Соединения пиразола, их фармацевтические композиции и их применение

Изобретение относится к соединению формулы (IA) или его фармацевтически приемлемой соли, способу его получения и его применению в изготовлении лекарственного средства для ингибирования киназ семейства IRAK. Соединения могут быть полезны для лечения заболеваний, вызываемых киназами семейства IRAK, таких как аутоиммунные заболевания, воспалительные заболевания и некоторые виды рака. В общей формуле (IA) R⁴ выбран из COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d или SO₂R^d; R⁵ выбран из Н, С_1-6 алкила, С_3-6-циклоалкила; где алкил или циклоалкил незамещен или замещен 1-3 R^5a; R^5a выбран из Н, D, галогена, циано, C_1-6 алкила, OR^a, NR^bR^c; где C_1-6 алкил незамещен или замещен 1-3 R^5b; R^5b выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a или NR^bR^c; R⁸ выбран из Н или D; R^a выбран из Н, D или C_1-6 алкила; R^b, R^c каждый выбран из Н, D или C_1-6 алкила; R^d выбран из Н, D, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила, где алкил или алкенил незамещен или замещен 1-4 R⁶; R⁶ выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, С_1-6 алкила и z равен 1 или 2. Технический результат: обеспечение ингибиторов IRAK4 формулы (IA), способа их получения и их применения в изготовлении лекарственного средства для ингибирования киназ семейства IRAK. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 2 табл., 43 пр.

 

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ

Настоящее изобретение относится к области химических лекарственных средств и имеет отношение к соединениям пиразола, их фармацевтически приемлемым солям, фармацевтическим композициям, содержащим такие соединения, и применениям таких соединений или композиций для получения лекарственных средств.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Семейство белков IRAK (киназы, ассоциированные с рецептором интерлейкина 1) состоит из IRAKI, IRAK2, IRAK3 и IRAK4. IRAK1 и IRAK4 являются активными серин/треониновыми киназами и ключевыми сигнальными факторами, расположенными ниже по сигнальному пути рецептора интерлейкина-1 (IL-1R)/толл-подобного рецептора (TLR), и играют важную роль во врожденном иммунитете. В противоположность этому, IRAK2 и IRAK3 являются псевдокиназами. IRAKI и IRAK4 вовлечены в развитие рака крови. При некоторых B-клеточных лимфомах активация путей TLR/IRAK обычно происходит одновременно с мутацией гена MYD88^L265P, приводящей к приобретению функции. Этот механизм встречается при макроглобулинемии Вальденстрема (WM), диффузной B-крупноклеточной лимфоме (DLBCL) и первичной эффузионной лимфоме (1-4). Некоторые виды плоскоклеточной карциномы головы и шеи, рака печени и трижды негативного рака молочной железы также демонстрируют повышенную концентрацию IRAKI (5-7). В мышиных моделях рака печени развитие НСС (гепатоцеллюлярная карцинома) подавляется ингибитором IRAK1/4; а рост опухоли синергетически подавлялся при введении ингибитора IRAK1/4 в комбинации с сорафенибом (7). Передача сигналов MYD88/IRAK играет важную роль в выживании клеток T-клеточного острого лимфобластного лейкоза (T-ALL) (8-9). Активация и сверхэкспрессия IRAKI отрицательно влияют на прогноз миелодиспластического синдрома (MDS) (8, 10). IRAKI сверхэкспрессируется при остром миелоидном лейкозе (AML) (11). Исследования доказывают, что ингибирование IRAK1/4 может уменьшить рост лейкозных клеток, перестроенных лейкозом смешанного происхождения (12). Эти исследования полностью доказывают, что IRAK1 и IRAK4 являются мишенями для лечения рака.

IRAK1 и IRAK4 также являются мишенями для лечения аутоиммунных заболеваний. Генетически модифицированные мыши с делецией IRAK4 или экспрессией IRAK4 без киназной активности имеют сниженный иммунный ответ на стимуляцию TLR (например, выработку TNFα (фактор некроза опухоли-альфа) и IL-6 (интерлейкин-6), индуцированную LPS (липополисахарид)) (13). Эти мыши устойчивы к экспериментальному индуцированному артриту (14), атеросклерозу (15) и MOG (миелин-олигодендроцитарный гликопротеин)-индуцированному энцефаломиелиту (16). Мыши, экспрессирующие IRAK4 без киназной активности, устойчивы к развитию болезни Альцгеймера (17). Низкомолекулярный ингибитор IRAK4 проявляет способность ингибировать TLR-индуцированную воспалительную передачу сигналов in vivo и in vitro (18-19). Введение ингибитора IRAK4 может уменьшить подагроподобное воспаление в модели перитонита, индуцированного мочевой кислотой (19), и облегчить симптомы заболевания в мышиной модели волчанки (20).

Согласно настоящему изобретению предложен ингибитор IRAK с новой структурой. Такие ингибиторы могут ингибировать активность киназы IRAK4 и могут быть использованы для лечения аутоиммунных заболеваний, воспалительных заболеваний и рака.

Ссылочные материалы

1. Jimenez, С.et al., Leukemia, 2013, 27, 1722-1728.

2. Yang, G. et al., Blood, 2013, 722, 1222-1232.

3. Ngo, V.N. et al., Nature, 2011, 473, 115-119.

4. Yang, D. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA4, 2014, 111, E4762-4768.

5. Wee, Z.N. et al., Commun. 2015, 6, 8746.

6. Adams, A.K. et al., Oncotarget, 2015, 6, 43395-43407.

7. Cheng, В.Y. et al., Cancer Ress. 2018, 78, 2332-2342.

8. Li, Z. et al., J. Clin. Invest. 2015, 723, 1081-1097.

9. Dussiau, C. et al., Oncotarget, 2015, 6, 18956-18965.

10. Rhyasen, G.W. et al., Cancer Cell, 2013, 24, 90-104.

11. Beverly, L.J. et al., Oncotarget, 2014, 3, 1699-1700.

12. Liang, K. et al., 2017, 168, 59-72 e13.

13. Kim, Т.W. et al., J. Fxp. Med. 2007, 204, 1025-1036.

14. Koziczak-Holbro, M. et al., Arthritis Rheum. 2009, 60, 1661-1671.

15. Rekhter, M. et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 2008, 367, 642-648.

16. Staschke, K.A. et al., J. Bmmunol. 2009, 183, 568-577.

17. Cameron, В. et al., J. Neurosci. 2012, 32, 15112-15123.

18. Tumey, L.N. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2014, 24, 2066-2072.

19. Kelly, P.N. et al., J. Exp. Med. 2015, 272, 2189-2201.

20. Dudhgaonkar, S. et al., J. Immunol 2017, 195, 1308-1319.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Согласно настоящему изобретению предложено соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение формулы (I) имеет следующую структуру:

где

кольцо Het представляет собой пяти- или шестичленное гетероароматическое кольцо;

R¹ выбран из Н или D;

R² и R³ каждый выбран из Н, D, алкила, галогена или OR^a;

R⁴ выбран из COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d или SO₂NR^bR^c;

R⁵ выбран из H, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d, SO₂NR^bR^c, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила или гетероциклоалкила; где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил или гетероциклоалкил незамещен или замещен 1-3 R^5a;

R^5a выбран из Н, D, галогена, циано, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, OR^a, SR^a, NR^bR^c, COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d или SO₂NR^bR^c; где алкил, циклоалкил или гетероциклоалкил незамещен или замещен 1-3 R^5d;

R^5d выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d или SO₂NR^bR^c;

R^a, R^b, R^c и R^d каждый выбран из H, D, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила или гетероарила, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил или гетероарил незамещен или замещен 1-4 R⁶;

R⁶ выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, NR^bCOR^d, NR^bCONR^bR^c, CONR^bR^c, CO₂R^d, NR^bSO₂R^d, NR^bSO₂NR^bR^c, SOR^d, SO₂R^d, SO₂NR^bR^c, алкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила или гетероарила;

где R^b и R^c в группе, содержащей и R^b, и R^c, присоединены к атому N в этой группе посредством одинарной связи или образуют гетероциклоалкил вместе с атомом N, к которому они присоединены, и этот гетероциклоалкил незамещен или замещен 1-3 R⁷;

R⁷ выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, NR^bCOR^d, NR^bCONR^bR^c, CONR^bR^c, CO₂R^d, NR^bSO₂R^d, NRbSO₂NR^bR^c, SOR^d, SO₂R^d, SO₂NR^bR^c, алкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила или гетероарила; и

m, n, р, q и y каждый независимо равен 1, 2 или 3.

Предпочтительно, предложенное в настоящем изобретении соединение имеет структуру представленную формулой (IA):

где

R⁴ выбран из COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d или SO₂NR^bR^c;

R⁵ выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d, SO₂NR^bR^c, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила или гетероциклоалкила; где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил или гетероциклоалкил незамещен или замещен 1-3R^5a;

R^5a выбран из Н, D, галогена, циано, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, OR^a, SR^a, NR^bR^c, COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d или SO₂NR^bR^c; где алкил, циклоалкил или гетероциклоалкил незамещен или замещен 1-3 R^5b;

R^5b выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d, SO₂R^d или SO₂NR^bR^c;

R⁸ выбран из Н, D, алкила, галогена, галогеналкила или OR^a;

R^a, R^b, R^c и R^d каждый выбран из Н, D, алкила, алкенила, алкинила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила или гетероарила, где алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил или гетероарил незамещен или замещен 1-4 R⁶;

R⁶ выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, NR^bCOR^d, NR^bCONR^bR^c, CONR^bR^c, CO₂R^d, NR^bSO₂R^d, NR^bSO₂NR^bR^c, SOR^d, SO₂R^d, SO₂NR^bR^c, алкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила или гетероарила;

где R^b и R^c в группе, содержащей и R^b, и R^c, присоединены к атому N в этой группе посредством одинарной связи или образуют гетероциклоалкил вместе с атомом N, к которому они присоединены, и этот гетероциклоалкил незамещен или замещен 1-3 R⁷;

R⁷ выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, SR^a, NR^bR^c, NR^bCOR^d, NR^bCONR^bR^c, CONR^bR^c, CO₂R^d, NR^bSO₂R^d, NR^bSO₂NR^bR^c, SOR^d, SO₂R^d, SO₂NR^bR^c, алкила, циклоалкила, гетероциклоалкила, арила или гетероарила; и

z равен 1 или 2.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Термин "галогено" или "галоген" в настоящем изобретении включает фтор, хлор, бром, и йод.

Термин "алкил" относится к насыщенной углеводородной группе с прямой или разветвленной цепью. Примеры алкильных групп включают метил (Me), этил (Et), пропил (такой как н-пропил и изопропил), бутил (такой как н-бутил, изобутил и трет-бутил), пентил (такой как н-пентил, изопентил и неопентил), гексил (такой как н-гексил, 2-гексил, 3-гексил, 2-метилпентил, 3-метилпентил, 2,2-диметилбутил и 3-этилпентил-1), гептил (такой как н-гептил, 2-гептил, 3-гептил, 4-гептил, 2-метилгексил, 3-метилгексил, 2,2-диметилпентил, 3,3-диметилпентил и 3-этилпентил-1), октил (такой как 1-октил, 2-октил и 2-этилгексил), нонил (такой как 1-нонил), децил (такой как н-децил) и подобные группы. В частности, алкил относится к алкилу с прямой или разветвленной цепью, имеющему 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 атомов углерода; более конкретно относится к алкилу с прямой или разветвленной цепью, имеющему 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 атомов; и, более предпочтительно, относится к алкилу с прямой или разветвленной цепью, имеющему 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов. Если не оговорено особо, все группы в настоящем изобретении являются такими, как определено здесь.

Термин "галогеналкил" относится к алкильной группе, имеющей один или более чем один галогеновый заместитель. Алкильная группа и галоген являются такими, как определено выше. Примеры галогеналкильных групп включают CH₂F, CHF₂, CF₃, C₂F₅, CCl₃ и подобные группы.

Термин "алкенил" относится к углеводородной группе, имеющей одну или более чем одну двойную связь С=С. Примеры алкенильных групп включают винил, пропенил, аллил, 1-бутенил, 2-бутенил, 1,3-бутадиенил, 1-пентенил, 2-пентенил, 1,3-пентадиенил, 1-гексенил, 2-гексенил и подобные группы.

Термин "алкинил" относится к углеводородной группе, имеющей одну или более чем одну тройную связь С=С. Примеры алкинильных групп включают этинил, пропинил, пропаргил, 1-бутинил, 2-бутинил, 1-пентинил, 2-пентинил, 1-гексинил, 2-гексинил и подобные группы.

Термин "циклоалкил" относится к неароматическому карбоциклическому кольцу и включает циклизированные алкильные, циклизированные алкенильные и циклизированные алкинильные группы. Циклоалкильные группы могут представлять собой моноциклическую или полициклическую (например, с 2, 3 или 4 конденсированными кольцами) кольцевую систему включая спироциклические кольца. В некоторых воплощениях циклоалкильная группа может иметь 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20 атомов углерода. Циклоалкильная группа может дополнительно иметь 0, 1, 2 или 3 двойные связи С=С и/или 0, 1 или 2 тройные связи С=С. В определение циклоалкила также включены группировки, имеющие одно или более чем одно ароматическое кольцо, конденсированное (например, имеющее общую связь) с циклоалкильным кольцом, такие как бензопроизводные пентана, пентена, гексана и гексана и подобные соединения. Циклоалкильная группа, имеющая одно или более чем одно конденсированное ароматическое кольцо, может быть присоединена через ароматическую часть или неароматическую часть. Примеры циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклопентенил, циклогексенил, циклогексадиенил, циклогептенил, циклогептадиенил, адамантил, дигидроинденил, тетрагидронафтил и подобные группы.

Термин "гетероциклоалкил" относится к неароматическому гетероциклическому кольцу в котором один или более чем один атом, образующий кольцо, представляет собой гетероатом, такой как О, N, Р или S. Гетероциклоалкильные группы могут включать моноциклическую или полициклическую (например, с 2, 3, или 4 конденсированными кольцами) кольцевую систему и спироциклические кольца. Примеры предпочтительных "гетероциклоалкильных" групп включают азиридинил, азетидинил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиенил, пирролидинил, оксазолидинил, тиазолидинил, имидазолидинил, изоксазолидинил, изотиазолидинил, пиразолидинил, морфолинил, тиоморфолинил, пиперазинил, пиперидинил и подобные группы, но не ограничиваются ими. В определение гетероциклоалкила также включены группировки, имеющие одно или более чем одно ароматическое кольцо, конденсированное (например, имеющее общую связь) с неароматическим гетероциклоалкильным кольцом, такие как 2,3-дигидробензофуранил, 1,3-бензодиоксоленил, бензо-1,4-диоксанил, фталимидил, нафталимидил и подобные группы. Гетероциклоалкильная группа, имеющая одно или более чем одно конденсированное ароматическое кольцо, может быть присоединена через ароматическую часть или неароматическую часть.

Термин "арил" относится к моноциклической или полициклической (например, с 2, 3 или 4 конденсированными кольцами) ароматической углеводородной группе, такой как фенил, нафтил, антраценил, фенантрил, инденил и подобным группам.

Термин "гетероарил" относится к ароматическому гетероциклическому кольцу, имеющему по меньшей мере один гетероатом, такой как О, N или S. Гетероарильные группы включают моноциклическую или полициклическую (например, с 2, 3 или 4 конденсированными кольцами) кольцевую систему. Любой атом N, образующий кольцо в гетероциклической группе, может быть окислен с образованием N-оксида. Примеры предпочтительных "гетероарильных" групп включают пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, триазинил, фурил, тиенил, имидазолил, триазолил, тетразолил, тиазолил, изотиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, пирролил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, оксадиазолил, бензофуранил, бензотиенил, бензотиазолил, индолил, индазолил, хинолинил, изохинолинил, пуринил, карбазолил, бензимидазолил, пирроло пиридил, пирролопиримидинил, пиразол опир ид ил, пиразолопиримидинил и подобные группы, но не ограничиваются ими.

Подразумевают, что используемый здесь термин "соединение" включает все стереоизомеры, геометрические изомеры, таутомеры и изотопы.

Соединение по настоящему изобретению может быть асимметричным, например имеющим один или более чем один стереоцентр. Если не оговорено особо, все стереоизомеры могут представлять собой энантиомеры и диастереомеры. Соединение по настоящему изобретению, которое содержит асимметрически замещенные атомы углерода, может быть выделено в виде оптически чистой формы или рацемической формы. Оптически чистая форма может быть получена посредством разделения рацемата или посредством использования хирального синтона или хирального реагента.

Соединение по настоящему изобретению также может включать таутомеры. Таутомеры получают посредством замены одинарной связи соседней двойной связью вместе с миграцией протона.

Соединение по настоящему изобретению также может содержать все изотопные формы атомов, присутствующих в промежуточных или конечных соединениях. Изотопы включают те атомы, которые имеют одинаковый атомный номер, но разные массы. Например, изотопы водорода включают дейтерий и тритий.

Настоящее изобретение дополнительно включает фармацевтически приемлемые соли соединений формулы (I) и формулы (IA). Фармацевтически приемлемая соль относится к производному соединения, модифицированному путем превращения исходного соединения в его солевую форму посредством имеющейся основной части, или соединения, модифицированному путем превращения исходного соединения в его солевую форму посредством имеющейся кислотной части. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают соли, составленные из неорганических или органических кислот и основных групп (таких как аммиак), или соли, составленные из неорганических или органических оснований и кислотных групп (таких как карбоновая кислота), но не ограничиваются ими. Фармацевтически приемлемая соль по настоящему изобретению может быть синтезирована посредством взаимодействия исходных соединений формулы (I) и формулы (IA) в форме свободных оснований с подходящей кислотой от 1 до 4 в системе растворителей. Подходящие соли перечислены в Remington's Parmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 и Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977).

Указанные в настоящем изобретении соединение и его фармацевтически приемлемая соль дополнительно включают сольватные формы или гидратные формы. В сущности, сольватные формы или гидратные формы эквивалентны несольватным формам или негидратным формам, обе из которых включены в объем настоящего изобретения. Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать в поликристаллической форме или аморфной форме. В общем, все физические формы соединений включены в объем настоящего изобретения.

Настоящее изобретение дополнительно включает пролекарства соединений формулы (I) и формулы (IA). Пролекарство представляет собой фармакологическое вещество (то есть, лекарственное средство), полученное из исходного лекарственного средства. После введения пролекарство метаболизируется в организме в исходное лекарственное средство. Пролекарство может быть получено посредством замещения одной или более чем одной функциональной группы, присутствующей в соединении. Получение и применение пролекарства можно найти в Т. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series и Bioreversible Carriers in Drug Desin, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

В некоторых воплощениях соединение по настоящему изобретению выбрано из следующих соединений:

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-этил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-изопропил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклопропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-(аминометил)циклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-(гидроксиметил)циклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-гидрокси-2-метилпропил-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

метил-4-(3-(4-(6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

метил-4-(3-(4-(6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата,

N-(1-(1-(1-акрилоилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-акрилоилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

метил-4-(3-(4-(6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-пропионилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-изобутирилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

(S)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(R)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(S)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(R)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(S)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

(R)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2-цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида.

В другом аспекте настоящего изобретения дополнительно предложена композиция. Композиция состоит из соединения формулы (I) и формулы (IA), его N-оксидного производного, его индивидуального изомера или смеси его изомеров, фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемого носителя или эксципиента. Композицию по настоящему изобретению можно вводить посредством перорального введения, парентерального введения (инъекционного введения), ингаляции спрея, местного введения, ректального введения, назального введения, вагинального введения, внутрибрюшинного введения или через имплантированный резервуар.

В другом аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения формулы (I) и формулы (IA) и фармацевтически приемлемой соли для ингибирования протеинкиназ.

В некоторых воплощениях протеинкиназы представляют собой киназы семейства IRAK, особенно киназу IRAK4.

В другом аспекте настоящего изобретения предложено применение соединения формулы (I) и формулы (IA) и фармацевтически приемлемой соли для лечения заболевания, вызванного протеинкиназами.

В некоторых воплощениях соединение или композиция по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения аутоиммунных заболеваний; воспалительных заболеваний; болевых расстройств; заболеваний респираторного тракта, дыхательных путей и легких; воспаления и повреждения легких; легочной гипертензии; желудочно-кишечных заболеваний; аллергических заболеваний; инфекционных заболеваний; травматических расстройств и повреждений тканей; фиброзных заболеваний; глазных болезней; заболеваний суставов, мышц и костей; заболеваний кожи; заболеваний почек; заболеваний кроветворной системы; заболеваний печени; заболеваний полости рта; нарушений обмена веществ и болезней сердца; сосудистых заболеваний; нейровоспалительных заболеваний; нейродегенеративных заболеваний; сепсиса и генетических нарушений; которые вызываются киназами семейства IRAK, особенно киназой IRAK4.

В некоторых воплощениях указанные в настоящем изобретении аутоиммунные заболевания и воспалительные заболевания выбраны из системной красной волчанки (SLE), волчаночного нефрита, артрита, псориаза, колита, болезни Крона, атопического дерматита, фиброза печени, болезни Альцгеймера, подагры, криопирин-ассоциированного периодического синдрома (CAPS), хронического заболевания почек или острого почечного повреждения, хронической обструктивной болезни легких (COPD), астмы, спазмов бронхов и болезни "трансплантат против хозяина".

В некоторых воплощениях соединение или композиция по настоящему изобретению могут быть использованы для лечения заболеваний, характеризующихся аномальной клеточной пролиферацией, особенно рака, вызванных киназами семейства IRAK, особенно киназой IRAK4.

В некоторых воплощениях указанный в настоящем изобретении рак включает рак молочной железы, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, бронхоальвеолярный рак, рак предстательной железы, холангиокарциному рак костей, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак почек, рак печени, рак желудочно-кишечной ткани, рак пищевода, рак яичников, рак поджелудочной железы, рак кожи, рак яичек, рак щитовидной железы, рак матки, рак шейки матки и влагалища, лейкоз, множественную миелому и лимфому.

В другом аспекте настоящего изобретения соединение формулы (I) и формулы (IA) и фармацевтически приемлемая соль по настоящему изобретению могут быть использованы в комбинации с одним или более чем одним другим лекарственным средством. Соединение по настоящему изобретению и лекарственные средства, используемые в комбинации с соединением, могут обеспечить достижение аддитивного или синергетического эффекта, когда их используют в комбинации. Лекарственные средства, используемые в комбинации с соединением, могут представлять собой низкомолекулярное лекарственное средство, лекарственное средство на основе моноклонального антитела, лекарственное средство на основе слитого белка или лекарственное средство на основе антисмысловой ДНК.

В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, описанной выше. Способ включает следующие стадии:

А. взаимодействие сложного эфира нитропиразолкарбоновой кислоты А-1 с Boc-защищенным азетидинсульфонатом А-2 с получением соединения A3, где R¹ представляет собой алкил, и R² представляет собой алкил или арил:

B. восстановление сложноэфирной группы карбоновой кислоты в А-3 с помощью восстановителя, такого как гидрид диизобутилалюминия (DIBAL-H), с получением альдегида В-1:

C. превращение альдегидной группы в В-1 в дифторметильную группу с помощью фторирующего реагента, такого как трифторид диэтиламиносеры (DAST), с получением соединения С-1:

D. удаление Boc группы из С-1 с помощью кислоты, такой как трифторуксусная кислота, и проведение восстановительного аминирования с помощью Boc-защищенного пиперидона с получением соединения D-1:

E. удаление Вое группы из D-1 с помощью кислоты, такой как трифторуксусная кислота, и конденсация D-1 и хлорангидрида или конденсация D-1 и кислоты с помощью конденсирующего агента, такого как HATU (гексафторфосфат 2-(7-аза-1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилмочевины), с получением соединения Е-1, где L представляет собой хлор или ОН:

F. восстановление нитрогруппы в Е-1 с помощью восстановителя, такого как H₂ и Pd/C, с получением аминосоединения F-1:

G. сочетание сложного эфира пиразолбороновой кислоты G-1 и 6-бром-2-пиридинкарбоновой кислоты (X представляет собой Н) или сложного эфира 6-бром-2-пиридинкарбоновой кислоты (X представляет собой алкил) G 2 с помощью палладиевого катализатора, такого как Pd(PPh₃)₄, с последующим гидролизом в присутствии основания, такого как NaOH (когда X представляет собой алкил), с получением соединения G-3

H. конденсация карбоновой кислоты G-3 и промежуточного аминосоединения F-1 с помощью конденсирующего агента, такого как HATU, с получением соединения IA из настоящего изобретения; где, если R⁵ в IA содержит аминогруппу, тогда восстанавливают цианогруппу в R⁵ с помощью восстановителя, такого как NaBH₄/CoCl₂/MeOH, после конденсации G-3 и F-1 с получением соединения IA с R⁵, содержащим амино:

I. конденсация промежуточного аминосоединения F-1 и пиридинкарбоновой кислоты G-2 с помощью конденсирующего агента, такого как HATU, с получением соединения I-1 и сочетание I-1 и сложного эфира бороновой кислоты G-1 с помощью палладиевого катализатора, такого как Pd(PPh₃)₄, с получением соединения IA из настоящего изобретения:

Пример 1

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. 1-(2,2-Дифторэтил)-4-йод-1H-пиразол

В круглодонной колбе объемом 100 мл растворяли 4-йодпиразол (5,0 г; 25,7 ммоль), трифенилфосфин (13,5 г; 51,4 ммоль) и 2,2-дифторэтанол (2,1 г; 25,7 ммоль) в THF (тетрагидрофуран) (80 мл). К вышеуказанному раствору добавляли активированное молекулярное сито 4А (10,0 г) и диизопропилазодикарбоксилат (DIAD) (10,4 г; 51,4 ммоль) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 6 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ (петролейный эфир) : EtOAc (об./об.)=1:1) с получением 4,6 г продукта с выходом 69%. ЖХ/МС (жидкостная хроматография/масс-спектрометрия) (ЭРИ (электрораспылительная ионизация)): m/z составляет 259 (М+Н)⁺.

Стадия 2. Метил-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли 1-(2,2-дифторэтил)-4-йод-1H-пиразол (2,0 г; 7,8 ммоль), бис(пинаколато)дибор (4,0 г; 15,6 ммоль), Pd(dppf)Cl₂ (571 мг; 0,78 ммоль), AcOK (2,3 г; 23,4 ммоль) и диоксан (40 мл), нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток использовали непосредственно на следующей стадии.

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли полученный ранее остаток, метил-6-бром-2-пиколинат (1,7 г; 7,8 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (901 мг; 0,78 ммоль), Na₂CO₃ (1,7 г; 15,6 ммоль), диоксан (40 мл) и H₂O (8 мл), нагревали до 80°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 1:1) с получением 1,3 г продукта с выходом 62%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 268 (М+Н)⁺.

Стадия 3. 6-(1-(2,2-Дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновая кислота

Метил-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат (1,3 г; 4,9 ммоль) растворяли в МеОН (15 мл), добавляли раствор NaOH (1 М; 15 мл) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор концентрировали для удаления МеОН, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Водную фазу доводили 4 М соляной кислотой до значения рН 3. Твердое вещество осаждали, отфильтровывали и промывали Н₂О с получением 1,1 г твердого вещества с выходом 89%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 254 (М+Н)⁺.

Стадия 4. Этил-4-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилат

4-Нитро-1H-пиразол-3-карбоновую кислоту (20,0 г; 127,4 ммоль) растворяли в EtOH (200 мл) и охлаждали в ледяной бане. Медленно, по каплям добавляли SOCl₂ (15 мл) и затем нагревали до образования флегмы в течение 6 ч. После окончания взаимодействия раствор доводили 5%-ным водным раствором Na₂CO₃ до нейтрального значения рН и подвергали перегонке при пониженном давлении для удаления этанола. Остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 22,0 г продукта с выходом 93%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 186 (М+Н)⁺.

Стадия 5. трет-Бутил-3-(n-толуолсульфонилокси)азетидин-1-карбоксилат

N-Boc-3-Гидроксиазетидин (10 г; 57,8 ммоль) растворяли в CH₂Cl₂ (40 мл) в круглодонной колбе объемом 150 мл и охлаждали в ледяной бане. К вышеуказанному раствору добавляли n-толуолсульфонилхлорид (11 г; 57,8 ммоль) и пиридин (5,5 г; 69,4 ммоль), затем в условиях окружающей среды нагревали до комнатной температуры и подвергали взаимодействию в течение 10 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой, и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, последовательно промывали 5%-ным раствором NaHCO₃ и насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 30:1) с получением 13,5 г продукта с выходом 71%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 328 (М+Н)⁺.

Стадия 6. Этил-1-(1-(трет-бутилкарбонил)азетидин-3-ил)-4-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилат

В трехгорлую круглодонную колбу объемом 500 мл добавляли этил-4-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилат (22,0 г; 118,9 ммоль), DMSO (диметилсульфоксид) (200 мл) и K₂CO₃ (19,7 г; 142,7 ммоль), перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 ч и потом нагревали до 100°С. Затем к вышеуказанному реакционному раствору по каплям добавляли раствор трет-бутил-3-(n-толуолсульфонилокси)азетидин-1-карбоксилата (38,9 г; 118,9 ммоль) в DMSO (40 мл) и подвергали взаимодействию в течение 6 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 20,5 г продукта с выходом 51%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 341 (М+Н)⁺.

Стадия 7. трет-Бутил-3-(3-формил-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-карбоксилат

В защитной атмосфере азота в трехгорлой круглодонной колбе объемом 500 мл, снабженной термометром, растворяли этил-1-(1-(трет-бутилкарбонил)азетидин-3-ил)-4-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилат (20,5 г; 60,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (200 мл) и охлаждали в бане с сухим льдом и ацетоном. Внутреннюю температуру поддерживали ниже -65°С, к вышеуказанному раствору медленно, по каплям добавляли 1 М раствор DIBAL-H в н-гексане (150 мл), и затем вышеуказанный реакционный раствор вливали в насыщенный раствор NH₄Cl (500 мл), перемешивали и фильтровали. Фильтрат экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 2:1) с получением 12,6 г продукта с выходом 71%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 315 (М+H₂O+Н)⁺.

Стадия 8. трет-Бутил-3-(3-(дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-карбоксилат

трет-Бутил-3-(3-формил-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-карбоксилат (12,6 г; 42,6 ммоль) растворяли в CH₂Cl₂ (150 мл) в круглодонной колбе объемом 250 мл и охлаждали в ледяной бане. Медленно, по каплям добавляли трифторид диэтиламиносеры (DAST) (17,1 г; 106,5 ммоль) и подвергали взаимодействию в течение 1 ч, поддерживая температуру. После окончания взаимодействия раствор доводили 5%-ным водным раствором NaHCO₃ до нейтрального значения рН и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 7,5 г продукта с выходом 55%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 319 (М+Н)⁺.

Стадия 9. трет-Бутил-4-(3-(3-(дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат

трет-Бутил-3-(3-(дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-карбоксилат (5,0 г; 15,7 ммоль) растворяли в CH₂Cl₂ (50 мл) в круглодонной колбе объемом 100 мл, добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл) и подвергали взаимодействию в течение 1 ч при комнатной температуре. После окончания взаимодействия раствор подвергали перегонке при пониженном давлении для удаления растворителя и трифторуксусной кислоты. Остаток растворяли в CH₂Cl₂ (50 мл) и доводили с помощью Et₃N до значения рН 8. К вышеуказанному раствору добавляли N-Boc-4-пиперидон (3,4 г; 17,3 ммоль) и Na(AcO)₃BH (4,0 г; 18,8 ммоль) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 5,5 г продукта с выходом 87%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 424 (M+Na)⁺.

Стадия 10. 1-(4-(3-(3-(Дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон

трет-Бутил-4-(3-(3-(дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (5,5 г; 13,7 ммоль) растворяли в CH₂Cl₂ (50 мл) в круглодонной колбе объемом 100 мл, добавляли трифторуксусную кислоту (10 мл) и подвергали взаимодействию в течение 1 ч при комнатной температуре. После окончания взаимодействия раствор подвергали перегонке при пониженном давлении для удаления растворителя и трифторуксусной кислоты. Остаток растворяли в CH₂Cl₂ (50 мл), последовательно добавляли Ac₂O (2,8 г; 27,4 ммоль) и Et₃N (6 мл) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 0,5 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (PE:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 4,1 г продукта с выходом 87%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 344 (М+Н)⁺.

Стадия 11. 1 -(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон

1-(4-(3-(3-(Дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (4,1 г; 11,9 ммоль) растворяли в МеОН (50 мл) в круглодонной колбе объемом 100 мл, оборудованной баллоном с водородом, добавляли Pd/C (10% влажного порошка, влажность 50% масс., 2,0 г) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали МеОН. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 3,2 г продукта, который использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 314 (М+Н)⁺.

Стадия 12. N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (120 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (96 мг; 0,38 ммоль), диизопропилэтиламин (DIEA) (98 мг; 0,76 ммоль), гексафторфосфат 2-(7-аза-1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилмочевины (HATU) (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН (об./об.) = 20:1) с получением 126 мг продукта с выходом 61%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 549 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (ядерный магнитный резонанс) (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.47 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.10 (s, 1Н), 8.07-8.02 (m, 2Н), 7.88 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 6.15 (tt, J=55,4, 4,2 Гц, 1H), 5.00-4.90 (m, 1H), 4.55 (td, J=13,5, 4,2 Гц, 2Н), 4.28-4.19 (m, 1Н), 3.83 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.79-3.70 (m, 1H), 3.54-3.48 (m, 2Н), 3.21-3.11 (m, 1H), 3.03-2.94 (m, 1Н), 2.51-2.42 (m, 1Н), 2.09 (s, ЗН), 1.78-1.67 (m, 2Н), 1.38-1.22 (m, 2Н).

Пример 2

6-(1-(2,2-Дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. 1-(4-(3-(3-(Дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)-2-гидроксиэтан-1-он

трет-Бутил-4-(3-(3-(дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1,0 г; 2,5 ммоль) растворяли в CH₂Cl₂ (10 мл) в круглодонной колбе объемом 50 мл, добавляли трифторуксусную кислоту (3 мл) и подвергали взаимодействию в течение 1 ч при комнатной температуре. После окончания взаимодействия раствор подвергали перегонке при пониженном давлении для удаления растворителя и трифторуксусной кислоты. Остаток растворяли в CH₂Cl₂ (10 мл), последовательно добавляли гидроксиуксусную кислоту (228 мг; 3,0 ммоль), DIEA (645 мг; 5,0 ммоль) и HATU (1,1 г; 3,0 ммоль) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 0,5 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 1:1) с получением 700 мг продукта с выходом 78%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 360 (М+Н)⁺.

Стадия 2. 1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)-2-гидроксиэтан-1-он

1-(4-(3-(3-(Дифторметил)-4-нитро-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)-2-гидроксиэтан-1-он (700 мг; 1,9 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл) в круглодонной колбе объемом 25 мл, оборудованной баллоном с водородом, добавляли Pd/C (10% влажного порошка, влажность 50% масс, 300 мг) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали МеОН. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 580 мг продукта, который использовали непосредственно на следующей стадии. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 330 (М+Н)⁺.

Стадия 3. 6-(1-(2,2-Дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)-2-гидроксиэтан-1-он (125 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (96 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl:МеОН (об./об.) = 40:1) с получением 145 мг продукта с выходом 68%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 565 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.11 (s, 1Н), 8.08-8.03 (m, 2Н), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 6.16 (tt, J=55,4, 4,3 Гц, 1Н), 5.00-4.91 (m, 1H), 4.56 (td, J=13,5, 4,3 Гц, 2Н), 4.20-4.11 (m, 3Н), 3.87-3.79 (m, 2Н), 3.67 (s, 1Н), 3.56-3.45 (m, 3Н), 3.25-3.16 (m, 1H), 3.09-2.99 (m, 1H), 2.57-2.48 (m, 1Н), 1.81-1.71 (m, 2Н), 1.42-1.29 (m, 2Н).

Пример 3

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. 4-Йод-1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол

В круглодонной колбе объемом 150 мл растворяли 4-йодпиразол (5,0 г; 25,7 ммоль) в DMF (50 мл), добавляли 2,2,2-трифторэтилтрифторметансульфонат (6,6 г; 28,3 ммоль) и K₂CO₃ (7,1 г; 51,4 ммоль), затем нагревали до 90°С и подвергали взаимодействию в течение 3 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой, и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 1:1) с получением 4,3 г продукта с выходом 60%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 281 (М+Н)⁺.

Стадия 2. Метил 6-(1-(2,2,2-трифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли 4-йод-1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол (4,3 г; 15,4 ммоль), бис(пинаколато)дибор (7,8 г; 30,8 ммоль), Pd(dppl)Cl₂ (1,1 г; 1,5 ммоль), AcOK (4,5 г; 46,2 ммоль) и диоксан (50 мл), нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток использовали непосредственно на следующей стадии.

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли полученный ранее остаток, метил 6-бром-2-пиколинат (3,3 г; 15,4 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (1,7 г; 1,5 ммоль), Na₂CO₃ (3,3 г; 30,8 ммоль), диоксан (50 мл) и H₂O (10 мл), нагревали до 80°С, и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 1:1) с получением 3,1 г продукта с выходом 71%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 286 (М+Н)⁺.

Стадия 3. 6-(1-(2,2,2-Трифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновая кислота

Метил-6-(1-(2,2,2-трифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат (3,1 г; 10,8 ммоль) растворяли в МеОН (30 мл), добавляли раствор NaOH (1 М; 30 мл) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор концентрировали для удаления МеОН, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Водную фазу доводили 4 М соляной кислотой до значения рН 3. Твердое вещество осаждали, отфильтровывали и промывали Н₂О с получением 2,5 г твердого вещества с выходом 85%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 272 (М+Н)⁺.

Стадия 4. N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (120 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(2,2,2-трифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (103 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН (об./об.) = 40:1) с получением 190 мг продукта с выходом 88%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 567 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.47 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.06 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7.90 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.66 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.00-4.90 (m, 1Н), 4.80 (q, J=8,3 Гц, 2Н), 4.28-4.19 (m, 1Н), 3.83 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.79-3.71 (m, 1Н), 3.51 (t, J=6,5 Гц, 2Н), 3.21-3.11 (m, 1Н), 3.04-2.94 (m, 1Н), 2.52-2.42 (m, 1Н), 2.09 (s, ЗН), 1.80-1.69 (m, 2Н), 1.39-1.22 (m, 2Н).

Пример 4

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)-2-гидроксиэтан-1-он (125 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (103 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН (об./об.) = 40:1) с получением 130 мг продукта с выходом 59%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 583 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.14-8.09 (m, 2Н), 8.07 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 7.91 (t, J=7,7 Гц, 1Н), 7.66 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,5 Гц, 1Н), 5.00-4.90 (m, 1H), 4.80 (q, J=8,3 Гц, 2Н), 4.19-4.12 (m, 3Н), 3.87-3.79 (m, 2Н), 3.57-3.44 (m, 3Н), 3.25-3.16 (m, 1Н), 3.09-2.99 (m, 1Н), 2.56-2.48 (m, 1Н), 1.80-1.71 (m, 2Н), 1.42-1.29 (m, 2Н).

Пример 5

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. 1-(Дифторметил)-4-йод-1H-пиразол

В круглодонной колбе объемом 150 мл растворяли 4-йодпиразол (5,0 г; 25,7 ммоль) в DMF (50 мл), добавляли 2-хлор-2,2-дифторацетат натрия (4,3 г; 28,3 ммоль) и K₂CO₃ (7,1 г; 51,4 ммоль), затем нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 16 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой, и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 2,6 г продукта с выходом 41%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 245 (М+Н)⁺.

Стадия 2. Метил-6-(1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли 1-(дифторметил)-4-йод-1H-пиразол (2,6 г; 10,6 ммоль), бис(пинаколато)дибор (5,4 г; 21,2 ммоль), Pd(dppl)Cl₂ (732 мг; 1,0 ммоль), AcOK (3,1 г; 31,8 ммоль) и диоксан (40 мл), нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 6 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток использовали непосредственно на следующей стадии.

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли полученный ранее остаток, метил-6-бром-2-пиколинат(2,3 г; 10,6 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (1,1 г; 1,0 ммоль), Na₂CO₃ (2,2 г; 21,2 ммоль), диоксан (40 мл) и Н₂О (мл), нагревали до 80°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na2S04, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 1:1) с получением 1,7 г продукта с выходом 63%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 254 (М+Н)⁺.

Стадия 3. 6-(1-(Дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновая кислота

Метил-6-(1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат (1,7 г; 6,7 ммоль) растворяли в МеОН (20 мл), добавляли раствор NaOH (1 М; 20 мл) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор концентрировали для удаления МеОН, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Водную фазу доводили 4 М соляной кислотой до значения рН 3. Твердое вещество осаждали, отфильтровывали и промывали Н₂О с получением 1,1 г твердого вещества с выходом 69%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 240 (М+Н)⁺.

Стадия 4. N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (120 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (91 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:MeOH (об./об.) = 40:1) с получением 117 мг продукта с выходом 58%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 535 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1H), 8.50 (s, 1Н), 8.38 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.11 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7.94 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.70 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7.27 (d, J=60,3 Гц, 1H), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.01-4.90 (m, 1Н), 4.29-4.19 (m, 1Н), 3.83 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.79-3.70 (m, 1Н), 3.52 (t, J=6,6 Гц, 2Н), 3.21-3.12 (m, 1Н), 3.05-2.95 (m, 1Н), 2.52-2.43 (m, 1Н), 2.10 (s, 3Н), 1.81-1.68 (m, 2Н), 1.39-1.22 (m, 2Н).

Пример 6

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-метил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 499 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.49 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.05-7.99 (m, 2Н), 7.96 (s, 1Н), 7.86 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.62 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.00-4.91 (m, 1Н), 4.29-4.20 (m, 1Н), 4.00 (s, 3Н), 3.83 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.79-3.71 (m, 1Н), 3.56-3.48 (m, 2Н), 3.21-3.11 (m, 1Н), 3.04-2.94 (m, 1H), 2.51-2.43 (m, 1H), 2.10 (s, 3Н), 1.77-1.67 (m, 2Н), 1.39-1.23 (m, 2Н).

Пример 7

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-этил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 513 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.52 (s, 1H), 8.50 (s, 1Н), 8.08-7.97 (m, 3Н), 7.86 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7.63 (d, J=7,8 Гц, 1H), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.00-4.89 (m, 1H), 4.33-4.18 (m, 3Н), 3.83 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.79-3.70 (m, 1Н), 3.57-3.46 (m, 2Н), 3.22-3.11 (m, 1Н), 3.04-2.93 (m, 1Н), 2.52-2.41 (m, 1Н), 2.10 (s, 3Н), 1.75-1.68 (m, 2Н), 1.58 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 1.40-1.22 (m, 2Н).

Пример 8

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-изопропил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 527 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.56 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.08 (s, 1Н), 8.03 (s, 1Н), 8.00 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.86 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.04-4.89 (m, 1Н), 4.68-4.51 (m, 1Н), 4.31-4.18 (m, 1Н), 3.84 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.79-3.71 (m, 1Н), 3.56-3.47 (m, 2Н), 3.21-3.12 (m, 1H), 3.04-2.94 (m, 1H), 2.52-2.42 (m, 1Н), 2.10 (s, 3Н), 1.82-1.72 (m, 2Н), 1.60 (d, J=6,7 Гц, 6Н), 1.39-1.23 (m, 2Н).

Пример 9

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклопропил)-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. 2-(4-Йод-1H-пиразол-1-ил)ацетонитрил

В круглодонной колбе объемом 250 мл растворяли 4-йодпиразол (10,0 г; 51,5 ммоль) в DMF (100 мл), добавляли бромацетонитрил (6,8 г; 56,6 ммоль) и K₂CO₃ (14 г; 103,0 ммоль), затем нагревали до 50°С и подвергали взаимодействию в течение 3 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой, и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 5:1) с получением 11,2 г продукта с выходом 93%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 234 (М+Н)⁺.

Стадия 2. 1-(4-Йод-1H-пиразол-1-ил)циклопропан-1-карбонитрил

В круглодонную колбу объемом 150 мл добавляли DMSO (50 мл) и охлаждали в ледяной бане. Затем добавляли NaH (3,4 г; 85,6 ммоль; 60%) и перемешивали в течение 20 мин. К вышеуказанному реакционному раствору добавляли смешанный раствор 2-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)ацетонитрила (5,0 г; 21,4 ммоль) и 1,2-дибромэтана (12,1 г; 64,2 ммоль) в DMSO (10 мл), в условиях окружающей среды нагревали до комнатной температуры и подвергали взаимодействию в течение 8 ч. После окончания взаимодействия вышеуказанный реакционный раствор вливали в ледяной насыщенный водный раствор NH₄Cl, и водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO4, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 10:1) с получением 1,8 г продукта с выходом 32%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 260 (М+Н)⁺.

Стадия 3. 6-(1-(1-Цианоциклопропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновая кислота

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли 1-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)цикло пропан-1-карбонитрил (1,8 г; 6,9 ммоль), бис(пинаколато)дибор (3,5 г; 13,8 ммоль), Pd(dppl)Cl₂ (0,5 г; 0,7 ммоль), AcOK (2,0 г; 20,7 ммоль) и DMF (30 мл), нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток использовали непосредственно на следующей стадии.

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли полученный ранее остаток, 6-бром-2-пиколиновую кислоту (1,4 г; 6,9 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (0,8 г; 0,7 ммоль), Na₂CO₃ (2,2 г; 20,7 ммоль), диоксан (40 мл) и Н₂О (10 мл), нагревали до 80°С и подвергали взаимодействию в течение 10 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Водную фазу доводили 1 М HCl до значения рН 1, экстрагировали EtOAc, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 830 мг продукта с выходом 47%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 255 (М+Н)⁺.

Стадия 4. N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклопропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (120 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(1-цианоциклопропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (97 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН (об./об.) = 40:1) с получением 175 мг продукта с выходом 84%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 550 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.46 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 8.10-8.05 (m, 2Н), 7.91 (t, J=7,7 Гц, 1Н), 7.64 (dd, J=7,9, 1,1 Гц, 1Н), 6.90 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.01-4.91 (m, 1Н), 4.29-4.20 (m, 1Н), 3.84 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.80-3.71 (m, 1Н), 3.52 (t, J=7,l Гц, 2Н), 3.21-3.11 (m, 1Н), 3.04-2.94 (m, 1H), 2.53-2.43 (m, 1Н), 2.10 (s, 3Н), 1.93-1.87 (m, 4Н), 1.80-1.69 (m, 2Н), 1.39-1.23 (m, 2Н).

Пример 10

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 9. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 564 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.50 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.26 (s, 1Н), 8.16 (s, 1Н), 8.06 (dd, J=7,5, 1,0 Гц, 1H), 7.90 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.66 (dd, J=7,9, 1,1 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.01-4.91 (m, 1Н), 4.29-4.20 (m, 1H), 3.84 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.80-3.71 (m, 1H), 3.56-3.49 (m, 2Н), 3.20-3.05 (m, 3Н), 3.03-2.93 (m, 3Н), 2.53-2.43 (m, 1Н), 2.43-2.30 (m, 1Н), 2.27-2.15 (m, 1Н), 2.09 (s, 3Н), 1.82-1.64 (m, 2Н), 1.31 (m, 2Н).

Пример 11

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-(аминометил)циклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид (150 мг; 0,27 ммоль) растворяли в МеОН (10 мл) в круглодонной колбе объемом 25 мл и охлаждали в ледяной бане. К вышеуказанному раствору добавляли безводный CoCl₂ (0,4 мг; 0,003 ммоль) и NaBH₄ (12 мг; 0,32 ммоль) и подвергали взаимодействию в течение 20 мин, поддерживая температуру. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН (об./об.) = 20:1) с получением 120 мг продукта с выходом 79%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 568 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.56 (s, 1Н), 8.49 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.00 (dd, J=7,6, 0,8 Гц, 1H), 7.86 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.63 (dd, J=7,8, 0,7 Гц, 1Н), 6.87 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.01-4.87 (m, 1Н), 4.29-4.15 (m, 1H), 3.82 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.78-3.69 (m, 1Н), 3.50 (t, J=6,4 Гц, 2Н), 3.21 (s, 2Н), 3.19-3.11 (m, 1Н), 3.02-2.92 (m, 1Н), 2.69-2.56 (m, 2Н), 2.51-2.31 (m, 3Н), 2.09 (s, 3Н), 2.07-1.91 (m, 2Н), 1.78-1.68 (m, 2Н), 1.38-1.20 (m, 2Н).

Пример 12

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. 2-(4-Йод-1H-пиразол-1-ил)-2-метилпропионитрил

В круглодонную колбу объемом 150 мл добавляли DMSO (50 мл) и охлаждали в ледяной бане. Затем добавляли NaH (3,4 г; 85,6 ммоль; 60%) и перемешивали в течение 20 мин. К вышеуказанному реакционному раствору добавляли смешанный раствор 2-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)ацетонитрила (5,0 г; 21,4 ммоль) и йодметана (9,1 г; 64,2 ммоль) в DMSO (10 мл), в условиях окружающей среды нагревали до комнатной температуры и подвергали взаимодействию в течение 8 ч. После окончания взаимодействия вышеуказанный реакционный раствор вливали в ледяной насыщенный водный раствор NH₄Cl, и водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 5:1) с получением 4,2 г продукта с выходом 75%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 262 (М+Н)⁺.

Стадия 2. 6-(1-(2-Цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновая кислота

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли 2-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)-2-метилпропионитрил (2,0 г; 7,7 ммоль), бис(пинаколато)дибор (3,9 г; 15,4 ммоль), Pd(dppl)Cl₂ (0,5 г; 0,7 ммоль), AcOK (2,3 г; 23,1 ммоль) и DMF (30 мл), нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток использовали непосредственно на следующей стадии.

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли полученный ранее остаток, 6-бром-2-пиколиновую кислоту (1,5 г; 7,7 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (0,8 г; 0,7 ммоль), Na₂CO₃ (2,4 г; 23,1 ммоль), диоксан (40 мл) и Н₂О (10 мл), нагревали до 80°С и подвергали взаимодействию в течение 10 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Водную фазу доводили 1 М HCl до значения рН 1, экстрагировали EtOAc, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали с получением 1,6 г продукта с выходом 81%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 257 (М+Н)⁺.

Стадия 3. N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (120 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(2-цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (97 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl:МеОН (об./об.) = 40:1) с получением 132 мг продукта с выходом 63%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 552 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.52 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.29 (s, 1Н), 8.13 (s, 1Н), 8.05 (dd, J=7,5, 1,1 Гц, 1Н), 7.90 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.66 (dd, J=7,9, 1,1 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.00-4.90 (m, 1H), 4.28-4.19 (m, 1H), 3.83 (t, J=7,5 Гц, 2H), 3.79-3.70 (m, 1H), 3.55-3.48 (m, 2H), 3.21-3.11 (m, 1H), 3.04-2.94 (m, 1H), 2.51-2.42 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 2.08 (s, 6H), 1.81-1.67 (m, 2H), 1.41-1.22 (m, 2H).

Пример 13

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали посредством восстановления соединения по примеру 12 согласно стадиям из примера 11. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 556 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.57 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.20 (s, 1Н), 8.06 (s, 1H), 7.99 (d, J=7,4 Гц, 1H), 7.86 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.63 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 4.99-4.90 (m, 1H), 4.28-4.19 (m, 1Н), 3.83 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.78-3.70 (m, 1Н), 3.55-3.47 (m, 2Н), 3.20-3.11 (m, 1Н), 3.08 (s, 2Н), 3.03-2.93 (m, 1Н), 2.51-2.42 (m, 1H), 2.09 (s, ЗН), 1.81-1.68 (m, 2Н), 1.63 (s, 6Н), 1.39-1.21 (m, 2Н).

Пример 14

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-(гидроксиметил)циклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. Этил-2-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)ацетат

В круглодонной колбе объемом 250 мл растворяли 4-йодпиразол (10,0 г; 51,5 ммоль) в DMF (100 мл), добавляли этилбромацетат (9,4 г; 56,6 ммоль) и K₂CO₃ (14,0 г; 103,0 ммоль), затем нагревали до 50°С и подвергали взаимодействию в течение 3 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой, и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 5:1) с получением 11,6 г продукта с выходом 80%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 281 (М+Н)⁺.

Стадия 2. Этил-1-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)циклобутан-1-карбоксилат

В круглодонную колбу объемом 150 мл добавляли DMSO (50 мл) и охлаждали в ледяной бане. Затем добавляли NaH (2,8 г; 71,4 ммоль; 60%) и перемешивали в течение 20 мин. К вышеуказанному реакционному раствору добавляли смешанный раствор этил-2-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)ацетата (5,0 г; 17,8 ммоль) и 1,3-дибромпропана (10,8 г; 53,4 ммоль) в DMSO (10 мл), в условиях окружающей среды нагревали до комнатной температуры и подвергали взаимодействию в течение 8 ч. После окончания взаимодействия вышеуказанный реакционный раствор вливали в ледяной насыщенный водный раствор NH₄Cl, и водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 5:1) с получением 3,6 г продукта с выходом 63%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 321 (М+Н)⁺.

Стадия 3. (1-(4-Йод-1H-пиразол-1-ил)циклобутил)метанол

В защитной атмосфере азота в трехгорлой круглодонной колбе объемом 250 мл, снабженной термометром, растворяли этил-1-(1-(трет-бутилкарбонил)азетидин-3-ил)-4-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилат (3,6 г; 11,2 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл) и охлаждали в бане со льдом и солью. Внутреннюю температуру поддерживали ниже -10°С, к вышеуказанному раствору медленно, по каплям добавляли 1 М раствор DIBAL-H в н-гексане (33 мл), и затем вышеуказанный реакционный раствор вливали в насыщенный раствор NH₄Cl (100 мл), перемешивали и фильтровали. Фильтрат экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 1,7 г продукта с выходом 54%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 279 (М+Н)⁺.

Стадия 4. Метил-6-(1-(1-(гидроксиметил)циклобутан)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли (1-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)циклобутил)метанол (1,7 г; 6,1 ммоль), бис(пинаколато)дибор (3,1 г; 12,2 ммоль), Pd(dppl)Cl₂ (439 мг; 0,6 ммоль), AcOK (1,8 г; 18,3 ммоль) и DMF (20 мл), нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток использовали непосредственно на следующей стадии.

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли полученный ранее остаток, метил-6-бром-2-пиколинат (1,3 г; 6,1 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (693 мг; 0,6 ммоль), Na₂CO₃ (1,3 г; 12,2 ммоль), диоксан (20 мл) и Н₂О (5 мл), нагревали до 80°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 2:1) с получением 1,2 г продукта с выходом 68%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 288 (М+Н)⁺.

Стадия 5. 6-(1 -(1-(Гидроксиметил)циклобутан)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновая кислота

Метил-6-(1-(1-(гидроксиметил)циклобутан)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат (1,2 г; 4,2 ммоль) растворяли в МеОН (20 мл), добавляли раствор NaOH (1 М; 20 мл) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор концентрировали для удаления МеОН, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Водную фазу доводили 4 М соляной кислотой до значения рН 3. Твердое вещество осаждали, отфильтровывали и промывали Н₂О с получением 1,0 г твердого вещества с выходом 87%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 274 (М+Н)⁺.

Стадия 6. N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-(гидроксиметил)циклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (120 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(1-(гидроксиметил)циклобутан)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (104 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН (об./об.) = 20:1) с получением 110 мг продукта с выходом 51%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 569 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.51 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.09 (s, 1Н), 8.07-8.00 (m, 2Н), 7.92-7.84 (m, 1H), 7.67-7.61 (m, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.20-5.06 (m, 1H), 5.03-4.91 (m, 1H), 4.43-4.16 (m, 2Н), 4.04 (s, 2Н), 3.90-3.81 (m, 2Н), 3.80-3.69 (m, 1Н), 3.61-3.44 (m, 2Н), 3.26-3.10 (m, 1Н), 3.04-2.91 (m, 1Н), 2.85-2.41 (m, 4Н), 2.11 (s, 3Н), 2.06-1.95 (m, 1Н), 1.83-1.67 (m, 2Н), 1.39-1.30 (m, 2Н).

Пример 15

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Стадия 1. 1-(4-Йод-1H-пиразол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол

В круглодонной колбе объемом 150 мл растворяли 4-йодпиразол (5,0 г; 25,7 ммоль) в DMF (50 мл), добавляли 1-хлор-2-метил-2-пропанол (3,1 г; 28,3 ммоль) и K₃PO₄ (10,9 г; 51,4 ммоль), затем нагревали до 50°С и подвергали взаимодействию в течение 10 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой, и слои разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.)=3:1) с получением 4,2 г продукта с выходом 58%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 281 (М+Н)⁺.

Стадия 2. Метил-6-(1 -(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли 1-(4-йод-1H-пиразол-1-ил)-2-метилпропан-2-ол (4,2 г; 15,0 ммоль), бис(пинаколато)дибор (7,6 г; 30,0 ммоль), Pd(dppf)Cl₂ (1,1 г; 1,5 ммоль), AcOK (4,4 г; 45 ммоль) и DMF (50 мл), нагревали до 100°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток использовали непосредственно на следующей стадии.

В защитной атмосфере азота в круглодонную колбу объемом 100 мл добавляли полученный ранее остаток, метил-6-бром-2-пиколинат (3,2 г; 15,0 ммоль), Pd(PPh₃)₄ (1,7 г; 1,5 ммоль), Na₂CO₃ (3,2 г; 30,0 ммоль), диоксан (50 мл) и Н₂О (10 мл), нагревали до 80°С и подвергали взаимодействию в течение 2 ч. После окончания взаимодействия раствор фильтровали, и остаток на фильтре промывали EtOAc. К фильтрату добавляли Н₂О и экстрагировали EtOAc. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (РЕ:EtOAc (об./об.) = 3:1) с получением 3,0 г продукта с выходом 73%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 276 (М+Н)⁺.

Стадия 3. 6-(1-(2-Гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновая кислота

Метил-6-(1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинат (3,0 г; 10,9 ммоль) растворяли в МеОН (30 мл), добавляли раствор NaOH (1 М; 30 мл) и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор концентрировали для удаления МеОН, разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Водную фазу доводили 4 М соляной кислотой до значения рН 3. Твердое вещество осаждали, отфильтровывали и промывали Н₂О с получением 2,5 г твердого вещества с выходом 88%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 262 (М+Н)⁺.

Стадия 4. N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

1-(4-(3-(4-Амино-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-ил)этанон (120 мг; 0,38 ммоль), 6-(1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколиновую кислоту (99 мг; 0,38 ммоль), DIEA (98 мг; 0,76 ммоль), HATU (175 мг; 0,46 ммоль) и CH₂Cl₂ (5 мл) добавляли в круглодонную колбу объемом 25 мл и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. После окончания взаимодействия раствор разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Органические фазы объединяли, промывали насыщенным раствором NaCl, сушили над безводным Na₂SO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле (CH₂Cl₂:МеОН (об./об.) = 20:1) с получением 160 мг продукта с выходом 76%. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 557 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.49 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.08 (s, 1Н), 8.05-8.00 (m, 2Н), 7.88 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.64 (dd, J=8,1, 1,1 Гц, 1H), 6.88 (t, J=54,7 Гц, 1H), 5.00-4.90 (m, 1H), 4.28-4.19 (m, 1H), 4.16 (s, 2H), 3.83 (t, J=7,5 Гц, 2H), 3.75 (d, J=13,6 Гц, 1H), 3.62 (s, 1H), 3.55-3.47 (m, 2H), 3.21-3.11 (m, 1H), 3.03-2.94 (m, 1H), 2.52-2.42 (m, 1H), 2.09 (s, 3H), 1.80-1.72 (m, 2H), 1.41-1.26 (m, 2H), 1.24 (s, 6H).

Пример 16

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-гидрокси-2-метилпропил-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно стадиям из примера 14. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 557 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, DMSO-d₆) δ 10.43 (s, 1Н), 8.51 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.06-7.94 (m, 2H), 7.89 (dd, J=7,2, 1,3 Гц, 1H), 7.27 (t, J=54,2 Гц, 1H), 5.14-5.04 (m, 1H), 5.00 (t, J=5,7 Гц, 1H), 4.04-3.94 (m, 1H), 3.75-3.64 (m, 3H), 3.62 (d, J=5,6 Гц, 2H), 3.45-3.36 (m, 2H), 3.17-3.06 (m, 1H), 2.95-2.84 (m, 1H), 2.45-2.36 (m, 1H), 1.98 (s, 3H), 1.74-1.59 (m, 2H), 1.54 (s, 6H), 1.26-1.12 (m, 1H), 1.11-1.00 (m, 1H).

Пример 17

6-(1-(1-Амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 13. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 585 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.58 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.21 (s, 1Н), 8.07 (s, 1Н), 8.00 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 7.86 (t, J=7,7 Гц, 1H), 7.64 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.00-4.91 (m, 1Н), 3.83 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 3.64-3.56 (m, 2Н), 3.51 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.09 (s, 2Н), 2.90-2.79 (m, 8H), 2.42-2.33 (m, 1H), 1.79-1.71 (m, 2H), 1.65 (s, 6H), 1.39-1.24 (m, 2H).

Пример 18

Метил-4-(3-(4-(6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 13. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 572 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.58 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.21 (s, 1Н), 8.07 (s, 1Н), 8.00 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7.86 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.00-4.91 (m, 1Н), 4.05-3.89 (m, 2Н), 3.87-3.79 (m, 2Н), 3.70 (s, 3Н), 3.53-3.46 (m, 2Н), 3.09 (s, 2Н), 3.04-2.95 (m, 2Н), 2.44-2.35 (m, 1Н), 1.76-1.67 (m, 2Н), 1.65 (s, 6Н), 1.35-1.21 (m, 2Н).

Пример 19

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 485 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.52 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.19 (s, 2Н), 8.05 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=7,9 Гц, 1H), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.01-4.91 (m, 1H), 4.29-4.21 (m, 1H), 3.84 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.80-3.71 (m, 1Н), 3.52 (t, J=7,3 Гц, 2Н), 3.21-3.12 (m, 1Н), 3.04-2.94 (m, 1Н), 2.52-2.43 (m, 1Н), 2.11 (s, 3Н), 1.82-1.68 (m, 2Н), 1.39-1.23 (m, 2Н).

Пример 20

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 514 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.51 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.18 (s, 2Н), 8.04 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.68 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 6.90 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.01-4.92 (m, 1H), 3.84 (t, J=7,8 Гц, 2Н), 3.65-3.58 (m, 2Н), 3.52 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 2.90-2.79 (m, 8Н), 2.44-2.34 (m, 1Н), 1.80-1.71 (m, 2Н), 1.40-1.25 (m, 2Н).

Пример 21

Метил-4-(3-(4-(6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 501 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.51 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.19 (s, 2Н), 8.05 (d, J=7,5 Гц, 1H), 7.89 (t, J=7,7 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=7,9 Гц, 1H), 6.89 (t, J=54,7 Гц, 1Н), 5.01-4.91 (m, 1H), 4.07-3.91 (m, 2Н), 3.84 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.70 (s, 3Н), 3.51 (d, J=7,6 Гц, 2Н), 3.04-2.94 (m, 2Н), 2.47-2.36 (m, 1Н), 1.79-1.67 (m, 2Н), 1.35-1.21 (m, 2Н).

Пример 22

N-(1-(1-(1-Акрилоилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 497 (М+Н)⁺. ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.51 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.18 (s, 2Н), 8.04 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 7.89 (t, J=7,7 Гц, 1Н), 7.68 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,5 Гц, 1H), 6.59 (dd, J=16,8, 10,6 Гц, 1Н), 6.27 (dd, J=16,8, 1,9 Гц, 1H), 5.69 (dd, J=10,7, 1,9 Гц, 1Н), 5.01-4.91 (m, 1H), 4.34-4.21 (m, 1Н), 3.96-3.77 (m, 3Н), 3.58-3.49 (m, 2Н), 3.29-2.94 (m, 2Н), 2.56-2.43 (m, 1Н), 1.83-1.68 (m, 2Н), 1.44-1.22 (m, 2Н).

Пример 23

N-(1-(1-(1-Акрилоилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 497 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.16 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.97 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.71 (d, J=2,2 Гц, 1Н), 7.03-7.01 (m, 1H), 6.90 (t, J=54,7 Гц, 1Н), 6.59 (dd, J=16,9, 10,6 Гц, 1Н), 6.27 (dd, J=16,8, 2,0 Гц, 1Н), 5.68 (dd, J=10,6, 1,9 Гц, 1Н), 5.04-4.90 (m, 1Н), 4.35-4.20 (m, 1Н), 3.96-3.77 (m, 3Н), 3.54 (t, J=7,3 Гц, 2Н), 3.30-3.02 (m, 2Н), 2.58-2.44 (m, 1H), 1.85-1.70 (m, 2Н), 1.43-1.29 (m, 2Н).

Пример 24

N-(1-(1-(1-Ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 485 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.16 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 7.97 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.71 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7.05-7.00 (m, 1Н), 6.83 (d, J=54,6 Гц, 1Н), 5.03-4.90 (m, 1Н), 4.35-4.19 (m, 1H), 3.85 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.80-3.71 (m, 1Н), 3.53 (t, J=7,2 Гц, 2Н), 3.24-3.10 (m, 1Н), 3.06-2.93 (m, 1Н), 2.56-2.41 (m, 1Н), 2.11 (s, ЗН), 1.83-1.69 (m, 2Н), 1.40-1.29 (m, 2Н).

Пример 25

Метил-4-(3-(4-(6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилат

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 501 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.50 (s, 1Н), 8.55 (s, 1Н), 8.21 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 8.16 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 8.01 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.76 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7.07 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,8 Гц, 1Н), 5.12-4.96 (m, 1Н), 4.17-3.99 (m, 2Н), 3.94 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.76 (s, 3Н), 3.60 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.12-2.97 (m, 2Н), 2.57-2.42 (m, 1H), 1.87-1.71 (m, 2Н), 1.43-1.32 (m, 2Н).

Пример 26

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-пропионилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 499 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.16 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.96 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.71 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7.02 (d, J=2,3 Гц, 1H), 6.90 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.10-4.91 (m, 1Н), 4.42-4.25 (m, 1Н), 4.02-3.87 (m, 2Н), 3.87-3.76 (m, 1Н), 3.68-3.50 (m, 2Н), 3.19-2.89 (m, 2Н), 2.65-2.45 (m, 1Н), 2.36 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 1.84-1.71 (m, 2Н), 1.42-1.30 (m, 2Н), 1.16 (t, J=7,4 Гц, ЗН).

Пример 27

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 501 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.16 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7.97 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.71 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7.02 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 6.90 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.08-4.91 (m, 1Н), 4.27-4.09 (m, 3Н), 3.98-3.79 (m, 2Н), 3.66-3.44 (m, 3Н), 3.27-2.94 (m, 2Н), 2.67-2.47 (m, 1H), 1.87-1.68 (m, 2Н), 1.48-1.33 (m, 2Н).

Пример 28

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 514 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.46 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.15 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.96 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.71 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7.02 (d, J=2,3 Гц, 1H), 6.90 (t, J=54,7 Гц, 1H), 5.04-4.94 (m, 1H), 3.89 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.66-3.59 (m, 2Н), 3.55 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 2.89-2.78 (m, 8Н), 2.47-2.38 (m, 1Н), 1.81-1.72 (m, 2Н), 1.42-1.29 (m, 2Н).

Пример 29

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-изобутирилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 513 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1H), 8.50 (s, 1Н), 8.18-8.07 (m, 2Н), 7.96 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.71 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7.05-6.74 (m, 2Н), 5.06-4.89 (m, 1H), 4.41-4.26 (m, 1Н), 3.96-3.77 (m, 3Н), 3.63-3.48 (m, 2Н), 3.25-3.07 (m, 1Н), 3.02-2.89 (m, 1Н), 2.87-2.74 (m, 1Н), 2.60-2.45 (m, 1Н), 1.86-1.66 (m, 2Н), 1.44-1.20 (m, 2Н), 1.13 (d, J=6,8 Гц, 6Н).

Пример 30

(S)-N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 4. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 597 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.13 (s, 1Н), 8.12 (s, 1Н), 8.07 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 7.91 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.67 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.01-4.91 (m, 1Н), 4.81 (q, J=8,3 Гц, 2Н), 4.51-4.42 (m, 1Н), 4.26-4.12 (m, 1Н), 3.94-3.81 (m, 3Н), 3.72-3.63 (m, 1Н), 3.59-3.49 (m, 2Н), 3.23-3.09 (m, 2Н), 2.59-2.48 (m, 1Н), 1.84-1.72 (m, 2Н), 1.44-1.35 (m, 2Н), 1.33 (d, J=6,6 Гц, 3Н).

Пример 31

(R)-N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 4. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 597 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1Н), 8.50 (s, 1H), 8.12 (s, 1Н), 8.11 (s, 1Н), 8.07 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7.91 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.66 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.01-4.89 (m, 1Н), 4.80 (q, J=8,3 Гц, 2Н), 4.52-4.41 (m, 1H), 4.25-4.11 (m, 1Н), 3.90 (s, 1H), 3.84 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.71-3.61 (m, 1Н), 3.58-3.47 (m, 2Н), 3.25-3.08 (m, 2Н), 2.59-2.46 (m, 1Н), 1.85-1.72 (m, 2Н), 1.44-1.35 (m, 2Н), 1.32 (d, J=6,5 Гц, 3Н).

Пример 32

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 4. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 611 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1Н), 8.50 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.07 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7.91 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.66 (d, J=7,8 Гц, 1H), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1H), 5.01-4.91 (m, 1H), 4.80 (q, J=8,4 Гц, 2H), 4.61 (s, 1H), 4.23-4.07 (m, 2H), 3.84 (t, J=7,8 Гц, 2H), 3.53 (t, J=7,5 Гц, 2H), 3.26-3.13 (m, 2H), 2.57-2.48 (m, 1H), 1.82-1.74 (m, 2H), 1.50 (s, 6H), 1.37 (s, 2H).

Пример 33

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 4. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 603 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.06 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.91 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.66 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1H), 4.99-4.89 (m, 1Н), 4.80 (q, J=8,3 Гц, 2Н), 3.81 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 3.59-3.46 (m, 4Н), 3.08-2.98 (m, 2Н), 2.82 (s, 3Н), 2.48-2.40 (m, 1Н), 1.88-1.77 (m, 2Н), 1.58-1.46 (m, 2Н).

Пример 34

(S)-6-(1-(2,2-Дифторэтил)-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу, используемому на стадии 3 примера 2. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 579 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.08-8.02 (m, 2Н), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,7 Гц, 1Н), 6.16 (tt, J=55,4, 4,3 Гц, 1Н), 5.01-4.90 (m, 1Н), 4.56 (td, J=13,5, 4,2 Гц, 2Н), 4.50-4.41 (m, 1Н), 4.25-4.10 (m, 1Н), 3.90 (s, 1Н), 3.83 (t, J=7,4 Гц, 2H), 3.72-3.61 (m, 1H), 3.59-3.47 (m, 2H), 3.25-3.08 (m, 2H), 2.59-2.47 (m, 1H), 1.84-1.71 (m, 2H), 1.43-1.34 (m, 2H), 1.32 (d, J=6,4 Гц, 3Н).

Пример 35

(R)-6-(1-(2,2-Дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу используемому на стадии 3 примера 2. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 579 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 8.08-8.02 (m, 2Н), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 6.16 (tt, J=55,3, 4,2 Гц, 1Н), 5.01-4.91 (m, 1Н), 4.56 (td, J=13,5, 4,3 Гц, 2Н), 4.46 (q, J=6,5 Гц, 1Н), 4.24-4.11 (m, 1Н), 3.84 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.72-3.61 (m, 1Н), 3.57-3.48 (m, 2Н), 3.23-3.08 (m, 2Н), 2.58-2.48 (m, 1H), 1.83-1.70 (m, 2Н), 1.44-1.34 (m, 2Н), 1.32 (d, J=6,5 Гц, 3Н).

Пример 36

6-(1-(2,2-Дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H- пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу используемому на стадии 3 примера 2. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 593 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.49 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.11 (s, 1Н), 8.08-8.02 (m, 2Н), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.65 (d, J=7,8 Гц, 1H), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1H), 6.16 (tt, J=55,3, 4,2 Гц, 1H), 5.02-4.90 (m, 1H), 4.67-4.50 (m, 3Н), 4.23-4.07 (m, 2Н), 3.84 (t, J=7,7 Гц, 2Н), 3.54 (t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.25-3.14 (m, 2Н), 2.57-2.49 (m, 1Н), 1.82-1.74 (m, 2Н), 1.50 (s, 6Н), 1.42-1.30 (m, 2Н).

Пример 37

6-(1-(2,2-Дифторэтил)-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 33. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 585 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.48 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.11 (s, 1Н), 8.06 (s, 1H), 8.04 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,8 Гц, 1H), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1H), 6.16 (tt, J=55,3, 4,2 Гц, 1Н), 5.03-4.89 (m, 1Н), 4.56 (td, J=13,5, 4,3 Гц, 2Н), 3.85 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.61-3.48 (m, 4Н), 3.10-2.97 (m, 2Н), 2.82 (s, 3Н), 2.54-2.43 (m, 1Н), 1.88-1.78 (m, 2Н), 1.59-1.47 (m, 2Н).

Пример 38

6-(1-(2,2 Дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способам, используемым на стадиях 1 и 2 примера 17 и стадии 3 примера 2. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 578 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.47 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.10 (s, 1Н), 8.07-8.02 (m, 2Н), 7.89 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.64 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 6.89 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 6.16 (tt, J=55,3, 4,2 Гц, 1H), 5.01-4.92 (m, 1H), 4.55 (td, J=13,5, 4,3 Гц, 2Н), 3.85 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.64-3.56 (m, 2Н), 3.53 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 2.90-2.75 (m, 8Н), 2.45-2.33 (m, 1H), 1.81-1.69 (m, 2Н), 1.42-1.26 (m, 2Н).

Пример 39

(S)-N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 515 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.16 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.96 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.70 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7.02 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 6.90 (t, J=54,7 Гц, 1H), 5.01-4.90 (m, 1H), 4.52-4.41 (m, 1Н), 4.24-4.11 (m, 1Н), 3.93 (s, 1Н), 3.84(t, J=7,5 Гц, 2Н), 3.72-3.60 (m, 1Н), 3.58-3.47 (m, 2Н), 3.24-3.08 (m, 2Н), 2.59-2.46 (m, 1H), 1.84-1.71 (m, 2Н), 1.43-1.28 (m, 5Н).

Пример 40

(R)-N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 515 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.16 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.96 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.70 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7.02 (d, J=2,3 Гц, 1H), 6.90 (t, J=54,7 Гц, 1H), 5.03-4.89 (m, 1Н), 4.54-4.41 (m, 1Н), 4.27-4.09 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.84 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.72-3.61 (m, 1Н), 3.59-3.47 (m, 2Н), 3.26-3.08 (m, 2Н), 2.59-2.46 (m, 1Н), 1.87-1.71 (m, 2Н), 1.44-1.27 (m, 5Н).

Пример 41

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 529 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.45 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.16 (dd, J=7,6, 1,1 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=7,9 Гц, 1H), 7.96 (t, J=7,7 Гц, 1Н), 7.70 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7.02 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 6.90 (t, J=54,7 Гц, 1H), 5.01-4.91 (m, 1Н), 4.63 (s, 1H), 4.27-4.04 (m, 2Н), 3.84 (t, J=7,8 Гц, 2Н), 3.54 (t, J=7,6 Гц, 2Н), 3.28-3.11 (m, 2Н), 2.58-2.47 (m, 1Н), 1.83-1.73 (m, 2Н), 1.50 (s, 6Н), 1.42-1.29 (m, 2Н).

Пример 42

N-(3-(Дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 5. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 521 (М+Н)⁺. ¹H ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) 5 10.45 (s, 1Н), 8.53 (s, 1Н), 8.15 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 8.11 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.97 (t, J=7,8 Гц, 1H), 7.71 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7.06-6.72 (m, 2Н), 5.04-4.90 (m, 1H), 3.83 (t, J=7,4 Гц, 2Н), 3.60-3.43 (m, 4Н), 3.11-2.97 (m, 2Н), 2.82 (s, 3Н), 2.53-2.40 (m, 1Н), 1.89-1.78 (m, 2Н), 1.59-1.48 (m, 2Н).

Пример 43

6-(1-(2-Цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид

Соединение по этому примеру получали согласно способу получения соединения по примеру 12. ЖХ/МС (ЭРИ): m/z составляет 568 (М+Н)⁺. ¹Н ЯМР (400 МГц, хлороформ-d) δ 10.52 (s, 1Н), 8.49 (s, 1H), 8.29 (s, 1Н), 8.13 (s, 1H), 8.05 (dd, J=7,5, 1,1 Гц, 1Н), 7.90 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.66 (dd, J=7,9, 1,1 Гц, 1Н), 6.88 (t, J=54,6 Гц, 1Н), 5.08-4.91 (m, 1Н), 4.27-4.09 (m, 3Н), 3.98-3.79 (m, 2Н), 3.66-3.44 (m, 3Н), 3.27-2.94 (m, 2Н), 2.67-2.47 (m, 1Н), 2.08 (s, 6Н), 1.87-1.68 (m, 2Н), 1.48-1.33 (m, 2Н).

Пример тестирования А: анализ активности в отношении киназы IRAK4

Ингибиторную активность (IC₅₀) соединений в отношении киназы IRAK4 при Km (константа Михаэлиса) АТФ (аденозинтрифосфорная кислота) регистрировали с помощью анализа спектра подвижности (АСП). Киназу IRAK4 приобретали у Carna (№ по каталогу: 09-145, № серии: 14CBS-0020H); субстрат Kinase Substrate 8 приобретали у GL Biochem (№ по каталогу: 112396, № серии: Р171207-МЛ112396).

Соединения готовили с помощью DMSO в концентрации в 100 раз превышающей конечную концентрацию в реакционной смеси и последовательно разводили до 10 концентраций с 3-кратным шагом разведения, начиная с концентрации 1 мкМ. Затем 0,25 мкл переносили в 384-луночный планшет с использованием системы дозирования Echo550. Использовали 1× киназный буфер (50 мМ HEPES (4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота), рН 7,5, 0,0015% Brij-35 (лауриловый эфир полиоксиэтилена), 10 мМ MgCl₂, 2 мМ DTT (дитиотреитол)) для приготовления раствора киназы с концентрацией, в 2,5 раза превышающей конечную. Затем 10 мкл раствора киназы с концентрацией, в 2,5 раза превышающей конечную, добавляли в каждую лунку с соединением, встряхивали, равномерно перемешивали и инкубировали при комнатной температуре в течение 10 мин. Использовали 1× киназный буфер для приготовления смешанного раствора АТФ и субстрата Kinase Substrate 8 с концентрацией, в 25/15 раз превышающей конечную концентрацию. 15 мкл смешанного раствора АТФ и субстрата с концентрацией, в 25/15 раз превышающей конечную концентрацию, добавляли в каждую лунку (конечная концентрация киназы IRAK4 составляла 1 нМ, конечная концентрация субстрата составляла 3 мкМ, и конечная концентрация АТФ составляла 15,6 мкМ), встряхивали, равномерно перемешивали и подвергали взаимодействию при комнатной температуре в течение 60 мин. В конце добавляли 30 мкл останавливающего раствора (100 мМ HEPES, рН 7,5; 0,015% Brij-35; 0,2% реагент покрытия #3; 50 мМ EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота)) для остановки взаимодействия. CaliperEZ Reader II использовали для считывания данных о скоростях превращения, которые затем преобразовывались в данные о степени ингибирования. Согласно данным о степени ингибирования при каждой концентрации, концентрацию полумаксимального ингибирования (IC₅₀) (таблица 1) рассчитывали посредством способа логит-преобразования.

Пример тестирования В: анализ клеточной активности

Ингибирование IRAK4 соединениями по настоящему изобретению оценивали в клетках ТНР-1 по клеточной активности. В качестве стимула в этом эксперименте использовали LPS. LPS является агонистом TLR4, который стимулирует секрецию TNFα через сигнальный путь TLR-IRAK4 в клетках ТНР-1. Когда сигнальный путь ингибируется ингибиторами IRAK4, выработка TNFα подавляется. В этом эксперименте секрецию TNFα детектировали посредством ИФА (иммуноферментный анализ).

150 мкл раствора среды RPMI-1640 (Gibco, № по каталогу: 11875-085), содержащего 10000 клеток ТНР-1, добавляли в каждую лунку 96-луночного планшета, а затем добавляли 25 мкл раствора тестируемого соединения в концентрации, в 8 раз превышающей конечную концентрацию (начиная с 10 мкМ, 3-кратное разведение, 8 концентраций, каждая концентрация содержала 4% DMSO в RPMI-1640 среде), и их равномерно перемешивали и инкубировали при 37°С в течение 30 мин. В каждую лунку добавляли 25 мкл раствора среды RPMI-1640, содержащего LPS (конечная концентрация LPS составляла 1 мкг/мл, а конечная концентрация DMSO составляла 0,5%), равномерно перемешивали и инкубировали при 37°С в течение 4,5 ч. 96-луночный планшет вращали при 2000 об/мин в течение 5 мин, затем отбирали 50 мкл супернатанта и определяли содержание TNFα в супернатанте с помощью ИФА-набора для диагностики человека (Life Technologies, №по каталогу: KHC3011). IC₅₀ (таблица 2) соединения рассчитывали с помощью XL-Fit.

Результаты в таблице 1 и таблице 2 показывают, что соединения по настоящему изобретению могут эффективно ингибировать активность киназы IRAK4, а также могут эффективно ингибировать LPS-стимулированную секрецию TNFα в клетках ТНР-1.

1. Соединение формулы (IA) или его фармацевтически приемлемая соль, где соединение формулы (IA) имеет следующую структуру:

,

где R⁴ выбран из COR^d, CONR^bR^c, CO₂R^d или SO₂R^d;

R⁵ выбран из Н, С_1-6 алкила, С_3-6-циклоалкила; где алкил или циклоалкил незамещен или замещен 1-3 R^5a;

R^5a выбран из Н, D, галогена, циано, C_1-6 алкила, OR^a, NR^bR^c; где C_1-6 алкил незамещен или замещен 1-3 R^5b;

R^5b выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a или NR^bR^c;

R⁸ выбран из Н или D;

R^a выбран из Н, D или C_1-6 алкила;

R^b, R^c каждый выбран из Н, D или C_1-6 алкила;

R^d выбран из Н, D, C_1-6 алкила, С_2-6 алкенила, где алкил или алкенил незамещен или замещен 1-4 R⁶;

R⁶ выбран из Н, D, галогена, циано, OR^a, С_1-6 алкила и

z равен 1 или 2.

2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1, где соединение выбрано из:

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-этил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-изопропил-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклопропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-цианоциклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-(аминометил)циклобутил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-цианопропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-(гидроксиметил)циклобутил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2-гидрокси-2-метилпропил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1-(1-гидрокси-2-метилпропил-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

метил-4-(3-(4-(6-(1-(1-амино-2-метилпропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

метил-4-(3-(4-(6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата,

N-(1-(1-(1-акрилоилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-акрилоилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(1-(1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

метил-4-(3-(4-(6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамид)-3-(дифторметил)-1H-пиразол-1-ил)азетидин-1-ил)пиперидин-1-карбоксилата,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-пропионилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(дифторметил)-1-(1-(1-изобутирилпиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

(S)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(R)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1-(2,2,2-трифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(S)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(R)-6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2,2-дифторэтил)-1H-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1(1-(диметилкарбамоил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида,

(S)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

(R)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксипропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1H-пиразол-4-ил)-6-(1H-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидрокси-2-метилпропионил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1Н-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(метилсульфонил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-6-(1Н-пиразол-3-ил)-2-пиколинамида,

6-(1-(2-цианопропан-2-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-N-(3-(дифторметил)-1-(1-(1-(2-гидроксиацетил)пиперидин-4-ил)азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-4-ил)-2-пиколинамида.

3. Применение соединения по п. 1 или 2 в изготовлении лекарственного средства для ингибирования киназ семейства IRAK.

4. Способ получения соединения или его фармацевтически приемлемой соли по п. 1 или 2, включающий:

A. взаимодействие сложного эфира нитропиразолкарбоновой кислоты А-1 с Вос-защищенным азетидинсульфонатом А-2 с получением соединения А-3, где R¹ представляет собой алкил и R² представляет собой алкил или арил:

,

B. восстановление сложноэфирной группы карбоновой кислоты в А-3 с помощью восстановителя, такого как гидрид диизобутилалюминия (DIBAL-H), с получением альдегида В-1:

,

C. превращение альдегидной группы в В-1 в дифторметильную группу с помощью фторирующего реагента, такого как трифторид диэтиламиносеры (DAST), с получением соединения С-1:

,

D. удаление Вос группы из С-1 с помощью кислоты, такой как трифторуксусная кислота, и проведение восстановительного аминирования с помощью Вос-защищенного пиперидона с получением соединения D-1:

,

E. удаление Вос группы из D-1 с помощью кислоты, такой как трифторуксусная кислота, и конденсация D-1 и хлорангидрида или конденсация D-1 и кислоты с помощью конденсирующего агента, такого как HATU (гексафторфосфат 2-(7-аза-1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилмочевины), с получением соединения Е-1, где L представляет собой хлор или ОН:

,

F. восстановление нитрогруппы в Е-1 с помощью восстановителя, такого как Н₂ и Pd/C, с получением аминосоединения F-1:

,

G. сочетание сложного эфира пиразолбороновой кислоты G-1 и 6-бром-2-пиридинкарбоновой кислоты (X представляет собой Н) или сложного эфира 6-бром-2-пиридинкарбоновой кислоты (X представляет собой алкил) G-2 с помощью палладиевого катализатора, такого как Pd(PPh₃)₄, с последующим гидролизом в присутствии основания, такого как NaOH (когда X представляет собой алкил), с получением соединения G-3:

H. конденсация карбоновой кислоты G-3 и промежуточного аминосоединения F-1 с помощью конденсирующего агента, такого как HATU, с получением соединения IA; где если R⁵ в IA содержит аминогруппу, тогда восстанавливают цианогруппу в R⁵ с помощью восстановителя, такого как NaBH⁴/CoCl²/MeOH, после конденсации G-3 и F-1 с получением соединения IA с R⁵, содержащим амино:

I. конденсация промежуточного аминосоединения F-1 и пиридинкарбоновой кислоты G-2 с помощью конденсирующего агента, такого как HATU, с получением соединения I-1 и сочетание I-1 и сложного эфира бороновой кислоты G-1 с помощью палладиевого катализатора, такого как Pd(PPh₃)₄, с получением соединения IA: