Способ оценки содержания меди в печени овец

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

G01N33/00 - Исследование или анализ материалов особыми способами, не отнесенными к предыдущим группам

Изобретение относится к областям животноводства, ветеринарии и экологии и может быть использовано в качестве прижизненного неинвазивного теста оценки степени содержания меди в печени овец. Способ определения концентрации меди в печени овец включает анализ субстрата в виде сыворотки крови. При этом в сыворотке крови определяют концентрацию гормона тестостерона или эстрадиола. Далее рассчитывают уравнения регрессии: у=0,361х+1,05, где у - содержание Cu, мг/кг, в печени, x - содержание тестостерона в сыворотке крови, нмоль/л, или у=0,230х+0,79, где у - содержание Cu (мг/кг) в печени, х - содержание эстрадиола в сыворотке крови, пмоль/л. Изобретение обеспечивает достаточную точность прижизненного определения меди в печени овец. 2 табл.

Предлагаемое изобретение относится к животноводству, экологии, ветеринарии и может быть использовано в качестве теста на степень концентрации меди в печени овец.

Медь является жизненно важным микроэлементом, играет роль в регуляции окислительно-восстановительных, нейроэндокринных процессах, перекисном окислении липидов, а также в формировании соединительной ткани и кроветворении. Также медь выступает в качестве простетического элемента, необратимо связанного с определенными белками. В организме должно быть достаточно данного микроэлемента в связи с его включением в специфические апоферменты для обеспечения синтеза этих белков.

Дефицит меди встречается при нефротическом синдроме, нарушении всасывания в тонком отделе кишечника, состояниях, сопровождающихся повышенной экскрецией или сниженным синтезом церулоплазмина. Дефицит меди отрицательно сказывается на кроветворении, вызывая анемию, и лейкопению. При высокой концентрации меди происходит угнетение активности цитохромоксидазы и аминоксидазы (Авцын П.А. Микроэлементозы человека: этиология, классификация, органопатология / П.А. Авцын, А.А Жаворонков, М.А Риш, Л.С. Строчкова. - М.: Медицина, 1991. - 96 с).

Необходимо определять и контролировать уровень меди в организме животных, так как ее дисбаланс приводит к нарушению гомеостаза организма, что в свою очередь будет сказываться на качестве получаемой продукции.

Известно, что определить содержание меди в мышечной ткани рыбы можно по уровню Си и/или Мп в чешуе (Патент на изобретение RU 2555518 С1. 10.07.2015. Заявка №2014131162/15 от 28.07.2014).

Для крупного рогатого скота и свиней разработаны методы прижизненного определения тяжелых металлов в органах и тканях с использованием волоса (Патент на изобретение RU 2426119 С1. 10.08.2011). Также установлено, что по содержанию Mn в копытном роге свиней можно прижизненно определить концентрацию Cd в почках, мышечной ткани, печени (патент РФ №2342659). А по содержанию Pb и Cd в щетине можно определить уровень Pb в печени (патент РФ №2285990).

Наличие меди в печени овец можно определить путем установления концентрации тестостерона или эстрадиола в сыворотке крови методом ИФА и последующего расчета уравнения регрессии:

у=0,361х+1,05, где

у - концентрация меди в печени (мг/кг),

х - содержание тестостерона в сыворотке крови (нмоль/л), или

у=0,230х+0,79, где

у - концентрация меди в печени (мг/кг),

х - содержание эстрадиола в сыворотке крови (пмоль/л).

Заявленным способом оценивается уровень аккумуляции меди в печени овец романовской породы. Поставленная задача достигается с помощью определения тестостерона или эстрадиола в сыворотке крови с последующим расчетом уравнения регрессии.

Предложенный способ отличается от ранее существующих тем, что концентрация Си в печени овец можно определить прижизненно, а не посмертно, используя в качестве биомаркера уровень тестостерона или эстрадиола в сыворотке крови. При этом обеспечивается точность и простота выполнения метода, а также малая инвазивность.

Эстрадиол и тестостерон определяют методом ИФА. В соответствующие лунки вносилось по 25-50 мкл калибровочной пробы, контрольной сыворотки и исследуемых проб. Во все лунки вносилось по 100-150 мкл конъюгата. Планшет инкубировался в течение 90-120 минут при температуре +37°С (500-800 об/мин). Затем осуществлялась промывка лунок 4-5 раз по 250-300 мкл отмывочного раствора. Во все лунки вносилось 100 мкл раствора ТМБ на 2-3 минуты. Планшет инкубировался в темноте при +37°С 10-20 минут. В конце исследования во все лунки вносилось по 100 мкл стоп-реагент и проводилось измерение оптической плотности в течение 15 минут при длине волны 450 нм.

Пробы печени были взяты у баранчиков романовской породы в возрасте 6-9 мес.

Данные содержании гормонов в сыворотке крови и меди в печени представлены в табл. 1.

Тестостерон играет роль в репродуктивной функции, а также оказывает анаболическое действие, т.е. стимулирует синтез белка. Кроме того, тестостерон может усиливать образование эритроцитов под действием эритропоэтина, чем объясняется большее количество эритроцитов в крови у самцов. Андрогенная активность тестостерона обеспечивает рост и функцию акцессорных органов репродуктивной системы - полового члена, мошонки, простаты и семенных пузырьков. Эстрогены, в т.ч. эстрадиол, влияют на обмен углеводов, белков и пуринов, активизируют дезоксирибонуклеазу, стимулируют остеобласты, улучшают реакции цикла лимонной кислоты. Они существенно изменяют функцию размножения, способствуют развитию молочной железы, понижают активность гипофиза (Д.Ю. Клинский, А.С. Сулайманов и др.). Под влиянием женского полового гормона у животных осуществляется регуляция полового цикла.

В табл. 2 показано, что между изученными показателями имеются средние положительные корреляции. Следовательно, при наличии связей между уровнями гормонов в сыворотке крови и концентрацией меди в печени, можно рассчитать уравнения регрессии. Это позволит прогнозировать в печени содержание меди, установив концентрацию одного из двух гормонов в сыворотке крови на выбор.

Таким образом, предложенные уравнения регрессии позволяют провести прижизненную оценку овец по содержанию меди в печени, используя при этом только пробы сыворотки крови, в которой определяют содержание гормонов тестостерона или эстрадиола.

Способ оценки содержания меди в печени овец, включающий анализ биосубстрата в виде сыворотки крови, отличающийся тем, что определяют в сыворотке крови концентрацию гормонов на выбор, тестостерона или эстрадиола методом ИФА, затем рассчитывают уравнение регрессии и определяют уровень меди в печени:

у=0,361х+1,05, где

у - содержание Cu, мг/кг, в печени,

х - содержание тестостерона в сыворотке крови, нмоль/л, или

у=0,230х+0,79, где

у - содержание Cu, мг/кг, в печени,

х - содержание эстрадиола в сыворотке крови, пмоль/л.

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии, интенсивной терапии, и может быть использовано при прогнозировании риска летального исхода у больных сахарным диабетом 2 типа (СД 2) в сочетании с COVID-19. Для этого у больного СД 2 типа с COVID-19 в крови определяют уровни мочевины, креатинина, аланинаминотрансферазы (АЛАТ), аспартатаминотрансферазы (АСАТ), С-реактивного белка (СРП), международного нормализированного отношения (MHO), Д-димера, лактатдегидрогеназы (ЛДГ), лейкоцитов, скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

Способ прогнозирования неврологического восстановления с 14-го по 90-й дни ишемического инсульта головного мозга // 2764355

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для прогнозирования неврологического восстановления пациентов в период с 14-го по 90-й дни ишемического инсульта головного мозга. Для этого на 14-й день острого ишемического инсульта определяют в венозной крови сывороточные концентрации основного белка миелина (MBP), антитела к нему (anti-MBP), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), нейротрофического фактора мозга (BDNF), оценивают функциональную независимость по шкале Рэнкин (mRS) и неврологический дефицит по Скандинавской шкале инсульта (SSS).

Способ получения антител против амн и их применение // 2764198

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения антител против AMH млекопитающих. Указанный способ предусматривает иммунизацию животного полипептидом AMH или полинуклеотидом, кодирующим указанный полипептид AMH, получение гибридом из клеток лимфоидного органа животного, получившего иммуноген, отбор гибридом, секретирующих антитела, распознающие полипептид AMH, и получение антитела.

Способы выделения, культивирования и генетической инженерии популяций клеток иммунной системы для адоптивной терапии // 2763795

Настоящая группа изобретений относится к клеточной биологии. Предложен способ обогащения CD4+- и CD8+-T-клеток, который предусматривает проведение в замкнутой системе отбора CD4+-клеток и отбора CD8+-клеток из образца, содержащего первичные T-клетки человека, и комбинирование этих клеток в необходимом соотношении, составляющем приблизительно от 10:1 до 1:10.

Способ пробоподготовки образцов изолятов коронавируса sars-cov-2 и олигонуклеотидные праймеры для его реализации // 2762759

Изобретение относится к биотехнологии, медицине, молекулярной биологии, генной инженерии и вирусологии. Описан способ пробоподготовки образцов изолятов коронавируса SARS-CoV-2, включающий стадии: (a) обратной транскрипции РНК вируса; (b) ПЦР с применением двух пулов олигонуклеотидных праймеров, где для первого пула применяют олигонуклеотидные праймеры, имеющие структуру SEQ ID NO: 1-4, с концентрацией в реакционной смеси каждого праймера 0,1 пмоль/мкл, а для второго пула применяют олигонуклеотидные праймеры, имеющие структуру SEQ ID NO: 5-10, с концентрацией в реакционной смеси каждого праймера 0,2 пмоль/мкл; (c) оценки получаемых в ходе амплификации ПЦР-продуктов с помощью электрофореза; (d) объединения ПЦР-продуктов двух пулов; (e) очистки ампликонов от реакционной смеси с использованием парамагнитных частиц с полимерным карбоксилированным покрытием; (f) индексации с использованием олигонуклеотидов, содержащих последовательности, комплементарные адаптерным последовательностям SEQ ID NO: 11-12, и индексные последовательности; (g) повторной очистки от реакционной смеси с использованием парамагнитных частиц с полимерным карбоксилированным покрытием.

Способ определения и количественной оценки специфического клеточного иммунитета к антигенам s-белка вируса sars-cov-2 // 2762616

Изобретение относится к области медицинской иммунологии и предназначено для определения и количественной оценки специфического клеточного иммунитета к антигенам S-белка вируса SARS-COV-2. Выделенные из крови пациента мононуклеары инкубируют в лунках 96-луночного планшета, на дне которых сорбирован полноразмерный S-белок, в качестве опытной пробы.

Способ мультиплексного анализа в-клеток для оценки клеточного звена иммунной системы рогатого скота // 2761468

Изобретение относится к ветеринарной медицине. Способ мультиплексного анализа В-лимфоцитов рогатого скота для оценки В-клеточного звена иммунной системы заключается в том, что проводят исследования на 10-луночных предметных стеклах с двумя контрольными лунками с адсорбированными В-клетками положительный контроль, полученными методом сепарации с частицами латекса, покрытых моноклональными антителами к CD19, и Т-клетками отрицательный контроль, полученными методом сепарации с частицами латекса, покрытых моноклональными антителами к CD3 из пула мононуклеаров крови рогатого скота.

Способ получения конъюгатов коллоидного золота с иммуноглобулинами при изготовлении иммунохроматографических тест-систем // 2761003

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения конъюгатов коллоидного золота с иммуноглобулинами предусматривает отделение конъюгата от несвязавшихся иммуноглобулинов и свободного вторичного стабилизатора путем наслоения реакционной смеси на среду высушивания, состоящую из 0,025 М трис-буфера, 0,1 М NaCl, сахарозы и бычьего альбумина с последующим центрифугированием.

Способ ранней диагностики острого почечного повреждения у онкоурологических пациентов после радикальной цистэктомии // 2760501

Изобретение относится к области медицины, в частности к лабораторной диагностике, и может быть использовано при обследовании пациентов для диагностики начальной стадии острого почечного повреждения (ОПП) в послеоперационном периоде. Способ диагностики острого почечного повреждения после радикальной цистэктомии включает определение концентрации липокалина-2 (uNGAL) и интерлейкина-18 (uIL-18) в моче.

Способ прогнозирования развития избыточного рубцеобразования у больных после проктологической операции // 2760498

Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования развития избыточного рубцеобразования у больных после проктологической операции, включающего проведение иммуноферментного анализа периферической крови и определение в сыворотке периферической крови больных уровней C-реактивного белка, гаптоглобина и альбумина, где проведение иммуноферментного анализа периферической крови, включающего определение в сыворотке уровней C-реактивного белка, гаптоглобина и альбумина, проводят до и после хирургической операции на 5-й и 11-й день, при этом при повышении к 5 суткам послеоперационного периода концентрации C-реактивного белка от 85,0 до 241,33 г/л, гаптоглобина от 1,14 до 1,83 г/л и снижении уровня альбумина сыворотки крови от 42,28 до 31,05 г/л, а к 11 дню при увеличении в сравнении с дооперационными показателями соответственно: C-реактивного белка до 150%, гаптоглобина до 140%, а концентрации альбумина сыворотки крови без тенденции к восстановлению прогнозируют избыточное рубцеобразование.

Гистоны и/или proadm в качестве маркеров, свидетельствующих о неблагоприятном событии // 2765212

Группа изобретений относится к медицине и касается способа прогнозирования смерти субъекта с критическим заболеванием, причем указанный способ включает (i) определение уровня по меньшей мере одного гистона в образце от указанного субъекта, и при этом указанный уровень по меньшей мере одного гистона свидетельствует об указанной смерти у указанного субъекта; и (ii) определение уровня проадреномедуллина (proADM) в образце от указанного субъекта, при этом указанный уровень proADM свидетельствует об указанной смерти у указанного субъекта, и где указанный уровень по меньшей мере одного гистона и указанный уровень proADM свидетельствуют о смерти в течение следующих 28 дней, при этом указанный образец представляет собой кровь, плазму крови, сыворотку крови или мочу.