Питательные композиции и детские смеси, содержащие смесь олигосахаридов и необязательно bifidobacterium lactis для профилактики, лечения или снижения степени тяжести диареи, не связанной с ротавирусом

Авторы патента:

БРЮССОВ, Гаральд (CH)

БЕРГЕР, Бернард (CH)

A23L33/21 - Пищевые продукты и безалкогольные напитки, не отнесенные к подклассам A23B-A23J; их приготовление или обработка, например варка, изменение питательных свойств, физическая обработка (формование или механическая обработка, полностью не относящиеся к этому подклассу, A23P); консервирование пищевых продуктов вообще

Владельцы патента RU 2748279:

СОСЬЕТЕ ДЕ ПРОДЮИ НЕСТЛЕ С.А. (CH)

Настоящее изобретение относится к питательной композиции для младенцев. Предложено применение питательной композиции, содержащей по меньшей мере один N-ацетилированный олигосахарид в количестве от 0,001 до 1 мас.%, и по меньшей мере один галактоолигосахарид в количестве от 1 до 10 мас.%, и по меньшей мере один сиалилированный олигосахарид в количестве от 0,005 до 1 мас.% для стимулирования или индуцирования кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, и для профилактики, и/или лечения, и/или снижения степени тяжести, и/или риска, и/или распространенности диареи, не связанной с ротавирусом, у младенцев или детей младшего возраста в возрасте от 0 до 36 месяцев, необязательно от 0 до 12 месяцев или от 0 до 6 месяцев. Причем указанное стимулирование или индуцирование кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, характеризуется тем, что включает увеличение популяции бифидобактерий и подавление популяции Streptococcus. 13 з.п. ф-лы, 6 ил., 2 табл., 4 пр.

Область применения изобретения

Настоящее изобретение относится к питательным композициям для младенцев и детей младшего возраста и их воздействию на здоровье младенцев. В частности, оно относится к детской смеси, содержащей специфическую смесь пробиотических олигосахаридов для профилактики, лечения или снижения степени тяжести или риска диареи и, в частности, диареи, не связанной с ротавирусом. В дополнительном аспекте композиция также содержит пробиотик Bifidobacterium animalis вида lactis.

Предпосылки создания изобретения

Когда матери не могут кормить младенцев грудью, детская смесь обеспечивает подходящую альтернативу естественному грудному вскармливанию человеческим грудным молоком. Питательные композиции для младенцев и детей младшего возраста часто продают в виде порошков для растворения в воде или, в некоторых случаях, в виде готовых к употреблению или концентрированных жидких композиций. Эти композиции предназначены для удовлетворения большинства или всех потребностей в питании младенцев или детей младшего возраста.

Однако известно, что человеческое грудное молоко представляет собой неоспоримый «золотой стандарт» в сфере питания младенцев. Производители детских смесей не единожды пытались обеспечить питательный эффект для здоровья, близкий к или аналогичный полезному воздействию человеческого грудного молока.

Материнское молоко рекомендовано всем младенцам. Однако в некоторых случаях грудное вскармливание является недостаточным или неэффективным по медицинским причинам или мать отказывается от грудного вскармливания. Для этих ситуаций были разработаны детские смеси. Также разработаны обогатители для витаминизации материнского молока или детской смеси определенными ингредиентами.

Однако во многих случаях исследования показали, что детская смесь не обеспечивает идентичного человеческому грудному молоку воздействия на организм. Например, у младенцев, находящихся на вскармливании детской смесью, и младенцев, находящихся на вскармливании человеческим грудным молоком (HBM), может наблюдаться различная кишечная микробиота.

Раннее детство, особенно первые недели, 3 месяца, 6 месяцев или 12 месяцев жизни, являются критически важными для установления сбалансированной кишечной микробиоты.

Известно, что модуляция кишечной микробиоты в младенчестве в перспективе может оказать большое влияние на будущее состояние здоровья организма. Например, кишечная флора может оказывать влияние на развитие ожирения в дальнейшей жизни, на развитие крепкой иммунной системы в дальнейшей жизни или на нормальный темп роста.

Аналогично здоровая кишечная флора является показателем здоровья младенца, а измененная кишечная микробиота может быть показателем (и/или причиной) аномальных состояний здоровья, таких как диарея, недостаточное всасывание питательных веществ, колики, нарушение сна и нарушение роста и развития.

Известно, что способ родоразрешения может повлиять на исходную кишечную микробиоту младенцев: было доказано, что младенцы, рожденные посредством кесарева сечения, имеют другую кишечную микробиоту по сравнению с младенцами, рожденными посредством вагинальных родов.

Известно, что на активацию конкретной микробиоты, помимо прочих ингредиентов, особенно могут повлиять неперевариваемые углеводы (пребиотики). Например, было доказано, что определенные галактоолигосахариды (GOS) и/или определенные фруктоолигосахариды (FOS) могут активировать рост и распространение бифидобактерий в кишечнике, особенно у младенцев.

Однако кишечная микробиота и ее развитие в течение развития младенца представляют собой тонкий баланс между наличием и уровнем распространения (количеством) многих популяций кишечных бактерий. Некоторые кишечные бактерии относят к категории «в целом полезных», а другие — «в целом вредных» (или патогенных) из-за их воздействия на общее состояние здоровья младенца.

Определенные виды «в целом полезных» бактерий, такие как бифидобактерии, могут быть представлены у младенцев, находящихся на вскармливании традиционной детской смесью, в недостаточной степени по сравнению с таковыми у младенцев, находящихся на грудном вскармливании. Аналогично некоторые популяции бактерий считаются патогенными, и их уровень распространения в кишечной микробиоте должен оставаться низким.

Действительно, младенец, вскармливаемый детскими смесями, может не получать положительного эффекта от естественной, хорошо сбалансированной кишечной флоры (кишечной микробиоты) младенцев, вскармливаемых исключительно или преимущественно грудным молоком. Такая естественная микробиота, наблюдаемая у младенцев, находящихся на грудном вскармливании, действительно является хорошо контролируемой на протяжении времени (развитие со временем) и очень сложной. Многие таксоны микроорганизмов сосуществуют в очень сложной микросреде кишечника, и все они находятся в последовательно формируемых пропорциях. При описании микробиоты младенцев или детей младшего возраста следует учитывать количественные и качественные параметры. Кроме того, дополнительная сложность заключается в том, что кишечная микробиота изменяется со временем.

Здоровая кишечная флора является показателем здоровья младенца, а измененная кишечная микробиота может быть показателем (и/или причиной) аномальных состояний здоровья, таких как диарея, недостаточное всасывание питательных веществ, колики, нарушение сна и/или нарушение роста и развития.

Диарея, также называемая поносом, — это состояние, при котором по меньшей мере трижды в сутки происходит дефекация неоформленным или жидким стулом. Диарея зачастую длится несколько дней и может приводить к обезвоживанию из-за потери жидкости. Признаки обезвоживания часто начинаются с потери нормальной растяжимости кожи и изменений личности. С усилением тяжести состояния они могут прогрессировать к снижению мочевыделения, бледности кожи, частому сердцебиению, заторможенности реакции. Диарея также характеризуется дисбиозом общей кишечной микробиоты, который предшествует проявлению (-ям) диареи и продолжается после него (них). В Африке к югу от Сахары и в южной Азии диарея является главной причиной детской смертности, входя в четыре важнейших фактора потери потенциальных лет жизни. Долю смертности среди детей до 5 лет по причине диареи во всем мире оценивают приблизительно в 15%. Самая распространенная причина заключается в инфекции кишечника, вызываемой вирусами, бактериями или паразитами; то есть в состоянии, известном как гастроэнтерит. Ротавирус, вызывающий или сопутствующий диарее, является одной из главных причин диареи. У детей в развивающихся странах основным возбудителем диареи после ротавируса является кишечная палочка (Escherichia coli). Выжившие также подвержены риску. Частые случаи диареи в возрасте до 2 лет связаны с последующим уменьшением среднего темпа роста на 3,6 см, частым сердцебиением после нагрузки, снижением IQ на 10 баллов и примерно годовой задержкой начала обучения в школе. Таким образом, важно сокращать случаи диареи, а также улучшать восстановление и выздоровление после них.

Такой тип кишечных инфекций, как правило, имеет свойство разрешаться самопроизвольно, но неспецифическая терапия может приносить облегчение некоторым пациентам, а специфическая терапия может сократить длительность заболевания и остановить фекальные выбросы из организма. В лечении пациентов с диареей и обезвоживанием основными клиническими рекомендациями являются инфузионная терапия, в том числе электролитами, упорядочение диеты (а восстановление питания важно для возмещения дефицита питательных веществ), неспецифическая терапия средствами против диареи (для ослабления симптомов) и специфическая терапия противомикробными агентами (как правило, только в случае дизентерии).

Однако такие существующие решения не вполне подходят для младенцев и детей младшего возраста из-за их раннего возраста и слабости, в особенности применение противодиарейных средств не рекомендовано для детей младшего возраста до 2 лет.

Антибиотики также не подходят для младенцев и детей младшего возраста в связи с их возрастом, а также с тем, что E.Coli устойчива ко многим антибиотикам (Jiang ZD, et al. Prevalence of enteric pathogens among international travelers with diarrhea acquired in Kenya (Mombasa), India (Goa), or Jamaica (Montego Bay). J. Infect. Dis. 2002; 185 (4): 497–502).

Поэтому были разработаны альтернативные методы терапии.

Против диареи, вызванной E.Coli, была исследована фаговая терапия (Brüssow H. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16000704). В российских аптеках продаются смеси фагов против многих бактериальных инфекций, включая диарею, вызванную E.Coli, но их эффективность не была задокументирована в подробных научных отчетах. В пробных клинических исследованиях с участием детей, инфицированных большей частью энтеротоксигенной E.Coli (ETEC), ни подобные Т4 фаги, ни коммерческая смесь колифагов из России не оказывали никакого влияния на количественные критерии диареи. Пик выведения ETEC с калом был кратковременным, с низким титром, и лишь половина изолятов E.Coli из кала была чувствительна к фагу.

В частности, проводят исследования применения пробиотиков. Например, штамм ST11 Lactobacillus paracasei улучшает исход не ротавирусной диареи у детей в Бангладеш, но не оказывает действия на ротавирусную диарею (A. Sarker, Pediatrics 2005). Пробиотики не представляют собой наилучшего решения для лечения или профилактики диареи в полной мере, так как они могут лишь увеличивать определенные таксоны микробиоты. Фактически пробиотики считаются препаратами на основе жизнеспособных микроорганизмов, которые укрепляют здоровье индивида путем сохранения естественной микрофлоры в кишечнике. Предполагают, что они прикрепляются к слизистой оболочке кишечника, колонизируют кишечный тракт и таким образом предотвращают прикрепление к нему вредных микроорганизмов. Важнейшее условие их действия заключается в том, что они должны достичь слизистой оболочки кишечника в надлежащей жизнеспособной форме и не должны разрушиться в верхнем отделе желудочно-кишечного тракта, в частности, под влиянием низкого рН, преобладающего в желудке. Еще одна сложность заключается в том, что кишечная микробиота очень разнообразна и сложна, и бактерии вступают в различные взаимодействия между собой.

Были исследованы также другие ингредиенты, такие как неперевариваемые углеводы (пребиотики). Олигосахариды человеческого грудного молока (HMO), как, в частности, сообщалось, сокращали длительность ротавирусной диареи у свиней, которых кормили такой смесью (Li et al ISME J 2014 and a study from University of Illinois of 2015).

Также были исследованы возможные защитные эффекты сиалиллактозы против диареи. В работе A. Weiss и T. Hennet описывалась «Роль сиалиллактозы молока в бактериальной колонизации кишечника» (Adv Nutr. 2012 May; 3(3): 483S–488S; Published online 2012 May 4. doi: 10.3945/an.111.001651).

В WO200440032639A1 описана комбинация фруктоолигосахаридов (FOS) / олигофруктозы (FOS) и специфических пробиотиков и сиалиллактозы, которую используют для уничтожения патогенных микроорганизмов в желудочно-кишечном тракте пациентов.

Коровье молозиво также было описано как природное средство лечения диареи и других желудочно-кишечных заболеваний.

В обзорной статье «European Journal of Clinical Nutrition (2003) 57, 1351–1369. doi:10.1038/sj.ejcn.1601704» приводят общие представления о роли и действии сиаловой кислоты на питание человека.

В WO2012160080A1, Berrocal et al, описана смесь олигосахаридов и некоторые из ее эффектов без их привязки к каким-либо благоприятным эффектам, например, в отношении диареи и, в частности, диареи, не связанной с ротавирусом.

В публикации Nutrients 2011, 3, 228-244; doi:10.3390/nu3020228, D. Bergner et al., сиалиллактозу связывали с дипальмитоилфосфатидилэтаноламином (PE) посредством восстановительного аминирования, и полученный продукт (SLPE) очищали с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (HPLC) и тестировали на предмет активности против связанной с ротавирусом диареи у поросят.

Некоторые из этих субстанций могут играть роль растворимых рецепторов-ловушек в кишечнике, защищающих новорожденного ребенка от возбудителей заболеваний кишечника (Newburg et al, Human milk glycans protect infants against enteric pathogens." Annual Review of Nutrition 2005;25:37–58), и они также могут напрямую взаимодействовать с эпителиальными клетками кишечника, вызывая изменения, которые могут препятствовать микробиальным взаимодействиям организма-хозяина (Bode et al, 2012).

Несмотря на множество предпринятых попыток, по-прежнему существует потребность в профилактике и/или снижении степени тяжести или длительности диареи, особенно у младенцев и детей младшего возраста.

Существует особая потребность в определении соединений, естественным образом присутствующих в традиционных пищевых ингредиентах (например, в коровьем молоке), и объединении их в смесь, способную обеспечивать конкретные полезные для здоровья эффекты против диареи и, в частности, диареи, не связанной с ротавирусом.

Большинство из этих исследований предлагают решения, которые не нацелены на лечение или профилактику состояний не ротавирусной диареи и всех сопутствующих симптомов. Они могут действовать на микробиоту только путем модулирования определенных таксонов микробиоты, например приводить к увеличению числа бифидобактерий или к уменьшению числа клостридий.

Однако в настоящее время не существует решения для лечения или профилактики не ротавирусной диареи путем приведения общей кишечной микробиоты (т.е. совокупной/целой/всей/полной микробиоты) ближе к норме. Никакие существующие решения, по-видимому, также не принимают в расчет функцию кишечной микробиоты.

Следовательно, существует потребность в снижении риска диареи и/или не ротавирусной диареи у младенцев или детей младшего возраста, и/или в улучшении излечения путем сокращения длительности диареи (и не ротавирусной диареи), и/или ослаблении симптомов и последствий диареи (и не ротавирусной диареи), в частности, воздействуя на дисбиоз общей кишечной микробиоты, возникающий до, во время и/или после проявлений диареи (или не ротавирусной диареи) у указанных младенцев или детей младшего возраста.

Существует потребность в компенсации аномальной совокупной кишечной микробиоты, наблюдаемой у младенцев или детей младшего возраста в случае диареи или не ротавирусной диареи. Существует потребность в восстановлении такой совокупной кишечной микробиоты в отношении как ее состава, так и функции.

Существует потребность в формировании оптимального баланса в совокупной кишечной микробиоте младенцев, в частности путем угнетения или подавления роста патогенных бактерий, в течение первых недель жизни, когда устанавливается такой баланс.

Существует потребность в питательных композициях для младенцев или детей младшего возраста, которые обеспечивают их общей кишечной микробиотой и метаболическим профилем, более близким к получаемым в нормальных ситуациях (т.е. в здоровом состоянии без диареи), и/или для младенцев, находящихся на грудном вскармливании.

Существует потребность в обеспечении указанных младенцев или детей младшего возраста наилучшим питанием, которое способствует развитию общей кишечной микробиоты, приближенной к таковой в отсутствие не ротавирусной диареи и/или приближенной к таковой у младенцев, находящихся на грудном вскармливании, причем указанное развитие является кратковременным (т.е. в период введения питания) и/или долговременным (т.е. после периода введения питания).

Существует потребность в питательных композициях для младенцев или детей младшего возраста, которые обеспечивают состав микробиоты, не допускающий развития диареи или не ротавирусной диареи и/или способствующий более быстрому выздоровлению после диареи/не ротавирусной диареи.

Существует потребность в обеспечении у этих младенцев или детей младшего возраста таких полезных для здоровья эффектов способом, который не вызывает побочных эффектов, и/или который можно легко предоставлять, и который приемлем для родителей или медицинских работников.

Существует потребность в стимулировании и/или индуцировании у младенцев, вскармливаемых детской смесью, с течением времени микробиоты, которая развивается подобно микробиоте младенцев, находящихся на грудном вскармливании, и таким образом, положительно влияет на случаи диареи.

Существует также потребность в предоставлении младенцам, вскармливаемым детской смесью, наилучшего питания, способствующего развитию микробиоты, похожей на микробиоту младенцев, находящихся на грудном вскармливании, в краткосрочной перспективе в период введения питания и/или в долгосрочной перспективе после периода введения питания.

Существует потребность в компенсации субоптимальной микробиоты, наблюдающейся у младенцев, находящихся на грудном вскармливании. Существует потребность в восстановлении баланса такой микробиоты.

Существует потребность в индуцировании и/или стимулировании у младенцев, вскармливаемых детской смесью, развития определенных семейств, родов, видов или штаммов бактерий в кишечнике, чтобы получить микробиоту, которая похожа на микробиоту младенцев, находящихся на грудном вскармливании, и которая является наилучшим природным средством профилактики или лечения диареи, в частности диареи, не связанной с ротавирусом.

Существует необходимость угнетать развитие и рост патогенных бактерий или вредных бактерий в кишечнике младенцев и детей младшего возраста, одновременно также предпочтительно способствуя развитию здоровых полезных бактерий.

Существует потребность в избирательном воздействии или уменьшении роста патогенных бактерий в кишечнике младенцев и детей младшего возраста при стимуляции или по меньшей мере без подавления роста полезных кишечных бактерий.

Существует потребность в формировании такого оптимального баланса путем хорошо переносимых, мягко воздействующих средств, не имеющих или практически не имеющих побочных эффектов.

Изложение сущности изобретения

Изобретение относится к питательной композиции для младенцев и детей младшего возраста, такой как детская смесь или смесь для прикармливаемых детей, предпочтительно детская смесь. Композиция содержит определенную смесь олигосахаридов, то есть содержит по меньшей мере один N-ацетилированный олигосахарид, и/или по меньшей мере один галактоолигосахарид, и/или по меньшей мере один сиалилированный олигосахарид для профилактики или лечения диареи, в частности диареи, не связанной с ротавирусом. Композиция также может содержать пробиотик Bifidobacterium animalis вида lactis. Возраст младенцев или детей младшего возраста может составлять от 0 до 36 месяцев, предпочтительно от 0 до 12 месяцев, более предпочтительно от 0 до 6 месяцев. Композиция настоящего изобретения лечит или предупреждает, или снижает риск, и/или степень тяжести, и/или частоту диареи, не связанной с ротавирусом.

Краткое описание графических материалов

Фиг. 1: доля стула различной консистенции в разных группах (группа «T»: исследуемая группа, получающая композицию настоящего изобретения, «B»: группа на грудном вскармливании, группа «С»: контрольная группа, получающая обычное питание без учета настоящего изобретения).

Фиг. 2: среднеизмеренная дистанция по Unifrac между группами T и C, получавшими разные смеси, и группой B на грудном вскармливании. Группа T: с пробиотиком B. lactis; Группа C: контроль без пробиотика B. lactis. Чем ближе дистанция к нулю, тем ближе к группе с грудным вскармливанием B.

Фиг. 3: Коробчатые диаграммы анализов альфа-разнообразия по трем временным точкам для трех групп вскармливания. P-значение: *, < 0,05; **, < 0,01; ***, < 0,001 (группа T: с пробиотиком B. lactis; группа C: контроль без пробиотика B. lactis; группа B: грудное вскармливание)

Фиг. 4: количество бактериальных эквивалентов, измеренное методом количественной ПЦР в фекалиях младенцев, получавших указанную смесь (C = контроль; T = исследуемая смесь с пробиотиком B. lactis) или получавших грудное вскармливание (группа B) в начале исследования (< 2 нед.) и в возрасте шести недель (6 нед.) и двенадцати недель (12 нед). Результаты количественной ПЦР представлены в виде средних значений + станд. ош. среднего для количества бактериальных клеток на г фекалий. Пунктирная линия — предел обнаружения. Планки погрешностей — стандартное отклонение.

Фиг. 5: доля младенцев в указанных ниже трех группах вскармливания, которые имели указанный на оси абсцисс цвет стула, в возрасте < 2 нед. (исходное состояние) и 12 нед. (правая панель). (группа T: с пробиотиком B. lactis; группа C: контроль без пробиотика B. lactis; группа B: грудное вскармливание)

Фиг. 6: количество бифидобактерий (log КОЕ бифидобактерий на г фекалий) у младенцев на 3-й, 10-й, 28-й и 84-й дни в каждой исследуемой группе (исследуемая смесь / вагинальные роды; исследуемая смесь / кесарево сечение; контрольная смесь / вагинальные роды; контрольная смесь / кесарево сечение).

Описание изобретения

Определения

В настоящем документе следующие термины имеют приведенные ниже определения.

Термин «младенец» означает ребенка в возрасте до 12 месяцев.

Выражение «ребенок младшего возраста» означает ребенка в возрасте от одного до трех лет (также называют ребенком, начинающим ходить).

«Младенец или ребенок младшего возраста, рожденный посредством кесарева сечения» означает, что ребенок был рожден посредством кесарева сечения. Это означает, что младенец не был рожден посредством вагинальных родов.

«Недоношенный» или «преждевременно родившийся» означает младенца или ребенка младшего возраста, который родился раньше срока. По существу этот термин относится к младенцу, рожденному до конца 37-й недели беременности.

Выражение «питательная композиция» означает композицию, которой питается субъект. Эта питательная композиция обычно предназначена для энтерального, перорального, парентерального или внутривенного применения и обычно содержит источник липидов или жиров и источник белка. Предпочтительно питательная композиция предназначена для перорального применения.

Выражение «гипоаллергенная питательная композиция» означает питательную композицию, которая с малой вероятностью может вызывать аллергические реакции.

Выражение «искусственная композиция» означает смесь, полученную с помощью химических и/или биологических средств, которая может быть химически идентична смеси природного происхождения, присутствующей в молоке млекопитающих.

Выражение «детская смесь» означает продукт питания, специально предназначенный для употребления в пищу младенцами в течение первых четырех–шести месяцев жизни, удовлетворяющий потребности в питании этой категории лиц (статья 1.2 Директивы Европейской комиссии 91/321/EEC от 14 мая 1991 г. о детских смесях и смесях для прикармливаемых детей).

Выражение «начальная детская смесь» означает продукт питания, специально предназначенный для употребления в пищу младенцами в течение первых четырех месяцев жизни.

Выражение «смесь для прикармливаемых детей» означает продукт питания, специально предназначенный для употребления в пищу младенцами старше четырех месяцев и составляющий основной жидкий компонент в рационе питания этой категории лиц, который предполагает постепенно увеличиваемое разнообразие.

Выражение «детское питание» означает продукт питания, специально предназначенный для употребления в пищу младенцами в течение первых лет жизни.

Выражение «обогатитель» относится к жидким или твердым питательным композициям, которые подходят для смешивания с грудным молоком или детской смесью.

Термин «период отлучения от груди» означает период, в течение которого в рационе питания младенца материнское молоко замещают другой пищей.

Под «материнским молоком» (также «человеческое грудное молоко», HBM) следует понимать грудное молоко или молозиво матери.

В настоящем документе термин «олигофруктоза» относится к олигомерам фруктозы. Олигофруктоза может быть длинноцепочечной или короткоцепочечной, в зависимости от степени полимеризации олигофруктозы (числа мономеров). Предпочтительно олигофруктоза настоящего изобретения представляет собой короткоцепочечную олигофруктозу, наиболее предпочтительно она имеет степень полимеризации от 2 до 10, например степень полимеризации от 2 до 8.

В настоящем документе термин «sn2-пальмитат» относится к пальмитиновой кислоте в положении sn2 триглицерида, с которым она связана.

Термин «Триглицерид с высоким содержанием sn2-пальмитата» относится к триглицериду (ТГ), содержащему более 30% пальмитиновых кислот в положении sn2. Например, в продаже доступен ингредиент с высоким содержанием sn2-пальмитата от компании Lipid Nutrition, который называется Betapol^TM B-55. Это смесь триглицеридов, полученная из растительного масла, в которой по меньшей мере 54% пальмитиновой кислоты находятся в положении sn2 молекулы глицерина.

Термин «Альфа-лактальбумин» относится к высококачественному легкоперевариваемому сывороточному белку, который составляет 20–25% от общего количества белка человеческого грудного молока (HBM) и является основным белком, присутствующим в HBM. Структура альфа-лактальбумина состоит из 123 аминокислот и 4 дисульфидных мостиков, а молекулярная масса белка составляет 14,2 килодальтона. Благодаря высокому содержанию незаменимых аминокислот, особенно триптофана, альфа-лактальбумин идеально подходит для детских смесей с пониженным содержанием белка.

Термин «пребиотик» означает неперевариваемые углеводы, которые благоприятно влияют на организм-хозяин, избирательно стимулируя рост и/или активность полезных для здоровья бактерий, например бифидобактерий в толстом кишечнике человека (Gibson GR, Roberfroid MB. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics. J Nutr. 1995;125:1401-12).

Термин «пробиотик» означает препараты клеток микроорганизмов или компонентов клеток микроорганизмов, которые оказывают благоприятное воздействие на здоровье или самочувствие организма-хозяина. (Salminen S, Ouwehand A. Benno Y. et al. «Probiotics: how should they be defined» Trends Food Sci. Technol. 1999:10 107–10). Клетки микроорганизмов, по существу, представляют собой бактерии или дрожжи.

Под термином «КОЕ» следует понимать колониеобразующую единицу.

Термин «диарея, не связанная с ротавирусом» (также в равной степени используемый с терминами «диарея, не относящаяся к ротавирусной» или «диарея, не вызванная ротавирусом») означает диарею и/или очень мягкий/полужидкий/жидкий стул, не вызванный/не связанный/не относящийся к инфекции субъекта ротавирусом (семейство реовирусы (Reoviridae), подсемейство Sedoreovirinae, род ротавирусы (Rotavirus)). Диарея, не связанная с ротавирусом, часто ассоциируется с гастроэнтеритом, не связанным с ротавирусом, и настоящее изобретение может распространяться на гастроэнтерит, не связанный с ротавирусом.

Термины «младенцы или дети младшего возраста с исключительно грудным вскармливанием» / «находящиеся исключительно на грудном вскармливании» в целом означает младенцев, у которых подавляющее большинство питательных веществ и/или энергии поступает из человеческого грудного молока («подавляющее большинство» может составлять по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 99%).

Термин «младенцы / дети младшего возраста, вскармливаемые преимущественно детской смесью» имеет общий смысл и относится к младенцам или детям младшего возраста, у которых источниками питательных веществ и/или энергии преимущественно являются искусственная детская смесь, смеси для прикармливаемых детей или молочные смеси для детей от 1 до 3 лет. Термин «преимущественно» означает по меньшей мере 50% этих питательных веществ и/или энергии или по меньшей мере 75%.

Все процентные содержания представляют собой мас.%, если не указано иное.

Ниже представлено более подробное описание настоящего изобретения. Следует отметить, что различные аспекты, признаки, примеры и варианты осуществления, описанные в настоящей заявке, могут быть совместимыми и/или комбинированными друг с другом.

Дополнительно в контексте настоящего изобретения термины «содержащий» или «содержит» не исключают других возможных элементов. Композиция настоящего изобретения, включая многие варианты осуществления, описанные в настоящем документе, может содержать, состоять из или, по существу, состоять из существенных элементов и ограничений настоящего изобретения, описанных в настоящем документе, а также любых дополнительных или необязательных ингредиентов, компонентов или ограничений, описанных в настоящем документе или иным образом, в зависимости от потребностей.

Подробное описание изобретения

Как правило, детская смесь в готовой к употреблению жидкой форме (например, растворенная из порошка) обеспечивает 60–70 ккал/100 мл. Детская смесь, как правило, содержит на 100 ккал около: 1,8–4,5 г белка; около 3,3–6,0 г жиров (липидов); около 300–1200 мг линолевой кислоты; около 9–14 г углеводов, выбранных из группы, состоящей из лактозы, сахарозы, глюкозы, глюкозного сиропа, крахмала, мальтодекстринов и мальтозы и их комбинаций; и незаменимые витамины и минеральные вещества. Лактоза может быть преобладающим углеводом в детской смеси. Например, жидкая детская смесь может содержать около 67 ккал/100 мл. В некоторых вариантах осуществления детская смесь может содержать около 1,8–3,3 г белка на 100 ккал. Детская смесь может быть представлена в форме порошка, который можно растворять для получения готовой к употреблению жидкости путем добавления количества воды, которое приводит к получению, например, жидкости, с показателем около 67 ккал/100 мл.

Детская смесь также может содержать нуклеотиды, выбранные из цитидин 5’-монофосфата (ЦМФ), уридин 5’-монофосфата (УМФ), аденозин 5’-монофосфата (АМФ), гуанозин 5’-монофосфата (ГМФ) и инозин 5’-монофосфата (ИМФ) и их смесей. Детская смесь также может содержать лютеин, зеаксантин, фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, сиалиллактозу и/или фукозиллактозу. В детскую смесь могут быть включены длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты, такие как докозагексаеновая кислота (DHA) и арахидоновая кислота (АА). Детская смесь также может включать свободные аминокислоты. Детская смесь также может включать другие ингредиенты хорошо известные в данной области.

В одном варианте осуществления детская смесь настоящего изобретения содержит около 5–6 г на 100 ккал жиров (триглицеридов), с по меньшей мере около 7,5 мас.% этих жиров, например около 7,5–12,0%, состоящих из пальмитиновой кислоты в положении sn2 триглицерида. В некоторых вариантах осуществления около 7,8–11,8%, около 8,0–11,5 мас.%, около 8,5–11,0% или около 9,0–10,0 мас.% жиров представляют собой пальмитиновую кислоту в положении sn2 триглицерида.

В некоторых вариантах осуществления пальмитиновая кислота составляет от около 15 до около 25%, например от около 15 до около 20 мас.%, от общего содержания жирных кислот в смеси, и по меньшей мере от около 30%, например от около 35, до около 43% от общего содержания пальмитиновой кислоты находятся в положении sn2.

В некоторых вариантах осуществления детская смесь дополнительно содержит по меньшей мере одну жирную кислоту омега-6 и по меньшей мере одну жирную кислоту омега-3 в соотношении от около 6 к около 1. В одном варианте осуществления по меньшей мере одна жирная кислота омега-6 составляет от около 10 до около 15 мас.% от общего содержания жирных кислот, и по меньшей мере одна жирная кислота омега-3 составляет от около 1,2% до около 3,6% от общего содержания жирных кислот. В некоторых вариантах осуществления детская смесь содержит по меньшей мере одну жирную кислоту омега-6, составляющую от около 2 до около 4% от общей массы, и по меньшей мере одну жирную кислоту омега-3, составляющую от около 0,3% до около 0,6% от общей массы.

Жиры в детской смеси настоящего изобретения содержат разнообразные триглицериды, как правило, присутствующие в молоке и/или детской смеси. Наиболее распространенными остатками жирных кислот в триглицеридах являются пальмитиновая и олеиновая кислоты. Помимо олеиновой и пальмитиновой кислот присутствующие остатки жирных кислот включают, без ограничений, линолевую кислоту, альфа-линолевую кислоту, лауриновую кислоту, миристиновую кислоту, докозагексаеновую кислоту и арахидоновую кислоту.

Недавние клинические исследования с участием младенцев показали, что питательные смеси, содержащие по меньшей мере одну жирную кислоту омега-6 и по меньшей мере одну жирную кислоту омега-3 в соотношении от около 6 к около 1, повышают накопление DHA в эритроцитах и плазме крови. Сбалансированное соотношение около 6 : 1 жирной кислоты омега-6 и жирной кислоты омега-3 также может обеспечивать долговременные полезные для здоровья эффекты, включая защиту от сердечно-сосудистых заболеваний. Такой баланс будет достигнут путем составления композиций настоящего изобретения с источниками жира из растительных масел, которые в своем составе имеют жирные кислоты омега-6, такие как, например, соевое масло и подсолнечное масло, и которые в своем составе имеют жирные кислоты омега-3, такие как рапс, канола, льняное семя, чиа, перлла или грецкие орехи. Для обеспечения модифицированной жировой смеси будет применяться уникальная жировая смесь с 5 разными маслами.

В одном варианте осуществления детская смесь настоящего изобретения содержит от около 1,8 до около 2,2 г общего количества белка на 100 ккал, например от около 1,8 до около 2,1 г или от около 1,9 до около 2,1 г белка на 100 ккал, причем от около 0,3 до около 0,4 г/100 ккал белка представляет собой альфа-лактальбумин. Детская смесь настоящего изобретения может быть представлена в форме готовой к употреблению жидкости или может представлять собой жидкий концентрат или порошкообразную смесь, которые можно растворять для получения готовой к употреблению жидкости путем добавления количества воды, которое приводит к получению жидкости с около 67 ккал/100 мл. Детская смесь настоящего изобретения включает все ингредиенты, которые требуются в соответствии с законодательством США или ЕС, включая, без ограничений, определенные витамины, минеральные вещества и незаменимые аминокислоты. Она также может включать нуклеотиды, такие как ЦМФ, УМФ, АМФ, ГМФ и ИМФ, лютеин, зеаксантин и другие ингредиенты, известные в данной области.

Олигосахариды

Питательная композиция настоящего изобретения содержит по меньшей мере один олигосахарид или олигосахариды. Олигосахарид может представлять собой единственный олигосахарид или смесь (разных) олигосахаридов. Смесь олигосахаридов в настоящем документе обозначается как «олигосахарид», или «олигосахариды», или «смесь олигосахаридов». Такие олигосахариды могут представлять собой, например, полифруктозу, фруктоолигосахариды (FOS), длинноцепочечные фруктоолигосахариды, короткоцепочечные фруктоолигосахариды (например, со степенью полимеризации (DP) от 2 до 8), инулин, галактоолигосахариды, сиалилированные олигосахариды, фукозилированные олигосахариды, N-ацетилированные олигосахариды и их смесь.

Смесь олигосахаридов

В одном варианте осуществления олигосахариды настоящего изобретения присутствуют в композиции в количестве от 0,5 до 10 г/100 ккал, предпочтительно от 1 до 5 г/100 ккал, наиболее предпочтительно от 2 до 4 г/100 ккал. В некоторых конкретных вариантах осуществления питательная композиция может содержать олигосахаридную смесь в количестве от 0,5 до 3,1 г/100 ккал, либо в количестве от 0,6 до 3,1 г/100 ккал, либо в количестве от 0,6 до 2,0 г/100 ккал, либо в количестве от 0,7 до 2,0 г/100 ккал, либо в количестве от 0,8 до 1,8 г/100 ккал, либо в количестве от 0,9 до 1,7 г/100 ккал, либо в количестве от 1,0 до 1,5 г/100 ккал, либо в количестве от 1,0 до 1,6 г/100 ккал.

В одном варианте осуществления олигосахариды присутствуют в композиции в количестве по меньшей мере 0,5 мас.%, 1 мас.%, по меньшей мере 5 мас.% или по меньшей мере 10 мас.%. В одном варианте осуществления олигосахариды присутствуют в композиции в количестве от 0,5 мас.% до 10 мас.%, или от 1 мас.% до 5 мас.%.

В одном аспекте изобретения питательная композиция содержит олигосахаридную смесь в количестве от 1% или 2,5% до 15 мас.%. В альтернативном варианте осуществления питательная композиция содержит олигосахаридную смесь в количестве от 3 до 15 мас.%, либо в количестве от 3 до 10 мас.%, либо в количестве от 3,5 до 9,5 мас.%, либо в количестве от 4 до 9 мас.%, либо в количестве от 4,5 до 8,5 мас.%, либо в количестве от 5,0 до 7,5 мас.%, либо в количестве от 5 до 8 мас.%.

В одном предпочтительном варианте осуществления олигосахариды содержат смеси сиалилированных олигосахаридов и галактоолигосахаридов (GOS).

Смесь олигосахаридов настоящего изобретения содержит N-ацетилированный (-е) олигосахарид (-ы), галактоолигосахарид (-ы) (GOS) и сиалилированный (-е) олигосахарид (-ы).

В одном варианте осуществления композиция содержит:

• N-ацетилированные олигосахариды: от 0,001 до 1 мас.%, предпочтительно от 0,003 мас.% до 0,3 мас.%

• галактоолигосахариды: от 1 до 10 мас.%, предпочтительно от 3 мас.% до 6 мас.%

• Сиалилированные олигосахариды: от 0,005 до 1 мас.%, предпочтительно от 0,01 мас.% до 0,4 мас.%

В одном наиболее предпочтительном варианте осуществления олигосахарид композиции настоящего изобретения состоит из или содержит по меньшей мере один N-ацетилированный олигосахарид, по меньшей мере один галактоолигосахарид и по меньшей мере один сиалилированный олигосахарид.

N-ацетилированные олигосахариды

N-ацетилированный олигосахарид представляет собой олигосахарид, содержащий N-ацетилированный остаток. Подходящие N-ацетилированные олигосахариды смеси олигосахаридов питательной композиции в соответствии с настоящим изобретением включают в себя GalNAcβ1,3Galβ1,4Glc и Galβ1,6GalNAcβ1,3Galβ1,4Glc, а также любую их смесь. N-ацетилированные олигосахариды могут быть приготовлены посредством действия глюкозаминидазы и/или галактозаминидазы на N-ацетилглюкозу и/или N-ацетилгалактозу. В равной степени для этой цели можно применять N-ацетилгалактозилтрансферазы и/или N-ацетилгликозилтрансферазы. N-ацетилированные олигосахариды также могут быть получены с помощью технологии ферментации с применением соответствующих ферментов (рекомбинантных или природных) и/или микробиологической ферментации. В последнем случае микроорганизмы могут экспрессировать свои природные ферменты и субстраты, или могут быть созданы микроорганизмы, вырабатывающие соответствующие субстраты и ферменты. Можно применять культуры микроорганизмов одного вида или смешанные культуры. Образование N-ацетилированного олигосахарида может быть инициировано акцепторными субстратами, начиная с любой степени полимеризации (DP) от DP = 1 и далее. Другой вариант представляет собой химическое преобразование кетогексозы (фруктозы) либо в свободной, либо в связанной с олигосахаридом (например, лактулозой) форме в N-ацетилгексозамин или в олигосахарид, содержащий N-ацетилгексозамин, как описано в Wrodnigg, T.M, Dtutz, A.E, Angew. Chem. Int. Ed. 1999: 38: 827-828.

Галактоолигосахарид представляет собой олигосахарид, содержащий две или более незаряженных молекул галактозы и не содержащий остатка N-ацетила.

Выражения «галактоолигосахарид» и «GOS» могут быть использованы взаимозаменяемо. Они относятся к олигосахариду, содержащему две или более молекул галактозы, которые не имеют заряда и не содержат N-ацетилированный остаток (т.е. они представляют собой нейтральные олигосахариды). В конкретном варианте осуществления указанные две или более молекулы галактозы соединены β-1,2-, β-1,3-, β-1,4- или β-1,6-связью. В другом варианте осуществления галактоолигосахарид и GOS также включают олигосахариды, содержащие одну молекулу галактозы и одну молекулу глюкозы (т.е. дисахариды), соединенные β-1,2-, β-1,3- или β-1,6-связью.

Подходящие галактоолигосахариды смеси олигосахаридов питательной композиции в соответствии с настоящим изобретением включают в себя Galβ1,3Galβ1,4Glc, Galβ1,6Galβ1,4Glc, Galβ1,3Galβ1,3Galβ1,4Glc, Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc, Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc, Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc, Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,6Glc, Galβ1,3Galβ1,3Glc, Galβ1,4Galβ1,4Glc и Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc, а также любую их смесь. Синтезированные галактоолигосахариды, такие как Galβ1,6Galβ1,4Glc, Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,6Glc, Galβ1,3Galβ1,4Glc, Galβ1,6Galβ1,6Galβ1,4Glc, Galβ1,6Galβ1,3Galβ1,4Glc, Galβ1,3Galβ1,6Galβ1,4Glc, Galβ1,4Galβ1,4Glc и Galβ1,4Galβ1,4Galβ1,4Glc и их смеси, представлены на рынке под товарными знаками Vivinal® и Elix’or®. Другими поставщиками олигосахаридов являются компании Dextra Laboratories, Sigma-Aldrich Chemie GmbH и Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. В альтернативном варианте осуществления для получения нейтральных олигосахаридов можно применять специфические гликозилтрансферазы, такие как галактозилтрансферазы.

Сиалилированный олигосахарид представляет собой олигосахарид, содержащий остаток сиаловой кислоты с ассоциированным зарядом. К подходящим сиалилированным олигосахаридам смеси олигосахаридов питательной композиции в соответствии с настоящим изобретением относятся сиалиллактоза, α2,3-сиалиллактоза (3SL), α2,6-сиалиллактоза (6SL), NeuAcα2-3Galβ1-4Glc, NeuAcα2-6Galβ1-4Glc, NeuAcα2,3Galβ1,4Glc и NeuAcα2,6Galβ1,4Glc, а также любая их смесь.

Сиалилированный (-ые) олигосахарид (-ы) можно выбирать из группы, включающей 3’-сиалиллактозу (3-SL), 6’-сиалиллактозу (6-SL) и любую их комбинацию. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения композиция содержит 3-SL и 6-SL. В некоторых конкретных вариантах осуществления соотношение 3’-сиалиллактозы (3-SL) и 6’-сиалиллактозы (6-SL) может находиться в диапазоне от 5 : 1 до 1 : 10 или от 3 : 1 до 1 : 1, или от 1 : 1 до 1 : 10. В некоторых конкретных вариантах осуществления сиалилированный олигосахарид композиции представляет собой 6'-сиалиллактозу (6-SL).

Эти сиалилированные олигосахариды могут быть выделены из естественного источника, такого как молоко животных, методами хроматографии или фильтрации. В альтернативном варианте осуществления изобретения они также могут быть получены с помощью биотехнологических средств с применением специфических сиалилтрансфераз, либо посредством методики ферментации на основе ферментов (рекомбинантных или естественных ферментов), либо посредством методики микробной ферментации. В последнем случае микроорганизмы могут экспрессировать свои природные ферменты и субстраты, или могут быть созданы микроорганизмы, вырабатывающие соответствующие субстраты и ферменты. Можно применять культуры микроорганизмов одного вида или смешанные культуры. Образование сиалилолигосахаридов может быть инициировано акцепторными субстратами, начиная с любой степени полимеризации (DP) от DP = 1 и далее. В альтернативном варианте осуществления сиалиллактозы могут быть получены путем химического синтеза из лактозы и свободной N-ацетилнейраминовой кислоты (сиаловой кислоты). Сиалиллактозы также доступны в продаже, например, от компании Kyowa Hakko Kogyo, Япония.

Источник пребиотиков/олигосахаридов

Олигосахариды могут быть выделены из любого источника. Предпочтительно олигосахариды выделяют, очищают или концентрируют из коровьего молока. В альтернативном варианте осуществления все или некоторые из олигосахаридов получают полностью или частично средствами биоинженерии.

Можно применять традиционные технологии фракционирования и обогащения фракций коровьего молока в олигосахаридах из коровьего молока (такие традиционные технологии включают в себя колонную экстракцию, фильтрацию с помощью смол, нанофильтрацию, специальную ферментную обработку бета-галактозидазой, осаждение белков, кристаллизацию и отделение лактозы и т.п.). Некоторые фракции коровьего молока, обогащенные олигосахаридами, коммерчески доступны или описаны (например, в патенте EP2526784 A1, способ которого можно применять для получения олигосахаридной смеси, применяемой в настоящем изобретении).

Конкретные варианты осуществления

Некоторые конкретные смеси олигосахаридов ожидаемо являются особенно подходящими для изобретения.

Питательная композиция настоящего изобретения может содержать по меньшей мере 0,01 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), по меньшей мере 2,0 мас.% галактоолигосахарида (-ов) и по меньшей мере 0,02 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В некоторых вариантах осуществления питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может содержать по меньшей мере 0,01 мас.%, либо по меньшей мере 0,02 мас.%, либо по меньшей мере 0,03 мас.%, либо по меньшей мере 0,04 мас.%, либо по меньшей мере 0,05 мас.%, либо по меньшей мере 0,06 мас.%, либо по меньшей мере 0,07 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов). В некоторых вариантах осуществления она может содержать от 0,01 до 0,07 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), например от 0,01 до 0,05 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов) или от 0,01 до 0,03 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

Дополнительно питательная композиция может содержать по меньшей мере 2 мас.%, либо по меньшей мере 3 мас.%, либо по меньшей мере 4 мас.%, либо по меньшей мере 5 мас.%, либо по меньшей мере 5,5 мас.%, либо по меньшей мере 6 мас.%, либо по меньшей мере 7 мас.%, либо по меньшей мере 8 мас.% галактоолигосахарида (-ов). В некоторых вариантах осуществления она может содержать от 5 до 8 мас.% галактоолигосахарида (-ов), например от 5,75 до 7 мас.% галактоолигосахарида (-ов) или от 5,85 до 6,5 мас.% галактоолигосахарида (-ов). Конкретным примером является количество 5,95 мас.% олигосахарида (-ов).

Наконец, питательная композиция может содержать по меньшей мере 0,02 мас.%, либо по меньшей мере 0,03 мас.%, либо по меньшей мере 0,04 мас.%, либо по меньшей мере 0,05 мас.%, либо по меньшей мере 0,06 мас.%, либо по меньшей мере 0,07 мас.%, либо по меньшей мере 0,08 мас.%, либо по меньшей мере 0,09 мас.% сиалилированных олигосахаридов. В некоторых вариантах осуществления она может содержать от 0,02 до 0,09 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов), например от 0,02 до 0,08 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов), либо от 0,02 до 0,07 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов), либо от 0,003 до 0,07 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В конкретном варианте осуществления питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может содержать от 0,01 до 0,07 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), от 2,0 до 8,0 мас.% галактоолигосахарида (-ов) и от 0,02 до 0,09 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

Еще в одном конкретном варианте осуществления питательная композиция в соответствии с настоящим изобретением может содержать от 0,01 до 0,03 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), 5,95 мас.% галактоолигосахарида (-ов) и от 0,02 до 0,09 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В другом варианте осуществления питательная композиция может содержать по меньшей мере 0,0015 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), по меньшей мере 0,70 г/100 ккал галактоолигосахарида (-ов) и по меньшей мере 0,0045 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В некоторых конкретных вариантах осуществления питательная композиция может содержать по меньшей мере 0,0015 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,002 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0025 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,003 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0035 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,004 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0045 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,005 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов). В некоторых вариантах осуществления питательная композиция может содержать от 0,0015 до 0,005 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), например от 0,0015 до 0,045 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов) или от 0,002 до 0,0045 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

Дополнительно питательная композиция может содержать по меньшей мере 0,70 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,74 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,8 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,85 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,90 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,95 г/100 ккал, либо по меньшей мере 1,0 г/100 ккал, либо по меньшей мере 1,05 г/100 ккал, либо по меньшей мере 1,10 г/100 ккал, либо по меньшей мере 1,20 г/100 ккал, либо по меньшей мере 1,50 галактоолигосахарида (-ов). В некоторых вариантах осуществления она может содержать от 0,70 до 1,5 г/100 ккал галактоолигосахарида (-ов), например от 0,70 до 1,20 г/100 ккал галактоолигосахарида (-ов) или от 0,74 до 1,2 г/100 ккал галактоолигосахарида (-ов).

Наконец, питательная композиция может содержать по меньшей мере 0,0045 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,005 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0055 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,006 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0065 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,007 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0075 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,008 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0085 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов). В некоторых вариантах осуществления она может содержать от 0,0045 до 0,0085 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов), например от 0,0045 до 0,008 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов) или от 0,0045 до 0,0075 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В конкретном варианте осуществления питательная композиция может содержать от 0,0015 до 0,005 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), от 0,70 до 1,5 г/100 ккал галактоолигосахарида (-ов) и от 0,0045 до 0,0085 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В другом конкретном варианте осуществления питательная композиция может содержать от 0,0015 до 0,0045 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), от 0,74 до 1,2 г/100 ккал галактоолигосахарида (-ов) и от 0,0045 до 0,0075 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В конкретном преимущественном варианте осуществления олигосахаридная смесь питательной композиции в соответствии с настоящим изобретением содержит от 0,1 до 4,0 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), от 92,0 до 98,5 мас.% галактоолигосахарида (-ов) и от 0,3 до 4,0 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В одном аспекте настоящего изобретения питательная композиция содержит смесь олигосахаридов в количестве от 2,5 до 15 мас.%. В альтернативном варианте осуществления питательная композиция содержит олигосахаридную смесь в количестве от 3 до 15 мас.%, либо в количестве от 3 до 10 мас.%, либо в количестве от 3,5 до 9,5 мас.%, либо в количестве от 4 до 9 мас.%, либо в количестве от 4,5 до 8,5 мас.%, либо в количестве от 5,0 до 7,5 мас.%, либо в количестве от 5 до 8 мас.%.

В некоторых конкретных вариантах осуществления питательная композиция может содержать олигосахаридную смесь в количестве от 0,5 до 3,1 г/100 ккал, либо в количестве от 0,6 до 3,1 г/100 ккал, либо в количестве от 0,6 до 2,0 г/100 ккал, либо в количестве от 0,7 до 2,0 г/100 ккал, либо в количестве от 0,8 до 1,8 г/100 ккал, либо в количестве от 0,9 до 1,7 г/100 ккал, либо в количестве от 1,0 до 1,5 г/100 ккал, либо в количестве от 1,0 до 1,6 г/100 ккал.

Дополнительно питательная композиция может содержать по меньшей мере 2 мас.% либо по меньшей мере 3 мас.%, либо по меньшей мере 4 мас.%, либо по меньшей мере 5 мас.%, либо по меньшей мере 5,5 мас.%, либо по меньшей мере 6 мас.%, либо по меньшей мере 7 мас.%, либо по меньшей мере 8 мас.% галактоолигосахарида (-ов). В некоторых вариантах осуществления она может содержать от 5 до 8 мас.% галактоолигосахарида (-ов), например от 5,75 до 7 мас.% галактоолигосахарида (-ов) либо от 5,85 до 6,5 мас.% галактоолигосахарида (-ов). Конкретным примером является количество 5,95 мас.% олигосахарида (-ов).

Олигосахариды/BMOS

В одном варианте осуществления настоящего изобретения композиция содержит олигосахариды коровьего молока (в настоящем документе используется сокращение BMOS или смесь BMOs), которые представляют собой следующую смесь (фракцию коровьего молока, обогащенную некоторыми олигосахаридами).

BMOS содержит (концентрация в итоговой композиции, например детской смеси, в пересчете на сухую массу) приблизительно:

N-ацетилированные олигосахариды:	от 0,006 до 0,24 мас.%
Галактоолигосахариды:	от 5,52 до 5,91 мас.%
Сиалилированные олигосахариды:	от 0,018 до 0,24 мас.%

Галактоолигосахариды могут представлять собой доступные в продаже Vivinal GOS от компании Friesland Campina (Нидерланды).

В различных вариантах осуществления GOS содержит менее 30, 20, 10, 8, 6, 5 или 4 остатков галактозы.

В конкретном варианте осуществления питательная композиция содержит от 2,5 до 15,0 мас.% смеси BMOS.

В другом варианте осуществления питательная композиция содержит по меньшей мере 0,01 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов) по меньшей мере 2,0 мас.% галактоолигосахарида (-ов) и по меньшей мере 0,02 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В одном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере один N-ацетилированный олигосахарид, и/или по меньшей мере один галактоолигосахарид, и/или по меньшей мере один сиалилированный олигосахарид.

В одном варианте осуществления смесь BMOS содержит от 0,1 до 4,0 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), от 92,0 до 98,5 мас.% галактоолигосахарида (-ов) и от 0,3 до 4,0 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В одном варианте осуществления смесь BMOS получают из животного молока, такого как коровье молоко или буйволиное молоко.

Питательная композиция может содержать по меньшей мере 0,0045 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,005 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0055 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,006 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0065 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,007 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0075 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,008 г/100 ккал, либо по меньшей мере 0,0085 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов). В некоторых вариантах осуществления она может содержать от 0,0045 до 0,0085 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов), например от 0,0045 до 0,008 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов) или от 0,0045 до 0,0075 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В WO2006087391 и WO2012160080 представлены некоторые примеры получения смесей BMOS.

Другие олигосахариды / олигофруктоза (OF)

Детская смесь настоящего изобретения может содержать по меньшей мере около 0,4 г или по меньшей мере 0,7 г олигофруктозы на 100 ккал композиции. В некоторых вариантах осуществления она содержит от около 0,4 до около 0,9 г, от около 0,4 до около 0,7 г, от около 0,4 до около 0,5 г, от около 0,7 до около 0,8 г или от около 0,7 до около 0,9 г олигофруктозы на 100 ккал.

В некоторых вариантах осуществления олигофруктоза имеет степень полимеризации от 2 до 10. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере 80%, 90%, 95%, 99% или 100% олигофруктозы имеют степень полимеризации от 2 до 8 (или в диапазоне от 2 до 8). В одном варианте осуществления FOS представляет собой длинноцепочечный фруктоолигосахарид (цепочка из 10 или более или 15 или более остатков фруктозы), например инулин.

В одном варианте осуществления композиция настоящего изобретения содержит

– по меньшей мере 3 г/л или по меньшей мере 5 г/л олигофруктозы (OF), если композиция представляет собой готовую к употреблению жидкую композицию, или

– достаточное количество олигосахарида для получения соответственно по меньшей мере 3 г/л или 5 г/л олигофруктозы в композиции после растворения, если указанная питательная композиция представляет собой порошкообразную или концентрированную композицию.

В некоторых вариантах осуществления питательная композиция настоящего изобретения содержит по меньшей мере 0,4 г OF/100 ккал композиции или по меньшей мере 0,7 г, или по меньшей мере 0,75 г, или по меньшей мере 0,8 г, или по меньшей мере 0,9 г OF/100 ккал композиции.

С учетом результатов, продемонстрированных в примерах, общепризнанным является то, что высокое количество олигофруктозы обеспечивает более сильный эффект. Однако может существовать верхний предел полезного эффекта олигофруктозы; когда появляется неблагоприятный побочный эффект. Такой верхний предел может, например, составлять 2,2 г/100 ккал, 2,0 г/100 ккал, 1,8 г/100 ккал, 1,5 г/100 ккал или 1,2 г/100 ккал. Предпочтительно композиция настоящего изобретения содержит 5 г OF/л, или 0,75 или 0,9 г OF/100 ккал композиции, или, наконец, такие количества.

Другие пребиотики

Композиция настоящего изобретения может содержать указанные или дополнительные неперевариваемые олигосахариды (например, пребиотики). Они, как правило, присутствуют в количестве от 0,3 до 10 мас.% композиции.

Пребиотики, как правило, являются неперевариваемыми в том смысле, что они не расщепляются и не всасываются в желудке или тонком кишечнике и, таким образом, остаются в нативном виде при переходе в толстый кишечник, в котором они селективно ферментируются полезными бактериями. Примеры пребиотиков включают в себя некоторые олигосахариды, такие дополнительные фруктоолигосахариды (FOS) и/или галактоолигосахариды (GOS). Можно использовать комбинацию пребиотиков, такую как 90% GOS с 10% короткоцепочечных фруктоолигосахаридов. Другая комбинация пребиотиков представляет собой 70% короткоцепочечных фруктоолигосахаридов и 30% инулина (длинноцепочечного FOS). Оба этих пребиотика, а также олигофруктоза (OF) доступны для приобретения, в частности, у компании BENEO (Beneo GmbH, Maximilianstrasse, 68165, г. Мангейм, Германия).

Пробиотики

Композиция настоящего изобретения содержит Bifidobacterium animalis вида lactis (B. lactis), представляющий собой пробиотик.

В одном варианте осуществления пробиотик B. lactis представляет собой доступный в продаже препарат BB12™, предлагаемый компанией CHr. Hansen (Дания). В одном варианте осуществления пробиотик представляет собой Bifidobacterium animalis вида lactis (B. lactis) CNCM I-3446.

Дозировка пробиотиков может составлять, например, от 10⁵ до 10¹² КОЕ на грамм композиции, предпочтительно в количестве, достаточном для обеспечения синергетического эффекта с олигосахаридами (например, BMOS) композиции, и предпочтительно от 10⁶ до 10⁸ КОЕ/г композиции.

Белки/альфа-лактальбумин

Композиция настоящего изобретения содержит источник белка. Такой источник белка может обеспечивать, например, от 1,6 до 3 г белка/100 ккал. В одном варианте осуществления, предназначенном для преждевременно родившихся младенцев, такое количество может составлять от 2,4 до 4 г/100 ккал или более 3,6 г/100 ккал. В одном варианте осуществления количество может быть ниже 2,0 г на 100 ккал, например ниже 1,8 г на 100 ккал.

Тип белка не считается в высшей степени критическим для настоящего изобретения при условии, что соблюдены минимальные требования по содержанию незаменимых аминокислот и обеспечен удовлетворительный рост. Однако конкретные белки могут обеспечивать наиболее подходящий субстрат для микробиоты. Таким образом, можно применять источники белка на основе молочной сыворотки, казеина и их смесей, а также источники белка на основе сои. Что касается сывороточных белков, источник белка может быть основан на кислой молочной сыворотке, или сладкой молочной сыворотке, или их смесях и может включать альфа-лактальбумин и бета-лактоглобулин в любых желаемых пропорциях.

В источнике белка предпочтительно преобладает молочная сыворотка (более 50% белков происходят от сывороточных белков). В одном варианте осуществления белок композиции представляет собой нативные белки или преимущественно (более 90%) нативные белки.

Белки могут быть нативными или гидролизованными либо могут представлять собой смесь нативных и гидролизованных белков. Под термином «нативный» подразумевают, что основная часть белков является нативной, т.е. их молекулярная структура не изменена, например не изменено по меньшей мере 80% белков, например не изменено по меньшей мере 85% белков, предпочтительно не изменено по меньшей мере 90% белков, еще более предпочтительно не изменено по меньшей мере 95% белков, например не изменено по меньшей мере 98% белков. В конкретном варианте осуществления 100% белков не изменено.

Термин «гидролизованный» в контексте настоящего изобретения означает белок, который был гидролизован или расщеплен на составляющие его аминокислоты.

Белки могут быть полностью, глубоко или частично гидролизованными. Может быть желательным вводить частично гидролизованные белки (степень гидролиза от 2 до 20%), например, младенцам, предположительно подверженным риску развития аллергии на коровье молоко. При необходимости использования гидролизованных белков процесс гидролиза можно проводить желаемым способом, известным в данной области. Например, гидролизаты сывороточного белка могут быть приготовлены ферментативным гидролизом фракции молочной сыворотки в одну или более стадий. Если фракция молочной сыворотки, применяемая в качестве исходного материала, по существу, не содержит лактозы, то установлено, что в процессе гидролиза блокировка лизина белка проявляется в гораздо меньшей степени. Это позволяет снизить степень блокировки лизина с около 15 мас.% общего лизина до менее около 10 мас.% лизина; например до около 7 мас.% лизина, что значительно улучшает питательное качество источника белка.

В одном предпочтительном варианте осуществления белки композиции гидролизованы, полностью гидролизованы, высокогидролизованы или частично гидролизованы. Степень гидролиза (DH) белка может составлять от 8 до 40, или от 20 до 60, или от 20 до 80 или более 10, 20, 40, 60, 80 90. Следует понимать, что гидролизованные белки могут оказывать на аллергию различные действия: гидролизованные белки могут быть менее аллергенными, вызывая, таким образом, меньше иммунных аллергических реакций. Гидролизованные белки, особенно небольшие пептиды (длиной менее 20, 10 или 5 аминокислот), могут индуцировать толерантность при пероральном введении, влияя, таким образом, на будущий аллергический статус субъекта. Следует понимать, что гидролизованные белки можно эффективно комбинировать с фукозилированным (-ыми) олигосахаридом (-ами) настоящего изобретения, обеспечивая двойной эффект, возможно, синергический эффект, действуя по меньшей мере на 2 разных уровня при формировании аллергических симптомов или аллергического статуса.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения гидролизовано по меньшей мере 70% белков, предпочтительно гидролизовано по меньшей мере 80% белков, например гидролизовано по меньшей мере 85% белков, еще более предпочтительно гидролизовано по меньшей мере 90% белков, например гидролизовано по меньшей мере 95% белков, в частности гидролизовано по меньшей мере 98% белков. В конкретном варианте осуществления гидролизовано 100% белков.

В одном варианте осуществления гидролизованные белки являются единственным источником белка (т.е. 100% или по меньшей мере 90% белка гидролизовано).

В одном варианте осуществления гидролизованные белки являются основным источником белка (т.е. по меньшей мере 50%, предпочтительно 60% белков гидролизовано).

В одном варианте осуществления питательная композиция настоящего изобретения содержит альфа-лактальбумин в количестве по меньшей мере 0,2 или 0,3, или 0,4 г/100 ккал, или по меньшей мере 1,7 г, или 2,0, или 2,3, или 2,6 г/л. Считается, что наличие альфа-лактальбумина в определенном количестве усиливает действие олигофруктозы, обеспечивая, например, необходимый питательный субстрат для микробиоты.

Можно предположить, что гидролизованный белок легче переваривается и, следовательно, вступает в синергетическую связь с формированием кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, находящихся на грудном вскармливании, особенно в случае ослабленных младенцев.

Предпочтительная матрица питательной композиции

Композиция в соответствии с настоящим изобретением может представлять собой искусственную питательную композицию. Это может быть детская смесь, начальная детская смесь, смесь для прикармливаемых детей, смесь для недоношенных детей, или обогатитель, такой как обогатитель грудного молока, или добавка. Композиция настоящего изобретения предпочтительно представляет собой детскую смесь, или обогатитель, или добавку для употребления в первые 4 или 6 месяцев жизни. Композиции настоящего изобретения могут представлять собой традиционную детскую смесь для продажи, в которую добавляют определенную смесь олигосахарида по п. 1.

Жиры / высокое содержание sn2-пальмитата

В одном варианте осуществления питательная композиция содержит триглицериды с высоким содержанием sn2-пальмитата, предпочтительно триглицериды, имеющие более 33% пальмитиновых кислот в положении sn2.

В одном варианте осуществления питательная композиция настоящего изобретения содержит около 5–6 г на 100 ккал жиров (триглицеридов) с по меньшей мере около 7,5 мас.% этих жиров, например около 7,5–12,0%, состоящих из пальмитиновой кислоты в положении sn2 триглицерида.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения композиция содержит по меньшей мере 7,5%, предпочтительно 8%, более предпочтительно по меньшей мере 9,6% жиров, которые представляют собой sn2-пальмитат.

В некоторых вариантах осуществления около 7,8–11,8%, около 8,0–11,5 мас.%, около 8,5–11,0% или около 9,0–10,0 мас.% жиров представляют собой пальмитиновую кислоту в положении sn2 триглицерида.

В некоторых вариантах осуществления питательная композиция дополнительно содержит по меньшей мере одну жирную кислоту омега-6 и по меньшей мере одну жирную кислоту омега-3 в соотношении около 6 к около 1. В одном варианте осуществления по меньшей мере одна жирная кислота омега-6 составляет от около 10 до около 15 мас.% от общего содержания жирных кислот, и по меньшей мере одна жирная кислота омега-3 составляет от около 1,2% до около 3,6% от общего содержания жирных кислот. В некоторых вариантах осуществления детская смесь содержит по меньшей мере одну жирную кислоту омега-6, составляющую от около 2 до около 4% от общей массы, и по меньшей мере одну жирную кислоту омега-3, составляющую от около 0,3% до около 0,6% от общей массы.

Жиры в питательной композиции настоящего изобретения содержат разнообразные триглицериды, как правило, присутствующие в молоке и/или питательной композиции. Наиболее распространенными остатками жирных кислот в триглицеридах являются пальмитиновая и олеиновая кислоты. Помимо олеиновой и пальмитиновой кислот присутствующие остатки жирных кислот включают, без ограничений, линолевую кислоту, альфа-линолевую кислоту, лауриновую кислоту, миристиновую кислоту, докозагексаеновую кислоту и арахидоновую кислоту.

В продаже доступна композиция Betapol^TM B-55 от компании Lipid Nutrition, которая представляет собой смесь триглицеридов, полученную из растительного масла, в которой по меньшей мере 54% пальмитиновой кислоты находится в положении sn2 молекулы глицерина. В одном варианте осуществления содержание жиров в композиции по настоящему изобретению составляет около 40–50 мас.% Betapol™ B-55, например от около 43 мас.% до около 45 мас.%. Для специалистов в данной области очевидно, что процентное содержание используемых жиров с высоким содержанием sn2-пальмитата и общее количество sn2-пальмитата в смеси может варьироваться, и что можно использовать другое масло с содержанием sn2-пальмитата без отступления от сущности и объема изобретения.

Хотя кормление младенца смесью с высоким процентным содержанием sn2-пальмитата способствует образованию более мягкого стула и росту бифидобактерий в толстом кишечнике, комбинация высокого содержания sn2-пальмитата с олигофруктозой обеспечивает существенно лучшее смягчение стула, при этом обеспечивая оптимальный баланс кишечной микробиоты и усиливая угнетение или снижение нагрузки патогенных бактерий в толстом кишечнике у младенцев, находящихся на вскармливании смесью.

Воздействие на здоровье

Композиция настоящего изобретения оказывает положительное воздействие на здоровье, снижая риск, или степень тяжести, или частоту диареи, не связанной с ротавирусом.

В одном варианте осуществления композиция настоящего изобретения снижает риск диареи, не связанной с ротавирусом. Сюда может входить сопоставление 2 групп субъектов (например, младенцев), одна из которых получает композицию настоящего изобретения в качестве детской смеси (предпочтительно в качестве единственного источника питания/энергии), а другая группа получает традиционную детскую смесь (не содержащую композицию настоящего изобретения), и измерение частоты или распространенности диареи, не связанной с ротавирусом, в течение продолжительного периода времени (например, 1 неделя, 1 месяц, 4 или 6 месяцев). У субъектов, получающих композицию настоящего изобретения, отмечалось снижение частоты случаев диареи, не связанной с ротавирусом, или снижение степени тяжести таких случаев. Это указывает на защитный эффект композиции настоящего изобретения, то есть снижение риска.

В одном варианте осуществления композиция настоящего изобретения снижает степень тяжести диареи, не связанной с ротавирусом. Показателем такой степени тяжести может быть сокращение длительности случаев диареи, более твердый стул / менее жидкий стул, уменьшение боли, снижение температуры, смягчение симптомов гастроэнтерита (всегда в сопоставлении группы, получающей композицию настоящего изобретения, с группой, не получающей композицию настоящего изобретения).

В одном варианте осуществления композиция настоящего изобретения снижает распространенность диареи, не связанной с ротавирусом. Показателем такой распространенности или частоты распространенности может быть сокращение частоты случаев диареи (всегда в сопоставлении группы, получающей композицию настоящего изобретения, с группой, не получающей композицию настоящего изобретения).

В вариантах осуществления настоящего изобретения упомянутое выше положительное воздействие на здоровье настоящего изобретения отмечалось у младенцев в возрасте от 0 до 6 месяцев, от 0 до 12 месяцев или от 0 до 36 месяцев. Продолжительность кормления младенцев может составлять 1, 2, 3, 6, 12 месяцев, предпочтительно, первые 1, 2, 3, 6, 12 месяцев жизни младенцев.

Композиция изобретения может оказывать положительное воздействие на микробиоту младенцев или детей младшего возраста. Такой положительный эффект может включать в себя угнетение, уменьшение или ингибирование роста патогенных бактерий и/или усиление, увеличение или стимуляцию роста полезных бактерий.

В одном варианте осуществления воздействие на здоровье композиции изобретения включает в себя стимулирование или индуцирование кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, по сравнению с микробиотой младенцев, вскармливаемых преимущественно традиционной питательной композицией (или детской смесью), не включающей указанного пробиотика. Такой эффект достигается у младенцев или детей младшего возраста от 0 до 36 месяцев, необязательно от 0 до 12 месяцев.

Подобное воздействие на здоровье можно наблюдать после нескольких дней или недель применения композиции, например после 4 недель, или 6 недель, или 8 недель применения. Однако время до появления индуцированной микробиоты может составлять 4, 6, 8 недель.

В данном контексте подобное воздействие на здоровье может приблизить микробиоту младенцев или детей младшего возраста к микробиоте младенцев или детей младшего возраста, находящихся (исключительно) на грудном вскармливании. Это особенно заметно при сравнении с младенцами или детьми младшего возраста, которые не получают композицию изобретения.

Вызванные индуцированием микробиоты изменения специфичны по 2 измерениям: С количественной точки зрения, кишечная флора содержит больше полезных бактерий и меньше неполезных или вредных бактерий. С качественной точки зрения, разнообразие таксонов бактерий больше напоминает микробиоту младенцев, находящихся на грудном вскармливании.

За счет угнетения, снижения и/или ингибирования роста популяций патогенных бактерий и/или индукции более полезных бактерий, в количественном и качественном аспектах, композиция изобретения может обеспечить положительное воздействие на здоровье. Такая здоровая кишечная микробиота в конечном счете связана с надлежащим всасыванием питательных веществ, адекватным ростом, уменьшением колик, и оптимальным состоянием кишечника.

Воздействие на здоровье, вызванное композицией настоящего изобретения, можно в одном варианте осуществления охарактеризовать как включающее в себя увеличение популяции B. animalis и/или бифидобактерии, и/или B. Longum, и/или Lactobacillus и/или подавление популяций Coprobacillus и/или Streptococcus.

Воздействие изобретения может быть профилактическим (например, снижение риска диареи, не связанной с ротавирусом, и, по возможности, также предотвращение дисбаланса кишечной микробиоты, предотвращение кишечных инфекций, поддержание здоровой кишечной микробиоты, индукция здоровой кишечной микробиоты) или лечебным (например, снижение степени тяжести диареи, не связанной с ротавирусом, и, по возможности, также восстановление здоровой кишечной микробиоты при ее нарушении, помощь в устранении или сокращении популяций патогенных бактерий в кишечнике, индукция здоровой микробиоты после ухудшения, например из-за диареи).

Воздействие на здоровье, в отношении младенца, может оцениваться по измерениям частоты или степени тяжести случаев диареи и сопоставляться с референтными группами (не получающими композицию настоящего изобретения).

Воздействие на здоровье, в отношении младенца, также можно измерить различными способами, как показано в приведенном ниже примере. Однако в одном варианте осуществления воздействие на микробиоту измеряют по среднему распределению дистанций по UNIFRAC (см. ниже).

В одном варианте осуществления воздействие на здоровье, стимулирующее или индуцирующее кишечную микробиоту, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, дополнительно характеризуется стимулированием или индуцированием кишечной микрофлоры, имеющей филогенетическую дистанцию до микробиоты младенцев, находящихся на грудном вскармливании, менее 0,3 единицы (измерение методом Unifrac), предпочтительно менее 0,25 единицы.

Диарея, не связанная с ротавирусом, сопровождается увеличением популяции стрептококка и бактерий E.Coli, а также сокращением популяций бифидобактерий (Jin et al, BMC Microbiology, 2013, 13:141 and Shields et al, Infect. Dis. Clin. Pract. 2012;20:357-358). Авторы настоящего изобретения подтвердили, что композиция настоящего изобретения оказывает противоположный эффект (рост бифидобактерий; сокращение популяций E.Coli и стрептококка). Неожиданно было обнаружено, что композиция настоящего изобретения оказывается предпочтительной композицией для снижения риска и/или степени тяжести, и/или распространенности диареи, не связанной с ротавирусом.

Целевая группа младенцев

В одном варианте осуществления настоящего изобретения целевая группа состоит из младенцев или детей младшего возраста, рожденных с ослабленной или несбалансированной микробиотой или с дисбиозом микробиоты. Например, такие младенцы могут быть недоношенными младенцами, младенцами, рожденными маленькими для своего гестационного возраста или рожденными посредством кесарева сечения, госпитализированными младенцами или младенцами, пролеченными или получающими лечение антибиотиками.

В одном варианте осуществления целевой группой младенцев являются младенцы, уже страдающие (страдавшие по меньшей мере однажды, по меньшей мере дважды, предпочтительно в последние 2 или 6 месяцев) от гастроэнтерита и/или диареи, не связанной с ротавирусом.

В одном варианте осуществления младенцы или дети младшего возраста родились в срок. Все младенцы могут получать пользу от изобретения, поскольку все младенцы являются или могут быть, в определенном возрасте, подвержены возникновению дисбаланса кишечной микробиоты. В одном варианте осуществления младенцы или дети младшего возраста родились преждевременно (являются недоношенными). В одном варианте осуществления младенцы или дети младшего возраста родились маленькими для своего гестационного возраста. В одном варианте осуществления младенцы или дети младшего возраста были рождены посредством вагинальных родов. В одном варианте осуществления младенцы или дети младшего возраста были рождены посредством кесарева сечения. Ожидается, что композиция настоящего изобретения может быть еще полезнее для младенцев, рожденных с возможным нарушением кишечной микробиоты, или ослабленных младенцев (таких как преждевременно родившиеся младенцы и/или младенцы, рожденные посредством кесарева сечения). Кроме того, ожидается, что композиция настоящего изобретения может быть еще полезнее для младенцев, у которых наблюдаются кишечные расстройства (такие как диарея, инфекции или колики) после рождения, например, в течение первых 4 недель после рождения.

В вариантах осуществления настоящего изобретения младенцы родились маленькими для своего гестационного возраста, или были рождены посредством кесарева сечения, или имеют несбалансированную или аномальную кишечную микробиоту, или страдают кишечной инфекцией; необязательно вышеуказанные состояния являются объектом воздействия композиции настоящего изобретения при возрасте младенцев 0–6 месяцев. Без ограничения какой-либо теорией считается, что младенцы младшего возраста получают еще большую пользу от настоящего изобретения, особенно если младенцы имеют (или подвержены риску иметь) несбалансированную кишечную микробиоту и/или имеют ослабленное состояние здоровья (примерами которого являются вышеприведенные состояния).

Особый интерес представляет получение кишечной микробиоты, которая похожа на кишечную микробиоту младенцев, находящихся на грудном вскармливании (предпочтительно находящихся исключительно на грудном вскармливании), у таких младенцев или детей младшего возраста. Это действительно обеспечивает им нормальное количество необходимых для здоровья элементов, что может быть полезным, особенно для таких ослабленных младенцев.

В одном варианте осуществления младенцы и дети младшего возраста находятся в возрасте 0–6 месяцев, или 0–12 месяцев, или 0–36 месяцев. Ожидается, что еще большую пользу композиция настоящего изобретения может принести новорожденным младенцам (в возрасте 0–4 недель или 0–8 недель), поскольку их кишечный тракт может быть более ослабленным.

Следующие примеры представлены для иллюстрации определенных вариантов осуществления и признаков настоящего изобретения, но их не следует толковать как ограничивающие объем настоящего изобретения.

Предполагаемый режим кормления

В одном варианте осуществления композицию настоящего изобретения дают (или предписывают давать, или назначают) младенцу или детям младшего возраста в течение 2, 4, 8, 12 недель или в течение по меньшей мере 2, 4, 8, 12 недель. В предпочтительных вариантах осуществления ее дают (или предписывают давать, или назначают) в течение первых 4, 8 или 12 недель жизни младенца. Считается, что раннее начало (при рождении или вскоре после рождения) является предпочтительным для обеспечения предполагаемого воздействия.

Ожидается, что здоровье будет более крепким или сформируется быстрее при использовании композиции изобретения в качестве исключительного источника питания. В одном варианте осуществления воздействие на здоровье наблюдается, если композиция изобретения покрывает 50% или более или 75% или более потребности в питании (например, потребности в энергии) целевой группы младенцев или детей младшего возраста.

Пример 1

В таблице 1 представлены примеры композиции изобретения.

Таблица 1

На литр	Единицы измерения	Контрольная смесь	Смесь sn2	Смесь sn2 + 3 г/л OF	Смесь sn2 + 5 г/л OF
Энергетическая ценность	Ккал	670	670	670	670
Белки	г	13,4	13,4	13,4	13,4
Жиры	г	36	36	36	36
% C16 в положении sn2	% общего содержания жиров	2,6	9,6	9,6	9,6
Углеводы	г	73	73	73	73
Олигофруктоза	г	0	0	3	5
Витамин A (РЭ)	мкг	660	660	660	660
Витамин D	мкг	10,6	10,6	10,6	10,6
Витамин E (ТЭ)	мг	7,4	7,4	7,4	7,4
Витамин K	мкг	67	67	67	67
Витамин B₁	мкг	1000	1000	1000	1000
Витамин B₂	мкг	1100	1100	1100	1100
Витамин B₆	мкг	550	550	550	550
Витамин B₁₂	Мкг	1,8	1,8	1,8	1,8
Ниацин	мкг	5000	5000	5000	5000
Фолиевая кислота	мкг	107	107	107	107
Пантотеновая кислота	мкг	3500	3500	3500	3500
Биотин	мкг	20	20	20	20
Витамин С	мг	90	90	90	90
Холин	мг	100	100	100	100
Инозит	мг	45	45	45	45
Таурин	мг	47	47	47	47
Лютеин	мкг	25	25	25	25
Каротины	мкг	210	210	210	210
Кальций	мг	420	420	420	420
Фосфор	мг	240	240	240	240
Магний	мг	45	45	45	45
Железо	мг	8	8	8	8
Цинк	мг	6	6	6	6
Марганец	мкг	50	50	50	50
Медь	мкг	333	333	333	333
Йод	мкг	100	100	100	100
Натрий	мг	160	160	160	160
Калий	мг	650	650	650	650
Хлорид	мг	433	433	433	433
Селен	мкг	14	14	14	14
Фторид	мкг	25	25	25	25
Нуклеотиды	мг	26	26	26	26
ЦМФ	мг	13	13	13	13
УМФ	мг	5,0	5,0	5,0	5,0
АМФ	мг	4,0	4,0	4,0	4,0
ГМФ	мг	2,0	2,0	2,0	2,0
ИМФ	мг	2,0	2,0	2,0	2,0

Приведенные выше в таблице 1 композиции дополнительно содержат смесь олигосахаридов по п. 1 (также называемую «BMOS», как описано выше), то есть

- от 0,0015 до 0,005 г/100 ккал N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), и

- от 0,70 до 1,5 г/100 ккал галактоолигосахарида (-ов), и

- от 0,0045 до 0,0085 г/100 ккал сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В дополнительном примере смеси олигосахаридов приведенного выше примера содержат:

- от 0,1 до 4,0 мас.% N-ацетилированного (-ых) олигосахарида (-ов), и

- от 92,0 до 98,5 мас.% галактоолигосахарида (-ов), и

- от 0,3 до 4,0 мас.% сиалилированного (-ых) олигосахарида (-ов).

В дополнительных примерах приведенные выше композиции также содержат соответственно пробиотик Bifidobacterium animalis вида lactis (BB12™ или в альтернативном варианте осуществления CNCM I-3446) в количестве 10⁶(контрольная смесь), 10⁸(смесь sn2), 10⁹ (смесь sn2 + 3 г OF), 10¹⁰ (смесь sn2 + 5 г OF) КОЕ/г композиции.

Дополнительные примеры питательной композиции для применения в соответствии с настоящим изобретением приведены ниже в таблице 2. Эти композиции приводятся исключительно в качестве иллюстрации. Источник белка представляет собой смесь 60% MSWP28 и 40% казеина.

Таблица 2

Питательное вещество	На 100 ккал	На литр
Энергетическая ценность (ккал)	100	670
Белки (г)	1,83	12,3
Жиры (г)	5,3	35,7
Линолевая кислота (г)	0,79	5,3
α-Линоленовая кислота (мг)	101	675
Лактоза (г)	11,2	74,7
Пребиотики-олигосахариды BMOS (г) (как описано выше) Необязательно: GOS (г)	1,1 0,64	7,5 4,3
Минеральные вещества (г)	0,37	2,5
Na (мг)	23	150
K (мг)	89	590
Cl (мг)	64	430
Ca (мг)	62	410
P (мг)	31	210
Mg (мг)	7	50
Mn (мкг)	8	50
Se (мкг)	2	13
Витамин A (мкг РЭ)	105	700
Витамин D (мкг)	1,5	10
Витамин E (мг ТЭ)	0,8	5,4
Витамин K1 (мкг)	8	54
Витамин С (мг)	10	67
Витамин В1 (мг)	0,07	0,47
Витамин В2 (мг)	0,15	1,0
Ниацин (мг)	1	6,7
Витамин В6 (мг)	0,075	0,50
Фолиевая кислота (мкг)	9	60
Пантотеновая кислота (мг)	0,45	3
Витамин B12 (мкг)	0,3	2
Биотин (мкг)	2,2	15
Холин (мг)	10	67
Fe (мг)	1,2	8
I (мкг)	15	100
Cu (мг)	0,06	0,4
Zn (мг)	0,75	5
Пробиотик (необязательно): Bifidobacterium lactis NCC2818 (CNCM I-3446),	1 x 10⁷ КОЕ/г порошка

Пример 2: Клиническое исследование

Исследование с вмешательством во вскармливание. К участию в исследовании с вмешательством во вскармливание привлекали 115 здоровых доношенных младенцев со средним возрастом 5 дней. Младенцы от матерей, которые решили не кормить ребенка грудью, были случайным образом распределены либо в группу начальной детской смеси (контрольная смесь C, n = 37, 1,8 г белка/100 ккал; соотношение сыворотки/казеина 70 : 30), либо в группу той же смеси, но с добавлением пребиотика (BMOS) с общей концентрацией олигосахарида 5,7 ± 1,0 г/100 г порошковой смеси (8 г/л растворенной смеси) и пробиотика (B. lactis штамм CNCM-I-3446 с 1 x 10⁷ КОЕ/г порошковой смеси; 1,4 x 10⁷ КОЕ/л растворенной смеси) (исследуемая смесь T, n = 39) в течение 12-недельного периода вскармливания. Младенцев от матерей, которые решили кормить ребенка исключительно грудью, включили в группу грудного вскармливания (группа B, n = 39), которая служила физиологической референтной группой. Термин BMOS, использованный в данном исследовании, соответствует определению в настоящем изобретении.

Характеристики кала. В проведенном согласно протоколу анализе за время наблюдения количество дефекаций уменьшилось с 4,9 до 2,4 дефекаций в день, без различий между группами (p > 0,4).

В ходе исследования вскармливания младенцы из группы T, но не из группы C продемонстрировали долю желтоватых, а не зеленоватых фекалий, эквивалентную таковой в группе B (фиг. 5). Цветовое сходство является индикатором сходной/близкой микробиоты.

Консистенция стула: На фиг. 1 приводятся данные о консистенции стула, наблюдавшиеся для различных групп субъектов (B: грудное вскармливание, C: контроль и T: исследуемая группа) через < 2 недели, 6 недель и 12 недель. Результаты приводятся для всех исследуемых популяций и показывают, что композиция настоящего изобретения (группа «T») приводит к такой тенденции консистенции стула, которая ближе к группе «B» (находящейся на грудном вскармливании), чем к контрольной группе «С». К 6 неделям у младенцев в группах Т и В отмечался близкий pH стула, тогда как у младенцев группы C регистрировался гораздо более высокий рН стула (данные не показаны). Младенцы из групп Т и С не отличались по показателям срыгивания, рвоты, плача, колик, метеоризма и возбудимости (данные не показаны). Поскольку исследуемая группа (Т) была ближе к группе (В), находящейся на грудном вскармливании, чем к контрольной группе, был сделан вывод, что младенцы, получавшие композицию настоящего изобретения, были в меньшей степени подвержены диарее, не связанной с ротавирусом (у инфицированных ротавирусом в любом случае отмечался бы очень жидкий стул).

Микробиологический анализ кала: количественная ПЦР в реальном времени. Образцы кала были собраны у младенцев до первого применения продукта, а также в возрасте 6 и 12 недель, когда они находились на назначенной диете. В проведенном согласно протоколу анализе на каждую группу и временную точку были доступны образцы кала от 18–23 младенцев. Пробы кала собирали в каждый момент времени, подвергали холодильной обработке при 4°C в течение максимум 10 часов после дефекации и хранили замороженными при -80°C до проведения анализа микробиоты. Общую ДНК выделяли, используя набор QIAamp DNA Stool Mini Kit (QIAGEN) в соответствии с инструкциями производителя, за исключением того, что была добавлена серия стадий механического разрушения (11 × 45 с) с помощью аппарата FastPrep и пробирок Lysing Matrix B (MP Biochemicals). Для таксономической дифференциации использовали генные праймеры 16S рРНК. Общее количество бифидобактерий от момента привлечения к исследованию и до 6-недельного возраста увеличивалось во всех трех группах, после чего оставалось неизменным до 12-недельного возраста (фиг. 4A). По сравнению с младенцами группы C младенцы группы T демонстрировали более выраженное увеличение титра бифидобактерий на 0,8 log. В группе T итоговый титр бифидобактерий в фекалиях составил 0,8 x 10¹⁰ бактерий/г кала, что существенно выше, чем в группе C и в группе B. Количество Bacteroides и lactobacilli в кале оказалось в 10 раз выше и в 10 раз ниже соответственно у младенцев группы C по сравнению с младенцами группы T (данные не показаны и фиг. 4B).

Чтобы обеспечить дополнительную детализацию по роду бифидобактерии, использовали набор праймеров для количественной ПЦР, основанный на гене groEL, позволяющий обнаружить 12 видов бифидобактерий B. bifidum и B. longum (фиг. 4C и 4D).

Композиция микробиоты: индекс разнообразия. Анализ микробиоты дополнили пиросеквенированием генов 16S рРНК. Вариабельный участок 16S с V1 по V3 подвергали ПЦР-амплификации и секвенировали на приборе Roche 454 GS-FLX-Titanium Sequencer. Необработанные данные секвенирования анализировали, используя программные пакеты Mothur v.1.33.0 (Schloss, P. D., S. L. Westcott, T. Ryabin, J. R. Hall, M. Hartmann, E. B. Hollister, R. A. Lesniewski, B. B. Oakley, D. H. Parks, C. J. Robinson, J. W. Sahl, B. Stres, G. G. Thallinger, D. J. Van Horn and C. F. Weber (2009). “Introducing mothur: Open-source, platform-independent, community-supported software for describing and comparing microbial communities.” Applied and Environmental Microbiology 75(23): 7537–7541.) и QIIME v.1.8 (Caporaso,J.G., Kuczynski,J., Stombaugh,J., Bittinger,K., Bushman,F.D., Costello,E.K. et al. (2010b) QIIME allows analysis of high-throughput community sequencing data. Nat Methods 7: 335–336). Выполняли выделение оперативных таксономических единиц (OTU) de novo с идентичностью 97%, и таксономическое распределение репрезентативных последовательностей OTU осуществляли с использованием RDP Classifier по референтной базе данных Greengenes v.13.8. Те же последовательности подвергали выравниванию с использованием PyNast по стандартным образцам из ядра базы Greengenes. Полученные множественные выравнивания затем фильтровали с построением филогенетического дерева с помощью FastTree. После фильтрации по качеству вычисляли филогенетические расстояния между всеми образцами на основе дистанций UniFrac. После анализа и исключения объектов изучения с неполными наборами данных получали композиции фекальной микробиоты для всех трех временных точек по меньшей мере для 13 младенцев в группе. На фиг. 3 сравнивается α-разнообразие для всех трех групп в исходном состоянии и через 6 и 12 недель вскармливания (вычисление с помощью пакета Calypso, http://bioinfo.qimr.edu.au/calypso). В исходном состоянии три группы кормления существенно не различались по разнообразию микроорганизмов (по индексу Шеннона). В возрасте 6 недель младенцы группы C демонстрировали более высокий индекс разнообразия из-за увеличения как насыщенности, так и однородности по сравнению с младенцами группы T и группы B. В возрасте 12 недель группа C, но не группа T, отличалась от группы B по разнообразию и насыщенности. Измеренную по Unifrac дистанцию (которая учитывает филогенетическое расстояние между OTU) вычисляли для разных образцов, используя пакет QIIME. Далее в пределах каждой группы анализировали распределение дистанций для каждого образца в сравнении с образцами группы, находящейся на грудном вскармливании. Статистическую значимость определяли по U-критерию Манна-Уитни (фиг. 2). Композиция общей микробиоты младенцев, получавших смесь с B. lactis и BMOS (группа T), отличалась от микробиоты группы, получавшей контрольную смесь (C), и филогенетически была более близкой к группе, находящейся на грудном вскармливании (B).

В целом, данный пример показывает, что определенная смесь олигосахаридов, которая использовалась в настоящем изобретении, стимулирует рост бифидобактерий in vivo и может также снижать рост стрептококка и/или E.Coli, одновременно индуцируя характеристики стула, близкие к наблюдаемым у младенцев на грудном вскармливании.

Пример 4: Дальнейшее клиническое исследование

Вмешательство во вскармливание; рандомизированное двойное слепое контролируемое исследование.

В многоцентровом рандомизированном контролируемом двойном слепом исследовании, проведенном в Южной Африке, проверяли влияние детской смеси, обогащенной пребиотиком, т.е. смесью олигосахаридов из коровьего молока (BMOS), полученной из фильтрата молочной сыворотки (содержащего галактоолигосахариды и молочные олигосахариды, такие как 3’- и 6’-сиалиллактоза), и пробиотиком Bifidobacterium animalis подвида lactis (B. lactis), штамм CNCM I-3446, на концентрацию бифидобактерий в кишечнике младенцев, родившихся как посредством вагинальных родов, так и посредством кесарева сечения, на ранних сроках жизни. Дополнительно оценивали безопасность новой рецептуры. Термин BMOS, использованный в данном исследовании, соответствует определению в настоящем изобретении.

В данном многоцентровом исследовании в общей сложности 430 здоровых младенцев, родившихся в срок у ВИЧ-положительных матерей, которые решили кормить своего ребенка исключительно смесью с рождения (≤ 3-дневного возраста), были случайным образом распределены по 4 параллельным группам. В популяцию полного анализа (FAS) вошел в общей сложности 421 младенец, получавший любую исследуемую смесь.

Первые две группы состояли из младенцев, родившихся посредством кесарева сечения, которым предписали исследуемую детскую смесь (n = 92) (начальная смесь с BMOS при общем содержании олигосахаридов 5,8 ± 1,0 г/100 г порошковой смеси (8 г/л растворенной смеси) + B. lactis (1 x 10⁷ КОЕ/г)) или контрольную детскую смесь (n = 101), а вторые две группы состояли из младенцев, родившихся вагинальным способом, случайным образом распределенных по таким же группам исследуемой смеси (n = 115) или контрольной смеси (n = 113), на время от привлечения к исследованию и до возраста 6 месяцев.

Первичным результатом по эффективности было количество бифидобактерий в кале в возрасте 10 дней, а первичным результатом по безопасности был ежедневный набор веса (г/день) в возрастной период от 10 дней и до 4 месяцев.

В возрасте 10 дней количество бифидобактерий в кале в группе исследуемой смеси было существенно выше, чем в группе контрольной смеси, среди младенцев, родившихся посредством кесарева сечения (медиана [диапазон] log: 9,41 [6,30–10,94] КОЕ/г по сравнению с 6,30 [6,30–10,51] КОЕ/г, критерий Уилкоксона, p = 0,002), но не среди младенцев, родившихся вагинальным способом (медианы [диапазон] логарифма: 10,06 [5,93–10,77] КОЕ/г по сравнению с 9,85 [6,15–10,79] КОЕ/г, p = 0,126). Нижняя граница 2-стороннего 95% доверительного интервала различий в среднем ежедневном наборе веса между группами исследуемой смеси и контрольной смеси составила более -3 г/день как среди младенцев, родившихся посредством кесарева сечения, так и родившихся вагинальным способом, и это указывает, что рост младенцев, получавших исследуемую смесь, был не ниже, чем у младенцев, получавших контрольную смесь.

В возрасте 10 дней и 4 недель pH кала младенцев, вскармливаемых исследуемой смесью, был существенно ниже, чем у получавших контрольную смесь, независимо от типа родов: для вагинальных родов: 4,93 по сравнению с 5,59 p < 0,001 (10 дней) и 5,01 по сравнению с 5,71 p < 0,001 (4 недели), для кесарева сечения: 5,14 по сравнению с 5,65 p = 0,009 (10 дней), 5,06 по сравнению с 5,75 p < 0,001 (4 недели). В возрасте 3 месяцев этот эффект подкисления сохранялся только среди младенцев, родившихся посредством кесарева сечения. Детская смесь, обогащенная пребиотиком BMOS и пробиотиком B. lactis, индуцировала сильный бифидогенный эффект у групп обоих типов родов, но наиболее явное изменение в сравнении с врожденным низким уровнем бифидобактерий наблюдалось у младенцев, родившихся посредством кесарева сечения. Обогащенная детская смесь снижала pH кала и улучшала фекальную микробиоту как у младенцев, родившихся естественным путем, так и у родившихся посредством кесарева сечения.

Подробные результаты (см. также фиг. 6)

В популяции FAS количество бифидобактерий в возрасте 28 дней и 3 месяцев (84 дня) также было существенно более высоким в группе исследуемой смеси, чем в группе контрольной смеси, среди младенцев, родившихся посредством кесарева сечения (квадраты на фиг. 6). В возрасте 28 дней медианы [диапазон] логарифма количества бифидобактерий составляли 10,15 [6,30–10,96] КОЕ/г и 9,00 [6,30–10,77] КОЕ/г в группах исследуемой смеси и контрольной смеси соответственно (непараметрический критерий Уилкоксона, p = 0,001). В возрасте 84 дней медианы [диапазон] логарифма количества бифидобактерий составляли 10,40 [6,50–10,79] КОЕ/г и 9,67 [6,30–10,50] КОЕ/г в группах исследуемой смеси и контрольной смеси соответственно (непараметрический критерий Уилкоксона, p < 0,001).

Среди родившихся вагинальным способом младенцев (треугольники на фиг. 6) в группе исследуемой смеси также наблюдалось достоверное увеличение количества бифидобактерий в возрасте 28 дней и 84 дней по сравнению с группой контрольной смеси. В возрасте 28 дней медианы [диапазон] логарифма количества бифидобактерий составляли 10,25 [6,75–10,98] КОЕ/г и 9,66 [6,30–10,31] КОЕ/г в группах исследуемой смеси и контрольной смеси соответственно (непараметрический критерий Уилкоксона, p < 0,001). В возрасте 84 дней медианы [диапазон] логарифма количества бифидобактерий составляли 10,45 [8,22-10,96] КОЕ/г и 9,95 [6,30-10,17] КОЕ/г в группах исследуемой смеси и контрольной смеси соответственно (непараметрический критерий Уилкоксона, p < 0,001).

Общее количество бактерий в возрасте 3 и 10 дней в группах исследуемой смеси и контрольной смеси существенно не отличались, независимо от типа родов (данные не показаны). Однако в возрасте 4 недель общее количество бактерий было более высоким в группах исследуемой смеси при обоих типах родов, а в возрасте 3 месяцев оно было выше в группе исследуемой смеси только среди младенцев, родившихся вагинальным способом (данные не показаны).

В группах исследуемой смеси обнаруживаемые виды бифидобактерий имелись у более высокой доли младенцев, чем в группах контрольной смеси, вплоть до 4 недель (данные не показаны). Виды lactobacillus обнаруживались у более высокой доли младенцев в возрасте 4 недель и 3 месяцев, у групп младенцев, родившихся посредством кесарева сечения и вагинальным способом соответственно, в группах исследуемой смеси по сравнению с группой контрольной смеси. В возрасте 10 дней, 4 недель и 3 месяцев B. lactis обнаруживались у существенно более высокой доли младенцев в группах исследуемой смеси по сравнению с группами контрольной смеси (данные не показаны). Виды кишечной палочки (E. coli) и стафилококков (Staphylococcus), энтеробактерий (Enterobacteria) и клебсиелл (Klebsiella) обнаруживались у существенно более высокой доли младенцев в группе контрольной смеси, чем в группе исследуемой смеси (данные не показаны).

1. Применение питательной композиции, содержащей по меньшей мере один N-ацетилированный олигосахарид, и по меньшей мере один галактоолигосахарид, и по меньшей мере один сиалилированный олигосахарид в следующем количестве:

N-ацетилированные олигосахариды от 0,001 до 1 мас.%, предпочтительно от 0,003 до 0,3 мас.%;

галактоолигосахариды от 1 до 10 мас.%, предпочтительно от 3 до 6 мас.%;

сиалилированные олигосахариды от 0,005 до 1 мас.%, предпочтительно от 0,01 до 0,4 мас.%;

все расчеты приведены в мас.% композиции,

для стимулирования или индуцирования кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, и для профилактики, и/или лечения, и/или снижения степени тяжести, и/или риска, и/или распространенности диареи, не связанной с ротавирусом, у младенцев или детей младшего возраста в возрасте от 0 до 36 месяцев, необязательно от 0 до 12 месяцев или от 0 до 6 месяцев, причем указанное стимулирование или индуцирование кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, характеризуется тем, что включает увеличение популяции бифидобактерий и подавление популяции Streptococcus.

2. Применение по п. 1, причем указанная композиция дополнительно содержит пробиотик Bifidobacterium animalis вида lactis, необязательно CNCM-I-3446, необязательно в количестве от 10⁵до 10¹² КОЕ/г композиции, предпочтительно от 10⁶ до 10⁸ КОЕ/г композиции.

3. Применение питательной композиции по п.2 для стимулирования или индуцирования кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, по сравнению с микробиотой младенцев, вскармливаемых преимущественно традиционной питательной композицией, не содержащей указанного пробиотика, у младенцев или детей младшего возраста в возрасте от 0 до 36 месяцев, необязательно от 0 до 12 месяцев.

4. Применение по любому из предшествующих пунктов, причем указанные младенцы родились с ослабленной или несбалансированной микробиотой или с дисбиозом микробиоты, например недоношенные младенцы, младенцы, рожденные маленькими для своего гестационного возраста, младенцы, рожденные посредством кесарева сечения, госпитализированные младенцы или младенцы, пролеченные или получающие лечение антибиотиками.

5. Применение по любому из предшествующих пунктов, причем указанная композиция дополнительно содержит олигофруктозу, при этом предпочтительно указанные по меньшей мере 90%, 99% или 100% указанной олигофруктозы имеют степень полимеризации от 2 до 8.

6. Применение по любому из предшествующих пунктов, причем указанная композиция дополнительно содержит жиры, и по меньшей мере 8%, предпочтительно по меньшей мере 9,6% указанных жиров представляют собой sn2-пальмитат.

7. Применение по любому из предшествующих пунктов, причем указанная композиция дополнительно содержит триглицериды, имеющие более 33% пальмитиновой кислоты в положении sn2.

8. Применение по любому из предшествующих пунктов, причем указанная композиция представляет собой детскую смесь или смесь для прикармливаемых детей.

9. Применение по любому из предшествующих пунктов, причем указанная композиция дополнительно содержит белки альфа-лактальбумина в количестве по меньшей мере 0,3 г/100 ккал или 2,3 г/л композиции.

10. Применение по любому из пп. 1-3, причем указанное стимулирование или индуцирование кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, дополнительно характеризуется тем, что включает увеличение популяции B. animalis, и/или B. Longum, и/или Lactobacillus и/или подавление популяций Coprobacillus.

11. Применение по любому из пп. 1-3 или 10, причем указанное стимулирование или индуцирование кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, дополнительно характеризуется стимулированием или индуцированием кишечной микрофлоры, имеющей филогенетическую дистанцию до микробиоты младенцев, находящихся на грудном вскармливании, менее 0,3 единицы (измеренных методом Unifrac), предпочтительно менее 0,25 единицы.

12. Применение по любому из пп. 1-3, 10 или 11, причем указанное стимулирование и/или индуцирование кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, может быть измерено в кале младенцев, необязательно может быть измерено в возрасте или после достижения возраста 1, 4, 6 или 8 недель и необязательно после 1, 4, 6 или 8 недель вскармливания указанной питательной композицией.

13. Применение по любому из предшествующих пунктов, причем указанную композицию дают или предписывают давать в течение первых 1, 2, 4, 8 или 12 недель жизни.

14. Применение по любому из пп. 1-3, 10, 11 или 12, причем указанное стимулирование и/или индуцирование кишечной микробиоты, которая похожа на микробиоту младенцев, вскармливаемых исключительно человеческим грудным молоком, дополнительно характеризуется стимулированием и/или индуцированием нормального роста, здоровой иммунной системы и/или здоровой функции кишечника, особенно в дальнейшей жизни.

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к паштету белковому функционального назначения, и предназначено для питания спортсменов и лиц с большими физическими нагрузками.

Пищевой ароматизатор на основе аромата клубники // 2748167

Изобретение относится к пищевой промышленности. Предложенный пищевой ароматизатор на основе аромата клубники содержит в мас.%: фуранеола 0,1-0,4, цис-3-гексенола 2,0-5,0, этилкапроата 1,0-5,0, этил-2-метилбутирата 0,5-5,0, метилциннамата 0,5-5,0, ванилина 1,0-5,0, этилванилина 0,5-2,0, этилбутирата 0,5-3,0, гамма-ноналактона 1,0-5,0, масляной кислоты 0,5-2,0, капроновой кислоты 0,5-2,0, ацетоин димера 0,1-1,0, дельта-декалактона 0,1-0,5, дельта-додекалактона 0,1-0,5, диэтилмалоната 0,1-0,5, бутил 2-метилбутирата 0,5-2,0, 2-метилбутил-3-метилбутаноата 0,5-2,0, среднецепочечные триглицериды в виде смеси триглицеридов каприловой (С8) и каприновой (С10) кислот 2,0-5,0 и неактивного компонента - до 100 мас.%.

Способ получения индигокармина // 2748041

Изобретение относится к способу получения динатрий-5,5'-индигосульфоната, который находит применение в качестве красителя в пищевой, фармацевтической и косметической отрасли, а также в области печати и фотографии.

Питательный состав для улучшения клеточных мембран // 2748025

Изобретение относится к области питания, влияющего на развитие головного мозга. Предложено применение липида в производстве питательного состава для улучшения состава жирных кислот в клеточных мембранах у человека.

Способ производства пельменей на пару // 2747865

Группа изобретений относится к пищевой промышленности, а именно к способу производства формованного изделия из теста с начинкой и формованному изделию. Способ включает приготовление начинки, состоящей из мясного и/или куриного и/или овощного фаршей, приготовление тестовой оболочки из муки высших сортов зерновых культур, формирование изделия из оболочки и начинки, нанесение на поверхность изделия фритюрного масла, выбранного из группы, включающей подсолнечное, кукурузное и рапсовое, варку изделия на пару до готовности, замораживание и упаковывание изделия в тару.

Витаминно-пребиотическое иммуностимулирующее средство // 2747780

Изобретение относится к производству препаратов витаминов, содержащих аскорбиновую кислоту, пребиотики и иммуностимуляторы. Предложено витаминно-пребиотическое иммуностимулирующее средство, которое представляет собой таблетку массой от 0,95 до 4,00 г и содержит витамины, пребиотики, иммуностимуляторы, связующие, лубриканты, вкусоароматические добавки, при этом в качестве витаминов содержит аскорбиновую кислоту и/или премикс поливитаминный Н30305, в качестве пребиотиков - изомальт, мальтит, эритрол, инулин и/или их смеси, в качестве иммуностимуляторов - экстракты и/или измельченные и высушенные пряности корня имбиря, листьев карри, базилика, куркумы и/или их смеси, при следующем соотношении исходных компонентов, мас.%: витамины 0,58-11,05; пребиотики 46,11-94,93; иммуностимуляторы 2,5-12,5; связующие 0,00-25,26; лубриканты 0,74-2,00; вкусоароматические добавки 0,00-8,42.

Жареное колбасное изделие // 2747699

Изобретение относится к мясной промышленности, а именно к производству изделий колбасных жареных. Жареное колбасное изделие включает свинину, соль, перец черный молотый, фенхель, сахар-песок, чеснок свежий очищенный.

Способ производства желейного фруктово-овощного мармелада, обогащенного биологически активными веществами левзеи сафлоровидной и чаги // 2747629

Изобретение относится к пищевой промышленности, а именно к кондитерской отрасли, и может быть использовано для производства мармелада функционального назначения. Заявленный способ производства желейного фруктово-овощного мармелада предусматривает подготовку сырья, приготовление рецептурной смеси, уваривание массы, охлаждение, добавление желатина, лимонной кислоты и экстрактов, формование, сушку.

Ионы магния в качестве антибактериального агента // 2747301

Группа изобретений относится к молочной промышленности. Пищевая композиция содержит пастеризованное молоко, обогащенное магнием, с концентрацией ионов магния от 8 до 25 миллимоль на литр (мМ), где присутствует менее чем 1 КОЕ/мл.

Природные инкапсулированные ароматизирующие продукты // 2747237

Изобретение относится к инкапсулированию природных ароматизирующих продуктов. Экструзионный инкапсулированный ароматизирующий продукт в форме частиц, свободный от химической модификации, содержит жидкий ароматизатор, инкапсулированный в природную стеклообразную матрицу.