2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека



2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека
2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1н-пиррол-3-карбоксамид, проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека

Владельцы патента RU 2753480:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к области медицины, конкретно к 2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамиду формулы I, который проявляет цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека и может найти применение для лечения онкологических заболеваний. 2 ил., 1 табл.

 

Заявляемое соединение относится к области медицины, производным 2-аминопиррола, а именно к новому биологически активному 2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамиду I, имеющему формулу:

,

который может найти применение в медицине в качестве лекарственного противоопухолевого препарата.

Задачей изобретения является получение 2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида (2-АБФПК), который может быть использован в медицине в качестве действующего вещества лекарственного препарата для лечения опухолевых заболеваний.

Ближайшим структурным аналогом к заявленному соединению являются соединения общей формулы II, проявляющие противоопухолевую, антиоксидантную активность и описаны в патенте:

2-Амино-1-арил-5-(3,3-диметил-2-оксо-бутилиден)-4-оксо-N-(тиазол-5-ил)-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамиды, проявляющие противоопухолевую и антирадикальную активность, способ их получения и фармацевтическая композиция на их основе: патент на изобретение РФ №2605091 по заявке 2015117807: МПК C07D 417/12, А61К 31/427, А61Р 35/00 / С.С. Зыкова, С.В. Бойчук, Н.М. Игидов, Т.Ф. Одегова, А.В. Захматов, А.Р. Галембикова, Б.Р. Рамазанов. - Заявл. 12.05.2015.

В качестве прототипа биологической активности нами взят противоопухолевый препарат - паклитаксел [Патент №2059631, МПК C07D 305/14, А61К 31/195. Производные таксола и фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью: №91 5010248: заявл. 29.11.1991: опубл. 10.05.1996 / Валентино Дж. Стелла, Абрахам Е. Мэтью].

LD50 паклитаксела в тесте острой токсичности составляет 48 мг/кг.

Заявляемое соединение 2-АБФПК в тесте острой токсичности на мышах при внутрибрюшинном введении в виде суспензии в 2% крахмальной слизи имеет токсичность более 1000 мг/кг [Колла В.Э., Сыропятов Б.Я. Дозы лекарственных средств и химических соединений для лабораторных животных, М.: Медицина, 1998, 263 с.]

Целью предлагаемого изобретения является биологическая активность не описанного 2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1H-пиррол-3-карбоксамида (I, 2-АБФПК) проявляющего цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека. Поставленная цель достигается получением 2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида (I) взаимодействием 4-(4-бромфениламино)-2-трет-бутил-5-оксо-2,5-дигидрофуран-2-илацетата (II) с цианоацетамидом в присутствии триэтиламина в среде толуола по схеме:

Методика получения 2-амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамида. 1.84 г (0.005 моль) 2-трет-бутил-4-(4-бромфениламино)-2,5-дигидро-5-оксофуран-2-илацетата (I) и 0.42 г (0.005 моль) цианоацетамида растворяли при нагревании в 90 мл толуола, добавляли 0.5 г (0.005 моль) триэтиламина, кипятили в течение 20 минут. Выпавший осадок отфильтровывали и перекристаллизовывали из этанола. Получали 1.04 г (62%) кристаллического вещества (I) с Тпл 209-210°С. C13H9BrN3O3. ИК-спектр, ν/см-1, вазелиновое масло: 3414 (NH), 3309 (NH), 1689 (С=O), 1673 (С=O), 1621 (C=N, С=С). Спектр ЯМР 1Н, δ, м.д.: 1.09 с (9Н, (t-Bu), 5.61 с (1Н, СН), 6.87 уш. с (1Н, NH), 7.34 уш. с (1Н, NH), 7.40 д (2Наром, J 8.6 Гц), 7.79 д (2Наром, J 8.4 Гц), 8.18 уш. c (1H, NH), 8.51 уш. с (1Н, NH).

Спектр ЯМР 13С, δ, м.д.: 26.12, 44.12, 88.59, 110.08, 122.64, 128.08, 128.78, 131.05, 131.81, 133.29, 140.64, 165.07, 166.24, 176.02, 207.75.

Заявляемое соединение представляет собой светло-желтое кристаллическое вещество, растворимое в ДМФА, уксусной кислоте, при нагревании - в этиловом спирте, устойчивое при хранении. Далее проводили контроль степени чистоты соединения при помощи тонкослойной хроматографии (ТСХ). Степень чистоты составила более 98%.

Сравнение цитотоксической активности паклитаксела и 2-АБФПК было проведено по общепринятой методике: были приготовлены маточные растворы в ДМСО. Маточный раствор прототипа готовили следующим образом: 1 мг паклитаксела (Sigma-algrich T7191) в 1,17 мл ДМСО (Хеликон, Am-O231-0.1) с конечной концентрацией 1 мМ. 2-АБФПК растворяли также в ДМСО, маточный раствор готовили растворением 0,013 г 2-АБФПК в 1,25 мл ДМСО с конечной концентрацией 5 мМ и 10 мМ.

Паклитаксел и 2-АБФПК добавляли к культурам опухолевых клеток клеточных линий лейомиосаркомы (SK-LMS-1), рабдомиосаркомы (RD), фибросаркомы (НТ1080), остеосаркомы (U2OS), рака молочной железы (НСС1806), а также гастроинтестинальных опухолей (GIST).

Изобретение подтверждается следующими графическими материалами, на которых представлено:

На фиг. 1 - результаты световой микроскопии клеток гастроинтестинальной стромальной опухоли (GIST - T1-R) под действием 2-АБФПК и паклитаксела (положительный контроль) в течение 24 часов культивирования.

На фиг. 2 - уровень экспрессии расщепленной формы ПАРП в клетках ГИСО под действием 2-АБФПК, паклитаксела и винбластина.

При изучении морфологических изменений опухолевых клеток человека под действием 2-АБФПК было обнаружено изменение их формы. Опухолевые клетки приобретали округлую форму, что соответствует их селективному накоплению в митозе. Аналогичные изменения наблюдались при инкубации опухолевых клеток с прототипом паклитакселом (Фигура 1), относящихся к группе препаратов - "митотических ядов", вызывающих необратимую полимеризацию тубулина, остановку деления клеток в М-фазе клеточного цикла и последующий запуск апоптоза вследствие незавершенности процессов деления.

Методом колориметрического MTS-теста была выявлена половинная ингибирующая доза (IC50) для 2-АБФПК в отношении разных опухолевых клеточных линий и нетрансформированных фибробластов человека (Табл. 1). Важно отметить, что цитотоксичность данного соединения была существенно выше в отношении большинства исследованных опухолевых клеточных линий (за исключением остео- и фибросаркомы) по сравнению с нетрансформированными клетками, что может свидетельствовать о потенциально высоком "терапевтическом окне" у исследуемого соединения. Важно также отметить, что соединение было также эффективным в отношении опухолевых клеток человека, резистентных к прототипу - паклитакселу, а также препаратам сравнения - иматинибу мезилату (см. Таблицу 1).

Для дальнейшего исследования механизмов цитотоксической активности соединения АБФПК была исследована их способность индуцировать клеточную гибель по механизму апоптоза. С этой целью был проанализирован уровень экспрессии расщепленной формы поли-АДФ-рибоза-полимеразы (ПАРП), являющийся традиционным маркером программированной клеточной гибели. Для клеток ГИСО был показан дозозависимый про-апоптотический эффект соединения 2-АБФПК, аналогичный эффекту паклитаксела и превышающий таковой у винбластина. Уровень экспрессии расщепленной формы ПАРП в клетках ГИСО под действием 2-АБФПК, паклитаксела и винбластина представлен на Фигуре 2. Уровень экспрессии белка актина иллюстрирует равную белковую нагрузку в исследуемых образцах. Аналогичные данные были получены на других клеточных линиях ГИСО, сарком и рака молочной железы.

Таким образом, результаты проведенных исследований свидетельствуют о том, что 2-АБФПК оказывает цитотоксический эффект в отношении широкого спектра опухолевых клеток человека, индуцируя их гибель по механизму апоптоза.

2-Амино-1-(4-бромфенил)-5-(3,3-диметил-2-оксобутилиден)-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамид формулы I

,

проявляющий цитотоксическую активность в отношении опухолевых клеток человека.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к новому соединению формулы: или к его фармакологически приемлемой соли, применяемым для профилактического или терапевтического лечения фиброза. В указанных структурных формулах А выбирают из: частично насыщенного или ненасыщенного 5- или 6-членного гетероциклила, выбранного из пирролила, пиразолила, имидазолила, триазолила, имидазолидинила, пирролидинила, пирролидинилидена, дигидропирролила, изоксазолил-дигидрооксазолила, изоксазолидинила, оксазолидинила и оксазолила, где указанный частично насыщенный или ненасыщенный 5- или 6-членный гетероциклил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, представляющими собой оксо, C1-6алкил, амино, гидроксил или галоген; C1-6алкоксиламина; C1-6алкиламина, необязательно замещенного одним или несколькими заместителями, представляющими собой C1-6алкил, C1-6галогеналкил, гидроксил или галоген; С0-6алкил-карбоновой кислоты; C1-6алкилгидроксила; насыщенного или ненасыщенного C0-6алкил-бициклического-гетероциклила, выбранного из индолила, изоиндолила, индолинила и изоиндолинила, где указанный насыщенный или ненасыщенный C0-6алкил-бициклический-гетероциклил необязательно замещен одним или несколькими оксо; и насыщенного или ненасыщенного C1-6алкоксил-бициклического-гетероциклила, выбранного из индолила, изоиндолила, индолинила и изоиндолинила, где указанный C1-6алкоксил-бициклический-гетероциклил необязательно замещен одним или несколькими оксо.

Изобретение относится к производному азола формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где R1 представляет собой атом водорода или С1-5 алкил; R2 представляет собой атом водорода или С1-5 алкил; R3 представляет собой фенил или пиридил (где фенил или пиридил необязательно замещен одним или двумя фрагментами, выбранными из группы, состоящей из С1-5 алкокси, атомов галогена и трифторметила); каждый из R4 и R5, которые могут быть одинаковыми или различными, представляет собой атом водорода или С1-5 алкил (где С1-5 алкил необязательно замещен одним фрагментом, выбранным из группы, состоящей из гидрокси и С1-5 алкокси), или R4 и R5 вместе с соединяющим их атомом азота образуют 4-7-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, необязательно содержащий один циклический атом азота, кислорода или серы, помимо указанного выше соединяющего атома азота (где 4-7-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл необязательно замещен одним или двумя фрагментами, выбранными из группы, состоящей из гидрокси, С1-5 алкила (где С1-5 алкил необязательно замещен одной или двумя гидроксильными группами), C1-5 алкокси, атомов галогена, циано, С2-5 алканоила, аминокарбонила, моно-C1-5 алкиламинокарбонила, ди-C1-5 алкиламинокарбонила, трифторметила, амино, моно-C1-5 алкиламино, ди-С1-5 алкиламино и С2-5 алканоиламино, причем в указанном 4-7-членном насыщенном или ненасыщенном гетероцикле необязательно имеется С1-5 алкиленовый фрагмент, соединяющий два различных циклических атома углерода), или образуют 2-окса-6-азаспиро[3.3]гепт-6-ил или 7-окса-2-азаспиро[3.5]нон-2-ил; азольный цикл, представленный формулой (α), имеет любую из структур формулы группы (II), приведенных в формуле изобретения, и где Ry представляет собой атом водорода или С1-5 алкил; X1 и X2 являются такими, что: (i) если X1 означает простую связь или фрагмент -СО-, X2 означает -С1-5 алкилен- или -О-С1-5 алкилен-; и (ii) если X1 означает фрагмент -CONRx1-, X2 означает простую связь; Rx1 представляет собой атом водорода или C1-5 алкил; и цикл А представляет собой бензольный цикл, пиридиновый цикл (где бензольный цикл необязательно замещен одним или двумя фрагментами, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена и С1-5 алкокси), 5-6-членный насыщенный или частично ненасыщенный гетероцикл, содержащий один или два атома азота (где 5-6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл необязательно замещен одной оксо группой) или С3-7 циклоалкан.

Изобретение относится к новым соединениям формулы (1) или их солям , где R1 означает Н, С1-С6-алкилкарбонил, С1-С6-алкоксикарбонил, SiR7R8R9, где R7, R8, R9 независимо друг от друга означают С1-С6-алкил, фенил-С1-С2-алкоксикарбонил, или R1 означает триметилсилилэтоксиметил (SEM), С1-С2-алкил, причем последний замещен С6-С10-арилом, предпочтительно фенилом, или гетероциклической группой, которая представляет собой моноциклическую насыщенную кольцевую систему с 5 кольцевыми атомами, один из которых является азотом, представляет собой водород или азотзащитную группу.

Изобретение относится к способу получения 1-[(2E,4E)-дека-2,4-диеноил]пирролидина (сарментина), включающем гидроалюминирование-иодирование 1-гептана с получением (1E)-1-иодгепт-1-ена, амидирование акрилхлорида пирролидином с получением 1-акрилоилпирролидина, сочетание (1E)-1-иодгепт-1-ена с 1-акрилоилпирролидином в присутствии Pd(OAc)2, K2CO3 и тетрабутиламмонийхлорида в полярном апротонном растворителе N-метилпирролидона с получением целевого продукта, при следующем мольном соотношении [(1E)-1-иодгепт-1-ен]:[1-акрилоилпирролидин]:[Pd(OAc)2]:[K2CO3]:[Bu4NCl]:[N-метилпирролидон] = 1:1,5:0,02:2,5:1:7,7 в течение 5 ч в атмосфере аргона при 70°C.

Изобретение относится к новым полифункциональным аминокислотным производным фуллерена С60, обладающим биологической активностью, а также к способам их получения и способу ковалентного связывания производных фуллерена с SH-содержащими белками. .

Изобретение относится к получению 1,3-фениленбисмалеимида, который применяется как химический модификатор для резиновых смесей, а также в производстве термоустойчивых полимеров. .

Изобретение относится к биотехнологии и может найти применение в медицине. .

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается способа получения противосудорожного препарата, представляющего собой 3-бензиламинометиленпирролидин-2,4-дион (1), заключающегося в том, что эфиры аминоуксусной кислоты ацилируют хлорангидридами моноэфиров малоновой кислоты в присутствии в качестве растворителя хлороформа, полученный продукт преобразуют в 3-алкоксикарбонилпирролидиндион-2,4 в спиртовом растворителе в присутствии в качестве циклизующего агента алкоголята натрия, полученный продукт декарбалкоксилируют путем трехкратного кипячения с ацетонитрилом, при концентрации продукта (V) 20-30 г/л в реакционной смеси, с последующим охлаждением, фильтрацией, отгонкой ацетонитрила, полученный пирролидин-2,4-дион вводят в реакцию с соответствующим диалкилацеталем диметилформамида или триалкоксиметаном, полученный продукт обрабатывают бензиламином при 0-5oС с последующим выделением целевого продукта.

Изобретение относится к новому способу получения 2,3-пиридиндикарбоксимида формулы (I), где R означает водород, C1-С6 алкил или C1-С6 алкоксиметил, R1 означает водород, C1-С6 алкил, С(O)R2, фенил, бензил, R2 означает C1-С6 алкил, бензил или фенил, который заключается в том, что соединение формулы (II), где R имеет вышеуказанные значения, R6 означает C1-С6 алкил, R7 означает OR8 или NR9R10, R8 означает водород, C1-С6 алкил, С(O)R11, фенил, бензил, R11 означает C1-С6 алкил, OR12, NR12, R13, бензил или фенил, R12 и R13 обозначают водород, C1-С6 алкил, бензил или фенил, R9 и R10 обозначают водород, C1-С6 алкил, бензил или фенил, подвергают взаимодействию с имидом малеиновой кислоты формулы (III), где R1 имеет вышеуказанные значения.

Изобретение относится к новому 2-амино-1-бензамидо-5-[2-(нафталин-1-ил)-2-оксоэтилиден]-4-оксо-4,5-дигидро-1Н-пиррол-3-карбоксамиду формулы I, обладающему цитотоксическими и проапоптогенными свойствами в отношении клеток солидных опухолей человека, в том числе резистентных к химиопрепаратам. Технический результат: получено новое соединение, проявляющее противоопухолевую активность и низкую токсичность.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2020-09-14 2021-08-17T09:40:37
Наверх