Способ профилактики эшерихиоза у телят



Способ профилактики эшерихиоза у телят
Способ профилактики эшерихиоза у телят
Способ профилактики эшерихиоза у телят

Владельцы патента RU 2766249:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" (RU)

Изобретение относится к области ветеринарии, касается способа профилактики эшерихиоза телят. Способ профилактики эшерихиоза включает двукратную иммунизацию анатоксин-вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам, рожденным от иммунизированных стельных коров. При этом стельных коров и рожденных от них телят иммунизируют анатоксин-вакциной, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества, и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %: раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9-11; 3% водный раствор полиакриловой кислоты 9-11; бесклеточная культуральная среда, содержащая инактивированные термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli до 100. При этом стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе 1 и 2 мл соответственно. 2 табл., 5 пр.

 

Изобретение относится к области ветеринарии, касается способа профилактики эшерихиоза у телят.

Известен способ профилактики колибактериоза, включающий иммунизацию телят вакциной против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ и ТС-анатоксины) внутримышечно перед отъемом с интервалом 10-15 дней; при этом первая доза составляет 1 см3, вторая - 1,5 см3 [Наставление по применению вакцины против эшерихиоза животных (Коли-Вак К88, К99, 987Р, F41, ТЛ- и ТС-анатоксины)/Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 20.06.1997 г.].

Установлено, что эффективными средствами специфической профилактики эшерихиоза у животных являются вакцины, содержащие в своем составе инактивированные экзотоксины патогенных Escherichia coli (Биологические препараты для специфической профилактики и терапии эшерихиоза животных/М.К. Пирожков//Дисс. док. вет. наук. - Москва, 2002. - 298 с). В настоящее время есть исследования по использованию биопрепаратов, которые включают сразу три вида токсинов патогенных эшерихий: термолабильный (LT) и термостабильный (ST) и шигагюдобный (STX) токсины, как в чистом виде, так и в сочетании с адъювантами (Караев Я.М. Иммуногенные и протективные свойства эшерихиозного анатоксина: дис. … канд. вет. наук/Я.М. Караев. - Краснодар: КубГАУ, 2009. - 132 с; Тищенко А.С. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина: дис. … канд. вет. наук/А.С. Тищенко. - Краснодар: КубГАУ, 2011. - 124 с). Однако, этими исследованиями было установлено, что эшерихиозный анатоксин стимулирует клеточные и гуморальные звенья иммунитета в первые сутки после введения препаратов, а использование адъювантов хоть и усиливает иммунный ответ, но на непродолжительное время. Учитывая данные обстоятельства, необходимо искать новые способы повышения иммуногенной активности вакцинных препаратов на основе инактивированных токсинов кишечной палочки.

Известно применение пирогенала и полиакриловой кислоты по-отдельности в качестве адъювантов для усиления иммуногенности эшерихиозного анатоксина, содержащим инактивированные токсины (TL, TS, STX) Е. coli (Терехов, В.И. Влияние различных адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина/В.И. Терехов, Я.М. Караев, А.С.Тищенко, А.В. Иванов//Тр./КубГАУ. - 2009. - Вып.№1 (ч. 1) Серия: Ветеринарные науки. - С. 100-102.; Тищенко А.С.и др. Влияние бактериального полисахарида и полиэлектролита на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина//Молодой ученый. - 2016. - №20 (124). - С. 113-115.; Тищенко А.С, Терехов В.И., Сердюченко И.В. Иммуногенность эшерихиозного анатоксина при использовании с пирогеналом и полиакриловой кислотой//Научное обеспечение агропромышленного комплекса: сб. ст.по материалам X Всерос. конф. молодых ученых. - Краснодар: КубГАУ, 2017 - С. 287-288.).

Недостатком известных исследований является то, что эшерихиозный анатоксин с использованием в качестве адъюванта пирогенала и эшерихиозный анатоксин с использованием в качестве адъюванта полиакриловой кислоты обладали низкими иммуногенными свойствами, что негативно сказывалось на формировании и продолжительности поствакцинальной защиты у животных против токсинов кишечной палочки. Кроме того, биологической моделью в этих исследованиях выступали белые крысы и кролики и неизвестно, как будут проявлять себя компоненты вакцины на телятах.

Известно применение адъювантов, в том числе полиакриловой кислоты и пирогенала, в сочетании с эшерихиозным анатоксином в опытах на стельных коровах и супоросных свиноматках (Тищенко А.С. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина: дис. … канд. вет. наук/А.С.Тищенко. - Краснодар: КубГАУ, 2011. - 124 с; Тищенко, А.С. Оценка гуморального иммунного ответа у супоросных свиноматок, иммунизированных эшерихиозным анатоксином в сочетании с адъювантами/А.С.Тищенко, В.И. Терехов//Тр./КубГЛУ. - 2011. - Вып. №2 (29). - С. 144-147; Терехов, В.И. Влияние адъювантов на иммуногенные свойства эшерихиозного анатоксина при вакцинации стельных коров/В.И. Терехов, А.С. Тищенко//Ветеринария Кубани. - 2011. - №3. - С. 19-21; а также определена профилактическая эффективность данных препаратов (Тищенко, А.С. Профилактическая эффективность эшерихиозного анатоксина при эшерихиозе телят/А.С. Тищенко, В.И. Терехов//Опыт международного сотрудничества в области экологии, лесного хозяйства, ветеринарной медицины и охотоведения: материалы II-й Междунар. науч. - практ. конф./КубГАУ. - Краснодар, 2010. - С. 380-381).

Недостатком известных исследований является то, что эшерихиозный анатоксин с использованием по отдельности в качестве адъювантов пирогенала и полиакриловой кислоты обладали непродолжительным иммунным ответом, что отражалось на эффективности специфической профилактики эшерихиоза. Кроме того, адъювантные компоненты, применяемые с эшерихиозным анатоксином по-отделыюсти, в целом обладают слабой иммуногенностью и могут проявлять ректогенность.

Известен способ получения эшерихиозного анатоксина (патент №2432174 от 27.10.2011, МПК А61К 39/108, C12N 1/20, А61Р 1/00), в котором, отбирают и раздельно культивируют эпизоотические штаммы Escherichia coli, обладающие генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов, на питательном бульоне при температуре 37°С в течение 6-7 дней с ежедневным двукратным перемешиванием. Инактивацию культур проводят путем добавления формалина до концентрации не более 0,4%, при температуре 37°С в течение 14 суток с ежедневным двукратным перемешиванием. После чего отбирают и смешивают культуры в равных соотношениях, отделяют бактериальную массу с помощью стерилизующей фильтрации и получают комплексный препарат.

Недостатком данного способа является отсутствие адъювантов, и как следствие низкая иммуногенная активность препарата, что недостаточно обеспечивает эффективность профилактики эшерихиоза у животных.

Известно использование высокоактивного неспецифического иммуномодулирующего препарата широкого спектра действия «Пирогенал», который вводят внутримышечно до родов в дозе 0,1 мкг/кг массы тела беременных животных, а именно в первую половину беременности выполнение в количестве 10 инъекций с интервалом 1 день, а во вторую половину беременности 5 инъекций с интервалом 2 дня, общим курсом 15 инъекций (патент РФ №2654563, кл. А01К 67/02, 2018 г.).

Наиболее близким по технической сущности является техническое решение (патент РФ №2612081, кл. А61К 39/02, 2017 г.), включающее двукратную иммунизацию вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам рожденных от иммунизированных стельных коров.

Недостатком известного способа является недостаточная эффективность специфической профилактики эшерихиоза у теля т.

Техническим результатом изобретения является повышение эффективности специфической профилактики эшерихиоза у телят.

Технический результат достигается тем, что в способе профилактики эшерихиоза у телят, включающем двукратную иммунизацию анатоксин-вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам рожденных от иммунизированных стельных коров, согласно изобретению, стельных коров и рожденных от них телят иммунизируют вакциной, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала содержащий 100 мкг/мл действующего вещества и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термобильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9-11
3% водный раствор полиакриловой кислоты 9-11
бесклеточная культуральная среда, содержащая инактивированные
термолабильные, термостабильные и шигаподобные
токсины Escherichia coli до 100,

при этом стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе 1 и 2 мл соответственно.

Новизна технического решения состоит в том, что за счет использования бесклеточных культур эпизоотических штаммов Escherichia coli, продуцирующих термолабильный, термостабильный и шигаподобный токсины, инактивированных формалином, при совместном использовании растворы пирогенала и полиакриловой кислоты обеспечивается повышение иммуногенных свойств вакцины и эффективности профилактики эшерихиоза у телят, а также безвредность биопрепарата за счет отсутствия после применения, поствакцинальных реакций.

В патентной и научно-технической литературе не обнаружена аналогичная заявляемой совокупность признаков, что позволяет судить об изобретательском уровне заявляемого предложения.

Предложенный способ профилактики эшерихиоза у телят соответствует критерию «промышленная применимость», поскольку может быть широко использован в животноводческих комплексах.

Способ профилактики эшерихиоза у телят осуществляется следующим образом.

Эффективность использования вакцины против эшерихиоза зависит от свойств подобранных эпизоотических штаммов Escherichia coli, последовательности приготовления и процентного соотношения компонентов входящий в ее состав, таких как: - пирогенал (фармацевтический препарат, выпускается в ампулах, в виде раствора для внутримышечного введения в дозе 1 мл которого, содержится 100 мкг действующего вещества - липополисахарид (ЛПС), выделенный из клеток Salmonella typhi) (EAN: 4602379000047) - 8 мл (8 ампул по 1 мл) - (8%); 9 мл (9 ампул по 1 мл) - (9%); 10 мл (10 ампул по 1 мл) - (10%); 11 мл (11 ампул по 1 мл) - (11%) и 12 мл (12 ампул по 1 мл) - (12%);

- 3% водный раствор полиакриловой кислоты - 8 мл (8%); 9 мл (9%); 10 мл (10%); 11 мл (11%) и 12 мл (12%).

Для иммунизации стельных коров и телят полученных от этих стельных коров используют вакцину, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала содержащий 100 мкг действующего вещества и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9-11
3% водный раствор полиакриловой кислоты 9-11
бесклеточная культуральная среда, содержащая инактивированные
термолабильные, термостабильные и шигаподобные
токсины Escherichia coli до 100

Стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе не более 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе не более 1 и 2 мл соответственно.

Периоды двукратной иммунизации стельных коров обусловлены тем, что на последней стадии беременности начинает происходить образование молозива, которое необходимо наполнить антителами, путем иммунизации, поэтому первое введение препарата за 30 дней до отела. Проводить иммунизацию раньше 30 дней до отела не целесообразно, поскольку защитные антитела не накопятся в молозиве в достаточных титрах. Вторая иммунизация за 15 дней - проводится с целью увеличения молозивных антител, для повышения иммунного статуса организма стельной коровы перед отелом, что положительно влияет на плод, также, повышая его иммунитет перед эшерихиозной инфекцией. Кроме того, установлено, что защитные антитела против возбудителей эшерихиоза не передаются внутриутробно от коров-матерей к плоду. Это объясняется тем, что плацента коров является непроницаемой для передачи материнских антител к плоду. Поэтому единственным фактором защиты новорожденных телят от эшерихиозной инфекции является колостральный иммунитет за счет специфических иммуноглобулинов, содержащихся в молозиве.

Что касается доз 5 и 10 мл для стельных коров, то они были подобраны экспериментальным путем, увеличенная доза на втором введении обладает потенцирующим действием, что положительно сказывается на выработке антител. При введении меньших доз, не вырабатывается достаточное количество антител, при больших дозах выработка антител угнетается, кроме того, возможны местные поствакцинальные реакции.

Двукратное введение вакцины телятам и рекомендованные дозы подобраны экспериментальным путем, вакцинацию проводят в соответствии со следующими периодами:

- в возрасте 15-20 дней, так как в этот период содержание пассивно полученных молозивных антител у теленка уменьшается, и для поддержания иммунного статуса животного, необходимо ввести в их организм анатоксин-вакцину в количестве 1 мл;

- повторно через 10-14 дней в дозе 2 мл, что достаточно для стимулирования собственного активного иммунитета и накопления необходимого уровня антител против эшерихиозной инфекции. Если взять меньшее количество вакцины, то не будет обеспечиваться требуемый уровень защитных антител, а при большем - выработка антител угнетается и возможны местные реакции в виде припухлостей и раздражений.

Пример конкретного осуществления способа профилактики эшерихиоза у телят.

Результаты исследований использования вакцины для профилактики эшерихиоза у телят.

В хозяйстве Краснодарского края, неблагополучном по эшерихиозу телят, провели производственное испытание заявляемой вакцины. По данным ветеринарной лаборатории диарею у молодняка крупного рогатого скота в данном хозяйстве вызывают патогенные штаммы кишечной палочки. Эффективность вакцины, изготовленной по заявляемому способу, сравнивали с эффективностью прототипа, для этого было сформировано 3 группы стельных коров по 25 голов в каждой.

Первую группу коров иммунизировали заявляемой вакциной 1-й раз за 30 дней до отела в дозе 5 мл, 2-й раз за 15 дней до отела в дозе 10 мл. Полученных от этих коров телят, также иммунизировали заявляемой вакциной 1-й раз в возрасте 15-20 дней в дозе 1 мл, а 2-й - через 10-15 дней в дозе 2 мл. Вакцину вводили подкожно в область верхней трети шеи.

Вторую группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозным вакциной с раствором пирогенала содержащий 100 мкг действующего вещества по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.

Третью группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозным вакциной с с водным раствором полиакриловой кислоты по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.

Четвертую группу коров и полученных от них телят иммунизировали эшерихиозным вакциной без адъювантов по схеме и в дозах аналогичных в первой группе.

Пятая группа коров была контрольной, они и полученные от них телята не иммунизировались.

Эффективность вакцин оценивали по достижении телятами 3-месячного возраста и перевода их другой корпус на групповое содержание. Критериями оценки служили показатели заболеваемости и летальности.

Результаты опыта отражены в таблице 1, из материалов которой, видно, что в первой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 2 телят, при этом диарею у них удалось купировать в течение 3 дней, а на 5 день телята полностью выздоровели. Таким образом, профилактическая эффективность заявляемой вакцины составила 92%.

Во 2-ой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 5 телят, причем у одного теленка она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животного. Профилактическая эффективность аналога составила 80%.

В третьей группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 6 телят, у двоих телят она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животных. Профилактическая эффективность аналога составила 76%.

В четвертой группе эшерихиозная инфекция была зарегистрирована у 8 телят, из них у троих телят она протекала очень тяжело и закончилась гибелью животных. Профилактическая эффективность прототипа составила 68%.

В пятой группе из 25 телят заболело 18 животных, из которых 5 пали. Таким образом, в 3 группе заболеваемость составила 72%, а летальность - 27,8%, что свидетельствует о значительной тяжести болезни.

Следовательно, применение вакцины против эшерихиоза, используемой в заявляемом способе позволило более эффективно профилактировать заболевание телят эшерихиозной инфекцией. Заболеваемость телят привитых заявляемой вакциной составила 8%, а сохранность 100%, тогда как при использовании аналога 1 заболеваемость телят составила 20%, а сохранность 96%, аналога 2 - заболеваемость 24%, сохранность 92%, аналога 3 - заболеваемость 32%, сохранность 88%. В контрольной группе заболеваемость телят острой кишечной инфекцией составила 72%, а сохранность 80%.

Иммуногенные свойства эшерихиозной вакцины изучали у телят, полученных от вакцинированных стельных коров. Сыворотку крови для определения наличия антитоксических антител в реакции диффузной преципитации отбирали через 7, 14, 28 и 56 дней после последней их вакцинации.

Влияние применения вакцин на титр антител у телят представлены в таблице 2, из данных которой видно, что иммунизация коров и телят заявляемым способом обеспечивает более напряженный и продолжительный специфический иммунитет против эшерихиозной инфекции. Об этом свидетельствуют количество антител к токсинам кишечной палочки у телят, которых у животных первой группы в 2-16 раз больше, чем у животных из второй и третьей группы, и 8-32 раза больше, чем у животных четвертой и пятой групп.

Эффективность использования вакцины в способе профилактики эше-рехиоза у телят зависит от свойств подобранных эпизоотических штаммов Escherichia coli, последовательности приготовления и процентного соотношения компонентов входящий в ее состав.

Количественные значения ввода адъювантов подобраны экспериментальным путем, при этом учитывалась иммуногенная активность вакцины. При вводе растворов пирогенала и полиакриловой кислоты в объеме 8% иммуногенная активность повышалась, но все же была не достаточной для длительного сохранения поствакцинального иммунитета. При вводе адъювантов в объеме 12%, увеличения продукции специфических антител более значения, чем при их вводе в объеме 9-11% не происходило, а экономические затраты возрастали. Кроме того, вслед за повышением ввода раствора полиакриловой кислоты возрастала опасность развития местной воспалительной реакции из-за раздражения тканей.

Приведено пять примеров (1-5) зависимости эффективности вакцины против эшерихиоза телят от соотношения заявленных компонентов из расчета на 100 мл вакцины.

Для примеров 1-5 использовали эпизоотические штаммы Escherichia coli, обладающие генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов, проводили их культивирование на питательном бульоне при температуре 37°С в течение 6-7 дней с ежедневным двукратным перемешиванием, затем их инактивировали формалином до его конечной концентрации 0,4% в течение 14 суток с ежедневным двукратным перемешиванием, после чего отбирали и смешивали культуры в равных соотношениях, отделяли бактериальную массу с помощью стерилизующей фильтрации, для получения бесклеточной культуральной среды, в которую поочередно с последующим перемешиванием вносили адъюванты со следующими объемными количествами и процентным соотношением:

Пример 1 - при следующем соотношении компонентов, масс. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 8
3% водный раствор полиакриловой кислоты 8
бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coli до 100

При данном соотношении компонентов вакцина обладает слабой протективной активностью и защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli телят в 75%.

Пример 2. При следующем соотношении компонентов, масс. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9
3% водный раствор полиакриловой кислоты 9
бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coli до 100

При данном соотношении компонентов вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 86% случаев.

Пример 3. При следующем соотношении компонентов, масс. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 10
3% водный раствор полиакриловой кислоты 10
бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coli до 100

При данном соотношении компонентов анатоксин-вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 92% случаев.

Пример 4. При следующем соотношении компонентов, масс. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 11
3% водный раствор полиакриловой кислоты 11
бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coli до 100

При данном соотношении компонентов вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 94% случаев.

Пример 5. При следующем соотношении компонентов, масс. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 12
3% водный раствор полиакриловой кислоты 12
бесклеточная культуральная среда, содержащая
токсины Escherichia coli до 100

При данном соотношении компонентов вакцина защищает от эшерихиозной инфекции, обусловленной патогенными Escherichia coli, телят в 84%, случаев. На месте введения у отдельных животных, особенно из числа телят развились плотные болезненные припухлости и повышение температуры тела.

Вакцину для использования в способе профилактики эшерихиоза телят производят следующим образом.

Первоначальные этапы получения эшерихиозной вакцины осуществляли по патенту РФ на изобретение №2432174 от 27.10.2011, МПК А61К 39/108, C12N 1/20, А61Р 1/00.

Предварительно из эпизоотических штаммов Escherichia coli отобрали штаммы, обладающие генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов. Для этого использовали тест-системы «АмплиСенс E.coli-tox» (Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии МЗ РФ, г. Москва). Подтверждение токсипообразования на искусственной питательной среде осуществляли с помощью биотеста на инфузориях-стилонихиях (патент РФ на изобретение 2262529 от 20.10.2005, МПК C12N 1/10, C12Q 1/10). По известному патенту, для испытания по выживаемости инфузорий использовали культуру кишечной палочки, выращенную на бульоне Хоттингера со сроком инкубации 1-3 суток, затем среду с инфузориями смешивали с бульонной культурой кишечной палочки в соотношении 3:1.При наличии в культуральной среде экзотоксинов, количество погибших инфузорий должно быть не менее 70-80%, в то время как количество погибших инфузорий в контрольной пробе, не содержащей токсин, не должно превышать 5%.

Отобранные штаммы по отдельности засевали в пробирки с 10 мл питательного бульона для накопления токсинов кишечной палочки, в состав которой входят кислотный гидролизат крови (9-11%), аутолизат пекарских дрожжей (9-11%), пептон (0,9-1,1%), натрия хлорид (0,4-0,6%), двузамещенный фосфорнокислый натрий (0,05-0,15%) и калия хлорид (0,01-0,03%) (патент РФ на изобретение 2342425 от 27.12.2008, МПК C12N 1/20, C12Q 1/04). Затем их помещали в термостат и культивировали при 37°С в течение 6-8 ч до появления легкой мути, свидетельствующей о росте микроорганизмов. Далее полученные культуры переносили в колбы с 200-300 мл аналогичного питательного бульона и инкубировали при 37°С в течение: продуцирующие термолабильный и термостабильный - 6 суток, а продуцирующие шигаподобный токсин - 7 суток. Ежедневно 2 раза в сутки колбы встряхивали. Перед окончанием инкубирования из каждой колбы отобрали по 10 мл культуральной жидкости, центрифугировали при 10 тыс.об/мин в течение 30 мин и определяли методом биотестирования на инфузориях наличия токсинов.

При наличии токсинов в оставшиеся культуры добавили формалин до концентрации 0,3-0,4%. Инактивацию культур проводили в течение 14 суток при температуре 37°С с ежедневным двукратным перемешиванием. После завершения инактивации равные объемы культур объединяли, получив, таким образом, комплексный препарат, содержащий 3 вида антигенов. С помощью стерилизующей фильтрации отделили микробную массу от среды культивирования, получая, таким образом, бесклеточную культуральную среду Escherichia coli (эшерихиозный антигенный токсоидный компонент). Далее в бесклеточную культуральную среду Escherichia coli: вносили адъюванты: препарат пирогенал (липополисахарид, выделенный из микробных клеток Salmonella typhi, производитель ФГБУ ПИЦЭМ им Н.Ф. Гамалеи Минздрава России) в 0,01% концентрации и 3% раствор полиакриловой кислоты (производства ООО Химдирект сервис, Москва) при следующем соотношении компонентов, мас. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9-11
3% водный раствор полиакриловой кислоты 9-11
бесклеточная культуральная среда, содержащая ииактивированные термолабильные,
термостабильные и шигаподобные токсины
Escherichia coli до 100

Использование вакцины в заявляемом способе позволяет обеспечить защиту телят от эшерихиозной инфекции продолжительностью не менее 6 месяцев (срок наблюдения).

Способ профилактики эшерихиоза у телят, включающий двукратную иммунизацию анатоксин-вакциной против эшерихиоза стельных коров с интервалом 15 дней и двукратное введение препарата телятам, рожденным от иммунизированных стельных коров, отличающийся тем, что стельных коров и рожденных от них телят иммунизируют анатоксин-вакциной, которая в качестве адъювантов содержит раствор пирогенала, содержащий 100 мкг/мл действующего вещества, и 3% водный раствор полиакриловой кислоты, внесенные поочередно с последующим перемешиванием в бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные формалином до его конечной концентрации 0,4% термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, при следующем соотношении компонентов, мас. %:

раствор пирогенала, содержащий 100 мкг действующего вещества 9-11
3% водный раствор полиакриловой кислоты 9-11
бесклеточная культуральиая среда, содержащая инактивированные
термолабильные, термостабильные и шигаподобные
токсины Escherichia coli до 100,

при этом стельных коров иммунизируют первый раз за 30 дней, а второй раз за 15 дней до отела в дозе 5 и 10 мл соответственно, а телят прививают дважды, первый раз в возрасте 15-20 дней, а второй через 10-14 дней в дозе 1 и 2 мл соответственно.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области фармацевтики, а именно к вакцине против эшерихиоза телят и поросят. Вакцина включает в определенных соотношениях: бесклеточную культуральную среду, содержащую инактивированные термолабильные, термостабильные и шигаподобные токсины Escherichia coli, полученные при смешивании в равных соотношениях эпизоотических штаммов Escherichia coli, обладающих генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов, инактивированных формалином до его конечной концентрации 0,4%, а также в качестве адъювантов - раствор пирогенала, содержащий 100 мкг/мл действующего вещества и 3% водный раствор полиакриловой кислоты.

Настоящее изобретение относится к области ветеринарии и может быть использовано для предупреждения риска заболевания парагриппом-3 у телят, включающее введение стельным коровам вирусной вакцины, отличающееся тем, что за 2 месяца до отела коровам двукратно с интервалом 14 дней вводят вакцины: инактивированную вирусную «Комбовак-Р», бактериальную «ОКЗ» и иммуномодулятор «Имактин» в дозах соответственно 3 см3/голову, 3 см3/голову, 0,3 мг/кг массы тела, а телятам в период повышенного риска респираторных заболеваний в возрасте 14-20 дней - дважды, с интервалом в 14 дней вводят иммуномодулятор «Имактин» в дозе 1,5 мг/кг массы тела вместе с вакциной «ОКЗ» в дозе 1 см3 и вторично - те же препараты в 1,5-месячном возрасте телятам дополнительно, дважды, так же с интервалом 14 дней вводят с вакциной «Комбовак-Р» в дозе 2 см3 - вместе с препаратом «Имактин» в дозе 1,5 мг/кг массы тела, при этом во второй стадии сухостоя (21-0 дней до отела) коровам в корм основного рациона вводят в качестве кормовой добавки: арабиногалактан по 195-205 мг/сутки, в расчете на одну корову.

Изобретение относится к фармацевтике и ветеринарии. Способ получения вакцины против эшерихиоза животных включает отбор эпизоотических штаммов Escherichia coli, обладающих генами термолабильного, термостабильного и шигаподобного токсинов, их культивирование на питательном бульоне при температуре 37°С в течение 6-7 дней с ежедневным двукратным перемешиванием и дальнейшую инактивацию формалином до его конечной концентрации 0,4% в течение 14 суток с последующим смешиванием в равных объемах и отделением бактериальной массы с помощью стерилизующей фильтрации.
Изобретение относится к биотехнологии. Штамм бактерий Klebsiella pneumoniae subsp.pneumoniae с выраженным гипермукоидным фенонтипом, обладающий способностью к биопленкообразованию, депонирован в ФГБУ «ВГНКИ» под регистрационным номером ВКШМ-Б-288М.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использована для модуляции иммунной системы позвоночного хозяина. Для модуляции иммунной системы позвоночного хозяина для терапевтического или профилактического лечения легочной инфекции Streptococcus pneumonia или Pseudomonas aeruginosa способ включает введение в участок введения эффективного количества антигенного состава, содержащего полностью убитые или аттенуированные клетки Klebsiella pneumonia.

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к вирусологии, и может быть использовано для получения вакцины против рота-, коронавирусной инфекции и эшерихиоза крупного рогатого скота. Вакцина в качестве активного вещества содержит смесь инактивированной суспензии штамма ротавируса РМ, семейства Reoviridae, рода Rotavirus, инактивированной суспензии штамма коронавируса КЛ-2 семейства Coronaviridae, рода Coronavirus, с активностью каждого из вирусных штаммов 105,5 - 106,5 ТЦД50 в см3 вакцины, выращенных в перевиваемой культуре клеток МДВК или ЛЭК, и адгезивных антигенов К99, F41, Атт25 бактерий Escherichia coli; очистку адгезивных антигенов К99, F41, Атт25 бактерий Escherichia coli, взятых в равном соотношении (1:1:1), с концентрацией 50-100 млдр микробных клеток в 1 см3 вакцины, проводят при увеличенной до 1,5-3,0 М концентрации раствора фосфатно-мочевинного буфера.

Изобретение относится к ветеринарной медицине, а именно к способу изготовления вакцины, ассоциированной против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота. Способ включает отбор пораженных органов от больных и павших животных из местного эпизоотического очага, из которых приготавливают суспензию и делают посев на дифференциально-диагностические среды, после чего выделяют чистые культуры возбудителей болезни.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности применения средства для повышения относительного содержания высокодифференцированных клеток в аденокарциноме молочной железы пациента с инвазивным протоковым раком. Указанным средством для повышения относительного содержания высокодифференцированных клеток является композиция, состоящая из фитогемагглютинина Р, фитогемагглютинина М, конканавалина А, липополисахарида из Escherichia coli, взятых в соотношении (мас.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для повышения содержания высокодифференцированных клеток в биоптате опухоли молочной железы. Композиция для повышения содержания высокодифференцированных клеток в биоптате опухоли молочной железы содержит фитогемагглютинин Р (РНА-Р) - 1,6-2,4 мкг/мл, фитогемагглютинин М - 1,6-2,4 мкг/мл, конканавалин А - 3,2-4,8 мкг/мл, липополисахарид из Escherichia coli - 1,6-2,4 мкг/мл в соотношении (мас.

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к вакцинам ассоциированным против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота. Вакцина содержит при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя эшерихиоза E.coli - 24,0-29,0; суспензия клеток чистой культуры возбудителя стрептококкоза Streptococcus galloliticus - 24,0-29,0; суспензия клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa - 24,0-29,0; глюкоза - 1,0-2,0; формалин - 1,5-2,0; гидроокись алюминия - остальное.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой новые биспецифические антигенсвязывающие молекулы, содержащие (а) по меньшей мере один антигенсвязывающий домен, обладающий способностью специфически связываться с CD40, и (б) по меньшей мере один антигенсвязывающий домен, обладающий способностью специфически связываться с фибробласт-активирующим белком (FAP), и способы получения указанных молекул и способы их применения.
Наверх