловушек, которые целенаправленно взаимодействуют с TAR и RRE ВИЧ-2.

Генетические конструкты могут включать основную часть вектора и трансактиватор, который регулирует промотор, функционально связанный с гетерологичными последовательностями нуклеиновой кислоты.

Другой пример подходящего вектора - вектор на основе ретровируса. Ретровирусы - это РНК-вирусы, которые содержат РНК-геном. Гены gag, pol и env фланкируются последовательностями длинных терминальных повторов (LTR). 5' и 3' LTR-последовательности способствуют транскрипции и полиаденилированию иРНК.

Вектор на основе ретровируса может обеспечить регулируемый трансактивирующий элемент, участок внутренней посадки рибосомы (IRES), маркер отбора и целевой гетерологичный ген, управляемый регулируемым промотором.

В качестве альтернативы множество последовательностей могут экспрессироваться под контролем множества промоторов. Наконец, вектор на основе ретровируса может содержать действующие в цис-положении последовательности, необходимые для обратной транскрипции и интеграции. При инфицировании происходит обратная транскрипция РНК в ДНК, которая эффективно интегрируется в геном хозяина. Рекомбинантный ретровирус данного изобретения генетически модифицирован таким образом, чтобы некоторые из ретровирусных, инфекционных генов природного вируса были удалены и в некоторых вариантах осуществления заменены целевой последовательностью нуклеиновой кислоты для генетической модификации клетки. Последовательности могут быть экзогенной ДНК или РНК в ее природной или измененной форме.

Пример 18: Способы создания терапевтического вектора, служащие в качестве примера.

Способы создания терапевтического вектора (терапевтических векторов) включают способы, представленные в Viral Power Lentiviral Expression Systems Manual от Invitrogen (включенном по ссылке в данный документ). Вкратце, кассету EmGFP-bsd клонируют как фрагмент PmlI-BlpI в вектор pLenti6/R4R2/V5-DEST, в то время как кассету miR-ловушки одновременно переносят BP-реакцией в pDONR221. Затем промотор EF1a и miR-ловушку скрещивают Multisite LR реакцией в модифицированный вектор pLenti6/EmGFP-bsd/R4R2-DEST.

Последовательность вектора pLenti6/R4R2/V5-DEST (SEQ ID NO: 1):

Служащая в качестве примера последовательность кассеты miR-ловушки (SEQ ID NO: 3):

Пример 19: Способы размножения/пролиферации стволовых клеток/клеток-предшественников in vivo.

В целях получения больших количеств клеток-мишеней, относительно устойчивых к 1) инфицированию ВИЧ, и/или 2) репликации ВИЧ, и/или 3) транскрипции ВИЧ, клетки-предшественники/стволовые клетки можно вырастить в модифицированной по способу Дульбекко минимальной необходимой среде (DMEM), дополненной глютамином, бета-меркаптоэтанолом, 10% (по объему) лошадиной сывороткой и человеческим рекомбинантным фактором, ингибирующим лейкоз (LIF). LIF устраняет необходимость в поддержании клеток-предшественников/стволовых клеток на фидерных слоях клеток (которые также можно использовать) и является необходимым для поддержания клеток-предшественников/стволовых клеток в недифференцированном состоянии.

Пример 20: Стволовые клетки собирают от особей, клетки трансфицируют терапевтическими векторами, затем готовят для трансплантации стандартными способами, с HLA-типированием и соответствием или без него.

Пример 21: Образцы пуповинной крови получают из банка пуповинной крови. Затем клетки трансфицируют терапевтическим вектором с полезными последовательностями, затем готовят для трансплантации стандартными способами, с HLA-типированием и соответствием или без него.

Пример 22: Примеры последовательностей искусственных олигонуклеотидов, подходящих для включения в терапевтический вектор.

Настоящее изобретение распространяется на любые последовательности искусственных олигонуклеотидов, успешно уменьшающие белковую экспрессию целевых последовательностей >70%.

Настоящее изобретение также распространяется на любые последовательности искусственных олигонуклеотидов, успешно уменьшающие способность клеток-мишеней поддерживать репликацию ВИЧ на >70% или в меньшей, но терапевтической степени, или вирусную активность ВИЧ на >70% или в меньшей, но терапевтической степени.

Примеры последовательностей микроРНК включают последовательности микроРНК, полученные с помощью алгоритма IVGN (Invitrogen). Последовательности микроРНК, целенаправленно воздействующие на ген CXCR4, включают верхнюю цепь: 5'-TGCTGATACCAGGCAGGATAAGGCCAGTTTTGGCCACTGACTGACTGGCCTTACTGCCTGGTAT-3' (SEQ ID NO: 4) и нижнюю цепь: 5'-CCTGATACCAGGCAGTAAGGCCAGTCAGTCAGTGGCCAAAACTGGCCTTATCCTGCCTGGTATC-3' (SEQ ID NO: 5); а также верхнюю цепь: 5'-TGCTGTGACCAGGATGACCAATCCATGTTTTGGCCACTGACTGACATGGATTGCATCCTGGTCA-3' (SEQ ID NO: 6) и нижнюю цепь: 5'-CCTGTGACCAGGATGCAATCCATGTCAGTCAGTGGCCAAAACATGGATTGGTCATCCTGGTCAC-3' (SEQ ID NO: 7).

Точно так же последовательности микроРНК, целенаправленно воздействующие на ген CCR5, включают верхнюю цепь: 5'-TGCTGATCGGGTGTAAACTGAGCTTGGTTTTGGCCACTGACTGACCAAGCTCATTACACCCGAT-3' (SEQ ID NO: 8) и нижнюю цепь: 5'-CCTGATCGGGTGTAATGAGCTTGGTCAGTCAGTGGCCAAAACCAAGCTCAGTTTACACCCGATC-3' (SEQ ID NO: 9); а также верхнюю цепь 5'-TGCTGATAGCTTGGTCCAACCTGTTAGTTTTGGCCACTGACTGACTAACAGGTGACCAAGCTAT-3' (SEQ ID NO: 10) и нижнюю цепь: 5'-CCTGATAGCTTGGTCACCTGTTAGTCAGTCAGTGGCCAAAACTAACAGGTTGGACCAAGCTATC-3' (SEQ ID NO: 11).

Пример 23: Примеры РНК-ловушки, подходящей для включения в терапевтический вектор. Настоящее изобретение также распространяется на любые последовательности ловушек, успешно уменьшающие способность клеток-мишеней поддерживать репликацию ВИЧ на >70% или в меньшей, но терапевтической степени, или вирусную активность ВИЧ на >70% или в меньшей, но терапевтической степени.

Примерной последовательностью TAR-ловушки является (SEQ ID NO: 12)

gtcgctctgcggagaggctggcagattgagccctgggaggttctctccagcactagcaggtagagcctgggtgttccctgctagactctcaccagtgcttggccggcactgggcagacggctccacgcttgcttgcttaaagacctcttaataaagctgc (Browning et al., 1999)

Примерной последовательностью RRE-ловушки является (SEQ ID NO: 13)

tgctagggttcttgggttttctcgcaacagcaggttctgcaatgggcgcggcgtccctgaccgtgtcggctcagtcccggactttactggccgggatagtgcagcaacagcaacagctgttggacgtggtcaagagacaacaagaactgttgcgactgaccgtctggggaacgaaaaacctccaggcaagagtcactgctatagagaagtacctacaggaccaggcgcggctaaattcatggggatg (Dillon et al., 1990).

Пример 24: Фланкирующие последовательности, обеспечивающие стабильность РНК-ловушек.

Ниже приведены примеры подходящих фланкирующих последовательностей для РНК ловушек:

GUGCUCGCUUCGGCAGCACGTCGAC ---ПОСЛ. TAR-ЛОВУШКИ --- (SEQ ID NO: 14) UCUAGAGCGGACUUCGGUCCGCUUUU (SEQ ID NO: 15)

GUGCUCGCUUCGGCAGCACGTCGAC ---ПОСЛ. RRE-ЛОВУШКИ --- (SEQ ID NO: 16) UCUAGAGCGGACUUCGGUCCGCUUUU (SEQ ID NO: 17)

Ранее было продемонстрировано, что последовательности-ловушки, фланкированные шпильками с обеих сторон, 19 нуклеотидами (ntds) РНК U6 с 5' стороны, а также 3'-стеблем, непосредственно предшествующим терминатору поли-U для POLIII, отличаются более высокой стабильностью. Ожидается, что такая схема защитит от 3'-5' эндонуклеазной атаки и уменьшит возможности взаимодействия 3'-трейлера с петлей РНК-вставки. Поскольку присутствуют только первые 3/4 последовательности тРНК, то 5' конец вставки должен быть защищен, а экспорт из ядра должен быть предотвращен (Good et al., 1997).

Пример 25: Введение терапевтического вектора хозяину

В предпочтительном варианте осуществления стволовые клетки/клетки-предшественники крови и клетки-мишени трансфицируют терапевтическим вектором (терапевтическими векторами) (или связанным терапевтическим вирусом) in vivo посредством введения терапевтического вектора (терапевтических векторов) в кровь, ткани или костный мозг хозяина и т.д. Наилучший результат может быть достигнут путем модификации большого количества эндогенных клеток-мишеней и стволовых клеток/клеток-предшественников. Это может быть осуществлено с помощью устройства соответствующего размера, подобного катетеру, или иглы для введения терапевтического вектора (терапевтических векторов) в систему венозного или артериального кровообращения. В предпочтительном варианте осуществления вирус псевдотипирован гликопротеином оболочки VSV-G и белками env природного ВИЧ-1.

Пример 26: Введение генетически модифицированных клеток в хозяина

Гемоциты, такие как зрелые Т-лимфоциты периферической крови, моноциты, макрофаги, предшественники Т-клеток, клетки-предшественники макрофагов-моноцитов и/или плюрипотентные стволовые кроветворные клетки (например, обнаруживаемые в пуповинной крови и занимающие участки костного мозга), а также другие стволовые клетки/клетки-предшественники можно трансфицировать с использованием терапевтического вектора (терапевтических векторов) in vitro. Соответствующие концентрации терапевтического вектора (терапевтических векторов) могут быть концентрациями в соответствии с Browning et al., 1999. Затем, клетки наращивают (размножают) in vitro и затем переносят в хозяина посредством введения клеток в систему венозного или артериального кровообращения с помощью внутривенной иглы или катетера. В дальнейшем клетки, трансфицированные терапевтическими векторами, способны к «хоумингу» в костный мозг и другие ткани.

Понятно, что описанные в данном документе примеры и варианты осуществления представлены исключительно в иллюстративных целях, и что в их свете квалифицированными специалистами в данной области будут предложены различные модификации или изменения, и они должны включаться в сущность и область охвата данной заявки и объем прилагаемой формулы изобретения. Все публикации, патенты и патентные заявки, указанные в данном документе, таким образом включаются ссылкой в их полном объеме во всех отношениях.

Пример 27: Примеры экспрессируемых или целевых трансгенов, используемых в настоящем изобретении.

Любые последовательности трансгенов, эффективные при осуществлении настоящего изобретения, подходят для применения в настоящем изобретении. Подходящие нуклеотидные последовательности можно выбирать из любых разновидностей до тех пор, пока не будут получены требуемые клетки или не будет достигнуто требуемое поведение. Подобным образом, способ обозначения таких последовательностей - буквами или нижнего, или верхнего регистра - не подразумевает конкретную разновидность. Следующие последовательности, хранящиеся в базе данных NCBI (приведены в соответствии с номером доступа), представляют собой примеры последовательностей, на которые ссылаются выше в настоящей заявке. Они также являются примерами последовательностей, кодирующих специфический трансген (cds), пригодных для применения в настоящем изобретении, но ни в коем случае не ограничивают практическое осуществление данного изобретения:

кардиотрофин1:U43030 (SEQ ID NO: 18):

CNTF:BC074964 (SEQ ID NO: 19):

GP130:NM_175767 (SEQ ID NO: 20):

IL6:BC015511 (SEQ ID NO: 21):

HOXB4:NM_024015 (SEQ ID NO: 22):

IL6R:NM_000565 (SEQ ID NO: 23):

IL11:NM_133519 (SEQ ID NO: 24):

LIF:NM_002309 (SEQ ID NO: 25):

LIFR:NM_002310 (SEQ ID NO: 26):

STAT3:NM_003150 (SEQ ID NO: 27):

NUMB:AF171938 (SEQ ID NO: 28):

AF171939 (SEQ ID NO: 29):

AF171940 (SEQ ID NO: 30):

AF171941 (SEQ ID NO: 31):

Numblike:NM_00475 (SEQ ID NO: 32):

NANOG:NM_024865 (SEQ ID NO: 33):

ОнкостатинM (OSM):NM_020530 (SEQ ID NO: 34):

OSMR:NM_003999 (SEQ ID NO: 35):

OCT3/4(POU5F1):NM_203289 (SEQ ID NO: 36):

NM_002701 (SEQ ID NO: 37):

SOX2:NM_003106 (SEQ ID NO: 38):

FGF4:NM_002007 (SEQ ID NO: 39):

Gata2:NM_032638 (SEQ ID NO: 40):

Gata3:NM_001002295 (SEQ ID NO: 41):

Gata4:BC101580 (SEQ ID NO: 42):

Gata5:BC117356 (SEQ ID NO: 43):

Gata6:NM_005257 (SEQ ID NO: 44):

HNF1:NM_000458 (SEQ ID NO: 45):

NM_012669 (SEQ ID NO: 46):

HNF3:X74936 (SEQ ID NO: 47):

HNF3gammaX74938M (SEQ ID NO: 48):

HNF3betaX74937 (SEQ ID NO: 49):

HNF3G:AH008133 (SEQ ID NO: 50):

HNF3A:AH008132 (SEQ ID NO: 51):

HNF4alpha:NM_008261 (SEQ ID NO: 52):

HNF4a:NM_022180 (SEQ ID NO: 53):

HNF6:U95945 (SEQ ID NO: 54):

HLXB9:NM_001096823 (SEQ ID NO: 55):

(SEQ ID NO: 56)

NM_005515 (SEQ ID NO: 57):

Lbx1:NM_006562 (SEQ ID NO: 58):

Lmx1b (SEQ ID NO: 59):

Нейрогенин (NEUROG1):NM_006161 (SEQ ID NO: 60):

Нейрогенин2 (NEUROG2):NM_024019 (SEQ ID NO: 61):

Нейрогенин3 (NEUROG3) (SEQ ID NO: 62):

MASH1:NM_004316 (SEQ ID NO: 63):

MyoD:NM_010866 (SEQ ID NO: 64):

Myf5:NM_005593 (SEQ ID NO: 66):

Myf6:NM_002469 (SEQ ID NO: 67):

Ifrd1:NM_001007245 (SEQ ID NO: 68):

Mef2A:NM_013172 (SEQ ID NO: 69):

Миогенин:NM_002479 (SEQ ID NO: 70):

Nkx2.2:NM_002509 (SEQ ID NO: 71):

Notch

Notch1:NM_017617 (SEQ ID NO: 72):

NOTCH2:NM_024408; NM_010928.

NOTCH3:NM_000435 (SEQ ID NO: 73):

Nurr1:NM_006186 (SEQ ID NO: 74):

NOV (CCN3):NM_002514 (SEQ ID NO: 75):

OLIG1:NM_138983 (SEQ ID NO: 76):

OLIG2:NM_005806 (SEQ ID NO: 77):

Pdx1:NM_000209 (SEQ ID NO: 78):

Pet1 (FEV):BC138435; NM_017521 (SEQ ID NO: 79):

Phox2a:NM_005169 (SEQ ID NO: 80):

Phox2b:NM_003924 (SEQ ID NO: 81):

Pit1:NM_000306 (SEQ ID NO: 82):

PITX3:NM_005029 (SEQ ID NO: 83):

RUNX1:NM_001001890 (SEQ ID NO: 84):

Runx2:NM_001015051 (SEQ ID NO: 85):

Shh:NM_000193 (SEQ ID NO: 86):

Sox9:NM_000346 (SEQ ID NO: 87):

Sox17:NM_022454 (SEQ ID NO: 88):

DLX2:NM_004405 (SEQ ID NO: 89):

DLX5:NM_005221 (SEQ ID NO: 90):

HES1:NM_005524 (SEQ ID NO: 91):

FGF8:NM_006119 (SEQ ID NO: 92):

PITX2:NM_000325 (SEQ ID NO: 93):

REST4:DQ644039 (SEQ ID NO: 94):

CREB-связывающий_белок:NM_134442 (SEQ ID NO: 95):

Zfp488:NM_001013777 (SEQ ID NO: 96):

Foxa2:NM_021784 (SEQ ID NO: 97):

Rnx

REN:NM_000537 (SEQ ID NO: 98):

dHAND (HAND2):NM_021973 (SEQ ID NO: 99):

аспартоацилаза (болезнь Канавана) (ASPA):NM_000049 (SEQ ID NO: 100);

гексозаминидазаА (HEXA):NM_000520 (SEQ ID NO: 101):

синдром_Леш-Нихана (HRPT):NM_000194 (SEQ ID NO: 102):

Хантингтин; NM_010414;

GUSB; NM_000181 (SEQ ID NO: 103):

NPC1:NM_000271; NM_006432.

гексозаминидазаВ:NM_000521 (SEQ ID NO: 104);

галактозидаза, альфа (GLA):NM_000169 (SEQ ID NO: 105):

кислая_бета-глюкозидаза (GBA):NM_000157 (SEQ ID NO: 106):

супрессор_опухоли фон Гиппеля-Ландау (VHL):NM_000551 (SEQ ID NO: 107):

Бета_глобин (HBB):NM_000518 (SEQ ID NO: 108):

PARK2:NM_013988 (SEQ ID NO: 109):

Содержания всех упоминаемых в скобках публикаций и следующих патентов США отмечены и включены в качестве ссылки во всей их полноте: 7211247, 5677139, 6432711 и 5453357, 05593875, 05783566, 5928944, 05910488, 05824547.

--->

ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ

<110> РЕЙД, КРИСТОФЕР Б.

<120> СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ ПОПУЛЯЦИЙ МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ

И ПЛЮРИПОТЕНТНЫХ КЛЕТОК, УСТОЙЧИВЫХ К ЗАБОЛЕВАНИЯМ И

СПОСОБНЫХ К ДИФФЕРЕНЦИРОВКЕ

<130> CBR-002PCT

<140> PCT/US2008/065007

<141> 2008-05-28

<150> 61/064,761

<151> 2008-03-25

<150> 61/006,449

<151> 2008-01-14

<150> 60/933,670

<151> 2007-06-08

<150> 60/933,133

<151> 2007-06-05

<150> 60/932,020

<151> 2007-05-29

<160> 109

<170> PatentIn версия 3.3

<210> 1

<211> 8069

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

полинуклеотид

<400> 1

aatgtagtct tatgcaatac tcttgtagtc ttgcaacatg gtaacgatga gttagcaaca 60

tgccttacaa ggagagaaaa agcaccgtgc atgccgattg gtggaagtaa ggtggtacga 120

tcgtgcctta ttaggaaggc aacagacggg tctgacatgg attggacgaa ccactgaatt 180

gccgcattgc agagatattg tatttaagtg cctagctcga tacataaacg ggtctctctg 240

gttagaccag atctgagcct gggagctctc tggctaacta gggaacccac tgcttaagcc 300

tcaataaagc ttgccttgag tgcttcaagt agtgtgtgcc cgtctgttgt gtgactctgg 360

taactagaga tccctcagac ccttttagtc agtgtggaaa atctctagca gtggcgcccg 420

aacagggact tgaaagcgaa agggaaacca gaggagctct ctcgacgcag gactcggctt 480

gctgaagcgc gcacggcaag aggcgagggg cggcgactgg tgagtacgcc aaaaattttg 540

actagcggag gctagaagga gagagatggg tgcgagagcg tcagtattaa gcgggggaga 600

attagatcgc gatgggaaaa aattcggtta aggccagggg gaaagaaaaa atataaatta 660

aaacatatag tatgggcaag cagggagcta gaacgattcg cagttaatcc tggcctgtta 720

gaaacatcag aaggctgtag acaaatactg ggacagctac aaccatccct tcagacagga 780

tcagaagaac ttagatcatt atataataca gtagcaaccc tctattgtgt gcatcaaagg 840

atagagataa aagacaccaa ggaagcttta gacaagatag aggaagagca aaacaaaagt 900

aagaccaccg cacagcaagc ggccgctgat cttcagacct ggaggaggag atatgaggga 960

caattggaga agtgaattat ataaatataa agtagtaaaa attgaaccat taggagtagc 1020

acccaccaag gcaaagagaa gagtggtgca gagagaaaaa agagcagtgg gaataggagc 1080

tttgttcctt gggttcttgg gagcagcagg aagcactatg ggcgcagcgt caatgacgct 1140

gacggtacag gccagacaat tattgtctgg tatagtgcag cagcagaaca atttgctgag 1200

ggctattgag gcgcaacagc atctgttgca actcacagtc tggggcatca agcagctcca 1260

ggcaagaatc ctggctgtgg aaagatacct aaaggatcaa cagctcctgg ggatttgggg 1320

ttgctctgga aaactcattt gcaccactgc tgtgccttgg aatgctagtt ggagtaataa 1380

atctctggaa cagatttgga atcacacgac ctggatggag tgggacagag aaattaacaa 1440

ttacacaagc ttaatacact ccttaattga agaatcgcaa aaccagcaag aaaagaatga 1500

acaagaatta ttggaattag ataaatgggc aagtttgtgg aattggttta acataacaaa 1560

ttggctgtgg tatataaдat tattcataat gatagtagga ggcttggtag gtttaagaat 1620

agtttttgct gtactttcta tagtgaatag agttaggcag ggatattcac cattatcgtt 1680

tcagacccac ctcccaaccc cgaggggacc cgacaggccc gaaggaatag aagaagaagg 1740

tggagagaga gacagagaca gatccattcg attagtgaac ggatctcgac ggtatcgatg 1800

tcgacgttaa cgctagtgat atcaactttg tatagaaaag ttgaacgaga aacgtaaaat 1860

gatataaata tcaatatatt aaattagatt ttgcataaaa aacagactac ataatactgt 1920

aaaacacaac atatccagtc actatggcgg ccgcattagg caccccaggc tttacacttt 1980

atgcttccgg ctcgtataat gtgtggattt tgagttagga tccgtcgaga ttttcaggag 2040

ctaaggaagc taaaatggag aaaaaaatca ctggatatac caccgttgat atatcccaat 2100

ggcatcgtaa agaacatttt gaggcatttc agtcagttgc tcaatgtacc tataaccaga 2160

ccgttcagct ggatattacg gcctttttaa agaccgtaaa gaaaaataag cacaagtttt 2220

atccggcctt tattcacatt cttgcccgcc tgatgaatgc tcatccggaa ttccgtatgg 2280

caatgaaaga cggtgagctg gtgatatggg atagtgttca cccttgttac accgttttcc 2340

atgagcaaac tgaaacgttt tcatcgctct ggagtgaata ccacgacgat ttccggcagt 2400

ttctacacat atattcgcaa gatgtggcgt gttacggtga aaacctggcc tatttcccta 2460

aagggtttat tgagaatatg tttttcgtct cagccaatcc ctgggtgagt ttcaccagtt 2520

ttgatttaaa cgtggccaat atggacaact tcttcgcccc cgttttcacc atgggcaaat 2580

attatacgca aggcgacaag gtgctgatgc cgctggcgat tcaggttcat catgccgttt 2640

gtgatggctt ccatgtcggc agaatgctta atgaattaca acagtactgc gatgagtggc 2700

agggcggggc gtaaagatct ggatccggct tactaaaagc cagataacag tatgcgtatt 2760

tgcgcgctga tttttgcggt ataagaatat atactgatat gtatacccga agtatgtcaa 2820

aaagaggtat gctatgaagc agcgtattac agtgacagtt gacagcgaca gctatcagtt 2880

gctcaaggca tatatgatgt caatatctcc ggtctggtaa gcacaaccat gcagaatgaa 2940

gcccgtcgtc tgcgtgccga acgctggaaa gcggaaaatc aggaagggat ggctgaggtc 3000

gcccggttta ttgaaatgaa cggctctttt gctgacgaga acagggactg gtgaaatgca 3060

gtttaaggtt tacacctata aaagagagag ccgttatcgt ctgtttgtgg atgtacagag 3120

tgatattatt gacacgcccg ggcgacggat ggtgatcccc ctggccagtg cacgtctgct 3180

gtcagataaa gtctcccgtg aactttaccc ggtggtgcat atcggggatg aaagctggcg 3240

catgatgacc accgatatgg ccagtgtgcc ggtctccgtt atcggggaag aagtggctga 3300

tctcagccac cgcgaaaatg acatcaaaaa cgccattaac ctgatgttct ggggaatata 3360

aatgtcaggc tccgttatac acagccagtc tgcaggtcga ccatagtgac tggatatgtt 3420

gtgttttaca gtattatgta gtctgttttt tatgcaaaat ctaatttaat atattgatat 3480

ttatatcatt ttacgtttct cgttcagctt tcttgtacaa agtggttgat atccagcaca 3540

gtggcggccg ctcgagtcta gagggcccgc ggttcgaagg taagcctatc cctaaccctc 3600

tcctcggtct cgattctacg cgtaccggtt agtaatgagt ttggaattaa ttctgtggaa 3660

tgtgtgtcag ttagggtgtg gaaagtcccc aggctcccca gcaggcagaa gtatgcaaag 3720

catgcatctc aattagtcag caaccaggtg tggaaagtcc ccaggctccc cagcaggcag 3780

aagtatgcaa agcatgcatc tcaattagtc agcaaccata gtcccgcccc taactccgcc 3840

catcccgccc ctaactccgc ccagttccgc ccattctccg ccccatggct gactaatttt 3900

ttttatttat gcagaggccg aggccgcctc tgcctctgag ctattccaga agtagtgagg 3960

aggctttttt ggaggcctag gcttttgcaa aaagctcccg ggagcttgta tatccatttt 4020

cggatctgat cagcacgtgt tgacaattaa tcatcggcat agtatatcgg catagtataa 4080

tacgacaagg tgaggaacta aaccatggcc aagcctttgt ctcaagaaga atccaccctc 4140

attgaaagag caacggctac aatcaacagc atccccatct ctgaagacta cagcgtcgcc 4200

agcgcagctc tctctagcga cggccgcatc ttcactggtg tcaatgtata tcattttact 4260

gggggacctt gtgcagaact cgtggtgctg ggcactgctg ctgctgcggc agctggcaac 4320

ctgacttgta tcgtcgcgat cggaaatgag aacaggggca tcttgagccc ctgcggacgg 4380

tgccgacagg tgcttctcga tctgcatcct gggatcaaag ccatagtgaa ggacagtgat 4440

ggacagccga cggcagttgg gattcgtgaa ttgctgccct ctggttatgt gtgggagggc 4500

taagcacaat tcgagctcgg tacctttaag accaatgact tacaaggcag ctgtagatct 4560

tagccacttt ttaaaagaaa aggggggact ggaagggcta attcactccc aacgaagaca 4620

agatctgctt tttgcttgta ctgggtctct ctggttagac cagatctgag cctgggagct 4680

ctctggctaa ctagggaacc cactgcttaa gcctcaataa agcttgcctt gagtgcttca 4740

agtagtgtgt gcccgtctgt tgtgtgactc tggtaactag agatccctca gaccctttta 4800

gtcagtgtgg aaaatctcta gcagtagtag ttcatgtcat cttattattc agtatttata 4860

acttgcaaag aaatgaatat cagagagtga gaggaacttg tttattgcag cttataatgg 4920

ttacaaataa agcaatagca tcacaaattt cacaaataaa gcattttttt cactgcattc 4980

tagttgtggt ttgtccaaac tcatcaatgt atcttatcat gtctggctct agctatcccg 5040

cccctaactc cgcccatccc gcccctaact ccgcccagtt ccgcccattc tccgccccat 5100

ggctgactaa ttttttttat ttatgcagag gccgaggccg cctcggcctc tgagctattc 5160

cagaagtagt gaggaggctt ttttggaggc ctagggacgt acccaattcg ccctatagtg 5220

agtcgtatta cgcgcgctca ctggccgtcg ttttacaacg tcgtgactgg gaaaaccctg 5280

gcgttaccca acttaatcgc cttgcagcac atcccccttt cgccagctgg cgtaatagcg 5340

aagaggcccg caccgatcgc ccttcccaac agttgcgcag cctgaatggc gaatgggacg 5400

cgccctgtag cggcgcatta agcgcggcgg gtgtggtggt tacgcgcagc gtgaccgcta 5460

cacttgccag cgccctagcg cccgctcctt tcgctttctt cccttccttt ctcgccacgt 5520

tcgccggctt tccccgtcaa gctctaaatc gggggctccc tttagggttc cgatttagtg 5580

ctttacggca cctcgacccc aaaaaacttg attagggtga tggttcacgt agtgggccat 5640

cgccctgata gacggttttt cgccctttga cgttggagtc cacgttcttt aatagtggac 5700

tcttgttcca aactggaaca acactcaacc ctatctcggt ctattctttt gatttataag 5760

ggattttgcc gatttcggcc tattggttaa aaaatgagct gatttaacaa aaatttaacg 5820

cgaattttaa caaaatatta acgcttacaa tttaggtggc acttttcggg gaaatgtgcg 5880

cggaacccct atttgtttat ttttctaaat acattcaaat atgtatccgc tcatgagaca 5940

ataaccctga taaatgcttc aataatattg aaaaaggaag agtatgagta ttcaacattt 6000

ccgtgtcgcc cttattccct tttttgcggc attttgcctt cctgtttttg ctcacccaga 6060

aacgctggtg aaagtaaaag atgctgaaga tcagttgggt gcacgagtgg gttacatcga 6120

actggatctc aacagcggta agatccttga gagttttcgc cccgaagaac gttttccaat 6180

gatgagcact tttaaagttc tgctatgtgg cgcggtatta tcccgtattg acgccgggca 6240

agagcaactc ggtcgccgca tacactattc tcagaatgac ttggttgagt actcaccagt 6300

cacagaaaag catcttacgg atggcatgac agtaagagaa ttatgcagtg ctgccataac 6360

catgagtgat aacactgcgg ccaacttact tctgacaacg atcggaggac cgaaggagct 6420

aaccgctttt ttgcacaaca tgggggatca tgtaactcgc cttgatcgtt gggaaccgga 6480

gctgaatgaa gccataccaa acgacgagcg tgacaccacg atgcctgtag caatggcaac 6540

aacgttgcgc aaactattaa ctggcgaact acttactcta gcttcccggc aacaattaat 6600

agactggatg gaggcggata aagttgcagg accacttctg cgctcggccc ttccggctgg 6660

ctggtttatt gctgataaat ctggagccgg tgagcgtggg tctcgcggta tcattgcagc 6720

actggggcca gatggtaagc cctcccgtat cgtagttatc tacacgacgg ggagtcaggc 6780

aactatggat gaacgaaata gacagatcgc tgagataggt gcctcactga ttaagcattg 6840

gtaactgtca gaccaagttt actcatatat actttagatt gatttaaaac ttcattttta 6900

atttaaaagg atctaggtga agatcctttt tgataatctc atgaccaaaa tcccttaacg 6960

tgagttttcg ttccactgag cgtcagaccc cgtagaaaag atcaaaggat cttcttgaga 7020

tccttttttt ctgcgcgtaa tctgctgctt gcaaacaaaa aaaccaccgc taccagcggt 7080

ggtttgtttg ccggatcaag agctaccaac tctttttccg aaggtaactg gcttcagcag 7140

agcgcagata ccaaatactg ttcttctagt gtagccgtag ttaggccacc acttcaagaa 7200

ctctgtagca ccgcctacat acctcgctct gctaatcctg ttaccagtgg ctgctgccag 7260

tggcgataag tcgtgtctta ccgggttgga ctcaagacga tagttaccgg ataaggcgca 7320

gcggtcgggc tgaacggggg gttcgtgcac acagcccagc ttggagcgaa cgacctacac 7380

cgaactgaga tacctacagc gtgagctatg agaaagcgcc acgcttcccg aagggagaaa 7440

ggcggacagg tatccggtaa gcggcagggt cggaacagga gagcgcacga gggagcttcc 7500

agggggaaac gcctggtatc tttatagtcc tgtcgggttt cgccacctct gacttgagcg 7560

tcgatttttg tgatgctcgt caggggggcg gagcctatgg aaaaacgcca gcaacgcggc 7620

ctttttacgg ttcctggcct tttgctggcc ttttgctcac atgttctttc ctgcgttatc 7680

ccctgattct gtggataacc gtattaccgc ctttgagtga gctgataccg ctcgccgcag 7740

ccgaacgacc gagcgcagcg agtcagtgag cgaggaagcg gaagagcgcc caatacgcaa 7800

accgcctctc cccgcgcgtt ggccgattca ttaatgcagc tggcacgaca ggtttcccga 7860

ctggaaagcg ggcagtgagc gcaacgcaat taatgtgagt tagctcactc attaggcacc 7920

ccaggcttta cactttatgc ttccggctcg tatgttgtgt ggaattgtga gcggataaca 7980

atttcacaca ggaaacagct atgaccatga ttacgccaag cgcgcaatta accctcacta 8040

aagggaacaa aagctggagc tgcaagctt 8069

<210> 2

<211> 22460

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

полинуклеотид

<400> 2

aatgtagtct tatgcaatac tcttgtagtc ttgcaacatg gtaacgatga gttagcaaca 60

tgccttacaa ggagagaaaa agcaccgtgc atgccgattg gtggaagtaa ggtggtacga 120

tcgtgcctta ttaggaaggc aacagacggg tctgacatgg attggacgaa ccactgaatt 180

gccgcattgc agagatattg tatttaagtg cctagctcga tacataaacg ggtctctctg 240

gttagaccag atctgagcct gggagctctc tggctaacta gggaacccac tgcttaagcc 300

tcaataaagc ttgccttgag tgcttcaagt agtgtgtgcc cgtctgttgt gtgactctgg 360

taactagaga tccctcagac ccttttagtc agtgtggaaa atctctagca gtggcgcccg 420

aacagggact tgaaagcgaa agggaaacca gaggagctct ctcgacgcag gactcggctt 480

gctgaagcgc gcacggcaag aggcgagggg cggcgactgg tgagtacgcc aaaaattttg 540

actagcggag gctagaagga gagagatggg tgcgagagcg tcagtattaa gcgggggaga 600

attagatcgc gatgggaaaa aattcggtta aggccagggg gaaagaaaaa atataaatta 660

aaacatatag tatgggcaag cagggagcta gaacgattcg cagttaatcc tggcctgtta 720

gaaacatcag aaggctgtag acaaatactg ggacagctac aaccatccct tcagacagga 780

tcagaagaac ttagatcatt atataataca gtagcaaccc tctattgtgt gcatcaaagg 840

atagagataa aagacaccaa ggaagcttta gacaagatag aggaagagca aaacaaaagt 900

aagaccaccg cacagcaagc ggccgctgat cttcagacct ggaggaggag atatgaggga 960

caattggaga agtgaattat ataaatataa agtagtaaaa attgaaccat taggagtagc 1020

acccaccaag gcaaagagaa gagtggtgca gagagaaaaa agagcagtgg gaataggagc 1080

tttgttcctt gggttcttgg gagcagcagg aagcactatg ggcgcagcgt caatgacgct 1140

gacggtacag gccagacaat tattgtctgg tatagtgcag cagcagaaca atttgctgag 1200

ggctattgag gcgcaacagc atctgttgca actcacagtc tggggcatca agcagctcca 1260

ggcaagaatc ctggctgtgg aaagatacct aaaggatcaa cagctcctgg ggatttgggg 1320

ttgctctgga aaactcattt gcaccactgc tgtgccttgg aatgctagtt ggagtaataa 1380

atctctggaa cagatttgga atcacacgac ctggatggag tgggacagag aaattaacaa 1440

ttacacaagc ttaatacact ccttaattga agaatcgcaa aaccagcaag aaaagaatga 1500

acaagaatta ttggaattag ataaatgggc aagtttgtgg aattggttta acataacaaa 1560

ttggctgtgg tatataaaat tattcataat gatagtagga ggcttggtag gtttaagaat 1620

agtttttgct gtactttcta tagtgaatag agttaggcag ggatattcac cattatcgtt 1680

tcagacccac ctcccaaccc cgaggggacc cgacaggccc gaaggaatag aagaagaagg 1740

tggagagaga gacagagaca gatccattcg attagtgaac ggatctcgac ggtatcgatg 1800

tcgacgttaa cgctagtgat atcaactttg tatagaaaag ttgaacgaga aacgtaaaat 1860

gatataaata tcaatatatt aaattagatt ttgcataaaa aacagactac ataatactgt 1920

aaaacacaac atatccagtc actatgggac ggatcgggag atctcccgat cccctatggt 1980

gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagtatctg ctccctgctt 2040

gtgtgttgga ggtcgctgag tagtgcgcga gcaaaattta agctacaaca aggcaaggct 2100

tgaccgacaa ttgcatgaag aatctgctta gggttaggcg ttttgcgctg cttcgcgatg 2160

tacgggccag atatacgcgt tgacattgat tattgactag ttattaatag taatcaatta 2220

cggggtcatt agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt tacataactt acggtaaatg 2280

gcccgcctgg ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg acgtatgttc 2340

ccatagtaac gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat ttacggtaaa 2400

ctgcccactt ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag tacgccccct attgacgtca 2460

atgacggtaa atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg gactttccta 2520

cttggcagta catctacgta ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg ttttggcagt 2580

acatcaatgg gcgtggatag cggtttgact cacggggatt tccaagtctc caccccattg 2640

acgtcaatgg gagtttgttt tggaaccaaa atcaacggga ctttccaaaa tgtcgtaaca 2700

actccgcccc attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc tatataagca 2760

gagctctccc tatcagtgat agagatctcc ctatcagtga tagagatcgt cgacgagctc 2820

gtttagtgaa ccgtcagatc gcctggagac gccatccacg ctgttttgac ctccatagaa 2880

gacaccggga ccgatccagc ctccggactc tagcgtttaa acttaagctt accatgcctt 2940

cgcaagccct catttcacca ggcccccggc ttggggcgcc ttccttcccc atggcgggac 3000

acctggcttc ggatttcgcc ttctcgcccc ctccaggtgg tggaggtgat gggccagggg 3060

ggccggagcc gggctgggtt gatcctcgga cctggctaag cttccaaggc cctcctggag 3120

ggccaggaat cgggccgggg gttgggccag gctctgaggt gtgggggatt cccccatgcc 3180

ccccgccgta tgagttctgt ggggggatgg cgtactgtgg gccccaggtt ggagtggggc 3240

tagtgcccca aggcggcttg gagacctctc agcctgaggg cgaagcagga gtcggggtgg 3300

agagcaactc cgatggggcc tccccggagc cctgcaccgt cacccctggt gccgtgaagc 3360

tggagaagga gaagctggag caaaacccgg aggagtccca ggacatcaaa gctctgcaga 3420

aagaactcga gcaatttgcc aagctcctga agcagaagag gatcaccctg ggatatacac 3480

aggccgatgt ggggctcacc ctgggggttc tatttgggaa ggtattcagc caaacgacca 3540

tctgccgctt tgaggctctg cagcttagct tcaagaacat gtgtaagctg cggcccttgc 3600

tgcagaagtg ggtggaggaa gctgacaaca atgaaaatct tcaggagata tgcaaagcag 3660

aaaccctcgt gcaggcccga aagagaaagc gaaccagtat cgagaaccga gtgagaggca 3720

acctggagaa tttgttcctg cagtgcccga aacccacact gcagcagatc agccacatcg 3780

cccagcagct tgggctcgag aaggatgtgg tccgagtgtg gttctgtaac cggcgccaga 3840

agggcaagcg atcaagcagc gactatgcac aacgagagga ttttgaggct gctgggtctc 3900

ctttctcagg gggaccagtg tcctttcctc tggccccagg gccccatttt ggtaccccag 3960

gctatgggag ccctcacttc actgcactgt actcctcggt ccctttccct gagggggaag 4020

cctttccccc tgtctccgtc accactctgg gctctcccat gcattcaaac tgaggtgcct 4080

gcccttctag gaatggggga cagggggagg ggaggagcta gggaaagaaa acctggagtt 4140

tgtgccaggg tttttgggat taagttcttc attcactaag gaaggaattg ggaacacaaa 4200

gggtgggggc aggggagttt ggggcaactg gttggaggga aggtgaagtt caatgatgct 4260

cttgatttta atcccacatc atgtatcact tttttcttaa ataaagaagc ctgggacaca 4320

gtagatagac acacttaaaa aaaaaaacct cgactgtgcc ttctagttgc cagccatctg 4380

ttgtttgccc ctcccccgtg ccttccttga ccctggaagg tgccactccc actgtccttt 4440

cctaataaaa tgaggaaatt gcatcgcatt gtctgagtag gtgtcattct attctggggg 4500

gtggggtggg gcaggacagc aagggggagg attgggaaga caatagcagg catgctgggg 4560

atgcggtggg ctctatggga cggatcggga gatctcccga tcccctatgg tgcactctca 4620

gtacaatctt gctctgatgc cgcatagtta agccagtatc tgctccctgc ttgtgtgttg 4680

gaggtcgctg agtagtgcgc gagcaaaatt taagctacaa caaggcaagg cttgaccgac 4740

aattgcatga agaatctgct tagggttagg cgttttgcgc tgcttcgcga tgtacgggcc 4800

agatatacgc gttgacattg attattgact agttattaat agtaatcaat tacggggtca 4860

ttagttcata gcccatatat ggagttccgc gttacataac ttacggtaaa tggcccgcct 4920

ggctgaccgc ccaacgaccc ccgcccattg acgtcaataa tgacgtatgt tcccatagta 4980

acgccaatag ggactttcca ttgacgtcaa tgggtggagt atttacggta aactgcccac 5040

ttggcagtac atcaagtgta tcatatgcca agtacgcccc ctattgacgt caatgacggt 5100

aaatggcccg cctggcatta tgcccagtac atgaccttat gggactttcc tacttggcag 5160

tacatctacg tattagtcat cgctattacc atggtgatgc ggttttggca gtacatcaat 5220

gggcgtggat agcggtttga ctcacgggga tttccaagtc tccaccccat tgacgtcaat 5280

gggagtttgt tttggaacca aaatcaacgg gactttccaa aatgtcgtaa caactccgcc 5340

ccattgacgc aaatgggcgg taggcgtgta cggtgggagg tctatataag cagagctctc 5400

cctatcagtg atagagatct ccctatcagt gatagagatc gtcgacgagc tcgtttagtg 5460

aaccgtcaga tcgcctggag acgccatcca cgctgttttg acctccatag aagacaccgg 5520

gaccgatcca gcctccggac tctagcgttt aaacttaagc ttaccatgct attaacttgt 5580

tcaaaaaagt atcaggagtt gtcaaggcag agaagagagt gtttgcaaaa gggggaaagt 5640

agtttgctgc ctctttaaga ctaggactga gagaaagaag aggagagaga aagaaaggga 5700

gagaagtttg agccccaggc ttaagccttt ccaaaaaata ataataacaa tcatcggcgg 5760

cggcaggatc ggccagagga ggagggaagc gctttttttg atcctgattc cagtttgcct 5820

ctctcttttt ttcccccaaa ttattcttcg cctgattttc ctcgcggagc cctgcgctcc 5880

cgacaccccc gcccgcctcc cctcctcctc tccccccgcc cgcgggcccc ccaaagtccc 5940

ggccgggccg agggtcggcg gccgccggcg ggccgggccc gcgcacagcg cccgcatgta 6000

caacatgatg gagacggagc tgaagccgcc gggcccgcag caaacttcgg ggggcggcgg 6060

cggcaactcc accgcggcgg cggccggcgg caaccagaaa aacagcccgg accgcgtcaa 6120

gcggcccatg aatgccttca tggtgtggtc ccgcgggcag cggcgcaaga tggcccagga 6180

gaaccccaag atgcacaact cggagatcag caagcgcctg ggcgccgagt ggaaactttt 6240

gtcggagacg gagaagcggc cgttcatcga cgaggctaag cggctgcgag cgctgcacat 6300

gaaggagcac ccggattata aataccggcc ccggcggaaa accaagacgc tcatgaagaa 6360

ggataagtac acgctgcccg gcgggctgct ggcccccggc ggcaatagca tggcgagcgg 6420

ggtcggggtg ggcgccggcc tgggcgcggg cgtgaaccag cgcatggaca gttacgcgca 6480

catgaacggc tggagcaacg gcagctacag catgatgcag gaccagctgg gctacccgca 6540

gcacccgggc ctcaatgcgc acggcgcagc gcagatgcag cccatgcacc gctacgacgt 6600

gagcgccctg cagtacaact ccatgaccag ctcgcagacc tacatgaacg gctcgcccac 6660

ctacagcatg tcctactcgc agcagggcac ccctggcatg gctcttggct ccatgggttc 6720

ggtggtcaag tccgaggcca gctccagccc ccctgtggtt acctcttcct cccactccag 6780

ggcgccctgc caggccgggg acctccggga catgatcagc atgtatctcc ccggcgccga 6840

ggtgccggaa cccgccgccc ccagcagact tcacatgtcc cagcactacc agagcggccc 6900

ggtgcccggc acggccatta acggcacact gcccctctca cacatgtgag ggccggacag 6960

cgaactggag gggggagaaa ttttcaaaga aaaacgaggg aaatgggagg ggtgcaaaag 7020

aggagagtaa gaaacagcat ggagaaaacc cggtacgctc aaaaagaaaa aggaaaaaaa 7080

aaaatcccat cacccacagc aaatgacagc tgcaaaagag aacaccaatc ccatccacac 7140

tcacgcaaaa accgcgatgc cgacaagaaa acttttatga gagagatcct ggacttcttt 7200

ttgggggact atttttgtac agagaaaacc tggggagggt ggggagggcg ggggaatgga 7260

ccttgtatag atctggagga aagaaagcta cgaaaaactt tttaaaagtt ctagtggtac 7320

ggtaggagct ttgcaggaag tttgcaaaag tctttaccaa taatatttag agctagtctc 7380

caagcgacga aaaaaatgtt ttaatatttg caagcaactt ttgtacagta tttatcgaga 7440

taaacatggc aatcaaaatg tccattgttt ataagctgag aatttgccaa tatttttcaa 7500

ggagaggctt cttgctgaat tttgattctg cagctgaaat ttaggacagt tgcaaacgtg 7560

aaaagaagaa aattattcaa atttggacat tttaattgtt taaaaattgt acaaaaggaa 7620

aaaattagaa taagtactgg cgaaccatct ctgtggtctt gtttaaaaag ggcaaaagtt 7680

ttagactgta ctaaatttta taacttactg ttaaaagcaa aaatggccat gcaggttgac 7740

accgttggta atttataata gcttttgttc gatcccaact ttccattttg ttcagataaa 7800

aaaaaccatg aaattactgt gtttgaaata ttttcttatg gtttgtaata tttctgtaaa 7860

tttattgtga tattttaagg ttttcccccc tttattttcc gtagttgtat tttaaaagat 7920

tcggctctgt attatttgaa tcagtctgcc gagaatccat gtatatattt gaactaatat 7980

catccttata acaggtacat tttcaactta agtttttact ccattatgca cagtttgaga 8040

taaataaatt tttgaaatat ggacactgaa aaaaaaaaaa aaaaaacctc gactgtgcct 8100

tctagttgcc agccatctgt tgtttgcccc tcccccgtgc cttccttgac cctggaaggt 8160

gccactccca ctgtcctttc ctaataaaat gaggaaattg catcgcattg tctgagtagg 8220

tgtcattcta ttctgggggg tggggtgggg caggacagca agggggagga ttgggaagac 8280

aatagcaggc atgctgggga tgcggtgggc tctatgggac ggatcgggag atctcccgat 8340

cccctatggt gcactctcag tacaatctgc tctgatgccg catagttaag ccagtatctg 8400

ctccctgctt gtgtgttgga ggtcgctgag tagtgcgcga gcaaaattta agctacaaca 8460

aggcaaggct tgaccgacaa ttgcatgaag aatctgctta gggttaggcg ttttgcgctg 8520

cttcgcgatg tacgggccag atatacgcgt tgacattgat tattgactag ttattaatag 8580

taatcaatta cggggtcatt agttcatagc ccatatatgg agttccgcgt tacataactt 8640

acggtaaatg gcccgcctgg ctgaccgccc aacgaccccc gcccattgac gtcaataatg 8700

acgtatgttc ccatagtaac gccaataggg actttccatt gacgtcaatg ggtggagtat 8760

ttacggtaaa ctgcccactt ggcagtacat caagtgtatc atatgccaag tacgccccct 8820

attgacgtca atgacggtaa atggcccgcc tggcattatg cccagtacat gaccttatgg 8880

gactttccta cttggcagta catctacgta ttagtcatcg ctattaccat ggtgatgcgg 8940

ttttggcagt acatcaatgg gcgtggatag cggtttgact cacggggatt tccaagtctc 9000

caccccattg acgtcaatgg gagtttgttt tggaaccaaa atcaacggga ctttccaaaa 9060

tgtcgtaaca actccgcccc attgacgcaa atgggcggta ggcgtgtacg gtgggaggtc 9120

tatataagca gagctctccc tatcagtgat agagatctcc ctatcagtga tagagatcgt 9180

cgacgagctc gtttagtgaa ccgtcagatc gcctggagac gccatccacg ctgttttgac 9240

ctccatagaa gacaccggga ccgatccagc ctccggactc tagcgtttaa acttaagctt 9300

accatggttg tcatggggga ggtggtggcg cttggtggcc actggcggcc gaggtagagg 9360

cagtggcgct tgagttggtc gggggcagcg gcagatttga ggcttaagca acttcttccg 9420

gggaagagtg ccagtgcagc cactgttaca attcaagatc ttgatctata tccatagatt 9480

ggaatattgg tgggccagca atcctcagac gcctcactta ggacaaatga ggaaactgag 9540

gcttggtgaa gttacgaaac ttgtccaaaa tcacacaact tgtaaagggc acagccaaga 9600

ttcagagcca ggctgtaaaa attaaaatga acaaattacg gcaaagtttt aggagaaaga 9660

aggatgttta tgttccagag gccagtcgtc cacatcagtg gcagacagat gaagaaggcg 9720

ttcgcaccgg aaaatgtagc ttcccggtta agtaccttgg ccatgtagaa gttgatgaat 9780

caagaggaat gcacatctgt gaagatgctg taaaaagatt gaaagctgaa aggaagttct 9840

tcaaaggctt ctttggaaaa actggaaaga aagcagttaa agcagttctg tgggtctcag 9900

cagatggact cagagttgtg gatgaaaaaa ctaaggacct catagttgac cagacgatag 9960

agaaagtttc tttctgtgcc ccagacagga actttgatag agccttttct tacatatgcc 10020

gtgatggcac cactcgtcgc tggatctgtc actgcttcat ggctgtcaag gacacaggtg 10080

aaaggttgag ccatgcagta ggctgtgctt ttgcagcctg tttagagcgc aagcagaagc 10140

gggagaagga atgtggagtg actgctactt ttgatgctag tcggaccact tttacaagag 10200

aaggatcatt ccgtgtcaca acagccactg aacaagcaga aagagaggag atcatgaaac 10260

aaatgcaaga tgccaagaaa gctgaaacag ataagatagt cgttggttca tcagttgccc 10320

ctggcaacac tgccccatcc ccatcctctc ccacctctcc tacttctgat gccacgacct 10380

ctctggagat gaacaatcct catgccatcc cacgccggca tgctccaatt gaacagcttg 10440

ctcgccaagg ctctttccga ggttttcctg ctcttagcca gaagatgtca ccctttaaac 10500

gccaactatc cctacgcatc aatgagttgc cttccactat gcagaggaag actgatttcc 10560

ccattaaaaa tgcagtgcca gaagtagaag gggaggcaga gagcatcagc tccctgtgct 10620

cacagatcac caatgccttc agcacacctg aggacccctt ctcatctgct ccgatgacca 10680

aaccagtgac agtggtggca ccacaatctc ctaccttcca agctaatggc actgactcag 10740

ccttccatgt gcttgctaag ccagcccata ctgctctagc acccgtagca atgcctgtgc 10800

gtgaaaccaa cccttgggcc catgcccctg atgctgctaa caaggaaatt gcagccacat 10860

gttcggggac cgagtggggt caatcttctg gtgctgcctc tccaggtctc ttccaggccg 10920

gtcatagacg tactccctct gaggccgacc gatggttaga agaggtgtct aagagcgtcc 10980

gggctcagca gccccaggcc tcagctgctc ctctgcagcc agttctccag cctcctccac 11040

ccactgccat ctcccagcca gcatcacctt tccaagggaa tgcattcctc acctctcagc 11100

ctgtgccagt gggtgtggtc ccagccctgc aaccagcctt tgtccctgcc cagtcctatc 11160

ctgtggccaa tggaatgccc tatccagccc ctaatgtgcc tgtggtgggc atcactccct 11220

cccagatggt ggccaacgta tttggcactg caggccaccc tcaggctgcc catccccatc 11280

agtcacccag cctggtcagg cagcagacat tccctcacta cgaggcaagc agtgctacca 11340

ccagtccctt ctttaagcct cctgctcagc acctcaacgg ttctgcagct ttcaatggtg 11400

tagatgatgg caggttggcc tcagcagaca ggcatacaga ggttcctaca ggcacctgcc 11460

cagtggatcc ttttgaagcc cagtgggctg cattagaaaa taagtccaag cagcgtacta 11520

atccctcccc taccaaccct ttctccagtg acttacagaa gacgtttgaa attgaacttt 11580

aagcaatcat tatggctatg tatcttgtcc ataccagaca gggagcaggg ggtagcggtc 11640

aaaggagcaa aacagacttt gtctcctgat tagtactctt ttcactaatc ccaaaggtcc 11700

caaggaacaa gtccaggccc agagtactgt gaggggtgat tttgaaagac atgggaaaaa 11760

gcattcctag agaaaagctg ccttgcaatt aggctaaaga agtcaaggaa atgttgcttt 11820

ctgtactccc tcttccctta cccccttaca aatctctggc aacagagagg caaagtatct 11880

gaacaagaat ctatattcca agcacattta ctgaaatgta aaacacaaca ggaagcaaag 11940

caatctccct ttgtttttca ggccattcac ctgcctcctg tcagtagtgg cctgtattag 12000

agatcaagaa gagtggtttg tgctcaggct ggggaacaga gaggcacgct atgctgccag 12060

aattcccagg agggcatatc agcaactgcc cagcagagct atattttggg ggagaagttg 12120

agcttccatt ttgagtaaca gaataaatat tatatatatc aaaagccaaa atctttattt 12180

ttatgcattt agaatatttt aaatagttct cagatattaa gaagttgtat gagttgtaag 12240

taatcttgcc aaaggtaaag gggctagttg taagaaattg tacataagat tgatttatca 12300

ttgatgccta ctgaaataaa aagaggaaag gctggaagct gcagacagga tccctagctt 12360

gttttctgtc agtcattcat tgtaagtagc acattgcaac aacaatcatg cttatgacca 12420

atacagtcac taggttgtag ttttttttaa ataaaggaaa agcagtattg tcctggtttt 12480

aaacctatga tggaattcta atgtcattat tttaatggaa tcaatcgaaa tatgctctat 12540

agagaatata tcttttatat attgctgcag tttccttatg ttaatccttt aacactaagg 12600

taacatgaca taatcatacc atagaaggga acacaggtta ccatattggt ttgtaatatg 12660

ggtcttggtg ggttttgttt tatcctttaa attttgttcc catgagtttt gtggggatgg 12720

ggattctggt tttattagct ttgtgtgtgt cctcttcccc caaaccccct tttggtgaga 12780

acatcccctt gacagttgca gcctcttgac ctcggataac aataagagag ctcatctcat 12840

ttttactttt gaacgttggc cttacaatca aatgtaagtt atatatattt gtactgatga 12900

aaatttataa tctgctttaa caaaaataaa tgttcatggt agaagctttt aaaaaaaaaa 12960

aaacctcgac tgtgccttct agttgccagc catctgttgt ttgcccctcc cccgtgcctt 13020

ccttgaccct ggaaggtgcc actcccactg tcctttccta ataaaatgag gaaattgcat 13080

cgcattgtct gagtaggtgt cattctattc tggggggtgg ggtggggcag gacagcaagg 13140

gggaggattg ggaagacaat agcaggcatg ctggggatgc ggtgggctct atgggacgga 13200

tcgggagatc tcccgatccc ctatggtgca ctctcagtac aatctgctct gatgccgcat 13260

agttaagcca gtatctgctc cctgcttgtg tgttggaggt cgctgagtag tgcgcgagca 13320

aaatttaagc tacaacaagg caaggcttga ccgacaattg catgaagaat ctgcttaggg 13380

ttaggcgttt tgcgctgctt cgcgatgtac gggccagata tacgcgttga cattgattat 13440

tgactagtta ttaatagtaa tcaattacgg ggtcattagt tcatagccca tatatggagt 13500

tccgcgttac ataacttacg gtaaatggcc cgcctggctg accgcccaac gacccccgcc 13560

cattgacgtc aataatgacg tatgttccca tagtaacgcc aatagggact ttccattgac 13620

gtcaatgggt ggagtattta cggtaaactg cccacttggc agtacatcaa gtgtatcata 13680

tgccaagtac gccccctatt gacgtcaatg acggtaaatg gcccgcctgg cattatgccc 13740

agtacatgac cttatgggac tttcctactt ggcagtacat ctacgtatta gtcatcgcta 13800

ttaccatggt gatgcggttt tggcagtaca tcaatgggcg tggatagcgg tttgactcac 13860

ggggatttcc aagtctccac cccattgacg tcaatgggag tttgttttgg aaccaaaatc 13920

aacgggactt tccaaaatgt cgtaacaact ccgccccatt gacgcaaatg ggcggtaggc 13980

gtgtacggtg ggaggtctat ataagcagag ctctccctat cagtgataga gatctcccta 14040

tcagtgatag agatcgtcga cgagctcgtt tagtgaaccg tcagatcgcc tggagacgcc 14100

atccacgctg ttttgacctc catagaagac accgggaccg atccagcctc cggactctag 14160

cgtttaaact taagcttacc atggtgagca agggcgagga gctgttcacc ggggtggtgc 14220

ccatcctggt cgagctggac ggcgacgtaa acggccacaa gttcagcgtg tccggcgagg 14280

gcgagggcga tgccacctac ggcaagctga ccctgaagtt catctgcacc accggcaagc 14340

tgcccgtgcc ctggcccacc ctcgtgacca ccttcaccta cggcgtgcag tgcttcgccc 14400

gctaccccga ccacatgaag cagcacgact tcttcaagtc cgccatgccc gaaggctacg 14460

tccaggagcg caccatcttc ttcaaggacg acggcaacta caagacccgc gccgaggtga 14520

agttcgaggg cgacaccctg gtgaaccgca tcgagctgaa gggcatcgac ttcaaggagg 14580

acggcaacat cctggggcac aagctggagt acaactacaa cagccacaag gtctatatca 14640

ccgccgacaa gcagaagaac ggcatcaagg tgaacttcaa gacccgccac aacatcgagg 14700

acggcagcgt gcagctcgcc gaccactacc agcagaacac ccccatcggc gacggccccg 14760

tgctgctgcc cgacaaccac tacctgagca cccagtccgc cctgagcaaa gaccccaacg 14820

agaagcgcga tcacatggtc ctgctggagt tcgtgaccgc cgccgggatc actctcggca 14880

tggacgagct gtacaagtaa cctcgactgt gccttctagt tgccagccat ctgttgtttg 14940

cccctccccc gtgccttcct tgaccctgga aggtgccact cccactgtcc tttcctaata 15000

aaatgaggaa attgcatcgc attgtctgag taggtgtcat tctattctgg ggggtggggt 15060

ggggcaggac agcaaggggg aggattggga agacaatagc aggcatgctg gggatgcggt 15120

gggctctatg ggacggatcg ggagatctcc cgatccccta tggtgcactc tcagtacaat 15180

ctgctctgat gccgcatagt taagccagta tctgctccct gcttgtgtgt tggaggtcgc 15240

tgagtagtgc gcgagcaaaa tttaagctac aacaaggcaa ggcttgaccg acaattgcat 15300

gaagaatctg cttagggtta ggcgttttgc gctgcttcgc gatgtacggg ccagatatac 15360

gcgttgacat tgattattga ctagttatta atagtaatca attacggggt cattagttca 15420

tagcccatat atggagttcc gcgttacata acttacggta aatggcccgc ctggctgacc 15480

gcccaacgac ccccgcccat tgacgtcaat aatgacgtat gttcccatag taacgccaat 15540

agggactttc cattgacgtc aatgggtgga gtatttacgg taaactgccc acttggcagt 15600

acatcaagtg tatcatatgc caagtacgcc ccctattgac gtcaatgacg gtaaatggcc 15660

cgcctggcat tatgcccagt acatgacctt atgggacttt cctacttggc agtacatcta 15720

cgtattagtc atcgctatta ccatggtgat gcggttttgg cagtacatca atgggcgtgg 15780

atagcggttt gactcacggg gatttccaag tctccacccc attgacgtca atgggagttt 15840

gttttggaac caaaatcaac gggactttcc aaaatgtcgt aacaactccg ccccattgac 15900

gcaaatgggc ggtaggcgtg tacggtggga ggtctatata agcagagctc gtgagtttgg 15960

ggacccttga ttgttctttc tttttcgcta ttgtaaaatt catgttatat ggagggggca 16020

aagttttcag ggtgttgttt agaatgggaa gatgtccctt gtatcaccat ggaccctcat 16080

gataattttg tttctttcac tttctactct gttgacaacc attgtctcct cttattttct 16140

tttcattttc tgtaactttt tcgttaaact ttagcttgca tttgtaacga atttttaaat 16200

tcacttttgt ttatttgtca gattgtaagt actttctcta atcacttttt tttcaaggca 16260

atcagggtat attatattgt acttcagcac agttttagag aacaattgtt ataattaaat 16320

gataaggtag aatatttctg catataaatt ctggctggcg tggaaatatt cttattggta 16380

gaaacaacta catcctggtc atcatcctgc ctttctcttt atggttacaa tgatatacac 16440

tgtttgagat gaggataaaa tactctgagt ccaaaccggg cccctctgct aaccatgttc 16500

atgccttctt ctttttccta cagctcctgg gcaacgtgct ggttattgtg ctgtctcatc 16560

attttggcaa agaattgtaa tacgactcac tatagggcga attgatatgt ctagattaga 16620

taaaagtaaa gtgattaaca gcgcattaga gctgcatgtc tagattagat aaaagtaaag 16680

tgattaacag cgcattagag ctgcttaatg aggtcggaat cgaaggttta acaacccgta 16740

aactcgccca gaagctaggt gtagagcagc ctacattgta ttggcatgta aaaaataagc 16800

gggctttgct cgacgcctta gccattgaga tgttagatag gcaccatact cacttttgcc 16860

ctttagaagg ggaaagctgg caagattttt tacgtaataa cgctaaaagt tttagatgtg 16920

ctttactaag tcatcgcgat ggagcaaaag tacatttagg tacacggcct acagaaaaac 16980

agtatgaaac tctcgaaaat caattagcct ttttatgcca acaaggtttt tcactagaga 17040

atgcattata tgcactcagc gctgtggggc attttacttt aggttgcgta ttggaagatc 17100

aagagcatca agtcgctaaa gaagaaaggg aaacacctac tactgatagt atgccgccat 17160

tattacgaca agctatcgaa ttatttgatc accaaggtgc agagccagcc ttcttattcg 17220

gccttgaatt gatcatatgc ggattagaaa aacaacttaa atgtgaaagt gggtccgcgt 17280

acagcggatc ccgggaattc agatcttatt aaagcagaac ttgtttattg cagcttataa 17340

tggttacaaa taaagcaata gcatcacaaa tttcacaaat aaagcatttt tttcactgca 17400

ttctagttgt ggtttgtcca aactcatcaa tgtatcttat catgtctggt caatgtgtgt 17460

cagttagggt gtggaaagtc cccaggctcc ccagcaggca gaagtatgca aagcatgcat 17520

ctcaattagt cagcaaccag gtgtggaaag tccccaggct ccccagcagg cagaagtatg 17580

caaagcatgc atctcaatta gtcagcaacc atagtcccgc ccctaactcc gcccatcccg 17640

cccctaactc cgcccagttc cgcccattct ccgccccatg gctgactaat tttttttatt 17700

tatgcagagg ccgaggccgc ctctgcctct gagctattcc agaagtagtg aggaggcttt 17760

tttggaggcc taggcttttg caaaaagctc cccatagtga ctggatatgt tgtgttttac 17820

agtattatgt agtctgtttt ttatgcaaaa tctaatttaa tatattgata tttatatcat 17880

tttacgtttc tcgttcagct ttcttgtaca aagtggttga tatccagcac agtggcggcc 17940

gctcgagtct agagggcccg cggttcgaag gtaagcctat ccctaaccct ctcctcggtc 18000

tcgattctac gcgtaccggt tagtaatgag tttggaatta attctgtgga atgtgtgtca 18060

gttagggtgt ggaaagtccc caggctcccc agcaggcaga agtatgcaaa gcatgcatct 18120

caattagtca gcaaccaggt gtggaaagtc cccaggctcc ccagcaggca gaagtatgca 18180

aagcatgcat ctcaattagt cagcaaccat agtcccgccc ctaactccgc ccatcccgcc 18240

cctaactccg cccagttccg cccattctcc gccccatggc tgactaattt tttttattta 18300

tgcagaggcc gaggccgcct ctgcctctga gctattccag aagtagtgag gaggcttttt 18360

tggaggccta ggcttttgca aaaagctccc gggagcttgt atatccattt tcggatctga 18420

tcagcacgtg ttgacaatta atcatcggca tagtatatcg gcatagtata atacgacaag 18480

gtgaggaact aaaccatggc caagcctttg tctcaagaag aatccaccct cattgaaaga 18540

gcaacggcta caatcaacag catccccatc tctgaagact acagcgtcgc cagcgcagct 18600

ctctctagcg acggccgcat cttcactggt gtcaatgtat atcattttac tgggggacct 18660

tgtgcagaac tcgtggtgct gggcactgct gctgctgcgg cagctggcaa cctgacttgt 18720

atcgtcgcga tcggaaatga gaacaggggc atcttgagcc cctgcggacg gtgccgacag 18780

gtgcttctcg atctgcatcc tgggatcaaa gccatagtga aggacagtga tggacagccg 18840

acggcagttg ggattcgtga attgctgccc tctggttatg tgtgggaggg ctaagcacaa 18900

ttcgagctcg gtacctttaa gaccaatgac ttacaaggca gctgtagatc ttagccactt 18960

tttaaaagaa aaggggggac tggaagggct aattcactcc caacgaagac-aagatctgct 19020

ttttgcttgt actgggtctc tctggttaga ccagatctga gcctgggagc tctctggcta 19080

actagggaac ccactgctta agcctcaata aagcttgcct tgagtgcttc aagtagtgtg 19140

tgcccgtctg ttgtgtgact ctggtaacta gagatccctc agaccctttt agtcagtgtg 19200

gaaaatctct agcagtagta gttcatgtca tcttattatt cagtatttat aacttgcaaa 19260

gaaatgaata tcagagagtg agaggaactt gtttattgca gcttataatg gttacaaata 19320

aagcaatagc atcacaaatt tcacaaataa agcatttttt tcactgcatt ctagttgtgg 19380

tttgtccaaa ctcatcaatg tatcttatca tgtctggctc tagctatccc gcccctaact 19440

ccgcccatcc cgcccctaac tccgcccagt tccgcccatt ctccgcccca tggctgacta 19500

atttttttta tttatgcaga ggccgaggcc gcctcggcct ctgagctatt ccagaagtag 19560

tgaggaggct tttttggagg cctagggacg tacccaattc gccctatagt gagtcgtatt 19620

acgcgcgctc actggccgtc gttttacaac gtcgtgactg ggaaaaccct ggcgttaccc 19680

aacttaatcg ccttgcagca catccccctt tcgccagctg gcgtaatagc gaagaggccc 19740

gcaccgatcg cccttcccaa cagttgcgca gcctgaatgg cgaatgggac gcgccctgta 19800

gcggcgcatt aagcgcggcg ggtgtggtgg ttacgcgcag cgtgaccgct acacttgcca 19860

gcgccctagc gcccgctcct ttcgctttct tcccttcctt tctcgccacg ttcgccggct 19920

ttccccgtca agctctaaat cgggggctcc ctttagggtt ccgatttagt gctttacggc 19980

acctcgaccc caaaaaactt gattagggtg atggttcacg tagtgggcca tcgccctgat 20040

agacggtttt tcgccctttg acgttggagt ccacgttctt taatagtgga ctcttgttcc 20100

aaactggaac aacactcaac cctatctcgg tctattcttt tgatttataa gggattttgc 20160

cgatttcggc ctattggtta aaaaatgagc tgatttaaca aaaatttaac gcgaatttta 20220

acaaaatatt aacgcttaca atttaggtgg cacttttcgg ggaaatgtgc gcggaacccc 20280

tatttgttta tttttctaaa tacattcaaa tatgtatccg ctcatgagac aataaccctg 20340

ataaatgctt caataatatt gaaaaaggaa gagtatgagt attcaacatt tccgtgtcgc 20400

ccttattccc ttttttgcgg cattttgcct tcctgttttt gctcacccag aaacgctggt 20460

gaaagtaaaa gatgctgaag atcagttggg tgcacgagtg ggttacatcg aactggatct 20520

caacagcggt aagatccttg agagttttcg ccccgaagaa cgttttccaa tgatgagcac 20580

ttttaaagtt ctgctatgtg gcgcggtatt atcccgtatt gacgccgggc aagagcaact 20640

cggtcgccgc atacactatt ctcagaatga cttggttgag tactcaccag tcacagaaaa 20700

gcatcttacg gatggcatga cagtaagaga attatgcagt gctgccataa ccatgagtga 20760

taacactgcg gccaacttac ttctgacaac gatcggagga ccgaaggagc taaccgcttt 20820

tttgcacaac atgggggatc atgtaactcg ccttgatcgt tgggaaccgg agctgaatga 20880

agccatacca aacgacgagc gtgacaccac gatgcctgta gcaatggcaa caacgttgcg 20940

caaactatta actggcgaac tacttactct agcttcccgg caacaattaa tagactggat 21000

ggaggcggat aaagttgcag gaccacttct gcgctcggcc cttccggctg gctggtttat 21060

tgctgataaa tctggagccg gtgagcgtgg gtctcgcggt atcattgcag cactggggcc 21120

agatggtaag ccctcccgta tcgtagttat ctacacgacg gggagtcagg caactatgga 21180

tgaacgaaat agacagatcg ctgagatagg tgcctcactg attaagcatt ggtaactgtc 21240

agaccaagtt tactcatata tactttagat tgatttaaaa cttcattttt aatttaaaag 21300

gatctaggtg aagatccttt ttgataatct catgaccaaa atcccttaac gtgagttttc 21360

gttccactga gcgtcagacc ccgtagaaaa gatcaaagga tcttcttgag atcctttttt 21420

tctgcgcgta atctgctgct tgcaaacaaa aaaaccaccg ctaccagcgg tggtttgttt 21480

gccggatcaa gagctaccaa ctctttttcc gaaggtaact ggcttcagca gagcgcagat 21540

accaaatact gttcttctag tgtagccgta gttaggccac cacttcaaga actctgtagc 21600

accgcctaca tacctcgctc tgctaatcct gttaccagtg gctgctgcca gtggcgataa 21660

gtcgtgtctt accgggttgg actcaagacg atagttaccg gataaggcgc agcggtcggg 21720

ctgaacgggg ggttcgtgca cacagcccag cttggagcga acgacctaca ccgaactgag 21780

atacctacag cgtgagctat gagaaagcgc cacgcttccc gaagggagaa aggcggacag 21840

gtatccggta agcggcaggg tcggaacagg agagcgcacg agggagcttc cagggggaaa 21900

cgcctggtat ctttatagtc ctgtcgggtt tcgccacctc tgacttgagc gtcgattttt 21960

gtgatgctcg tcaggggggc ggagcctatg gaaaaacgcc agcaacgcgg cctttttacg 22020

gttcctggcc ttttgctggc cttttgctca catgttcttt cctgcgttat cccctgattc 22080

tgtggataac cgtattaccg cctttgagtg agctgatacc gctcgccgca gccgaacgac 22140

cgagcgcagc gagtcagtga gcgaggaagc ggaagagcgc ccaatacgca aaccgcctct 22200

ccccgcgcgt tggccgattc attaatgcag ctggcacgac aggtttcccg actggaaagc 22260

gggcagtgag cgcaacgcaa ttaatgtgag ttagctcact cattaggcac cccaggcttt 22320

acactttatg cttccggctc gtatgttgtg tggaattgtg agcggataac aatttcacac 22380

aggaaacagc tatgaccatg attacgccaa gcgcgcaatt aaccctcact aaagggaaca 22440

aaagctggag ctgcaagctt 22460

<210> 3

<211> 1751

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

полинуклеотид

<400> 3

gtcgaccagt ggatcctgga ggcttgctga aggctgtatg ctgatcgggt gtaaactgag 60

cttggttttg gccactgact gaccaagctc attacacccg atcaggacac aaggcctgtt 120

actagcactc acatggaaca aatggcccag atcctggagg cttgctgaag gctgtatgct 180

gataccaggc aggataaggc cagttttggc cactgactga ctggccttac tgcctggtat 240

caggacacaa ggcctgttac tagcactcac atggaacaaa tggcccagat cctggaggct 300

tgctgaaggc tgtatgctgt gaccaggatg accaatccat gttttggcca ctgactgaca 360

tggattgcat cctggtcaca ggacacaagg cctgttacta gcactcacat ggaacaaatg 420

gcccagatcc tggaggcttg ctgaaggctg tatgctgata gcttggtcca acctgttagt 480

tttggccact gactgactaa caggtgacca agctatcagg acacaaggcc tgttactagc 540

actcacatgg aacaaatggc ccagatctcc ccagtggaaa gacgcgcagg caaaacgcac 600

cacgtgacgg agcgtgaccg cgcgccgagc gcgcgccaag gtcgggcagg aagagggcct 660

atttcccatg attccttcat atttgcatat acgatacaag gctgttagag agataattag 720

aattaatttg actgtaaaca caaagatatt agtacaaaat acgtgacgta gaaagtaata 780

atttcttggg tagtttgcag ttttaaaatt atgttttaaa atggactatc atatgcttac 840

cgtaacttga aagtatttcg atttcttggg tttatatatc ttgtggaaag gacggtgctc 900

gcttcggcag cacgtcgtgc tagggttctt gggttttctc gcaacagcag gttctgcaat 960

gggcgcggcg tccctgaccg tgtcggctca gtcccggact ttactggccg ggatagtgca 1020

gcaacagcaa cagctgttgg acgtggtcaa gagacaacaa gaactgttgc gactgaccgt 1080

ctggggaacg aaaaacctcc aggcaagagt cactgctata gagaagtacc tacaggacca 1140

ggcgcggcta aattcatggg gatgtctaga cctagagcgg acttcggtcc gctttttccc 1200

cagtggaaag acgcgcaggc aaaacgcacc acgtgacgga gcgtgaccgc gcgccgagcg 1260

cgcgccaagg tcgggcagga agagggccta tttcccatga ttccttcata tttgcatata 1320

cgatacaagg ctgttagaga gataattaga attaatttga ctgtaaacac aaagatatta 1380

gtacaaaata cgtgacgtag aaagtaataa tttcttgggt agtttgcagt tttaaaatta 1440

tgttttaaaa tggactatca tatgcttacc gtaacttgaa agtatttcga tttcttgggt 1500

ttatatatct tgtggaaagg acggtgctcg cttcggcagc acgtcggtcg ctctgcggag 1560

aggctggcag attgagccct gggaggttct ctccagcact agcaggtaga gcctgggtgt 1620

tccctgctag actctcacca gtgcttggcc ggcactgggc agacggctcc acgcttgctt 1680

gcttaaagac ctcttaataa agctgctcta gacctagagc ggacttcggt ccgctttttt 1740

acgtactcga g 1751

<210> 4

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 4

tgctgatacc aggcaggata aggccagttt tggccactga ctgactggcc ttactgcctg 60

gtat 64

<210> 5

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 5

cctgatacca ggcagtaagg ccagtcagtc agtggccaaa actggcctta tcctgcctgg 60

tatc 64

<210> 6

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 6

tgctgtgacc aggatgacca atccatgttt tggccactga ctgacatgga ttgcatcctg 60

gtca 64

<210> 7

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 7

cctgtgacca ggatgcaatc catgtcagtc agtggccaaa acatggattg gtcatcctgg 60

tcac 64

<210> 8

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 8

tgctgatcgg gtgtaaactg agcttggttt tggccactga ctgaccaagc tcattacacc 60

cgat 64

<210> 9

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности:

искусственный олигонуклеотид

<400> 9

cctgatcggg tgtaatgagc ttggtcagtc agtggccaaa accaagctca gtttacaccc 60

gatc 64

<210> 10

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности:

искусственный олигонуклеотид

<400> 10

tgctgatagc ttggtccaac ctgttagttt tggccactga ctgactaaca ggtgaccaag 60

ctat 64

<210> 11

<211> 64

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 11

cctgatagct tggtcacctg ttagtcagtc agtggccaaa actaacaggt tggaccaagc 60

tatc 64

<210> 12

<211> 160

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

полинуклеотид

<400> 12

gtcgctctgc ggagaggctg gcagattgag ccctgggagg ttctctccag cactagcagg 60

tagagcctgg gtgttccctg ctagactctc accagtgctt ggccggcact gggcagacgg 120

ctccacgctt gcttgcttaa agacctctta ataaagctgc 160

<210> 13

<211> 247

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

полинуклеотид

<400> 13

tgctagggtt cttgggtttt ctcgcaacag caggttctgc aatgggcgcg gcgtccctga 60

ccgtgtcggc tcagtcccgg actttactgg ccgggatagt gcagcaacag caacagctgt 120

tggacgtggt caagagacaa caagaactgt tgcgactgac cgtctgggga acgaaaaacc 180

tccaggcaag agtcactgct atagagaagt acctacagga ccaggcgcgg ctaaattcat 240

ggggatg 247

<210> 14

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание комбинированной ДНК/РНК молекулы: искусственный

олигонуклеотид

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 14

gugcucgcuu cggcagcacg tcgac 25

<210> 15

<211> 26

<212> РНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 15

ucuagagcgg acuucggucc gcuuuu 26

<210> 16

<211> 25

<212> ДНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание комбинированной ДНК/РНК молекулы: искусственный

олигонуклеотид

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 16

gugcucgcuu cggcagcacg tcgac 25

<210> 17

<211> 26

<212> РНК

<213> Искусственная последовательность

<220>

<223> Описание искусственной последовательности: искусственный

олигонуклеотид

<400> 17

ucuagagcgg acuucggucc gcuuuu 26

<210> 18

<211> 606

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 18

atgagccgga gggagggaag tctggaagac ccccagactg attcctcagt ctcacttctt 60

ccccacttgg aggccaagat ccgtcagaca cacagccttg cgcacctcct caccaaatac 120

gctgagcagc tgctccagga atatgtgcag ctccagggag accccttcgg gctgcccagc 180

ttctcgccgc cgcggctgcc ggtggccggc ctgagcgccc cggctccgag ccacgcgggg 240

ctgccagtgc acgagcggct gcggctggac gcggcggcgc tggccgcgct gcccccgctg 300

ctggacgcag tgtgtcgccg ccaggccgag ctgaacccgc gcgcgccgcg cctgctgcgc 360

cgcctggagg acgcggcgcg ccaggcccgg gccctgggcg ccgccgtgga ggccttgctg 420

gccgcgctgg gcgccgccaa ccgcgggccc cgggccgagc cccccgccgc caccgcctca 480

gccgcctccg ccaccggggt cttccccgcc aaggtgctgg ggctccgcgt ttgcggcctc 540

taccgcgagt ggctgagccg caccgagggc gacctgggcc agctgctgcc cgggggctcg 600

gcctga 606

<210> 19

<211> 603

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 19

atggctttca cagagcattc accgctgacc cctcaccgtc gggacctctg tagccgctct 60

atctggctag caaggaagat tcgttcagac ctgactgctc ttacggaatc ctatgtgaag 120

catcagggcc tgaacaagaa catcaacctg gactctgcgg atgggatgcc agtggcaagc 180

actgatcagt ggagtgagct gaccgaggca gagcgactcc aagagaacct tcaagcttat 240

cgtaccttcc atgttttgtt ggccaggctc ttagaagacc agcaggtgca ttttacccca 300

accgaaggtg acttccatca agctatacat acccttcttc tccaagtcgc tgcctttgca 360

taccagatag aggagttaat gatactcctg gaatacaaga tcccccgcaa tgaggctgat 420

gggatgccta ttaatgttgg agatggtggt ctctttgaga agaagctgtg gggcctaaag 480

gtgctgcagg agctttcaca gtggacagta aggtccatcc atgaccttcg tttcatttct 540

tctcatcaga ctgggatccc agcacgtggg agccattata ttgctaacaa caagaaaatg 600

tag 603

<210> 20

<211> 990

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 20

atgttgacgt tgcagacttg gctagtgcaa gccttgttta ttttcctcac cactgaatct 60

acaggtgaac ttctagatcc atgtggttat atcagtcctg aatctccagt tgtacaactt 120

cattctaatt tcactgcagt ttgtgtgcta aaggaaaaat gtatggatta ttttcatgta 180

aatgctaatt acattgtctg gaaaacaaac cattttacta ttcctaagga gcaatatact 240

atcataaaca gaacagcatc cagtgtcacc tttacagata tagcttcatt aaatattcag 300

ctcacttgca acattcttac attcggacag cttgaacaga atgtttatgg aatcacaata 360

atttcaggct tgcctccaga aaaacctaaa aatttgagtt gcattgtgaa cgaggggaag 420

aaaatgaggt gtgagtggga tggtggaagg gaaacacact tggagacaaa cttcacttta 480

aaatctgaat gggcaacaca caagtttgct gattgcaaag caaaacgtga cacccccacc 540

tcatgcactg ttgattattc tactgtgtat tttgtcaaca ttgaagtctg ggtagaagca 600

gagaatgccc ttgggaaggt tacatcagat catatcaatt ttgatcctgt atataaagtg 660

aagcccaatc cgccacataa tttatcagtg atcaactcag aggaactgtc tagtatctta 720

aaattgacat ggaccaaccc aagtattaag agtgttataa tactaaaata taacattcaa 780

tataggacca aagatgcctc aacttggagc cagattcctc ctgaagacac agcatccacc 840

cgatcttcat tcactgtcca agaccttaaa ccttttacag aatatgtgtt taggattcgc 900

tgtatgaagg aagatggtaa gggatactgg agtgactgga gtgaagaagc aagtgggatc 960

acctatgaag ataacattgc ctccttttga 990

<210> 21

<211> 639

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 21

atgaactcct tctccacaag cgccttcggt ccagttgcct tctccctggg gctgctcctg 60

gtgttgcctg ctgccttccc tgccccagta cccccaggag aagattccaa agatgtagcc 120

gccccacaca gacagccact cacctcttca gaacgaattg acaaacaaat tcggtacatc 180

ctcgacggca tctcagccct gagaaaggag acatgtaaca agagtaacat gtgtgaaagc 240

agcaaagagg cactggcaga aaacaacctg aaccttccaa agatggctga aaaagatgga 300

tgcttccaat ctggattcaa tgaggagact tgcctggtga aaatcatcac tggtcttttg 360

gagtttgagg tatacctaga gtacctccag aacagatttg agagtagtga ggaacaagcc 420

agagctgtgc agatgagtac aaaagtcctg atccagttcc tgcagaaaaa ggcaaagaat 480

ctagatgcaa taaccacccc tgacccaacc acaaatgcca gcctgctgac gaagctgcag 540

gcacagaacc agtggctgca ggacatgaca actcatctca ttctgcgcag ctttaaggag 600

ttcctgcagt ccagcctgag ggctcttcgg caaatgtag 639

<210> 22

<211> 756

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 22

atggctatga gttctttttt gatcaactca aactatgtcg accccaagtt ccctccatgc 60

gaggaatatt cacagagcga ttacctaccc agcgaccact cgcccgggta ctacgccggc 120

ggccagaggc gagagagcag cttccagccg gaggcgggct tcgggcggcg cgcggcgtgc 180

accgtgcagc gctacgcggc ctgccgggac cctgggcccc cgccgcctcc gccaccaccc 240

ccgccgcccc cgccaccgcc cggtctgtcc cctcgggctc ctgcgccgcc acccgccggg 300

gccctcctcc cggagcccgg ccagcgctgc gaggcggtca gcagcagccc cccgccgcct 360

ccctgcgccc agaaccccct gcaccccagc ccgtcccact ccgcgtgcaa agagcccgtc 420

gtctacccct ggatgcgcaa agttcacgtg agcacggtaa accccaatta cgccggcggg 480

gagcccaagc gctctcggac cgcctacacg cgccagcagg tcttggagct ggagaaggaa 540

tttcactaca accgctacct gacacggcgc cggagggtgg agatcgccca cgcgctctgc 600

ctctccgagc gccagatcaa gatctggttc cagaaccggc gcatgaagtg gaaaaaagac 660

cacaagttgc ccaacaccaa gatccgctcg ggtggtgcgg caggctcagc cggagggccc 720

cctggccggc ccaatggagg cccccgcgcg ctctag 756

<210> 23

<211> 1407

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 23

atgctggccg tcggctgcgc gctgctggct gccctgctgg ccgcgccggg agcggcgctg 60

gccccaaggc gctgccctgc gcaggaggtg gcgagaggcg tgctgaccag tctgccagga 120

gacagcgtga ctctgacctg cccgggggta gagccggaag acaatgccac tgttcactgg 180

gtgctcagga agccggctgc aggctcccac cccagcagat gggctggcat gggaaggagg 240

ctgctgctga ggtcggtgca gctccacgac tctggaaact attcatgcta ccgggccggc 300

cgcccagctg ggactgtgca cttgctggtg gatgttcccc ccgaggagcc ccagctctcc 360

tgcttccgga agagccccct cagcaatgtt gtttgtgagt ggggtcctcg gagcacccca 420

tccctgacga caaaggctgt gctcttggtg aggaagtttc agaacagtcc ggccgaagac 480

ttccaggagc cgtgccagta ttcccaggag tcccagaagt tctcctgcca gttagcagtc 540

ccggagggag acagctcttt ctacatagtg tccatgtgcg tcgccagtag tgtcgggagc 600

aagttcagca aaactcaaac ctttcagggt tgtggaatct tgcagcctga tccgcctgcc 660

aacatcacag tcactgccgt ggccagaaac ccccgctggc tcagtgtcac ctggcaagac 720

ccccactcct ggaactcatc tttctacaga ctacggtttg agctcagata tcgggctgaa 780

cggtcaaaga cattcacaac atggatggtc aaggacctcc agcatcactg tgtcatccac 840

gacgcctgga gcggcctgag gcacgtggtg cagcttcgtg cccaggagga gttcgggcaa 900

ggcgagtgga gcgagtggag cccggaggcc atgggcacgc cttggacaga atccaggagt 960

cctccagctg agaacgaggt gtccaccccc atgcaggcac ttactactaa taaagacgat 1020

gataatattc tcttcagaga ttctgcaaat gcgacaagcc tcccagtgca agattcttct 1080

tcagtaccac tgcccacatt cctggttgct ggagggagcc tggccttcgg aacgctcctc 1140

tgcattgcca ttgttctgag gttcaagaag acgtggaagc tgcgggctct gaaggaaggc 1200

aagacaagca tgcatccgcc gtactctttg gggcagctgg tcccggagag gcctcgaccc 1260

accccagtgc ttgttcctct catctcccca ccggtgtccc ccagcagcct ggggtctgac 1320

aatacctcga gccacaaccg accagatgcc agggacccac ggagccctta tgacatcagc 1380

aatacagact acttcttccc cagatag 1407

<210> 24

<211> 600

<212> ДНК

<213> Rattus norvegicus

<400> 24

atgaactgtg tttgtcgcct ggtcctggtg gtgctgagcc tctggccaga tagagtcgtt 60

gcccctgggc caccagctgg ctcccctcga gtgtcttcag accctcgtgc agatctggat 120

agcgctgtcc tcttgaccag gtccctcctg gcagacacac ggcaactagc tgcacagatg 180

agagacaaat tcccagctga tggagaccac aatctggact ccctacctac cttggccatg 240

agcgctggga cactgggatc tttgcagctt cctggagtgc tgacaaggct tcgagtagac 300

ttaatgtcct acttccgaca tgtacagtgg ttgcgccggg cagctggtcc ttccctaaag 360

actctggagc cagagctggg tgccctgcaa gcccgactgg aacggctact tcgtcgctta 420

cagctcttga tgtctcgcct agccttgccc caggcagccc cggaccaacc tgcggtccct 480

ctgggccctc ctgcctcggc ctggggaagc atccgggcag ctcatgccat cctaggaggg 540

ctgcacctga ccttggactg ggccgtgcgg ggcctgctgt tgttaaagac tcggctgtaa 600

<210> 25

<211> 609

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 25

atgaaggtct tggcggcagg agttgtgccc ctgctgttgg ttctgcactg gaaacatggg 60

gcggggagcc ccctccccat cacccctgtc aacgccacct gtgccatacg ccacccatgt 120

cacaacaacc tcatgaacca gatcaggagc caactggcac agctcaatgg cagtgccaat 180

gccctcttta ttctctatta cacagcccag ggggagccgt tccccaacaa cctggacaag 240

ctatgtggcc ccaacgtgac ggacttcccg cccttccacg ccaacggcac ggagaaggcc 300

aagctggtgg agctgtaccg catagtcgtg taccttggca cctccctggg caacatcacc 360

cgggaccaga agatcctcaa ccccagtgcc ctcagcctcc acagcaagct caacgccacc 420

gccgacatcc tgcgaggcct ccttagcaac gtgctgtgcc gcctgtgcag caagtaccac 480

gtgggccatg tggacgtgac ctacggccct gacacctcgg gtaaggatgt cttccagaag 540

aagaagctgg gctgtcaact cctggggaag tataagcaga tcatcgccgt gttggcccag 600

gccttctag 609

<210> 26

<211> 3294

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 26

atgatggata tttacgtatg tttgaaacga ccatcctgga tggtggacaa taaaagaatg 60

aggactgctt caaatttcca gtggctgtta tcaacattta ttcttctata tctaatgaat 120

caagtaaata gccagaaaaa gggggctcct catgatttga agtgtgtaac taacaatttg 180

caagtgtgga actgttcttg gaaagcaccc tctggaacag gccgtggtac tgattatgaa 240

gtttgcattg aaaacaggtc ccgttcttgt tatcagttgg agaaaaccag tattaaaatt 300

ccagctcttt cacatggtga ttatgaaata acaataaatt ctctacatga ttttggaagt 360

tctacaagta aattcacact aaatgaacaa aacgtttcct taattccaga tactccagag 420

atcttgaatt tgtctgctga tttctcaacc tctacattat acctaaagtg gaacgacagg 480

ggttcagttt ttccacaccg ctcaaatgtt atctgggaaa ttaaagttct acgtaaagag 540

agtatggagc tcgtaaaatt agtgacccac aacacaactc tgaatggcaa agatacactt 600

catcactgga gttgggcctc agatatgccc ttggaatgtg ccattcattt tgtggaaatt 660

agatgctaca ttgacaatct tcatttttct ggtctcgaag agtggagtga ctggagccct 720

gtgaagaaca tttcttggat acctgattct cagactaagg tttttcctca agataaagtg 780

atacttgtag gctcagacat aacattttgt tgtgtgagtc aagaaaaagt gttatcagca 840

ctgattggcc atacaaactg ccccttgatc catcttgatg gggaaaatgt tgcaatcaag 900

attcgtaata tttctgtttc tgcaagtagt ggaacaaatg tagtttttac aaccgaagat 960

aacatatttg gaaccgttat ttttgctgga tatccaccag atactcctca acaactgaat 1020

tgtgagacac atgatttaaa agaaattata tgtagttgga atccaggaag ggtgacagcg 1080

ttggtgggcc cacgtgctac aagctacact ttagttgaaa gtttttcagg aaaatatgtt 1140

agacttaaaa gagctgaagc acctacaaac gaaagctatc aattattatt tcaaatgctt 1200

ccaaatcaag aaatatataa ttttactttg aatgctcaca atccgctggg tcgatcacaa 1260

tcaacaattt tagttaatat aactgaaaaa gtttatcccc atactcctac ttcattcaaa 1320

gtgaaggata ttaattcaac agctgttaaa ctttcttggc atttaccagg caactttgca 1380

aagattaatt ttttatgtga aattgaaatt aagaaatcta attcagtaca agagcagcgg 1440

aatgtcacaa tcaaaggagt agaaaattca agttatcttg ttgctctgga caagttaaat 1500

ccatacactc tatatacttt tcggattcgt tgttctactg aaactttctg gaaatggagc 1560

aaatggagca ataaaaaaca acatttaaca acagaagcca gtccttcaaa ggggcctgat 1620

acttggagag agtggagttc tgatggaaaa aatttaataa tctattggaa gcctttaccc 1680

attaatgaag ctaatggaaa aatactttcc tacaatgtat cgtgttcatc agatgaggaa 1740

acacagtccc tttctgaaat ccctgatcct cagcacaaag cagagatacg acttgataag 1800

aatgactaca tcatcagcgt agtggctaaa aattctgtgg gctcatcacc accttccaaa 1860

atagcgagta tggaaattcc aaatgatgat ctcaaaatag aacaagttgt tgggatggga 1920

aaggggattc tcctcacctg gcattacgac cccaacatga cttgcgacta cgtcattaag 1980

tggtgtaact cgtctcggtc ggaaccatgc cttatggact ggagaaaagt tccctcaaac 2040

agcactgaaa ctgtaataga atctgatgag tttcgaccag gtataagata taattttttc 2100

ctgtatggat gcagaaatca aggatatcaa ttattacgct ccatgattgg atatatagaa 2160

gaattggctc ccattgttgc accaaatttt actgttgagg atacttctgc agattcgata 2220

ttagtaaaat gggaagacat tcctgtggaa gaacttagag gctttttaag aggatatttg 2280

ttttactttg gaaaaggaga aagagacaca tctaagatga gggttttaga atcaggtcgt 2340

tctgacataa aagttaagaa tattactgac atatcccaga agacactgag aattgctgat 2400

cttcaaggta aaacaagtta ccacctggtc ttgcgagcct atacagatgg tggagtgggc 2460

ccggagaaga gtatgtatgt ggtgacaaag gaaaattctg tgggattaat tattgccatt 2520

ctcatcccag tggcagtggc tgtcattgtt ggagtggtga caagtatcct ttgctatcgg 2580

aaacgagaat ggattaaaga aaccttctac cctgatattc caaatccaga aaactgtaaa 2640

gcattacagt ttcaaaagag tgtctgtgag ggaagcagtg ctcttaaaac attggaaatg 2700

aatccttgta ccccaaataa tgttgaggtt ctggaaactc gatcagcatt tcctaaaata 2760

gaagatacag aaataatttc cccagtagct gagcgtcctg aagatcgctc tgatgcagag 2820

cctgaaaacc atgtggttgt gtcctattgt ccacccatca ttgaggaaga aataccaaac 2880

ccagccgcag atgaagctgg agggactgca caggttattt acattgatgt tcagtcgatg 2940

tatcagcctc aagcaaaacc agaagaagaa caagaaaatg accctgtagg aggggcaggc 3000

tataagccac agatgcacct ccccattaat tctactgtgg aagatatagc tgcagaagag 3060

gacttagata aaactgcggg ttacagacct caggccaatg taaatacatg gaatttagtg 3120

tctccagact ctcctagatc catagacagc aacagtgaga ttgtctcatt tggaagtcca 3180

tgctccatta attcccgaca atttttgatt cctcctaaag atgaagactc tcctaaatct 3240

aatggaggag ggtggtcctt tacaaacttt tttcagaaca aaccaaacga ttaa 3294

<210> 27

<211> 2310

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 27

atggcccaat ggaatcagct acagcagctt gacacacggt acctggagca gctccatcag 60

ctctacagtg acagcttccc aatggagctg cggcagtttc tggccccttg gattgagagt 120

caagattggg catatgcggc cagcaaagaa tcacatgcca ctttggtgtt tcataatctc 180

ctgggagaga ttgaccagca gtatagccgc ttcctgcaag agtcgaatgt tctctatcag 240

cacaatctac gaagaatcaa gcagtttctt cagagcaggt atcttgagaa gccaatggag 300

attgcccgga ttgtggcccg gtgcctgtgg gaagaatcac gccttctaca gactgcagcc 360

actgcggccc agcaaggggg ccaggccaac caccccacag cagccgtggt gacggagaag 420

cagcagatgc tggagcagca ccttcaggat gtccggaaga gagtgcagga tctagaacag 480

aaaatgaaag tggtagagaa tctccaggat gactttgatt tcaactataa aaccctcaag 540

agtcaaggag acatgcaaga tctgaatgga aacaaccagt cagtgaccag gcagaagatg 600

cagcagctgg aacagatgct cactgcgctg gaccagatgc ggagaagcat cgtgagtgag 660

ctggcggggc ttttgtcagc gatggagtac gtgcagaaaa ctctcacgga cgaggagctg 720

gctgactgga agaggcggca acagattgcc tgcattggag gcccgcccaa catctgccta 780

gatcggctag aaaactggat aacgtcatta gcagaatctc aacttcagac ccgtcaacaa 840

attaagaaac tggaggagtt gcagcaaaaa gtttcctaca aaggggaccc cattgtacag 900

caccggccga tgctggagga gagaatcgtg gagctgttta gaaacttaat gaaaagtgcc 960

tttgtggtgg agcggcagcc ctgcatgccc atgcatcctg accggcccct cgtcatcaag 1020

accggcgtcc agttcactac taaagtcagg ttgctggtca aattccctga gttgaattat 1080

cagcttaaaa ttaaagtgtg cattgacaaa gactctgggg acgttgcagc tctcagagga 1140

tcccggaaat ttaacattct gggcacaaac acaaaagtga tgaacatgga agaatccaac 1200

aacggcagcc tctctgcaga attcaaacac ttgaccctga gggagcagag atgtgggaat 1260

gggggccgag ccaattgtga tgcttccctg attgtgactg aggagctgca cctgatcacc 1320

tttgagaccg aggtgtatca ccaaggcctc aagattgacc tagagaccca ctccttgcca 1380

gttgtggtga tctccaacat ctgtcagatg ccaaatgcct gggcgtccat cctgtggtac 1440

aacatgctga ccaacaatcc caagaatgta aactttttta ccaagccccc aattggaacc 1500

tgggatcaag tggccgaggt cctgagctgg cagttctcct ccaccaccaa gcgaggactg 1560

agcatcgagc agctgactac actggcagag aaactcttgg gacctggtgt gaattattca 1620

gggtgtcaga tcacatgggc taaattttgc aaagaaaaca tggctggcaa gggcttctcc 1680

ttctgggtct ggctggacaa tatcattgac cttgtgaaaa agtacatcct ggccctttgg 1740

aacgaagggt acatcatggg ctttatcagt aaggagcggg agcgggccat cttgagcact 1800

aagcctccag gcaccttcct gctaagattc agtgaaagca gcaaagaagg aggcgtcact 1860

ttcacttggg tggagaagga catcagcggt aagacccaga tccagtccgt ggaaccatac 1920

acaaagcagc agctgaacaa catgtcattt gctgaaatca tcatgggcta taagatcatg 1980

gatgctacca atatcctggt gtctccactg gtctatctct atcctgacat tcccaaggag 2040

gaggcattcg gaaagtattg tcggccagag agccaggagc atcctgaagc tgacccaggc 2100

gctgccccat acctgaagac caagtttatc tgtgtgacac caacgacctg cagcaatacc 2160

attgacctgc cgatgtcccc ccgcacttta gattcattga tgcagtttgg aaataatggt 2220

gaaggtgctg aaccctcagc aggagggcag tttgagtccc tcacctttga catggagttg 2280

acctcggagt gcgctacctc ccccatgtga 2310

<210> 28

<211> 1956

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 28

atgaacaaat tacggcaaag ttttaggaga aagaaggatg tttatgttcc agaggccagt 60

cgtccacatc agtggcagac agatgaagaa ggcgttcgca ccggaaaatg tagcttcccg 120

gttaagtacc ttggccatgt agaagttgat gaatcaagag gaatgcacat ctgtgaagat 180

gctgtaaaaa gattgaaagc tgaaaggaag ttcttcaaag gcttctttgg aaaaactgga 240

aagaaagcag ttaaagcagt tctgtgggtc tcagcagatg gactcagagt tgtggatgaa 300

aaaactaagg acctcatagt tgaccagacg atagagaaag tttctttctg tgccccagac 360

aggaactttg atagagcctt ttcttacata tgccgtgatg gcaccactcg tcgctggatc 420

tgtcactgct tcatggctgt caaggacaca ggtgaaaggt tgagccatgc agtaggctgt 480

gcttttgcag cctgtttaga gcgcaagcag aagcgggaga aggaatgtgg agtgactgct 540

acttttgatg ctagtcggac cacttttaca agagaaggat cattccgtgt cacaacagcc 600

actgaacaag cagaaagaga ggagatcatg aaacaaatgc aagatgccaa gaaagctgaa 660

acagataaga tagtcgttgg ttcatcagtt gcccctggca acactgcccc atccccatcc 720

tctcccacct ctcctacttc tgatgccacg acctctctgg agatgaacaa tcctcatgcc 780

atcccacgcc ggcatgctcc aattgaacag cttgctcgcc aaggctcttt ccgaggtttt 840

cctgctctta gccagaagat gtcacccttt aaacgccaac tatccctacg catcaatgag 900

ttgccttcca ctatgcagag gaagactgat ttccccatta aaaatgcagt gccagaagta 960

gaaggggagg cagagagcat cagctccctg tgctcacaga tcaccaatgc cttcagcaca 1020

cctgaggacc ccttctcatc tgctccgatg accaaaccag tgacagtggt ggcaccacaa 1080

tctcctacct tccaagctaa tggcactgac tcagccttcc atgtgcttgc taagccagcc 1140

catactgctc tagcacccgt agcaatgcct gtgcgtgaaa ccaacccttg ggcccatgcc 1200

cctgatgctg ctaacaagga aattgcagcc acatgttcgg ggaccgagtg gggtcaatct 1260

tctggtgctg cctctccagg tctcttccag gccggtcata gacgtactcc ctctgaggcc 1320

gaccgatggt tagaagaggt gtctaagagc gtccgggctc agcagcccca ggcctcagct 1380

gctcctctgc agccagttct ccagcctcct ccacccactg ccatctccca gccagcatca 1440

cctttccaag ggaatgcatt cctcacctct cagcctgtgc cagtgggtgt ggtcccagcc 1500

ctgcaaccag cctttgtccc tgcccagtcc tatcctgtgg ccaatggaat gccctatcca 1560

gcccctaatg tgcctgtggt gggcatcact ccctcccaga tggtggccaa cgtatttggc 1620

actgcaggcc accctcaggc tgcccatccc catcagtcac ccagcctggt caggcagcag 1680

acattccctc actacgaggc aagcagtgct accaccagtc ccttctttaa gcctcctgct 1740

cagcacctca acggttctgc agctttcaat ggtgtagatg atggcaggtt ggcctcagca 1800

gacaggcata cagaggttcc tacaggcacc tgcccagtgg atccttttga agcccagtgg 1860

gctgcattag aaaataagtc caagcagcgt actaatccct cccctaccaa ccctttctcc 1920

agtgacttac agaagacgtt tgaaattgaa ctttaa 1956

<210> 29

<211> 1812

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 29

atgaacaaat tacggcaaag ttttaggaga aagaaggatg tttatgttcc agaggccagt 60

cgtccacatc agtggcagac agatgaagaa ggcgttcgca ccggaaaatg tagcttcccg 120

gttaagtacc ttggccatgt agaagttgat gaatcaagag gaatgcacat ctgtgaagat 180

gctgtaaaaa gattgaaagc tgaaaggaag ttcttcaaag gcttctttgg aaaaactgga 240

aagaaagcag ttaaagcagt tctgtgggtc tcagcagatg gactcagagt tgtggatgaa 300

aaaactaagg acctcatagt tgaccagacg atagagaaag tttctttctg tgccccagac 360

aggaactttg atagagcctt ttcttacata tgccgtgatg gcaccactcg tcgctggatc 420

tgtcactgct tcatggctgt caaggacaca ggtgaaaggt tgagccatgc agtaggctgt 480

gcttttgcag cctgtttaga gcgcaagcag aagcgggaga aggaatgtgg agtgactgct 540

acttttgatg ctagtcggac cacttttaca agagaaggat cattccgtgt cacaacagcc 600

actgaacaag cagaaagaga ggagatcatg aaacaaatgc aagatgccaa gaaagctgaa 660

acagataaga tagtcgttgg ttcatcagtt gcccctggca acactgcccc atccccatcc 720

tctcccacct ctcctacttc tgatgccacg acctctctgg agatgaacaa tcctcatgcc 780

atcccacgcc ggcatgctcc aattgaacag cttgctcgcc aaggctcttt ccgaggtttt 840

cctgctctta gccagaagat gtcacccttt aaacgccaac tatccctacg catcaatgag 900

ttgccttcca ctatgcagag gaagactgat ttccccatta aaaatgcagt gccagaagta 960

gaaggggagg cagagagcat cagctccctg tgctcacaga tcaccaatgc cttcagcaca 1020

cctgaggacc ccttctcatc tgctccgatg accaaaccag tgacagtggt ggcaccacaa 1080

tctcctacct tccaagggac cgagtggggt caatcttctg gtgctgcctc tccaggtctc 1140

ttccaggccg gtcatagacg tactccctct gaggccgacc gatggttaga agaggtgtct 1200

aagagcgtcc gggctcagca gccccaggcc tcagctgctc ctctgcagcc agttctccag 1260

cctcctccac ccactgccat ctcccagcca gcatcacctt tccaagggaa tgcattcctc 1320

acctctcagc ctgtgccagt gggtgtggtc ccagccctgc aaccagcctt tgtccctgcc 1380

cagtcctatc ctgtggccaa tggaatgccc tatccagccc ctaatgtgcc tgtggtgggc 1440

atcactccct cccagatggt ggccaacgta tttggcactg caggccaccc tcaggctgcc 1500

catccccatc agtcacccag cctggtcagg cagcagacat tccctcacta cgaggcaagc 1560

agtgctacca ccagtccctt ctttaagcct cctgctcagc acctcaacgg ttctgcagct 1620

ttcaatggtg tagatgatgg caggttggcc tcagcagaca ggcatacaga ggttcctaca 1680

ggcacctgcc cagtggatcc ttttgaagcc cagtgggctg cattagaaaa taagtccaag 1740

cagcgtacta atccctcccc taccaaccct ttctccagtg acttacagaa gacgtttgaa 1800

attgaacttt aa 1812

<210> 30

<211> 1923

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 30

atgaacaaat tacggcaaag ttttaggaga aagaaggatg tttatgttcc agaggccagt 60

cgtccacatc agtggcagac agatgaagaa ggcgttcgca ccggaaaatg tagcttcccg 120

gttaagtacc ttggccatgt agaagttgat gaatcaagag gaatgcacat ctgtgaagat 180

gctgtaaaaa gattgaaagc tactggaaag aaagcagtta aagcagttct gtgggtctca 240

gcagatggac tcagagttgt ggatgaaaaa actaaggacc tcatagttga ccagacgata 300

gagaaagttt ctttctgtgc cccagacagg aactttgata gagccttttc ttacatatgc 360

cgtgatggca ccactcgtcg ctggatctgt cactgcttca tggctgtcaa ggacacaggt 420

gaaaggttga gccatgcagt aggctgtgct tttgcagcct gtttagagcg caagcagaag 480

cgggagaagg aatgtggagt gactgctact tttgatgcta gtcggaccac ttttacaaga 540

gaaggatcat tccgtgtcac aacagccact gaacaagcag aaagagagga gatcatgaaa 600

caaatgcaag atgccaagaa agctgaaaca gataagatag tcgttggttc atcagttgcc 660

cctggcaaca ctgccccatc cccatcctct cccacctctc ctacttctga tgccacgacc 720

tctctggaga tgaacaatcc tcatgccatc ccacgccggc atgctccaat tgaacagctt 780

gctcgccaag gctctttccg aggttttcct gctcttagcc agaagatgtc accctttaaa 840

cgccaactat ccctacgcat caatgagttg ccttccacta tgcagaggaa gactgatttc 900

cccattaaaa atgcagtgcc agaagtagaa ggggaggcag agagcatcag ctccctgtgc 960

tcacagatca ccaatgcctt cagcacacct gaggacccct tctcatctgc tccgatgacc 1020

aaaccagtga cagtggtggc accacaatct cctaccttcc aagctaatgg cactgactca 1080

gccttccatg tgcttgctaa gccagcccat actgctctag cacccgtagc aatgcctgtg 1140

cgtgaaacca acccttgggc ccatgcccct gatgctgcta acaaggaaat tgcagccaca 1200

tgttcgggga ccgagtgggg tcaatcttct ggtgctgcct ctccaggtct cttccaggcc 1260

ggtcatagac gtactccctc tgaggccgac cgatggttag aagaggtgtc taagagcgtc 1320

cgggctcagc agccccaggc ctcagctgct cctctgcagc cagttctcca gcctcctcca 1380

cccactgcca tctcccagcc agcatcacct ttccaaggga atgcattcct cacctctcag 1440

cctgtgccag tgggtgtggt cccagccctg caaccagcct ttgtccctgc ccagtcctat 1500

cctgtggcca atggaatgcc ctatccagcc cctaatgtgc ctgtggtggg catcactccc 1560

tcccagatgg tggccaacgt atttggcact gcaggccacc ctcaggctgc ccatccccat 1620

cagtcaccca gcctggtcag gcagcagaca ttccctcact acgaggcaag cagtgctacc 1680

accagtccct tctttaagcc tcctgctcag cacctcaacg gttctgcagc tttcaatggt 1740

gtagatgatg gcaggttggc ctcagcagac aggcatacag aggttcctac aggcacctgc 1800

ccagtggatc cttttgaagc ccagtgggct gcattagaaa ataagtccaa gcagcgtact 1860

aatccctccc ctaccaaccc tttctccagt gacttacaga agacgtttga aattgaactt 1920

taa 1923

<210> 31

<211> 1779

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 31

atgaacaaat tacggcaaag ttttaggaga aagaaggatg tttatgttcc agaggccagt 60

cgtccacatc agtggcagac agatgaagaa ggcgttcgca ccggaaaatg tagcttcccg 120

gttaagtacc ttggccatgt agaagttgat gaatcaagag gaatgcacat ctgtgaagat 180

gctgtaaaaa gattgaaagc tactggaaag aaagcagtta aagcagttct gtgggtctca 240

gcagatggac tcagagttgt ggatgaaaaa actaaggacc tcatagttga ccagacgata 300

gagaaagttt ctttctgtgc cccagacagg aactttgata gagccttttc ttacatatgc 360

cgtgatggca ccactcgtcg ctggatctgt cactgcttca tggctgtcaa ggacacaggt 420

gaaaggttga gccatgcagt aggctgtgct tttgcagcct gtttagagcg caagcagaag 480

cgggagaagg aatgtggagt gactgctact tttgatgcta gtcggaccac ttttacaaga 540

gaaggatcat tccgtgtcac aacagccact gaacaagcag aaagagagga gatcatgaaa 600

caaatgcaag atgccaagaa agctgaaaca gataagatag tcgttggttc atcagttgcc 660

cctggcaaca ctgccccatc cccatcctct cccacctctc ctacttctga tgccacgacc 720

tctctggaga tgaacaatcc tcatgccatc ccacgccggc atgctccaat tgaacagctt 780

gctcgccaag gctctttccg aggttttcct gctcttagcc agaagatgtc accctttaaa 840

cgccaactat ccctacgcat caatgagttg ccttccacta tgcagaggaa gactgatttc 900

cccattaaaa atgcagtgcc agaagtagaa ggggaggcag agagcatcag ctccctgtgc 960

tcacagatca ccaatgcctt cagcacacct gaggacccct tctcatctgc tccgatgacc 1020

aaaccagtga cagtggtggc accacaatct cctaccttcc aagggaccga gtggggtcaa 1080

tcttctggtg ctgcctctcc aggtctcttc caggccggtc atagacgtac tccctctgag 1140

gccgaccgat ggttagaaga ggtgtctaag agcgtccggg ctcagcagcc ccaggcctca 1200

gctgctcctc tgcagccagt tctccagcct cctccaccca ctgccatctc ccagccagca 1260

tcacctttcc aagggaatgc attcctcacc tctcagcctg tgccagtggg tgtggtccca 1320

gccctgcaac cagcctttgt ccctgcccag tcctatcctg tggccaatgg aatgccctat 1380

ccagccccta atgtgcctgt ggtgggcatc actccctccc agatggtggc caacgtattt 1440

ggcactgcag gccaccctca ggctgcccat ccccatcagt cacccagcct ggtcaggcag 1500

cagacattcc ctcactacga ggcaagcagt gctaccacca gtcccttctt taagcctcct 1560

gctcagcacc tcaacggttc tgcagctttc aatggtgtag atgatggcag gttggcctca 1620

gcagacaggc atacagaggt tcctacaggc acctgcccag tggatccttt tgaagcccag 1680

tgggctgcat tagaaaataa gtccaagcag cgtactaatc cctcccctac caaccctttc 1740

tccagtgact tacagaagac gtttgaaatt gaactttaa 1779

<210> 32

<211> 1830

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 32

atgtcccgca gcgcggcggc cagcggcgga ccccggaggc ctgagcggca cctgccccca 60

gccccctgtg gggccccggg gcccccagaa acctgcagga cggagccaga cggggcgggc 120

accatgaaca agttacggca gagcctgcgg cggaggaagc cagcctacgt gcccgaggcg 180

tcgcgcccgc accagtggca ggcagacgag gacgcggtgc ggaagggcac gtgcagcttc 240

ccggtcaggt acctgggtca cgtggaggta gaggagtccc ggggaatgca cgtgtgtgaa 300

gatgcggtga agaagctgaa ggcgatgggc cgaaagtccg tgaagtctgt cctgtgggtg 360

tcagccgatg ggctccgagt ggtggacgac aaaaccaagg atcttctggt cgaccagacc 420

atcgaaaagg tctccttttg tgctcctgac cgcaacctgg acaaggcttt ctcctatatc 480

tgtcgtgacg ggactacccg ccgctggatc tgccactgtt ttctggcact gaaggactcc 540

ggcgagaggc tgagccacgc tgtgggctgt gcttttgccg cctgcctgga gcgaaaacag 600

cgacgggaga aggaatgtgg ggtcacggcc gccttcgatg ccagccgcac cagcttcgcc 660

cgcgagggct ccttccgcct gtctgggggt gggcggcctg ctgagcgaga ggccccggac 720

aagaagaaag cagaggcagc agctgccccc actgtggctc ctggccctgc ccagcctggg 780

cacgtgtccc cgacaccagc caccacatcc cctggtgaga agggtgaggc aggcacccct 840

gtggctgcag gcaccactgc ggccgccatc ccccggcgcc atgcacccct ggagcagctg 900

gttcgccagg gctccttccg tgggttccca gcactcagcc agaagaactc gcctttcaaa 960

cggcagctga gcctacggct gaatgagctg ccatccacgc tgcagcgccg cactgacttc 1020

caggtgaagg gcacagtgcc tgagatggag cctcctggtg ccggcgacag tgacagcatc 1080

aacgctctgt gcacacagat cagttcatct tttgccagtg ctggagcgcc agcaccaggg 1140

ccaccacctg ccacaacagg gacttctgcc tggggtgagc cctccgtgcc ccctgcagct 1200

gccttccagc ctgggcacaa gcggacacct tcagaggctg agcgatggct ggaggaggtg 1260

tcacaggtgg ccaaggccca gcagcagcag cagcagcaac agcaacagca gcagcagcag 1320

cagcagcaac agcagcaagc agcctcagtg gccccagtgc ccaccatgcc tcctgccctg 1380

cagcctttcc ccgcccccgt ggggcccttt gacgctgcac ctgcccaagt ggccgtgttc 1440

ctgccacccc cacacatgca gccccctttt gtgcccgcct acccgggctt gggctaccca 1500

ccgatgcccc gggtgcccgt ggtgggcatc acaccctcac agatggtggc aaacgccttc 1560

tgctcagccg cccagctcca gcctcagcct gccactctgc ttgggaaagc tggggccttc 1620

ccgccccctg ccatacccag tgcccctggg agccaggccc gccctcgccc caatggggcc 1680

ccctggcccc ctgagccagc gcctgcccca gctccagagt tggacccctt tgaggcccag 1740

tgggcggcat tagaaggcaa agccactgta gagaaaccct ccaacccctt ttctggcgac 1800

ctgcaaaaga cattcgagat tgaactgtag 1830

<210> 33

<211> 918

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 33

atgagtgtgg atccagcttg tccccaaagc ttgccttgct ttgaagcatc cgactgtaaa 60

gaatcttcac ctatgcctgt gatttgtggg cctgaagaaa actatccatc cttgcaaatg 120

tcttctgctg agatgcctca cacggagact gtctctcctc ttccttcctc catggatctg 180

cttattcagg acagccctga ttcttccacc agtcccaaag gcaaacaacc cacttctgca 240

gagaagagtg tcgcaaaaaa ggaagacaag gtcccggtca agaaacagaa gaccagaact 300

gtgttctctt ccacccagct gtgtgtactc aatgatagat ttcagagaca gaaatacctc 360

agcctccagc agatgcaaga actctccaac atcctgaacc tcagctacaa acaggtgaag 420

acctggttcc agaaccagag aatgaaatct aagaggtggc agaaaaacaa ctggccgaag 480

aatagcaatg gtgtgacgca gaaggcctca gcacctacct accccagcct ttactcttcc 540

taccaccagg gatgcctggt gaacccgact gggaaccttc caatgtggag caaccagacc 600

tggaacaatt caacctggag caaccagacc cagaacatcc agtcctggag caaccactcc 660

tggaacactc agacctggtg cacccaatcc tggaacaatc aggcctggaa cagtcccttc 720

tataactgtg gagaggaatc tctgcagtcc tgcatgcagt tccagccaaa ttctcctgcc 780

agtgacttgg aggctgcctt ggaagctgct ggggaaggcc ttaatgtaat acagcagacc 840

actaggtatt ttagtactcc acaaaccatg gatttattcc taaactactc catgaacatg 900

caacctgaag acgtgtga 918

<210> 34

<211> 759

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 34

atgggggtac tgctcacaca gaggacgctg ctcagtctgg tccttgcact cctgtttcca 60

agcatggcga gcatggcggc tataggcagc tgctcgaaag agtaccgcgt gctccttggc 120

cagctccaga agcagacaga tctcatgcag gacaccagca gactcctgga cccctatata 180

cgtatccaag gcctggatgt tcctaaactg agagagcact gcagggagcg ccccggggcc 240

ttccccagtg aggagaccct gagggggctg ggcaggcggg gcttcctgca gaccctcaat 300

gccacactgg gctgcgtcct gcacagactg gccgacttag agcagcgcct ccccaaggcc 360

caggatttgg agaggtctgg gctgaacatc gaggacttgg agaagctgca gatggcgagg 420

ccgaacatcc tcgggctcag gaacaacatc tactgcatgg cccagctgct ggacaactca 480

gacacggctg agcccacgaa ggctggccgg ggggcctctc agccgcccac ccccacccct 540

gcctcggatg cttttcagcg caagctggag ggctgcaggt tcctgcatgg ctaccatcgc 600

ttcatgcact cagtggggcg ggtcttcagc aagtgggggg agagcccgaa ccggagccgg 660

agacacagcc cccaccaggc cctgaggaag ggggtgcgca ggaccagacc ctccaggaaa 720

ggcaagagac tcatgaccag gggacagctg ccccggtag 759

<210> 35

<211> 2940

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 35

atggctctat ttgcagtctt tcagacaaca ttcttcttaa cattgctgtc cttgaggact 60

taccagagtg aagtcttggc tgaacgttta ccattgactc ctgtatcact taaagtttcc 120

accaattcta cgcgtcagag tttgcactta caatggactg tccacaacct tccttatcat 180

caggaattga aaatggtatt tcagatccag atcagtagga ttgaaacatc caatgtcatc 240

tgggtgggga attacagcac cactgtgaag tggaaccagg ttctgcattg gagctgggaa 300

tctgagctcc ctttggaatg tgccacacac tttgtaagaa taaagagttt ggtggacgat 360

gccaagttcc ctgagccaaa tttctggagc aactggagtt cctgggagga agtcagtgta 420

caagattcta ctggacagga tatattgttc gttttcccta aagataagct ggtggaagaa 480

ggcaccaatg ttaccatttg ttacgtttct aggaacattc aaaataatgt atcctgttat 540

ttggaaggga aacagattca tggagaacaa cttgatccac atgtaactgc attcaacttg 600

aatagtgtgc ctttcattag gaataaaggg acaaatatct attgtgaggc aagtcaagga 660

aatgtcagtg aaggcatgaa aggcatcgtt ctttttgtct caaaagtact tgaggagccc 720

aaggactttt cttgtgaaac cgaggacttc aagactttgc actgtacttg ggatcctggg 780

acggacactg ccttggggtg gtctaaacaa ccttcccaaa gctacacttt atttgaatca 840

ttttctgggg aaaagaaact ttgtacacac aaaaactggt gtaattggca aataactcaa 900

gactcacaag aaacctataa cttcacactc atagctgaaa attacttaag gaagagaagt 960

gtcaatatcc tttttaacct gactcatcga gtttatttaa tgaatccttt tagtgtcaac 1020

tttgaaaatg taaatgccac aaatgccatc atgacctgga aggtgcactc cataaggaat 1080

aatttcacat atttgtgtca gattgaactc catggtgaag gaaaaatgat gcaatacaat 1140

gtttccatca aggtgaacgg tgagtacttc ttaagtgaac tggaacctgc cacagagtac 1200

atggcgcgag tacggtgtgc tgatgccagc cacttctgga aatggagtga atggagtggt 1260

cagaacttca ccacacttga agctgctccc tcagaggccc ctgatgtctg gagaattgtg 1320

agcttggagc caggaaatca tactgtgacc ttattctgga agccattatc aaaactgcat 1380

gccaatggaa agatcctgtt ctataatgta gttgtagaaa acctagacaa accatccagt 1440

tcagagctcc attccattcc agcaccagcc aacagcacaa aactaatcct tgacaggtgt 1500

tcctaccaaa tctgcgtcat agccaacaac agtgtgggtg cttctcctgc ttctgtaata 1560

gtcatctctg cagaccccga aaacaaagag gttgaggaag aaagaattgc aggcacagag 1620

ggtggattct ctctgtcttg gaaaccccaa cctggagatg ttataggcta tgttgtggac 1680

tggtgtgacc atacccagga tgtgctcggt gatttccagt ggaagaatgt aggtcccaat 1740

accacaagca cagtcattag cacagatgct tttaggccag gagttcgata tgacttcaga 1800

atttatgggt tatctacaaa aaggattgct tgtttattag agaaaaaaac aggatactct 1860

caggaacttg ctccttcaga caaccctcac gtgctggtgg atacattgac atcccactcc 1920

ttcactctga gttggaaaga ttactctact gaatctcaac ctggttttat acaagggtac 1980

catgtctatc tgaaatccaa ggcgaggcag tgccacccac gatttgaaaa ggcagttctt 2040

tcagatggtt cagaatgttg caaatacaaa attgacaacc cggaagaaaa ggcattgatt 2100

gtggacaacc taaagccaga atccttctat gagtttttca tcactccatt cactagtgct 2160

ggtgaaggcc ccagtgctac gttcacgaag gtcacgactc cggatgaaca ctcctcgatg 2220

ctgattcata tcctactgcc catggttttc tgcgtcttgc tcatcatggt catgtgctac 2280

ttgaaaagtc agtggatcaa ggagacctgt tatcctgaca tccctgaccc ttacaagagc 2340

agcatcctgt cattaataaa attcaaggag aaccctcacc taataataat gaatgtcagt 2400

gactgtatcc cagatgctat tgaagttgta agcaagccag aagggacaaa gatacagttc 2460

ctaggcacta ggaagtcact cacagaaacc gagttgacta agcctaacta cctttatctc 2520

cttccaacag aaaagaatca ctctggccct ggcccctgca tctgttttga gaacttgacc 2580

tataaccagg cagcttctga ctctggctct tgtggccatg ttccagtatc cccaaaagcc 2640

ccaagtatgc tgggactaat gacctcacct gaaaatgtac taaaggcact agaaaaaaac 2700

tacatgaact ccctgggaga aatcccagct ggagaaacaa gtttgaatta tgtgtcccag 2760

ttggcttcac ccatgtttgg agacaaggac agtctcccaa caaacccagt agaggcacca 2820

cactgttcag agtataaaat gcaaatggca gtctccctgc gtcttgcctt gcctcccccg 2880

accgagaata gcagcctctc ctcaattacc cttttagatc caggtgaaca ctactgctaa 2940

<210> 36

<211> 798

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 36

atgcacttct acagactatt ccttggggcc acacgtaggt tcttgaatcc cgaatggaaa 60

ggggagattg ataactggtg tgtttatgtt cttacaagtc ttctgccttt taaaatccag 120

tcccaggaca tcaaagctct gcagaaagaa ctcgagcaat ttgccaagct cctgaagcag 180

aagaggatca ccctgggata tacacaggcc gatgtggggc tcaccctggg ggttctattt 240

gggaaggtat tcagccaaac gaccatctgc cgctttgagg ctctgcagct tagcttcaag 300

aacatgtgta agctgcggcc cttgctgcag aagtgggtgg aggaagctga caacaatgaa 360

aatcttcagg agatatgcaa agcagaaacc ctcgtgcagg cccgaaagag aaagcgaacc 420

agtatcgaga accgagtgag aggcaacctg gagaatttgt tcctgcagtg cccgaaaccc 480

acactgcagc agatcagcca catcgcccag cagcttgggc tcgagaagga tgtggtccga 540

gtgtggttct gtaaccggcg ccagaagggc aagcgatcaa gcagcgacta tgcacaacga 600

gaggattttg aggctgctgg gtctcctttc tcagggggac cagtgtcctt tcctctggcc 660

ccagggcccc attttggtac cccaggctat gggagccctc acttcactgc actgtactcc 720

tcggtccctt tccctgaggg ggaagccttt ccccctgtct ccgtcaccac tctgggctct 780

cccatgcatt caaactga 798

<210> 37

<211> 1083

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 37

atggcgggac acctggcttc ggatttcgcc ttctcgcccc ctccaggtgg tggaggtgat 60

gggccagggg ggccggagcc gggctgggtt gatcctcgga cctggctaag cttccaaggc 120

cctcctggag ggccaggaat cgggccgggg gttgggccag gctctgaggt gtgggggatt 180

cccccatgcc ccccgccgta tgagttctgt ggggggatgg cgtactgtgg gccccaggtt 240

ggagtggggc tagtgcccca aggcggcttg gagacctctc agcctgaggg cgaagcagga 300

gtcggggtgg agagcaactc cgatggggcc tccccggagc cctgcaccgt cacccctggt 360

gccgtgaagc tggagaagga gaagctggag caaaacccgg aggagtccca ggacatcaaa 420

gctctgcaga aagaactcga gcaatttgcc aagctcctga agcagaagag gatcaccctg 480

ggatatacac aggccgatgt ggggctcacc ctgggggttc tatttgggaa ggtattcagc 540

caaacgacca tctgccgctt tgaggctctg cagcttagct tcaagaacat gtgtaagctg 600

cggcccttgc tgcagaagtg ggtggaggaa gctgacaaca atgaaaatct tcaggagata 660

tgcaaagcag aaaccctcgt gcaggcccga aagagaaagc gaaccagtat cgagaaccga 720

gtgagaggca acctggagaa tttgttcctg cagtgcccga aacccacact gcagcagatc 780

agccacatcg cccagcagct tgggctcgag aaggatgtgg tccgagtgtg gttctgtaac 840

cggcgccaga agggcaagcg atcaagcagc gactatgcac aacgagagga ttttgaggct 900

gctgggtctc ctttctcagg gggaccagtg tcctttcctc tggccccagg gccccatttt 960

ggtaccccag gctatgggag ccctcacttc actgcactgt actcctcggt ccctttccct 1020

gagggggaag cctttccccc tgtctccgtc accactctgg gctctcccat gcattcaaac 1080

tga 1083

<210> 38

<211> 953

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 38

tgtacaacat gatggagacg gagctgaagc cgccgggccc gcagcaaact tcggggggcg 60

gcggcggcaa ctccaccgcg gcggcggccg gcggcaacca gaaaaacagc ccggaccgcg 120

tcaagcggcc catgaatgcc ttcatggtgt ggtcccgcgg gcagcggcgc aagatggccc 180

aggagaaccc caagatgcac aactcggaga tcagcaagcg cctgggcgcc gagtggaaac 240

ttttgtcgga gacggagaag cggccgttca tcgacgaggc taagcggctg cgagcgctgc 300

acatgaagga gcacccggat tataaatacc ggccccggcg gaaaaccaag acgctcatga 360

agaaggataa gtacacgctg cccggcgggc tgctggcccc cggcggcaat agcatggcga 420

gcggggtcgg ggtgggcgcc ggcctgggcg cgggcgtgaa ccagcgcatg gacagttacg 480

cgcacatgaa cggctggagc aacggcagct acagcatgat gcaggaccag ctgggctacc 540

cgcagcaccc gggcctcaat gcgcacggcg cagcgcagat gcagcccatg caccgctacg 600

acgtgagcgc cctgcagtac aactccatga ccagctcgca gacctacatg aacggctcgc 660

ccacctacag catgtcctac tcgcagcagg gcacccctgg catggctctt ggctccatgg 720

gttcggtggt caagtccgag gccagctcca gcccccctgt ggttacctct tcctcccact 780

ccagggcgcc ctgccaggcc ggggacctcc gggacatgat cagcatgtat ctccccggcg 840

ccgaggtgcc ggaacccgcc gcccccagca gacttcacat gtcccagcac taccagagcg 900

gcccggtgcc cggcacggcc attaacggca cactgcccct ctcacacatg tga 953

<210> 39

<211> 621

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 39

atgtcggggc ccgggacggc cgcggtagcg ctgctcccgg cggtcctgct ggccttgctg 60

gcgccctggg cgggccgagg gggcgccgcc gcacccactg cacccaacgg cacgctggag 120

gccgagctgg agcgccgctg ggagagcctg gtggcgctct cgttggcgcg cctgccggtg 180

gcagcgcagc ccaaggaggc ggccgtccag agcggcgccg gcgactacct gctgggcatc 240

aagcggctgc ggcggctcta ctgcaacgtg ggcatcggct tccacctcca ggcgctcccc 300

gacggccgca tcggcggcgc gcacgcggac acccgcgaca gcctgctgga gctctcgccc 360

gtggagcggg gcgtggtgag catcttcggc gtggccagcc ggttcttcgt ggccatgagc 420

agcaagggca agctctatgg ctcgcccttc ttcaccgatg agtgcacgtt caaggagatt 480

ctccttccca acaactacaa cgcctacgag tcctacaagt accccggcat gttcatcgcc 540

ctgagcaaga atgggaagac caagaagggg aaccgagtgt cgcccaccat gaaggtcacc 600

cacttcctcc ccaggctgtg a 621

<210> 40

<211> 1443

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 40

atggaggtgg cgccggagca gccgcgctgg atggcgcacc cggccgtgct gaatgcgcag 60

caccccgact cacaccaccc gggcctggcg cacaactaca tggaacccgc gcagctgctg 120

cctccagacg aggtggacgt cttcttcaat cacctcgact cgcagggcaa cccctactat 180

gccaaccccg ctcacgcgcg ggcgcgcgtc tcctacagcc ccgcgcacgc ccgcctgacc 240

ggaggccaga tgtgccgccc acacttgttg cacagcccgg gtttgccctg gctggacggg 300

ggcaaagcag ccctctctgc cgctgcggcc caccaccaca acccctggac cgtgagcccc 360

ttctccaaga cgccactgca cccctcagct gctggaggcc ctggaggccc actctctgtg 420

tacccagggg ctgggggtgg gagcggggga ggcagcggga gctcagtggc ctccctcacc 480

cctacagcag cccactctgg ctcccacctt ttcggcttcc cacccacgcc acccaaagaa 540

gtgtctcctg accctagcac cacgggggct gcgtctccag cctcatcttc cgcggggggt 600

agtgcagccc gaggagagga caaggacggc gtcaagtacc aggtgtcact gacggagagc 660

atgaagatgg aaagtggcag tcccctgcgc ccaggcctag ctactatggg cacccagcct 720

gctacacacc accccatccc cacctacccc tcctatgtgc cggcggctgc ccacgactac 780

agcagcggac tcttccaccc cggaggcttc ctggggggac cggcctccag cttcacccct 840

aagcagcgca gcaaggctcg ttcctgttca gaaggccggg agtgtgtcaa ctgtggggcc 900

acagccaccc ctctctggcg gcgggacggc accggccact acctgtgcaa tgcctgtggc 960

ctctaccaca agatgaatgg gcagaaccga ccactcatca agcccaagcg aagactgtcg 1020

gccgccagaa gagccggcac ctgttgtgca aattgtcaga cgacaaccac caccttatgg 1080

cgccgaaacg ccaacgggga ccctgtctgc aacgcctgtg gcctctacta caagctgcac 1140

aatgttaaca ggccactgac catgaagaag gaagggatcc agactcggaa ccggaagatg 1200

tccaacaagt ccaagaagag caagaaaggg gcggagtgct tcgaggagct gtcaaagtgc 1260

atgcaggaga agtcatcccc cttcagtgca gctgccctgg ctggacacat ggcacctgtg 1320

ggccacctcc cgcccttcag ccactccgga cacatcctgc ccactccgac gcccatccac 1380

ccctcctcca gcctctcctt cggccacccc cacccgtcca gcatggtgac cgccatgggc 1440

tag 1443

<210> 41

<211> 1335

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 41

atggaggtga cggcggacca gccgcgctgg gtgagccacc accaccccgc cgtgctcaac 60

gggcagcacc cggacacgca ccacccgggc ctcagccact cctacatgga cgcggcgcag 120

tacccgctgc cggaggaggt ggatgtgctt tttaacatcg acggtcaagg caaccacgtc 180

ccgccctact acggaaactc ggtcagggcc acggtgcaga ggtaccctcc gacccaccac 240

gggagccagg tgtgccgccc gcctctgctt catggatccc taccctggct ggacggcggc 300

aaagccctgg gcagccacca caccgcctcc ccctggaatc tcagcccctt ctccaagacg 360

tccatccacc acggctcccc ggggcccctc tccgtctacc ccccggcctc gtcctcctcc 420

ttgtcggggg gccacgccag cccgcacctc ttcaccttcc cgcccacccc gccgaaggac 480

gtctccccgg acccatcgct gtccacccca ggctcggccg gctcggcccg gcaggacgag 540

aaagagtgcc tcaagtacca ggtgcccctg cccgacagca tgaagctgga gtcgtcccac 600

tcccgtggca gcatgaccgc cctgggtgga gcctcctcgt cgacccacca ccccatcacc 660

acctacccgc cctacgtgcc cgagtacagc tccggactct tcccccccag cagcctgctg 720

ggcggctccc ccaccggctt cggatgcaag tccaggccca aggcccggtc cagcacagaa 780

ggcagggagt gtgtgaactg tggggcaacc tcgaccccac tgtggcggcg agatggcacg 840

ggacactacc tgtgcaacgc ctgcgggctc tatcacaaaa tgaacggaca gaaccggccc 900

ctcattaagc ccaagcgaag gctgtctgca gccaggagag cagggacgtc ctgtgcgaac 960

tgtcagacca ccacaaccac actctggagg aggaatgcca atggggaccc tgtctgcaat 1020

gcctgtgggc tctactacaa gcttcacaat attaacagac ccctgactat gaagaaggaa 1080

ggcatccaga ccagaaaccg aaaaatgtct agcaaatcca aaaagtgcaa aaaagtgcat 1140

gactcactgg aggacttccc caagaacagc tcgtttaacc cggccgccct ctccagacac 1200

atgtcctccc tgagccacat ctcgcccttc agccactcca gccacatgct gaccacgccc 1260

acgccgatgc acccgccatc cagcctgtcc tttggaccac accacccctc cagcatggtc 1320

accgccatgg gttag 1335

<210> 42

<211> 1329

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 42

atgtatcaga gcttggccat ggccgccaac cacgggccgc cccccggtgc ctacgaggcg 60

ggcggccccg gcgccttcat gcacggcgcg ggcgccgcgt cctcgccagt ctacgtgccc 120

acaccgcggg tgccctcctc cgtgctgggc ctgtcctacc tccagggcgg aggcgcgggc 180

tctgcgtccg gaggcgcctc gggcggcagc tccggtgggg ccgcgtctgg tgcggggccc 240

gggacccagc agggcagccc gggatggagc caggcgggag ccgacggagc cgcttacacc 300

ccgccgccgg tgtcgccgcg cttctccttc ccggggacca ccgggtccct ggcggccgcc 360

gccgccgctg ccgcggcccg ggaagctgcg gcctacagca gtggcggcgg agcggcgggt 420

gcgggcctgg cgggccgcga gcagtacggg cgcgccggct tcgcgggctc ctactccagc 480

ccctacccgg cttacatggc cgacgtgggc gcgtcctggg ccgcagccgc cgccgcctcc 540

gccggcccct tcgacagccc ggtcctgcac agcctgcccg gccgggccaa cccggccgcc 600

cgacacccca atctcgatat gtttgacgac ttctcagaag gcagagagtg tgtcaactgt 660

ggggctatgt ccaccccgct ctggaggcga gatgggacgg gtcactatct gtgcaacgcc 720

tgcggcctct accacaagat gaacggcatc aaccggccgc tcatcaagcc tcagcgccgg 780

ctgtccgcct cccgccgagt gggcctctcc tgtgccaact gccagaccac caccaccacg 840

ctgtggcgcc gcaatgcgga gggcgagcct gtgtgcaatg cctgcggcct ctacatgaag 900

ctccacgggg tccccaggcc tcttgcaatg cggaaagagg ggatccaaac cagaaaacgg 960

aagcccaaga acctgaataa atctaagaca ccagcagctc cttcaggcag tgagagcctt 1020

cctcccgcca gcggtgcttc cagcaactcc agcaacgcca ccaccagcag cagcgaggag 1080

atgcgtccca tcaagacgga gcctggcctg tcatctcact acgggcacag cagctccgtg 1140

tcccagacgt tctcagtcag tgcgatgtct ggccatgggc cctccatcca ccctgtcctc 1200

tcggccctga agctctcccc acaaggctat gcgtctcccg tcagccagtc tccacagacc 1260

agctccaagc aggactcttg gaacagcctg gtcttggccg acagtcacgg ggacataatc 1320

actgcgtaa 1329

<210> 43

<211> 1194

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 43

atgtaccaga gcctggcgct ggccgcgagc ccccgccagg ccgcctacgc cgactcgggc 60

tccttcctgc acgctccggg cgccggctct ccgatgtttg tgccgccggc gcgcgtcccc 120

tcgatgctgt cctacctgtc cgggtgtgag ccgagcccgc agccccccga gctcgctgcg 180

cgccccggct gggcgcagac agccaccgcg gattcgtcgg ccttcggccc gggcagtccg 240

caccccccag ccgcgcaccc gcccggggcc accgccttcc ctttcgcgca cagcccctcg 300

gggcccggca gcggcggcag cgcggggggc cgagacggca gtgcctacca gggcgcgctg 360

ttgcctcgag aacagttcgc ggccccgctt gggcggccgg tggggacctc gtactccgcc 420

acctacccgg cctacgtgag ccccgacgtg gcccagtcct ggactgccgg gcccttcgat 480

ggcagcgtcc tgcacggcct cccaggccgc aggcccacct tcgtgtccga cttcttggag 540

gagttcccgg gtgagggtcg tgagtgtgtc aactgcgggg ccctgtccac accgctgtgg 600

cgccgagatg gcaccggcca ctacctgtgc aatgcctgcg gcctctacca caagatgaat 660

ggcgtcaacc ggccgctcgt tcggcctcag aagcgcctgt cctcgtcccg ccgcgccggc 720

ctctgctgca ccaactgcca cacgaccaac accacgctgt ggcggcggaa ctcggagggg 780

gagcccgtgt gcaatgcctg cggcctctac atgaagctgc acggggtgcc gcggcctctg 840

gctatgaaga aagaaagcat ccagacacgg aagcggaagc caaagaccat cgccaaggcc 900

aggggctcct caggatccac aaggaatgcc tcggcctccc catctgctgt cgccagcact 960

gacagctcag cagccacttc caaagccaag cccagcctgg cgtccccagt gtgccctggg 1020

cccagcatgg ccccccaggc ctctggccag gaggatgact ctcttgcccc cggccacttg 1080

gagttcaagt tcgagcctga ggactttgcc ttcccctcca cggccccgag cccccaggct 1140

ggcctcaggg gggctctgcg ccaagaggcc tggtgtgcgc tggccttggc ctag 1194

<210> 44

<211> 1788

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 44

atggccttga ctgacggcgg ctggtgcttg ccgaagcgct tcggggccgc gggtgcggac 60

gccagcgact ccagagcctt tccagcgcgg gagccctcca cgccgccttc ccccatctct 120

tcctcgtcct cctcctgctc ccggggcgga gagcggggcc ccggcggcgc cagcaactgc 180

gggacgcctc agctcgacac ggaggcggcg gccggacccc cggcccgctc gctgctgctc 240

agttcctacg cttcgcatcc cttcggggct ccccacggac cttcggcgcc tggggtcgcg 300

ggccccgggg gcaacctgtc gagctgggag gacttgctgc tgttcactga cctcgaccaa 360

gccgcgaccg ccagcaagct gctgtggtcc agccgcggcg ccaagctgag ccccttcgca 420

cccgagcagc cggaggagat gtaccagacc ctcgccgctc tctccagcca gggtccggcc 480

gcctacgacg gcgcgcccgg cggcttcgtg cactctgcgg ccgcggcggc agcagccgcg 540

gcggcggcca gctccccggt ctacgtgccc accacccgcg tgggttccat gctgcccggc 600

ctaccgtacc acctgcaggg gtcgggcagt gggccagcca accacgcggg cggcgcgggc 660

gcgcaccccg gctggcctca ggcctcggcc gacagccctc catacggcag cggaggcggc 720

gcggctggcg gcggggccgc ggggcctggc ggcgctggct cagccgcggc gcacgtctcg 780

gcgcgcttcc cctactctcc cagcccgccc atggccaacg gcgccgcgcg ggagccggga 840

ggctacgcgg cggcgggcag tgggggcgcg ggaggcgtga gcggcggcgg cagtagcctg 900

gcggccatgg gcggccgcga gccccagtac agctcgctgt cggccgcgcg gccgctgaac 960

gggacgtacc accaccacca ccaccaccac caccaccatc cgagccccta ctcgccctac 1020

gtgggggcgc cactgacgcc tgcctggccc gccggaccct tcgagacccc ggtgctgcac 1080

agcctgcaga gccgcgccgg agccccgctc ccggtgcccc ggggtcccag tgcagacctg 1140

ctggaggacc tgtccgagag ccgcgagtgc gtgaactgcg gctccatcca gacgccgctg 1200

tggcggcggg acggcaccgg ccactacctg tgcaacgcct gcgggctcta cagcaagatg 1260

aacggcctca gccggcccct catcaagccg cagaagcgcg tgccttcatc acggcggctt 1320

ggattgtcct gtgccaactg tcacaccaca actaccacct tatggcgcag aaacgccgag 1380

ggtgaacccg tgtgcaatgc ttgtggactc tacatgaaac tccatggggt gcccagacca 1440

cttgctatga aaaaagaggg aattcaaacc aggaaacgaa aacctaagaa cataaataaa 1500

tcaaagactt gctctggtaa tagcaataat tccattccca tgactccaac ttccacctct 1560

tctaactcag atgattgcag caaaaatact tcccccacaa cacaacctac agcctcaggg 1620

gcgggtgccc cggtgatgac tggtgcggga gagagcacca atcccgagaa cagcgagctc 1680

aagtattcgg gtcaagatgg gctctacata ggcgtcagtc tcgcctcgcc ggccgaagtc 1740

acgtcctccg tgcgaccgga ttcctggtgc gccctggccc tggcctga 1788

<210> 45

<211> 1674

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 45

atggtgtcca agctcacgtc gctccagcaa gaactcctga gcgccctgct gagctccggg 60

gtcaccaagg aggtgctggt tcaggccttg gaggagttgc tgccatcccc gaacttcggg 120

gtgaagctgg agacgctgcc cctgtcccct ggcagcgggg ccgagcccga caccaagccg 180

gtcttccata ctctcaccaa cggccacgcc aagggccgct tgtccggcga cgagggctcc 240

gaggacggcg acgactatga cacacctccc atcctcaagg agctgcaggc gctcaacacc 300

gaggaggcgg cggagcagcg ggcggaggtg gaccggatgc tcagtgagga cccttggagg 360

gctgctaaaa tgatcaaggg ttacatgcag caacacaaca tcccccagag ggaggtggtc 420

gatgtcaccg gcctgaacca gtcgcacctc tcccagcatc tcaacaaggg cacccctatg 480

aagacccaga agcgtgccgc tctgtacacc tggtacgtca gaaagcaacg agagatcctc 540

cgacaattca accagacagt ccagagttct ggaaatatga cagacaaaag cagtcaggat 600

cagctgctgt ttctctttcc agagttcagt caacagagcc atgggcctgg gcagtccgat 660

gatgcctgct ctgagcccac caacaagaag atgcgccgca accggttcaa atgggggccc 720

gcgtcccagc aaatcttgta ccaggcctac gatcggcaaa agaaccccag caaggaagag 780

agagaggcct tagtggagga atgcaacagg gcagaatgtt tgcagcgagg ggtgtccccc 840

tccaaagccc acggcctggg ctccaacttg gtcactgagg tccgtgtcta caactggttt 900

gcaaaccgca ggaaggagga ggcattccgg caaaagctgg ccatggacgc ctatagctcc 960

aaccagactc acagcctgaa ccctctgctc tcccacggct ccccccacca ccagcccagc 1020

tcctctcctc caaacaagct gtcaggagtg cgctacagcc agcagggaaa caatgagatc 1080

acttcctcct caacaatcag tcaccatggc aacagcgcca tggtgaccag ccagtcggtt 1140

ttacagcaag tctccccagc cagcctggac ccaggccaca atctcctctc acctgatggt 1200

aaaatgatct cagtctcagg aggaggtttg cccccagtca gcaccttgac gaatatccac 1260

agcctctccc accataatcc ccagcaatct caaaacctca tcatgacacc cctctctgga 1320

gtcatggcaa ttgcacaaag cctcaacacc tcccaagcac agagtgtccc tgtcatcaac 1380

agtgtggccg gcagcctggc agccctgcag cccgtccagt tctcccagca gctgcacagc 1440

cctcaccagc agcccctcat gcagcagagc ccaggcagcc acatggccca gcagcccttc 1500

atggcagctg tgactcagct gcagaactca cacatgtacg cacacaagca ggaacccccc 1560

cagtattccc acacctcccg gtttccatct gcaatggtgg tcacagatac cagcagcatc 1620

agtacactca ccaacatgtc ttcaagtaaa cagtgtcctc tacaagcctg gtga 1674

<210> 46

<211> 1887

<212> ДНК

<213> Rattus norvegicus

<400> 46

atggtttcta agttgagcca gctgcagacg gagctcctgg ctgctctgct cgagtcgggc 60

ctgagcaaag aggctctgat ccaggctctg ggggagcccg ggccctacct gatggttgga 120

gatggtcccc tggacaaggg ggagtcctgc ggtgggactc gaggggacct gaccgagctg 180

cccaatggcc tgggggagac gcgtggctcg gaagatgaca cggatgacga tggggaagac 240

ttcgcgccac ccattctgaa agagctggag aacctcagcc cagaggaggc agcccaccag 300

aaagccgtgg tggagtcact tcttcaggag gacccatggc gcgtggcaaa gatggtcaag 360

tcgtacctgc agcaacacaa catcccccag cgggaggtgg tggacactac gggtctcaac 420

cagtcccacc tgtcccagca cctcaacaag ggcaccccca tgaagacgca gaagcgggcc 480

gcgctgtaca cctggtacgt ccgcaagcag cgagaggtgg ctcagcaatt cacccacgcg 540

gggcagggcg gactgattga agagcccaca ggtgatgagc tgccaaccaa aaaggggcgg 600

aggaaccggt tcaagtgggg ccccgcatcc cagcagatcc tgttccaggc ttacgagagg 660

cagaagaacc ccagcaagga agagcgagag accttggtgg aggagtgcaa tagggcggag 720

tgcatccaga gaggggtgtc accatcgcag gcccaggggc taggctccaa ccttgtcacc 780

gaggtgcgtg tctacaactg gtttgccaac cggcgcaagg aagaagcctt tcggcataag 840

ctggccatgg acacgtataa cgggcctcca cccgggccag gccccggccc tgcgctacct 900

gcccacagtt ccccgggcct gcccacaacc accctctctc ccagtaaggt ccacggtgtg 960

cggtatggac agtctgcaac cagcgaggca gctgaggtgc cctccagcag cggaggtccc 1020

ttagtcacag tgtctgcggc cttacaccaa gtgtccccca caggcttgga gcccagcagc 1080

ctgctgagca ccgaggccaa gctggtctca gccacggggg gtcccctgcc tcccgtcagc 1140

accctgacag cactgcacag cttggagcag acgtctccag gtctcaacca gcagccgcag 1200

aaccttatca tggcctcgct gcctggggtc atgaccatcg gcccagggga gcccgcctcc 1260

ctgggtccca cgttcactaa cacgggtgcc tctaccctgg tcattggtct ggcctccaca 1320

caggcacaga gcgtgccagt catcaacagc atggggagca gcctgaccac cctgcagccg 1380

gtccagtttt cccagccact gcacccttcc tatcagcagc ctctcatgcc ccctgtacag 1440

agccacgtgg cccagagtcc cttcatggca accatggccc agctgcagag cccccacgcc 1500

ctgtacagcc acaagcctga ggtggcccag tacacgcata caagcctgct tccgcagacc 1560

atgctgatca cagacaccaa cctcagcacc cttgccagcc tcacgcccac caagcaggtc 1620

ttcacctcag acacagaggc ctccagtgag cctgggcttc atgagccgtc gtctccagcc 1680

acaaccattc acatccccag ccaggacccg tcaaacatcc agcacctgca gcctgctcac 1740

cggctcagca ccagtcccac agtgtcctcc agcagcctgg tgttgtacca gagttctgac 1800

tccaacgggc acagccacct gctgccatcc aaccacggtg tcatcgagac ttttatctcc 1860

acccagatgg cctcctcctc ccagtaa 1887

<210> 47

<211> 1407

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 47

atgttaggga ctgtgaagat ggaagggcat gagagcaacg actggaacag ctactacgcg 60

gacacgcagg aggcctactc ctctgtccct gtcagcaaca tgaactccgg cctgggctct 120

atgaactcca tgaacaccta catgaccatg aacaccatga ccacgagcgg caacatgacc 180

ccggcttcct tcaacatgtc ctacgccaac acgggcttag gggccggcct gagtcccggt 240

gctgtggctg gcatgccagg ggcctctgca ggcgccatga acagcatgac tgcggcgggc 300

gtcacggcca tgggtacggc gctgagcccg ggaggcatgg gctccatggg cgcgcagccc 360

gtcacctcca tgaacggcct gggtccctac gccgccgcca tgaacccgtg catgagtccc 420

atggcgtacg cgccgtccaa cctgggccgc agccgcgcgg ggggcggcgg cgacgccaag 480

acattcaagc gcagctaccc tcacgccaag ccgccttact cctacatctc gctcatcacg 540

atggccatcc agcaggcgcc cagcaagatg ctcacgctga gcgagatcta ccagtggatc 600

atggacctct tcccctatta ccgccagaac cagcagcgct ggcagaactc catccgccac 660

tcgctgtcct tcaacgattg tttcgtcaag gtggcacgat ccccagacaa gccaggcaag 720

ggctcctact ggacgctgca cccggactcc ggcaacatgt tcgagaacgg ctgctacttg 780

cgccgccaaa agcgcttcaa gtgtgagaag cagccggggg ccggaggtgg gagtgggggc 840

ggcggctcca aagggggccc agaaagtcgc aaggacccct caggcccggg gaaccccagc 900

gccgagtcac cccttcattg gggtgtgcac ggaaaggcta gccagctaga gggcgcgccg 960

gcccccgggc ccgccgccag cccccagact ctggaccaca gcggggccac ggcgacaggg 1020

ggcgcttcgg agttgaagtc tccagcgtct tcatctgcgc cccccataag ctccgggcca 1080

ggggcgctgg catctgtacc cccctctcac ccggctcacg gcctggcacc ccacgaatct 1140

cagctgcatc tgaaagggga tccccactac tcctttaatc accccttctc catcaacaac 1200

ctcatgtcct cctccgagca acagcacaag ctggacttca aggcatacga gcaggcgctg 1260

cagtactctc cttatggcgc taccttgccc gccagtctgc cccttggcag cgcctcagtg 1320

gccacgagga gccccatcga gccctcagcc ctggagccag cctactacca aggtgtgtat 1380

tccagacccg tgctaaatac ttcctag 1407

<210> 48

<211> 1062

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 48

atgctgggct cagtgaagat ggaggctcat gacctggccg agtggagcta ctacccggag 60

gcgggcgagg tgtattctcc agtgaatcct gtgcccacca tggcccctct caactcctac 120

atgaccttga acccactcag ctctccctac cctcccggag ggcttcaggc ctccccactg 180

cctacaggac ccctggcacc cccagccccc actgcgccct tggggcccac cttcccaagc 240

ttgggcactg gtggcagcac cggaggcagt gcttccgggt atgtagcccc agggcccggg 300

cttgtacatg gaaaagagat ggcaaagggg taccggcggc cactggccca cgccaaacca 360

ccatattcct acatctctct cataaccatg gctattcagc aggctccagg caagatgctg 420

accctgagtg aaatctacca atggatcatg gacctcttcc cgtactaccg ggagaaccag 480

caacgttggc agaactccat ccggcattcg ctgtccttca atgactgctt cgtcaaggtg 540

gcacgctccc cagacaagcc aggcaaaggc tcctactggg ccttgcatcc cagctctggg 600

aacatgtttg agaacggatg ctatctccgc cggcagaagc gcttcaagct ggaggagaag 660

gcaaagaaag gaaacagcgc cacatcggcc agcaggaatg gtactgcggg gtcagccacc 720

tctgccacca ctacagctgc cactgcagtc acctccccgg ctcagcccca gcctacgcca 780

tctgagcccg aggcccagag tggggatgat gtggggggtc tggactgcgc ctcacctcct 840

tcgtccacac cttatttcag cggcctggag ctcccggggg aactaaagtt ggatgcgccc 900

tataacttca accacccttt ctctatcaac aacctgatgt cagaacagac atcgacacct 960

tccaaactgg atgtggggtt tgggggctac ggggctgaga gtggggagcc tggagtctac 1020

taccagagcc tctattcccg ctctctgctt aatgcatcct ag 1062

<210> 49

<211> 1380

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 49

atgctgggag ccgtgaagat ggaagggctc gagccatccg actggagcag ctactacgcg 60

gagcccgagg gctactcttc cgtgagcaac atgaacgccg gcctggggat gaatggcatg 120

aacacataca tgagcatgtc cgcggctgcc atgggcggcg gttccggcaa catgagcgcg 180

ggctccatga acatgtcatc ctatgtgggc gctggaatga gcccgtcgct agctggcatg 240

tccccgggcg ccggcgccat ggcgggcatg agcggctcag ccggggcggc cggcgtggcg 300

ggcatgggac ctcacctgag tccgagtctg agcccgctcg ggggacaggc ggccggggcc 360

atgggtggcc ttgcccccta cgccaacatg aactcgatga gccccatgta cgggcaggcc 420

ggcctgagcc gcgctcggga ccccaagaca taccgacgca gctacacaca cgccaaacct 480

ccctactcgt acatctcgct catcaccatg gccatccagc agagccccaa caagatgctg 540

acgctgagcg agatctatca gtggatcatg gacctcttcc ctttctaccg gcagaaccag 600

cagcgctggc agaactccat ccgccactct ctctccttca acgactgctt tctcaaggtg 660

ccccgctcgc cagacaagcc tggcaagggc tccttctgga ccctgcaccc agactcgggc 720

aacatgttcg agaacggctg ctacctgcgc cgccagaagc gcttcaagtg tgagaagcaa 780

ctggcactga aggaagccgc gggtgcggcc agtagcggag gcaagaagac cgctcctggg 840

tcccaggcct ctcaggctca gctcggggag gccgcgggct cggcctccga gactccggcg 900

ggcaccgagt ccccccattc cagcgcttct ccgtgtcagg agcacaagcg aggtggccta 960

agcgagctaa agggagcacc tgcctctgcg ctgagtcctc ccgagccggc gccctcgcct 1020

gggcagcagc agcaggctgc agcccacctg ctgggcccac ctcaccaccc aggcctgcca 1080

ccagaggccc acctgaagcc cgagcaccat tacgccttca accacccctt ctctatcaac 1140

aacctcatgt cgtccgagca gcaacatcac cacagccacc accaccatca gccccacaaa 1200

atggacctca aggcctacga acaggtcatg cactacccag ggggctatgg ttcccccatg 1260

ccaggcagct tggccatggg cccagtcacg aacaaagcgg gcctggatgc ctcgcccctg 1320

gctgcagaca cttcctacta ccaaggagtg tactccaggc ctattatgaa ctcatcctaa 1380

<210> 50

<211> 1053

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 50

atgctgggct cagtgaagat ggaggcccat gacctggccg agtggagcta ctacccggag 60

gcgggcgagg tctactcgcc ggtgacccca gtgcccacca tggcccccct caactcctac 120

atgaccctga atcctctaag ctctccctat ccccctgggg ggctccctgc ctccccactg 180

ccctcaggac ccctggcacc cccagcacct gcagcccccc tggggcccac tttcccaggc 240

ctgggtgtca gcggtggcag cagcagctcc gggtacgggg ccccgggtcc tgggctggtg 300

cacgggaagg agatgccgaa ggggtatcgg cggcccctgg cacacgccaa gccaccgtat 360

tcctatatct cactcatcac catggccatc cagcaggcgc cgggcaagat gctgaccttg 420

agtgaaatct accagtggat catggacctc ttcccttact accgggagaa tcagcagcgc 480

tggcagaact ccattcgcca ctcgctgtct ttcaacgact gcttcgtcaa ggtggcgcgt 540

tccccagaca agcctggcaa gggctcctac tgggccctac accccagctc agggaacatg 600

tttgagaatg gctgctacct gcgccgccag aaacgcttca agctggagga gaaggtgaaa 660

aaagggggca gcggggctgc caccaccacc aggaacggga cagggtctgc tgcctcgacc 720

accacccccg cggccacagt cacctccccg ccccagcccc cgcctccagc ccctgagcct 780

gaggcccagg gcggggaaga tgtgggggct ctggactgtg gctcacccgc ttcctccaca 840

ccctatttca ctggcctgga gctcccaggg gagctgaagc tggacgcgcc ctacaacttc 900

aaccaccctt tctccatcaa caacctaatg tcagaacaga caccagcacc tcccaaactg 960

gacgtggggt ttgggggcta cggggctgaa ggtggggagc ctggagtcta ctaccagggc 1020

ctctattccc gctctttgct taatgcatcc tag 1053

<210> 51

<211> 1422

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 51

atgttaggaa ctgtgaagat ggaagggcat gaaaccagcg actggaacag ctactacgca 60

gacacgcagg aggcctactc ctcggtcccg gtcagcaaca tgaactcagg cctgggctcc 120

atgaactcca tgaacaccta catgaccatg aacaccatga ctacgagcgg caacatgacc 180

ccggcgtcct tcaacatgtc ctatgccaac ccggccttag gggccggcct gagtcccggc 240

gcagtagccg gcatgccggg gggctcggcg ggcgccatga acagcatgac tgcggccggc 300

gtgacggcca tgggtacggc gctgagcccg agcggcatgg gcgccatggg tgcgcagcag 360

gcggcctcca tgatgaatgg cctgggcccc tacgcggccg ccatgaaccc gtgcatgagc 420

cccatggcgt acgcgccgtc caacctgggc cgcagccgcg cgggcggcgg cggcgacgcc 480

aagacgttca agcgcagtta cccgcacgcc aagccgccct actcgtacat ctcgctcatc 540

accatggcca tccagcgggc gcccagcaag atgctcacgc tgagcgagat ctaccagtgg 600

atcatggacc tcttccccta ttaccggcag aaccagcagc gctggcagaa ctccatccgc 660

cactcgctgt ccttcaatga ctgcttcgtc aaggtggcac gctccccgga caagccgggc 720

aagggctcct actggacgct gcacccggac tccggcaaca tgttcgagaa cggctgctac 780

ttgcgccgcc agaagcgctt caagtgcgag aagcagccgg gggccggcgg cgggggcggg 840

agcggaagcg ggggcagcgg cgccaagggc ggccctgaga gccgcaagga cccctctggc 900

gcctctaacc ccagcgccga ctcgcccctc catcggggtg tgcacgggaa gaccggccag 960

ctagagggcg cgccggcccc gggcccggcc gccagccccc agactctgga ccacagtggg 1020

gcgacggcga cagggggcgc ctcggagttg aagactccag cctcctcaac tgcgcccccc 1080

ataagctccg ggcccggggc gctggcctct gtgcccgcct ctcacccggc acacggcttg 1140

gcaccccacg agtcccagct gcacctgaaa ggggaccccc actactcctt caaccacccg 1200

ttctccatca acaacctcat gtcctcctcg gagcagcagc ataagctgga cttcaaggca 1260

tacgaacagg cactgcaata ctcgccttac ggctctacgt tgcccgccag cctgcctcta 1320

ggcagcgcct cggtgaccac caggagcccc atcgagccct cagccctgga gccggcgtac 1380

taccaaggtg tgtattccag acccgtccta aacacttcct ag 1422

<210> 52

<211> 1425

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 52

atgcgactct ctaaaaccct tgccggcatg gatatggccg actacagcgc tgccctggac 60

ccagcctaca ccaccctgga gtttgaaaat gtgcaggtgt tgaccatggg caatgacacg 120

tccccatctg aaggtgccaa cctcaattca tccaacagcc tgggcgtcag tgccctgtgc 180

gccatctgtg gcgaccgggc caccggcaaa cactacggag cctcgagctg tgacggctgc 240

aaggggttct tcaggaggag cgtgaggaag aaccacatgt actcctgcag gtttagccga 300

caatgtgtgg tagacaaaga taagaggaac cagtgtcgtt actgcaggct taagaagtgc 360

ttccgggctg gcatgaagaa ggaagctgtc caaaatgagc gggaccggat cagcacgcgg 420

aggtcaagct acgaggacag cagcctgccc tccatcaacg cgctcctgca ggcagaggtt 480

ctgtcccagc agatcacctc tcccatctct gggatcaatg gcgacattcg ggcaaagaag 540

attgccaaca tcacagacgt gtgtgagtct atgaaggagc agctgctggt cctggtcgag 600

tgggccaagt acatcccggc cttctgcgaa ctccttctgg atgaccaggt ggcgctgctc 660

agggcccacg ccggtgagca tctgctgctt ggagccacca agaggtccat ggtgtttaag 720

gacgtgctgc tcctaggcaa tgactacatc gtccctcggc actgtccaga gctagcggag 780

atgagccgtg tgtccatccg catcctcgat gagctggtcc tgcccttcca agagctgcag 840

attgatgaca atgaatatgc ctgcctcaaa gccatcatct tctttgatcc agatgccaag 900

gggctgagtg acccgggcaa gatcaagcgg ctgcggtcac aggtgcaagt gagcctggag 960

gattacatca acgaccggca gtacgactct cggggccgct ttggagagct gctgctgctg 1020

ttgcccacgc tgcagagcat cacctggcag atgatcgaac agatccagtt catcaagctc 1080

ttcggcatgg ccaagattga caacctgctg caggagatgc ttctcggagg gtctgccagt 1140

gatgcacccc acacccacca ccccctgcac cctcacctga tgcaagaaca catgggcacc 1200

aatgtcattg ttgctaacac gatgccctct cacctcagca atggacagat gtgtgagtgg 1260

ccccgaccca gggggcaggc agccactccc gagactccac agccatcacc accaagtggc 1320

tcgggatctg aatcctacaa gctcctgcca ggagccatca ccaccatcgt caagcctccc 1380

tctgccattc cccagccaac gatcaccaag caagaagcca tctag 1425

<210> 53

<211> 1398

<212> ДНК

<213> Rattus norvegicus

<400> 53

atggacatgg ctgactacag tgctgccttg gacccagcct acaccaccct ggagtttgaa 60

aatgtgcagg tgttgaccat gggcaatgac acatccccat ctgaaggtgc caacctcaac 120

tcatccaaca gcctgggtgt cagtgccctg tgtgccatct gtggcgatcg ggccactggc 180

aaacactacg gagcctcaag ctgtgacggc tgcaagggat tcttcaggag gagcgtgagg 240

aagaaccaca tgtactcctg caggtttagc aggcagtgcg tggtagacaa agataagagg 300

aaccagtgtc gttactgcag gctcaagaag tgcttccggg ctggcatgaa gaaagaagcc 360

gtccaaaatg agcgggatcg gatcagcacg cggaggtcaa gctacgagga cagcagccta 420

ccctccatta atgcgctcct gcaggcagag gtcctgtctc agcagatcac ctcccccatc 480

tctgggatca atggcgacat tcgggccaag aagattgcca acatcacgga tgtgtgtgag 540

tctatgaagg agcagctgct ggttctggtc gaatgggcca agtacatccc ggccttctgt 600

gaacttcttc tggatgacca ggtggcgctg ctcagagccc acgctggtga gcacctgctg 660

cttggagcca ccaagaggtc catggtgttc aaggatgtgc tgctcctagg caatgactac 720

atcgtccctc ggcactgtcc agagctagca gagatgagcc gtgtgtccat tcgcatcctc 780

gatgagctgg tcttgccctt ccaagagctg cagatcgatg ataatgaata cgcctgcctc 840

aaagccatca tcttctttga cccagatgcc aaggggctga gtgacccagg caagatcaag 900

cggctgcggt cacaggtgca ggtgagcctg gaggattaca tcaacgaccg gcagtatgac 960

tctcggggtc gttttggaga gctgctgctg ctcctgccca ctctgcagag cattacctgg 1020

cagatgatcg agcagatcca gttcatcaag ctctttggca tggccaagat tgacaacctg 1080

ctgcaggaga tgctgcttgg agggtctgcc agtgacgcgc cccacgccca ccaccccctg 1140

caccctcacc tgatgcaaga acacatgggc accaatgtca tagttgccaa cacgatgccc 1200

tctcacctca gcaatggaca gatgtgtgag tggccccggc ccagggggca ggcagccacc 1260

cctgagactc cacagccatc accaccaagt ggctctggat ctgaatccta caagctcctg 1320

ccaggagcca tcaccaccat cgtcaagcct ccctctgcca tcccccagcc aacgatcacc 1380

aagcaggaag ccatctag 1398

<210> 54

<211> 1398

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 54

atgaacgcac agctgaccat ggaggcgatc ggcgagctgc acggggtgag ccatgagccg 60

gtgcccgccc ctgctgacct gctgggcggc agccctcacg cgcgcagctc cgtgggacac 120

cgcggcagcc acctgcctcc cgcgcacccg cgttccatgg gcatggcgtc cctgctggac 180

ggcggcagcg gaggcagcga ttaccaccac caccaccgcg cccctgagca cagcttggct 240

ggccccctgc accccaccat gaccatggcc tgtgaaactc ccccaggtat gagcatgccc 300

accacctaca ctaccttaac ccctctgcag ccgctgccgc ccatctccac cgtgtccgac 360

aagttccctc accatcatca ccaccaccat caccaccacc acccacacca ccaccagcgc 420

ctggcgggca acgtgagcgg tagtttcaca cttatgcggg atgagcgcgg gctggcctct 480

atgaataacc tctatacccc ctaccacaag gacgtggctg gcatgggcca gagcctctcg 540

cccctctctg gctccggtct gggcagcatt cacaactccc agcaaggact tccccactat 600

gctcatcccg gcgcggctat gcccaccgac aagatgctca ccccaaatgg ctttgaagcc 660

caccaccctg ccatgctcgg tcgccacggg gagcagcacc tcacgcccac ctcggccggc 720

atggtaccca tcaacggcct tcctccgcac catcctcatg cccacctgaa tgcccagggc 780

cacggacagc tcctgggcac agcccgagag cccaaccctt cggtgaccgg cgcgcaggtc 840

agcaatggaa gtaattcagg gcagatggaa gagatcaata ccaaagaggt ggcgcagcgt 900

atcaccaccg agctcaaacg ttacagcatc ccacaggcca tcttcgcgca gagggtgctc 960

tgccgttccc aggggaccct ttcggacctg ctgcgaaacc ccaagccctg gagcaaactc 1020

aagtcgggtc gggagacctt ccggaggatg tggaagtggc tgcaggagcc ggagttccag 1080

cgcatgtcgg cgctccgctt agcagcctgc aaacggaaag agcaagaaca tgggaaggac 1140

agaggcaaca cccccaaaaa gcccaggctg gtcttcacag acgtccaacg tcgaactcta 1200

catgcaatat tcaaggaaaa taagcgtccg tccaaagaat tacaaatcac catctcccag 1260

cagctggggt tggagctgag cactgtcagc aacttcttca tgaatgccag aaggaggagt 1320

ctggacaagt ggcaggacga gggcggctcc aactcaggca gttcatcgtc ctcatcgagc 1380

acttgtacca aagcatga 1398

<210> 55

<211> 1002

<212> ДНК

<213> Xenopus laevis

<400> 55

atggagaagt ccaagaattt caggattgac gctctcctgg cgatagatcc ccccaaggct 60

cagacctccc cattggctct ggtcacctcg ctgtcctcct cgtctctctc cgggagcccc 120

ccgtccgagc acactgacag cctcaggact gactccccct cccctccaag gacttgtgga 180

ctggtcccta aaccaggttt cctgagcagc caccagcacc ccccaaacat gatgtcattg 240

cacccccagg ctgctccagg gatcccccct caggccctgt atggacaccc gatgtacagc 300

tacttggcag cggggcagca cccagctctg tcctacccct actcccagat gcagagcagc 360

caccaccccc accccatgga ccccatcaag atcagcgctg gcaccttcca actggaccag 420

tggctcagag cctccactgc cggcatgatg ctgcccaaaa tggcagactt taactcccag 480

gcccaatcca acctgctggg aaagtgcaga agaccaagga cagcgtttac cagtcagcag 540

ctgttggaac tggagcacca attcaagctg aacaagtacc tctccaggcc gaaacgcttt 600

gaagtggcca cttccctgat gctcactgag acgcaggtga agatctggtt ccagaacagg 660

cgcatgaaat ggaagaggag taagaaagcc aaggagcagg cggcgcagga ctcagcagag 720

aaacagcaga gggcaggcaa gggcagcagc gaggagaagt gctcggatga gctgcaggaa 780

gagaagaaat cctaccatct ccatcccagg ggggagccca tcaaagggaa cggccgcctg 840

cagcccagag actatacaga cagcgaagag gacgaggagg aggacaggga agaggaggaa 900

gaggaagatc acagagggga ggggaagcgg ttttaccatc attcttctga ctgcacatcc 960

gaggaagagg agaacagcca caataagcag agcggccact ga 1002

<210> 56

<211> 1215

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 56

atggaaaaat ccaaaaattt ccgcatcgac gccctgctgg ccgtggatcc cccgcgagcc 60

gcctccacgc agagcgcgcc tctggccttg gtcacttccc tcgcgactac agtatctggt 120

cccggccgcg gcggcagcgg cggcgggggg accagtagcg gggcgagccg tagctgcagt 180

cccgcatcct cggaggccac tgcagcgccc ggtgaccggc tgagagctga gagcccgtcg 240

cccccacgct tgctggctgc acactgcgcg ctgctgccca agcccggatt cctgggcgcc 300

ggaggaggcg gcggcgcggc gggtgggccg ggcactcccc accaccacgc gcaccctggt 360

gcagcagccg ccgcggctgc cgctgccgct gccgcggctg ccggtggcct ggcactgggg 420

ctgcacccgg ggggcgcaca gggcggcgcg ggcctccctg cacaggcggc tctctatgga 480

cacccggtct acagttattc ggcagcagct gcagcggccg cgctagctgg ccagcacccg 540

gcgctttcct actcataccc tcaggtgcag ggcgcgcacc ctgcgcaccc tgccgacccc 600

atcaagctgg gtgccagcac cttccaactg gaccagtggc tgcgcgcgtc tactgcgggc 660

atgatcctgc ccaagatgcc ggacttcagc tgtcaggcgc agtcgaacct cttggggaag 720

tgccgaaggc ctcgcacggc cttcaccagc cagcagctgt tggagctgga acaccagttc 780

aagctcaaca agtacctgtc tcgacccaag cgttttgagg tggctacctc gctcatgctc 840

accgagactc aggtgaagat ttggttccag aaccgccgaa tgaaatggaa acgcagcaaa 900

aaggccaaag agcaggctgc gcaggaggcg gagaagcaga agggcggcgg cgggggcacc 960

ggcaaaggcg gcagtgagga gaagacggaa gaggagctga tggggcctcc ggtttcgggg 1020

gacaaggcaa gcggccgtcg cctgcgggac ttgcgggaca gtgaccctga tgaggacgag 1080

gatgatgaag aagaggacaa cttcccgtac agcaatggtg ccggtgccca tgctgcctca 1140

tccgactgct catctgagga cgactcgcct cctccaagac taggcgggcc tggacaccaa 1200

cctctgcccc agtag 1215

<210> 57

<211> 1215

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 57

atggaaaaat ccaaaaattt ccgcatcgac gccctgctgg ccgtggatcc cccgcgagcc 60

gcctccacgc agagcgcgcc tctggccttg gtcacttccc tcgcgactac agtatctggt 120

cccggccgcg gcggcagcgg cggcgggggg accagtagcg gggcgagccg tagctgcagt 180

cccgcatcct cggaggccac tgcagcgccc ggtgaccggc tgagagctga gagcccgtcg 240

cccccacgct tgctggctgc acactgcgcg ctgctgccca agcccggatt cctgggcgcc 300

ggaggaggcg gcggcgcggc gggtgggccg ggcactcccc accaccacgc gcaccctggt 360

gcagcagccg ccgcggctgc cgctgccgct gccgcggctg ccggtggcct ggcactgggg 420

ctgcacccgg ggggcgcaca gggcggcgcg ggcctccctg cacaggcggc tctctatgga 480

cacccggtct acagttattc ggcagcagct gcagcggccg cgctagctgg ccagcacccg 540

gcgctttcct actcataccc tcaggtgcag ggcgcgcacc ctgcgcaccc tgccgacccc 600

atcaagctgg gtgccagcac cttccaactg gaccagtggc tgcgcgcgtc tactgcgggc 660

atgatcctgc ccaagatgcc ggacttcagc tgtcaggcgc agtcgaacct cttggggaag 720

tgccgaaggc ctcgcacggc cttcaccagc cagcagctgt tggagctgga acaccagttc 780

aagctcaaca agtacctgtc tcgacccaag cgttttgagg tggctacctc gctcatgctc 840

accgagactc aggtgaagat ttggttccag aaccgccgaa tgaaatggaa acgcagcaaa 900

aaggccaaag agcaggctgc gcaggaggcg gagaagcaga agggcggcgg cgggggcacc 960

ggcaaaggcg gcagtgagga gaagacggaa gaggagctga tggggcctcc ggtttcgggg 1020

gacaaggcaa gcggccgtcg cctgcgggac ttgcgggaca gtgaccctga tgaggacgag 1080

gatgatgaag aagaggacaa cttcccgtac agcaatggtg ccggtgccca tgctgcctca 1140

tccgactgct catctgagga cgactcgcct cctccaagac taggcgggcc tggacaccaa 1200

cctctgcccc agtag 1215

<210> 58

<211> 846

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 58

atgacttcca aggaggacgg caaggcggcg ccgggggagg agcggcggcg cagcccgctg 60

gaccacctgc ctccgcctgc caactccaac aagccactga cgccgttcag catcgaggac 120

atcctcaaca agccgtctgt gcggagaagt tactcgctgt gcggggcggc gcacctgctg 180

gccgccgcgg acaagcacgc gcagggcggc ttgcccctgg cgggccgcgc gctgctctcg 240

cagacctcgc cgctgtgcgc gctggaggag ctcgccagca agacgtttaa ggggctggag 300

gtcagcgttc tgcaggcagc cgaaggccgc gacggtatga ccatctttgg gcagcggcag 360

acccctaaga agcggcgaaa gtcgcgcacg gccttcacca accaccagat ctatgaattg 420

gaaaagcgct ttctatacca gaagtacctg tcccccgccg atcgcgacca aatcgcgcag 480

cagctgggcc tcaccaacgc gcaagtcatc acctggttcc agaatcggcg cgctaagctc 540

aagcgggacc tggaggagat gaaggccgac gtagagtccg ccaagaaact gggccccagc 600

gggcagatgg acatcgtggc gctggccgaa ctcgagcaga actcggaggc cacagccggc 660

ggtggcggcg gctgcggcag ggccaagtcg aggcccggct ctccggtcct ccccccaggc 720

gccccgaagg ccccgggcgc tggcgccctg cagctctcgc ctgcctctcc gctcacggac 780

cagccggcca gcagccagga ctgctcggag gacgaggaag acgaagagat cgacgtggac 840

gattga 846

<210> 59

<211> 1119

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 59

atgttggacg gcatcaagat ggaggagcac gccctgcgcc ccgggcccgc cactctgggg 60

gtgctgctgg gctccgactg cccgcatccc gccgtctgcg agggctgcca gcggcccatc 120

tccgaccgct tcctgatgcg agtcaacgag tcgtcctggc acgaggagtg tttgcagtgc 180

gcggcgtgtc agcaagccct caccaccagc tgctacttcc gggatcggaa actgtactgc 240

aaacaagact accaacagct cttcgcggcc aagtgcagcg gctgcatgga gaagatcgcc 300

cccaccgagt tcgtgatgcg ggcgctggag tgcgtgtacc acctgggctg cttctgctgc 360

tgcgtgtgtg aacggcagct acgcaagggc gacgaattcg tgctcaagga gggccagctg 420

ctgtgcaagg gtgactacga gaaggagaag gacctgctca gctccgtgag ccccgacgag 480

tccgactccg tgaagagcga ggatgaagat ggggacatga agccggccaa ggggcagggc 540

agtcagagca agggcagcgg ggatgacggg aaggacccgc ggaggcccaa gcgaccccgg 600

accatcctca ccacgcagca gcgaagagcc ttcaaggcct ccttcgaggt ctcgtcgaag 660

ccttgccgaa aggtccgaga gacactggca gctgagacgg gcctcagtgt gcgcgtggtc 720

caggtctggt ttcagaacca aagagcaaag atgaagaagc tggcgcggcg gcaccagcag 780

cagcaggagc agcagaactc ccagcggctg ggccaggagg tcctgtccag ccgcatggag 840

ggcatgatgg cttcctacac gccgctggcc ccaccacagc agcagatcgt ggccatggaa 900

cagagcccct acggcagcag cgaccccttc cagcagggcc tcacgccgcc ccaaatgcca 960

gggaacgact ccatcttcca tgacatcgac agcgatacct ccttaaccag cctcagcgac 1020

tgcttcctcg gctcctcaga cgtgggctcc ctgcaggccc gcgtggggaa ccccatcgac 1080

cggctctact ccatgcagag ttcctacttc gcctcctga 1119

<210> 60

<211> 714

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 60

atgccagccc gccttgagac ctgcatctcc gacctcgact gcgccagcag cagcggcagt 60

gacctatccg gcttcctcac cgacgaggaa gactgtgcca gactccaaca ggcagcctcc 120

gcttcggggc cgcccgcgcc ggcccgcagg ggcgcgccca atatctcccg ggcgtctgag 180

gttccagggg cacaggacga cgagcaggag aggcggcggc gccgcggccg gacgcgggtc 240

cgctccgagg cgctgctgca ctcgctgcgc aggagccggc gcgtcaaggc caacgatcgc 300

gagcgcaacc gcatgcacaa cttgaacgcg gccctggacg cactgcgcag cgtgctgccc 360

tcgttccccg acgacaccaa gctcaccaaa atcgagacgc tgcgcttcgc ctacaactac 420

atctgggctc tggccgagac actgcgcctg gcggatcaag ggctgcccgg aggcggtgcc 480

cgggagcgcc tcctgccgcc gcagtgcgtc ccctgcctgc ccggtccccc aagccccgcc 540

agcgacgcgg agtcctgggg ctcaggtgcc gccgccgcct ccccgctctc tgaccccagt 600

agcccagccg cctccgaaga cttcacctac cgccccggcg accctgtttt ctccttccca 660

agcctgccca aagacttgct ccacacaacg ccctgtttca ttccttacca ctag 714

<210> 61

<211> 819

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 61

atgttcgtca aatccgagac cttggagttg aaggaggaag aggacgtgtt agtgctgctc 60

ggatcggcct cccccgcctt ggcggccctg accccgctgt catccagcgc cgacgaagaa 120

gaggaggagg agccgggcgc gtcaggcggg gcgcgtcggc agcgcggggc tgaggccggg 180

cagggggcgc ggggcggcgt ggctgcgggt gcggagggct gccggcccgc acggctgctg 240

ggtctggtac acgattgcaa acggcgccct tcccgggcgc gggccgtctc ccgaggcgcc 300

aagacggccg agacggtgca gcgcatcaag aagacccgta gactgaaggc caacaaccgc 360

gagcgaaacc gcatgcacaa cctcaacgcg gcactggacg cgctgcgcga ggtgctcccc 420

acgttccccg aggacgccaa gctcaccaag atcgagaccc tgcgcttcgc ccacaactac 480

atctgggcac tcaccgagac cctgcgcctg gcggatcact gcgggggcgg cggcgggggc 540

ctgccggggg cgctcttctc cgaggcagtg ttgctgagcc cgggaggcgc cagcgccgcc 600

ctgagcagca gcggagacag cccctcgccc gcctccacgt ggagttgcac caacagcccc 660

gcgccgtcct cctccgtgtc ctccaattcc acctccccct acagctgcac tttatcgccc 720

gccagcccgg ccgggtcaga catggactat tggcagcccc cacctcccga caagcaccgc 780

tatgcacctc acctccccat agccagggat tgtatctag 819

<210> 62

<211> 645

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 62

atgacgcctc aaccctcggg tgcgcccact gtccaagtga cccgtgagac ggagcggtcc 60

ttccccagag cctcggaaga cgaagtgacc tgccccacgt ccgccccgcc cagccccact 120

cgcacacggg ggaactgcgc agaggcggaa gagggaggct gccgaggggc cccgaggaag 180

ctccgggcac ggcgcggggg acgcagccgg cctaagagcg agttggcact gagcaagcag 240

cgacggagtc ggcgaaagaa ggccaacgac cgcgagcgca atcgaatgca caacctcaac 300

tcggcactgg acgccctgcg cggtgtcctg cccaccttcc cagacgacgc gaagctcacc 360

aagatcgaga cgctgcgctt cgcccacaac tacatctggg cgctgactca aacgctgcgc 420

atagcggacc acagcttgta cgcgctggag ccgccggcgc cgcactgcgg ggagctgggc 480

agcccaggcg gttcccccgg ggactggggg tccctctact ccccagtctc ccaggctggc 540

agcctgagtc ccgccgcgtc gctggaggag cgacccgggc tgctgggggc caccttttcc 600

gcctgcttga gcccaggcag tctggctttc tcagattttc tgtga 645

<210> 63

<211> 711

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 63

atggaaagct ctgccaagat ggagagcggc ggcgccggcc agcagcccca gccgcagccc 60

cagcagccct tcctgccgcc cgcagcctgt ttctttgcca cggccgcagc cgcggcggcc 120

gcagccgccg cagcggcagc gcagagcgcg cagcagcagc agcagcagca gcagcagcag 180

cagcaggcgc cgcagctgag accggcggcc gacggccagc cctcaggggg cggtcacaag 240

tcagcgccca agcaagtcaa gcgacagcgc tcgtcttcgc ccgaactgat gcgctgcaaa 300

cgccggctca acttcagcgg ctttggctac agcctgccgc agcagcagcc ggccgccgtg 360

gcgcgccgca acgagcgcga gcgcaaccgc gtcaagttgg tcaacctggg ctttgccacc 420

cttcgggagc acgtccccaa cggcgcggcc aacaagaaga tgagtaaggt ggagacactg 480

cgctcggcgg tcgagtacat ccgcgcgctg cagcagctgc tggacgagca tgacgcggtg 540

agcgccgcct tccaggcagg cgtcctgtcg cccaccatct cccccaacta ctccaacgac 600

ttgaactcca tggccggctc gccggtctca tcctactcgt cggacgaggg ctcttacgac 660

ccgctcagcc ccgaggagca ggagcttctc gacttcacca actggttctg a 711

<210> 64

<211> 957

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 64

atggagcttc tatcgccgcc actccgggac atagacttga caggccccga cggctctctc 60

tgctcctttg agacagcaga cgacttctat gatgacccgt gtttcgactc accagacctg 120

cgcttttttg aggacctgga cccgcgcctg gtgcacatgg gagccctcct gaaaccggag 180

gagcacgcac acttccctac tgcggtgcac ccaggcccag gcgctcgtga ggatgagcat 240

gtgcgcgcgc ccagcgggca ccaccaggcg ggtcgctgct tgctgtgggc ctgcaaggcg 300

tgcaagcgca agaccaccaa cgctgatcgc cgcaaggccg ccaccatgcg cgagcgccgc 360

cgcctgagca aagtgaatga ggccttcgag acgctcaagc gctgcacgtc cagcaacccg 420

aaccagcggc tacccaaggt ggagatcctg cgcaacgcca tccgctacat cgaaggtctg 480

caggctctgc tgcgcgacca ggacgccgcg ccccctggcg ccgctgcctt ctacgcacct 540

ggaccgctgc ccccaggccg tggcagcgag cactacagtg gcgactcaga tgcatccagc 600

ccgcgctcca actgctctga tggcatgatg gattacagcg gccccccaag cggcccccgg 660

cggcagaatg gctacgacac cgcctactac agtgaggcgg cgcgcgagtc caggccaggg 720

aagagtgcgg ctgtgtcgag cctcgactgc ctgtccagca tagtggagcg catctccaca 780

gacagccccg ctgcgcctgc gctgcttttg gcagatgcac caccagagtc gcctccgggt 840

ccgccagagg gggcatccct aagcgacaca gaacagggaa cccagacccc gtctcccgac 900

gccgcccctc agtgtcctgc aggctcaaac cccaatgcga tttatcaggt gctttga 957

<210> 65

<211> 963

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 65

atggagctac tgtcgccacc gctccgcgac gtagacctga cggcccccga cggctctctc 60

tgctcctttg ccacaacgga cgacttctat gacgacccgt gtttcgactc cccggacctg 120

cgcttcttcg aagacctgga cccgcgcctg atgcacgtgg gcgcgctcct gaaacccgaa 180

gagcactcgc acttccccgc ggcggtgcac ccggccccgg gcgcacgtga ggacgagcat 240

gtgcgcgcgc ccagcgggca ccaccaggcg ggccgctgcc tactgtgggc ctgcaaggcg 300

tgcaagcgca agaccaccaa cgccgaccgc cgcaaggccg ccaccatgcg cgagcggcgc 360

cgcctgagca aagtaaatga ggcctttgag acactcaagc gctgcacgtc gagcaatcca 420

aaccagcggt tgcccaaggt ggagatcctg cgcaacgcca tccgctatat cgagggcctg 480

caggctctgc tgcgcgacca ggacgccgcg ccccctggcg ccgcagccgc cttctatgcg 540

ccgggcccgc tgcccccggg ccgcggcggc gagcactaca gcggcgactc cgacgcgtcc 600

agcccgcgct ccaactgctc cgacggcatg atggactaca gcggcccccc gagcggcgcc 660

cggcggcgga actgctacga aggcgcctac tacaacgagg cgcccagcga acccaggccc 720

gggaagagtg cggcggtgtc gagcctagac tgcctgtcca gcatcgtgga gcgcatctcc 780

accgagagcc ctgcggcgcc cgccctcctg ctggcggacg tgccttctga gtcgcctccg 840

cgcaggcaag aggctgccgc ccccagcgag ggagagagca gcggcgaccc cacccagtca 900

ccggacgccg ccccgcagtg ccctgcgggt gcgaacccca acccgatata ccaggtgctc 960

tga 963

<210> 66

<211> 768

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 66

atggacgtga tggatggctg ccagttctca ccttctgagt acttctacga cggctcctgc 60

ataccgtccc ccgagggtga atttggggac gagtttgtgc cgcgagtggc tgccttcgga 120

gcgcacaaag cagagctgca gggctcagat gaggacgagc acgtgcgagc gcctaccggc 180

caccaccagg ctggtcactg cctcatgtgg gcctgcaaag cctgcaagag gaagtccacc 240

accatggatc ggcggaaggc agccactatg cgcgagcgga ggcgcctgaa gaaggtcaac 300

caggctttcg aaaccctcaa gaggtgtacc acgaccaacc ccaaccagag gctgcccaag 360

gtggagatcc tcaggaatgc catccgctac atcgagagcc tgcaggagtt gctgagagag 420

caggtggaga actactatag cctgccggga cagagctgct cggagcccac cagccccacc 480

tccaactgct ctgatggcat gcccgaatgt aacagtcctg tctggtccag aaagagcagt 540

acttttgaca gcatctactg tcctgatgta tcaaatgtat atgccacaga taaaaactcc 600

ttatccagct tggattgctt atccaacata gtggaccgga tcacctcctc agagcaacct 660

gggttgcctc tccaggatct ggcttctctc tctccagttg ccagcaccga ttcacagcct 720

gcaactccag gggcttctag ttccaggctt atctatcatg tgctatga 768

<210> 67

<211> 729

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 67

atgatgatgg acctttttga aactggctcc tatttcttct acttggatgg ggaaaatgtt 60

actctgcagc cattagaagt ggcagaaggc tctcctttgt atccagggag tgatggtacc 120

ttgtccccct gccaggacca aatgcccccg gaagcgggga gcgacagcag cggagaggaa 180

catgtcctgg cgcccccggg cctgcagcct ccacactgcc ccggccagtg tctgatctgg 240

gcttgcaaga cctgcaagag aaaatctgcc cccactgacc ggcgaaaagc cgccaccctg 300

cgcgaaagga ggaggctaaa gaaaatcaac gaggccttcg aggcactgaa gcggcgaact 360

gtggccaacc ccaaccagag gctgcccaag gtggagattc tgcggagcgc catcagctat 420

attgagcggc tgcaggacct gctgcaccgg ctggatcagc aggagaagat gcaggagctg 480

ggggtggacc ccttcagcta cagacccaaa caagaaaatc ttgagggtgc ggatttcctg 540

cgcacctgca gctcccagtg gccaagtgtt tccgatcatt ccagggggct cgtgataacg 600

gctaaggaag gaggagcaag tattgattcg tcagcctcga gtagccttcg atgcctttct 660

tccatcgtgg acagtatttc ctcggaggaa cgcaaactcc cctgcgtgga ggaagtggtg 720

gagaagtaa 729

<210> 68

<211> 1356

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 68

atgccgaaga acaagaagcg gaacactccc caccgcggta gcagtgctgg cggcggcggg 60

tcaggagcag ccgcagcgac ggcggcgaca gcaggtggcc agcatcgaaa tgttcagcct 120

tttagtgatg aagatgcatc aattgaaaca atgagccatt gcagtggtta tagcgatcct 180

tccagttttg ctgaagatgg accagaagtc cttgatgagg aaggaactca agaagaccta 240

gagtacaagt tgaagggatt aattgaccta accctggata agagtgcgaa gacaaggcaa 300

gcagctcttg aaggtattaa aaatgcactg gcttcaaaaa tgctgtatga atttattctg 360

gaaaggagaa tgactttaac tgatagcatt gaacgctgcc tgaaaaaagg taagagtgat 420

gagcaacgtg cagctgcagc gttagcatct gttctttgta ttcagctggg ccctggaatt 480

gaaagtgaag agattttgaa aactcttgga ccaatcctaa agaaaatcat ttgtgatggg 540

tcagctagta tgcaggctag gcaaacttgt gcaacttgct ttggtgtttg ctgttttatt 600

gccacagatg acattactga actatactca actctggaat gtttggaaaa tatcttcact 660

aaatcctatc tcaaagagaa agacactact gttatttgca gcactcctaa tacagtgctt 720

catatcagct ctcttcttgc atggacacta ctgctgacca tatgcccaat caatgaagtg 780

aagaaaaagc ttgagatgca tttccataag cttccaagcc tcctctcttg tgatgatgta 840

aacatgagaa tagctgctgg tgaatctttg gcacttctct ttgaattggc cagaggaata 900

gagagtgact ttttttatga agacatggag tccttgacgc agatgcttag ggccttggca 960

acagatggaa ataaacaccg ggccaaagtg gacaagagaa agcagcggtc agttttcaga 1020

gatgtcctga gggcagtgga ggaacgggat tttccaacag aaaccattaa atttggtcct 1080

gaacgcatgt atattgattg ctgggtaaaa aaacacacct atgacacctt taaggaggtt 1140

cttggatcag ggatgcagta ccacttgcag tcaaatgaat tccttcgaaa tgtatttgaa 1200

cttggacccc cagtgatgct tgatgctgca acgcttaaaa cgatgaagat ttctcgtttc 1260

gaaaggcatt tatataactc tgcagccttc aaagctcgaa ccaaagctag aagcaaatgt 1320

cgagataaga gagcagatgt tggagaattc ttctag 1356

<210> 69

<211> 1524

<212> ДНК

<213> Rattus norvegicus

<400> 69

atggggcgga agaaaataca aatcacacgc ataatggatg aaaggaaccg acaggtcact 60

tttacaaaga gaaagtttgg attaatgaag aaagcctatg aacttagtgt gctctgtgac 120

tgtgaaatag cactcatcat tttcaacagc tctaacaaac tgtttcaata tgctagcact 180

gatatggaca aagttcttct caagtataca gaatataatg aacctcatga aagcagaacc 240

aactcggata ttgttgaggc tctgaacaag aaggaacaca gagggtgcga cagcccagac 300

cctgatactt catatgtgct aactccacat acagaagaaa aatataaaaa aattaatgag 360

gaatttgata atatgatgcg gaatcataaa atcgcacctg gtctgccacc tcagaacttt 420

tcaatgtctg tcacagttcc agtgaccagc cccaatgctt tgtcctacac taacccaggg 480

agttcactgg tgtccccatc tttggcagcc agctcaacgt taacagattc aagcatgctc 540

tctccacctc aaaccacatt acatagaaat gtgtctcctg gagctcctca gagaccacca 600

agtactggca atgcaggtgg gatgttgagc actacagacc tcacagtgcc aaatggagct 660

ggaagcagtc cagtggggaa tggatttgta aactcaagag cttctccaaa tttgattgga 720

gctactggtg caaatagctt aggcaaagtc atgcctacaa agtctccccc tccaccaggt 780

ggtggtaatc ttggaatgaa cagtaggaaa ccagatcttc gagttgtcat ccccccttca 840

agcaagggca tgatgcctcc actatcggag gaagaggaat tggagttgaa cacccaaagg 900

atcagtagtt ctcaagccac tcaacctctt gctaccccag tcgtgtctgt gacaacccca 960

agcttgcctc cgcaaggact tgtgtactca gcaatgccga ctgcctacaa cactgattat 1020

tcactgacca gcgctgacct gtcagccctt caaggcttca actcgccagg aatgctgtcg 1080

ctgggacagg tgtcggcctg gcagcagcac cacctaggac aagcagccct cagctctctt 1140

gttgctggag ggcagttatc tcagggttcc aatttatcca ttaataccaa ccaaaacatc 1200

agcatcaagt ccgaaccgat ttcacctcct cgggatcgta tgaccccatc gggcttccag 1260

cagcagcagc agcagcagca gcagcagcag ccgccgccac caccgcagcc ccagccacaa 1320

cccccgcagc cccagccccg acaggaaatg gggcgctccc ctgtggacag tctgagcagc 1380

tctagtagct cctatgatgg cagtgatcgg gaggatccac ggggcgactt ccattctcca 1440

attgtgcttg gccgaccccc aaacactgag gacagagaaa gcccttctgt aaagcgaatg 1500

aggatggacg cgtgggtgac ctaa 1524

<210> 70

<211> 675

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 70

atggagctgt atgagacatc cccctacttc taccaggaac cccgcttcta tgatggggaa 60

aactacctgc ctgtccacct ccagggcttc gaaccaccag gctacgagcg gacggagctc 120

accctgagcc ccgaggcccc agggcccctt gaggacaagg ggctggggac ccccgagcac 180

tgtccaggcc agtgcctgcc gtgggcgtgt aaggtgtgta agaggaagtc ggtgtccgtg 240

gaccggcggc gggcggccac actgagggag aagcgcaggc tcaagaaggt gaatgaggcc 300

ttcgaggccc tgaagagaag caccctgctc aaccccaacc agcggctgcc caaggtggag 360

atcctgcgca gtgccatcca gtacatcgag cgcctccagg ccctgctcag ctccctcaac 420

caggaggagc gtgacctccg ctaccggggc gggggcgggc cccagccagg ggtgcccagc 480

gaatgcagct ctcacagcgc ctcctgcagt ccagagtggg gcagtgcact ggagttcagc 540

gccaacccag gggatcatct gctcacggct gaccctacag atgcccacaa cctgcactcc 600

ctcacctcca tcgtggacag catcacagtg gaagatgtgt ctgtggcctt cccagatgaa 660

accatgccca actga 675

<210> 71

<211> 822

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 71

atgtcgctga ccaacacaaa gacggggttt tcggtcaagg acatcttaga cctgccggac 60

accaacgatg aggagggctc tgtggccgaa ggtccggagg aagagaacga ggggcccgag 120

ccagccaaga gggccgggcc gctggggcag ggcgccctgg acgcggtgca gagcctgccc 180

ctgaagaacc ccttctacga cagcagcgac aacccgtaca cgcgctggct ggccagcacc 240

gagggccttc agtactccct gcacggtctg gctgccgggg cgccccctca ggactcaagc 300

tccaagtccc cggagccctc ggccgacgag tcaccggaca atgacaagga gaccccgggc 360

ggcggggggg acgccggcaa gaagcgaaag cggcgagtgc ttttctccaa ggcgcagacc 420

tacgagctgg agcggcgctt tcggcagcag cggtacctgt cggcgcccga gcgcgaacac 480

ctggccagcc tcatccgcct cacgcccacg caggtcaaga tctggttcca gaaccaccgc 540

tacaagatga agcgcgcccg ggccgagaaa ggtatggagg tgacgcccct gccctcgccg 600

cgccgggtgg ccgtgcccgt cttggtcagg gacggcaaac catgtcacgc gctcaaagcc 660

caggacctgg cagccgccac cttccaggcg ggcattccct tttctgccta cagcgcgcag 720

tcgctgcagc acatgcagta caacgcccag tacagctcgg ccagcacccc ccagtacccg 780

acagcacacc ccctggtcca ggcccagcag tggacttggt ga 822

<210> 72

<211> 7668

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 72

atgccgccgc tcctggcgcc cctgctctgc ctggcgctgc tgcccgcgct cgccgcacga 60

ggcccgcgat gctcccagcc cggtgagacc tgcctgaatg gcgggaagtg tgaagcggcc 120

aatggcacgg aggcctgcgt ctgtggcggg gccttcgtgg gcccgcgatg ccaggacccc 180

aacccgtgcc tcagcacccc ctgcaagaac gccgggacat gccacgtggt ggaccgcaga 240

ggcgtggcag actatgcctg cagctgtgcc ctgggcttct ctgggcccct ctgcctgaca 300

cccctggaca atgcctgcct caccaacccc tgccgcaacg ggggcacctg cgacctgctc 360

acgctgacgg agtacaagtg ccgctgcccg cccggctggt cagggaaatc gtgccagcag 420

gctgacccgt gcgcctccaa cccctgcgcc aacggtggcc agtgcctgcc cttcgaggcc 480

tcctacatct gccactgccc acccagcttc catggcccca cctgccggca ggatgtcaac 540

gagtgtggcc agaagcccgg gctttgccgc cacggaggca cctgccacaa cgaggtcggc 600

tcctaccgct gcgtctgccg cgccacccac actggcccca actgcgagcg gccctacgtg 660

ccctgcagcc cctcgccctg ccagaacggg ggcacctgcc gccccacggg cgacgtcacc 720

cacgagtgtg cctgcctgcc aggcttcacc ggccagaact gtgaggaaaa tatcgacgat 780

tgtccaggaa acaactgcaa gaacgggggt gcctgtgtgg acggcgtgaa cacctacaac 840

tgccgctgcc cgccagagtg gacaggtcag tactgtaccg aggatgtgga cgagtgccag 900

ctgatgccaa atgcctgcca gaacggcggg acctgccaca acacccacgg tggctacaac 960

tgcgtgtgtg tcaacggctg gactggtgag gactgcagcg agaacattga tgactgtgcc 1020

agcgccgcct gcttccacgg cgccacctgc catgaccgtg tggcctcctt ctactgcgag 1080

tgtccccatg gccgcacagg tctgctgtgc cacctcaacg acgcatgcat cagcaacccc 1140

tgtaacgagg gctccaactg cgacaccaac cctgtcaatg gcaaggccat ctgcacctgc 1200

ccctcggggt acacgggccc ggcctgcagc caggacgtgg atgagtgctc gctgggtgcc 1260

aacccctgcg agcatgcggg caagtgcatc aacacgctgg gctccttcga gtgccagtgt 1320

ctgcagggct acacgggccc ccgatgcgag atcgacgtca acgagtgcgt ctcgaacccg 1380

tgccagaacg acgccacctg cctggaccag attggggagt tccagtgcat ctgcatgccc 1440

ggctacgagg gtgtgcactg cgaggtcaac acagacgagt gtgccagcag cccctgcctg 1500

cacaatggcc gctgcctgga caagatcaat gagttccagt gcgagtgccc cacgggcttc 1560

actgggcatc tgtgccagta cgatgtggac gagtgtgcca gcaccccctg caagaatggt 1620

gccaagtgcc tggacggacc caacacttac acctgtgtgt gcacggaagg gtacacgggg 1680

acgcactgcg aggtggacat cgatgagtgc gaccccgacc cctgccacta cggctcctgc 1740

aaggacggcg tcgccacctt cacctgcctc tgccgcccag gctacacggg ccaccactgc 1800

gagaccaaca tcaacgagtg ctccagccag ccctgccgcc acgggggcac ctgccaggac 1860

cgcgacaacg cctacctctg cttctgcctg aaggggacca caggacccaa ctgcgagatc 1920

aacctggatg actgtgccag cagcccctgc gactcgggca cctgtctgga caagatcgat 1980

ggctacgagt gtgcctgtga gccgggctac acagggagca tgtgtaacat caacatcgat 2040

gagtgtgcgg gcaacccctg ccacaacggg ggcacctgcg aggacggcat caatggcttc 2100

acctgccgct gccccgaggg ctaccacgac cccacctgcc tgtctgaggt caatgagtgc 2160

aacagcaacc cctgcgtcca cggggcctgc cgggacagcc tcaacgggta caagtgcgac 2220

tgtgaccctg ggtggagtgg gaccaactgt gacatcaaca acaatgagtg tgaatccaac 2280

ccttgtgtca acggcggcac ctgcaaagac atgaccagtg gctacgtgtg cacctgccgg 2340

gagggcttca gcggtcccaa ctgccagacc aacatcaacg agtgtgcgtc caacccatgt 2400

ctgaaccagg gcacgtgtat tgacgacgtt gccgggtaca agtgcaactg cctgctgccc 2460

tacacaggtg ccacgtgtga ggtggtgctg gccccgtgtg cccccagccc ctgcagaaac 2520

ggcggggagt gcaggcaatc cgaggactat gagagcttct cctgtgtctg ccccacgggc 2580

tggcaagggc agacctgtga ggtcgacatc aacgagtgcg ttctgagccc gtgccggcac 2640

ggcgcatcct gccagaacac ccacggcggc taccgctgcc actgccaggc cggctacagt 2700

gggcgcaact gcgagaccga catcgacgac tgccggccca acccgtgtca caacgggggc 2760

tcctgcacag acggcatcaa cacggccttc tgcgactgcc tgcccggctt ccggggcact 2820

ttctgtgagg aggacatcaa cgagtgtgcc agtgacccct gccgcaacgg ggccaactgc 2880

acggactgcg tggacagcta cacgtgcacc tgccccgcag gcttcagcgg gatccactgt 2940

gagaacaaca cgcctgactg cacagagagc tcctgcttca acggtggcac ctgcgtggac 3000

ggcatcaact cgttcacctg cctgtgtcca cccggcttca cgggcagcta ctgccagcac 3060

gatgtcaatg agtgcgactc acagccctgc ctgcatggcg gcacctgtca ggacggctgc 3120

ggctcctaca ggtgcacctg cccccagggc tacactggcc ccaactgcca gaaccttgtg 3180

cactggtgtg actcctcgcc ctgcaagaac ggcggcaaat gctggcagac ccacacccag 3240

taccgctgcg agtgccccag cggctggacc ggcctttact gcgacgtgcc cagcgtgtcc 3300

tgtgaggtgg ctgcgcagcg acaaggtgtt gacgttgccc gcctgtgcca gcatggaggg 3360

ctctgtgtgg acgcgggcaa cacgcaccac tgccgctgcc aggcgggcta cacaggcagc 3420

tactgtgagg acctggtgga cgagtgctca cccagcccct gccagaacgg ggccacctgc 3480

acggactacc tgggcggcta ctcctgcaag tgcgtggccg gctaccacgg ggtgaactgc 3540

tctgaggaga tcgacgagtg cctctcccac ccctgccaga acgggggcac ctgcctcgac 3600

ctccccaaca cctacaagtg ctcctgccca cggggcactc agggtgtgca ctgtgagatc 3660

aacgtggacg actgcaatcc ccccgttgac cccgtgtccc ggagccccaa gtgctttaac 3720

aacggcacct gcgtggacca ggtgggcggc tacagctgca cctgcccgcc gggcttcgtg 3780

ggtgagcgct gtgaggggga tgtcaacgag tgcctgtcca atccctgcga cgcccgtggc 3840

acccagaact gcgtgcagcg cgtcaatgac ttccactgcg agtgccgtgc tggtcacacc 3900

gggcgccgct gcgagtccgt catcaatggc tgcaaaggca agccctgcaa gaatgggggc 3960

acctgcgccg tggcctccaa caccgcccgc gggttcatct gcaagtgccc tgcgggcttc 4020

gagggcgcca cgtgtgagaa tgacgctcgt acctgcggca gcctgcgctg cctcaacggc 4080

ggcacatgca tctccggccc gcgcagcccc acctgcctgt gcctgggccc cttcacgggc 4140

cccgaatgcc agttcccggc cagcagcccc tgcctgggcg gcaacccctg ctacaaccag 4200

gggacctgtg agcccacatc cgagagcccc ttctaccgtt gcctgtgccc cgccaaattc 4260

aacgggctct tgtgccacat cctggactac agcttcgggg gtggggccgg gcgcgacatc 4320

cccccgccgc tgatcgagga ggcgtgcgag ctgcccgagt gccaggagga cgcgggcaac 4380

aaggtctgca gcctgcagtg caacaaccac gcgtgcggct gggacggcgg tgactgctcc 4440

ctcaacttca atgacccctg gaagaactgc acgcagtctc tgcagtgctg gaagtacttc 4500

agtgacggcc actgtgacag ccagtgcaac tcagccggct gcctcttcga cggctttgac 4560

tgccagcgtg cggaaggcca gtgcaacccc ctgtacgacc agtactgcaa ggaccacttc 4620

agcgacgggc actgcgacca gggctgcaac agcgcggagt gcgagtggga cgggctggac 4680

tgtgcggagc atgtacccga gaggctggcg gccggcacgc tggtggtggt ggtgctgatg 4740

ccgccggagc agctgcgcaa cagctccttc cacttcctgc gggagctcag ccgcgtgctg 4800

cacaccaacg tggtcttcaa gcgtgacgca cacggccagc agatgatctt cccctactac 4860

ggccgcgagg aggagctgcg caagcacccc atcaagcgtg ccgccgaggg ctgggccgca 4920

cctgacgccc tgctgggcca ggtgaaggcc tcgctgctcc ctggtggcag cgagggtggg 4980

cggcggcgga gggagctgga ccccatggac gtccgcggct ccatcgtcta cctggagatt 5040

gacaaccggc agtgtgtgca ggcctcctcg cagtgcttcc agagtgccac cgacgtggcc 5100

gcattcctgg gagcgctcgc ctcgctgggc agcctcaaca tcccctacaa gatcgaggcc 5160

gtgcagagtg agaccgtgga gccgcccccg ccggcgcagc tgcacttcat gtacgtggcg 5220

gcggccgcct ttgtgcttct gttcttcgtg ggctgcgggg tgctgctgtc ccgcaagcgc 5280

cggcggcagc atggccagct ctggttccct gagggcttca aagtgtctga ggccagcaag 5340

aagaagcggc gggagcccct cggcgaggac tccgtgggcc tcaagcccct gaagaacgct 5400

tcagacggtg ccctcatgga cgacaaccag aatgagtggg gggacgagga cctggagacc 5460

aagaagttcc ggttcgagga gcccgtggtt ctgcctgacc tggacgacca gacagaccac 5520

cggcagtgga ctcagcagca cctggatgcc gctgacctgc gcatgtctgc catggccccc 5580

acaccgcccc agggtgaggt tgacgccgac tgcatggacg tcaatgtccg cgggcctgat 5640

ggcttcaccc cgctcatgat cgcctcctgc agcgggggcg gcctggagac gggcaacagc 5700

gaggaagagg aggacgcgcc ggccgtcatc tccgacttca tctaccaggg cgccagcctg 5760

cacaaccaga cagaccgcac gggcgagacc gccttgcacc tggccgcccg ctactcacgc 5820

tctgatgccg ccaagcgcct gctggaggcc agcgcagatg ccaacatcca ggacaacatg 5880

ggccgcaccc cgctgcatgc ggctgtgtct gccgacgcac aaggtgtctt ccagatcctg 5940

atccggaacc gagccacaga cctggatgcc cgcatgcatg atggcacgac gccactgatc 6000

ctggctgccc gcctggccgt ggagggcatg ctggaggacc tcatcaactc acacgccgac 6060

gtcaacgccg tagatgacct gggcaagtcc gccctgcact gggccgccgc cgtgaacaat 6120

gtggatgccg cagttgtgct cctgaagaac ggggctaaca aagatatgca gaacaacagg 6180

gaggagacac ccctgtttct ggccgcccgg gagggcagct acgagaccgc caaggtgctg 6240

ctggaccact ttgccaaccg ggacatcacg gatcatatgg accgcctgcc gcgcgacatc 6300

gcacaggagc gcatgcatca cgacatcgtg aggctgctgg acgagtacaa cctggtgcgc 6360

agcccgcagc tgcacggagc cccgctgggg ggcacgccca ccctgtcgcc cccgctctgc 6420

tcgcccaacg gctacctggg cagcctcaag cccggcgtgc agggcaagaa ggtccgcaag 6480

cccagcagca aaggcctggc ctgtggaagc aaggaggcca aggacctcaa ggcacggagg 6540

aagaagtccc aggacggcaa gggctgcctg ctggacagct ccggcatgct ctcgcccgtg 6600

gactccctgg agtcacccca tggctacctg tcagacgtgg cctcgccgcc actgctgccc 6660

tccccgttcc agcagtctcc gtccgtgccc ctcaaccacc tgcctgggat gcccgacacc 6720

cacctgggca tcgggcacct gaacgtggcg gccaagcccg agatggcggc gctgggtggg 6780

ggcggccggc tggcctttga gactggccca cctcgtctct cccacctgcc tgtggcctct 6840

ggcaccagca ccgtcctggg ctccagcagc ggaggggccc tgaatttcac tgtgggcggg 6900

tccaccagtt tgaatggtca atgcgagtgg ctgtcccggc tgcagagcgg catggtgccg 6960

aaccaataca accctctgcg ggggagtgtg gcaccaggcc ccctgagcac acaggccccc 7020

tccctgcagc atggcatggt aggcccgctg cacagtagcc ttgctgccag cgccctgtcc 7080

cagatgatga gctaccaggg cctgcccagc acccggctgg ccacccagcc tcacctggtg 7140

cagacccagc aggtgcagcc acaaaactta cagatgcagc agcagaacct gcagccagca 7200

aacatccagc agcagcaaag cctgcagccg ccaccaccac caccacagcc gcaccttggc 7260

gtgagctcag cagccagcgg ccacctgggc cggagcttcc tgagtggaga gccgagccag 7320

gcagacgtgc agccactggg ccccagcagc ctggcggtgc acactattct gccccaggag 7380

agccccgccc tgcccacgtc gctgccatcc tcgctggtcc cacccgtgac cgcagcccag 7440

ttcctgacgc ccccctcgca gcacagctac tcctcgcctg tggacaacac ccccagccac 7500

cagctacagg tgcctgagca ccccttcctc accccgtccc ctgagtcccc tgaccagtgg 7560

tccagctcgt ccccgcattc caacgtctcc gactggtccg agggcgtctc cagccctccc 7620

accagcatgc agtcccagat cgcccgcatt ccggaggcct tcaagtaa 7668

<210> 73

<211> 6966

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 73

atggggccgg gggcccgtgg ccgccgccgc cgccgtcgcc cgatgtcgcc gccaccgcca 60

ccgccacccg tgcgggcgct gcccctgctg ctgctgctag cggggccggg ggctgcagcc 120

cccccttgcc tggacggaag cccgtgtgca aatggaggtc gttgcaccca gctgccctcc 180

cgggaggctg cctgcctgtg cccgcctggc tgggtgggtg agcggtgtca gctggaggac 240

ccctgtcact caggcccctg tgctggccgt ggtgtctgcc agagttcagt ggtggctggc 300

accgcccgat tctcatgccg gtgcccccgt ggcttccgag gccctgactg ctccctgcca 360

gatccctgcc tcagcagccc ttgtgcccac ggtgcccgct gctcagtggg gcccgatgga 420

cgcttcctct gctcctgccc acctggctac cagggccgca gctgccgaag cgacgtggat 480

gagtgccggg tgggtgagcc ctgccgccat ggtggcacct gcctcaacac acctggctcc 540

ttccgctgcc agtgtccagc tggctacaca gggccactat gtgagaaccc cgcggtgccc 600

tgtgcaccct caccatgccg taacgggggc acctgcaggc agagtggcga cctcacttac 660

gactgtgcct gtcttcctgg gtttgagggt cagaattgtg aagtgaacgt ggacgactgt 720

ccaggacacc gatgtctcaa tggggggaca tgcgtggatg gcgtcaacac ctataactgc 780

cagtgccctc ctgagtggac aggccagttc tgcacggagg acgtggatga gtgtcagctg 840

cagcccaacg cctgccacaa tgggggtacc tgcttcaaca cgctgggtgg ccacagctgc 900

gtgtgtgtca atggctggac aggcgagagc tgcagtcaga atatcgatga ctgtgccaca 960

gccgtgtgct tccatggggc cacctgccat gaccgcgtgg cttctttcta ctgtgcctgc 1020

cccatgggca agactggcct cctgtgtcac ctggatgacg cctgtgtcag caacccctgc 1080

cacgaggatg ctatctgtga cacaaatccg gtgaacggcc gggccatttg cacctgtcct 1140

cccggcttca cgggtggggc atgtgaccag gatgtggacg agtgctctat cggcgccaac 1200

ccctgcgagc acttgggcag gtgcgtgaac acgcagggct ccttcctgtg ccagtgcggt 1260

cgtggctaca ctggacctcg ctgtgagacc gatgtcaacg agtgtctgtc ggggccctgc 1320

cgaaaccagg ccacgtgcct cgaccgcata ggccagttca cctgtatctg tatggcaggc 1380

ttcacaggaa cctattgcga ggtggacatt gacgagtgtc agagtagccc ctgtgtcaac 1440

ggtggggtct gcaaggaccg agtcaatggc ttcagctgca cctgcccctc gggcttcagc 1500

ggctccacgt gtcagctgga cgtggacgaa tgcgccagca cgccctgcag gaatggcgcc 1560

aaatgcgtgg accagcccga tggctacgag tgccgctgtg ccgagggctt tgagggcacg 1620

ctgtgtgatc gcaacgtgga cgactgctcc cctgacccat gccaccatgg tcgctgcgtg 1680

gatggcatcg ccagcttctc atgtgcctgt gctcctggct acacgggcac acgctgcgag 1740

agccaggtgg acgaatgccg cagccagccc tgccgccatg gcggcaaatg cctagacctg 1800

gtggacaagt acctctgccg ctgcccttct gggaccacag gtgtgaactg cgaagtgaac 1860

attgacgact gtgccagcaa cccctgcacc tttggagtct gccgtgatgg catcaaccgc 1920

tacgactgtg tctgccaacc tggcttcaca gggccccttt gtaacgtgga gatcaatgag 1980

tgtgcttcca gcccatgcgg cgagggaggt tcctgtgtgg atggggaaaa tggcttccgc 2040

tgcctctgcc cgcctggctc cttgccccca ctctgcctcc ccccgagcca tccctgtgcc 2100

catgagccct gcagtcacgg catctgctat gatgcacctg gcgggttccg ctgtgtgtgt 2160

gagcctggct ggagtggccc ccgctgcagc cagagcctgg cccgagacgc ctgtgagtcc 2220

cagccgtgca gggccggtgg gacatgcagc agcgatggaa tgggtttcca ctgcacctgc 2280

ccgcctggtg tccagggacg tcagtgtgaa ctcctctccc cctgcacccc gaacccctgt 2340

gagcatgggg gccgctgcga gtctgcccct ggccagctgc ctgtctgctc ctgcccccag 2400

ggctggcaag gcccacgatg ccagcaggat gtggacgagt gtgctggccc cgcaccctgt 2460

ggccctcatg gtatctgcac caacctggca gggagtttca gctgcacctg ccatggaggg 2520

tacactggcc cttcctgcga tcaggacatc aatgactgtg accccaaccc atgcctgaac 2580

ggtggctcgt gccaagacgg cgtgggctcc ttttcctgct cctgcctccc tggtttcgcc 2640

ggcccacgat gcgcccgcga tgtggatgag tgcctgagca acccctgcgg cccgggcacc 2700

tgtaccgacc acgtggcctc cttcacctgc acctgcccgc caggctacgg aggcttccac 2760

tgcgaacagg acctgcccga ctgcagcccc agctcctgct tcaatggcgg gacctgtgtg 2820

gacggcgtga actcgttcag ctgcctgtgc cgtcccggct acacaggagc ccactgccaa 2880

catgaggcag acccctgcct ctcgcggccc tgcctacacg ggggcgtctg cagcgccgcc 2940

caccctggct tccgctgcac ctgcctcgag agcttcacgg gcccgcagtg ccagacgctg 3000

gtggattggt gcagccgcca gccttgtcaa aacgggggtc gctgcgtcca gactggggcc 3060

tattgccttt gtccccctgg atggagcgga cgcctctgtg acatccgaag cttgccctgc 3120

agggaggccg cagcccagat cggggtgcgg ctggagcagc tgtgtcaggc gggtgggcag 3180

tgtgtggatg aagacagctc ccactactgc gtgtgcccag agggccgtac tggtagccac 3240

tgtgagcagg aggtggaccc ctgcttggcc cagccctgcc agcatggggg gacctgccgt 3300

ggctatatgg ggggctacat gtgtgagtgt cttcctggct acaatggtga taactgtgag 3360

gacgacgtgg acgagtgtgc ctcccagccc tgccagcacg ggggttcatg cattgacctc 3420

gtggcccgct atctctgctc ctgtccccca ggaacgctgg gggtgctctg cgagattaat 3480

gaggatgact gcggcccagg cccaccgctg gactcagggc cccggtgcct acacaatggc 3540

acctgcgtgg acctggtggg tggtttccgc tgcacctgtc ccccaggata cactggtttg 3600

cgctgcgagg cagacatcaa tgagtgtcgc tcaggtgcct gccacgcggc acacacccgg 3660

gactgcctgc aggacccagg cggaggtttc cgttgccttt gtcatgctgg cttctcaggt 3720

cctcgctgtc agactgtcct gtctccctgc gagtcccagc catgccagca tggaggccag 3780

tgccgtccta gcccgggtcc tgggggtggg ctgaccttca cctgtcactg tgcccagccg 3840

ttctggggtc cgcgttgcga gcgggtggcg cgctcctgcc gggagctgca gtgcccggtg 3900

ggcgtcccat gccagcagac gccccgcggg ccgcgctgcg cctgcccccc agggttgtcg 3960

ggaccctcct gccgcagctt cccggggtcg ccgccggggg ccagcaacgc cagctgcgcg 4020

gccgccccct gtctccacgg gggctcctgc cgccccgcgc cgctcgcgcc cttcttccgc 4080

tgcgcttgcg cgcagggctg gaccgggccg cgctgcgagg cgcccgccgc ggcacccgag 4140

gtctcggagg agccgcggtg cccgcgcgcc gcctgccagg ccaagcgcgg ggaccagcgc 4200

tgcgaccgcg agtgcaacag cccaggctgc ggctgggacg gcggcgactg ctcgctgagc 4260

gtgggcgacc cctggcggca atgcgaggcg ctgcagtgct ggcgcctctt caacaacagc 4320

cgctgcgacc ccgcctgcag ctcgcccgcc tgcctctacg acaacttcga ctgccacgcc 4380

ggtggccgcg agcgcacttg caacccggtg tacgagaagt actgcgccga ccactttgcc 4440

gacggccgct gcgaccaggg ctgcaacacg gaggagtgcg gctgggatgg gctggattgt 4500

gccagcgagg tgccggccct gctggcccgc ggcgtgctgg tgctcacagt gctgctgccg 4560

ccagaggagc tactgcgttc cagcgccgac tttctgcagc ggctcagcgc catcctgcgc 4620

acctcgctgc gcttccgcct ggacgcgcac ggccaggcca tggtcttccc ttaccaccgg 4680

cctagtcctg gctccgaacc ccgggcccgt cgggagctgg cccccgaggt gatcggctcg 4740

gtagtaatgc tggagattga caaccggctc tgcctgcagt cgcctgagaa tgatcactgc 4800

ttccccgatg cccagagcgc cgctgactac ctgggagcgt tgtcagcggt ggagcgcctg 4860

gacttcccgt acccactgcg ggacgtgcgg ggggagccgc tggagcctcc agaacccagc 4920

gtcccgctgc tgccactgct agtggcgggc gctgtcttgc tgctggtcat tctcgtcctg 4980

ggtgtcatgg tggcccggcg caagcgcgag cacagcaccc tctggttccc tgagggcttc 5040

tcactgcaca aggacgtggc ctctggtcac aagggccggc gggaacccgt gggccaggac 5100

gcgctgggca tgaagaacat ggccaagggt gagagcctga tgggggaggt ggccacagac 5160

tggatggaca cagagtgccc agaggccaag cggctaaagg tagaggagcc aggcatgggg 5220

gctgaggagg ctgtggattg ccgtcagtgg actcaacacc atctggttgc tgctgacatc 5280

cgcgtggcac cagccatggc actgacacca ccacagggcg acgcagatgc tgatggcatg 5340

gatgtcaatg tgcgtggccc agatggcttc accccgctaa tgctggcttc cttctgtggg 5400

ggggctctgg agccaatgcc aactgaagag gatgaggcag atgacacatc agctagcatc 5460

atctccgacc tgatctgcca gggggctcag cttggggcac ggactgaccg tactggcgag 5520

actgctttgc acctggctgc ccgttatgcc cgtgctgatg cagccaagcg gctgctggat 5580

gctggggcag acaccaatgc ccaggaccac tcaggccgca ctcccctgca cacagctgtc 5640

acagccgatg cccagggtgt cttccagatt ctcatccgaa accgctctac agacttggat 5700

gcccgcatgg cagatggctc aacggcactg atcctggcgg cccgcctggc agtagagggc 5760

atggtggaag agctcatcgc cagccatgct gatgtcaatg ctgtggatga gcttgggaaa 5820

tcagccttac actgggctgc ggctgtgaac aacgtggaag ccactttggc cctgctcaaa 5880

aatggagcca ataaggacat gcaggatagc aaggaggaga cccccctatt cctggccgcc 5940

cgcgagggca gctatgaggc tgccaagctg ctgttggacc actttgccaa ccgtgagatc 6000

accgaccacc tggacaggct gccgcgggac gtagcccagg agagactgca ccaggacatc 6060

gtgcgcttgc tggatcaacc cagtgggccc cgcagccccc ccggtcccca cggcctgggg 6120

cctctgctct gtcctccagg ggccttcctc cctggcctca aagcggcaca gtcggggtcc 6180

aagaagagca ggaggccccc cgggaaggcg gggctggggc cgcaggggcc ccgggggcgg 6240

ggcaagaagc tgacgctggc ctgcccgggc cccctggctg acagctcggt cacgctgtcg 6300

cccgtggact cgctggactc cccgcggcct ttcggtgggc cccctgcttc ccctggtggc 6360

ttcccccttg aggggcccta tgcagctgcc actgccactg cagtgtctct ggcacagctt 6420

ggtggcccag gccgggcggg tctagggcgc cagccccctg gaggatgtgt actcagcctg 6480

ggcctgctga accctgtggc tgtgcccctc gattgggccc ggctgccccc acctgcccct 6540

ccaggcccct cgttcctgct gccactggcg ccgggacccc agctgctcaa cccagggacc 6600

cccgtctccc cgcaggagcg gcccccgcct tacctggcag tcccaggaca tggcgaggag 6660

tacccggcgg ctggggcaca cagcagcccc ccaaaggccc gcttcctgcg ggttcccagt 6720

gagcaccctt acctgacccc atcccccgaa tcccctgagc actgggccag cccctcacct 6780

ccctccctct cagactggtc cgaatccacg cctagcccag ccactgccac tggggccatg 6840

gccaccacca ctggggcact gcctgcccag ccacttccct tgtctgttcc cagctccctt 6900

gctcaggccc agacccagct ggggccccag ccggaagtta cccccaagag gcaagtgttg 6960

gcctga 6966

<210> 74

<211> 1797

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 74

atgccttgtg ttcaggcgca gtatgggtcc tcgcctcaag gagccagccc cgcttctcag 60

agctacagtt accactcttc gggagaatac agctccgatt tcttaactcc agagtttgtc 120

aagtttagca tggacctcac caacactgaa atcactgcca ccacttctct ccccagcttc 180

agtaccttta tggacaacta cagcacaggc tacgacgtca agccaccttg cttgtaccaa 240

atgcccctgt ccggacagca gtcctccatt aaggtagaag acattcagat gcacaactac 300

cagcaacaca gccacctgcc cccccagtct gaggagatga tgccgcactc cgggtcggtt 360

tactacaagc cctcctcgcc cccgacgccc accaccccgg gcttccaggt gcagcacagc 420

cccatgtggg acgacccggg atctctccac aacttccacc agaactacgt ggccactacg 480

cacatgatcg agcagaggaa aacgccagtc tcccgcctct ccctcttctc ctttaagcaa 540

tcgccccctg gcaccccggt gtctagttgc cagatgcgct tcgacgggcc cctgcacgtc 600

cccatgaacc cggagcccgc cggcagccac cacgtggtgg acgggcagac cttcgctgtg 660

cccaacccca ttcgcaagcc cgcgtccatg ggcttcccgg gcctgcagat cggccacgcg 720

tctcagctgc tcgacacgca ggtgccctca ccgccgtcgc ggggctcccc ctccaacgag 780

gggctgtgcg ctgtgtgtgg ggacaacgcg gcctgccaac actacggcgt gcgcacctgt 840

gagggctgca aaggcttctt taagcgcaca gtgcaaaaaa atgcaaaata cgtgtgttta 900

gcaaataaaa actgcccagt ggacaagcgt cgccggaatc gctgtcagta ctgccgattt 960

cagaagtgcc tggctgttgg gatggtcaaa gaagtggttc gcacagacag tttaaaaggc 1020

cggagaggtc gtttgccctc gaaaccgaag agcccacagg agccctctcc cccttcgccc 1080

ccggtgagtc tgatcagtgc cctcgtcagg gcccatgtcg actccaaccc ggctatgacc 1140

agcctggact attccaggtt ccaggcgaac cctgactatc aaatgagtgg agatgacacc 1200

cagcatatcc agcaattcta tgatctcctg actggctcca tggagatcat ccggggctgg 1260

gcagagaaga tccctggctt cgcagacctg cccaaagccg accaagacct gctttttgaa 1320

tcagctttct tagaactgtt tgtccttcga ttagcataca ggtccaaccc agtggagggt 1380

aaactcatct tttgcaatgg ggtggtcttg cacaggttgc aatgcgttcg tggctttggg 1440

gaatggattg attccattgt tgaattctcc tccaacttgc agaatatgaa catcgacatt 1500

tctgccttct cctgcattgc tgccctggct atggtcacag agagacacgg gctcaaggaa 1560

cccaagagag tggaagaact gcaaaacaag attgtaaatt gtctcaaaga ccacgtgact 1620

ttcaacaatg gggggttgaa ccgccccaat tatttgtcca aactgttggg gaagctccca 1680

gaacttcgta ccctttgcac acaggggcta cagcgcattt tctacctgaa attggaagac 1740

ttggtgccac cgccagcaat aattgacaaa cttttcctgg acactttacc tttctaa 1797

<210> 75

<211> 1074

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 75

atgcagagtg tgcagagcac gagcttttgt ctccgaaagc agtgcctttg cctgaccttc 60

ctgcttctcc atctcctggg acaggtcgct gcgactcagc gctgccctcc ccagtgcccg 120

ggccggtgcc ctgcgacgcc gccgacctgc gcccccgggg tgcgcgcggt gctggacggc 180

tgctcatgct gtctggtgtg tgcccgccag cgtggcgaga gctgctcaga tctggagcca 240

tgcgacgaga gcagtggcct ctactgtgat cgcagcgcgg accccagcaa ccagactggc 300

atctgcacgg cggtagaggg agataactgt gtgttcgatg gggtcatcta ccgcagtgga 360

gagaaatttc agccaagctg caaattccag tgcacctgca gagatgggca gattggctgt 420

gtgccccgct gtcagctgga tgtgctactg cctgagccta actgcccagc tccaagaaaa 480

gttgaggtgc ctggagagtg ctgtgaaaag tggatctgtg gcccagatga ggaggattca 540

ctgggaggcc ttacccttgc agcttacagg ccagaagcca ccctaggagt agaagtctct 600

gactcaagtg tcaactgcat tgaacagacc acagagtgga cagcatgctc caagagctgt 660

ggtatggggt tctccacccg ggtcaccaat aggaaccgtc aatgtgagat gctgaaacag 720

actcggctct gcatggtgcg gccctgtgaa caagagccag agcagccaac agataagaaa 780

ggaaaaaagt gtctccgcac caagaagtca ctcaaagcca tccacctgca gttcaagaac 840

tgcaccagcc tgcacaccta caagcccagg ttctgtgggg tctgcagtga tggccgctgc 900

tgcactcccc acaataccaa aaccatccag gcagagtttc agtgctcccc agggcaaata 960

gtcaagaagc cagtgatggt cattgggacc tgcacctgtc acaccaactg tcctaagaac 1020

aatgaggcct tcctccagga gctggagctg aagactacca gagggaaaat gtaa 1074

<210> 76

<211> 768

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 76

atgctgcggc cacagcggcc cggagacttg cagctcgggg cctccctcta cgagctggtg 60

ggctacaggc agccgccctc ctcctcctcc tcctccacct cctccacctc ctccacttcc 120

tcctcctcca cgacggcccc cctcctcccc aaggctgcgc gcgagaagcc ggaggcgccg 180

gccgagcctc caggccccgg gcccgggtca ggcgcgcacc cgggcggcag cgcccggccg 240

gacgccaagg aggagcagca gcagcagctg cggcgcaaga tcaacagccg cgagcggaag 300

cgcatgcagg acctgaacct ggccatggac gccctgcgcg aggtcatcct gccctactca 360

gcggcgcact gccagggcgc gcccggccgc aagctctcca agatagccac gctgctgctc 420

gcccgcaact acatcctact gctgggcagc tcgctgcagg agctgcgccg cgcgctgggc 480

gagggcgccg ggcccgccgc gccgcgcctg ctgctggccg ggctgcccct gctcgccgcc 540

gcgcccggct ccgtgttgct ggcgcccggc gccgtaggac cccccgacgc gctgcgcccc 600

gccaagtacc tgtcgctggc gctggacgag ccgccgtgcg gccagttcgc tctccccggc 660

ggcggcgcag gcggccccgg cctctgcacc tgcgccgtgt gcaagttccc gcacctggtc 720

ccggccagcc tgggcctggc cgccgtgcag gcgcaattct ccaagtga 768

<210> 77

<211> 972

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 77

atggactcgg acgccagcct ggtgtccagc cgcccgtcgt cgccagagcc cgatgacctt 60

tttctgccgg cccggagtaa gggcagcagc ggcagcgcct tcactggggg caccgtgtcc 120

tcgtccaccc cgagtgactg cccgccggag ctgagcgccg agctgcgcgg cgctatgggc 180

tctgcgggcg cgcatcctgg ggacaagcta ggaggcagtg gcttcaagtc atcctcgtcc 240

agcacctcgt cgtctacgtc gtcggcggct gcgtcgtcca ccaagaagga caagaagcaa 300

atgacagagc cggagctgca gcagctgcgt ctcaagatca acagccgcga gcgcaagcgc 360

atgcacgacc tcaacatcgc catggatggc ctccgcgagg tcatgccgta cgcacacggc 420

ccttcggtgc gcaagctttc caagatcgcc acgctgctgc tggcgcgcaa ctacatcctc 480

atgctcacca actcgctgga ggagatgaag cgactggtga gcgagatcta cgggggccac 540

cacgctggct tccacccgtc ggcctgcggc ggcctggcgc actccgcgcc cctgcccgcc 600

gccaccgcgc acccggcagc agcagcgcac gccgcacatc accccgcggt gcaccacccc 660

atcctgccgc ccgccgccgc agcggctgct gccgccgctg cagccgcggc tgtgtccagc 720

gcctctctgc ccggatccgg gctgccgtcg gtcggctcca tccgtccacc gcacggccta 780

ctcaagtctc cgtctgctgc cgcggccgcc ccgctggggg gcgggggcgg cggcagtggg 840

gcgagcgggg gcttccagca ctggggcggc atgccctgcc cctgcagcat gtgccaggtg 900

ccgccgccgc accaccacgt gtcggctatg ggcgccggca gcctgccgcg cctcacctcc 960

gacgccaagt ga 972

<210> 78

<211> 852

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 78

atgaacggcg aggagcagta ctacgcggcc acgcagcttt acaaggaccc atgcgcgttc 60

cagcgaggcc cggcgccgga gttcagcgcc agcccccctg cgtgcctgta catgggccgc 120

cagcccccgc cgccgccgcc gcacccgttc cctggcgccc tgggcgcgct ggagcagggc 180

agccccccgg acatctcccc gtacgaggtg ccccccctcg ccgacgaccc cgcggtggcg 240

caccttcacc accacctccc ggctcagctc gcgctccccc acccgcccgc cgggcccttc 300

ccggagggag ccgagccggg cgtcctggag gagcccaacc gcgtccagct gcctttccca 360

tggatgaagt ctaccaaagc tcacgcgtgg aaaggccagt gggcaggcgg cgcctacgct 420

gcggagccgg aggagaacaa gcggacgcgc acggcctaca cgcgcgcaca gctgctagag 480

ctggagaagg agttcctatt caacaagtac atctcacggc cgcgccgggt ggagctggct 540

gtcatgttga acttgaccga gagacacatc aagatctggt tccaaaaccg ccgcatgaag 600

tggaaaaagg aggaggacaa gaagcgcggc ggcgggacag ctgtcggggg tggcggggtc 660

gcggagcctg agcaggactg cgccgtgacc tccggcgagg agcttctggc gctgccgccg 720

ccgccgcccc ccggaggtgc tgtgccgccc gctgcccccg ttgccgcccg agagggccgc 780

ctgccgcctg gccttagcgc gtcgccacag ccctccagcg tcgcgcctcg gcggccgcag 840

gaaccacgat ga 852

<210> 79

<211> 717

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 79

atgagacaga gcggcgcctc ccagcccctg ctgatcaaca tgtacctgcc agatcccgtc 60

ggagacggtc tcttcaagga cgggaagaac ccgagctggg ggccgctgag ccccgcggtt 120

cagaaaggca gcggacagat ccagctgtgg cagtttctgc tggagctgct ggctgaccgc 180

gcgaacgccg gctgcatcgc gtgggagggc ggtcacggcg agttcaagct cacggacccg 240

gacgaggtgg cgcggcggtg gggcgagcgc aagagcaagc ccaacatgaa ctacgacaag 300

ctgagccgcg ccctgcgcta ctactacgac aagaacatca tgagcaaggt gcatggcaag 360

cgctacgcct accgcttcga cttccagggc ctggcgcagg cctgccagcc gccgcccgcg 420

cacgctcatg ccgccgccgc agctgctgcc gccgccgcgg ccgcccagga cggcgcgctc 480

tacaagctgc ccgccggcct cgccccgctg cccttccccg gcctctccaa actcaacctc 540

atggccgcct cggccggggt cgcgcccgcc ggcttctcct actggccggg cccgggcccc 600

gccgccaccg ctgccgccgc caccgccgcg ctctacccca gtcccagctt gcagcccccg 660

cccgggccct tcggggccgt ggccgcagcc tcgcacttgg ggggccatta ccactag 717

<210> 80

<211> 855

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 80

atggactact cctacctcaa ttcgtacgac tcgtgcgtgg cggccatgga ggcgtccgcc 60

tacggcgact ttggcgcctg cagccagccc ggcggcttcc aatacagccc cctgcggccc 120

gctttccccg cggcagggcc gccctgcccc gcgctcggct cctccaactg cgcacttggc 180

gccctacgcg accaccagcc cgcgccctac tcggcagtgc cctacaagtt cttcccagag 240

ccatccggcc tgcacgagaa gcgcaagcag cggcgcatcc gcaccacgtt caccagcgcg 300

cagctcaagg agctggagcg cgttttcgct gagacccact accccgacat ttacacgcgt 360

gaggagctgg cgctcaagat cgacctcact gaggctcgcg tgcaggtctg gttccagaac 420

cgccgggcca agttccgcaa acaggagcgc gcggccagcg ccaagggcgc ggcgggcgcg 480

gcgggcgcca aaaagggcga ggcgcgctgc tcctccgagg acgacgattc caaggagtcc 540

acgtgcagcc ccacgcccga tagcaccgcc tcgctgccgc cgccgcctgc gcccggcctg 600

gccagcccgc gcctgagccc cagcccgctg cccgtcgcac tgggctccgg gccgggacct 660

gggccggggc cacagccgct caagggcgca ctgtgggccg gtgtggcggg cggtgggggc 720

ggcgggcctg gcgcgggagc ggccgaacta cttaaggctt ggcagccggc ggagtccggc 780

cccgggccct tctccggggt tctgtcctcc tttcaccgga agcccggccc cgccctgaag 840

accaatctct tctag 855

<210> 81

<211> 945

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 81

atgtataaaa tggaatattc ttacctcaat tcctctgcct acgagtcctg tatggctggg 60

atggacacct cgagcctggc ttcagcctat gctgacttca gttcctgcag ccaggccagt 120

ggcttccagt ataacccgat aaggaccact tttggggcca cgtccggctg cccttccctc 180

acgccgggat cctgcagcct gggcaccctc agggaccacc agagcagtcc gtacgccgca 240

gttccttaca aactcttcac ggaccacggc ggcctcaacg agaagcgcaa gcagcggcgc 300

atccgcacca ctttcaccag tgcccagctc aaagagctgg aaagggtctt cgcggagact 360

cactaccccg acatctacac tcgggaggag ctggccctga agatcgacct cacagaggcg 420

cgagtccagg tgtggttcca gaaccgccgc gccaagtttc gcaagcagga gcgcgcagcg 480

gcagccgcag cggccgcggc caagaacggc tcctcgggca aaaagtctga ctcttccagg 540

gacgacgaga gcaaagaggc caagagcact gacccggaca gcactggggg cccaggtccc 600

aatcccaacc ccacccccag ctgcggggcg aatggaggcg gcggcggcgg gcccagcccg 660

gctggagctc cgggggcggc ggggcccggg ggcccgggag gcgaacccgg caagggcggc 720

gcagcagcag cggcggcggc cgcggcagcg gcggcggcgg cagcggcagc ggcggcagct 780

ggaggcctgg ctgcggctgg gggccctgga caaggctggg ctcccggccc cggccccatc 840

acctccatcc cggattcgct tgggggtccc ttcgccagcg tcctatcttc gctccaaaga 900

cccaacggtg ccaaagccgc cttagtgaag agcagtatgt tctga 945

<210> 82

<211> 876

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 82

atgagttgcc aagcttttac ttcggctgat acctttatac ctctgaattc tgacgcctct 60

gcaactctgc ctctgataat gcatcacagt gctgccgagt gtctaccagt ctccaaccat 120

gccaccaatg tgatgtctac agcaacagga cttcattatt ctgttccttc ctgtcattat 180

ggaaaccagc catcaaccta tggagtgatg gcaggtagtt taaccccttg tctttataaa 240

tttcctgacc acaccttgag tcatggattt cctcctatac accagcctct tctggcagag 300

gaccccacag ctgctgattt caagcaggaa ctcaggcgga aaagtaaatt ggtggaagag 360

ccaatagaca tggattctcc agaaatcaga gaacttgaaa agtttgccaa tgaatttaaa 420

gtgagacgaa ttaaattagg atacacccag acaaatgttg gggaggccct ggcagctgtg 480

catggctctg aattcagtca aacaacaatc tgccgatttg aaaatctgca gctcagcttt 540

aaaaatgcat gcaaactgaa agcaatatta tccaaatggc tggaggaagc tgagcaagta 600

ggagctttgt acaatgaaaa agtgggagca aatgaaagga aaagaaaacg aagaacaact 660

ataagcattg ctgctaaaga tgctctggag agacactttg gagaacagaa taaaccttct 720

tctcaagaga tcatgaggat ggctgaagaa ctgaatctgg agaaagaagt agtaagagtt 780

tggttttgca accggaggca gagagaaaaa cgggtgaaaa caagtctgaa tcagagttta 840

ttttctattt ctaaggaaca tcttgagtgc agataa 876

<210> 83

<211> 909

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 83

atggagttcg gcctgctcag cgaggcagag gcccggagcc ctgccctgtc gctgtcagac 60

gctggcactc cgcaccccca gctcccagag cacggctgca agggccagga gcacagcgac 120

tcagaaaagg cctcggcttc gctgcccggc ggctccccag aggacggttc gctgaaaaag 180

aagcagcggc ggcagcgcac gcacttcacc agccagcagc tacaggagct agaggcgacc 240

ttccagagga accgctaccc cgacatgagc acgcgcgagg agatcgccgt gtggaccaac 300

ctcaccgagg cccgcgtgcg ggtgtggttc aagaaccggc gcgccaaatg gcggaagcgc 360

gagcgcagcc agcaggccga gctatgcaaa ggcagcttcg cggcgccgct cggggggctg 420

gtgccgccct acgaggaggt gtaccccggc tactcgtacg gcaactggcc gcccaaggct 480

cttgccccgc cgctcgccgc caagaccttt ccattcgcct tcaactcggt caacgtgggg 540

cctctggctt cgcagcccgt cttctcgcca cccagctcca tcgccgcctc catggtgccc 600

tccgccgcgg ctgccccggg caccgtgcca gggcctgggg ccctgcaggg cctgggcggg 660

ggcccccccg ggctggctcc ggccgccgtg tcctccgggg ccgtgtcctg cccttatgcc 720

tcggccgccg ccgccgccgc ggctgccgcc tcttccccct acgtctatcg ggacccgtgt 780

aactcgagcc tggccagcct gcggctcaaa gccaaacagc acgcctcctt cagctacccc 840

gctgtgcacg ggccgccccc ggcagccaac cttagtccgt gccagtacgc cgtggaaagg 900

cccgtatga 909

<210> 84

<211> 1362

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 84

atgcgtatcc ccgtagatgc cagcacgagc cgccgcttca cgccgccttc caccgcgctg 60

agcccaggca agatgagcga ggcgttgccg ctgggcgccc cggacgccgg cgctgccctg 120

gccggcaagc tgaggagcgg cgaccgcagc atggtggagg tgctggccga ccacccgggc 180

gagctggtgc gcaccgacag ccccaacttc ctctgctccg tgctgcctac gcactggcgc 240

tgcaacaaga ccctgcccat cgctttcaag gtggtggccc taggggatgt tccagatggc 300

actctggtca ctgtgatggc tggcaatgat gaaaactact cggctgagct gagaaatgct 360

accgcagcca tgaagaacca ggttgcaaga tttaatgacc tcaggtttgt cggtcgaagt 420

ggaagaggga aaagcttcac tctgaccatc actgtcttca caaacccacc gcaagtcgcc 480

acctaccaca gagccatcaa aatcacagtg gatgggcccc gagaacctcg aagacatcgg 540

cagaaactag atgatcagac caagcccggg agcttgtcct tttccgagcg gctcagtgaa 600

ctggagcagc tgcggcgcac agccatgagg gtcagcccac accacccagc ccccacgccc 660

aaccctcgtg cctccctgaa ccactccact gcctttaacc ctcagcctca gagtcagatg 720

caggatacaa ggcagatcca accatcccca ccgtggtcct acgatcagtc ctaccaatac 780

ctgggatcca ttgcctctcc ttctgtgcac ccagcaacgc ccatttcacc tggacgtgcc 840

agcggcatga caaccctctc tgcagaactt tccagtcgac tctcaacggc acccgacctg 900

acagcgttca gcgacccgcg ccagttcccc gcgctgccct ccatctccga cccccgcatg 960

cactatccag gcgccttcac ctactccccg acgccggtca cctcgggcat cggcatcggc 1020

atgtcggcca tgggctcggc cacgcgctac cacacctacc tgccgccgcc ctaccccggc 1080

tcgtcgcaag cgcagggagg cccgttccaa gccagctcgc cctcctacca cctgtactac 1140

ggcgcctcgg ccggctccta ccagttctcc atggtgggcg gcgagcgctc gccgccgcgc 1200

atcctgccgc cctgcaccaa cgcctccacc ggctccgcgc tgctcaaccc cagcctcccg 1260

aaccagagcg acgtggtgga ggccgagggc agccacagca actcccccac caacatggcg 1320

ccctccgcgc gcctggagga ggccgtgtgg aggccctact ga 1362

<210> 85

<211> 1704

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 85

atgcttcatt cgcctcacaa acaaccacag aaccacaagt gcggtgcaaa ctttctccag 60

gaggacagca agaagtctct ggtttttaaa tggttaatct ccgcaggtca ctaccagcca 120

ccgagaccaa cagagtcatt taaggctgca agcagtattt acaacagagg gtacaagttc 180

tatctgaaaa aaaaaggagg gactatggca tcaaacagcc tcttcagcac agtgacacca 240

tgtcagcaaa acttcttttg ggatccgagc accagccggc gcttcagccc cccctccagc 300

agcctgcagc ccggcaaaat gagcgacgtg agcccggtgg tggctgcgca acagcagcag 360

caacagcagc agcagcaaca gcagcagcag cagcagcaac agcagcagca gcagcaggag 420

gcggcggcgg cggctgcggc ggcggcggcg gctgcggcgg cggcagctgc agtgccccgg 480

ttgcggccgc cccacgacaa ccgcaccatg gtggagatca tcgccgacca cccggccgaa 540

ctcgtccgca ccgacagccc caacttcctg tgctcggtgc tgccctcgca ctggcgctgc 600

aacaagaccc tgcccgtggc cttcaaggtg gtagccctcg gagaggtacc agatgggact 660

gtggttactg tcatggcggg taacgatgaa aattattctg ctgagctccg gaatgcctct 720

gctgttatga aaaaccaagt agcaaggttc aacgatctga gatttgtggg ccggagtgga 780

cgaggcaaga gtttcacctt gaccataacc gtcttcacaa atcctcccca agtagctacc 840

tatcacagag caattaaagt tacagtagat ggacctcggg aacccagaag gcacagacag 900

aagcttgatg actctaaacc tagtttgttc tctgaccgcc tcagtgattt agggcgcatt 960

cctcatccca gtatgagagt aggtgtcccg cctcagaacc cacggccctc cctgaactct 1020

gcaccaagtc cttttaatcc acaaggacag agtcagatta cagaccccag gcaggcacag 1080

tcttccccgc cgtggtccta tgaccagtct tacccctcct acctgagcca gatgacgtcc 1140

ccgtccatcc actctaccac cccgctgtct tccacacggg gcactgggct tcctgccatc 1200

accgatgtgc ctaggcgcat ttcaggtgct tcagaactgg gccctttttc agaccccagg 1260

cagttcccaa gcatttcatc cctcactgag agccgcttct ccaacccacg aatgcactat 1320

ccagccacct ttacttacac cccgccagtc acctcaggca tgtccctcgg tatgtccgcc 1380

accactcact accacaccta cctgccacca ccctaccccg gctcttccca aagccagagt 1440

ggacccttcc agaccagcag cactccatat ctctactatg gcacttcgtc aggatcctat 1500

cagtttccca tggtgccggg gggagaccgg tctccttcca gaatgcttcc gccatgcacc 1560

accacctcga atggcagcac gctattaaat ccaaatttgc ctaaccagaa tgatggtgtt 1620

gacgctgatg gaagccacag cagttcccca actgttttga attctagtgg cagaatggat 1680

gaatctgttt ggcgaccata ttga 1704

<210> 86

<211> 1389

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 86

atgctgctgc tggcgagatg tctgctgcta gtcctcgtct cctcgctgct ggtatgctcg 60

ggactggcgt gcggaccggg cagggggttc gggaagagga ggcaccccaa aaagctgacc 120

cctttagcct acaagcagtt tatccccaat gtggccgaga agaccctagg cgccagcgga 180

aggtatgaag ggaagatctc cagaaactcc gagcgattta aggaactcac ccccaattac 240

aaccccgaca tcatatttaa ggatgaagaa aacaccggag cggacaggct gatgactcag 300

aggtgtaagg acaagttgaa cgctttggcc atctcggtga tgaaccagtg gccaggagtg 360

aaactgcggg tgaccgaggg ctgggacgaa gatggccacc actcagagga gtctctgcac 420

tacgagggcc gcgcagtgga catcaccacg tctgaccgcg accgcagcaa gtacggcatg 480

ctggcccgcc tggcggtgga ggccggcttc gactgggtgt actacgagtc caaggcacat 540

atccactgct cggtgaaagc agagaactcg gtggcggcca aatcgggagg ctgcttcccg 600

ggctcggcca cggtgcacct ggagcagggc ggcaccaagc tggtgaagga cctgagcccc 660

ggggaccgcg tgctggcggc ggacgaccag ggccggctgc tctacagcga cttcctcact 720

ttcctggacc gcgacgacgg cgccaagaag gtcttctacg tgatcgagac gcgggagccg 780

cgcgagcgcc tgctgctcac cgccgcgcac ctgctctttg tggcgccgca caacgactcg 840

gccaccgggg agcccgaggc gtcctcgggc tcggggccgc cttccggggg cgcactgggg 900

cctcgggcgc tgttcgccag ccgcgtgcgc ccgggccagc gcgtgtacgt ggtggccgag 960

cgtgacgggg accgccggct cctgcccgcc gctgtgcaca gcgtgaccct aagcgaggag 1020

gccgcgggcg cctacgcgcc gctcacggcc cagggcacca ttctcatcaa ccgggtgctg 1080

gcctcgtgct acgcggtcat cgaggagcac agctgggcgc accgggcctt cgcgcccttc 1140

cgcctggcgc acgcgctcct ggctgcactg gcgcccgcgc gcacggaccg cggcggggac 1200

agcggcggcg gggaccgcgg gggcggcggc ggcagagtag ccctaaccgc tccaggtgct 1260

gccgacgctc cgggtgcggg ggccaccgcg ggcatccact ggtactcgca gctgctctac 1320

caaataggca cctggctcct ggacagcgag gccctgcacc cgctgggcat ggcggtcaag 1380

tccagctga 1389

<210> 87

<211> 1530

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 87

atgaatctcc tggacccctt catgaagatg accgacgagc aggagaaggg cctgtccggc 60

gcccccagcc ccaccatgtc cgaggactcc gcgggctcgc cctgcccgtc gggctccggc 120

tcggacaccg agaacacgcg gccccaggag aacacgttcc ccaagggcga gcccgatctg 180

aagaaggaga gcgaggagga caagttcccc gtgtgcatcc gcgaggcggt cagccaggtg 240

ctcaaaggct acgactggac gctggtgccc atgccggtgc gcgtcaacgg ctccagcaag 300

aacaagccgc acgtcaagcg gcccatgaac gccttcatgg tgtgggcgca ggcggcgcgc 360

aggaagctcg cggaccagta cccgcacttg cacaacgccg agctcagcaa gacgctgggc 420

aagctctgga gacttctgaa cgagagcgag aagcggccct tcgtggagga ggcggagcgg 480

ctgcgcgtgc agcacaagaa ggaccacccg gattacaagt accagccgcg gcggaggaag 540

tcggtgaaga acgggcaggc ggaggcagag gaggccacgg agcagacgca catctccccc 600

aacgccatct tcaaggcgct gcaggccgac tcgccacact cctcctccgg catgagcgag 660

gtgcactccc ccggcgagca ctcggggcaa tcccagggcc caccgacccc acccaccacc 720

cccaaaaccg acgtgcagcc gggcaaggct gacctgaagc gagaggggcg ccccttgcca 780

gaggggggca gacagccccc tatcgacttc cgcgacgtgg acatcggcga gctgagcagc 840

gacgtcatct ccaacatcga gaccttcgat gtcaacgagt ttgaccagta cctgccgccc 900

aacggccacc cgggggtgcc ggccacgcac ggccaggtca cctacacggg cagctacggc 960

atcagcagca ccgcggccac cccggcgagc gcgggccacg tgtggatgtc caagcagcag 1020

gcgccgccgc cacccccgca gcagccccca caggccccgc cggccccgca ggcgcccccg 1080

cagccgcagg cggcgccccc acagcagccg gcggcacccc cgcagcagcc acaggcgcac 1140

acgctgacca cgctgagcag cgagccgggc cagtcccagc gaacgcacat caagacggag 1200

cagctgagcc ccagccacta cagcgagcag cagcagcact cgccccaaca gatcgcctac 1260

agccccttca acctcccaca ctacagcccc tcctacccgc ccatcacccg ctcacagtac 1320

gactacaccg accaccagaa ctccagctcc tactacagcc acgcggcagg ccagggcacc 1380

ggcctctact ccaccttcac ctacatgaac cccgctcagc gccccatgta cacccccatc 1440

gccgacacct ctggggtccc ttccatcccg cagacccaca gcccccagca ctgggaacaa 1500

cccgtctaca cacagctcac tcgaccttga 1530

<210> 88

<211> 1245

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 88

atgagcagcc cggatgcggg atacgccagt gacgaccaga gccagaccca gagcgcgctg 60

cccgcggtga tggccgggct gggcccctgc ccctgggccg agtcgctgag ccccatcggg 120

gacatgaagg tgaagggcga ggcgccggcg aacagcggag caccggccgg ggccgcgggc 180

cgagccaagg gcgagtcccg tatccggcgg ccgatgaacg ctttcatggt gtgggctaag 240

gacgagcgca agcggctggc gcagcagaat ccagacctgc acaacgccga gttgagcaag 300

atgctgggca agtcgtggaa ggcgctgacg ctggcggaga agcggccctt cgtggaggag 360

gcagagcggc tgcgcgtgca gcacatgcag gaccacccca actacaagta ccggccgcgg 420

cggcgcaagc aggtgaagcg gctgaagcgg gtggagggcg gcttcctgca cggcctggct 480

gagccgcagg cggccgcgct gggccccgag ggcggccgcg tggccatgga cggcctgggc 540

ctccagttcc ccgagcaggg cttccccgcc ggcccgccgc tgctgcctcc gcacatgggc 600

ggccactacc gcgactgcca gagtctgggc gcgcctccgc tcgacggcta cccgttgccc 660

acgcccgaca cgtccccgct ggacggcgtg gaccccgacc cggctttctt cgccgccccg 720

atgcccgggg actgcccggc ggccggcacc tacagctacg cgcaggtctc ggactacgct 780

ggccccccgg agcctcccgc cggtcccatg cacccccgac tcggcccaga gcccgcgggt 840

ccctcgattc cgggcctcct ggcgccaccc agcgcccttc acgtgtacta cggcgcgatg 900

ggctcgcccg gggcgggcgg cgggcgcggc ttccagatgc agccgcaaca ccagcaccag 960

caccagcacc agcaccaccc cccgggcccc ggacagccgt cgccccctcc ggaggcactg 1020

ccctgccggg acggcacgga ccccagtcag cccgccgagc tcctcgggga ggtggaccgc 1080

acggaatttg aacagtatct gcacttcgtg tgcaagcctg agatgggcct cccctaccag 1140

gggcatgact ccggtgtgaa tctccccgac agccacgggg ccatttcctc ggtggtgtcc 1200

gacgccagct ccgcggtata ttactgcaac tatcctgacg tgtga 1245

<210> 89

<211> 987

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 89

atgactggag tctttgacag tctagtggct gatatgcact cgacccagat cgccgcctcc 60

agcacgtacc accagcacca gcagcccccg agcggcggcg gcgccggccc gggtggcaac 120

agcagcagca gcagcagcct ccacaagccc caggagtcgc ccacccttcc ggtgtccacc 180

gccaccgaca gcagctacta caccaaccag cagcacccgg cgggcggcgg cggcggcggg 240

ggctcgccct acgcgcacat gggttcctac cagtaccaag ccagcggcct caacaacgtc 300

ccttactccg ccaagagcag ctatgacctg ggctacaccg ccgcctacac ctcctacgct 360

ccctatggaa ccagttcgtc cccagccaac aacgagcctg agaaggagga ccttgagcct 420

gaaattcgga tagtgaacgg gaagccaaag aaagtccgga aaccccgcac catctactcc 480

agtttccagc tggcggctct tcagcggcgt ttccaaaaga ctcaatactt ggccttgccg 540

gagcgagccg agctggcggc ctctctgggc ctcacccaga ctcaggtcaa aatctggttc 600

cagaaccgcc ggtccaagtt caagaagatg tggaaaagtg gtgagatccc ctcggagcag 660

caccctgggg ccagcgcttc tccaccttgt gcttcgccgc cagtctcagc gccggcctcc 720

tgggactttg gtgtgccgca gcggatggcg ggcggcggtg gtccgggcag tggcggcagc 780

ggcgccggca gctcgggctc cagcccgagc agcgcggcct cggcttttct gggcaactac 840

ccctggtacc accagacctc gggatccgcc tcacacctgc aggccacggc gccgctgctg 900

caccccactc agaccccgca gccgcatcac caccaccacc atcacggcgg cgggggcgcc 960

ccggtgagcg cggggacgat tttctaa 987

<210> 90

<211> 870

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 90

atgacaggag tgtttgacag aagggtcccc agcatccgat ccggcgactt ccaagctccg 60

ttccagacgt ccgcagctat gcaccatccg tctcaggaat cgccaacttt gcccgagtct 120

tcagctaccg attctgacta ctacagccct acggggggag ccccgcacgg ctactgctct 180

cctacctcgg cttcctatgg caaagctctc aacccctacc agtatcagta tcacggcgtg 240

aacggctccg ccgggagcta cccagccaaa gcttatgccg actatagcta cgctagctcc 300

taccaccagt acggcggcgc ctacaaccgc gtcccaagcg ccaccaacca gccagagaaa 360

gaagtgaccg agcccgaggt gagaatggtg aatggcaaac caaagaaagt tcgtaaaccc 420

aggactattt attccagctt tcagctggcc gcattacaga gaaggtttca gaagactcag 480

tacctcgcct tgccggaacg cgccgagctg gccgcctcgc tgggattgac acaaacacag 540

gtgaaaatct ggtttcagaa caaaagatcc aagatcaaga agatcatgaa aaacggggag 600

atgcccccgg agcacagtcc cagctccagc gacccaatgg cgtgtaactc gccgcagtct 660

ccagcggtgt gggagcccca gggctcgtcc cgctcgctca gccaccaccc tcatgcccac 720

cctccgacct ccaaccagtc cccagcgtcc agctacctgg agaactctgc atcctggtac 780

acaagtgcag ccagctcaat caattcccac ctgccgccgc cgggctcctt acagcacccg 840

ctggcgctgg cctccgggac actctattag 870

<210> 91

<211> 843

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 91

atgccagctg atataatgga gaaaaattcc tcgtccccgg tggctgctac cccagccagt 60

gtcaacacga caccggataa accaaagaca gcatctgagc acagaaagtc atcaaagcct 120

attatggaga aaagacgaag agcaagaata aatgaaagtc tgagccagct gaaaacactg 180

attttggatg ctctgaagaa agatagctcg cggcattcca agctggagaa ggcggacatt 240

ctggaaatga cagtgaagca cctccggaac ctgcagcggg cgcagatgac ggctgcgctg 300

agcacagacc caagtgtgct ggggaagtac cgagccggct tcagcgagtg catgaacgag 360

gtgacccgct tcctgtccac gtgcgagggc gttaataccg aggtgcgcac tcggctgctc 420

ggccacctgg ccaactgcat gacccagatc aatgccatga cctaccccgg gcagccgcac 480

cccgccttgc aggcgccgcc accgccccca ccgggacccg gcggccccca gcacgcgccg 540

ttcgcgccgc cgccgccact cgtgcccatc cccgggggcg cggcgccccc tcccggcggc 600

gccccctgca agctgggcag ccaggctgga gaggcggcta aggtgtttgg aggcttccag 660

gtggtaccgg ctcccgatgg ccagtttgct ttcctcattc ccaacggggc cttcgcgcac 720

agcggccctg tcatccccgt ctacaccagc aacagcggca cctccgtggg ccccaacgca 780

gtgtcacctt ccagcggccc ctcgcttacg gcggactcca tgtggaggcc gtggcggaac 840

tga 843

<210> 92

<211> 648

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 92

atgggcagcc cccgctccgc gctgagctgc ctgctgttgc acttgctggt cctctgcctc 60

caagcccagg taactgttca gtcctcacct aattttacac agcatgtgag ggagcagagc 120

ctggtgacgg atcagctcag ccgccgcctc atccggacct accaactcta cagccgcacc 180

agcgggaagc acgtgcaggt cctggccaac aagcgcatca acgccatggc agaggacggc 240

gaccccttcg caaagctcat cgtggagacg gacacctttg gaagcagagt tcgagtccga 300

ggagccgaga cgggcctcta catctgcatg aacaagaagg ggaagctgat cgccaagagc 360

aacggcaaag gcaaggactg cgtcttcacg gagattgtgc tggagaacaa ctacacagcg 420

ctgcagaatg ccaagtacga gggctggtac atggccttca cccgcaaggg ccggccccgc 480

aagggctcca agacgcggca gcaccagcgt gaggtccact tcatgaagcg gctgccccgg 540

ggccaccaca ccaccgagca gagcctgcgc ttcgagttcc tcaactaccc gcccttcacg 600

cgcagcctgc gcggcagcca gaggacttgg gcccccgagc cccgatag 648

<210> 93

<211> 975

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 93

atgaactgca tgaaaggccc gcttcacttg gagcaccgag cagcggggac caagctgtcg 60

gccgtctcct catcttcctg tcaccatccc cagccgttag ccatggcttc ggttctggct 120

cccggtcagc cccggtcgct ggactcctcc aagcacaggc tggaggtgca caccatctcc 180

gacacctcca gcccggaggc cgcagagaaa gataaaagcc agcaggggaa gaatgaggac 240

gtgggcgccg aggacccgtc taagaagaag cggcaaaggc ggcagcggac tcactttacc 300

agccagcagc tccaggagct ggaggccact ttccagagga accgctaccc ggacatgtcc 360

acacgcgaag aaatcgctgt gtggaccaac cttacggaag cccgagtccg ggtttggttc 420

aagaatcgtc gggccaaatg gagaaagagg gagcgcaacc agcaggccga gctatgcaag 480

aatggcttcg ggccgcagtt caatgggctc atgcagccct acgacgacat gtacccaggc 540

tattcctaca acaactgggc cgccaagggc cttacatccg cctccctatc caccaagagc 600

ttccccttct tcaactctat gaacgtcaac cccctgtcat cacagagcat gttttcccca 660

cccaactcta tctcgtccat gagcatgtcg tccagcatgg tgccctcagc agtgacaggc 720

gtcccgggct ccagtctcaa cagcctgaat aacttgaaca acctgagtag cccgtcgctg 780

aattccgcgg tgccgacgcc tgcctgtcct tacgcgccgc cgactcctcc gtatgtttat 840

agggacacgt gtaactcgag cctggccagc ctgagactga aagcaaagca gcactccagc 900

ttcggctacg ccagcgtgca gaacccggcc tccaacctga gtgcttgcca gtatgcagtg 960

gaccggcccg tgtga 975

<210> 94

<211> 987

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 94

atggccaccc aggtgatggg gcagtcttct ggaggaggca gtctcttcaa caacagtgcc 60

aacatgggca tggccttaac caacgacatg tacgacctgc acgagctctc gaaagctgaa 120

ctggcagccc ctcagctcat catgttagcc aacgtggccc tgacggggga ggcaagcggc 180

agctgctgcg attacctggt cggtgaagag aggcagatgg ccgaattgat gcccgtggga 240

gacaaccact tctcagaaag tgaaggagaa ggcctggaag agtcggctga cctcaaaggg 300

ctggaaaaca tggaactggg aagtttggag ctaagtgctg tagaacccca gcccgtattt 360

gaagcctcag ctgccccaga aatatacagc gccaataaag atcccgctcc agaaacaccc 420

gtggcggaag acaaatgcag gagttctaag gccaagccct tccggtgtaa gccttgccag 480

tacgaagccg aatctgaaga gcagtttgtg catcacatcc ggattcacag cgctaagaag 540

ttctttgtgg aggaaagtgc agagaaacag gccaaagcct gggagtcggg gtcgtctccg 600

gccgaagagg gcgagttctc caaaggcccc atccgctgtg accgctgtgg ctacaatacc 660

aaccggtatg accactacat ggcacacctg aagcaccacc tgcgagctgg cgagaacgag 720

cgcatctaca agtgcatcat ctgcacgtac acgacggtca gcgagtacca ctggaggaaa 780

cacctgagaa accatttccc caggaaagtc tacacctgca gcaagtgcaa ctacttctca 840

gacagaaaaa ataactacgt tcagcacgtg cgaactcaca caggagaacg cccgtataaa 900

tgtgaacttt gtccttactc aagctctcag aagactcatc taacgcgaca catgcggact 960

cattcagagt gtgatctagc tgggtga 987

<210> 95

<211> 1025

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 95

atgaccatgg aatctggagc cgagaaccag cagagtggag atgcagctgt aacagaagct 60

gaaaaccaac aaatgacagt tcaagcccag ccacagattg ccacattagc ccaggtatct 120

atgccagcag ctcatgcaac atcatctgct cccaccgtaa ctctagtaca gctgcccaat 180

gggcagacag ttcaagtcca tggagtcatt caggcggccc agccatcagt tattcagtct 240

ccacaagtcc aaacagttca gtcttcctgt aaggacttaa aaagactttt ctccggaaca 300

cagatttcaa ctattgcaga aagtgaagat tcacaggagt cagtggatag tgtaactgat 360

tcccaaaagc gaagggaaat tctttcaagg aggccttcct acaggaaaat tttgaatgac 420

ttatcttctg atgcaccagg agtgccaagg attgaagaag agaagtctga agaggagact 480

tcagcacctg ccatcaccac tgtaacggtg ccaactccaa tttaccaaac tagcagtgga 540

cagtatattg ccattaccca gggaggagca atacagctgg ctaacaatgg taccgatggg 600

gtacagggcc tgcaaacatt aaccatgacc aatgcagcag ccactcagcc gggtactacc 660

attctacagt atgcacagac cactgatgga cagcagatct tagtgcccag caaccaagtt 720

gttgttcaag ctgcctctgg agacgtacaa acataccaga ttcgcacagc acccactagc 780

actattgccc ctggagttgt tatggcatcc tccccagcac ttcctacaca gcctgctgaa 840

gaagcagcac gaaagagaga ggtccgtcta atgaagaaca gggaagcagc tcgagagtgt 900

cgtagaaaga agaaagaata tgtgaaatgt ttagaaaaca gagtggcagt gcttgaaaat 960

caaaacaaga cattgattga ggagctaaaa gcacttaagg acctttactg ccacaaatca 1020

gatta 1025

<210> 96

<211> 963

<212> ДНК

<213> Mus musculus

<400> 96

atggctgagg gcaaaggggc tcctctgagg ccttcagttg agaagagatg gaagctcatg 60

gaacccaagc agacccaggc agggatgttc aagaaaatga gccttgtgga ctctgacact 120

gctgcaggaa agggtagcca agatgaggcc tatactgaac tgagcctgcc aacagcaccg 180

aacaagcctc gactggacag gcctcgggcc tgcaaggcat acacagagca gaggcacaat 240

accttcacag agctatcatg tctccaggag aggccagggg acatccaggc ccagacgagg 300

aagctggaga acccagaagg ccagctcggc cctcagcagc tgccctcgag tttcctcaga 360

gcctcaggtg atggcacagt gtgttcagca tggccaggtg ccccccggag tgagcagaaa 420

agtgctttca gcaagccagc caaacgccca gcagagaaac ctaagcgctc tcccatgctt 480

ctggctggtg gaagtgcaga gggctcatgg gagctctcag gactcatcac cactgtggac 540

atcccatatt gggctcatct gtcaactttc aagttcatgg gtgatttctg gaaattgcac 600

acattgtcac agaacattct cctctgcaat gctttccagg gggctcccac accatggctg 660

gagcataccc aggtacaagc ccccacatcc tcagctcctt cctccacagc ctcccgggct 720

ctcttgccgc ccacactctc ctccttgggc ttgtctactc agaactggtg tgcgaagtgc 780

aacctagcct ttcgcctgac agctgacctg gtcttccaca tgcggtcaca tcacaaaagg 840

gaacacgtgg gccctgaccc acattctaag aaacgaagag aggaagttct cacttgcccc 900

gtttgccacg agtacttccg ggagcgccac catctgtcca ggcatatggc ttcacatagt 960

tag 963

<210> 97

<211> 1374

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 97

atgctgggag cggtgaagat ggaagggcac gagccgtccg actggagcag ctactatgca 60

gagcccgagg gctactcctc cgtgagcaac atgaacgccg gcctggggat gaacggcatg 120

aacacgtaca tgagcatgtc ggcggccgcc atgggcagcg gctcgggcaa catgagcgcg 180

ggctccatga acatgtcgtc gtacgtgggc gctggcatga gcccgtccct ggcggggatg 240

tcccccggcg cgggcgccat ggcgggcatg ggcggctcgg ccggggcggc cggcgtggcg 300

ggcatggggc cgcacttgag tcccagcctg agcccgctcg gggggcaggc ggccggggcc 360

atgggcggcc tggcccccta cgccaacatg aactccatga gccccatgta cgggcaggcg 420

ggcctgagcc gcgcccgcga ccccaagacc tacaggcgca gctacacgca cgcaaagccg 480

ccctactcgt acatctcgct catcaccatg gccatccagc agagccccaa caagatgctg 540

acgctgagcg agatctacca gtggatcatg gacctcttcc ccttctaccg gcagaaccag 600

cagcgctggc agaactccat ccgccactcg ctctccttca acgactgttt cctgaaggtg 660

ccccgctcgc ccgacaagcc cggcaagggc tccttctgga ccctgcaccc tgactcgggc 720

aacatgttcg agaacggctg ctacctgcgc cgccagaagc gcttcaagtg cgagaagcag 780

ctggcgctga aggaggccgc aggcgccgcc ggcagcggca agaaggcggc cgccggagcc 840

caggcctcac aggctcaact cggggaggcc gccgggccgg cctccgagac tccggcgggc 900

accgagtcgc ctcactcgag cgcctccccg tgccaggagc acaagcgagg gggcctggga 960

gagctgaagg ggacgccggc tgcggcgctg agccccccag agccggcgcc ctctcccggg 1020

cagcagcagc aggccgcggc ccacctgctg ggcccgcccc accacccggg cctgccgcct 1080

gaggcccacc tgaagccgga acaccactac gccttcaacc acccgttctc catcaacaac 1140

ctcatgtcct cggagcagca gcaccaccac agccaccacc accaccaacc ccacaaaatg 1200

gacctcaagg cctacgaaca ggtgatgcac taccccggct acggttcccc catgcctggc 1260

agcttggcca tgggcccggt cacgaacaaa acgggcctgg acgcctcgcc cctggccgca 1320

gatacctcct actaccaggg ggtgtactcc cggcccatta tgaactcctc ttaa 1374

<210> 98

<211> 1221

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 98

atggatggat ggagaaggat gcctcgctgg ggactgctgc tgctgctctg gggctcctgt 60

acctttggtc tcccgacaga caccaccacc tttaaacgga tcttcctcaa gagaatgccc 120

tcaatccgag aaagcctgaa ggaacgaggt gtggacatgg ccaggcttgg tcccgagtgg 180

agccaaccca tgaagaggct gacacttggc aacaccacct cctccgtgat cctcaccaac 240

tacatggaca cccagtacta tggcgagatt gggatcggga ccccacccca aaccttcaaa 300

gtcgtctttg acactggttc gtccaatgtt tgggtgccct cctccaagtg cagccgtctc 360

tacactgcct gtgtgtatca caagctcttc gatgcttcgg attcctccag ctacaagcac 420

aatggaacag aactcaccct ccgctattca acagggacag tcagtggctt tctcagccag 480

gacatcatca ccgtgggtgg aatcacggtg acacagatgt ttggagaggt cacggagatg 540

cccgccttac ccttcatgct ggccgagttt gatggggttg tgggcatggg cttcattgaa 600

caggccattg gcagggtcac ccctatcttc gacaacatca tctcccaagg ggtgctaaaa 660

gaggacgtct tctctttcta ctacaacaga gattccgaga attcccaatc gctgggagga 720

cagattgtgc tgggaggcag cgacccccag cattacgaag ggaatttcca ctatatcaac 780

ctcatcaaga ctggtgtctg gcagattcaa atgaaggggg tgtctgtggg gtcatccacc 840

ttgctctgtg aagacggctg cctggcattg gtagacaccg gtgcatccta catctcaggt 900

tctaccagct ccatagagaa gctcatggag gccttgggag ccaagaagag gctgtttgat 960

tatgtcgtga agtgtaacga gggccctaca ctccccgaca tctctttcca cctgggaggc 1020

aaagaataca cgctcaccag cgcggactat gtatttcagg aatcctacag tagtaaaaag 1080

ctgtgcacac tggccatcca cgccatggat atcccgccac ccactggacc cacctgggcc 1140

ctgggggcca ccttcatccg aaagttctac acagagtttg atcggcgtaa caaccgcatt 1200

ggcttcgcct tggcccgctg a 1221

<210> 99

<211> 654

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 99

atgagtctgg taggtggttt tccccaccac ccggtggtgc accacgaggg ctacccgttt 60

gccgccgccg ccgccgcagc tgccgccgcc gccgccagcc gctgcagcca tgaggagaac 120

ccctacttcc atggctggct catcggccac cccgagatgt cgccccccga ctacagcatg 180

gccctgtcct acagccccga gtatgccagc ggcgccgccg gcctggacca ctcccattac 240

gggggggtgc cgccgggcgc cgggcccccg ggcctggggg ggccgcgccc ggtgaagcgc 300

cgaggcaccg ccaaccgcaa ggagcggcgc aggactcaga gcatcaacag cgccttcgcc 360

gaactgcgcg agtgcatccc caacgtaccc gccgacacca aactctccaa aatcaagacc 420

ctgcgcctgg ccaccagcta catcgcctac ctcatggacc tgctggccaa ggacgaccag 480

aatggcgagg cggaggcctt caaggcagag atcaagaaga ccgacgtgaa agaggagaag 540

aggaagaagg agctgaacga aatcttgaaa agcacagtga gcagcaacga caagaaaacc 600

aaaggccgga cgggctggcc gcagcacgtc tgggccctgg agctcaagca gtga 654

<210> 100

<211> 942

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 100

atgacttctt gtcacattgc tgaagaacat atacaaaagg ttgctatctt tggaggaacc 60

catgggaatg agctaaccgg agtatttctg gttaagcatt ggctagagaa tggcgctgag 120

attcagagaa cagggctgga ggtaaaacca tttattacta accccagagc agtgaagaag 180

tgtaccagat atattgactg tgacctgaat cgcatttttg accttgaaaa tcttggcaaa 240

aaaatgtcag aagatttgcc atatgaagtg agaagggctc aagaaataaa tcatttattt 300

ggtccaaaag acagtgaaga ttcctatgac attatttttg accttcacaa caccacctct 360

aacatggggt gcactcttat tcttgaggat tccaggaata actttttaat tcagatgttt 420

cattacatta agacttctct ggctccacta ccctgctacg tttatctgat tgagcatcct 480

tccctcaaat atgcgaccac tcgttccata gccaagtatc ctgtgggtat agaagttggt 540

cctcagcctc aaggggttct gagagctgat atcttggatc aaatgagaaa aatgattaaa 600

catgctcttg attttataca tcatttcaat gaaggaaaag aatttcctcc ctgcgccatt 660

gaggtctata aaattataga gaaagttgat tacccccggg atgaaaatgg agaaattgct 720

gctatcatcc atcctaatct gcaggatcaa gactggaaac cactgcatcc tggggatccc 780

atgtttttaa ctcttgatgg gaagacgatc ccactgggcg gagactgtac cgtgtacccc 840

gtgtttgtga atgaggccgc atattacgaa aagaaagaag cttttgcaaa gacaactaaa 900

ctaacgctca atgcaaaaag tattcgctgc tgtttacatt ag 942

<210> 101

<211> 1590

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 101

atgacaagct ccaggctttg gttttcgctg ctgctggcgg cagcgttcgc aggacgggcg 60

acggccctct ggccctggcc tcagaacttc caaacctccg accagcgcta cgtcctttac 120

ccgaacaact ttcaattcca gtacgatgtc agctcggccg cgcagcccgg ctgctcagtc 180

ctcgacgagg ccttccagcg ctatcgtgac ctgcttttcg gttccgggtc ttggccccgt 240

ccttacctca cagggaaacg gcatacactg gagaagaatg tgttggttgt ctctgtagtc 300

acacctggat gtaaccagct tcctactttg gagtcagtgg agaattatac cctgaccata 360

aatgatgacc agtgtttact cctctctgag actgtctggg gagctctccg aggtctggag 420

acttttagcc agcttgtttg gaaatctgct gagggcacat tctttatcaa caagactgag 480

attgaggact ttccccgctt tcctcaccgg ggcttgctgt tggatacatc tcgccattac 540

ctgccactct ctagcatcct ggacactctg gatgtcatgg cgtacaataa attgaacgtg 600

ttccactggc atctggtaga tgatccttcc ttcccatatg agagcttcac ttttccagag 660

ctcatgagaa aggggtccta caaccctgtc acccacatct acacagcaca ggatgtgaag 720

gaggtcattg aatacgcacg gctccggggt atccgtgtgc ttgcagagtt tgacactcct 780

ggccacactt tgtcctgggg accaggtatc cctggattac tgactccttg ctactctggg 840

tctgagccct ctggcacctt tggaccagtg aatcccagtc tcaataatac ctatgagttc 900

atgagcacat tcttcttaga agtcagctct gtcttcccag atttttatct tcatcttgga 960

ggagatgagg ttgatttcac ctgctggaag tccaacccag agatccagga ctttatgagg 1020

aagaaaggct tcggtgagga cttcaagcag ctggagtcct tctacatcca gacgctgctg 1080

gacatcgtct cttcttatgg caagggctat gtggtgtggc aggaggtgtt tgataataaa 1140

gtaaagattc agccagacac aatcatacag gtgtggcgag aggatattcc agtgaactat 1200

atgaaggagc tggaactggt caccaaggcc ggcttccggg cccttctctc tgccccctgg 1260

tacctgaacc gtatatccta tggccctgac tggaaggatt tctacgtagt ggaacccctg 1320

gcatttgaag gtacccctga gcagaaggct ctggtgattg gtggagaggc ttgtatgtgg 1380

ggagaatatg tggacaacac aaacctggtc cccaggctct ggcccagagc aggggctgtt 1440

gccgaaaggc tgtggagcaa caagttgaca tctgacctga catttgccta tgaacgtttg 1500

tcacacttcc gctgtgagtt gctgaggcga ggtgtccagg cccaacccct caatgtaggc 1560

ttctgtgagc aggagtttga acagacctga 1590

<210> 102

<211> 657

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 102

atggcgaccc gcagccctgg cgtcgtgatt agtgatgatg aaccaggtta tgaccttgat 60

ttattttgca tacctaatca ttatgctgag gatttggaaa gggtgtttat tcctcatgga 120

ctaattatgg acaggactga acgtcttgct cgagatgtga tgaaggagat gggaggccat 180

cacattgtag ccctctgtgt gctcaagggg ggctataaat tctttgctga cctgctggat 240

tacatcaaag cactgaatag aaatagtgat agatccattc ctatgactgt agattttatc 300

agactgaaga gctattgtaa tgaccagtca acaggggaca taaaagtaat tggtggagat 360

gatctctcaa ctttaactgg aaagaatgtc ttgattgtgg aagatataat tgacactggc 420

aaaacaatgc agactttgct ttccttggtc aggcagtata atccaaagat ggtcaaggtc 480

gcaagcttgc tggtgaaaag gaccccacga agtgttggat ataagccaga ctttgttgga 540

tttgaaattc cagacaagtt tgttgtagga tatgcccttg actataatga atacttcagg 600

gatttgaatc atgtttgtgt cattagtgaa actggaaaag caaaatacaa agcctaa 657

<210> 103

<211> 1956

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 103

atggcccggg ggtcggcggt tgcctgggcg gcgctcgggc cgttgttgtg gggctgcgcg 60

ctggggctgc agggcgggat gctgtacccc caggagagcc cgtcgcggga gtgcaaggag 120

ctggacggcc tctggagctt ccgcgccgac ttctctgaca accgacgccg gggcttcgag 180

gagcagtggt accggcggcc gctgtgggag tcaggcccca ccgtggacat gccagttccc 240

tccagcttca atgacatcag ccaggactgg cgtctgcggc attttgtcgg ctgggtgtgg 300

tacgaacggg aggtgatcct gccggagcga tggacccagg acctgcgcac aagagtggtg 360

ctgaggattg gcagtgccca ttcctatgcc atcgtgtggg tgaatggggt cgacacgcta 420

gagcatgagg ggggctacct ccccttcgag gccgacatca gcaacctggt ccaggtgggg 480

cccctgccct cccggctccg aatcactatc gccatcaaca acacactcac ccccaccacc 540

ctgccaccag ggaccatcca atacctgact gacacctcca agtatcccaa gggttacttt 600

gtccagaaca catattttga ctttttcaac tacgctggac tgcagcggtc tgtacttctg 660

tacacgacac ccaccaccta catcgatgac atcaccgtca ccaccagcgt ggagcaagac 720

agtgggctgg tgaattacca gatctctgtc aagggcagta acctgttcaa gttggaagtg 780

cgtcttttgg atgcagaaaa caaagtcgtg gcgaatggga ctgggaccca gggccaactt 840

aaggtgccag gtgtcagcct ctggtggccg tacctgatgc acgaacgccc tgcctatctg 900

tattcattgg aggtgcagct gactgcacag acgtcactgg ggcctgtgtc tgacttctac 960

acactccctg tggggatccg cactgtggct gtcaccaaga gccagttcct catcaatggg 1020

aaacctttct atttccacgg tgtcaacaag catgaggatg cggacatccg agggaagggc 1080

ttcgactggc cgctgctggt gaaggacttc aacctgcttc gctggcttgg tgccaacgct 1140

ttccgtacca gccactaccc ctatgcagag gaagtgatgc agatgtgtga ccgctatggg 1200

attgtggtca tcgatgagtg tcccggcgtg ggcctggcgc tgccgcagtt cttcaacaac 1260

gtttctctgc atcaccacat gcaggtgatg gaagaagtgg tgcgtaggga caagaaccac 1320

cccgcggtcg tgatgtggtc tgtggccaac gagcctgcgt cccacctaga atctgctggc 1380

tactacttga agatggtgat cgctcacacc aaatccttgg acccctcccg gcctgtgacc 1440

tttgtgagca actctaacta tgcagcagac aagggggctc cgtatgtgga tgtgatctgt 1500

ttgaacagct actactcttg gtatcacgac tacgggcacc tggagttgat tcagctgcag 1560

ctggccaccc agtttgagaa ctggtataag aagtatcaga agcccattat tcagagcgag 1620

tatggagcag aaacgattgc agggtttcac caggatccac ctctgatgtt cactgaagag 1680

taccagaaaa gtctgctaga gcagtaccat ctgggtctgg atcaaaaacg cagaaaatac 1740

gtggttggag agctcatttg gaattttgcc gatttcatga ctgaacagtc accgacgaga 1800

gtgctgggga ataaaaaggg gatcttcact cggcagagac aaccaaaaag tgcagcgttc 1860

cttttgcgag agagatactg gaagattgcc aatgaaacca ggtatcccca ctcagtagcc 1920

aagtcacaat gtttggaaaa cagcccgttt acttga 1956

<210> 104

<211> 1671

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 104

atggagctgt gcgggctggg gctgccccgg ccgcccatgc tgctggcgct gctgttggcg 60

acactgctgg cggcgatgtt ggcgctgctg actcaggtgg cgctggtggt gcaggtggcg 120

gaggcggctc gggccccgag cgtctcggcc aagccggggc cggcgctgtg gcccctgccg 180

ctctcggtga agatgacccc gaacctgctg catctcgccc cggagaactt ctacatcagc 240

cacagcccca attccacggc gggcccctcc tgcaccctgc tggaggaagc gtttcgacga 300

tatcatggct atatttttgg tttctacaag tggcatcatg aacctgctga attccaggct 360

aaaacccagg ttcagcaact tcttgtctca atcacccttc agtcagagtg tgatgctttc 420

cccaacatat cttcagatga gtcttatact ttacttgtga aagaaccagt ggctgtcctt 480

aaggccaaca gagtttgggg agcattacga ggtttagaga cctttagcca gttagtttat 540

caagattctt atggaacttt caccatcaat gaatccacca ttattgattc tccaaggttt 600

tctcacagag gaattttgat tgatacatcc agacattatc tgccagttaa gattattctt 660

aaaactctgg atgccatggc ttttaataag tttaatgttc ttcactggca catagttgat 720

gaccagtctt tcccatatca gagcatcact tttcctgagt taagcaataa aggaagctat 780

tctttgtctc atgtttatac accaaatgat gtccgtatgg tgattgaata tgccagatta 840

cgaggaattc gagtcctgcc agaatttgat acccctgggc atacactatc ttggggaaaa 900

ggtcagaaag acctcctgac tccatgttac agtagacaaa acaagttgga ctcttttgga 960

cctataaacc ctactctgaa tacaacatac agcttcctta ctacattttt caaagaaatt 1020

agtgaggtgt ttccagatca attcattcat ttgggaggag atgaagtgga atttaaatgt 1080

tgggaatcaa atccaaaaat tcaagatttc atgaggcaaa aaggctttgg cacagatttt 1140

aagaaactag aatctttcta cattcaaaag gttttggata ttattgcaac cataaacaag 1200

ggatccattg tctggcagga ggtttttgat gataaagcaa agcttgcgcc gggcacaata 1260

gttgaagtat ggaaagacag cgcatatcct gaggaactca gtagagtcac agcatctggc 1320

ttccctgtaa tcctttctgc tccttggtac ttagatttga ttagctatgg acaagattgg 1380

aggaaatact ataaagtgga acctcttgat tttggcggta ctcagaaaca gaaacaactt 1440

ttcattggtg gagaagcttg tctatgggga gaatatgtgg atgcaactaa cctcactcca 1500

agattatggc ctcgggcaag tgctgttggt gagagactct ggagttccaa agatgtcaga 1560

gatatggatg acgcctatga cagactgaca aggcaccgct gcaggatggt cgaacgtgga 1620

atagctgcac aacctcttta tgctggatat tgtaaccatg agaacatgta a 1671

<210> 105

<211> 1290

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 105

atgcagctga ggaacccaga actacatctg ggctgcgcgc ttgcgcttcg cttcctggcc 60

ctcgtttcct gggacatccc tggggctaga gcactggaca atggattggc aaggacgcct 120

accatgggct ggctgcactg ggagcgcttc atgtgcaacc ttgactgcca ggaagagcca 180

gattcctgca tcagtgagaa gctcttcatg gagatggcag agctcatggt ctcagaaggc 240

tggaaggatg caggttatga gtacctctgc attgatgact gttggatggc tccccaaaga 300

gattcagaag gcagacttca ggcagaccct cagcgctttc ctcatgggat tcgccagcta 360

gctaattatg ttcacagcaa aggactgaag ctagggattt atgcagatgt tggaaataaa 420

acctgзgcag gcttccctgg gagttttgga tactacgaca ttgatgccca gacctttgct 480

gactggggag tagatctgct aaaatttgat ggttgttact gtgacagttt ggaaaatttg 540

gcagatggtt ataagcacat gtccttggcc ctgaatagga ctggcagaag cattgtgtac 600

tcctgtgagt ggcctcttta tatgtggccc tttcaaaagc ccaattatac agaaatccga 660

cagtactgca atcactggcg aaattttgct gacattgatg attcctggaa aagtataaag 720

agtatcttgg actggacatc ttttaaccag gagagaattg ttgatgttgc tggaccaggg 780

ggttggaatg acccagatat gttagtgatt ggcaactttg gcctcagctg gaatcagcaa 840

gtaactcaga tggccctctg ggctatcatg gctgctcctt tattcatgtc taatgacctc 900

cgacacatca gccctcaagc caaagctctc cttcaggata aggacgtaat tgccatcaat 960

caggacccct tgggcaagca agggtaccag cttagacagg gagacaactt tgaagtgtgg 1020

gaacgacctc tctcaggctt agcctgggct gtagctatga taaaccggca ggagattggt 1080

ggacctcgct cttataccat cgcagttgct tccctgggta aaggagtggc ctgtaatcct 1140

gcctgcttca tcacacagct cctccctgtg aaaaggaagc tagggttcta tgaatggact 1200

tcaaggttaa gaagtcacat aaatcccaca ggcactgttt tgcttcagct agaaaataca 1260

atgcagatgt cattaaaaga cttactttaa 1290

<210> 106

<211> 1611

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 106

atggagtttt caagtccttc cagagaggaa tgtcccaagc ctttgagtag ggtaagcatc 60

atggctggca gcctcacagg attgcttcta cttcaggcag tgtcgtgggc atcaggtgcc 120

cgcccctgca tccctaaaag cttcggctac agctcggtgg tgtgtgtctg caatgccaca 180

tactgtgact cctttgaccc cccgaccttt cctgcccttg gtaccttcag ccgctatgag 240

agtacacgca gtgggcgacg gatggagctg agtatggggc ccatccaggc taatcacacg 300

ggcacaggcc tgctactgac cctgcagcca gaacagaagt tccagaaagt gaagggattt 360

ggaggggcca tgacagatgc tgctgctctc aacatccttg ccctgtcacc ccctgcccaa 420

aatttgctac ttaaatcgta cttctctgaa gaaggaatcg gatataacat catccgggta 480

cccatggcca gctgtgactt ctccatccgc acctacacct atgcagacac ccctgatgat 540

ttccagttgc acaacttcag cctcccagag gaagatacca agctcaagat acccctgatt 600

caccgagccc tgcagttggc ccagcgtccc gtttcactcc ttgccagccc ctggacatca 660

cccacttggc tcaagaccaa tggagcggtg aatgggaagg ggtcactcaa gggacagccc 720

ggagacatct accaccagac ctgggccaga tactttgtga agttcctgga tgcctatgct 780

gagcacaagt tacagttctg ggcagtgaca gctgaaaatg agccttctgc tgggctgttg 840

agtggatacc ccttccagtg cctgggcttc acccctgaac atcagcgaga cttcattgcc 900

cgtgacctag gtcctaccct cgccaacagt actcaccaca atgtccgcct actcatgctg 960

gatgaccaac gcttgctgct gccccactgg gcaaaggtgg tactgacaga cccagaagca 1020

gctaaatatg ttcatggcat tgctgtacat tggtacctgg actttctggc tccagccaaa 1080

gccaccctag gggagacaca ccgcctgttc cccaacacca tgctctttgc ctcagaggcc 1140

tgtgtgggct ccaagttctg ggagcagagt gtgcggctag gctcctggga tcgagggatg 1200

cagtacagcc acagcatcat cacgaacctc ctgtaccatg tggtcggctg gaccgactgg 1260

aaccttgccc tgaaccccga aggaggaccc aattgggtgc gtaactttgt cgacagtccc 1320

atcattgtag acatcaccaa ggacacgttt tacaaacagc ccatgttcta ccaccttggc 1380

cacttcagca agttcattcc tgagggctcc cagagagtgg ggctggttgc cagtcagaag 1440

aacgacctgg acgcagtggc actgatgcat cccgatggct ctgctgttgt ggtcgtgcta 1500

aaccgctcct ctaaggatgt gcctcttacc atcaaggatc ctgctgtggg cttcctggag 1560

acaatctcac ctggctactc cattcacacc tacctgtggc gtcgccagtg a 1611

<210> 107

<211> 642

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 107

atgccccgga gggcggagaa ctgggacgag gccgaggtag gcgcggagga ggcaggcgtc 60

gaagagtacg gccctgaaga agacggcggg gaggagtcgg gcgccgagga gtccggcccg 120

gaagagtccg gcccggagga actgggcgcc gaggaggaga tggaggccgg gcggccgcgg 180

cccgtgctgc gctcggtgaa ctcgcgcgag ccctcccagg tcatcttctg caatcgcagt 240

ccgcgcgtcg tgctgcccgt atggctcaac ttcgacggcg agccgcagcc ctacccaacg 300

ctgccgcctg gcacgggccg ccgcatccac agctaccgag gtcacctttg gctcttcaga 360

gatgcaggga cacacgatgg gcttctggtt aaccaaactg aattatttgt gccatctctc 420

aatgttgacg gacagcctat ttttgccaat atcacactgc cagtgtatac tctgaaagag 480

cgatgcctcc aggttgtccg gagcctagtc aagcctgaga attacaggag actggacatc 540

gtcaggtcgc tctacgaaga tctggaagac cacccaaatg tgcagaaaga cctggagcgg 600

ctgacacagg agcgcattgc acatcaacgg atgggagatt ga 642

<210> 108

<211> 444

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 108

atggtgcatc tgactcctga ggagaagtct gccgttactg ccctgtgggg caaggtgaac 60

gtggatgaag ttggtggtga ggccctgggc aggctgctgg tggtctaccc ttggacccag 120

aggttctttg agtcctttgg ggatctgtcc actcctgatg ctgttatggg caaccctaag 180

gtgaaggctc atggcaagaa agtgctcggt gcctttagtg atggcctggc tcacctggac 240

aacctcaagg gcacctttgc cacactgagt gagctgcact gtgacaagct gcacgtggat 300

cctgagaact tcaggctcct gggcaacgtg ctggtctgtg tgctggccca tcactttggc 360

aaagaattca ccccaccagt gcaggctgcc tatcagaaag tggtggctgg tgtggctaat 420

gccctggccc acaagtatca ctaa 444

<210> 109

<211> 951

<212> ДНК

<213> Homo sapiens

<400> 109

atgatagtgt ttgtcaggtt caactccagc catggtttcc cagtggaggt cgattctgac 60

accagcatct tccagctcaa ggaggtggtt gctaagcgac agggggttcc ggctgaccag 120

ttgcgtgtga ttttcgcagg gaaggagctg aggaatgact ggactgtgca ggaatttttc 180

tttaaatgtg gagcacaccc cacctctgac aaggaaacat cagtagcttt gcacctgatc 240

gcaacaaata gtcggaacat cacttgcatt acgtgcacag acgtcaggag ccccgtcctg 300

gttttccagt gcaactcccg ccacgtgatt tgcttagact gtttccactt atactgtgtg 360

acaagactca atgatcggca gtttgttcac gaccctcaac ttggctactc cctgccttgt 420

gtggctggct gtcccaactc cttgattaaa gagctccatc acttcaggat tctgggagaa 480

gagcagtaca accggtacca gcagtatggt gcagaggagt gtgtcctgca gatggggggc 540

gtgttatgcc cccgccctgg ctgtggagcg gggctgctgc cggagcctga ccagaggaaa 600

gtcacctgcg aagggggcaa tggcctgggc tgtgggtttg ccttctgccg ggaatgtaaa 660

gaagcgtacc atgaagggga gtgcagtgcc gtatttgaag cctcaggaac aactactcag 720

gcctacagag tcgatgaaag agccgccgag caggctcgtt gggaagcagc ctccaaagaa 780

accatcaaga aaaccaccaa gccctgtccc cgctgccatg taccagtgga aaaaaatgga 840

ggctgcatgc acatgaagtg tccgcagccc cagtgcaggc tcgagtggtg ctggaactgt 900

ggctgcgagt ggaaccgcgt ctgcatgggg gaccactggt tcgacgtgta g 951

<---

1. Способ получения дифференцирующихся клеток путем клеточного перепрограммирования, включающий этапы, на которых:

- выбирают неплюрипотентные или соматические клетки;

- выращивают клетки в ростовой среде, стимулирующей рост, при этом выбранные клетки растут с оптимальной скоростью роста;

- сверхэкспрессируют или вводят нуклеиновую(-ые) кислоту(-ы) или белок (белки), соответствующие транскрипционным факторам или детерминантам клеточного развития, обычно присутствующим в желаемых клетках;

- культивируют клетки в клеточной культуральной среде, где клетки растут со скоростью, которая меньше оптимальной скорости, и в присутствии средства (средств), стимулирующего(-их) дифференцировку.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выбранные транскрипционные факторы или детерминанты клеточного развития включают Numb, Numblike, Oct4, Sox2, Nanog и/или Notch.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные клетки и/или их потомство инкубируют в дифференцирующей среде, включающей одно или более средств, выбранных из группы, включающей:

а. ретиноевую кислоту, нейротрофин 3 (NT3), фактор роста нервов (NGF), фактор роста, полученный из клеточной линии глии (GDNF) и/или интерферон-γ (IFN-γ), гексаметилен-бис-акриламид, диметилсульфоксид (DMSO), фетальную бычью сыворотку (FBS), нормальную бычью сыворотку (NBS), кондиционированную среду для кардиомиоцитов, фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), LIF, тромбопоэтин, колониестимулирующий фактор, M-CSF (CSF-1), GMCSF, IL-7, цитокин, стимулирующий CD4+ Т-клеточную дифференцировку, основной фактор роста фибропластов;

b. ретиноевую кислоту, нейротрофин 3 (NT3), фактор роста нервов (NGF), фактор роста, полученный из клеточной линии глии (GDNF) и/или интерферон-γ (IFN-γ);

c. гексаметилен-бис-акриламид или диметилсульфоксид;

d. фетальную бычью сыворотку (FBS);

e. нормальную бычью сыворотку (NBS), диметилсульфоксид, ретиноевую кислоту и/или кондиционированную среду для кардиомиоцитов;

f. фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), тромбопоэтин и колониестимулирующие факторы, соответствующие типу целевой клетки;

g. LIF, нейротрофин 3 (NT3) и/или фактор роста нервов (NGF);

h. колониестимулирующий фактор, факультативно M-CSF (CSF-1), GM-CSF, IL-7 или цитокин, стимулирующий CD4+ Т-клеточную дифференцировку; и

i. ретиноевую кислоту, основной фактор роста фибропластов.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выбранную клетку модифицируют для экспрессии:

a. теломеразы, изменяющей срок жизни клетки;

b. продукта гена, отсутствующего у человека;

с. последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей белок, выбранный из аспартоацилазы (ASP), HRPT, HTT, NPC1, PARK2, гексозаминидазы А (HEXA), гексозаминидазы В (HEXB), альфа-галактозидазы (GLA), кислой бета-глюкозидазы (GBA), супрессора опухоли фон Гиппеля-Линдау (VHL), бета-глобина (HBB).

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что выбранную клетку или ее потомство модифицируют для экспрессии:

а. существенных последовательностей нуклеиновых кислот;

b. синтетических олигонуклеотидов, малой РНК (миРНК), антисмысловой РНК, короткой шпилечной РНК (shRNA), малой интерферирующей РНК (siRNA);

c. последовательности нуклеиновой кислоты или белка, замедляющей(его) инфицирование вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ);

d. последовательности нуклеиновой кислоты или белка, воспроизводящей(его) указанные клетки и/или их потомство, менее способные поддерживать репликацию вируса;

e. последовательности нуклеиновой кислоты или белка, воспроизводящей(его) указанные клетки и/или их потомство, менее способные поддерживать транскрипцию вируса;

f. синтетического олигонуклеотида, направленного против корецептора ВИЧ;

g. РНК ловушки;

h. psi-последовательности ВИЧ;

i. последовательности нуклеиновой кислоты или белка, воспроизводящей(его) указанные клетки и/или их потомство, сопротивляющиеся заболеванию.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что белок или нуклеиновая кислота присутствует для скрининга в отношении его способности индуцировать фенотические изменения или дифференцировки выбранных клеток в целевые популяции клеток.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют электропорацию, липосомы, нанокапсулы, нанохранилища, неинтегрирующийся вектор и/или

другие подходы, недопускающие ретровирусное/лентивирусное объединение, или любую случайную замену генома указанной клетки.

8. Способ по одному из пп. 1-7, отличающийся тем, что указанную клетку и/или ее потомство культивируют в трехмерном или двухмерном каркасе, или указанные клетки или их потомства используют совместно с технологией струйной печати, трехмерной печати или тканевой инженерии.

9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что его осуществляют in vivo.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к панелям дискретных объемов микроокружений клеточных культур, обладающих различными свойствами, к способу и набору для изготовления таких панелей и к комбинаторному способу тестирования влияния композиций гидрогеля на характер клеточного роста.

Клетка // 2717984
Настоящая группа изобретений относится к иммунологии и клеточной биологии. Предложены цитотоксическая Т-клетка и клетка естественного киллера (NK-клетка), содержащие по два химерных антигенных рецептора (CAR), один из которых содержит эндодомен CD3ξ, активирующий клетку в присутствии первого антигена, а второй - домен тирозиновой фосфатазы CD148 или CD45, ингибирующий клетку в отсутствии второго антигена.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к индукционным средам для получения иммунологически поляризованной популяции мезенхимальных стволовых клеток из нестимулированной популяции мезенхимальных стволовых клеток, иммунологически поляризованным популяциям мезенхимальных стволовых клеток и лечению заболеваний у субъекта.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложена новая клеточная линия рака молочной железы человека BrCCh4e, обладающая стабильными культуральными и морфологическими характеристиками.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено антитело, способное специфически связываться с эритропоэтином человека.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу идентификации функционального М1 и М2 фенотипа макрофагов человека, генерированных in vitro из моноцитов крови.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложен способ индукции иммунологической толерантности на трансплантационные антигены у млекопитающих.

Изобретение относится к медицине, а именно к области биотехнологии. Способ включает нарезание суставного хряща свиньи фрагментами размером не более 0,5 см, измельчают и выделяют частицы размером от 100 мкм до 250 мкм.

Изобретение относится к консервированию культуры клеток. Для замораживания клеток-предшественников периферической крови (КППК) производят выделение свежезаготовленного концентрата ядерных клеток (КЯК), смешивание КЯК с криоконсервантом Гекмодиолит (ГД) в полимерном криопакете (ПК) в равных пропорциях, его герметизацию, маркировку, укладку ПК в металлический пенал-холдер, КППК в присутствии ГД от плюс 4°С до минус 80°С по трехступенчатой программе в электрических холодильниках с установленной температурой изотермической холодовой адаптации клеток (TA), причем на первом этапе замораживания холдер с КППК помещают на 10 мин в электроморозильник с TA плюс 4±1°С, на втором этапе холдер переносят на 10 мин в электроморозильник с TA минус 7±1°С, на третьем этапе холдер переносят в электроморозильник с TA минус 28±1°С, выдерживают в этих условиях в течение 25 мин, после чего переносят в хранилище-морозильник с температурой минус 80±2°С для полного замораживания клеточной взвеси и длительной консервации.

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, клеточным биотехнологиям, регенеративной медицине. Выполняют отделение эпителиальной части зачатка зуба от мезенхимы с сохранением фрагмента мезенхимальной ткани.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ лечения млекопитающего, страдающего заболеванием, связанным с экспрессией CD19, включающий введение млекопитающему эффективного количества популяции иммунных эффекторных клеток, экспрессирующих молекулу CAR, которая связывается с CD19, (CAR19-экспрессирующие клетки), в комбинации с ингибитором тирозинкиназы Брутона (BTK), где молекула CAR содержит связывающий CD19 домен, трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, где внутриклеточный сигнальный домен содержит костимулирующий домен и первичный сигнальный домен. Изобретение позволяет эффективно лечить заболевания, связанные с экспрессией CD19. 6 н. и 80 з.п. ф-лы, 61 ил., 13 табл., 16 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к получению дифференцирующихся клеток путем клеточного перепрограммирования. Способ включает выращивание неплюрипотентных или соматических клеток в ростовой среде, стимулирующей рост, при этом выбранные клетки растут с оптимальной скоростью роста. Затем сверхэкспрессируют или вводят нуклеиновую кислоту или белок, соответствующие транскрипционным факторам или детерминантам клеточного развития, обычно присутствующим в желаемых клетках и культивируют клетки в клеточной культуральной среде, где клетки растут со скоростью, которая меньше оптимальной скорости, и в присутствии средства, стимулирующего дифференцировку. 1 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 ил., 27 пр.

Наверх