Антитела к респираторно-синцитиальному вирусу и способы их получения и применения
Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфично связываются с белком F респираторно-синцитиального вируса (РСВ), а также их применение для лечения или предотвращения РСВ-инфекции у пациента. Кроме того, предложены нуклеиновая кислота, вектор экспрессии и клетка-хозяин для получения указанных антитела или его фрагмента. Изобретение обеспечивает усиленную нейтрализующую активность в отношении респираторно-синцитиального вируса подтипа А. 5 н. и 6 з.п. ф-лы, 39 ил., 6 табл.
Перекрестная ссылка на родственные заявки
[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на патент США 62/411500, поданной 21 октября 2016 г., содержание которой полностью включено в настоящий документ посредством ссылки.
Перечень последовательностей
[0002] Настоящая заявка содержит перечень последовательностей, который был представлен в электронном виде в формате ASCII и настоящим полностью включен посредством ссылки. Указанная копия в формате ASCII, созданная 20 октября 2017 г., называется «2009186_0217_SL.TXT» и имеет размер 860021 байт.
Область техники
[0003] Настоящее изобретение относится, наряду с прочим, к антителам к респираторно-синцитиальному вирусу (РСВ) и их функциональным фрагментам, а также к способам и реагентам для их получения и применения.
Уровень техники
[0004] Все источники, цитируемые в настоящем документе, включая, но не ограничиваясь указанными, патенты, заявки на патенты, а также не относящиеся к патентам источники и публикации, на которые приведены ссылки по всему тексту, настоящим явным образом полностью включены посредством ссылки для всех целей.
[0005] Респираторно-синцитиальный вирус (РСВ) вызывает значительную заболеваемость и смертность среди детей младшего возраста и пожилых людей, является основной причиной госпитализации младенцев в Соединенных Штатах и каждый год является причиной приблизительно 64 миллионов случаев инфекции и 160000 смертей во всем мире. Однако, несмотря на десятилетия исследований, разработка безопасных и эффективных вакцин или терапевтических и/или профилактических антител против РСВ оставалась труднодостижимой, что подчеркивает необходимость разработки новых стратегий, которые индуцируют или обеспечивают защитные иммунные ответы (1-3). Действительно, в настоящее время отсутствуют одобренные вакцины против РСВ, и пассивная профилактика с применением моноклонального антитела паливизумаба (выпущенного на рынок под наименованием синагис (Synagis®)) имеет ограничения при применении у младенцев с высоким риском инфекции, отчасти из-за ее незначительной эффективности.
[0006] Определенные популяции детей подвержены риску развития РСВ-инфекции, и к ним относятся недоношенные младенцы (Hall et al., 1979, New Engl. J. Med. 300:393-396), дети с врожденными пороками дыхательных путей, дети с бронхолегочной дисплазией (Groothuis et al., 1988, Pediatrics 82:199-203), дети с врожденным пороком сердца (MacDonald et al., New Engl. J. Med. 307:397-400) и дети с врожденным или приобретенным иммунодефицитом (Ogra et al., 1988, Pediatr. Infect. Dis. J. 7:246-249; и Pohl et al., 1992, J. Infect. Dis. 165:166-169), а также муковисцидозом (Abman et al., 1988, J. Pediatr. 1 13:826-830).
[0007] РСВ также может инфицировать популяцию взрослых людей. В этой популяции РСВ главным образом вызывает заболевание верхних дыхательных путей, хотя пожилые пациенты могут подвергаться большему риску серьезной инфекции и пневмонии (Evans, A. S., eds., 1989, Viral Infections of Humans. Epidemiology and Control, 3rd ed., Plenum Medical Book, New York pp. 525-544), также как и взрослые с подавленным иммунитетом, в частности, пациенты после трансплантации костного мозга (Hertz et al., 1989, Medicine 68:269-281). Другие подверженные риску пациенты включают тех, кто страдает застойной сердечной недостаточностью, и тех, кто страдает хронической обструктивной болезнью легких (т.е. ХОБЛ). Также сообщалось об эпидемиях среди пациентов домов престарелых и молодых людей в учреждениях закрытого типа (Falsey, A. R., 1991, Infect. Control Hosp. Epidemiol. 12:602-608; и Garvie et al., 1980, Br. Med. J. 281:1253-1254).
[0008] Несмотря на ограниченное количество вариантов лечения развившегося заболевания РСВ, более тяжелые формы заболевания нижних дыхательных путей часто требуют значительного поддерживающего ухода, включая введение увлажненного кислорода и искусственную вентиляцию легких (Fields et al., eds, 1990, Fields Virology, 2nd ed., Vol. 1, Raven Press, New York pp.1045-1072).
[0009] Подобно другим пневмовирусам РСВ экспрессирует два основных поверхностных гликопротеина: белок слияния (F) и белок прикрепления (G). Несмотря на то, что было показано, что оба они индуцируют защитные ответы нейтрализующих антител, F менее генетически изменчив, чем G, он безусловно необходим для инфекции и является мишенью для большей доли нейтрализующей активности в сыворотке крови человека (4-8). Белок F РСВ также является мишенью моноклонального антитела паливизумаба, которое применяют для пассивной защиты подверженных высокому риску младенцев от тяжелого заболевания (9). Соответственно, белок F РСВ считается очень подходящей мишенью для вакцин и различных видов терапии на основе антител.
[00010] Зрелый гликопротеин F РСВ исходно существует в метастабильной, предшествующей слиянию конформации (10) перед тем, как подвергнуться конформационному изменению, которое приводит к вставке гидрофобного пептида слияния в мембрану клетки-хозяина. Последующее повторное сворачивание F в стабильную, удлиненную конформацию после слияния (postF) (11, 12) приводит к слиянию мембран вируса и клетки-хозяина. Вследствие своей исходной нестабильности белок preF склонен к преждевременному превращению в postF, как в растворе, так и на поверхности вируса (13). Недавно с помощью конструирования белков была достигнута стабилизация preF (14, 15), и в моделях на животных было показано, что стабилизированный preF индуцирует более высокие титры нейтрализующих антител, чем postF (15).
[00011] Несмотря на важность нейтрализующих антител в защите против тяжелого заболевания РСВ наше понимание гуморального ответа на РСВ у человека было ограничено исследованиями сывороток человека и небольшого количества РСВ- специфичных моноклональных антител человека (16-19). Эпитопы, распознаваемые этими антителами человека, а также несколькими мышиными антителами, определили по меньшей мере четыре «антигенных сайта» на F РСВ (1, 10, 16, 18-20) (см. также, например, таблицу 1). Три из этих сайтов - I, II и IV - присутствуют как на preF, так и на postF, тогда как антигенный сайт ∅ существует исключительно на preF. Дополнительные preF-специфичные эпитопы были определены с применением антител MPE8 (17) и AM14 (21). Несмотря на то, что исследования сыворотки с целью картирования показали, что направленные к сайту ∅ антитела ответственны за большую часть ответов нейтрализующих антител у большинства индивидуумов (8), существуют дополнительные виды специфичности антител, вносящие вклад в сывороточную нейтрализующую активность, которые еще предстоит определить. Помимо этого до сих пор неизвестно, требуются ли определенные признаки последовательности антитела для распознавания определенных нейтрализующих сайтов, как наблюдали для других вирусных мишеней (22-25). Соответственно, понимание взаимосвязи между нейтрализующей активностью и специфичностью эпитопов будет предпочтительным при отборе и/или конструировании вакцинных антигенов, а также терапевтических и/или профилактических антител, которые индуцируют эффективные нейтрализующие ответы на РСВ.
[00012] Несмотря на ограниченное количество вариантов лечения развившегося заболевания РСВ более тяжелые формы заболевания нижних дыхательных путей часто требуют значительного поддерживающего ухода, включая введение увлажненного кислорода и искусственную вентиляцию легких (Fields et al., eds, 1990, Fields Virology, 2nd ed., Vol. 1, Raven Press, New York pp. 1045-1072).
[00013] Было показано, что рибавирин, который является единственным лекарственным препаратом, одобренным для лечения инфекции, эффективен в лечении пневмонии и бронхиолита, связанного с РСВ-инфекцией, и было показано, что он изменяет течение тяжелого заболевания РСВ у иммунокомпетентных детей (Smith et ai., 1991, New Engl. J. Med. 325:24-29). Применение рибавирина ограничено вследствие опасений, связанных с его потенциальным риском для беременных женщин, которые могут подвергаться воздействию аэрозольного лекарственного препарата во время его применения в условиях стационара.
[00014] Аналогичным образом, несмотря на то, что вакцина может быть полезной, коммерчески доступная вакцина не была разработана до настоящего времени. Была прекращена разработка нескольких вакцин-кандидатов, а другие находятся на этапе разработки (Murphy et al., 1994, Virus Res. 32: 13-36). Разработка вакцины оказалась сложной. В частности, иммунизация может потребоваться в ближайшем неонатальном периоде, поскольку пик заболеваемости для заболевания нижних дыхательных путей наступает в возрасте 2-5 месяцев. Однако известно, что в это время иммунный ответ новорожденных незрелый. Кроме того, младенец в этот момент времени все еще имеет высокие титры материнских антител к РСВ, что может снизить иммуногенность вакцины (Murphy et al., 1988, J. Virol. 62:3907-3910; и Murphy et al, 1991, Vaccine 9:185-189).
[00015] В настоящее время единственным одобренным подходом к профилактике заболевания РСВ является пассивная иммунизация. Например, гуманизированное антитело, паливизумаб (синагис®), которое специфично в отношении эпитопа белка F, одобрено для внутримышечного введения педиатрическим пациентам для предотвращения серьезного заболевания нижних дыхательных путей, вызванного РСВ, в рекомендуемых ежемесячных дозах 15 мг/кг массы тела в течение сезона РСВ (с ноября по апрель в северном полушарии). Синагис® представляет собой смесь последовательностей антител человека (95%) и мыши (5%) (Johnson et al, (1997), J. Infect. Diseases 176:1215-1224 и патент США 5824307).
[00016] Несмотря на то, что синагис® успешно применяется для предотвращения РСВ-инфекции у педиатрических пациентов, для достижения профилактического эффекта требуются многократные внутримышечные дозы 15 мг/кг синагис®. Необходимость введения нескольких внутримышечных доз антитела требует повторных посещений кабинета врача, что не только неудобно для пациента, но также может привести к пропуску доз.
[00017] Были предприняты попытки улучшения терапевтического профиля антитела к РСВ-F, что привело к выявлению и разработке мотавизумаба, также называемого нумакс (NUMAX™). Однако клинические исследования показали, что некоторые пациенты, которым вводили мотавизумаб, имели тяжелые реакции гиперчувствительности. После этого дальнейшая разработка этого гуманизированного антитела к РСВ-F была прекращена.
[00018] Другие антитела к белку РСВ-F были описаны и могут быть найдены в US 6656467; US 5824307, US 7786273; US 7670600; US 7083784; US 6818216; US 7700735; US 7553489; US 7323172; US 7229619; US 7425618; US 7740851; US 7658921; US 7704505; US 7635568; US 6855493; US 6565849; US 7582297; US 7208162; US 7700720; US 6413771; US 5811524; US 6537809; US 5762905; US 7070786; US 7364742; US 7879329; US 7488477; US 7867497; US 5534411; US 6835372; US 7482024; US 7691603; US 8562996; US 8568726; US 9447173; US 20100015596; WO 2009088159 A1; и WO 2014159822. В настоящее время ни одно из антител, за исключением синагис®, не было одобрено регулирующим органом для применения при предотвращении РСВ-инфекции.
[00019] Сохраняется необходимость в обеспечении высокоспецифичных, высокоаффинных и высокоактивных нейтрализующих антител к РСВ и их антигенсвязывающих фрагментов, которые нейтрализуют по меньшей мере один, но предпочтительно оба, из вирусных штаммов подтипа A и подтипа B РСВ, и которые предпочтительно распознают PreF в сравнении с конформацией PostF белка F. Также остается необходимость в обеспечении перекрестно нейтрализующих антител к РСВ и к HMPV и их антигенсвязывающих фрагментов.
Краткое описание изобретения
[00020] Заявитель обнаружил, выделил и охарактеризовал в данном исследовании, среди прочего, обширную панель РСВ-F-специфичных моноклональных антител из В-клеток памяти здорового взрослого человека-донора и применил эти антитела для исчерпывающего картирования антигенной топологии РСВ-F. Большая доля репертуара РСВ-F-специфичных антител человека предпочтительно состояла из антител со значительно повышенной специфичностью в отношении конформации PreF белка F (в сравнении с формой PostF), многие из которых, если не большинство, проявляли значительную активность в количественных исследованиях нейтрализации против одного или обоих из штаммов подтипа A РСВ и подтипа B РСВ. Действительно, большое количество этих антител имеют величины нейтрализующей активности, которые в несколько раз выше, примерно в 5-100 раз или более, по сравнению с предшествующими терапевтическими антителами к РСВ, такими как D25 и паливизумаб, и в этой связи являются привлекательными терапевтическими и/или профилактическими кандидатами для лечения и/или предотвращения инфекции и заболевания РСВ.
[00021] Было обнаружено, что наиболее активные антитела нацелены на два различных антигенных сайта, которые расположены вблизи вершины тримера preF, обеспечивая сильную поддержку для разработки терапевтических и/или профилактических антител, нацеленных на эти антигенные сайты, а также вакцин-кандидатов на основе preF, которые сохраняют эти антигенные сайты. Кроме того, нейтрализующие антитела, описанные и раскрытые в настоящем документе, представляют собой новые возможности для предотвращения тяжелого заболевания РСВ с применением пассивной иммунопрофилактики.
[00022] Учитывая роль, которую белок F играет в слиянии вируса с клеткой и в передаче вируса от клетки к клетке, антитела и фармацевтические композиции, описанные в настоящем документе, обеспечивают способ ингибирования этого процесса и как таковые могут применяться для предотвращения инфекции пациента, подвергающегося воздействию или подверженного риску РСВ-инфекции, или для лечения и/или улучшения одного или более симптомов, связанных с РСВ-инфекцией, у пациента, подвергающегося воздействию или подверженного риску РСВ-инфекции, или страдающего РСВ-инфекцией. Антитела, описанные в настоящем документе, также можно применять для предотвращения или лечения РСВ-инфекции у пациента, который может иметь более тяжелую форму РСВ-инфекции из-за первопричинного или ранее существовавшего патологического состояния. Пациент, который может получить пользу от лечения с применением антитела и/или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, может быть недоношенным младенцем, доношенным младенцем, рожденным в течение сезона РСВ (приблизительно с поздней осени (ноябрь) до ранней весны (апрель)), который подвержен риску вследствие других ранее существовавших или первопричинных патологических состояний, включая врожденный порок сердца или хроническое заболевание легких, ребенком старше одного года с первопричинным патологическим состоянием или без него, пациента в учреждении закрытого типа или госпитализированного пациента или пожилого взрослого (>65 лет) с первопричинным патологическим состоянием или без него, таким как застойная сердечная недостаточность (ЗСН) или хроническая обструктивная болезнь легких (ХОБЛ). Пациент, который может получить пользу от такой терапии, может страдать патологическим состоянием, вызванным нарушением легочной, сердечно-сосудистой, нервно-мышечной или иммунной системы. Например, пациент может страдать патологией дыхательных путей или дисфункцией дыхательных путей, хроническим заболеванием легких, хроническим или врожденным заболеванием сердца, нервно-мышечным заболеванием, которое нарушает секрецию в дыхательных путях, или у пациента может быть подавлен иммунитет из-за тяжелого комбинированного иммунодефицитного заболевания или тяжелого приобретенного иммунодефицитного заболевания или из-за любого другого первопричинного инфекционного заболевания или ракового состояния, которое приводит к иммуносупрессии, или у пациента может быть ослаблен иммунитет из-за лечения иммуносупрессорным лекарственным препаратом (например, любым лекарственным препаратом, используемым для лечения пациента, имеющего трансплантат) или радиотерапии. Пациент, который может получить пользу от антител и/или фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению, может быть пациентом, который страдает хроническим обструктивным заболеванием легких (ХОБЛ), муковисцидозом (CF), бронхолегочной дисплазией, застойной сердечной недостаточностью (ЗСН) или врожденным пороком сердца.
[00023] Поскольку антитела согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающие фрагменты более эффективны при нейтрализации РСВ по сравнению с известными антителами, то для достижения более высокого уровня защиты против РСВ-инфекции и более эффективного лечения и/или улучшения симптомов, связанных с РСВ-инфекцией, можно применять более низкие дозы антител или фрагментов антител или фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению. Соответственно, применение более низких доз антител или их фрагментов, которые иммуноспецифично связываются с антигеном РСВ-F, может привести к меньшему количеству или менее серьезным нежелательным явлениям. Аналогичным образом, применение более эффективных нейтрализующих антител может привести к снижению потребности в частом введении антител или фрагментов антител или фармацевтических композиций, которое, как предполагалось ранее, необходимо для предотвращения инфекции или для нейтрализации вируса, или для лечения или улучшения одного или более симптомов, связанных с РСВ-инфекцией. Симптомы РСВ-инфекции могут включать синеватый цвет кожи из-за недостатка кислорода (гипоксия), затрудненное дыхание (учащенное дыхание или одышка), кашель, крупозный кашель (лающий кашель «морского котика»), лихорадку, раздувание крыльев носа, заложенность носа (заложенный нос), апноэ, снижение аппетита, обезвоживание, недостаточное питание, изменение психического состояния или хрипение.
[00024] Такие антитела или фармацевтические композиции можно применять при профилактическом введении (до воздействия вируса и инфекции вирусом) для снижения тяжести или продолжительности первичной РСВ-инфекции или для улучшения по меньшей мере одного симптома, связанного с инфекцией. Антитела или фармацевтические композиции можно применять по отдельности или в сочетании со вторым агентом, пригодным для лечения РСВ-инфекции. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела или фармацевтические композиции могут быть введены терапевтически (после воздействия и инфекции вирусом) либо по отдельности, либо в сочетании со вторым агентом для уменьшения тяжести или продолжительности первичной инфекции, либо для улучшения по меньшей мере одного симптома, связанного с инфекцией. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела или фармацевтические композиции можно применять профилактически в качестве монотерапии для защиты пациентов, подверженных риску РСВ-инфекции, таких как те, которые описаны выше. Любая из этих популяций пациентов может получить пользу от лечения с применением антител согласно настоящему изобретению, при их введении по отдельности или в сочетании со вторым агентом, включая, например, противовирусную терапию, такую как рибавирин, или другие противовирусные вакцины.
[00025] Антитела согласно настоящему изобретению могут быть полноразмерными (например, антитело IgG1 или IgG4) или могут содержать только антигенсвязывающую часть (например, фрагмент Fab, F(ab')2 или scFv), и могут быть модифицированы для влияния на функциональность, например, для устранения остаточных эффекторных функций (Reddy et al., (2000), J. Immunol. 164:1925-1933).
[00026] Соответственно, согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфично связываются с белком F (F) респираторно-синцитиального вируса (РСВ), в которых по меньшей мере одна, по меньшей мере две, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять или по меньшей мере шесть из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и CDRL3 таких антител или их антигенсвязывающих фрагментов идентичны по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; по меньшей мере одной, по меньшей мере двум, по меньшей мере трем, по меньшей мере четырем, по меньшей мере пяти или по меньшей мере шести аминокислотным последовательностям CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и/или CDRL3, раскрытым в таблице 6, антитела, выбранного из антител №№124-244, представленных в таблице 6; и при этом указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент также имеет одну или более из следующих характеристик: a) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты перекрестно конкурируют с указанными антителами или их антигенсвязывающими фрагментами за связывание с РСВ-F; b) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют лучшую аффинность связывания в отношении формы PreF РСВ-F по сравнению с формой PostF; c) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют профиль с отсутствующей или низкой полиреактивностью; d) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют нейтрализующую активность в отношении подтипа A РСВ и подтипа B РСВ в условиях in vitro; e) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют специфичность в отношении антигенного сайта РСВ-F в сайте ∅, сайте I, сайте II, сайте III, сайте IV или сайте V; f) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют специфичность в отношении антигенного сайта ∅, сайта V или сайта III РСВ-F по сравнению с сайтом I, сайтом II или сайтом IV РСВ-F; g) по меньшей мере часть эпитопа, с которой взаимодействуют антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, содержит α3-спираль и β3/β4-шпильку PreF; h) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют нейтрализующую активность (ИК50) в условиях in vitro от приблизительно 0,5 микрограмм/миллилитр (мкг/мл) до приблизительно 5 мкг/мл; от приблизительно 0,05 мкг/мл до приблизительно 0,5 мкг/мл; или менее приблизительно 0,05 мг/мл; i) значения аффинности связывания и/или виды эпитопной специфичности антител или их антигенсвязывающих фрагментов в отношении любого из вариантов РСВ-F, обозначенных 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и DG на Фигуре 7А, снижены или устранены относительно значений аффинности связывания и/или видов эпитопной специфичности указанных антител или их антигенсвязывающих фрагментов в отношении РСВ-F или РСВ-F DS-Cav1; j) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют перекрестную нейтрализующую активность (ИК50) против метапневмовируса человека (HMPV); k) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты не конкурируют с D25, MPE8, паливизумабом или мотавизумабом; или l) антитела или их антигенсвязывающие фрагменты проявляют по меньшей мере приблизительно в 2 раза; по меньшей мере приблизительно в 3 раза; по меньшей мере приблизительно в 4 раза; по меньшей мере приблизительно в 5 раз; по меньшей мере приблизительно в 6 раз; по меньшей мере приблизительно в 7 раз; по меньшей мере приблизительно в 8 раз; по меньшей мере приблизительно в 9 раз; по меньшей мере приблизительно в 10 раз; по меньшей мере приблизительно в 15 раз; по меньшей мере приблизительно в 20 раз; по меньшей мере приблизительно в 25 раз; по меньшей мере приблизительно в 30 раз; по меньшей мере приблизительно в 35 раз; по меньшей мере приблизительно в 40 раз; по меньшей мере приблизительно в 50 раз; по меньшей мере приблизительно в 55 раз; по меньшей мере приблизительно в 60 раз; по меньшей мере приблизительно в 70 раз; по меньшей мере приблизительно в 80 раз; по меньшей мере приблизительно в 90 раз; по меньшей мере приблизительно в 100 раз; более чем в 100 раз; и на любую относительную величину, которая находится в пределах указанного диапазона; более высокую нейтрализующую активность (ИК50), чем D25 и/или паливизумаб.
[00027] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты имеют: по меньшей мере две; по меньшей мере три; по меньшей мере 4; по меньшей мере 5; по меньшей мере 6; по меньшей мере 7; по меньшей мере 8; по меньшей мере 9; по меньшей мере 10; по меньшей мере 11; или по меньшей мере 12; из характеристик от a) до l), упомянутых выше.
[00028] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты содержат: a) аминокислотную последовательность CDRH3 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6; b) аминокислотную последовательность CDRH2 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6; c) аминокислотную последовательность CDRH1 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6; d) аминокислотную последовательность CDRL3 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6; e) аминокислотную последовательность CDRL2 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6; f) аминокислотную последовательность CDRL1 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6; или g) любую комбинацию двух или более из a), b), c), d), e) и f).
[00029] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты содержат: a) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (HC) любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6; и/или b) аминокислотную последовательность легкой цепи (LC) любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[00030] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты выбраны из группы, состоящей из антител, которые идентичны по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; любому из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[00031] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты выбраны из группы, состоящей из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[00032] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, кодирующие антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, или их легкие и/или тяжелые цепи в соответствии с любым из других вариантов реализации, раскрытых в настоящем документе.
[00033] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены векторы экспрессии, содержащие выделенные последовательности нуклеиновых кислот в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе.
[00034] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены клетки-хозяева, трансфецированные, трансформированные или трансдуцированные последовательностями нуклеиновых кислот или векторами экспрессии в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе.
[00035] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, содержащие: одно или более выделенных антител или их антигенсвязывающих фрагментов в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
[00036] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, содержащие: одну или более последовательностей нуклеиновых кислот в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем описании; или один или более векторов экспрессии в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
[00037] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены трансгенные организмы, содержащие последовательности нуклеиновых кислот в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; или векторы экспрессии в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе.
[00038] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) или по меньшей мере одного симптома, связанного с РСВ-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом: a) одного или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; b) последовательностей нуклеиновых кислот в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; вектора экспрессии в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; клетки-хозяина в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; или e) фармацевтической композиции в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести.
[00039] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) и/или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом: a) одного или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; b) последовательности нуклеиновой кислоты в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; c) вектора экспрессии в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; d) клетки-хозяина в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; или e) фармацевтической композиции в соответствии с другими вариантами реализации, раскрытыми в настоящем документе; так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают, или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы в соответствии с другими вариантами реализации, в которых одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов: a) выбраны из группы, состоящей из антител, обозначенных антитела №№179, 188, 211, 221 или 229, представленных в таблице 6.
[00040] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы в соответствии с другими вариантами реализации, в которых способ дополнительно включает введение пациенту второго терапевтического агента.
[00041] Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы в соответствии с другими вариантами реализации, в которых второй терапевтический агент выбран из группы, состоящей из: противовирусного агента; вакцины, специфичной в отношении РСВ, вакцины, специфичной в отношении вируса гриппа, или вакцины, специфичной в отношении метапневмовируса (MPV); миРНК, специфичной в отношении антигена РСВ или антигена метапневмовируса (MPV); второго антитела, специфичного в отношении антигена РСВ или антигена метапневмовируса (MPV); антитела к IL4R, антитела, специфичного в отношении антигена вируса гриппа, антитела к РСВ-G и НПВП.
[00042] Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, содержащие любое одно или более из выделенных антител или их антигенсвязывающих фрагментов и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
[00043] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции в соответствии с другими вариантами реализации для применения при предотвращении инфекции респираторно- синцитиальным вирусом (РСВ) у пациента, нуждающегося в этом или предположительно нуждающегося в этом, или для лечения пациента, страдающего РСВ-инфекцией, или для улучшения по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией, причем в результате такого применения либо предотвращается инфекция, либо предотвращается, улучшается или уменьшается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
[00044] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции в соответствии с другими вариантами реализации для применения при лечении или предупреждении либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) и/или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, у пациента, нуждающегося в этом или предположительно нуждающегося в этом, причем в результате такого применения либо предотвращается инфекция, либо предотвращается, улучшается или уменьшается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
[00045] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены варианты применения фармацевтических композиций в соответствии с другими вариантами реализации при изготовлении лекарственного средства для предотвращения инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) у пациента, нуждающегося в этом, или для лечения пациента, страдающего РСВ-инфекцией, или для улучшения по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией, причем либо предотвращается инфекция, либо предотвращается, улучшается или уменьшается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
[00046] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены варианты применения фармацевтических композиций в соответствии с другими вариантами реализации при изготовлении лекарственного средства для предотвращения либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) и/или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией и/или указанной HMPV-инфекцией, у пациента, нуждающегося в этом или предположительно нуждающегося в этом, причем в результате такого применения либо предотвращается инфекция, либо предотвращается, улучшается или уменьшается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
Краткое описание Фигур
[00047] Фигуры 1A-1F иллюстрируют клонирование репертуара антител к РСВ и анализ последовательности идентифицированных и выделенных антител. Фигура 1А: сортировка РСВ-F-специфичных В-клеток. На графиках FACS показана реактивность РСВ-F-специфичных IgG+ и IgA+ B-клеток от здорового взрослого человека-донора. В-клетки в квадранте 2 (Q2) были отсортированы по одной клетке. Фигура 1B: анализ изотипа. На графиках индексной сортировки показан процент РСВ-F-специфичных В-клеток, которые экспрессируют IgG или IgA. Фигура 1C: анализ клональной линии. Каждый сектор представляет одну клональную линию; размер сектора пропорционален количеству клонов в линии. Общее количество клонов показано в центре секторной диаграммы. Клональные линии были определены на основании следующих критериев: 1) совпадение вариабельных и соединяющихся генных сегментов; 2) одинаковые значения длины петли CDR3; и 3) >80% гомология нуклеотидных последовательностей CDR3. Фигура 1D: анализ репертуара VH. Гены VH зародышевой линии считали обогащенными в репертуаре РСВ, если было обнаружено, что данный ген обогащен более чем в 3 раза по сравнению с репертуарами, неспецифичными в отношении РСВ (33). Фигура 1E: распределение значений длины CDRH3. Фигура 1F: соматическая гипермутация в VH (исключая CDRH3). Красная планка указывает среднее количество нуклеотидных замен. Каждая клональная линия представлена только один раз на Фигуре 1D и Фигуре 1E. Данные для РСВ-нереактивных IgG были получены из опубликованных последовательностей, полученных путем высокопроизводительного секвенирования репертуаров перегруппированных вариабельных генов антител здоровых индивидуумов (33).
[00048] Фигуры 2А-2D иллюстрируют сходные предпочтительные параметры антител, наблюдаемые для конформационного состояния и подтипа РСВ-F в репертуаре. Фигура 2А: аффинность IgG в отношении preF и postF представлена в графическом виде. Фигура 2В: процент антител в донорском репертуаре, которые распознавали обе конформации F (зеленый) или связывались только с preF (голубой) или postF (оранжевый). Фигура 2C: процент антител в донорском репертуаре, которые специфично связываются с подтипом А (зеленый), подтипом B (синий) или обоими подтипами A и B (красный). N.B., несвязывающееся антитело. Значения KD IgG рассчитывали для антител с ответами, измеренными методом интерферометрии биослоев (BLI), >0,1 нм. Антитела с ответами BLI<0,05 нм были обозначены N.B. Фигура 2D: анализ полиреактивности антител к РСВ. Полиреактивность выделенных антител к РСВ-F измеряли с использованием описанного ранее количественного исследования (42, 43). Для сравнения были включены три панели контрольных антител: группа из 138 антител, в настоящее время проходящих клинические исследования, 39 антител, которые были одобрены для клинического применения, и 14 широко нейтрализующих антител к ВИЧ.
[00049] Фигуры 3А-3G иллюстрируют картирование и виды специфичности антител к РСВ в отношении антигенных сайтов, включающих поверхность PreF и PostF. Фигура 3А: определенная ранее структура preF с одним протомером, показанным в виде лент, и с шестью антигенными участками, радужной окраски от красного до фиолетового. Фигура 3В: представлен процент антител, нацеленных на каждый антигенный сайт. Фигура 3С: процент preF-специфичных антител, нацеленных на каждый антигенный сайт. Фигура 3D: значения кажущейся аффинности связывания антитела в отношении антигенных сайтов PreF подтипа А. Фигура 3Е: значения кажущейся аффинности связывания в отношении антигенных сайтов postF подтипа А. Фигура 3F: значения кажущейся аффинности связывания антитела в отношении антигенных сайтов PreF подтипа B. Фигура 3G. значения кажущейся аффинности связывания в отношении postF подтипа B. В этот анализ были включены только антитела со значениями кажущейся аффинности связывания, превышающими 2 нМ, поскольку антитела с более низкой аффинностью не поддавались надежному картированию. Красные планки показывают медиану, и пунктирная серая линия соответствует значению 2 нМ. N.B., несвязывающееся антитело.
[00050] Фигуры 4A-4G иллюстрируют виды нейтрализующей активности антител к РСВ и корреляцию между активностью и специфичностью PreF по сравнению с PostF для каждого из подтипов A и B РСВ. Фигура 4A: Значения ИК50 нейтрализации для антител, выделенных из донорского репертуара. Точки данных обозначены цветом в зависимости от нейтрализующей активности, в соответствии с пояснительной надписью справа. Красные и синие пунктирные линии обозначают ИК50 мотавизумаба и D25, соответственно. Фигура 4B: процент нейтрализующих антител в донорском репертуаре против подтипа A или подтипа B РСВ, стратифицированных по активности, как указано в пояснительной надписи в правой части фигуры. Фигура 4С: процент антител в донорском репертуаре, которые нейтрализовали как подтип A РСВ, так и подтип B (красный) РСВ либо нейтрализовали только подтип A РСВ (зеленый) или подтип B РСВ (синий). Фигура 4D: значения кажущейся аффинности связывания в отношении подтипа A, preF и postF, представленные в графическом виде для каждого антитела (значения KD IgG рассчитывали для антител с ответами BLI>0,1 нм. Антитела с ответами BLI<0,05 нм были обозначены N.B.). Фигура 4E: значения ИК50 для нейтрализации представлены в графическом виде для подтипа A РСВ preF-специфичных, postF-специфичных и перекрестно-реактивных антител. (Красные и синие пунктирные линии обозначают ИК50 мотавизумаба и D25, соответственно. Красные полоски обозначают медианы. N.B., несвязывающееся антитело; N.N., ненейтрализующее антитело). Фигура 4F: значения кажущейся аффинности связывания антител в отношении подтипа B, preF и postF. Фигура 4G: значения ИК50 представлены в графическом виде для подтипа В РСВ preF- специфичных, postF-специфичных и перекрестно реактивных антител. (Черная полоска обозначает медиану. N.B., несвязывающееся антитело; N.N., ненейтрализующее антитело).
[00051] Фигуры 5A-5C иллюстрируют, что наиболее активные нейтрализующие антитела связываются с высокой аффинностью с preF и распознают антигенные сайты ∅ и V. Фигура 5А: значения кажущейся KD в отношении preF нанесены на график против значений ИК50 для нейтрализации и обозначены цветом в соответствии с антигенным сайтом, как показано в пояснительной надписи в правой части Фигуры 5C. Фигура 5В: значения кажущейся KD в отношении postF нанесены на график против значений ИК50 для нейтрализации и обозначены цветом, как на Фигуре 5А. Фигура 5C: антитела, сгруппированы в соответствии с нейтрализующей активностью и обозначены цветом в зависимости от антигенного сайта, как в пояснительной надписи справа. N.B., несвязывающееся антитело; N.N., ненейтрализующее антитело. Значения KD IgG рассчитывали для антител с ответами BLI>0,1 нм. Антитела с ответами BLI<0,05 нм были обозначены N.B. Статистическую значимость определяли с использованием двустороннего непарного t-критерия. Коэффициент корреляции Пирсона, r, рассчитывали с использованием программного обеспечения Prism, версия 7.0. Антитела, не способные к связыванию или нейтрализации, были исключены из статистического анализа из-за невозможности точно рассчитать концентрации в средней точке.
[00052] Фигуры 6А-6С иллюстрируют характер и очистку зондов для сортировки preF и postF. Фигура 6А: схема флуоресцентного зонда для предшествующей слиянию формы белка F, preF РСВ, показывает одну ФЭ-конъюгированную молекулу стрептавидина, связанную четырьмя мечеными пептидом AviTag™ тримерными молекулами предшествующей слиянию формы белка F. Фигура 6B: окрашенный Кумасси ДСН-ПААГ демонстрирует выделение РСВ-F с одной меткой AviTag™ на тример с использованием последовательных этапов очистки на смоле Ni-NTA и Strep-тактин, как описано в Методах. Фигура 6С: кривая флуоресцентной эксклюзионной хроматографии (FSEC) тетрамерных зондов на колонке Superose 6. Положения стандартов молекулярной массы указаны стрелками.
[00053] Фигуры 7А-7С иллюстрируют получение и проверку панели мутированных участков preF. Фигура 7А: панель вариантов РСВ-F, используемая для картирования эпитопов. Фигура 7В: белок РСВ-F в предшествующей слиянию форме показан в виде молекулярной поверхности с одним протомером, окрашенным в белый цвет. Девять вариантов, каждый из которых содержит участок мутаций, уникально обозначены цветом в соответствии с таблицей на Фигуре 7А. Фигура 7С: связывание каждого IgG с флуоресцентномечеными гранулами, соединенными с каждым из вариантов, перечисленных на Фигуре 7А, измеряли с использованием ФЭ-конъюгированного антитела к Fc человека на проточном цитометре FLEXMAP 3D (Luminex). Снижение связывания D25 и мотавизумаба с участками 1 и 5, соответственно, согласуется с их структурно определенными эпитопами (10, 11). Связывание AM14 было снижено как для участка 3, так и для участка 9 из-за его уникального эпитопа, включающего протомер (21). Этот характерный профиль связывания был использован, чтобы облегчить классификацию других возможных четвертично-специфичных антител в панели.
[00054] Фигура 8 иллюстрирует антигенный сайт V, расположенный между эпитопами, распознаваемыми D25, MPE8 и мотавизумабом. Белок F в предшествующей слиянию форме показан с одним промотором в виде рисунка, окрашенного в соответствии с расположением антигенного сайта, и два других протомера окрашены в серый цвет. Fab D25 и мотавизумаба показаны синим и розовым цветом, соответственно. Сайт связывания MPE8 обведен черным. Антигенный сайт V расположен между сайтами связывания D25 и MPE8 в пределах одного протомера, что объясняет конкуренцию между антителами, направленными к сайту V, и этими контролями. Конкуренция с мотавизумабом может происходить между двумя соседними протомерами (слева) или в пределах одного протомера (справа), в зависимости от угла сближения этих антител, направленных к сайту V.
[00055] Фигура 9 иллюстрирует процент антител к РСВ, демонстрирующих указанные виды нейтрализующей активности preF-специфичных, postF-специфичных и перекрестно- реактивных антител. Антитела были стратифицированы в соответствии с нейтрализующей активностью, и процент антител в каждой группе, которые были preF-специфичными (розовые), postF-специфичными (белые) или перекрестно-реактивными (оранжевыми), представляли в графической форме для подтипа A (левая панель) и подтипа B (правая панель).
[00056] Фигуры 10А-10С иллюстрируют взаимосвязь между нейтрализацией подтипа B и специфичностью в отношении антигенного сайта для антител к РСВ. Фигура 10А: аффинность в отношении preF подтипа B, нанесенная на график против значений ИК50 для нейтрализации, для всех антител и обозначенная цветом на основании антигенного сайта в соответствии с цветовой схемой, изображенной на Фигуре 10С, правая часть. Фигура 10В: аффинность в отношении PostF, нанесенная на график против значений ИК50, и обозначенная цветом, как на Фигуре 10А. Фигура 10С: антитела со значениями аффинности в отношении preF выше 2 нМ сгруппированы в соответствии с нейтрализующей активностью и обозначены цветом в соответствии с антигенным сайтом (правая часть).
[00057] Фигура 11 иллюстрирует нейтрализацию A2 РСВ в условиях in vitro. Ингибирование репликации РСВ измеряли в количественном исследовании нейтрализации на основе ИФА с использованием клеток линии Hep-2. Клетки, моноклональные антитела (МАТ) и вирусы совместно инкубировали в течение 4 дней при 37°C с последующим количественным определением вирусных белков в инфицированных клетках с использованием поликлонального антитела к РСВ. Процент (%) ингибирования рассчитывали относительно контрольных клеток, инфицированных вирусом в отсутствие нейтрализующего антитела. Данные выражены как половина максимальной ингибирующей концентрации, которая привела к 50% снижению репликации вируса (ИК50), и представляют среднее значение ± стандартная ошибка среднего двух независимых экспериментов. Контрольное МАТ (*) соответствующего изотипа было включено в каждый эксперимент и не проявляло нейтрализации вируса.
Подробное описание изобретения
[00058] Если не указано иное, все технические и научные термины используются в настоящем документе в значении, соответствующем обычному пониманию специалиста в соответствующей области техники. В настоящем документе термин «приблизительно» при использовании в отношении конкретного приведенного числового значения означает, что значение может отличаться от приведенного значения не более чем на 1%. Например, в настоящем документе выражение «приблизительно 100» включает 99 и 101 и все значения между ними (например, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4 и т. д.).
Определения
[00059] «Белок F респираторно-синцитиального вируса», также называемый «РСВ-F» или «РСВ F», представляет собой трансмембранный поверхностный белок типа I, который имеет отщепляемый N-концевой сигнальный пептид и мембранный якорь вблизи С-конца (Collins, P.L. et al., (1984), PNAS (USA) 81:7683-7687). Белок РСВ-F синтезируется как неактивный предшественник массой 67 кДа, обозначаемый F0 (Calder, L.J.; et al., Virology (2000), 277, 122-131). Белок F0 протеолитически активируется в комплексе Гольджи фуриноподобной протеазой в двух сайтах с получением двух дисульфидсоединенных полипептидов, F2 и F1, с N- и C-конца, соответственно. Высвобождается пептид из 27 аминокислот, называемый «pep27». На каждой стороне pep27 имеются сайты расщепления фурином (FCS) (Collins, P.L.; Mottet, G. (1991), J. Gen. Virol., 72: 3095-3101; Sugrue, R.J, et al. (2001), J.. Gen. Virol., 82, 1375-1386). Субъединица F2 состоит из гептадного повтора C (HRC), в то время как F1 содержит полипептид слияния (FP), гептадный повтор A (HRA), домен I, домен II, гептадный повтор B (HRB), трансмембранный (TM) и цитоплазматический домены (CP) (см. Sun, Z. et al. Viruses (2013), 5:21 1-225). Белок РСВ-F участвует в слиянии вирусной частицы с клеточной мембраной и экспрессируется на поверхности инфицированных клеток, участвуя тем самым в передаче вируса от клетки к клетке и формировании синцития. Аминокислотная последовательность белка РСВ-F представлена в GenBank под номером доступа AAX23994.
[00060] Стабилизированный вариант тримерной конформации Pre-F белка F РСВ, называемый «РСВ-DS-Cav1» или «DS-Cav1», раскрытый, помимо прочего, в Stewart-Jones et al., PLos One, Vol. 10(6) e0128779 и WO 2011/050168, применяли для идентификации, выделения и характеристики антител, раскрытых в настоящем документе.
[00061] В настоящем документе термин «лабораторный штамм» относится к штамму РСВ (подтипа A или B), который интенсивно пассировали в культуре клеток в условиях in vitro. «Лабораторный штамм» может приобретать адаптивные мутации, которые могут влиять на его биологические свойства. В настоящем документе термин «клинический штамм» относится к изоляту РСВ (подтипа A или B), который получают от инфицированного индивидуума и который был выделен и выращен в культуре ткани при нечастом пассировании.
[00062] Термин «эффективная доза 99» или «ЭД99» относится к дозировке агента, которая вызывает желаемый эффект снижения на 99% образования вирусных бляшек относительно изотипического (отрицательного) контроля. В настоящем изобретении ЭД99 относится к дозировке антител к РСВ-F, которая будет нейтрализовать вирусную инфекцию (т.е. снижать вирусную нагрузку на 99%) в условиях in vivo, как описано в Примере 5.
[00063] Термин «ИК50» относится к «половине максимальной ингибирующей концентрации», величина которой является мерой эффективности ингибирования соединением (например, антителом к РСВ-F) в отношении биологической или биохимической полезности. Эта количественная мера указывает количество, необходимое для того чтобы конкретный ингибитор наполовину ингибировал конкретный биологический процесс. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения виды нейтрализующей активности в отношении вируса РСВ для перекрестно-нейтрализующих антител к РСВ и/или антител к РСВ/HMPV, раскрытых в настоящем документе, выражены в виде значений ИК50 для нейтрализации.
[00064] «Паливизумаб», также называемый «синагис®», представляет собой гуманизированное антитело к РСВ-F, вариабельные домены тяжелой и легкой цепей которого имеют аминокислотные последовательности, представленные в US 7635568 и US 5824307. Это антитело, которое иммуноспецифично связывается с белком РСВ-F, в настоящее время одобрено Управлением по контролю качества пищевых продуктов и лекарственных средств США (FDA) для пассивной иммунопрофилактики серьезного заболевания РСВ у детей с высоким риском и вводится внутримышечно в рекомендуемых ежемесячных дозах 15 мг/кг массы тела на протяжении всего сезона РСВ (с ноября по апрель в северном полушарии). Синагис® состоит из смеси последовательностей антител человека (95%) и мышиных антител (5%). См. также Johnson et al., (1997), J. Infect. Diseases 176:1215-1224.
[00065] «Мотавизумаб», также называемый «нумакс™», представляет собой РСВ-F-специфичное гуманизированное моноклональное антитело с повышенной активностью, полученное путем созревания аффинности гипервариабельных участков (CDR) тяжелой и легкой цепей паливизумаба в условиях in vitro. В качестве справочной информации аминокислотная последовательность антитела нумакс™ раскрыта в публикации патента США 2003/0091584 и в патенте США 6818216, а также в Wu et al., (2005) J. Mol. Bio. 350(1):126-144 и в Wu, et al. (2007) J. Mol. Biol. 368:652-665. Она также представлена в настоящем документе как SEQ ID NO: 359 для тяжелой цепи и как SEQ ID NO: 360 для легкой цепи антитела.
[00066] В настоящем документе термины «лечить», «лечение» и «лечащий» относятся к снижению или улучшению прогрессирования, степени тяжести и/или продолжительности вызванной РСВ и/или метапневмовирусом человека (HMPV) инфекции верхних и/или нижних дыхательных путей, отита среднего уха или связанного с этим симптома или респираторного заболевания (такого как астма, хрипение или их комбинация), что является результатом введения одного или более терапевтических средств (включая, но не ограничиваясь этим, введение одного или более профилактических или терапевтических агентов). Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие термины относятся к снижению или ингибированию репликации РСВ и/или HMPV, к ингибированию или снижению распространения РСВ и/или HMPV в другие ткани или другим субъектам (например, распространение в нижние дыхательные пути), к ингибированию или снижению инфицирования клетки РСВ и/или HMPV, или к улучшению одного или более симптомов, связанных с РСВ-инфекцией верхних и/или нижних дыхательных путей или отитом среднего уха.
[00067] В настоящем документе термины «предотвращать», «предотвращающий» и «предотвращение» относятся к предотвращению или ингибированию развития или возникновения вызванной РСВ и/или HMPV инфекции верхних и/или нижних дыхательных путей, отита среднего уха или респираторного заболевания, связанного с ними, у субъекта, к предотвращению или ингибированию прогрессирования вызванной РСВ и/или HMPV инфекции верхних дыхательных путей в инфекцию нижних дыхательных путей, отита среднего уха или респираторного заболевания, связанного с ними, в результате применения терапии (например, профилактического или терапевтического агента), к предотвращению симптома вызванной РСВ и/или HMPV инфекции верхних и/или нижних дыхательных путей, отита среднего уха или респираторного заболевания, связанного с ними, или к введению комбинации терапевтических средств (например, комбинации профилактических или терапевтических агентов). В настоящем документе термины «улучшать» и «облегчать» относятся к снижению или уменьшению степени тяжести состояния или любых его симптомов.
[00068] В настоящем документе термин «антитело» предназначен для обозначения молекул иммуноглобулинов, состоящих из четырех полипептидных цепей, двух тяжелых (Н) цепей и двух легких (L) цепей, соединенных между собой дисульфидными связями (т.е. «полных молекул антител»), а также их мультимеров (например, IgM) или их антигенсвязывающих фрагментов. Каждая тяжелая цепь (HC) состоит из вариабельной области тяжелой цепи («HCVR» или «VH») и константной области тяжелой цепи (состоящей из доменов CH1, CH2 и CH3). Каждая легкая цепь (LC) состоит из вариабельной области легкой цепи («LCVR» или «VL») и константной области легкой цепи (CL). Области VH и VL могут быть дополнительно подразделены на области гипервариабельности, называемые гипервариабельными участками (CDR), перемежающимися с областями, которые являются более консервативными, называемыми каркасными участками (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения FR антитела (или его антигенсвязывающего фрагмента) могут быть идентичны последовательностям зародышевой линии человека или могут быть модифицированы естественным образом или искусственно. Консенсусная аминокислотная последовательность может быть определена на основании параллельного анализа двух или более CDR. Соответственно, CDR в тяжелой цепи обозначены «CHRH1», «CDRH2» и «CDRH3», соответственно, и CDR в легкой цепи обозначены «CDRL1», «CDRL2» и «CDRL3».
[00069] Также возможна замена одного или более остатков CDR или пропуск одного или более CDR. В научной литературе описаны антитела, в которых один или два CDR могут быть устранены для связывания. Padlan et al. (1995 FASEB J. 9:133-139) проанализировали области контакта между антителами и их антигенами на основании опубликованных кристаллических структур и пришли к выводу, что с антигеном фактически связываются только от одной пятой до одной третьей остатков CDR. Padlan et al. также обнаружили много антител, в которых один или два CDR не имели аминокислот, вступающих в контакт с антигеном (см. также Vajdos et al. 2002 J Mol Biol 320:415-428).
[00070] Остатки CDR, не вступающие в контакт с антигеном, могут быть идентифицированы на основании предыдущих исследований (например, остатки H60-H65 в CDRH2 часто не требуются), из областей CDR по Kabat, лежащих вне CDR по Chothia, с помощью молекулярного моделирования и/или эмпирически. Если CDR или его остаток (ки) отсутствует (ют), то его (их) обычно заменяют аминокислотой, занимающей соответствующее положение в другой последовательности антитела человека или консенсусе таких последовательностей. Положения для замены в CDR и аминокислоты для замены также могут быть выбраны эмпирически.
[00071] Полностью моноклональные антитела человека, раскрытые в настоящем документе, могут содержать одну или более замен, вставок и/или делеций аминокислот в каркасных участках и/или CDR вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей по сравнению с соответствующими последовательностями зародышевой линии. Такие мутации могут быть легко установлены путем сравнения аминокислотных последовательностей, раскрытых в настоящем документе, с последовательностями зародышевой линии, доступными, например, из общедоступных баз данных последовательностей антител. В объем настоящего изобретения включены антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые происходят из любой из аминокислотных последовательностей, раскрытых в настоящем документе, в которых одна или более аминокислот в одном или более каркасных участках и/или CDR мутированы с получением соответствующего (их) остатка (ов) последовательности зародышевой линии, из которой происходит антитело, или с получением соответствующего (их) остатка (ов) другой последовательности зародышевой линии человека, или с получением консервативной аминокислотной замены соответствующего (их) остатка (ов) зародышевой линии (такие изменения последовательности в совокупности называются в настоящем документе «мутации зародышевой линии»). Специалист в данной области техники может легко получить многочисленные антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые содержат одну или более индивидуальных мутаций зародышевой линии или их комбинации, взяв за основу последовательности вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, описанные в настоящем документе. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения все каркасные участки и/или CDR в доменах VH и/или VL подвергают обратной мутации с получением остатков, обнаруженных в исходной последовательности зародышевой линии, из которой происходит антитело. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения только определенные остатки подвергают обратной мутации с получением исходной последовательности зародышевой линии, например, только мутированные остатки, обнаруженные в первых 8 аминокислотах FR1 или в последних 8 аминокислотах FR4, или только мутированные остатки, обнаруженные в CDR1, CDR2 или CDR3. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения один или более остатков каркаса и/или CDR подвергают мутации с получением соответствующего (их) остатка (ов) другой последовательности зародышевой линии (т. е. последовательности зародышевой линии, которая отличается от последовательности зародышевой линии, из которой изначально происходит антитело). Кроме того, антитела согласно настоящему изобретению могут содержать любую комбинацию двух или более мутаций зародышевой линии в каркасных участках и/или CDR, например, в которых определенные индивидуальные остатки подвергают мутации с получением соответствующего остатка конкретной последовательности зародышевой линии, в то время как некоторые другие остатки, которые отличаются от исходной последовательности зародышевой линии, сохраняют или подвергают мутации с получением соответствующего остатка другой последовательности зародышевой линии. После получения антител и антигенсвязывающих фрагментов, которые содержат одну или более мутаций зародышевой линии, их можно легко исследовать для определения одного или более желаемых свойств, таких как улучшенная специфичность связывания, повышенная аффинность связывания, улучшенные или повышенные антагонистические или агонистические биологические свойства (в зависимости от обстоятельств), сниженная иммуногенность и т.д. Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, полученные с помощью этого общего способа, включены в объем настоящего изобретения.
[00072] В объем настоящего изобретения также включены полностью моноклональные антитела, содержащие варианты любой из аминокислотных последовательностей CDR, раскрытых в настоящем документе, содержащих одну или более консервативных замен. Например, в объем настоящего изобретения включены антитела, имеющие аминокислотные последовательности CDR, например, содержащие 10 или менее, 8 или менее, 6 или менее, 4 или менее и т.д. консервативных замен аминокислот в сравнении с любой из аминокислотных последовательностей CDR, раскрытых в настоящем документе.
[00073] В настоящем документе термин «антитело человека» предназначен для включения антител, имеющих вариабельные и константные области, происходящие из последовательностей иммуноглобулинов зародышевой линии человека. МАТ человека согласно настоящему изобретению могут включать остатки аминокислот, не кодируемые последовательностями иммуноглобулинов зародышевой линии человека (например, мутации, введенные путем случайного или сайт-специфичного мутагенеза в условиях in vitro или путем соматической мутации в условиях in vivo), например, в CDR и, в частности, CDR3.
[00074] Однако в настоящем документе термин «антитело человека» не предназначен для включения МАТ, в которых последовательности CDR, происходящие из зародышевой линии другого вида млекопитающих (например, мыши), были привиты на последовательности FR человека.
[00075] Термин «гуманизированное антитело» относится к антителу человека, в котором один или более CDR такого антитела были заменены одним или более соответствующими CDR, полученными из антитела из вида, отличного от человека (например, мыши, крысы, кролика, примата). Гуманизированные антитела также могут включать определенные последовательности или остатки, не относящиеся к CDR, происходящие из таких антител из видов, не относящихся к человеку, а также одну или более последовательностей CDR из вида, отличного от человека. Такие антитела могут также называться «химерными» антителами.
[00076] Термин «рекомбинантный» обычно относится к любому белку, полипептиду или клетке, экспрессирующим представляющий интерес ген, который получен методами генной инженерии. Термин «рекомбинантный», используемый в отношении белка или полипептида, означает полипептид, полученный путем экспрессии рекомбинантного полинуклеотида. Белки, применяемые в иммуногенных композициях согласно настоящему изобретению, могут быть выделены из природного источника или получены методами генной инженерии.
[00077] Антитела согласно настоящему изобретению, в некоторых вариантах реализации настоящего изобретения, могут представлять собой рекомбинантные антитела человека. В настоящем документе термин «рекомбинантное антитело человека» предназначен для включения всех антител, включая антитела человека или гуманизированные антитела, которые получают, экспрессируют, создают или выделяют рекомбинантными способами, таких как антитела, экспрессируемые с использованием рекомбинантного вектора экспрессии, трансфецированного в клетку-хозяина (подробно описана ниже), антитела, выделенные из рекомбинантной комбинаторной библиотеки антител человека (подробно описана ниже), антитела, выделенные у животного (например, мыши), которое является трансгенным в отношении генов иммуноглобулина человека (см., например, Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295), или антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные любым другим способом, который включает сплайсинг последовательностей генов иммуноглобулинов человека с другими последовательностями ДНК. Такие рекомбинантные антитела человека имеют вариабельные и константные области, происходящие из последовательностей иммуноглобулинов зародышевой линии человека. Однако согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие рекомбинантные антитела человека подвергают мутагенезу в условиях in vitro (или соматическому мутагенезу в условиях in vivo, если применяют животное, трансгенное в отношении последовательностей Ig человека), и, соответственно, аминокислотные последовательности областей VH и VL рекомбинантных антител представляют собой последовательности, которые, несмотря на то, что они происходят и родственны последовательностям VH и VL зародышевой линии человека, могут не существовать в природе в репертуаре антител зародышевой линии человека в условиях in vivo.
[00078] Термин «специфично связывается» или «специфично связывается с» или тому подобное означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образует комплекс с антигеном, который относительно стабилен в физиологических условиях. Специфичное связывание может быть охарактеризовано равновесной константой диссоциации по меньшей мере приблизительно 1×10-6 М или менее (например, более низкая KD означает более прочное связывание). Способы определения того, связываются ли специфично две молекулы, хорошо известны в данной области техники и включают, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и тому подобное. Как описано в настоящем документе, антитела, специфично связывающиеся с РСВ-F, были идентифицированы с помощью поверхностного плазмонного резонанса, например, BIACORE™, измерений методом интерферометрии биослоев с использованием, например, прибора ForteBio Octet HTX (Pall Life Sciences). Кроме того, мультиспецифичные антитела, которые связываются с белком РСВ-F и одним или более дополнительными антигенами, такими как антиген, экспрессируемый HMPV, или биспецифичные антитела, которые связываются с двумя различными областями РСВ-F, тем не менее, в настоящем документе считаются антителами, которые «связываются специфично». Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела, раскрытые в настоящем документе, имеют значения равновесной константы диссоциации (и, следовательно, величины специфичности) приблизительно 1×10-6 М; приблизительно 1×10-7 М; приблизительно 1×10-8 М; приблизительно 1×10-9 М; приблизительно 1×10-10 М; от приблизительно 1×10-6 М до приблизительно 1×10-7 М; от приблизительно 1×10-7 М до приблизительно 1×10-8 М; от приблизительно 1×10-8 М до приблизительно 1×10-9 М; или от приблизительно 1×10-9 М до приблизительно 1×10-10 М.
[00079] Термин «высокоаффинное» антитело относится к тем МАТ, которые имеют аффинность связывания с РСВ-F и/или HMPV, выраженную как KD, составляющую по меньшей мере 10-9 М; более предпочтительно 10-10 М, более предпочтительно 10-11 М, более предпочтительно 10-12 М, измеренную методом поверхностного плазмонного резонанса, например, BIACORE™, интерферометрии биослоев с использованием, например, прибора ForteBio Octet HTX (Pall Life Sciences), или ИФА в растворе для оценки аффинности.
[00080] Под термином «низкая скорость обратной реакции» «Koff» или «kd» подразумевается антитело, которое диссоциирует от РСВ-F с константой скорости 1×10-3 с-1 или менее, предпочтительно 1×10-4 с-1 или менее, определенной методом поверхностного плазмонного резонанса, например, BIACORE™ или с помощью прибора ForteBio Octet HTX (Pall Life Sciences).
[00081] В настоящем документе термины «антигенсвязывающая часть» антитела, «антигенсвязывающий фрагмент» антитела и тому подобное включают любой природный, полученный ферментативными, синтетическими способами или способами генной инженерии полипептид или гликопротеин, который специфично связывает антиген для образования комплекса. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения в настоящем документе термины «антигенсвязывающая часть» антитела или «фрагмент антитела» относятся к одному или более фрагментам антитела, которые сохраняют способность связываться с РСВ-F и/или HMPV.
[00082] Фрагмент антитела может включать фрагмент Fab, фрагмент F(ab')2, фрагмент Fv, фрагмент dAb, фрагмент, содержащий CDR, или выделенный CDR. Антигенсвязывающие фрагменты антитела могут быть получены, например, из полных молекул антител, с использованием любых подходящих стандартных методик, таких как протеолитическое расщепление или методы рекомбинантной генной инженерии, включающие манипулирование и экспрессию ДНК, кодирующей вариабельные и (необязательно) константные домены антитела. Такая ДНК известна и/или легко доступна, например, из коммерческих источников, библиотек ДНК (включая, например, библиотеки фаг-антитело) или может быть синтезирована. ДНК можно секвенировать и подвергать химическим манипуляциям или с использованием методик молекулярной биологии, например, группировать один или более вариабельных и/или константных доменов в подходящую конфигурацию, или вводить кодоны, создавать остатки цистеина, модифицировать, добавлять или удалять аминокислоты и т.д.
[00083] Неограничивающие примеры антигенсвязывающих фрагментов включают: (i) фрагменты Fab; (ii) фрагменты F(ab')2; (iii) фрагменты Fd; (iv) фрагменты Fv; (v) одноцепочечные молекулы Fv (scFv); (vi) фрагменты dAb; и (vii) минимальные распознающие компоненты, состоящие из аминокислотных остатков, которые имитируют гипервариабельный участок антитела (например, выделенный гипервариабельный участок (CDR), такой как пептид CDR3), или ограниченный пептид FR3-CDR3-FR4. Другие модифицированные молекулы, такие как домен-специфичные антитела, однодоменные антитела, антитела с удаленным доменом, химерные антитела, CDR-привитые антитела, диатела, триатела, тетратела, минитела, нанотела (например, моновалентные нанотела, двухвалентные нанотела и т.д.), малые модульные иммунофармацевтические препараты (SMIP) и вариабельные домены IgNAR акул также включены в выражение «антигенсвязывающий фрагмент», используемое в настоящем документе.
[00084] Антигенсвязывающий фрагмент антитела, как правило, будет содержать по меньшей мере один вариабельный домен. Вариабельный домен может иметь любой размер или аминокислотный состав и обычно будет содержать по меньшей мере один CDR, который является смежным или находится в одной рамке считывания с одной или более каркасными последовательностями. В антигенсвязывающих фрагментах, имеющих домен VH, связанный с доменом VL, домены VH и VL могут быть расположены в любом подходящем положении относительно друг друга. Например, вариабельная область может быть димерной и содержать димеры VH -VH, VH -VL или VL -VL. Согласно другому варианту антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать мономерный домен VH или VL.
[00085] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать по меньшей мере один вариабельный домен, ковалентно соединенный с по меньшей мере одним константным доменом. Неограничивающие примерные конфигурации вариабельных и константных доменов, которые могут быть обнаружены в антигенсвязывающем фрагменте антитела согласно настоящему изобретению, включают: (i) VH -CH1; (ii) VH -CH2; (iii) VH -CH3; (iv) VH -Ch1-Ch2; (v) VH -Ch1-Ch2-Ch3; (vi) VH -CH2-CH3; (vii) VH -CL; (viii) VL -CH1; (ix) VL - CH2; (x) VL -CH3; (xi) VL -CH1-CH2; (xii) VL -CH1-CH2-CH3; (xiii) VL -CH2-CH3; и (xiv) VL - CL. В любой конфигурации вариабельного и константного доменов, включая любую из примерных конфигураций, перечисленных выше, вариабельный и константный домены могут быть либо непосредственно соединены друг с другом, либо могут быть соединены полной или частичной шарнирной или линкерной областью. Шарнирная область может состоять по меньшей мере из 2 (например, 5, 10, 15, 20, 40, 60 или более) аминокислот, что приводит к образованию гибкой или полугибкой связи между смежными вариабельными и/или константными доменами в отдельной молекуле полипептида. Кроме того, антигенсвязывающий фрагмент антитела согласно настоящему изобретению может содержать гомодимер или гетеродимер (или другой мультимер) любой из конфигураций вариабельного и константного доменов, перечисленных выше, которые нековалентно связаны друг с другом и/или с одним или более мономерными доменами VH или VL (например, дисульфидной (ыми) связью (ями)).
[00086] Как и в случае полных молекул антител антигенсвязывающие фрагменты могут быть моноспецифичными или мультиспецифичными (например, биспецифичными). Мультиспецифичный антигенсвязывающий фрагмент антитела обычно будет содержать по меньшей мере два разных вариабельных домена, причем каждый вариабельный домен способен специфично связываться с отдельным антигеном или с другим эпитопом на одном и том же антигене. Любой формат мультиспецифичного антитела, включая примерные форматы биспецифичных антител, раскрытых в настоящем документе, может быть адаптирован для применения в случае антигенсвязывающего фрагмента антитела согласно настоящему изобретению с использованием обычных методик, доступных в данной области техники.
[00087] Согласно конкретным вариантам реализации настоящего изобретения антитело или фрагменты антитела согласно настоящему изобретению могут быть конъюгированы с терапевтическим фрагментом («иммуноконъюгат»), таким как антибиотик, второе антитело к РСВ-F, антитело к HMPV, вакцина или анатоксин, или любым другим терапевтическим фрагментом, который можно применять для лечения РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции.
[00088] В настоящем документе «выделенное антитело» предназначено для обозначения антитела, которое по существу не содержит другие антитела (АТ), имеющие различные виды антигенной специфичности (например, выделенное антитело, которое специфично связывается с РСВ-F и/или HMPV, или его фрагмент, по существу не содержит АТ, которые специфично связывают антигены, отличные от РСВ-F и/или HMPV).
[00089] В настоящем документе термин «блокирующее антитело» или «нейтрализующее антитело» (или «антитело, которое нейтрализует активность РСВ-F и/или HMPV»), предназначен для обозначения антитела, связывание которого с антигеном РСВ-F или HMPV, в зависимости от обстоятельств, раскрытых в настоящем документе, приводит к ингибированию по меньшей мере одного вида биологической активности РСВ-F и/или HMPV. Например, антитело согласно настоящему изобретению может способствовать блокированию слияния РСВ и/или HMPV с клеткой хозяина или предотвращать образование синцития, или предотвращать первичное заболевание, вызванное РСВ и/или HMPV. Согласно другому варианту антитело согласно настоящему изобретению может быть способно улучшать по меньшей мере один симптом РСВ-инфекции и/или HMPV- инфекции. Это ингибирование биологической активности РСВ-F и/или HMPV можно оценить путем измерения одного или более показателей биологической активности РСВ-F и/или HMPV с помощью одного или более стандартных количественных исследований в условиях in vitro (таких как количественное исследование нейтрализации, описанное в настоящем документе) или количественных исследований в условиях in vivo, известных в данной области техники (например, модели на животных для определения защиты от антигенной стимуляции РСВ и/или HMPV после введения одного или более антител, описанных в настоящем документе).
[00090] В настоящем документе термин «поверхностный плазмонный резонанс» относится к оптическому явлению, которое позволяет исследовать взаимодействия биомолекул в реальном времени путем детектирования изменений концентраций белка в матрице биосенсора, например, с использованием системы BIACORE™ (Pharmacia Biosensor AB, Упсала, Швеция и Пискатэуэй, Нью-Джерси, США).
[00091] В настоящем документе термин «KD» предназначен для обозначения равновесной константы диссоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген.
[00092] Термин «эпитоп» относится к антигенной детерминанте, которая взаимодействует со специфичным антигенсвязывающим сайтом в вариабельной области молекулы антитела, известным как паратоп. Один антиген может иметь более одного эпитопа. Соответственно, различные антитела могут связываться с различными областями на антигене и могут иметь разные биологические эффекты. Термин «эпитоп» также относится к сайту на антигене, на который отвечают B- и/или Т-клетки. Это также относится к области антигена, которая связана антителом. Эпитопы могут быть определены как структурные или функциональные. Функциональные эпитопы обычно представляют собой подгруппу структурных эпитопов и содержат те остатки, которые непосредственно вносят вклад в аффинность взаимодействия. Эпитопы также могут быть конформационными, т. е. состоящими из нелинейных аминокислотных последовательностей. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения эпитопы могут включать детерминанты, которые представляют собой химически активные поверхностные группировки молекул, такие как аминокислоты, боковые цепи сахаров, фосфорильные группы или сульфонильные группы, и, согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения, могут иметь конкретные трехмерные структурные характеристики и/или конкретные характеристики заряда.
[00093] Термин «существенная идентичность» или «по существу идентичный», когда он относится к нуклеиновой кислоте или ее фрагменту, указывает на то, что, при оптимальном сопоставлении с соответствующими нуклеотидными вставками или делециями другой нуклеиновой кислоты (или ее комплементарной цепи), по меньшей мере приблизительно 90% и более предпочтительно по меньшей мере приблизительно 95%, 96%, 97%, 98% или 99% нуклеотидных оснований в нуклеотидных последовательностях являются идентичными, согласно результатам измерения с помощью любого известного алгоритма оценки идентичности последовательностей, такого как FASTA, BLAST или GAP, как обсуждается ниже. Соответственно, для последовательностей нуклеиновых кислот, которые проявляют определенный процент «идентичности», этот процент идентичности является общим и/или они «идентичны» друг другу на этот процент. Молекула нуклеиновой кислоты, существенно идентичная эталонной молекуле нуклеиновой кислоты, может в некоторых случаях кодировать полипептид, имеющий такую же или по существу сходную аминокислотную последовательность, как и полипептид, кодируемый эталонной молекулой нуклеиновой кислоты.
[00094] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения раскрытые последовательности нуклеиновых кислот антител, например, идентичны по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; другим последовательностям и/или имеют общий процент идентичности друг с другом (или с некоторыми подгруппами последовательностей антител, раскрытых в настоящем документе).
[00095] Применительно к полипептидам термин «существенная идентичность» или «по существу идентичный» означает, что две пептидные последовательности, при оптимальном сопоставлении, например, с помощью программ GAP или BESTFIT с использованием штрафа за пробел по умолчанию, имеют общий процент идентичности последовательностей по меньшей мере 90%, еще более предпочтительно по меньшей мере 95%, 98% или 99% идентичность последовательностей. Соответственно, аминокислотные последовательности, которые проявляют определенный процент «идентичности», имеют такой общий процент идентичности и/или «идентичны» друг другу на этот процент. Соответственно, аминокислотные последовательности, которые проявляют определенный процент «идентичности», имеют такой общий процент идентичности и/или «идентичны» друг другу на этот процент.
[00096] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения раскрытые аминокислотные последовательности антител, например, идентичны по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; другим последовательностям и/или имеют такой общий процент идентичности друг с другом (или с некоторыми подгруппами последовательностей антител, раскрытых в настоящем документе).
[00097] Предпочтительно положения остатков, которые не являются идентичными, отличаются консервативными заменами аминокислот. «Консервативная замена аминокислоты» представляет собой замену, при которой остаток аминокислоты заменен другим остатком аминокислоты, имеющим боковую цепь (группу R) со сходными химическими свойствами (например, зарядом или гидрофобностью). В целом консервативная замена аминокислоты существенно не изменит функциональные свойства белка. В тех случаях, когда две или более аминокислотных последовательностей отличаются друг от друга консервативными заменами, процент или степень сходства могут быть изменены в сторону увеличения, чтобы скорректировать консервативный характер замены. Способы такой корректировки хорошо известны специалистам в данной области техники. (См., например, Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24: 307-331). Примеры групп аминокислот, которые имеют боковые цепи со сходными химическими свойствами, включают 1) алифатические боковые цепи: глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин; 2) алифатические гидроксилсодержащие боковые цепи: серин и треонин; 3) амидсодержащие боковые цепи: аспарагин и глутамин; 4) ароматические боковые цепи: фенилаланин, тирозин и триптофан; 5) основные боковые цепи: лизин, аргинин и гистидин; 6) кислотные боковые цепи: аспартат и глутамат, и 7) серосодержащие боковые цепи: цистеин и метионин. Предпочтительные группы консервативных замен аминокислот представляют собой: валин-лейцин-изолейцин, фенилаланин-тирозин, лизин-аргинин, аланин-валин, глутамат-аспартат и аспарагин-глутамин. Согласно другому варианту консервативная замена представляет собой любое изменение, имеющее положительное значение в матрице логарифмического правдоподобия PAM250, раскрытой в Gonnet et al. (1992) Science 256: 1443-45. «Умеренно консервативная» замена представляет собой любое изменение, имеющее неотрицательное значение в матрице логарифмического правдоподобия PAM250.
[00098] Сходство последовательностей для полипептидов, как правило, измеряют с использованием программного обеспечения для анализа последовательностей. Программное обеспечение для анализа белка сопоставляет сходные последовательности, используя показатели сходства, присвоенные различным заменам, делециям и другим модификациям, включая консервативные замены аминокислот. Например, программное обеспечение GCG содержит программы, такие как GAP и BESTFIT, которые можно применять с параметрами по умолчанию для определения гомологии последовательностей или идентичности последовательностей между близкородственными полипептидами, такими как гомологичные полипептиды из разных видов организмов, или между белком дикого типа и его мутированным вариантом. См., например, GCG, версия 6.1. Полипептидные последовательности также можно сравнивать с использованием FASTA с параметрами по умолчанию или рекомендуемыми параметрами; программа FASTA (например, FASTA2 и FASTA3) в GCG, версия 6.1., обеспечивает сопоставление и определение процента идентичности последовательностей для областей с наилучшим перекрыванием между запрашиваемой последовательностью и последовательностью поиска (Pearson (2000), выше). Другим предпочтительным алгоритмом при сравнении последовательности согласно настоящему изобретению с базой данных, содержащей большое количество последовательностей из разных организмов, является компьютерная программа BLAST, в частности, BLASTP или TBLASTN, с использованием параметров по умолчанию. (См., например, Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403 410 и (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389 402).
[00099] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитело или фрагмент антитела для применения в способе согласно настоящему изобретению могут быть моноспецифичными, биспецифичными или мультиспецифичными. Мультиспецифичные антитела могут быть специфичными в отношении различных эпитопов одного полипептида-мишени или могут содержать антигенсвязывающие домены, специфичные в отношении эпитопов более чем одного полипептида-мишени. Примерный формат биспецифичных антител, который можно применять в случае настоящего изобретения, включает применение первого домена CH3 иммуноглобулина (Ig) и второго домена CH3 Ig, причем первый и второй домены CH3 Ig отличаются друг от друга по меньшей мере одной аминокислотой, и при этом различие по не менее чем одной аминокислоте снижает связывание биспецифичного антитела с белком A по сравнению с биспецифичным антителом, в котором отсутствует различие по аминокислоте. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первый домен CH3 Ig связывает белок A, и второй домен CH3 Ig содержит мутацию, которая снижает или устраняет связывание белка A, такую как модификация H95R (согласно нумерации экзонов IMGT; H435R согласно нумерации ЕС). Второй CH3 может дополнительно содержать модификацию Y96F (согласно IMGT; Y436F согласно нумерации ЕС). Дополнительные модификации, которые могут быть обнаружены во втором CH3, включают: D16E, L18M, N44S, K52N, V57M и V82I (согласно IMGT; D356E, L358M, N384S, K392N, V397M и V422I согласно нумерации ЕС) в случае МАТ IgG1; N44S, K52N и V82I (IMGT; N384S, K392N и V422I согласно нумерации ЕС) в случае МАТ IgG2; и Q15R, N44S, K52N, V57M, R69K, E79Q и V82I (согласно IMGT; Q355R, N384S, K392N, V397M, R409K, E419Q и V422I согласно нумерации ЕС) в случае МАТ IgG4. Изменения в формате биспецифичных антител, описанном выше, включены в объем настоящего изобретения.
[000100] Под выражением «терапевтически эффективное количество» подразумевают количество, которое обеспечивает желаемый эффект, для достижения которого его вводят. Точное количество будет зависеть от цели лечения и будет определено специалистом в данной области техники с использованием известных методик (см., например, Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding).
[000101] «Иммуногенная композиция» относится к композиции, содержащей антиген/иммуноген, например, микроорганизм, такой как вирус или бактерия, или их компонент, белок, полипептид, фрагмент белка или полипептида, целую инактивированную клетку, субъединицу или ослабленный вирус, или полисахарид, или их комбинацию, вводимую для стимуляции гуморальной и/или клеточной иммунной системы реципиента в ответ на один или более антигенов/иммуногенов, присутствующих в иммуногенной композиции. Иммуногенные композиции согласно настоящему изобретению можно применять для лечения человека, восприимчивого к инфекции РСВ и/или HMPV, или у которого подозревают наличие или восприимчивость к инфекции РСВ и/или HMPV, путем введения иммуногенных композиций системным путем. Такие введения могут включать инъекцию внутримышечным (в/м), внутрикожным (в/к), интраназальным или ингаляционным путем или подкожным (п/к) путем; применение пластыря или другого устройства для трансдермальной доставки. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения иммуногенную композицию можно применять при изготовлении вакцины или при стимуляции выработки поликлональных или моноклональных антител, которые можно применять для пассивной защиты или лечения млекопитающего.
[000102] Термины «вакцина» или «вакцинная композиция», которые используются взаимозаменяемо, относятся к композиции, содержащей по меньшей мере одну иммуногенную композицию, которая индуцирует иммунный ответ у животного.
[000103] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения белок, представляющий интерес, содержит антиген. Термины «антиген», «иммуноген», «антигенный», «иммуногенный», «антигенно активный» и «иммунологически активный», применительно к молекуле, относятся к любому веществу, способному индуцировать специфичный гуморальный и/или клеточный иммунный ответ. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения антиген содержит эпитоп, определенный выше.
[000104] В настоящем документе «иммунологически защитное количество» представляет собой количество антигена, эффективное для индукции иммуногенного ответа у реципиента, который является достаточным для предотвращения или уменьшения признаков или симптомов заболевания, включая нежелательные эффекты на состояние здоровья или их осложнения. Может быть индуцирован как гуморальный иммунитет, так и клеточный иммунитет, либо оба. Иммуногенный ответ животного на композицию можно оценить, например, косвенно путем измерения титров антител, количественных исследований пролиферации лимфоцитов, или непосредственно путем мониторинга признаков и симптомов после иммуногенной стимуляции микроорганизмом. Защитный иммунитет, придаваемый иммуногенной композицией или вакциной, можно оценить путем измерения, например, снижения выделения иммунизирующих организмов, снижения клинических признаков, таких как смертность, заболеваемость, температура и общее физическое состояние, состояние здоровья и работоспособность субъекта. Иммунный ответ может включать, но не ограничивается этим, индукцию клеточного и/или гуморального иммунитета. Количество композиции или вакцины, которое является терапевтически эффективным, может варьироваться в зависимости от конкретного применяемого организма или состояния животного, которого лечат или вакцинируют.
[000105] В настоящем документе «иммунный ответ» или «иммунологический ответ» у субъекта относится к развитию гуморального иммунного ответа, клеточного иммунного ответа или гуморального и клеточного иммунного ответов на антиген/иммуноген. «Гуморальный иммунный ответ» относится к ответу, который по меньшей мере частично опосредуется антителами. «Клеточный иммунный ответ» представляет собой ответ, опосредуемый Т-лимфоцитами или другими лейкоцитами, или и теми, и другими клетками, и включает выработку цитокинов, хемокинов и подобных молекул, вырабатываемыми активированными Т-клетками, лейкоцитами или и теми, и другими клетками. Иммунные ответы могут быть определены с использованием стандартных иммунологических количественных исследований и количественных исследований нейтрализации, которые известны в данной области техники.
[000106] В настоящем документе «иммуногенность» относится к способности белка или полипептида вызывать иммунный ответ, направленный конкретно против бактерии или вируса, который вызывает идентифицированное заболевание.
[000107] Если конкретно не указано иное, в настоящем документе термин «антитело» следует понимать как включающий молекулы антител, содержащие две тяжелые цепи иммуноглобулина и две легкие цепи иммуноглобулина (т. е. «полные молекулы антител»), а также их антигенсвязывающие фрагменты. В настоящем документе термины «антигенсвязывающая часть» антитела, «антигенсвязывающий фрагмент» антитела и тому подобное включают любой природный, полученный ферментативными, синтетическими способами или способами генной инженерии полипептид или гликопротеин, который специфично связывает антиген для образования комплекса.
Получение антител человека
[000108] Как раскрыто в настоящем документе, перекрестно-нейтрализующие антитела к РСВ и/или к РСВ/HMPF могут быть получены с помощью методик сортировки B-клеток, доступных специалисту, и, например, как описано в примерах ниже. Способы получения антител человека у трансгенных мышей также известны в данной области техники и могут применяться для получения антител в соответствии с настоящим изобретением. Любые такие известные способы можно применять в случае настоящего изобретения для получения антител человека, которые специфично связываются с РСВ-F (см., например, патент США № 6596541).
[000109] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению имеют значения аффинности (KD), которые находятся в пределах диапазона от приблизительно 1,0×10-7 М до приблизительно 1,0×10-12 М, согласно результатам измерения связывания с антигеном, иммобилизованным на твердой фазе или присутствующим в жидкой фазе. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению имеют значения аффинности (KD), которые находятся в пределах диапазона от приблизительно 1×10-7 М до приблизительно 6×10-10 М, согласно результатам измерения связывания с антигеном, иммобилизованным на твердой фазе или присутствующим в жидкой фазе. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению имеют значения аффинности (KD), которые находятся в пределах диапазона от приблизительно 1×10-7 М до приблизительно 9×10-10 М, согласно результатам измерения связывания с антигеном, иммобилизованным на твердой фазе или присутствующим в жидкой фазе.
[000110] Антитела к РСВ-F и/или к HMPV и фрагменты антител, раскрытые в настоящем документе, включают белки, имеющие аминокислотные последовательности, которые отличаются от последовательностей описанных антител, но которые сохраняют способность связывать РСВ-F. Такие варианты антител и фрагментов антител содержат одно или более добавлений, делеций или замен аминокислот по сравнению с исходной последовательностью, но проявляют биологическую активность, которая по существу эквивалентна активности описанных антител. Аналогичным образом, последовательности ДНК, кодирующие антитела согласно настоящему изобретению, включают последовательности, которые содержат одно или более добавлений, делеций или замен нуклеотидов по сравнению с раскрытой последовательностью, но которые кодируют антитело или фрагмент антитела, который по существу биологически эквивалентен антителу или фрагменту антитела согласно настоящему изобретению.
[000111] Два антигенсвязывающих белка или антитела считаются биоэквивалентными, если, например, они представляют собой фармацевтические эквиваленты или фармацевтические альтернативные варианты, скорость и степень всасывания которых значительно не различается при введении в одной и той же молярной дозе в аналогичных экспериментальных условиях, будь то в виде однократной или многократных доз. Некоторые антитела будут считаться эквивалентами или фармацевтически альтернативными вариантами, если они эквивалентны по степени их всасывания, но не по скорости их всасывания, и все же их можно считать биоэквивалентными, поскольку такие различия в скорости всасывания являются преднамеренными и отражены в маркировке, не имеют существенного значения для достижения эффективных концентраций лекарственного препарата в организме, например, при долгосрочном применении, и с медицинской точки зрения считаются несущественными для конкретного исследуемого лекарственного препарата.
[000112] Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения два антигенсвязывающих белка являются биоэквивалентными, если отсутствуют клинически значимые различия их безопасности, чистоты и эффективности.
[000113] Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения два антигенсвязывающих белка являются биоэквивалентными, если схема лечения пациента может быть переключена один или более раз между эталонным продуктом и биологическим продуктом без ожидаемого увеличения риска нежелательных эффектов, включая клинически значимое изменение иммуногенности, или уменьшения эффективности по сравнению с продолжением терапии без такого переключения.
[000114] Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения два антигенсвязывающих белка являются биоэквивалентными, если они оба действуют по общему механизму или механизмам действия для условия или условий применения в той степени, в которой такие механизмы известны.
[000115] Биоэквивалентность может быть продемонстрирована с помощью способов в условиях in vivo и/или in vitro. Меры биоэквивалентности включают, например, (a) испытание в условиях in vivo с участием людей или других млекопитающих, в котором концентрацию антитела или его метаболитов измеряют как функцию времени в крови, плазме, сыворотке или другой биологической жидкости; (b) испытание в условиях in vitro, которое коррелировало с данными о биодоступности у человека в условиях in vivo и является достаточно прогностическим в отношении их; (c) испытание в условиях in vivo с участием людей или других млекопитающих, в котором соответствующий острый фармакологический эффект антитела (или его мишени) измеряют как функцию времени; и (d) клиническое исследование с надлежащим контролем, которое устанавливает безопасность, эффективность или биодоступность или биоэквивалентность антитела.
[000116] Биоэквивалентные варианты антител согласно настоящему изобретению могут быть сконструированы, например, путем осуществления различных замен остатков или последовательностей или удаления концевых или внутренних остатков или последовательностей, не требуемых для биологической активности. Например, остатки цистеина, несущественные для биологической активности, могут быть удалены или заменены другими аминокислотами, чтобы предотвратить образование ненужных или некорректных внутримолекулярных дисульфидных мостиков при ренатурации. В других случаях биоэквивалентные антитела могут включать варианты антител, содержащие замены аминокислот, которые модифицируют характеристики гликозилирования антител, например, мутации, которые устраняют или удаляют гликозилирование.
Биологические и биофизические характеристики антител
[000117] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающие фрагменты специфично связываются с белком F (F) респираторно-синцитиального вируса (РСВ), причем по меньшей мере одна из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и/или CDRL3 такого антитела или антигенсвязывающего фрагмента идентична по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99% или 100%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находятся в пределах указанного диапазона; по меньшей мере одной из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и/или CDRL3, представленных в таблице 6, антитела, выбранного из антител №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения такие антитела также обладают по меньшей мере одной, двумя, тремя, четырьмя, пятью, шестью, семью, восемью, девятью, десятью или более характеристиками, раскрытыми в одиннадцати абзацах непосредственно ниже.
[000118] Не желая быть связанными соответствием какой-либо теории, полагают, что антитела согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающие фрагменты могут функционировать за счет связывания с РСВ-F, предпочтительно в конформации PreF, и тем самым блокируют слияние вирусной мембраны с мембраной клетки хозяина. Антитела согласно настоящему изобретению могут также функционировать за счет связывания с РСВ-F и тем самым блокируют распространение вируса от клетки к клетке и блокируют образование синцития, связанное с РСВ-инфекцией клеток. Предпочтительно большинство антител к РСВ, раскрытых в настоящем документе, эффективно блокируют или нейтрализуют как подтип A РСВ, так и подтип B РСВ.
[000119] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающий фрагмент проявляют лучшую аффинность связывания с формой Pre-F РСВ-F в сравнении с формой Post-F РСВ- F.
[000120] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающие фрагменты предпочтительно проявляют профиль с отсутствующей или низкой полиреактивностью (см., например, WO 2014/179363 и Xu et al., Protein Eng Des Sel, Oct; 26(10):663-70) и, соответственно, особенно пригодны для разработки в качестве безопасных, эффективных и развиваемых терапевтических и/или профилактических вариантов лечения, направленных против РСВ и/или HMPV.
[000121] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающие фрагменты, безотносительно к какой-либо теории, могут функционировать за счет блокирования или ингибирования слияния РСВ с клеточной мембраной, связываясь с любым одним или более, например, антигенными сайтами ∅, I, II, III, IV или сайтом V конформации PreF белка F. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению проявляют специфичность в отношении антигенного сайта ∅, сайта V или сайта III PreF в сравнении с сайтом I, сайтом II или сайтом IV РСВ-F.
[000122] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения по меньшей мере часть эпитопа, с которой взаимодействуют антитела и антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, содержит часть α3-спирали и β3/β4-шпильку из PreF. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения по существу весь эпитоп таких антител содержит α3-спираль и β3/β4-шпильку PreF. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению перекрестно конкурируют с антителами, которые распознают часть или по существу всю α3-спираль и β3/β4-шпильку PreF.
[000123] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению проявляют нейтрализующую активность (ИК50) в условиях in vitro от приблизительно 0,5 микрограмм/миллилитр (мкг/мл) до приблизительно 5 мкг/мл; от приблизительно 0,05 мкг/мл до приблизительно 0,5 мкг/мл; или менее чем приблизительно 0,05 мг/мл.
[000124] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения аффинность связывания и/или эпитопная специфичность антител и их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению в отношении любого одного из вариантов РСВ-F, обозначенных 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и DG на Фигуре 7A, снижена или устранена в сравнении с аффинностью связывания и/или эпитопной специфичностью указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента в отношении РСВ-F или РСВ-F DS-Cav1.
[000125] Согласно определенным вариантам реализации антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению проявляют перекрестную нейтрализующую активность (ИК50) против метапневмовируса человека (HMPV), а также РСВ. Согласно таким определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат по меньшей мере одну из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, и/или CDRL3 такого антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которая идентична по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; или 100%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; по меньшей мере одной из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и/или CDRL3, представленных в таблице 6, антитела, выбранного из группы, состоящей из антител №№179, 188, 211, 221 и 229, представленных в таблице 6.
[000126] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с D25, MPE8, паливизумабом, мотавизумабом или AM-14. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с D25, MPE8, паливизумабом или мотавизумабом. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с MPE8, паливизумабом или мотавизумабом. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с D25, паливизумабом или мотавизумабом. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с D25. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с MPE8. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с паливизумабом. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению не конкурируют с мотавизумабом.
[000127] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению конкурируют с одним или более из D25, MPE8, паливизумаба, мотавизумаба и/или AM-14.
[000128] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению проявляют по меньшей мере приблизительно в 2 раза; по меньшей мере приблизительно в 3 раза; по меньшей мере приблизительно в 4 раза; по меньшей мере приблизительно в 5 раз; по меньшей мере приблизительно в 6 раз; по меньшей мере приблизительно в 7 раз; по меньшей мере приблизительно в 8 раз; по меньшей мере приблизительно в 9 раз; по меньшей мере приблизительно в 10 раз; по меньшей мере приблизительно в 15 раз; по меньшей мере приблизительно в 20 раз; по меньшей мере приблизительно в 25 раз; по меньшей мере приблизительно в 30 раз; по меньшей мере приблизительно в 35 раз; по меньшей мере приблизительно в 40 раз; по меньшей мере приблизительно в 50 раз; по меньшей мере приблизительно в 55 раз; по меньшей мере приблизительно в 60 раз; по меньшей мере приблизительно в 70 раз; по меньшей мере приблизительно в 80 раз; по меньшей мере приблизительно в 90 раз; по меньшей мере приблизительно в 100 раз; более чем приблизительно в 100 раз; и на любую относительную величину, которая находится в пределах указанного диапазона; более высокую нейтрализующую активность (ИК50), чем D25 и/или паливизумаб.
[000129] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность CDRH3 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000130] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающие фрагменты содержат аминокислотную последовательность CDRH2 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000131] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность CDRH1 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000132] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность CDRL3 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000133] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность CDRL2 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000134] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность CDRL1 любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000135] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат любую комбинацию двух, трех, четырех, пяти или шести характеристик, раскрытых в шести абзацах непосредственно выше.
[000136] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность тяжелой цепи (HC) любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность легкой цепи (LC) любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению содержат аминокислотную последовательность тяжелой цепи (HC) и аминокислотную последовательность легкой цепи (LC) любого из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000137] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения каждое из антител и их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению выбрано из группы, включающей антитела, которые идентичны по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; на 100%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; любому из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000138] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения каждое из антител и их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению выбрано из группы, состоящей из антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000139] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфично связываются с белком F респираторно-синцитиального вируса (РСВ), и их антигенсвязывающие фрагменты, в которых по меньшей мере одна из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2, и/или CDRL3 антитела или антигенсвязывающего фрагмента идентична по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; на 100%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; по меньшей мере одной из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и/или CDRL3, представленных в таблице 6, антитела, выбранного из антител №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000140] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот содержат последовательности, которые кодируют аминокислотную последовательность CDRH3 антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000141] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот включают последовательности, которые кодируют аминокислотные последовательности CDRH2 антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000142] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот включают последовательности, которые кодируют аминокислотные последовательности CDRH1 антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000143] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот включают последовательности, которые кодируют аминокислотные последовательности CDRL3 антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000144] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот включают последовательности, которые кодируют аминокислотные последовательности CDRL2 антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000145] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот включают последовательности, которые кодируют аминокислотные последовательности CDRL1 антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000146] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот содержат последовательности, которые кодируют аминокислотную последовательность тяжелой цепи (HC) антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000147] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот содержат последовательности, которые кодируют аминокислотную последовательность легкой цепи (LC) антител, обозначенных антитела №№124-244, представленных в таблице 6. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из тех последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарных цепей.
[000148] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены выделенные последовательности нуклеиновых кислот, которые кодируют антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению, причем такие последовательности нуклеиновых кислот содержат последовательности, каждая из которых выбрана из группы, состоящей из последовательностей, которые идентичны по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; на 100%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; любой из последовательностей нуклеиновых кислот, которые раскрыты в таблице 6, и их комплементарным цепям.
[000149] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены векторы экспрессии, содержащие выделенную последовательность нуклеиновой кислоты, раскрытую в настоящем документе и по всему тексту, и, в частности, в десяти абзацах непосредственно выше.
[000150] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены клетки-хозяева, трансфецированные, трансформированные или трансдуцированные последовательностями нуклеиновых кислот и/или векторами экспрессии, раскрытыми непосредственно выше.
Картирование эпитопа и соответствующие методики
[000151] Как описано выше и как продемонстрировано в примерах, заявитель охарактеризовал виды эпитопной специфичности, типы распределения по группам и типы распределения в соответствии с антигенными сайтами антител согласно настоящему изобретению и их антигенсвязывающих фрагментов. В дополнение к способам осуществления такой характеристики для специалиста доступны различные другие методики, которые можно применять для осуществления такой характеристики или для иного определения того, «взаимодействует ли антитело с одной или более аминокислотами» в полипептиде или белке. Примерные методики включают, например, обычное количественное исследование перекрестной блокировки, такое как то, которое описано в Antibodies, Harlow and Lane (Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harb., NY), которое можно применять. Другие способы включают сканирующий аланином мутационный анализ, пептидный блот-анализ (Reineke (2004) Methods Mol Biol 248:443-63), анализ расщепления пептида, кристаллографические исследования и ЯМР. Помимо этого можно применять такие способы как вырезание эпитопа, экстракция эпитопа и химическая модификация антигенов (Tomer (2000) Protein Science 9: 487-496). Другой способ, который можно применять для идентификации аминокислот в полипептиде, с которым взаимодействует антитело, включает обмен водорода/дейтерия, детектируемый методом масс-спектрометрии. В общих чертах, метод обмена водорода/дейтерия включает мечение дейтерием белка, представляющего интерес, с последующим связыванием антитела с меченым дейтерием белком. Затем комплекс белок/антитело переносится в воду, и способные к обмену протоны в аминокислотах, которые защищены комплексом антитела, подвергаются обратному обмену дейтерия на водород с более низкой скоростью, чем способные к обмену протоны в аминокислотах, которые не являются частью контактирующей поверхности. В результате аминокислоты, которые образуют часть контактирующей поверхности белок/антитело, могут сохранять дейтерий и, следовательно, проявлять относительно большую массу по сравнению с аминокислотами, не включенными в контактирующую поверхность. После диссоциации антитела белок-мишень подвергают расщеплению протеазой и исследуют методом масс-спектрометрии, выявляя тем самым меченые дейтерием остатки, которые соответствуют конкретным аминокислотам, с которыми взаимодействует антитело. См., например, Ehring (1999) Analytical Biochemistry 267 (2):252-259; Engen and Smith (2001) Anal. Chem. 73:256A-265A.
[000152] Специалист поймет, что эпитоп может быть образован как из смежных аминокислот, так и из несмежных аминокислот, расположенных рядом за счет сворачивания белка в третичную структуру. Эпитопы, образованные из смежных аминокислот, как правило, сохраняются при воздействии денатурирующих растворителей, тогда как эпитопы, образованные в результате сворачивания в третичную структуру, обычно теряются при обработке денатурирующими растворителями. Эпитоп, как правило, включает, по меньшей мере 3, и более обычно по меньшей мере 5 или 8-10 аминокислот в уникальной пространственной конформации.
[000153] Профилирование на основе модификаций (MAP), также известное как профилирование антител на основе структуры антигена (ASAP), представляет собой метод, который позволяет разделить на категории большое количество моноклональных антител (МАТ), направленных против одного и того же антигена, в соответствии со сходством профиля связывания каждого антитела с химически или ферментативно модифицированными антигенными поверхностями (публикация патента США 2004/0101920). Каждая категория может отражать уникальный эпитоп, явно отличающийся от эпитопа, представленного другой категорией, или частично перекрывающийся с ним. Эта технология позволяет быстро фильтровать генетически идентичные антитела так, что характеристика может быть сосредоточена на генетически отличных антителах. При применении при скрининге гибридом MAP может облегчать идентификацию редких клонов гибридомы, которые вырабатывают МАТ, имеющие желаемые характеристики. MAP можно применять для сортировки антител согласно настоящему изобретению на группы антител, связывающих разные эпитопы.
[000154] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и/или их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению взаимодействуют с аминокислотной последовательностью, содержащей остатки аминокислот, которые изменены в одном или более из раскрытых вариантов участка белка F, например, в примерах, и которые изображены, например, на Фигуре 7А, и которые обозначены как варианты РСВ-F 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и DG. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения такие антитела и их антигенсвязывающие фрагменты взаимодействуют с аминокислотной последовательностью, содержащей остатки аминокислот, которые изменены в варианте 2 РСВ-F. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела и/или их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению взаимодействуют с остатками аминокислот, которые расположены за пределами области (ей), идентифицированной (ых) выше, приблизительно на 5-10 аминокислотных остатков или приблизительно на 10-15 аминокислотных остатков, или приблизительно на 15-20 аминокислотных остатков по направлению либо к амино-концу, либо к карбокси-концу белка РСВ-F.
[000155] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела согласно настоящему изобретению не связываются с тем же эпитопом на белке РСВ-F, как и паливизумаб, мотавизумаб, MPE8 или AM-14.
[000156] Специалист поймет, что с помощью обычных доступных способов в данной области техники можно легко определить, связывается ли антитело с тем же эпитопом, как и эталонное антитело к РСВ-F, и конкурирует за связывание с ним с этим антителом. Например, чтобы определить, связывается ли испытываемое антитело с тем же эпитопом, как и эталонное антитело к РСВ-F согласно настоящему изобретению, обеспечивают связывание эталонного антитела с белком или пептидом РСВ-F в условиях насыщения. Затем оценивают способность испытываемого антитела связываться с молекулой РСВ-F. Если испытываемое антитело способно связываться с РСВ-F после насыщающего связывания с эталонным антителом к РСВ-F, то можно сделать вывод, что испытываемое антитело связывается с другим эпитопом, нежели эталонное антитело к РСВ-F. С другой стороны, если испытываемое антитело не способно связываться с молекулой РСВ-F после насыщающего связывания с эталонным антителом к РСВ-F, тогда испытываемое антитело может связываться с тем же эпитопом, что и эпитоп, связанный эталонным антителом к РСВ-F согласно настоящему изобретению.
[000157] Чтобы определить, конкурирует ли антитело за связывание с эталонным антителом к РСВ-F, описанную выше методологию оценки связывания выполняют при двух установках: при первой установке обеспечивают связывание эталонного антитела с молекулой РСВ-F в условиях насыщения с последующей оценкой связывания испытываемого антитела с молекулой РСВ-F. При второй установке обеспечивают связывание испытываемого антитела с молекулой РСВ-F в условиях насыщения с последующей оценкой связывания эталонного антитела с молекулой РСВ-F. Если при обеих установках только первое (насыщающее) антитело способно связываться с молекулой РСВ-F, то делается вывод, что испытываемое антитело и эталонное антитело конкурируют за связывание с РСВ-F. Специалист в данной области техники поймет, что антитело, которое конкурирует за связывание с эталонным антителом, необязательно может связываться с тем же эпитопом, как и эталонное антитело, но может стерически блокировать связывание эталонного антитела за счет связывания перекрывающегося или смежного эпитопа.
[000158] Два антитела связываются с одним и тем же или перекрывающимся эпитопом, если каждое из них конкурентно ингибирует (блокирует) связывание другого антитела с антигеном. Иными словами, 1-, 5-, 10-, 20- или 100-кратный избыток одного антитела ингибирует связывание другого антитела по меньшей мере на 50%, но предпочтительно на 75%, 90% или даже 99%, согласно результатам измерения в количественном исследовании конкурентного связывания (см., например, Junghans et al., Cancer Res. (1990) 50:1495-1502). Согласно другому варианту два антитела связываются с одним и тем же эпитопом, если по существу все мутации аминокислот в антигене, которые снижают или устраняют связывание одного антитела, снижают или устраняют связывание другого антитела. Два антитела связываются с перекрывающимися эпитопами, если некоторые мутации аминокислот, которые снижают или устраняют связывание одного антитела, снижают или устраняют связывание другого антитела.
[000159] Далее могут быть проведены дополнительные обычные эксперименты (например, исследования пептидных мутаций или связывания), чтобы подтвердить, действительно ли наблюдаемое отсутствие связывания испытываемого антитела обусловлено связыванием с тем же эпитопом, как и эталонного антитела, или обусловлено ли отсутствие наблюдаемого связывания стерическим блокированием (или другим явлением). Эксперименты такого рода могут быть выполнены с использованием ИФА, РИА, поверхностного плазмонного резонанса, проточной цитометрии или любого другого количественного или качественного исследования связывания антител, доступных в данной области техники.
Иммуноконъюгаты
[000160] В объем настоящего изобретения включено моноклональное антитело человека к РСВ-F, конъюгированное с терапевтическим фрагментом («иммуноконъюгат»), таким как агент, который способен снижать степень тяжести первичной инфекции РСВ и/или HMPV или улучшать по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией и/или HMPV-инфекцией, включая кашель, лихорадку, пневмонию, или его степень тяжести. Такой агент может представлять собой второе отличающееся антитело к РСВ-F и/или HMPV или вакцину. Тип терапевтического фрагмента, который может быть конъюгирован с антителом к РСВ-F и/или антителом к HMPV, будет действовать с учетом состояния, подлежащего лечению, и желаемого терапевтического эффекта, который должен быть достигнут. Согласно другому варианту, если желаемый терапевтический эффект заключается в лечении осложнений или симптомов, связанных с РСВ-инфекцией и/или HMPV-инфекцией, или любого другого состояния, возникающего в результате такой инфекции, такого как, но не ограничиваясь этим, пневмония, предпочтительной может быть конъюгация агента, подходящего для лечения осложнений или симптомов состояния или для уменьшения любых побочных эффектов антител согласно настоящему изобретению. Примеры агентов, подходящих для образования иммуноконъюгатов, известны в данной области техники, см., например, WO 05/103081.
Мультиспецифичные антитела
[000161] Антитела согласно настоящему изобретению могут быть моноспецифичными, биспецифичными или мультиспецифичными. Мультиспецифичные антитела могут быть специфичными в отношении разных эпитопов одного полипептида-мишени или могут содержать антигенсвязывающие домены, специфичные в отношении более чем одного полипептида-мишени. См., например, Tutt et al., 1991, J. Immunol. 147:60-69; Kufer et al., 2004, Trends Biotechnol. 22:238-244. Антитела согласно настоящему изобретению могут быть соединены или коэкспрессированы с другой функциональной молекулой, например, другим пептидом или белком. Например, антитело или его фрагмент могут быть функционально соединены (например, за счет химического связывания, генетического слияния, нековалентной связи или иным образом) с одним или более другими молекулярными фрагментами, такими как другое антитело или фрагмент антитела, для получения биспецифичного или мультиспецифичного антитела со вторым видом специфичности связывания.
[000162] Примерный формат биспецифичных антител, который можно применять в случае настоящего изобретения, включает применение первого домена CH3 иммуноглобулина (Ig) и второго домена CH3 Ig, причем указанные первый и второй домены CH3 Ig отличаются друг от друга по меньшей мере одной аминокислотой, и при этом различие по не менее чем одной аминокислоте снижает связывание биспецифичного антитела с белком А по сравнению с биспецифичным антителом, в котором отсутствует различие по аминокислоте. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения первый домен CH3 Ig связывает белок A, и второй домен CH3 Ig содержит мутацию, которая снижает или устраняет связывание белка A, такую как модификация H95R (согласно нумерации экзонов IMGT; H435R согласно нумерации ЕС). Второй CH3 может дополнительно содержать модификацию Y96F (согласно IMGT; Y436F согласно нумерации ЕС). Дополнительные модификации, которые могут быть найдены во втором CH3, включают: D16E, L18M, N44S, K52N, V57M и V82I (согласно нумерации IMGT; D356E, L358M, N384S, K392N, V397M и V422I согласно нумерации ЕС) в случае антител IgG1; N44S, K52N и V82I (IMGT; N384S, K392N и V422I согласно нумерации ЕС) в случае антител IgG2; и Q15R, N44S, K52N, V57M, R69K, E79Q и V82I (согласно нумерации IMGT; Q355R, N384S, K392N, V397M, R409K, E419Q и V422I согласно нумерации ЕС) в случае антител IgG4. Варианты формата биспецифичных антител, описанные выше, включены в объем настоящего изобретения.
Терапевтическое введение и составы
[000163] Настоящее изобретение относится к терапевтическим композициям, содержащим антитела к РСВ-F согласно настоящему изобретению или их антигенсвязывающие фрагменты. Введение терапевтических композиций в соответствии с настоящим изобретением будет осуществляться с применением подходящих носителей, вспомогательных веществ и других агентов, которые включены в составы, чтобы обеспечить улучшенный перенос, доставку, переносимость и тому подобное. Множество подходящих составов можно найти в справочнике, известном всем фармацевтическим химикам: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Эти составы включают, например, порошки, пасты, мази, желе, воски, масла, липиды, содержащие липиды (катионные или анионные) везикулы (такие как LIPOFECTIN™), конъюгаты ДНК, безводные абсорбционные пасты, эмульсии типа масло-в-воде и вода-в масле, эмульсии CARBOWAX™ (полиэтиленгликоли различной молекулярной массы), полутвердые гели и полутвердые смеси, содержащие CARBOWAX™. См. также Powell et al. «Compendium of excipients for parenteral formulations» PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238-311.
[000164] Доза каждого из антител согласно настоящему изобретению может варьироваться в зависимости от возраста и размера субъекта, которому она будет введена, целевого заболевания, условий, пути введения и тому подобного. В случае если антитела согласно настоящему изобретению применяют для лечения у пациента РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции или для лечения одного или более симптомов, связанных с РСВ-инфекцией и/или HMPV-инфекцией, таких как кашель или пневмония, связанная с РСВ-инфекцией и/или HMPV-инфекцией, или для уменьшения степени тяжести заболевания, предпочтительно каждое из антител согласно настоящему изобретению вводят внутривенно или подкожно обычно в однократной дозе от приблизительно 0,01 до приблизительно 30 мг/кг массы тела, более предпочтительно от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мг/кг массы тела, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 15 мг/кг массы тела, или от приблизительно 0,02 до приблизительно 7 мг/кг массы тела, от приблизительно 0,03 до приблизительно 5 мг/кг массы тела, или от приблизительно 0,05 до приблизительно 3 мг/кг массы тела, или приблизительно 1 мг/кг массы тела, или приблизительно 3,0 мг/кг массы тела, или приблизительно 10 мг/кг массы тела, или приблизительно 20 мг/кг массы тела. При необходимости можно вводить несколько доз. В зависимости от тяжести состояния частота и продолжительность лечения могут быть скорректированы. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения антитела или их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению можно вводить в виде начальной дозы по меньшей мере от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 800 мг, от приблизительно 1 мг до приблизительно 600 мг, от приблизительно 5 мг до приблизительно 300 мг или от приблизительно 10 мг до приблизительно 150 мг, до приблизительно 100 мг или до приблизительно 50 мг. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения после начальной дозы может быть введена вторая или множество последующих доз антител или их антигенсвязывающих фрагментов в количестве, которое может быть приблизительно таким же или меньше, чем количество начальной дозы, при этом последующие дозы разделены интервалом, составляющим по меньшей мере от 1 дня до 3 дней; по меньшей мере одну неделю, по меньшей мере 2 недели; по меньшей мере 3 недели; по меньшей мере 4 недели; по меньшей мере 5 недель; по меньшей мере 6 недель; по меньшей мере 7 недель; по меньшей мере 8 недель; по меньшей мере 9 недель; по меньшей мере 10 недель; по меньшей мере 12 недель; или по меньшей мере 14 недель.
[000165] Различные системы доставки известны и могут применяться для введения фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, например, инкапсуляция в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы, рекомбинантные клетки, способные экспрессировать мутированные вирусы, опосредуемый рецептором эндоцитоз (см., например, Wu et al. (1987) J. Biol. Chem. 262:4429-4432). Способы введения включают, но не ограничиваются указанными, внутрикожный, трансдермальный, внутримышечный, внутрибрюшинный, внутривенный, подкожный, интраназальный, эпидуральный и пероральный пути. Композицию можно вводить любым удобным путем, например, путем инфузии или болюсной инъекции, путем всасывания через эпителиальные или слизисто-кожные покровы (например, слизистую оболочку полости рта, слизистую оболочку носа, слизистую оболочку прямой кишки и кишечника и т. д.), и можно вводить вместе с другими биологически активными агентами. Введение может быть системным или локальным. Композиция может быть доставлена в виде аэрозольного препарата (см. публикации US 2011/031 1515 и US 2012/0128669). Доставка агентов, которые можно применять для лечения респираторных заболеваний, ингаляционным путем становится все более общепринятой (см. A.J. Bitonti and J.A. Dumont, (2006), Adv. Drug Deliv. Rev, 58:1 106-118). Помимо эффективности при лечении локального заболевания легких такой механизм доставки также можно применять для системной доставки антител (см. Maillet et al. (2008), Pharmaceutical Research, Vol. 25, No. 6, 2008).
[000166] Фармацевтическая композиция также может быть доставлена в везикуле, в частности, в липосоме (см., например, Langer (1990) Science 249:1527-1533).
[000167] В определенных ситуациях фармацевтическая композиция может быть доставлена в системе с контролируемым высвобождением. Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения можно применять насос. В другом варианте настоящего изобретения можно применять полимерные материалы. В еще одном варианте реализации настоящего изобретения система с контролируемым высвобождением может быть размещена в непосредственной близости от мишени композиции, что требует лишь доли системной дозы.
[000168] Препараты для инъекций могут включать лекарственные формы для внутривенных, подкожных, внутрикожных и внутримышечных инъекций, капельных вливаний и т.д. Такие препараты для инъекций могут быть получены общеизвестными способами. Например, препараты для инъекций могут быть получены, например, путем растворения, суспендирования или эмульгирования антитела или его соли, описанных выше, в стерильной водной среде или масляной среде, обычно применяемой для инъекций. В качестве водной среды для инъекций доступны, например, физиологический солевой раствор, изотонический раствор, содержащий глюкозу и другие вспомогательные агенты, и т.д., которые можно применять в комбинации с подходящим солюбилизирующим агентом, таким как спирт (например, этанол), полиспирт (например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль), неионогенное поверхностно-активное вещество [например, полисорбат 80, HCO-50 (полиоксиэтиленовый (50 моль) аддукт гидрогенизированного касторового масла)] и т.д. В качестве масляной среды применяют, например, кунжутное масло, соевое масло и т.д., которые можно применять в комбинации с солюбилизирующим агентом, таким как бензилбензоат, бензиловый спирт и т.д. Полученную таким способом инъекционную форму предпочтительно вносят в соответствующую ампулу.
[000169] Фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может быть доставлена подкожно или внутривенно с помощью стандартной иглы и шприца. Кроме того, в отношении подкожной доставки, при доставке фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению можно легко применять шприц-ручку. Устройство для доставки в виде шприца-ручки может быть многоразовым или одноразовым. В многоразовом устройстве для доставки в виде шприца-ручки обычно применяют сменный картридж, который содержит фармацевтическую композицию. После введения всей фармацевтической композиции в картридже и его опустошении пустой картридж можно легко выбросить и заменить новым картриджем, который содержит фармацевтическую композицию. Устройство для доставки в виде шприца-ручки затем можно применять повторно. В одноразовом устройстве для доставки в виде шприца-ручки сменный картридж отсутствует. Наоборот, устройство для доставки в виде одноразового шприца- ручки поставляется предварительно заполненным фармацевтической композицией, удерживаемой в резервуаре внутри устройства. После опорожнения резервуара от фармацевтической композиции все устройство выбрасывают.
[000170] При подкожной доставке фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению можно применять многочисленные многоразовые устройства доставки в виде шприца-ручки и автоинъектора. Примеры включают, но не ограничиваются указанными, AUTOPEN™ (Owen Mumford, Inc., Вудсток, Великобритания), шприц-ручку DISETRONIC™ (Disetronic Medical Systems, Бургдорф, Швейцария), шприц-ручку HUMALOG MIX 75/25™, шприц-ручку HUMALOG™, шприц-ручку HUMALIN 70/30™ (Eli Lilly and Co., Индианаполис, Индиана), NOVOPEN™ I, II и III (Novo Nordisk, Копенгаген, Дания), NOVOPEN JUNIOR™ (Novo Nordisk, Копенгаген, Дания), шприц-ручку BD™ (Becton Dickinson, Франклин Лейкс, Нью-Джерси, США), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™ и OPTICLIK™ (Sanofi-Aventis, Франкфурт, Германия), в качестве нескольких примеров. Примеры одноразовых устройств для доставки в виде шприца- ручки, применяемых для подкожной доставки фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются указанными, шприц-ручку SOLOSTAR™ (Sanofi-Aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk) и KWIKPEN™ (Eli Lilly), автоинъектор SURECLICK™ (Amgen, Саузенд-Оукс, Калифорния, США), PENLET™ (Haselmeier, Штутгарт, Германия), EPIPEN (Dey, L.P.) и шприц-ручку HUMIRA™ (Abbott Labs, Эббот-парк, Иллинойс, США), в качестве нескольких примеров.
[000171] Предпочтительно фармацевтические композиции для перорального или парентерального применения, описанные выше, получают в виде лекарственных форм в стандартной дозе, соответствующей дозе активных ингредиентов. Такие лекарственные формы в стандартной дозе включают, например, таблетки, пилюли, капсулы, инъекции (ампулы), суппозитории и т.д. Количество содержащегося антитела, упомянутого выше, обычно составляет от приблизительно 5 мг до приблизительно 500 мг на лекарственную форму в стандартной дозе; в частности, в инъекционной форме, предпочтительно антитело, упомянутое выше, содержится в количестве от приблизительно 5 мг до приблизительно 100 мг и от приблизительно 10 мг до приблизительно 250 мг для других лекарственных форм.
Схемы введения
[000172] В соответствии с определенными вариантами реализации настоящего изобретения многократные дозы антитела к РСВ-F и/или HMPV можно вводить субъекту в течение определенного периода времени. Способы согласно этому аспекту настоящего изобретения включают последовательное введение субъекту многократных доз антитела к РСВ-F и/или HMPV. В настоящем документе «последовательное введение» означает, что каждая доза антитела к РСВ-F и/или HMPV вводится субъекту в разные моменты времени, например, в разные дни, разделенные заранее определенным интервалом времени (например, часами, днями, неделями или месяцами). В объем настоящего изобретения включены способы, которые включают последовательное введение пациенту однократной начальной дозы антитела к РСВ-F и/или HMPV с последующим введением одной или более второстепенных доз антитела к РСВ-F и/или HMPV и, необязательно, с последующим введением одной или более третьестепенных доз антитела к РСВ-F и/или HMPV.
[000173] Термины «начальная доза», «второстепенные дозы» и «третьестепенные дозы» относятся к временной последовательности введения антитела к РСВ-F и/или HMPV. Соответственно, «начальная доза» представляет собой дозу, которую вводят в начале схемы лечения (также называемую «исходная доза»); «второстепенные дозы» представляют собой дозы, которые вводят после начальной дозы; и «третьестепенные дозы» представляют собой дозы, которые вводят после второстепенных доз. Начальная, второстепенная и третьестепенная дозы могут содержать одинаковое количество антитела к РСВ-F и/или HMPV, но обычно могут отличаться друг от друга по частоте введения. Однако согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения количество антитела к РСВ-F и/или HMPV, содержащегося в начальной, второстепенной и/или третьестепенной дозах, отличается одно от другого (например, корректируется с повышением или понижением в зависимости от ситуации) в течение курса лечения. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения две или более (например, 2, 3, 4 или 5) доз вводят в начале схемы лечения в виде «нагрузочных доз» с последующими дозами, которые вводят реже (например, «поддерживающие дозы»).
[000174] В одном примерном варианте реализации настоящего изобретения каждую второстепенную и/или третьестепенную дозу вводят через от 1 до 26 (например,
или более) недель после непосредственно предшествующей дозы. В настоящем документе выражение «непосредственно предшествующая доза» означает, в последовательности нескольких введений, дозу антитела к РСВ-F и/или HMPV, которую вводят пациенту до введения следующей же дозы в последовательности без промежуточных доз.
[000175] Способы в соответствии с этим аспектом настоящего изобретения могут включать введение пациенту любого количества второстепенных и/или третьестепенных доз антитела к РСВ-F и/или HMPV. Например, согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения пациенту вводят только одну второстепенную дозу. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения пациенту вводят две или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или более) второстепенных доз. Аналогичным образом, согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения пациенту вводят только одну третьестепенную дозу. Согласно другим вариантам реализации настоящего изобретения пациенту вводят две или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или более) третьестепенных доз.
[000176] В вариантах реализации, включающих множество второстепенных доз, каждая второстепенная доза может быть введена с той же частотой, как и другие второстепенные дозы. Например, каждая второстепенная доза может быть введена пациенту через 1-2 недели после непосредственно предшествующей дозы. Аналогичным образом, в вариантах реализации, включающих множество третьестепенных доз, каждая третьестепенная доза может быть введена с той же частотой, как и другие третьестепенные дозы. Например, каждая третьестепенная доза может быть введена пациенту через 2-4 недели после непосредственно предшествующей дозы. Согласно другому варианту частота введения второстепенных и/или третьестепенных доз пациенту может варьироваться в течение курса лечения. Частота введения также может регулироваться врачом в течение курса лечения в зависимости от потребностей конкретного пациента после клинического обследования.
[000177] Соответственно, согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, содержащие: одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению, раскрытых в настоящем документе и во всем тексте, и фармацевтически приемлемый носитель и/или одно или более вспомогательных веществ. Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, содержащие: одну или более последовательностей нуклеиновых кислот, кодирующих одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению; или один или более векторов экспрессии, несущих такие последовательности нуклеиновых кислот; и фармацевтически приемлемый носитель и/или одно или более вспомогательных веществ.
Варианты терапевтического применения антител
[000178] Считается, что благодаря их связыванию и взаимодействию с белком слияния РСВ (РСВ-F) антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению можно применять, безотносительно к какой-либо теории, для предотвращения слияния вируса с мембраной клетки хозяина, для предотвращения распространения вируса от клетки к клетке и для ингибирования образования синцития. Помимо этого, как заявитель настоящего изобретения продемонстрировал в настоящем документе, неожиданным фактом явилось то, что подгруппа антител к РСВ и их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению проявляет перекрестную нейтрализующую активность против HMPV, антитела и их антигенсвязывающие фрагменты согласно настоящему изобретению являются предпочтительными для предотвращения инфекции субъекта РСВ и/или HMPV при профилактическом введении. Согласно другому варианту антитела согласно настоящему изобретению можно применять для улучшения по меньшей мере одного симптома, связанного с инфекцией, такого как кашель, лихорадка, пневмония, или для уменьшения степени тяжести, продолжительности и/или частоты инфекции. Антитела согласно настоящему изобретению также предназначены для профилактического применения у пациентов с риском развития или приобретения РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции. К таким пациентам относятся недоношенные младенцы, доношенные младенцы, родившиеся в течение сезона РСВ (с поздней осени до ранней весны) и/или сезона HMPV, пожилые люди (например, в возрасте 65 лет и старше), или пациенты с ослабленным иммунитетом из-за болезни или лечения иммуносупрессорами, или пациенты, которые могут иметь превопричинное патологическое состояние, которое предрасполагает их к РСВ-инфекции (например, пациенты с муковисцидозом, пациенты с застойной сердечной недостаточностью или другими сердечными заболеваниями, пациенты с нарушением дыхательных путей, пациенты с ХОБЛ) и/или HMPV-инфекции. Предусмотрено, что антитела согласно настоящему изобретению можно применять по отдельности или в комбинации со вторым агентом или третьим агентом для лечения РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции, или для облегчения по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с РСВ-инфекцией и/или HMPV-инфекцией, такого как лихорадка, кашель, бронхиолит или пневмония, связанные с такой инфекцией или возникшие в результате нее. Второй или третий агенты могут быть доставлены одновременно с антителами согласно настоящему изобретению или могут быть введены по отдельности, либо до, либо после антител согласно настоящему изобретению. Второй или третий агенты могут представлять собой противовирусный агент, такой как рибавирин, НПВП или другие агенты для снижения лихорадки или боли, другое второе, но отличающееся антитело, которое специфично связывает РСВ-F, агент (например, антитело), который связывается с другим антигеном РСВ, таким как РСВ-G, вакцину против РСВ, миРНК, специфичную в отношении антигена РСВ.
[000179] В еще одном дополнительном варианте реализации настоящего изобретения антитела применяют для получения фармацевтической композиции для лечения пациентов, страдающих РСВ-инфекцией и/или HMPV-инфекцией. В еще одном варианте реализации настоящего изобретения антитела применяют для получения фармацевтической композиции для снижения степени тяжести первичной РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции, или для уменьшения продолжительности инфекции, или для уменьшения по меньшей мере одного симптома, связанного с РСВ-инфекцией и/или HMPV-инфекцией. Согласно дополнительному варианту реализации настоящего изобретения антитела применяют в качестве дополнительной терапии любым другим агентом, подходящим для лечения РСВ-инфекции и/или и HMPV-инфекции, включая антивирусный агент, анатоксин, вакцину, второе антитело к РСВ-F или любое другое антитело, специфичное в отношении антигена РСВ, включая антитело к РСВ-G, или любую другую паллиативную терапию, известную специалистам в данной области техники.
[000180] Соответственно, согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения инфекции респираторно- синцитиальным вирусом (РСВ), или по меньшей мере одного симптома, связанного с РСВ-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, одного или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению, раскрытых в настоящем документе и по всему тексту, таких как, например, одно или более антител к РСВ, представленных в таблице 6, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают, или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести.
[000181] Согласно другим определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения инфекции респираторно- синцитиальным вирусом (РСВ), или по меньшей мере одного симптома, связанного с РСВ-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей одно или более из антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению, таких как последовательности нуклеиновых кислот, раскрытые в таблице 6, и их комплементарные цепи, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией лечат, облегчают или снижают его степень тяжести.
[000182] В дополнительных вариантах реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ), или по меньшей мере одного симптома, связанного с РСВ-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, клетки-хозяина, несущей последовательность нуклеиновой кислоты или вектор экспрессии, содержащий такую последовательность нуклеиновой кислоты, причем такие последовательности нуклеиновой кислоты выбраны из группы, состоящей из последовательностей, представленных в таблице 6, и их комплементарных цепей, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают, или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести.
[000183] В дополнительных вариантах реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ), или по меньшей мере одного симптома, связанного с РСВ-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению, представленных в таблице 6; одну или более последовательностей нуклеиновых кислот или векторов экспрессии, содержащих такую последовательность нуклеиновой кислоты, причем такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из группы, состоящей из последовательностей, представленных в таблице 6, и их комплементарных цепей; одну или более клеток-хозяев, несущих одну или более последовательностей нуклеиновых кислот или векторов экспрессии, содержащих такую одну или более последовательностей нуклеиновых кислот, причем такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из группы, состоящей из последовательностей, представленных в таблице 6, и их комплементарных цепей; и фармацевтически приемлемый носитель и/или одно или более вспомогательных веществ, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести.
[000184] Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения либо инфекции респираторно- синцитиальным вирусом (РСВ) или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, одного или более из антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению, раскрытых в настоящем документе и по всему тексту, таких как, например, одно или более антител к РСВ, представленных в таблице 6, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают, или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов a) выбраны из группы, состоящей из антител, обозначенных как антитело № 179, 188, 211, 221 или 229, представленных в таблице 6.
[000185] Согласно определенным другим вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения либо инфекции респираторно- синцитиальным вирусом (РСВ) или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей одно или более из антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно настоящему изобретению, таких как последовательности нуклеиновых кислот, раскрытые в таблице 6, и их комплементарные цепи, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают, или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов a) выбраны из группы, состоящей из антител, обозначенных как антитело №179, 188, 211, 221 или 229, представленных в таблице 6.
[000186] В дополнительных вариантах реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, клетки-хозяина, несущей последовательность нуклеиновой кислоты или вектор экспрессии, содержащий такую последовательность нуклеиновой кислоты, причем такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из группы, состоящей из последовательностей, представленных в таблице 6, и их комплементарных цепей, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают, или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести. Согласно определенным вариантам реализации настоящего изобретения одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов выбраны из группы, состоящей из антител, обозначенных как антитело №179, 188, 211, 221, или 229, представленных в таблице 6.
[000187] В дополнительных вариантах реализации настоящего изобретения предложены способы лечения или предотвращения либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, включающие введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом, фармацевтической композиции, содержащей одно или более из антител согласно настоящему изобретению или их антигенсвязывающих фрагментов, представленных в таблице 6; одну или более последовательностей нуклеиновых кислот или векторов экспрессии, содержащих такую последовательность нуклеиновой кислоты, причем такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из группы, состоящей из последовательностей, представленных в таблице 6, и их комплементарных цепей; одну или более клеток-хозяев, несущих одну или более последовательностей нуклеиновых кислот или векторов экспрессии, содержащих такую одну или более последовательностей нуклеиновых кислот, причем такие последовательности нуклеиновых кислот выбраны из группы, состоящей из последовательностей, представленных в таблице 6, и их комплементарных цепей; и фармацевтически приемлемый носитель и/или одно или более вспомогательных веществ, так, что РСВ-инфекцию лечат или предотвращают, или по меньшей мере один симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают степень его тяжести. Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов a) выбраны из группы, состоящей из антител, обозначенных а как антитело №179, 188, 211, 221 или 229, представленных в таблице 6.
Виды комбинированной терапии
[000188] Как отмечено выше, в соответствии с определенными вариантами реализации настоящего изобретения раскрытые способы включают введение субъекту одного или более дополнительных терапевтических агентов в комбинации с антителом к РСВ-F и/или HMPV или фармацевтической композицией согласно настоящему изобретению. В настоящем документе выражение «в комбинации с» означает, что дополнительные терапевтические агенты вводят до, после или одновременно с антителами или фармацевтической композицией, содержащей антитело к РСВ-F. Термин «в комбинации с» также включает последовательное или сопутствующее введение с антителом к РСВ-F и вторым терапевтическим агентом.
[000189] Например, при введении «до» фармацевтической композиции, содержащей антитело к РСВ-F, дополнительный терапевтический агент можно вводить за приблизительно 72 часа, приблизительно 60 часов, приблизительно 48 часов, приблизительно 36 часов, приблизительно 24 часа, приблизительно 12 часов, приблизительно 10 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 6 часов, приблизительно 4 часа, приблизительно 2 часа, приблизительно 1 час, приблизительно 30 минут, приблизительно 15 минут или приблизительно 10 минут до введения фармацевтической композиции, содержащей антитело к РСВ-F. При введении «после» фармацевтической композиции, содержащей антитело к РСВ-F, дополнительный терапевтический агент можно вводить через приблизительно 10 минут, приблизительно 15 минут, приблизительно 30 минут, приблизительно 1 час, приблизительно 2 часа, приблизительно 4 часа, приблизительно 6 часов, приблизительно 8 часов, приблизительно 10 часов, приблизительно 12 часов, приблизительно 24 часа, приблизительно 36 часов, приблизительно 48 часов, приблизительно 60 часов или приблизительно 72 часа после введения фармацевтической композиции, содержащей антитела к РСВ-F. Введение «одновременно» или с фармацевтической композицией, содержащей антитело к РСВ-F, означает, что дополнительный терапевтический агент вводят субъекту в отдельной лекарственной форме в течение менее чем 5 минут (до, после или в то же время) относительно введения фармацевтической композиции, содержащей антитело к РСВ-F, или вводят субъекту в виде единой комбинированной лекарственной формы, содержащей как дополнительный терапевтический агент, так и антитело к РСВ-F.
[000190] Виды комбинированной терапии могут включать антитело к РСВ-F согласно настоящему изобретению и любой дополнительный терапевтический агент, который может быть предпочтительно комбинирован с антителом согласно настоящему изобретению или с биологически активным фрагментом антитела согласно настоящему изобретению.
[000191] Например, второй или третий терапевтический агент можно применять, чтобы облегчить снижение вирусной нагрузки в легких, такой как противовирусный агент, например, рибавирин. Антитела также можно применять в комбинации с другими видами терапии, как отмечено выше, включая анатоксин, вакцину, специфичную в отношении РСВ, второе антитело, специфичное в отношении РСВ-F, или антитело, специфичное в отношении другого антигена РСВ, такого как РСВ-G.
Варианты диагностического применения антител
[000192] Антитела к РСВ и их антигенсвязывающие фрагменты также можно применять для детектирования и/или измерения РСВ и/или HMPV в образце, например, для диагностических целей. Предусмотрено, что инфекция, предположительно вызванная РСВ и/или HMPV, может быть подтверждена путем измерения присутствия вируса с помощью любого одного или более из антител согласно настоящему изобретению. Примерные диагностические количественные исследования РСВ и/или HMPV могут включать, например, приведение образца, полученного от пациента, в контакт с антителом к РСВ-F и/или HMPV согласно настоящему изобретению, причем антитело к РСВ-F и/или HMPV помечено детектируемой меткой или репортерной молекулой или применяется в качестве захватывающего лиганда для селективного выделения вируса, содержащего белок F, из образцов пациентов. Согласно другому варианту немеченое антитело к РСВ-F и/или HMPV можно применять в диагностических сферах применения в комбинации с вторичным антителом, которое само детектируемо помечено. Детектируемая метка или репортерная молекула может представлять собой радиоизотоп, такой как H3, C14, P32, S35 или l125; флуоресцентный или хемилюминесцентный фрагмент, такой как изотиоцианат флуоресцеина или родамин; или фермент, такой как щелочная фосфатаза, β-галактозидаза, пероксидаза хрена или люцифераза. Конкретные примерные количественные исследования, которые можно применять для детектирования или измерения содержащего белок F РСВ и/или HMPV в образце, включают твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА), радиоиммуноанализ (РИА) и флуоресцентно-активированную сортировку клеток (FACS).
[000193] Образцы, которые можно применять в диагностических количественных исследованиях РСВ и/или HMPV в соответствии с настоящим изобретением, включают любой образец ткани или жидкости, который может быть получен от пациента, содержащий детектируемые количества белка F РСВ и/или HMPV или их фрагментов в нормальных или патологических условиях. Обычно уровни РСВ-F и/или HMPV в конкретном образце, полученном от здорового пациента (например, пациента, не страдающего заболеванием или состоянием, связанным с присутствием РСВ-F и/или HMPV), будут измерены, чтобы первоначально установить исходный или стандартный уровень белка F из РСВ и/или HMPV. Такой исходный уровень РСВ-F и/или HMPV затем можно сравнить с уровнями РСВ-F и/или HMPV, измеренными в образцах, полученных от индивидуумов, у которых подозревают присутствие РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции, или симптомов, связанных с такой инфекцией.
ПРИМЕРЫ
[000194] Заявитель провел исчерпывающее профилирование гуморального ответа человека на белок слияния РСВ (F), выделив и охарактеризовав 108 РСВ F-специфичных моноклональных антител из В-клеток памяти здорового взрослого донора, и использовал эти антитела для исчерпывающего картирования антигенной топологии РСВ-F. Было установлено, что ответ антител на РСВ-F состоит из широкого разнообразия клонов, которые нацелены на несколько антигенных сайтов. Практически половина из наиболее активных антител нацелена на ранее неопределенный сайт уязвимости вблизи вершины предшествующей слиянию конформации РСВ-F (preF), обеспечивая сильную поддержку для разработки антител к РСВ, нацеленных на эту область, а также вакцин-кандидатов, которые сохраняют мембранно-дистальную полусферу белка preF. Кроме того, этот класс антител проявлял сходные признаки последовательностей, что обеспечивает будущее средство быстрого детектирования этих типов антител в образцах человека. Многие из антител, которые связывали preF-специфичные поверхности от этого донора, были более чем в 100 раз более активны, чем паливизумаб, и несколько перекрестно нейтрализовали метапневмовирус человека (HMPV). В совокупности эти результаты можно применять для дизайна и оценки вакцин против РСВ и терапевтических средств-кандидатов на основе антител, они также обеспечивают новые варианты для пассивной профилактики.
Крупномасштабное выделение РСВ F-специфичных моноклональных антител у здоровых взрослых доноров-людей
[000195] Для того чтобы исчерпывающе профилировать гуморальный ответ человека на РСВ-F, заявитель выделил и охарактеризовал приблизительно 108 моноклональных антител из В-клеток памяти здорового взрослого донора («донор 003»). Несмотря на то, что этот донор не имел документально подтвержденной истории РСВ-инфекции, ожидалось, что здоровые взрослые имели многократные РСВ-инфекции на протяжении всей жизни (26).
[000196] Величину ответа B-клеток памяти на РСВ-F у этого донора оценивали путем окрашивания периферических B-клеток смесью флуоресцентномеченых зондов для сортировки форм белка РСВ-F, предшествующих слиянию и после слияния (Фигура 6A-6B) (11, 15). Оба белка были дважды мечены для того чтобы устранить фон из-за неспецифичного связывания флуорохрома (27). Исследование методом проточной цитометрии выявило, что 0,04-0,18% периферических В-клеток с переключенным классом (IgG+ и IgA+) были специфичными в отношении РСВ-F (Фигура 1A и Фигура 1B), это значительно ниже, чем процент РСВ-F-специфичных клеток, наблюдаемых после экспериментальной РСВ-инфекции, и указывает на то, что этот донор, вероятно, не подвергался в недавнем прошлом воздействию РСВ (28). Примечательно, что индексированная сортировка показала, что 17-38% циркулирующих РСВ-F-специфичных В-клеток экспрессируют IgA, это указывает на то, что в периферической крови присутствуют IgA+ В-клетки памяти к РСВ-F (Фигура 1В).
[000197] Приблизительно 200 отдельных РСВ-F-специфичных В-клеток отсортировывали из образца донора, и гены вариабельной области тяжелой цепи (VH) и вариабельной области легкой цепи (VL) антитела выделяли с помощью ПЦР в одной клетке (29). Более 100 когнатных пар тяжелых и легких цепей затем клонировали и экспрессировали как полноразмерные IgG в модифицированном штамме Saccharomyces cerevisiae для дальнейшей характеристики (30). Предварительные исследования связывания показали, что приблизительно 80% антител, клонированных из В-клеток, специфичных в отношении гликопротеина (F) РСВ, связываются с рекомбинантными белками РСВ-F.
Анализ последовательностей репертуаров РСВ-F-специфичных антител
[000198] Анализ последовательностей выделенных моноклональных антител выявил, что РСВ-F-специфичный репертуар был очень разнообразным и содержал более 70 уникальных линий (Фигура 1C и таблица 2). Этот результат существенно противоречит данным об относительно ограниченных репертуарах, наблюдаемых у ВИЧ- инфицированных пациентов (31) или у здоровых доноров после вакцинации против гриппа (32). По сравнению с антителами, нереактивными в отношении РСВ (33), РСВ-F- специфичные репертуары обычно были смещены в сторону определенных генов VH зародышевой линии (VH1-18, VH1-2, VH1-69, VH2-70, VH4-304 и VH5-51) (Фигура 1D и таблица 2) и имели более длинные гипервариабельные участки 3 (CDRH3) тяжелой цепи (как правило, приблизительно 14-18 аминокислот в длину; Фигура 1E и таблица 2). Интересно отметить, что отклонение в сторону VH1-69 также наблюдали в репертуарах, направленных против ВИЧ-1, вируса гриппа и ВГС (34-36), и недавние исследования показали, что существует значительное увеличение относительной частоты использования VH1-18, VH1-2 и VH1-69 во время острой инфекции вирусом Денге (37). Следовательно, по-видимому, эти конкретные генные сегменты зародышевой линии могут обладать исходными свойствами, которые облегчают распознавание белков вирусной оболочки.
[000199] Средний уровень соматической гипермутации (SHM) варьировался от 16 до 30 нуклеотидных замен на ген VH (исключая CDRH3) (Фигура 1F и таблица 2), что сопоставимо со средним уровнем SHM, наблюдаемым в репертуаре антител против гриппа (32, 38), и согласуется с рецидивирующим характером РСВ-инфекции (26). Интересно отметить, что несколько антител содержали 40 или более нуклеотидных замен в гене VH, это указывает на то, что множественные циклы РСВ-инфекции могут приводить к выработке антител с очень высоким уровнем соматической гипермутации (SHM).
Большая доля антител связывается исключительно с preF
[000200] Далее значения кажущейся аффинности связывания IgG с расщепленными фурином эктодоменами РСВ-F, стабилизированными в конформации, предшествующей слиянию (DS-Cav1) или после слияния (F ΔFP), измеряли методом интерферометрии биослоев (11, 15). Относительно большая доля антител (36-67%) связывалась исключительно с preF (Фигура 2А и Фигура 2В; таблица 3). Подавляющее большинство оставшихся антител связывались как с preF, так и с postF, и только 5-7% антител проявляли исключительную специфичность в отношении postF (Фигура 2A и Фигура 2B; таблица 3). Низкая распространенность postF-специфичных антител в этих донорских репертуарах согласуется с наблюдением, что менее 10% сывороточной активности, специфичной в отношении РСВ-F, нацелено на postF (8). Интересно отметить, тем не менее, что большинство перекрестно-реактивных антител связывались с postF с более высокой кажущейся аффинностью (Фигура 2А; таблица 3), это указывает на то, что выработка таких антител и/или созревание их аффинности, вероятно, происходили под действием postF в условиях in vivo. Следовательно, значительно большая доля антител, специфичных в отношении preF, по сравнению с postF, вероятно, обусловлена более высокой иммуногенностью уникальных поверхностей на preF, по сравнению с postF, а не повышенной распространенностью preF в условиях in vivo. Наконец, как и ожидалось на основании относительно высокой степени консервативности последовательностей между подтипами РСВ, большинство антител были способны связываться с F-белками, происходящими из обоих подтипов A и B (Фигура 2C; таблица 3).
[000201] Поскольку определенные виды специфичности противовирусных антител были связаны с поли- и аутореактивностью (39-41), полиреактивность антител к РСВ также испытывали с помощью описанного ранее высокопроизводительного количественного исследования, что соотносится с характером последующих процессов, таких как клиренс из сыворотки крови (42, 43). Для сравнения также включали сто семьдесят семь клинических антител, а также несколько широко нейтрализующих антител к ВИЧ. Интересно отметить, что в отличие от многих описанных ранее широко нейтрализующих антител к ВИЧ, подавляющее большинство РСВ-F-специфичных антител не обладало значительной полиреактивностью в этом количественном исследовании (Фигура 2D).
РСВ-F-специфичные антитела нацелены на шесть основных антигенных сайтов
[000202] Чтобы картировать антигенную специфичность РСВ-F-специфичных антител заявитель сначала провел эксперименты по конкурентному связыванию с помощью описанного ранее количественного исследования на основе дрожжей (44). Сначала исследовали конкуренцию антител с D25, AM14 и MPE8, тремя описанными ранее preF- специфичными антителами (10, 17, 21), и мотавизумабом, вариантом паливизумаба с созревшей аффинностью, который связывается как с pre-F, так и postF (10, 11, 45). Затем исследовали конкуренцию неконкурирующих антител с МАТ, направленным к сайту IV (101F) (46), антителом, направленным к сайту I (сайт I АТ), и двумя антителами с высокой аффинностью (высокоаффинное АТ I и высокоаффинное АТ 2, соответственно), которые не конкурировали значительно друг с другом или с любым из контрольных антител. Каждое антитело было отнесено к группе на основании результатов этого конкурентного количественного исследования (см., например, таблицу 4).
[000203] Для того чтобы подтвердить и увеличить разрешающую способность распределения эпитопов, связывание каждого антитела с панелью вариантов preF измеряли с использованием количественного исследования на основе Luminex®. Каждый вариант содержал 2-4 мутации, кластеризованные вместе, чтобы образовать участок на поверхности preF. В общей сложности получили девять участков, которые равномерно покрывали поверхность preF (Фигуры 7А-7C). Дегликозилированный preF также включали для идентификации антител, направленных против гликанзависимых эпитопов. Связывание каждого антитела с 10 вариантами preF сравнивали со связыванием с preF дикого типа и использовали для соотнесения с участком (см., например, таблицу 4). Охарактеризованные ранее антитела D25, AM14 и мотавизумаб применяли для проверки количественного исследования (см., например, Фигуру 7C и таблицу 4). Объединенные данные о группах и участках, которые были определены на основе ранее установленных структур, мутаций устойчивости и элементов вторичной структуры белка F, затем применяли для соотнесения каждого антитела с одним антигенным сайтом (Фигура 3A-3G). В целом, эти данные показывают, что подавляющее большинство выделенных антител нацелено на шесть доминантных антигенных сайтов на белке РСВ-F в предшествующей слиянию форме (∅, I, II, III, IV и V). Интересно отметить, что только небольшая доля выделенных антител имела профили связывания, сходные с профилями AM14, это указывает на то, что выработка антител, нацеленных на этот четвертичный эпитоп, обычно не вызывается во время природной инфекции. Ни одно из антител не было чувствительным к дегликозилированию F, это свидетельствует о том, что выработка гликанзависимых антител также редко вызывается природной РСВ-инфекцией.
[000204] Исследование видов preF- и postF-связывающей активности антител, нацеленных на каждый антигенный сайт (см., например, Фигуры 3C-3G; таблицу 4), выявило, что три сайта преимущественно обнаруживаются на preF (∅, III и V). Антитела, нацеленные на сайт ∅ и сайт III, были описаны ранее (10, 17), и эти сайты расположены на верхней и боковой стороне шпильки preF, соответственно. Более 20% антител от этого донора распознавали сайт ∅ и приблизительно 22% распознавали сайт III. Относительно большая доля антител от этого донора (приблизительно 14%) распознавали третий preF- специфичный сайт, который ранее не был описан и поэтому был обозначен в настоящем документе как сайт области V (см., например, Фигуры 3C-3G; таблицу 4). Большинство антител, направленных на сайт V, конкурировали с D25, MPE8 и мотавизумабом, что было неожиданным, учитывая расстояние между эпитопами, распознаваемыми этими тремя антителами. Результаты исследования мутированных участков выявили, что эти антитела взаимодействуют с α3-спиралью и β3/β4-шпилькой preF. Этот участок расположен между эпитопами, распознаваемыми D25, MPE8 и мотавизумабом, что объясняет необычный профиль конкуренции, наблюдаемый для этого класса антител (см., например, Фигуру 8). В дополнение к трем преимущественно preF-специфичным сайтам большое количество антител, которые распознавали антигенный сайт IV, были preF- специфичными, вероятно, за счет контактов с β22, который существенно перестраивается во время перехода от preF к postF. В заключение следует отметить, что данные картирования эпитопа показывают, что подавляющее большинство выделенных антител нацелено на шесть доминантных антигенных сайтов, приблизительно половина из которых экспрессируется исключительно на preF.
Высокоактивные нейтрализующие антитела нацелены на preF-специфичные эпитопы
[000205] Затем испытывали нейтрализующую активность антитела против подтипов A и B РСВ с помощью описанного ранее высокопроизводительного количественного исследования нейтрализации (15). Более 60% выделенных антител проявляли нейтрализующую активность, и приблизительно 20% антител нейтрализовали с высокой активностью (ИК50≤0,05 мкг/мл) (см., например, Фигуру 4А и Фигуру 4В; таблицу 3). Примечательно, что некоторые клонально неродственные антитела были в ≥5,0 раз активнее, чем D25, и в ≥100 раз активнее, чем паливизумаб (см., например, Фигуру 4A; таблицу 3). Интересно отметить отсутствие корреляции между нейтрализующей активностью и уровнем SHM, это указывает на то, что обширная SHM не требуется для активной нейтрализации РСВ. В соответствии с данными по перекрестной реактивности связывания большинство нейтрализующих антител проявили активность против обоих подтипов A и B (Фигуры 4A-4C; таблица 3).
[000206] Затем изучали взаимосвязь между аффинностью связывания preF- и postF и активностью нейтрализации, которая ясно продемонстрировала, что большинство высокоактивных антител связывались преимущественно или исключительно с preF (см., например, Фигуры 4D-4G; таблицу 3). Количественная оценка этого различия выявила, что более 80% высокоактивных антител (ИК50<0,05 мкг/мл) были специфичными в отношении preF (см., например, Фигуру 9; таблицу 3) и что медиана ИК50 для preF- специфичных антител более чем в 8 раз превышала этот показатель для антител, перекрестно реагирующих с preF и postF, и была в 80 раз ниже, чем этот показатель для антител, которые специфично распознавали postF (см., например, Фигуру 4Е; таблицу 3). Важно отметить положительную корреляцию между связыванием preF и нейтрализацией (P<0,001, r = 0,24), и то, что значения кажущийся KD в отношении preF обычно хорошо соответствовали ИК50 для нейтрализации (см., например, Фигуру 5A; таблицу 3). Напротив, корреляция между активностью нейтрализации и аффинностью в отношении postF отсутствовала (P = 0,44, r = -0,07) (см., например, Фигуру 5B; таблицу 3). Этот результат согласуется с моделью занятости для нейтрализации, опосредуемой антителами (47), и позволяет предположить, что DS-Cav1 является точным антигенным имитатором нативного тримера preF. Примечательно, что лишь немногие антитела нейтрализовали со значениями ИК50 ниже 100 пМ, что согласуется с ранее предложенным пределом созревания аффинности (48, 49).
[000207] Затем исследовали взаимосвязь между нейтрализующей активностью и антигенным сайтом. Результаты, представленные, например, на Фигуре 5С, в таблице 3 и в таблице 4, в совокупности указывали на то, что более 60% высокоактивных нейтрализующих антител были нацелены на антигенные сайты ∅ и V, которые являются двумя из трех preF-специфичных сайтов. Напротив, антитела, нацеленные на сайты III и IV, проявили широкий диапазон видов нейтрализующей активности, и антитела, нацеленные на сайты I и II, обычно имели умеренную нейтрализующую активность или не имели ее. Аналогичные результаты были получены с использованием значений аффинности связывания и нейтрализующей активности, измеренных для подтипа B (см., например, Фигуру 10A-10C, таблицу 3 и таблицу 4). Интересно отметить, что подгруппа антител, направленных к сайту IV, оказывала нейтрализующее действие с существенно более низкой активностью, чем можно было бы ожидать на основании аффинности связывания preF (см., например, Фигуру 5А; таблицу 3). Этот результат может указывать на то, что некоторые эпитопы внутри сайта IV менее подвержены воздействию, применительно к нативной шпильке оболочки, экспрессированной на перегруженной поверхности вириона, чем на рекомбинантном preF.
Несколько антител перекрестно нейтрализуют РСВ и HMPV
[000208] Учитывая, что аминокислотные последовательности белка РСВ-F и метапневмовируса человека (HMPV) идентичны на 33%, и некоторые РСВ-F- специфичные антитела перекрестно нейтрализуют HMPV (17, 50), испытывали нейтрализующую активность антител от этого донора против HMPV. Из 108 испытанных антител пять нейтрализовали HMPV и два проявили высокую активность против HMPV и РСВ (см., например, таблицу 5). Анализ последовательностей выявил, что пять антител представляют два разных клональных семейства, которые используют разные гены VH зародышевой линии и имеют различную длину CDRH3 и уровни соматической гипермутации (см., например, таблицу 2 и перечень последовательностей). Все из перекрестно нейтрализующих антител связывались исключительно с preF и конкурировали с MPE8 (см., например, таблицу 5), что согласуется с предыдущими исследованиями, свидетельствующими о том, что MPE8 перекрестно нейтрализует четыре пневмовируса, включая РСВ и HMPV (17). Этот результат указывает на то, что, помимо прочего, высококонсервативные эпитопы являются относительно иммуногенными в случае природной РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции.
Созревание аффинности РСВ-F-специфичных антител
[000209] Некоторые варианты реализации относятся к антителам с созревшей аффинностью для любого из антител, перечисленных в таблице 6 (подразумевается, что каждое является «исходным» антителом» для получения варианта с созревшей аффинностью). Антитела с созревшей аффинностью могут быть получены путем мутагенеза любого одного или более из CDR исходного антитела. В соответствии с конкретным вариантом реализации настоящее изобретение относится к вариантам с созревшей аффинностью, содержащим одну или более точечных мутаций, например, 0, 1, 2 или 3 точечные мутации в каждой из последовательностей CDR любого из антител, перечисленных в таблице 6, или антитела, содержащего шесть последовательностей CDR любого из антител, перечисленных в таблице 6. Варианты с созревшей аффинностью могут быть получены любым способом созревания аффинности с применением стандартных методик мутагенеза, например, для оптимизации характеристик связывания, таких как увеличение аффинности связывания или увеличение Kon, или уменьшение Koff, и могут характеризоваться различием KD по меньшей мере в 2 раза, 5 раз, 1 log или 2 log или 3 log, по сравнению с исходным антителом. Такие антитела с созревшей аффинностью по-прежнему обладают аналогичной специфичностью связывания, как и исходное антитело, и, например, оптимизированной аффинностью связывания эпитопа-мишени.
[000210] Отобранные антитела к РСВ идентифицировали для созревания аффинности. Были заказаны олигонуклеотиды, которые включали последовательности CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и CDRL3, которые варьировались за счет разнообразия NNK. Олигонуклеотиды NNK включали в исходные HC или LC путем перестановки ДНК, как описано ранее (Stemmer WP et al., DNA shuffling by random fragmentation and reassembly: in vitro recombination for molecular evolution. Proc Natl Acad Sci U S A. 1994 Oct 25; 91(22):10747-51). Затем библиотеку создавали путем трансформации продуктов ПЦР VH и VL в дрожжи, уже содержащие плазмиду с легкой цепью или тяжелой цепью исходного антитела. Затем диверсифицированные библиотеки отбирали с помощью проточной цитометрии. Для каждого этапа FACS библиотеки подвергали аффинному давлению, используя уменьшающиеся количества антигена, и клоны с улучшенной аффинностью связывания сортировали и размножали. После того, как с помощью проточной цитометрии (как правило, два этапа отбора) наблюдали популяции с улучшенным связыванием, отдельные дрожжевые клоны отбирали для секвенирования и определения характеристик (таблица 6).
[000211] Конкретный вариант реализации относится к вариантам антител 128, 133 и 227 с созревшей аффинностью, представленным в таблице 6. Примечательно, что антитела №№232 и 233 представляют собой вариант с созревшей аффинностью антитела №128 в таблице 6, антитела №№234-236 представляют собой вариант с созревшей аффинностью антитела №133 в таблице 6, и антитела №№237-244 представляют собой вариант с созревшей аффинностью антитела №227 в таблице 6.
Получение антител и очистка антител с созревшей аффинностью
[000212] Клоны дрожжей размножали до насыщения и затем индуцировали в течение 48 ч при 30°C при встряхивании. После индукции дрожжевые клетки осаждали, и супернатанты собирали для очистки. IgG очищали с использованием колонки с белком A и элюировали уксусной кислотой, рН=2,0. Фрагменты Fab получали путем расщепления папаином и очищали пропусканием через KappaSelect (GE Healthcare LifeSciences).
Нейтрализация РСВ в условиях in vitro в количественных исследованиях микронейтрализации на основе ИФА
[000213] Нейтрализацию РСВ в условиях in vitro испытывали в количественных исследованиях микронейтрализации на основе ИФА с применением штамма A2 РСВ-A (ATCC, VR1540P). Вирус (при конечной множественности инфекции приблизительно 0,25) добавляли в 96-луночные планшеты, содержащие последовательно разбавленные МАТ в бессывороточной МЕМ и предварительно инкубировали в течение 30 мин при 4°C. Свежетрипсинизированные клетки Hep-2 (1,5×104 клеток/лунку) затем добавляли в каждую лунку в MEM с добавлением 5% фетальной сыворотки теленка (ФСТ). После инкубации в течение 4 дней при 37°C и 5% CO2 среду аспирировали, и клетки дважды промывали 200 мкл фосфатно-солевого буфера (ФСБ)/лунку, высушивали на воздухе и фиксировали 100 мкл ацетона (80%). Репликацию РСВ измеряли путем количественного определения экспрессированных вирусных белков с помощью ИФА. Для этой цели фиксированные клетки дважды промывали ФСБ-0,1% твин-20, блокировали 1% обезжиренным молоком в ФСБ в течение 1 часа при комнатной температуре и затем окрашивали поликлональным препаратом козьего антитела к РСВ (BioRad, № 7950-0004) в течение 1 часа при комнатной температуре в блокирующем буфере. Конъюгат ослиного антитела к козьему IgG и ПХ использовали в качестве реагента для детектирования, и 1 step-Ultra TMB (Thermo Fisher Scientific, №34209) применяли в качестве субстрата. Процент ингибирования (%) репликации вируса рассчитывали относительно контрольных клеток, инфицированных вирусом в отсутствие нейтрализующих антител. Контрольное МАТ соответствующего изотипа включали во все эксперименты. Активность МАТ выражали как половину максимальной ингибирующей концентрации, которая приводит к снижению репликации вируса на 50% (ИК50). Результаты представлены на Фигуре 11 и демонстрируют, что все МАТ были способны нейтрализовать РСВ-A2 в этих условиях с широким диапазоном значений ИК50, варьирующихся от 8,5 нг/мл (ADI-31674) до 495,5 нг/мл (ADI-31379).
Обсуждение
[000214] Глубокое понимание гуморального ответа человека на РСВ-инфекцию облегчит разработку и оценку вакцин против РСВ и терапевтических и/или профилактических антител-кандидатов для лечения и/или предотвращения РСВ-инфекции. Несмотря на то, что эпитопы, на которые нацелены РСВ-специфичные нейтрализующие антитела, были картированы в общих чертах в сыворотках человека в предыдущих исследованиях (4, 8), виды специфичности и функциональные свойства антител, индуцированных природной РСВ-инфекцией, оставались в значительной степени неопределенными. Как раскрыто в настоящем документе, для клонального анализа ответа В-клеток памяти человека на РСВ-F у инфицированного естественным путем взрослого донора применяли preF- и postF-стабилизированные белки (11, 15), платформу для высокопроизводительного выделения антител и структурно-направленный сбор мутантов preF, также были выделены и охарактеризованы высокоактивные и селективные РСВ-нейтрализующие антитела, а также высокоактивные перекрестно-селективные и перекрестно-нейтрализующие антитела к РСВ/HMPV.
[000215] В исследованном репертуаре соотношение preF-специфичных антител к тем, которые распознают как preF, так и postF, незначительно превышало 1:1 (см., например, Фигуру 2B). Эти значения несколько ниже, чем те, которые сообщались для сывороток человека, которые показали, что приблизительно 70% сывороточного связывания белка F специфично в отношении preF (8). Это несоответствие может быть обусловлено различиями уровней отдельных антител в сыворотке, различиями фенотипов В-клеток, достигнутых для конкретной специфичности, или изменчивостью среди доноров. Несмотря на эти незначительные различия результаты обоих исследований указывают на то, что preF-специфичные эпитопы и эпитопы, общие для pre- и postF, являются иммуногенными во время природной РСВ-инфекции, тогда как уникальные поверхности на postF являются значительно менее иммуногенными.
[000216] Анализ репертуара, раскрытый в настоящем документе, выявил, что подавляющее большинство РСВ-F-специфичных антител нацелено на шесть доминантных антигенных сайтов на preF РСВ: ∅, I, II, III, IV и V. Эти сайты были определены на основании ранее определенных структур, количественных исследований группировки эпитопов/конкуренции, мутаций устойчивости и элементов вторичной структуры белка preF. Важно отметить, что номенклатура для описания антигенных сайтов РСВ-F развивалась с течением времени (6, 51-57) и предыдущие попытки картирования были основаны на конформации F после слияния и не включали поверхности, присутствующие исключительно на preF. Кристаллическая структура preF предоставила существенную информацию о структуре и функции F, а также о новых реагентах для картирования сайтов связывания антител на уникальных поверхностях preF и поверхностях, общих с postF. В первом приближении каждое антитело может быть соотнесено в первую очередь с одним из этих сайтов. Однако вполне вероятно, что эпитопы антител покрывают всю поверхность F и что существуют антитела, которые связывают два или более смежных антигенных сайтов в протомере, и четвертичные антитела, которые связываются по всем протомерам.
[000217] Важно отметить, что результаты, раскрытые в настоящем документе, свидетельствуют о том, что наиболее активные нейтрализующие антитела нацелены на антигенные сайты ∅ и V, оба из которых расположены вблизи вершины тримера preF. Эти результаты согласуются с результатами, полученными при картировании в сыворотках человека, которые позволили определить, что большая часть нейтрализующей активности может быть удалена путем предварительной инкубации с preF (4, 8) и что preF-специфичные сайты, отличные от сайта ∅, обуславливают значительную долю связывания preF-специфичных нейтрализующих антител (8). Несмотря на то, что было показано, что антигенный сайт ∅ является мишенью для активно нейтрализующих антител (8, 10), взаимодействие антител с сайтом V менее понятно. Интересно отметить, что было обнаружено, что большинство сайт V-направленных антител имеют несколько общих сходных признаков последовательностей, это указывает на возможность быстрого детектирования этих типов антител в образцах человека с применением технологии высокопроизводительного секвенирования (58). Заявитель ожидает, что этот результат будет особенно предпочтительным при определении профиля гуморальных ответов на вакцины-кандидаты против РСВ, которые нацелены на сохранение вершины тримера preF.
[000218] Обширная панель антител, описанная в настоящем документе, обеспечивает новые возможности для пассивной профилактики, а также для лечения РСВ-инфекции. Большое количество этих антител нейтрализуют РСВ более эффективно, чем D25, который служит основой для MEDI8897 - моноклонального антитела, которое в настоящее время проходит клинические исследования с целью профилактики РСВ у детей младшего возраста, входящих в группу риска (59). Помимо этого было продемонстрировано, что подгруппа этих антител перекрестно нейтрализует HMPV.
[000219] Разработка эффективной вакцины против РСВ привела к появлению ряда уникальных задач, и выбор оптимальной стратегии вакцинации будет иметь первостепенное значение. Углубленный анализ гуморального ответа человека на природную РСВ-инфекцию, представленный в настоящем документе, обеспечивает аналитическую информацию для разработки такой вакцины. Важно отметить, что результаты указывают на то, что иммунизация преиммунных доноров с применением иммуногенов preF, как ожидается, усилит нейтрализующие ответы, тогда как применение иммуногенов postF, вероятно, приведет к размножению клонов B-клеток с умеренной или слабой нейтрализующей активностью. Аналогичным образом можно ожидать, что иммунизация РСВ-наивных младенцев с применением иммуногенов preF активирует наивные В-клетки, нацеленные на эпитопы, связанные с существенно более сильной нейтрализующей активностью, по сравнению с иммуногенами postF. Помимо этого идеальная вакцина против РСВ должна сохранять антигенные участки ∅ и V, поскольку эти сайты являются мишенями наиболее высокоактивных антител, вырабатываемых в ответ на природную РСВ-инфекцию.
[000220] Соответственно, в настоящем документе раскрыты высокоселективные и высокоактивные антитела к РСВ, а также высокоактивные перекрестно-нейтрализующие антитела к РСВ и к HMPV, а также вакцины-кандидаты для лечения и/или предотвращения РСВ-инфекции и/или HMPV-инфекции. Помимо этого реагенты, раскрытые в настоящем документе, обеспечивают набор инструментов, который можно применять для оценки клинических исследований, что будет иметь решающее значение для выбора оптимальной стратегии вакцинации против РСВ или терапии на основе антител из множества изучаемых в настоящее время (60).
Материалы и методы
Дизайн исследования
[000221] Для определения профиля гуморального ответа на РСВ-F мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) получали от взрослого донора приблизительно в возрасте от 20 до 35 лет, и моноклональные антитела выделяли из РСВ-F-реактивных В-клеток из МКПК. Антитела характеризовали с помощью секвенирования, количественных исследований связывания, картирования эпитопов и нейтрализации. Все образцы для этого исследования собирали при наличии информированного согласия добровольцев. Это исследование не имело маски и не было рандомизированным. По меньшей мере два независимых эксперимента выполняли для каждого количественного исследования.
Получение сортировочных зондов для белка РСВ-F
[000222] Растворимые зонды к форме белка F, предшествующей слиянию и после слияния, были основаны на конструкциях РСВ-F ΔFP и DS-Cav1, которые кристаллизовали ранее и определили, что они находятся в конформации, предшествующей слиянию и после слияния, соответственно (11, 15). Чтобы увеличить авидность зондов и равномерно ориентировать белки РСВ-F, тримерные белки РСВ-F соединяли с тетрамерным стрептавидином за счет биотинилирования С-концевого пептида AviTag™. Для каждого зонда как C-концевой вариант с меткой His-Avi, так и C-концевой вариант StrepTagII совместно трансфецировали в клетки FreeStyle 293-F. Секретируемые белки сначала очищали путем пропускания через смолу Ni-NTA, чтобы удалить тримеры, лишенные метки His-Avi. Элюат после очистки на Ni-NTA затем очищали путем пропускания через смолу Strep-тактин. Вследствие низкой авидности одной метки StrepTagII для смолы Strep-тактин дополнительные этапы промывки позволяли удалить по отдельности тримеры StrepTag. Это привело к очистке тримеров, содержащих два StrepTagII-меченых мономера и, следовательно, только один His-Avi-меченый мономер. Эта схема очистки позволила получить один AviTag на тример, что значительно снижает агрегацию или «гирляндное сцепление», которое происходит при инкубации тримерных белков, содержащих три AviTag, с тетрамерным стрептавидином. Тримеры РСВ-F биотинилировали с использованием биотинлигазы BirA в соответствии с инструкциями производителя (Avidity, LLC). Биотинилированные белки отделяли от избытка биотина методом эксклюзионной хроматографии на колонке Superdex 200 (GE Healthcare). Подсчет количества фрагментов биотина на тример РСВ-F проводили с использованием набора Quant*Tag Biotin в соответствии с инструкциями производителя (Vector Laboratories).
Сортировка одиночных B-клеток
[000223] Мононуклеарные клетки периферической крови окрашивали с использованием антител к IgG человека (BV605), IgA (FITC), CD27 (BV421), CD8 (PerCP-Cy5.5), CD14 (PerCP-Cy5.5), CD19 (PECy7), CD20 (PECy7) и смеси содержащих двойную метку тетрамеров DS-Cav1 и F ΔFP (по 50 нМ каждый). Тетрамеры РСВ-F с двойной меткой получали путем инкубации отдельных белков РСВ-F, меченых AviTag, с меченым фикоэритрином стрептавидином (Molecular Probes) высшего качества или меченым аллофикоцианином стрептавидином высшего качества в течение по меньшей мере 20 минут на льду при молярном соотношении 4:1. Тетрамеры получали свежими для каждого эксперимента. Одиночные клетки сортировали на сортировщике для флуоресцентно- активированной сортировки клеток BD Aria II в 96-луночные планшеты для ПЦР (BioRad), содержащие 20 мкл/лунку буфера для лизиса [5 мкл 5× буфера для первой цепи кДНК (Invitrogen), 0,25 мкл RNaseOUT (Invitrogen), 1,25 мкл дитиотреитола (Invitrogen), 0,625 мкл NP-40 (New England Biolabs) и 12,6 мкл дистиллированной H2O]. Планшеты немедленно замораживали на сухом льду перед хранением при - 80°C.
Амплификация и клонирование вариабельных генов антител
[000224] ПЦР отдельной В-клетки проводили, как описано ранее (22). В общих чертах, вариабельные гены IgH, Igλ и Igκ амплифицировали с помощью ОТ-ПЦР и реакций гнездовой ПЦР с использованием комбинаций IgG- и IgA-специфичных праймеров (22). Праймеры, использованные во втором раунде ПЦР, содержали 40 пар оснований с 5'- и 3'- концевой гомологией с разрезанными векторами экспрессии, чтобы обеспечить клонирование в Saccharomyces cerevisiae за счет гомологичной рекомбинации (40). Продукты ПЦР клонировали в S. cerevisiae с использованием способа на основе ацетата лития для химической трансформации (41). Каждая реакция трансформации содержала 20 мкл неочищенных продуктов ПЦР тяжелой цепи и легкой цепи и 200 нг разрезанных плазмид, несущих тяжелую и легкую цепи. После трансформации отдельные колонии дрожжей отбирали для секвенирования и характеристики.
Экспрессия и очистка фрагментов IgG и Fab
[000225] IgG, направленные к РСВ-F, экспрессировали в культурах S. cerevisiae, выращенных в 24-луночных планшетах, как описано ранее (23). Фрагменты Fab, используемые для количественных исследований конкуренции, получали путем расщепления IgG папаином в течение 2 ч при 30°C. Расщепление останавливали добавлением йодацетамида, и смеси Fab и Fc пропускали через белок А-агарозу для удаления фрагментов Fc и нерасщепленного IgG. Затем элюат со смолы с белком A пропускали через аффинную смолу CaptureSelect™ IgG-CH1 (ThermoFischer Scientific) и элюировали 200 мМ уксусной кислотой/50 мМ NaCl, pH=3,5 в 1/8 объема 2M HEPES, pH=8,0. Затем буфер во фрагментах Fab заменяли ФСБ, pH=7,0.
Исследование связывания методом интерферометрии биослоев
[000226] Связывание IgG с DS-Cav1 и FΔ FP определяли на основании измерений методом BLI с использованием прибора Octet HTX (Pall Life Sciences). Для высокопроизводительного скрининга KD IgG иммобилизовали на сенсорах AHQ (Pall Life Sciences) и подвергали воздействию 100 нМ антигена в ФСБ, содержащем 0,1% БСА (ФСБ-F), для стадии ассоциации с последующей стадией диссоциации в буфере ФСБ-F. Данные анализировали с использованием программного обеспечения для анализа данных
7. Данные аппроксимировали с использованием модели связывания в соотношении 1:1 для расчета скорости ассоциации и диссоциации, и KD рассчитывали с использованием соотношения kd/ka.
Количественные исследования конкуренции антител
[000227] Количественные исследования конкуренции антител проводили, как описано ранее (23). Конкуренцию антител измеряли на основании способности контрольного Fab к РСВ-F ингибировать связывание экспрессируемых на поверхности дрожжей IgG к РСВ-F либо с DS-Cav1, либо с FΔ FP. По 50 нМ биотинилированного DS-Cav1 или FΔ FP предварительно инкубировали с 1 мкМ конкурирующего Fab в течение 30 мин при комнатной температуре и затем добавляли к суспензии дрожжей, экспрессирующих IgG к РСВ-F. Несвязанный антиген удаляли с помощью промывки ФСБ, содержащим 0,1% БСА (ФСБ-F). После промывки связанный антиген детектировали с использованием стрептавидин-Alexa Fluor 633 в разведении 1:500 (Life Technologies) и исследовали методом проточной цитометрии с использованием FACSCanto II (BD Biosciences). Уровень конкуренции оценивали путем измерения относительного снижения связывания антигена в присутствии конкурентного Fab по сравнению с контролем, содержащим только антиген. Антитела считались конкурентами, если наблюдали более чем пятикратное снижение в присутствии контрольного Fab по сравнению с контролем, содержащим только антиген.
Экспрессия, очистка и биотинилирование вариантов участков preF
[000228] Панель из 9 участков с 2-4 мутациями, равномерно покрывающими поверхность молекулы preF, разрабатывали на основе структуры белка РСВ-F в предшествующей слиянию форме (10). Для известных антигенных сайтов, включая те, которые распознаются мотавизумабом, 101F, D25, AM14 и MPE8, участки включали остатки, связанные с уклонением вируса или которые, как известно, являются критическими для связывания антител. По возможности избегали остатков с высокой консервативностью во всех 184 последовательностях подтипа A, подтипа B и бычьего РСВ-F, чтобы свести к минимуму вероятность нарушения структуры белка. Мутации, присутствующие в каждом варианте участка, показаны на Фигуре 7А. Мутации для каждого варианта участка клонировали в стабилизированную конструкцию формы белка F РСВ, предшествующей слиянию (DS-Cav1), с C-концевым пептидом AviTag для сайт-специфичного биотинилирования. Белки секретировали из клеток FreeStyle 293-F, очищали путем пропускания через смолу Ni-NTA и биотинилировали с использованием биотинлигазы BirA в соответствии с инструкциями производителя (Avidity, LLC). Биотинилированные белки отделяли от избытка биотина методом эксклюзивной хроматографии на колонке Superdex 200 (GE Healthcare). Дегликозилированный вариант DS-Cav1 получали путем экспрессии DS-Cav1 в присутствии 1 мкМ кифунензина и расщепления 10% (масс./масс.) EndoH перед биотинилированием.
Количественное исследование Luminex® для определения связывания варианта участка
[000229] Связывание выделенных антител с вариантами участков определяли с помощью высокопроизводительного количественного исследования Luminex®. Каждый биотинилированный вариант и контроль DS-Cav1 соединяли с гранулами, покрытыми авидином MagPlex (Bio-Rad), каждый из них имел идентификационный номер гранулы, отражающий уникальное соотношение красных и инфракрасных красителей, внедренных в гранулу. Затем соединенные гранулы смешивали с шестикратным последовательным разведением каждого антитела в диапазоне от 400 нМ до 1,4 пМ в 384-луночном планшете. Перед инкубацией с ФЭ-конъюгированным вторичным мышиным антителом к Fc IgG человека (Southern Biotech) гранулы промывали с помощью устройства для промывания микропланшетов с магнитными гранулами (BioTek). Гранулы классифицировали, и связывание ФЭ измеряли с использованием проточного цитометра FLEXMAP 3D (Luminex).
Количественное исследование нейтрализации РСВ
[000230] Исходные растворы вирусов получали и поддерживали, как описано ранее (61). Рекомбинантный mKate-РСВ, экспрессирующий гены прототипного белка F подтипа A (штамм A2) и подтипа B (18537), а также флуоресцентный белок Katushka конструировали, как сообщалось Hotard et al. (62). Клетки HEp-2 поддерживали в минимальной питательной среде Игла, содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки, с добавлением глутамина, пенициллина и стрептомицина. Нейтрализацию антителами измеряли с помощью количественного исследования нейтрализации с использованием флуоресцентного считывателя для планшетов (15). По 30 мкл раствора культуральной среды, содержащей 2,4×104 клеток Нер-2, высевали в 384-луночные черные планшеты с оптическим дном (Nunc, Thermo Scientific). Образцы IgG последовательно четырехкратно разводили от 1:10 до 1:163840 и вносили равный объем рекомбинантного mKate-РСВ A2. Образцы смешивали и инкубировали при 37°C в течение одного часа. После инкубации по 50 мкл смеси образца и вируса добавляли к клеткам в 384-луночный планшет и инкубировали при 37°C в течение 22-24 часов. Интенсивность флуоресценции в аналитическом планшете затем измеряли на считывателе для микропланшетов при длине волны возбуждения 588 нм и длине волны испускания 635 нм (SpectraMax Paradigm, Molecular Devices). ИК50 для нейтрализации для каждого образца рассчитывали путем аппроксимации кривой с использованием Prism (GraphPad Software Inc.).
Количественное исследование нейтрализации метапневмовируса человека
[000231] Предварительно определенные количества GFP-экспрессирующего рекомбинантного вируса HMPV (NL/1/00, сублиния A1, любезный подарок Bernadette van den Hoogen и Ron Fouchier, Роттердам, Нидерланды) смешивали с последовательными разведениями моноклональных антител перед добавлением к культурам клеток Vero-118, выращиваемым в 96-луночных планшетах со средой Игла в модификации Дульбекко, дополненной 10% фетальной сыворотки теленка. Среду удаляли через 36 часов, добавляли ФСБ и измеряли количество GFP на лунку с помощью считывателя для микропланшетов Tecan M200. Значения интенсивности флуоресценции представляли как процент от контроля вируса без антител.
[000232] Количественное исследование полиреактивности
[000233] Полиреактивность антител оценивали с помощью описанного ранее высокопроизводительного количественного исследования, которое позволяет измерить связывание с солюбилизированными препаратами клеточной мембраны СНО (SMP) (43). В общих чертах, два миллиона IgG-презентирующих дрожжей переносили в 96-луночный планшет для количественного исследования и осаждали для удаления супернатанта. Осадок ресуспендировали в 50 мкл исходного раствора b-SMP, разведенного в соотношении 1:10, и инкубировали на льду в течение 20 минут. Затем клетки дважды промывали ледяным ФСБ-F, и осадок клеток ресуспендировали в 50 мкл вторичной помечающей смеси (Extravidin-R-PE, FITC-меченое антитело к LC человека и йодид пропидия). Смесь инкубировали на льду в течение 20 минут и затем дважды промывали ледяным ФСБ-F. Затем клетки ресуспендировали в 100 мкл ледяного ФСБ-F, и планшет исследовали на FACSCanto II (BD Biosciences) с использованием впрыскивателя образцов для высокопроизводительного скрининга. Данные проточной цитометрии анализировали для определения средней интенсивности флуоресценции в канале R-PE и нормировали к соответствующему контролю для оценки неспецифичного связывания.
[000234] Ссылки и примечания:
[000235] 1. A. L. Rogovik, B. Carleton, A. Solimano, R. D. Goldman, Palivizumab for the prevention of respiratory syncytial virus infection. Can Fam Physician 56, 769-772 (2010).
[000236] 2. B. S. Graham, Biological challenges and technological opportunities for respiratory syncytial virus vaccine development. Immunol Rev 239, 149-166 (2011).
[000237] 3. J. R. Groothuis, E. A. Simoes, V. G. Hemming, Respiratory syncytial virus (RSV) infection in preterm infants and the protective effects of RSV immune globulin (RSVIG). Respiratory Syncytial Virus Immune Globulin Study Group. Pediatrics 95, 463-467 (1995).
[000238] 4. M. Magro, V. Mas, K. Chappell, M. Vazquez, O. Cano, D. Luque, M. C. Terron, J. A. Melero, C. Palomo, Neutralizing antibodies against the preactive form of respiratory syncytial virus fusion protein offer unique possibilities for clinical intervention. Proc Natl Acad Sci U S A 109, 3089-3094 (2012).
[000239] 5. S. Johnson, C. Oliver, G. A. Prince, V. G. Hemming, D. S. Pfarr, S. C. Wang, M. Dormitzer, J. O'Grady, S. Koenig, J. K. Tamura, R. Woods, G. Bansal, D. Couchenour, E. Tsao, W. C. Hall, J. F. Young, Development of a humanized monoclonal antibody (MEDI-493) with potent in vitro and in vivo activity against respiratory syncytial virus. J Infect Dis 176, 1215-1224 (1997).
[000240] 6. J. A. Beeler, K. van Wyke Coelingh, Neutralization epitopes of the F glycoprotein of respiratory syncytial virus: effect of mutation upon fusion function. J Virol 63, 2941-2950 (1989).
[000241] 7. R. A. Karron, D. A. Buonagurio, A. F. Georgiu, S. S. Whitehead, J. E. Adamus, M. L. Clements-Mann, D. O. Harris, V. B. Randolph, S. A. Udem, B. R. Murphy, M. S. Sidhu, Respiratory syncytial virus (RSV) SH and G proteins are not essential for viral replication in vitro: clinical evaluation and molecular characterization of a cold-passaged, attenuated RSV subgroup B mutant. Proc Natl Acad Sci U S A 94, 13961-13966 (1997).
[000242] 8. J. O. Ngwuta, M. Chen, K. Modjarrad, M. G. Joyce, M. Kanekiyo, A. Kumar, H. M. Yassine, S. M. Moin, A. M. Killikelly, G. Y. Chuang, A. Druz, I. S. Georgiev, E. J. Rundlet, M. Sastry, G. B. Stewart-Jones, Y. Yang, B. Zhang, M. C. Nason, C. Capella, M. E. Peeples, J. E. Ledgerwood, J. S. McLellan, P. D. Kwong, B. S. Graham, Prefusion F-specific antibodies determine the magnitude of RSV neutralizing activity in human sera. Sci Transl Med 7, 309ra162 (2015).
[000243] 9. T. I.-R. S. Group, Palivizumab, a humanized respiratory syncytial virus monoclonal antibody, reduces hospitalization from respiratory syncytial virus infection in high-risk infants. Pediatrics 102, 531-537 (1998).
[000244] 10. J. S. McLellan, M. Chen, S. Leung, K. W. Graepel, X. Du, Y. Yang, T. Zhou, U. Baxa, E. Yasuda, T. Beaumont, A. Kumar, K. Modjarrad, Z. Zheng, M. Zhao, N. Xia, P. D. Kwong, B. S. Graham, Structure of RSV fusion glycoprotein trimer bound to a prefusion- specific neutralizing antibody. Science 340, 1113-1117 (2013).
[000245] 11. J. S. McLellan, Y. Yang, B. S. Graham, P. D. Kwong, Structure of respiratory syncytial virus fusion glycoprotein in the postfusion conformation reveals preservation of neutralizing epitopes. J Virol 85, 7788-7796 (2011).
[000246] 12. K. A. Swanson, E. C. Settembre, C. A. Shaw, A. K. Dey, R. Rappuoli, C. W. Mandl, P. R. Dormitzer, A. Carfi, Structural basis for immunization with postfusion respiratory syncytial virus fusion F glycoprotein (RSV F) to elicit high neutralizing antibody titers. Proc Natl Acad Sci U S A 108, 9619-9624 (2011).
[000247] 13. L. Liljeroos, M. A. Krzyzaniak, A. Helenius, S. J. Butcher, Architecture of respiratory syncytial virus revealed by electron cryotomography. Proc Natl Acad Sci U S A 110, 11133-11138 (2013).
[000248] 14. A. Krarup, D. Truan, P. Furmanova-Hollenstein, L. Bogaert, P. Bouchier, I. J. Bisschop, M. N. Widjojoatmodjo, R. Zahn, H. Schuitemaker, J. S. McLellan, J. P. Langedijk, A highly stable prefusion RSV F vaccine derived from structural analysis of the fusion mechanism. Nat Commun 6, 8143 (2015).
[000249] 15. J. S. McLellan, M. Chen, M. G. Joyce, M. Sastry, G. B. Stewart-Jones, Y. Yang, B. Zhang, L. Chen, S. Srivatsan, A. Zheng, T. Zhou, K. W. Graepel, A. Kumar, S. Moin, J. C. Boyington, G. Y. Chuang, C. Soto, U. Baxa, A. Q. Bakker, H. Spits, T. Beaumont, Z. Zheng, N. Xia, S. Y. Ko, J. P. Todd, S. Rao, B. S. Graham, P. D. Kwong, Structure-based design of a fusion glycoprotein vaccine for respiratory syncytial virus. Science 342, 592-598 (2013).
[000250] 16. M. J. Kwakkenbos, S. A. Diehl, E. Yasuda, A. Q. Bakker, C. M. van Geelen, M. V. Lukens, G. M. van Bleek, M. N. Widjojoatmodjo, W. M. Bogers, H. Mei, A. Radbruch, F. A. Scheeren, H. Spits, T. Beaumont, Generation of stable monoclonal antibody-producing B cell receptor-positive human memory B cells by genetic programming. Nat Med 16, 123-128 (2010).
[000251] 17. D. Corti, S. Bianchi, F. Vanzetta, A. Minola, L. Perez, G. Agatic, B. Guarino, C. Silacci, J. Marcandalli, B. J. Marsland, A. Piralla, E. Percivalle, F. Sallusto, F. Baldanti, A. Lanzavecchia, Cross-neutralization of four paramyxoviruses by a human monoclonal antibody. Nature 501, 439-443 (2013).
[000252] 18. M. Magro, D. Andreu, P. Gomez-Puertas, J. A. Melero, C. Palomo, Neutralization of human respiratory syncytial virus infectivity by antibodies and low-molecular-weight compounds targeted against the fusion glycoprotein. J Virol 84, 7970-7982 (2010).
[000253] 19. G. Taylor, E. J. Stott, J. Furze, J. Ford, P. Sopp, Protective epitopes on the fusion protein of respiratory syncytial virus recognized by murine and bovine monoclonal antibodies. J Gen Virol 73 ( Pt 9), 2217-2223 (1992).
[000254] 20. L. J. Calder, L. Gonzalez-Reyes, B. Garcia-Barreno, S. A. Wharton, J. J. Skehel, D. C. Wiley, J. A. Melero, Electron microscopy of the human respiratory syncytial virus fusion protein and complexes that it forms with monoclonal antibodies. Virology 271, 122-131 (2000).
[000255] 21. M. S. Gilman, S. M. Moin, V. Mas, M. Chen, N. K. Patel, K. Kramer, Q. Zhu, S. C. Kabeche, A. Kumar, C. Palomo, T. Beaumont, U. Baxa, N. D. Ulbrandt, J. A. Melero, B. S. Graham, J. S. McLellan, Characterization of a Prefusion-Specific Antibody That Recognizes a Quaternary, Cleavage-Dependent Epitope on the RSV Fusion Glycoprotein. PLoS Pathog 11, e1005035 (2015).
[000256] 22. M. G. Joyce, A. K. Wheatley, P. V. Thomas, G. Y. Chuang, C. Soto, R. T. Bailer, A. Druz, I. S. Georgiev, R. A. Gillespie, M. Kanekiyo, W. P. Kong, K. Leung, S. N. Narpala, M. S. Prabhakaran, E. S. Yang, B. Zhang, Y. Zhang, M. Asokan, J. C. Boyington, T. Bylund, S. Darko, C. R. Lees, A. Ransier, C. H. Shen, L. Wang, J. R. Whittle, X. Wu, H. M. Yassine, C. Santos, Y. Matsuoka, Y. Tsybovsky, U. Baxa, J. C. Mullikin, K. Subbarao, D. C. Douek, B. S. Graham, R. A. Koup, J. E. Ledgerwood, M. Roederer, L. Shapiro, P. D. Kwong, J. R. Mascola, A. B. McDermott, Vaccine-Induced Antibodies that Neutralize Group 1 and Group 2 Influenza A Viruses. Cell 166, 609-623 (2016).
[000257] 23. J. Truck, M. N. Ramasamy, J. D. Galson, R. Rance, J. Parkhill, G. Lunter, A. J. Pollard, D. F. Kelly, Identification of antigen-specific B cell receptor sequences using public repertoire analysis. J Immunol 194, 252-261 (2015).
[000258] 24. P. Parameswaran, Y. Liu, K. M. Roskin, K. K. Jackson, V. P. Dixit, J. Y. Lee, K. L. Artiles, S. Zompi, M. J. Vargas, B. B. Simen, B. Hanczaruk, K. R. McGowan, M. A. Tariq, N. Pourmand, D. Koller, A. Balmaseda, S. D. Boyd, E. Harris, A. Z. Fire, Convergent antibody signatures in human dengue. Cell host & microbe 13, 691-700 (2013).
[000259] 25. K. J. Jackson, Y. Liu, K. M. Roskin, J. Glanville, R. A. Hoh, K. Seo, E. L. Marshall, T. C. Gurley, M. A. Moody, B. F. Haynes, E. B. Walter, H. X. Liao, R. A. Albrecht, A. Garcia- Sastre, J. Chaparro-Riggers, A. Rajpal, J. Pons, B. B. Simen, B. Hanczaruk, C. L. Dekker, J. Laserson, D. Koller, M. M. Davis, A. Z. Fire, S. D. Boyd, Human responses to influenza vaccination show seroconversion signatures and convergent antibody rearrangements. Cell host & microbe 16, 105-114 (2014).
[000260] 26. F. W. Henderson, A. M. Collier, W. A. Clyde, Jr., F. W. Denny, Respiratory- syncytial-virus infections, reinfections and immunity. A prospective, longitudinal study in young children. The New England journal of medicine 300, 530-534 (1979).
[000261] 27. M. A. Moody, B. F. Haynes, Antigen-specific B cell detection reagents: use and quality control. Cytometry A 73, 1086-1092 (2008).
[000262] 28. M. S. Habibi, A. Jozwik, S. Makris, J. Dunning, A. Paras, J. P. DeVincenzo, C. A. de Haan, J. Wrammert, P. J. Openshaw, C. Chiu, I. Mechanisms of Severe Acute Influenza Consortium, Impaired Antibody-mediated Protection and Defective IgA B-Cell Memory in Experimental Infection of Adults with Respiratory Syncytial Virus. Am J Respir Crit Care Med 191, 1040-1049 (2015).
[000263] 29. T. Tiller, E. Meffre, S. Yurasov, M. Tsuiji, M. C. Nussenzweig, H. Wardemann, Efficient generation of monoclonal antibodies from single human B cells by single cell RT-PCR and expression vector cloning. J Immunol Methods 329, 112-124 (2008).
[000264] 30. Z. A. Bornholdt, H. L. Turner, C. D. Murin, W. Li, D. Sok, C. A. Souders, A. E. Piper, A. Goff, J. D. Shamblin, S. E. Wollen, T. R. Sprague, M. L. Fusco, K. B. Pommert, L. A. Cavacini, H. L. Smith, M. Klempner, K. A. Reimann, E. Krauland, T. U. Gerngross, K. D. Wittrup, E. O. Saphire, D. R. Burton, P. J. Glass, A. B. Ward, L. M. Walker, Isolation of potent neutralizing antibodies from a survivor of the 2014 Ebola virus outbreak. Science 351, 1078-1083 (2016).
[000265] 31. J. F. Scheid, H. Mouquet, N. Feldhahn, M. S. Seaman, K. Velinzon, J. Pietzsch, R. G. Ott, R. M. Anthony, H. Zebroski, A. Hurley, A. Phogat, B. Chakrabarti, Y. Li, M. Connors, F. Pereyra, B. D. Walker, H. Wardemann, D. Ho, R. T. Wyatt, J. R. Mascola, J. V. Ravetch, M. C. Nussenzweig, Broad diversity of neutralizing antibodies isolated from memory B cells in HIV- infected individuals. Nature 458, 636-640 (2009).
[000266] 32. J. Wrammert, K. Smith, J. Miller, W. A. Langley, K. Kokko, C. Larsen, N. Y. Zheng, I. Mays, L. Garman, C. Helms, J. James, G. M. Air, J. D. Capra, R. Ahmed, P. C. Wilson, Rapid cloning of high-affinity human monoclonal antibodies against influenza virus. Nature 453, 667-671 (2008).
[000267] 33. S. D. Boyd, B. A. Gaeta, K. J. Jackson, A. Z. Fire, E. L. Marshall, J. D. Merker, J. M. Maniar, L. N. Zhang, B. Sahaf, C. D. Jones, B. B. Simen, B. Hanczaruk, K. D. Nguyen, K. C. Nadeau, M. Egholm, D. B. Miklos, J. L. Zehnder, A. M. Collins, Individual variation in the germline Ig gene repertoire inferred from variable region gene rearrangements. J Immunol 184, 6986-6992 (2010).
[000268] 34. J. Sui, W. C. Hwang, S. Perez, G. Wei, D. Aird, L. M. Chen, E. Santelli, B. Stec, G. Cadwell, M. Ali, H. Wan, A. Murakami, A. Yammanuru, T. Han, N. J. Cox, L. A. Bankston, R. O. Donis, R. C. Liddington, W. A. Marasco, Structural and functional bases for broad-spectrum neutralization of avian and human influenza A viruses. Nat Struct Mol Biol 16, 265-273 (2009).
[000269] 35. C. C. Huang, M. Venturi, S. Majeed, M. J. Moore, S. Phogat, M. Y. Zhang, D. S. Dimitrov, W. A. Hendrickson, J. Robinson, J. Sodroski, R. Wyatt, H. Choe, M. Farzan, P. D. Kwong, Structural basis of tyrosine sulfation and VH-gene usage in antibodies that recognize the HIV type 1 coreceptor-binding site on gp120. Proc Natl Acad Sci U S A 101, 2706-2711 (2004).
[000270] 36. C. H. Chan, K. G. Hadlock, S. K. Foung, S. Levy, V(H)1-69 gene is preferentially used by hepatitis C virus-associated B cell lymphomas and by normal B cells responding to the E2 viral antigen. Blood 97, 1023-1026 (2001).
[000271] 37. E. E. Godoy-Lozano, J. Tellez-Sosa, G. Sanchez-Gonzalez, H. Samano-Sanchez, A. Aguilar-Salgado, A. Salinas-Rodriguez, B. Cortina-Ceballos, H. Vivanco-Cid, K. Hernandez- Flores, J. M. Pfaff, K. M. Kahle, B. J. Doranz, R. E. Gomez-Barreto, H. Valdovinos-Torres, I. Lopez-Martinez, M. H. Rodriguez, J. Martinez-Barnetche, Lower IgG somatic hypermutation rates during acute dengue virus infection is compatible with a germinal center-independent B cell response. Genome Med 8, 23 (2016).
[000272] 38. J. Wrammert, D. Koutsonanos, G. M. Li, S. Edupuganti, J. Sui, M. Morrissey, M. McCausland, I. Skountzou, M. Hornig, W. I. Lipkin, A. Mehta, B. Razavi, C. Del Rio, N. Y. Zheng, J. H. Lee, M. Huang, Z. Ali, K. Kaur, S. Andrews, R. R. Amara, Y. Wang, S. R. Das, C. D. O'Donnell, J. W. Yewdell, K. Subbarao, W. A. Marasco, M. J. Mulligan, R. Compans, R. Ahmed, P. C. Wilson, Broadly cross-reactive antibodies dominate the human B cell response against 2009 pandemic H1N1 influenza virus infection. J Exp Med 208, 181-193 (2011).
[000273] 39. S. F. Andrews, Y. Huang, K. Kaur, L. I. Popova, I. Y. Ho, N. T. Pauli, C. J. Henry Dunand, W. M. Taylor, S. Lim, M. Huang, X. Qu, J. H. Lee, M. Salgado-Ferrer, F. Krammer, P. Palese, J. Wrammert, R. Ahmed, P. C. Wilson, Immune history profoundly affects broadly protective B cell responses to influenza. Sci Transl Med 7, 316ra192 (2015).
[000274] 40. M. Liu, G. Yang, K. Wiehe, N. I. Nicely, N. A. Vandergrift, W. Rountree, M. Bonsignori, S. M. Alam, J. Gao, B. F. Haynes, G. Kelsoe, Polyreactivity and autoreactivity among HIV-1 antibodies. J Virol 89, 784-798 (2015).
[000275] 41. H. Mouquet, J. F. Scheid, M. J. Zoller, M. Krogsgaard, R. G. Ott, S. Shukair, M. N. Artyomov, J. Pietzsch, M. Connors, F. Pereyra, B. D. Walker, D. D. Ho, P. C. Wilson, M. S. Seaman, H. N. Eisen, A. K. Chakraborty, T. J. Hope, J. V. Ravetch, H. Wardemann, M. C. Nussenzweig, Polyreactivity increases the apparent affinity of anti-HIV antibodies by heteroligation. Nature 467, 591-595 (2010).
[000276] 42. R. L. Kelly, T. Sun, T. Jain, I. Caffry, Y. Yu, Y. Cao, H. Lynaugh, M. Brown, M. Vasquez, K. D. Wittrup, Y. Xu, High throughput cross-interaction measures for human IgG1 antibodies correlate with clearance rates in mice. MAbs, 0 (2015).
[000277] 43. Y. Xu, W. Roach, T. Sun, T. Jain, B. Prinz, T. Y. Yu, J. Torrey, J. Thomas, P. Bobrowicz, M. Vasquez, K. D. Wittrup, E. Krauland, Addressing polyspecificity of antibodies selected from an in vitro yeast presentation system: a FACS-based, high-throughput selection and analytical tool. Protein Eng Des Sel 26, 663-670 (2013).
[000278] 44. D. R. Bowley, A. F. Labrijn, M. B. Zwick, D. R. Burton, Antigen selection from an HIV-1 immune antibody library displayed on yeast yields many novel antibodies compared to selection from the same library displayed on phage. Protein Eng Des Sel 20, 81-90 (2007).
[000279] 45. H. Wu, D. S. Pfarr, S. Johnson, Y. A. Brewah, R. M. Woods, N. K. Patel, W. I. White, J. F. Young, P. A. Kiener, Development of motavizumab, an ultra-potent antibody for the prevention of respiratory syncytial virus infection in the upper and lower respiratory tract. Journal of molecular biology 368, 652-665 (2007).
[000280] 46. J. S. McLellan, M. Chen, J. S. Chang, Y. Yang, A. Kim, B. S. Graham, P. D. Kwong, Structure of a major antigenic site on the respiratory syncytial virus fusion glycoprotein in complex with neutralizing antibody 101F. J Virol 84, 12236-12244 (2010).
[000281] 47. P. W. Parren, D. R. Burton, The antiviral activity of antibodies in vitro and in vivo. Advances in immunology 77, 195-262 (2001).
[000282] 48. J. Foote, H. N. Eisen, Kinetic and affinity limits on antibodies produced during immune responses. Proc Natl Acad Sci U S A 92, 1254-1256 (1995).
[000283] 49. F. D. Batista, M. S. Neuberger, Affinity dependence of the B cell response to antigen: a threshold, a ceiling, and the importance of off-rate. Immunity 8, 751-759 (1998).
[000284] 50. J. E. Schuster, R. G. Cox, A. K. Hastings, K. L. Boyd, J. Wadia, Z. Chen, D. R. Burton, R. A. Williamson, J. V. Williams, A broadly neutralizing human monoclonal antibody exhibits in vivo efficacy against both human metapneumovirus and respiratory syncytial virus. J Infect Dis 211, 216-225 (2015).
[000285] 51. B. F. Fernie, P. J. Cote, Jr., J. L. Gerin, Classification of hybridomas to respiratory syncytial virus glycoproteins. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. Society for Experimental Biology and Medicine (New York, N.Y.) 171, 266-271 (1982).
[000286] 52. P. J. Cote, Jr., B. F. Fernie, E. C. Ford, J. W. Shih, J. L. Gerin, Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus: detection of virus neutralization and other antigen- antibody systems using infected human and murine cells. Journal of virological methods 3, 137-147 (1981).
[000287] 53. E. E. Walsh, J. Hruska, Monoclonal antibodies to respiratory syncytial virus proteins: identification of the fusion protein. J Virol 47, 171-177 (1983).
[000288] 54. L. J. Anderson, P. Bingham, J. C. Hierholzer, Neutralization of respiratory syncytial virus by individual and mixtures of F and G protein monoclonal antibodies. J Virol 62, 4232-4238 (1988).
[000289] 55. G. E. Scopes, P. J. Watt, P. R. Lambden, Identification of a linear epitope on the fusion glycoprotein of respiratory syncytial virus. J Gen Virol 71 ( Pt 1), 53-59 (1990).
[000290] 56. J. Arbiza, G. Taylor, J. A. Lopez, J. Furze, S. Wyld, P. Whyte, E. J. Stott, G. Wertz, W. Sullender, M. Trudel, et al., Characterization of two antigenic sites recognized by neutralizing monoclonal antibodies directed against the fusion glycoprotein of human respiratory syncytial virus. J Gen Virol 73 ( Pt 9), 2225-2234 (1992).
[000291] 57. J. A. Lopez, R. Bustos, C. Orvell, M. Berois, J. Arbiza, B. Garcia-Barreno, J. A. Melero, Antigenic structure of human respiratory syncytial virus fusion glycoprotein. J Virol 72, 6922-6928 (1998).
[000292] 58. B. J. DeKosky, T. Kojima, A. Rodin, W. Charab, G. C. Ippolito, A. D. Ellington, G. Georgiou, In-depth determination and analysis of the human paired heavy- and light-chain antibody repertoire. Nat Med 21, 86-91 (2015).
[000293] 59. U.S. National Library of Medicine, (NCT02290340, https://clinicaltrials.gov/).
[000294] 60. PATH, RSV Vaccine Snapshot (2016 http://sites.path.org/vaccinedevelopment/files/2016/07/RSV-snapshot-July_13_2016.pdf).
[000295] 61. B. S. Graham, M. D. Perkins, P. F. Wright, D. T. Karzon, Primary respiratory syncytial virus infection in mice. Journal of medical virology 26, 153-162 (1988).
[000296] 62. A. L. Hotard, F. Y. Shaikh, S. Lee, D. Yan, M. N. Teng, R. K. Plemper, J. E. Crowe, Jr., M. L. Moore, A stabilized respiratory syncytial virus reverse genetics system amenable to recombination-mediated mutagenesis. Virology 434, 129-136 (2012).
[000297] Перечень последовательностей без соблюдения формальных требований приведен в таблице 6 ниже. Перечень последовательностей антител 124-231 без соблюдения формальных требований обеспечивает следующие шестнадцать (16) элементов последовательностей, содержащихся в каждом из 108 антител, идентифицированных, как описано выше, и обозначенных как антитела (АТ №) №№124-231, в следующем порядке:
• Последовательность нуклеиновой кислоты вариабельной области тяжелой цепи («HC»)
• Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи («HC»)
• Аминокислотная последовательность CDR H1 («H1») вариабельной области тяжелой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты CDR H1 («H1») вариабельной области тяжелой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR H2 («H2») вариабельной области тяжелой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты CDR H2 («H2») вариабельной области тяжелой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR H3 («H3») вариабельной области тяжелой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты CDR H3 («H3») вариабельной области тяжелой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты вариабельной области легкой цепи («LC»)
• Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи («LC»)
• Аминокислотная последовательность CDR L1 («L1») вариабельной области легкой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты CDR L1 («L1») вариабельной области легкой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR L2 («L2») вариабельной области легкой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты CDR L2 («L2») вариабельной области легкой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR L3 («L3») вариабельной области легкой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты CDR L3 («L3») вариабельной области легкой цепи
[000298] Перечень последовательностей антител 232-244 без соблюдения формальных требований обеспечивает следующие десять (10) элементов последовательностей, содержащихся в каждом из 13 антител, идентифицированных, как описано выше, и обозначенных как антитела №№ (АТ №) 232-244, в следующем порядке:
• Последовательность нуклеиновой кислоты вариабельной области тяжелой цепи («HC»)
• Аминокислотная последовательность вариабельной области тяжелой цепи («HC»)
• Аминокислотная последовательность CDR H1 («H1») вариабельной области тяжелой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR H2 («H2») вариабельной области тяжелой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR H3 («H3») вариабельной области тяжелой цепи
• Последовательность нуклеиновой кислоты вариабельной области легкой цепи («LC»)
• Аминокислотная последовательность вариабельной области легкой цепи («LC»)
• Аминокислотная последовательность CDR L1 («L1») вариабельной области легкой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR L2 («L2») вариабельной области легкой цепи
• Аминокислотная последовательность CDR L3 («L3») вариабельной области легкой цепи
Дополнительные варианты реализации:
[000299] Вариант 1. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфично связывается с белком (F) респираторно-синцитиального вируса (РСВ), причем по меньшей мере одна из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и CDRL3 антитела или его антигенсвязывающего фрагмента идентична по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; по меньшей мере одной из аминокислотных последовательностей CDRH1, CDRH2, CDRH3, CDRL1, CDRL2 и/или CDRL3, представленных в таблице 6, антитела, выбранного из антител №№124-244, представленных в таблице 6; и при этом указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент также имеет одну или более из следующих характеристик:
a) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент перекрестно конкурирует с указанным антителом или его антигенсвязывающим фрагментом за связывание с РСВ-F;
b) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет лучшую аффинность связывания с формой Pre F РСВ-F по сравнению с формой PostF;
c) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет профиль с отсутствующей или низкой полиреактивностью;
d) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет нейтрализующую активность в отношении подтипа A РСВ и подтипа B РСВ в условиях in vitro;
e) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет специфичность в отношении антигенного сайта для РСВ-F в сайте ∅, сайте I, сайте II, сайте III, сайте IV или сайте V;
f) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет специфичность в отношении антигенного сайта для сайта ∅, сайта V или сайта III РСВ-F по сравнению с сайтом I, сайтом II или сайтом IV РСВ-F;
g) по меньшей мере часть эпитопа, с которой взаимодействует антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержит α3-спираль и β3/β4-шпильку PreF;
h) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет нейтрализующую активность (ИК50) в условиях in vitro от приблизительно 0,5 микрограмм/миллилитр (мкг/мл) до приблизительно 5 мкг/мл; от приблизительно 0,05 мкг/мл до приблизительно 0,5 мкг/мл; или менее чем приблизительно 0,05 мг/мл;
i) аффинность связывания и/или эпитопная специфичность антитела или его антигенсвязывающего фрагмента в отношении любого из вариантов РСВ-F, обозначенных 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 и DG на Фигуре 7А, снижена или устранена относительно аффинности связывания и/или эпитопной специфичности указанного антитела или его антигенсвязывающего фрагмента в отношении РСВ-F или РСВ-F DS-Cav1;
j) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент проявляет способность к перекрестной нейтрализующей активности (ИК50) против метапневмовируса человека (HMPV);
k) антитело или его антигенсвязывающий фрагмент не конкурирует с D25, MPE8, паливизумабом или мотавизумабом; или l)антитело или его антигенсвязывающим фрагмент проявляет по меньшей мере приблизительно в 2 раза; по меньшей мере приблизительно в 3 раза; по меньшей мере приблизительно в 4 раза; по меньшей мере приблизительно в 5 раз; по меньшей мере приблизительно в 6 раз; по меньшей мере приблизительно в 7 раз; по меньшей мере приблизительно в 8 раз; по меньшей мере приблизительно в 9 раз; по меньшей мере приблизительно в 10 раз; по меньшей мере приблизительно в 15 раз; по меньшей мере приблизительно в 20 раз; по меньшей мере приблизительно в 25 раз; по меньшей мере приблизительно в 30 раз; по меньшей мере приблизительно в 35 раз; по меньшей мере приблизительно в 40 раз; по меньшей мере приблизительно в 50 раз; по меньшей мере приблизительно в 55 раз; по меньшей мере приблизительно в 60 раз; по меньшей мере приблизительно в 70 раз; по меньшей мере приблизительно в 80 раз; по меньшей мере приблизительно в 90 раз; по меньшей мере приблизительно в 100 раз; более чем в 100 раз; и на любую относительную величину, которая находится в пределах указанного диапазона; более высокую нейтрализующую активность (ИК50), чем D25 и/или паливизумаб.
[000300] Вариант реализации 2. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент согласно варианту реализации 1, которые характеризуются тем, что указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит: по меньшей мере два; по меньшей мере три; по меньшей мере 4; по меньшей мере 5; по меньшей мере 6; по меньшей мере 7; по меньшей мере 8; по меньшей мере 9; по меньшей мере 10; по меньшей мере 11; или по меньшей мере 12; характеристик от a) до l).
[000301] Вариант реализации 3. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент согласно варианту реализации 1 или 2, которые характеризуются тем, что указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит:
a) аминокислотную последовательность CDRH3 любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6;
b) аминокислотную последовательность CDRH2 любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6;
c) аминокислотную последовательность CDRH1 любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6;
d) аминокислотную последовательность CDRL3 любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6;
e) аминокислотную последовательность CDRL2 любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6;
f) аминокислотную последовательность CDRL1 любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6; или
g) любую комбинацию двух или более из a), b), c), d), e) и f).
[000302] Вариант реализации 4. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент согласно любому из вариантов реализации 1-3, которые характеризуются тем, что указанное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержит:
a) аминокислотную последовательность тяжелой цепи (HC) любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6; и/или
b) аминокислотную последовательность легкой цепи (LC) любого из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000303] Вариант реализации 5. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент согласно любому из вариантов реализации 1-4, которые характеризуются тем, что указанное антитело выбрано из группы, состоящей из антител, которые идентичны по меньшей мере на 70%; по меньшей мере на 75%; на 80%; по меньшей мере на 85%; по меньшей мере на 90%; по меньшей мере на 95%; по меньшей мере на 96%; по меньшей мере на 97%; по меньшей мере на 98%; по меньшей мере на 99%; и/или на любое процентное значение идентичности, которое находится в пределах указанного диапазона; любому из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000304] Вариант реализации 6. Выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент согласно любому из вариантов реализации 1-5, которые характеризуются тем, что указанное антитело выбрано из группы, состоящей из антител, обозначенных как антитела №№124-244, представленных в таблице 6.
[000305] Вариант реализации 7. Выделенная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в соответствии с любым из вариантов реализации 1-6.
[000306] Вариант реализации 8. Вектор экспрессии, содержащий выделенную последовательность нуклеиновой кислоты в соответствии с вариантом реализации 7.
[000307] Вариант реализации 9. Клетка-хозяин, трансфецированная, трансформированная или трансдуцированная последовательностью нуклеиновой кислоты в соответствии с вариантом реализации 7 или вектором экспрессии в соответствии с вариантом реализации 8.
[000308] Вариант реализации 10. Фармацевтическая композиция, содержащая: одно или более выделенных антител или их антигенсвязывающих фрагментов в соответствии с любым из вариантов реализации 1-6; и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
[000309] Вариант реализации 11. Фармацевтическая композиция, содержащая: одну или более последовательностей нуклеиновых кислот согласно варианту реализации 7; или один или более векторов экспрессии в соответствии с вариантом реализации 8; и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
[000310] Вариант реализации 12. Трансгенный организм, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты в соответствии с вариантом реализации 7; или вектор экспрессии в соответствии с вариантом реализации 8.
[000311] Вариант реализации 13. Способ лечения или предотвращения инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ), или по меньшей мере одного симптома, связанного с РСВ-инфекцией, включающий введение пациенту, который нуждается в этом или предположительно нуждается в этом:
a) одного или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов в соответствии с любым из вариантов реализации 1-6;
b) последовательности нуклеиновой кислоты согласно варианту реализации 7;
c) вектора экспрессии в соответствии с вариантом реализации 8;
d) клетки-хозяина согласно варианту реализации 9; или
e) фармацевтической композиции согласно варианту реализации 10 или варианту реализации 11;
так, что РСВ-инфекцию лечат или предупреждают, или по меньшей мере симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают его степень тяжести.
[000312] Вариант реализации 14. Способ лечения или предотвращения либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом или предположительно нуждающемуся в этом:
a) одного или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно любому из вариантов реализации 1-6;
b) последовательности нуклеиновой кислоты согласно варианту реализации 7;
c) вектора экспрессии в соответствии с вариантом реализации 8;
d) клетки-хозяина согласно варианту реализации 9; или
e) фармацевтической композиции согласно варианту реализации 10 или варианту реализации 11;
так, что РСВ-инфекцию лечат или предупреждают, или по меньшей мере симптом, связанный с РСВ-инфекцией, лечат, облегчают или снижают степени тяжести.
[000313] Вариант реализации 15. Способ согласно варианту реализации 14, который характеризуется тем, что указанное одно или более антител или их антигенсвязывающих фрагментов a) выбраны из группы, состоящей из антител, обозначенных как антитела №№179, 188, 211, 221 или 229, представленных в таблице 6.
[000314] Вариант реализации 16. Способ по любому из вариантов 13-15, который характеризуется тем, что указанный способ дополнительно включает введение пациенту второго терапевтического агента.
[000315] Вариант реализации 17. Способ согласно варианту реализации 16, который характеризуется тем, что указанный второй терапевтический агент выбран из группы, состоящей из: противовирусного агента; вакцины, специфичной в отношении РСВ, вакцины, специфичной в отношении вируса гриппа, или вакцины, специфичной в отношении метапневмовируса (MPV); миРНК, специфичной в отношении антигена РСВ или антигена метапневмовируса (MPV); второго антитела, специфичного в отношении антигена РСВ или антигена метапневмовируса (MPV); антитела к IL4R, антитела, специфичного в отношении антигена вируса гриппа, антитела к РСВ-G и НПВП.
[000316] Вариант реализации 18. Фармацевтическая композиция, содержащая одно или более из выделенных антител или их антигенсвязывающих фрагментов согласно любому из вариантов реализации 1-7 и фармацевтически приемлемый носитель и/или вспомогательное вещество.
[000317] Вариант реализации 19. Фармацевтическая композиция в соответствии с вариантом реализации 18 для применения при предотвращении инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) у пациента, нуждающегося в этом или предположительно нуждающегося в этом, или для лечения пациента, страдающего РСВ-инфекцией, или для улучшения по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией, причем в результате такого применения либо предотвращается указанная инфекция, либо предотвращается, улучшается или снижается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
[000318] Вариант реализации 20. Фармацевтическая композиция согласно варианту реализации 18 для применения при лечении или предотвращении либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, у пациента, нуждающегося в этом или предположительно нуждающегося в этом, причем в результате такого применения либо предотвращается указанная инфекция, либо предотвращается, улучшается или снижается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
[000319] Вариант реализации 21. Применение фармацевтической композиции согласно варианту реализации 18 при изготовлении лекарственного средства для предотвращения инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) у пациента, нуждающегося в этом, или для лечения пациента, страдающего РСВ-инфекцией, или для улучшения по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией, причем либо предотвращается указанная инфекция, либо предотвращается, улучшается или снижается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
[000320] Вариант реализации 22. Применение фармацевтической композиции согласно варианту реализации 18 при изготовлении лекарственного средства для предотвращения либо инфекции респираторно-синцитиальным вирусом (РСВ) или инфекции метапневмовирусом человека (HMPV), либо по меньшей мере одного симптома, связанного с указанной РСВ-инфекцией или указанной HMPV-инфекцией, у пациента, нуждающегося в этом или предположительно нуждающегося в этом, причем в результате такого применения либо предотвращается указанная инфекция, либо предотвращается, улучшается или снижается степень тяжести и/или продолжительность по меньшей мере одного симптома или осложнения, связанного с инфекцией.
--->
Перечень последовательностей
<110> АДИМАБ ЭлЭлСи
<120> АНТИТЕЛА К РЕСПИРАТОРНО-СИНЦИТИАЛЬНОМУ ВИРУСУ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И
ПРИМЕНЕНИЯ
<130> 2009186-0217
<140>
<141>
<150> 62/411,500
<151> 2016-10-21
<160> 1858
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 378
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 1
caggtgcagc tggtggagtc tggtcctgcg ctggtgaaac ccacacagac cctcacactg 60
acctgcagct tctccgggtt ctcactcacc actaggagaa tgtgtgtgag ctggatccgt 120
cagaccccag ggaaggccct ggagtggctt gcacgcattg attgggatga tgataaagac 180
tacagcacat ctctgaagac caggctcacc atctccaagg acacctccaa aaaccaggtg 240
gtccttacaa tgaccaacat ggaccctgtg gacacggcca cgtattactg tgcacggacc 300
cacatttatg atagtagtgg ttattatcta tactactttg actactgggg ccagggaacc 360
ctggtcaccg tctcttca 378
<210> 2
<211> 126
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 2
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Thr Thr Arg
20 25 30
Arg Met Cys Val Ser Trp Ile Arg Gln Thr Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Trp Leu Ala Arg Ile Asp Trp Asp Asp Asp Lys Asp Tyr Ser Thr Ser
50 55 60
Leu Lys Thr Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Thr His Ile Tyr Asp Ser Ser Gly Tyr Tyr Leu Tyr Tyr
100 105 110
Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 3
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 3
Phe Ser Leu Thr Thr Arg Arg Met Cys Val Ser
1 5 10
<210> 4
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи «
<400> 4
ttctcactca ccactaggag aatgtgtgtg agc 33
<210> 5
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 5
Arg Ile Asp Trp Asp Asp Asp Lys Asp Tyr Ser Thr Ser Leu Lys Thr
1 5 10 15
<210> 6
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 6
cgcattgatt gggatgatga taaagactac agcacatctc tgaagacc 48
<210> 7
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 7
Ala Arg Thr His Ile Tyr Asp Ser Ser Gly Tyr Tyr Leu Tyr Tyr Phe
1 5 10 15
Asp Tyr
<210> 8
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 8
gcacggaccc acatttatga tagtagtggt tattatctat actactttga ctac 54
<210> 9
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 9
gatattgtgc tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctataggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gaccattgcc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctgaactcct gatctatgct gcaaccaatt tgcagagtgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcgacct 240
gaagattttg caagttacta ctgtcaacag agttacagta gtccctggac gttcggccaa 300
gggaccaaag tggatatcaa a 321
<210> 10
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 10
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Ile Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ala Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Arg Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Ser Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Ser Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 11
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 11
Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ala Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 12
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 12
cgggcaagtc agaccattgc cagctattta aat 33
<210> 13
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 13
Ala Ala Thr Asn Leu Gln Ser
1 5
<210> 14
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 14
gctgcaacca atttgcagag t 21
<210> 15
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 15
Gln Gln Ser Tyr Ser Ser Pro Trp Thr
1 5
<210> 16
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 16
caacagagtt acagtagtcc ctggacg 27
<210> 17
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 17
gaggtgcagc tggtggagtc tggcccagga ctggtgaagc cttcggggac cctgtccctc 60
acctgcactg tctctggtga ctccatgagt gattactact ggagctggat ccggcagtcc 120
ccagggaggg gactggagtg gcttggatat atctattacg atgggagcac caactacaac 180
ccctccctca agggtcgagg caccatttca atagacacgt ccaagagcca gttctccctg 240
acgctgagct ctgtgaaggc tgcggacacg gccgtgtatt actgtgcgag agggaagtac 300
tatgatagag gtggttatta cctgttctac cttgactact ggggccaggg aatactggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 18
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 18
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Gly
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Ser Gly Asp Ser Met Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Trp Ser Trp Ile Arg Gln Ser Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Tyr Ile Tyr Tyr Asp Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys
50 55 60
Gly Arg Gly Thr Ile Ser Ile Asp Thr Ser Lys Ser Gln Phe Ser Leu
65 70 75 80
Thr Leu Ser Ser Val Lys Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Gly Lys Tyr Tyr Asp Arg Gly Gly Tyr Tyr Leu Phe Tyr Leu Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Ile Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 19
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 19
Asp Ser Met Ser Asp Tyr Tyr Trp Ser
1 5
<210> 20
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 20
gactccatga gtgattacta ctggagc 27
<210> 21
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 21
Tyr Ile Tyr Tyr Asp Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Gly
1 5 10 15
<210> 22
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 22
tatatctatt acgatgggag caccaactac aacccctccc tcaagggt 48
<210> 23
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 23
Ala Arg Gly Lys Tyr Tyr Asp Arg Gly Gly Tyr Tyr Leu Phe Tyr Leu
1 5 10 15
Asp Tyr
<210> 24
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 24
gcgagaggga agtactatga tagaggtggt tattacctgt tctaccttga ctac 54
<210> 25
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 25
gacatccggt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtgggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gaccattgcc agctatgtaa actggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaaactcct tatctatgct gcatccagtt tgcaagatgg ggttccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcgctctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg caatttactt ttgtcaacag agttacagta cccccatatt cactttcggc 300
cctgggacca aggtggaaat caaa 324
<210> 26
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 26
Asp Ile Arg Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ala Ser Tyr
20 25 30
Val Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ala Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Ile Tyr Phe Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile
85 90 95
Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 27
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 27
Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ala Ser Tyr Val Asn
1 5 10
<210> 28
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 28
cgggcaagtc agaccattgc cagctatgta aac 33
<210> 29
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 29
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Asp
1 5
<210> 30
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 30
gctgcatcca gtttgcaaga t 21
<210> 31
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 31
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Ile Phe Thr
1 5 10
<210> 32
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 32
caacagagtt acagtacccc catattcact 30
<210> 33
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 33
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggcgcc ttggtaaagc cgggggggtc ccttagactc 60
tcctgtgtag gcactggact cactttcact actgcctaca tgagctgggc ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggtcgt attaagagca aaagtgatgg tgggacaaca 180
gactacccta cacccgtcaa aggcagattc accatctcaa gagatgaatc caaaaacacc 240
ctgtatctgc aaatgaacag cctgaaaatc gaggacacag ccgtctatta ttgtaccaca 300
gataggggga taacagctcg tcctatcttc gactcctggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctca 369
<210> 34
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 34
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Ala Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Gly Thr Gly Leu Thr Phe Thr Thr Ala
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ala Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Ile Lys Ser Lys Ser Asp Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Pro Thr
50 55 60
Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Glu Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ile Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Thr Thr Asp Arg Gly Ile Thr Ala Arg Pro Ile Phe Asp Ser
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 35
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 35
Leu Thr Phe Thr Thr Ala Tyr Met Ser
1 5
<210> 36
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 36
ctcactttca ctactgccta catgagc 27
<210> 37
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 37
Arg Ile Lys Ser Lys Ser Asp Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Pro Thr Pro
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 38
<211> 57
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 38
cgtattaaga gcaaaagtga tggtgggaca acagactacc ctacacccgt caaaggc 57
<210> 39
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 39
Thr Thr Asp Arg Gly Ile Thr Ala Arg Pro Ile Phe Asp Ser
1 5 10
<210> 40
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 40
accacagata gggggataac agctcgtcct atcttcgact cc 42
<210> 41
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 41
cagtctgtct tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc tagggcggag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcgggttatg atgtacattg gtacaggcaa 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatt tatggtaaca ccaaacggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtatgcc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgacgctga ttattactgc cagtcctatg acggcggcct gagtggttat 300
gtcttcggaa ctgggaccaa gctcaccgtc cta 333
<210> 42
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 42
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Leu Gly Arg
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Tyr Ala Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Asp Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Gly
85 90 95
Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 43
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 43
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 44
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 44
actgggagca gctccaacat cggggcgggt tatgatgtac at 42
<210> 45
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 45
Gly Asn Thr Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 46
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 46
ggtaacacca aacggccctc a 21
<210> 47
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 47
Gln Ser Tyr Asp Gly Gly Leu Ser Gly Tyr Val
1 5 10
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 48
cagtcctatg acggcggcct gagtggttat gtc 33
<210> 49
<211> 390
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 49
caggtccagc ttgtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caacgtcaac atctatggaa tcagttgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatcccta tttatgatac aacaaagtac 180
gcacagaaat tccaggacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag tacagcctac 240
atggagttga gcagcctgag atctgaggac acggccgtat atttctgtgc gagagatctt 300
gattacgata ttttgactgg ttattccgta aactactact actacggtat ggacgtctgg 360
ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 390
<210> 50
<211> 130
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 50
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Asn Val Asn Ile Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ile Tyr Asp Thr Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Leu Asp Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Ser Val Asn Tyr
100 105 110
Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 51
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 51
Gly Asn Val Asn Ile Tyr Gly Ile Ser
1 5
<210> 52
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 52
ggcaacgtca acatctatgg aatcagt 27
<210> 53
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 53
Gly Ile Ile Pro Ile Tyr Asp Thr Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 54
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 54
gggatcatcc ctatttatga tacaacaaag tacgcacaga aattccagga c 51
<210> 55
<211> 23
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 55
Ala Arg Asp Leu Asp Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Tyr Ser Val Asn Tyr
1 5 10 15
Tyr Tyr Tyr Gly Met Asp Val
20
<210> 56
<211> 69
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 56
gcgagagatc ttgattacga tattttgact ggttattccg taaactacta ctactacggt 60 atggacgtc 69
<210> 57
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 57
cagtctgtcc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacactg gtaccagcag 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca tcaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctgtg acagcagcct aagtggttgg 300
gtgttcggcg gagggaccaa gctgaccatc cta 333
<210> 58
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 58
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Ile Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Cys Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Ser Gly Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Ile Leu
100 105 110
<210> 59
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 59
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 60
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 60
actgggagca gctccaacat cggggcaggt tatgatgtac ac 42
<210> 61
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 61
Gly Asn Ile Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 62
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 62
ggtaacatca atcggccctc a 21
<210> 63
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 63
Gln Ser Cys Asp Ser Ser Leu Ser Gly Trp Val
1 5 10
<210> 64
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 64
cagtcctgtg acagcagcct aagtggttgg gtg 33
<210> 65
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 65
caggtccagc ttgtacagtc tggggctgaa gtgaagaggc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agctttgcta tcaactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg ctcatcccta tctttggtac accaaacaac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgatt accgcggacg aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga gcagcctgag atctgaggac acggccgtct attactgtgc ctcattacga 300
tattttgact ggcaacctgg ggggtcctac tggttcgacc cctggggcca gggaaccctg 360
gtcaccgtct cctca 375
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 66
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Arg Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Phe
20 25 30
Ala Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Leu Ile Pro Ile Phe Gly Thr Pro Asn Asn Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ser Leu Arg Tyr Phe Asp Trp Gln Pro Gly Gly Ser Tyr Trp Phe
100 105 110
Asp Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 67
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 67
Gly Thr Phe Ser Ser Phe Ala Ile Asn
1 5
<210> 68
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 68
ggcaccttca gcagctttgc tatcaac 27
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 69
Gly Leu Ile Pro Ile Phe Gly Thr Pro Asn Asn Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 70
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 70
gggctcatcc ctatctttgg tacaccaaac aacgcacaga agttccaggg c 51
<210> 71
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 71
Ala Ser Leu Arg Tyr Phe Asp Trp Gln Pro Gly Gly Ser Tyr Trp Phe
1 5 10 15
Asp Pro
<210> 72
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 72
gcctcattac gatattttga ctggcaacct ggggggtcct actggttcga cccc 54
<210> 73
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 73
cagcctgggc tgactcagcc accctcagtg tcagtggccc caggaaagac ggccaggatt 60
gcctgtgggg gagacaacat tggaactaaa ggagtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120
caggcccctg tgctggtcat ctattatgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180
ttctctggtt ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagcggggt cgaagccggg 240
gatgaggccg actactactg tcaggtttgg gatactattg atgatcataa ggatggacta 300
ttcggcggag ggaccaagct caccgtccta 330
<210> 74
<211> 110
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 74
Gln Pro Gly Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Ala Cys Gly Gly Asp Asn Ile Gly Thr Lys Gly Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Tyr Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Gly Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Thr Ile Asp Asp His
85 90 95
Lys Asp Gly Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 75
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 75
Gly Gly Asp Asn Ile Gly Thr Lys Gly Val His
1 5 10
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 76
gggggagaca acattggaac taaaggagtg cac 33
<210> 77
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 77
Tyr Asp Ser Asp Arg Pro Ser
1 5
<210> 78
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 78
tatgatagcg accggccctc a 21
<210> 79
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 79
Gln Val Trp Asp Thr Ile Asp Asp His Lys Asp Gly Leu
1 5 10
<210> 80
<211> 39
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 80
caggtttggg atactattga tgatcataag gatggacta 39
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 81
caggtccagc ttgtgcagtc tggaggtgag gtgaagaagc ctggcgcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggtta cacctttacc acctatggaa tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacatg ggcttgagtg gctgggatgg atcagcccta agaatggcaa cacaaagtat 180
gcacagaagg tccagggcag agtcaccatg accatagacc caaccacgag tacagcctac 240
atggaactga ggagcctgag atcagacgac acggccatgt attactgtgc gagagactat 300
attgtagcaa tagtggctgc tctcccccac ggtatggacg tctggggcca agggaccctg 360
gtcactgtct cctca 375
<210> 82
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 82
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Leu
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Pro Lys Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Val
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Ile Asp Pro Thr Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Tyr Ile Val Ala Ile Val Ala Ala Leu Pro His Gly Met
100 105 110
Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 83
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 83
Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Gly Ile Ser
1 5
<210> 84
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 84
tacaccttta ccacctatgg aatcagc 27
<210> 85
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 85
Trp Ile Ser Pro Lys Asn Gly Asn Thr Lys Tyr Ala Gln Lys Val Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 86
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 86
tggatcagcc ctaagaatgg caacacaaag tatgcacaga aggtccaggg c 51
<210> 87
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 87
Ala Arg Asp Tyr Ile Val Ala Ile Val Ala Ala Leu Pro His Gly Met
1 5 10 15
Asp Val
<210> 88
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 88
gcgagagact atattgtagc aatagtggct gctctccccc acggtatgga cgtc 54
<210> 89
<211> 318
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 89
cagtctgtct tgacgcagcc gccctccctg tccgtgtccc caggacagac agccagcatc 60
tcctgctctg gggatcagtt ggggaataaa tatgtttgtt ggtatcagca gaagccaggc 120
cagtcccctg ttctggtcat ctatcaagat tccaggcggc cctcaggggt ccctgagcga 180
ttctctggct ccaactccgg gaacacagcc actctgaccg tcggcgggac ccagcctatg 240
gatgaggctg actattactg tcaggcgtgg gacagcagca ttcgggtatt cggcggaggg 300
accaaggtga ccgtccta 318
<210> 90
<211> 106
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 90
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Leu Ser Val Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Ser Ile Ser Cys Ser Gly Asp Gln Leu Gly Asn Lys Tyr Val
20 25 30
Cys Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Gln Asp Ser Arg Arg Pro Ser Gly Val Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Val Gly Gly Thr Gln Pro Met
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ala Trp Asp Ser Ser Ile Arg Val
85 90 95
Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105
<210> 91
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 91
Ser Gly Asp Gln Leu Gly Asn Lys Tyr Val Cys
1 5 10
<210> 92
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 92
tctggggatc agttggggaa taaatatgtt tgt 33
<210> 93
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 93
Gln Asp Ser Arg Arg Pro Ser
1 5
<210> 94
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 94
caagattcca ggcggccctc a 21
<210> 95
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 95
Gln Ala Trp Asp Ser Ser Ile Arg Val
1 5
<210> 96
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 96
caggcgtggg acagcagcat tcgggta 27
<210> 97
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 97
caggtccagc ttgtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cctctggagg ctccttgagc acctatggga tccactgggt gcgacaggcc 120
cctggccaag gccttgagtg ggtgggaggg gtcatgactg tctatggcaa aacaacctac 180
ggacagaact tccagggcag agtcaccatt gccgtggaca gatcgaccaa cacagcctac 240
atggaactga gcagcctaac atctgacgac acgggtactt attactgtgc gacagactcc 300
tactatgttt ggactggttc ttatcccccc ccctttgacc tctggggcca gggaaccctg 360
gtcaccgtct cctca 375
<210> 98
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 98
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Ser Leu Ser Thr Tyr
20 25 30
Gly Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Gly Val Met Thr Val Tyr Gly Lys Thr Thr Tyr Gly Gln Asn Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Ala Val Asp Arg Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Thr Gly Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Asp Ser Tyr Tyr Val Trp Thr Gly Ser Tyr Pro Pro Pro Phe
100 105 110
Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 99
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 99
Gly Ser Leu Ser Thr Tyr Gly Ile His
1 5
<210> 100
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 100
ggctccttga gcacctatgg gatccac 27
<210> 101
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 101
Gly Val Met Thr Val Tyr Gly Lys Thr Thr Tyr Gly Gln Asn Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 102
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 102
ggggtcatga ctgtctatgg caaaacaacc tacggacaga acttccaggg c 51
<210> 103
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 103
Ala Thr Asp Ser Tyr Tyr Val Trp Thr Gly Ser Tyr Pro Pro Pro Phe
1 5 10 15
Asp Leu
<210> 104
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 104
gcgacagact cctactatgt ttggactggt tcttatcccc ccccctttga cctc 54
<210> 105
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 105
gaaattgtgt tgacccagac tccaggcacc cagtctttgt ctccagggca aagtgccacc 60
ctctcctgca gggccagtca cagtgtcggc aacgactact tggcctggta tcagcagaag 120
cctggccagt ctccccggct cctcattcac ggtgcataca ggagggactc tggcatccca 180
gacaggttca ttggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcga cagtctggag 240
cctgacgatt gtgcagtata ttactgtcag cagtatggga gctggcctct cactttcggc 300
ggagggacca aagtggatat caaa 324
<210> 106
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 106
Glu Ile Val Leu Thr Gln Thr Pro Gly Thr Gln Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Gln Ser Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Ser Val Gly Asn Asp
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ser Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile His Gly Ala Tyr Arg Arg Asp Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ile
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Asp Ser Leu Glu
65 70 75 80
Pro Asp Asp Cys Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Trp Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 107
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 107
Arg Ala Ser His Ser Val Gly Asn Asp Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 108
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 108
agggccagtc acagtgtcgg caacgactac ttggcc 36
<210> 109
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 109
Gly Ala Tyr Arg Arg Asp Ser
1 5
<210> 110
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 110
ggtgcataca ggagggactc t 21
<210> 111
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 111
Gln Gln Tyr Gly Ser Trp Pro Leu Thr
1 5
<210> 112
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 112
cagcagtatg ggagctggcc tctcact 27
<210> 113
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 113
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaggtc cctgagactc 60
tcctgtgtta cctctggatt catcttcagc aattatgcta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcctttg atgcagacaa tgaatattat 180
gcagagtccg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagaa cacgatgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccggggac acagctctct attactgtgc gagagatcct 300
ctgggtatag gagtgaaggg ctacgttgac ttctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 114
<211> 122
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 114
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Thr Ser Gly Phe Ile Phe Ser Asn Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Phe Asp Ala Asp Asn Glu Tyr Tyr Ala Glu Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Met Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Gly Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Pro Leu Gly Ile Gly Val Lys Gly Tyr Val Asp Phe Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 115
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 115
Phe Ile Phe Ser Asn Tyr Ala Met His
1 5
<210> 116
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 116
ttcatcttca gcaattatgc tatgcac 27
<210> 117
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 117
Val Ile Ser Phe Asp Ala Asp Asn Glu Tyr Tyr Ala Glu Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 118
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 118
gttatatcct ttgatgcaga caatgaatat tatgcagagt ccgtgaaggg c 51
<210> 119
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 119
Ala Arg Asp Pro Leu Gly Ile Gly Val Lys Gly Tyr Val Asp Phe
1 5 10 15
<210> 120
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 120
gcgagagatc ctctgggtat aggagtgaag ggctacgttg acttc 45
<210> 121
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 121
tcctctgagc tgagtcagcc accctcagtg tcagtggccc caggagagac ggccaggatt 60
acttgtgggg gagacaactt tggaagtgac ggtctgcact ggtaccagca gaagccaggc 120
caggcccctg tgttggtcat ctattatgat agcgaccggc cctcagggat ccctgagcga 180
ttctccggct ccatctctgg gaacacggcc accttgacca tcagcagggt cgaagccggg 240
gatgaggccg actatttctg tcaggtgtgg gatagtatta gtgatcatct ggtattcggc 300
ggggggacca aggtgaccgt ccta 324
<210> 122
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 122
Ser Ser Glu Leu Ser Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Glu
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asp Asn Phe Gly Ser Asp Gly Leu
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
Tyr Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Ile Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Phe Cys Gln Val Trp Asp Ser Ile Ser Asp His
85 90 95
Leu Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105
<210> 123
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 123
Gly Gly Asp Asn Phe Gly Ser Asp Gly Leu His
1 5 10
<210> 124
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 124
gggggagaca actttggaag tgacggtctg cac 33
<210> 125
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 125
Tyr Asp Ser Asp Arg Pro Ser
1 5
<210> 126
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 126
tatgatagcg accggccctc a 21
<210> 127
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 127
Gln Val Trp Asp Ser Ile Ser Asp His Leu Val
1 5 10
<210> 128
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 128
caggtgtggg atagtattag tgatcatctg gta 33
<210> 129
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 129
caggtccagc ttgtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcagc agttatgcta tcaactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggg atcatccctg cctttggtac aacaatctac 180
gcacagaggt tccaggacag agtcacgatt accgcggaca aatccacgag cacagcctac 240
atggagctga ggagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gaggtcacca 300
cccttttgga gtgactatag ccgtgggtgg ttcgacccct ggggccaggg aaccctggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 130
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 130
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Ala Phe Gly Thr Thr Ile Tyr Ala Gln Arg Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Pro Pro Phe Trp Ser Asp Tyr Ser Arg Gly Trp Phe Asp
100 105 110
Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 131
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 131
Gly Thr Phe Ser Ser Tyr Ala Ile Asn
1 5
<210> 132
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 132
ggcaccttca gcagttatgc tatcaac 27
<210> 133
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 133
Gly Ile Ile Pro Ala Phe Gly Thr Thr Ile Tyr Ala Gln Arg Phe Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 134
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 134
gggatcatcc ctgcctttgg tacaacaatc tacgcacaga ggttccagga c 51
<210> 135
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 135
Ala Arg Ser Pro Pro Phe Trp Ser Asp Tyr Ser Arg Gly Trp Phe Asp
1 5 10 15
Pro
<210> 136
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 136
gcgaggtcac cacccttttg gagtgactat agccgtgggt ggttcgaccc c 51
<210> 137
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 137
gaaacgacac tcacgcagtc tccatccgcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gaccattagc ggctatttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccagtt tgcaaagtgg ggtcccgtcg 180
agattcagtg gcagtagcgc tgggacagat ttcactctct ccatcagcaa tctacaacct 240
gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacacta ccccgtggac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 138
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 138
Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ala Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Ser Ala Gly Thr Asp Phe Thr Leu Ser Ile Ser Asn Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Thr Thr Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 139
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 139
Arg Ala Ser Gln Thr Ile Ser Gly Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 140
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 140
cgggcaagtc agaccattag cggctattta aat 33
<210> 141
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 141
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 142
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 142
gctgcatcca gtttgcaaag t 21
<210> 143
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 143
Gln Gln Ser Tyr Thr Thr Pro Trp Thr
1 5
<210> 144
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 144
caacagagtt acactacccc gtggacg 27
<210> 145
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 145
caggtccagc tggtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggagactc tctgaagatc 60
tcctgtaaga atgctggaca cacctctaga atctactgga tcgcctgggt gcgccagatg 120
cccgcgaaag gcctggagta catgggcatc atctttcctg gtgactctga taccagatac 180
agtccgtcct tccgaggcca ggtcaccatc tcagccgaca ggtccatcag aactgcctac 240
ctgcagttga gcagcctgaa ggcctcggac accggcattt attactgtgc gacacagggg 300
cttgaggggg cttttgacta ctggggccag ggaaccctgg tcaccgtctc ctca 354
<210> 146
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 146
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Asp
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Asn Ala Gly His Thr Ser Arg Ile Tyr
20 25 30
Trp Ile Ala Trp Val Arg Gln Met Pro Ala Lys Gly Leu Glu Tyr Met
35 40 45
Gly Ile Ile Phe Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Arg Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Arg Ser Ile Arg Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Leu Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Gly Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Gln Gly Leu Glu Gly Ala Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 147
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 147
His Thr Ser Arg Ile Tyr Trp Ile Ala
1 5
<210> 148
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 148
cacacctcta gaatctactg gatcgcc 27
<210> 149
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 149
Ile Ile Phe Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 150
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 150
atcatctttc ctggtgactc tgataccaga tacagtccgt ccttccgagg c 51
<210> 151
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 151
Ala Thr Gln Gly Leu Glu Gly Ala Phe Asp Tyr
1 5 10
<210> 152
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 152
gcgacacagg ggcttgaggg ggcttttgac tac 33
<210> 153
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 153
gacatccggt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aaccagttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggacagccc ctaagctcct catctacgat gcatcctttt tgcaaacagg ggtcccatca 180
aggttcagtg gaagtggatc tgggacacat tttactttca ccatcaccag cctgcagcct 240
gaagattttg caacatattt ctgtcagcat tatgatagtt tccccatatt cactttcggc 300
cctgggacca agctggagat caaa 324
<210> 154
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 154
Asp Ile Arg Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Gln
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Phe Leu Gln Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr His Phe Thr Phe Thr Ile Thr Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln His Tyr Asp Ser Phe Pro Ile
85 90 95
Phe Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 155
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 155
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Gln Leu Asn
1 5 10
<210> 156
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 156
caggcgagtc aggacattag caaccagtta aat 33
<210> 157
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 157
Asp Ala Ser Phe Leu Gln Thr
1 5
<210> 158
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 158
gatgcatcct ttttgcaaac a 21
<210> 159
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 159
Gln His Tyr Asp Ser Phe Pro Ile Phe Thr
1 5 10
<210> 160
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 160
cagcattatg atagtttccc catattcact 30
<210> 161
<211> 378
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 161
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggcaggtc cctgcgactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttgat gattatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120
ccagggaagg gcctggagtg ggtctcaggc atcagttgga atagtggtat tgtaaagtat 180
gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga acagtctgag aactgaggac acggccttgt attattgtgt aaaagacggt 300
tataccagca gttggcactc ggactaccac tacggcttgg acgtctgggg ccaagggacc 360
acggtcaccg tctcctca 378
<210> 162
<211> 126
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 162
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ile Val Lys Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Val Lys Asp Gly Tyr Thr Ser Ser Trp His Ser Asp Tyr His Tyr Gly
100 105 110
Leu Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 163
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 163
Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Ala Met His
1 5
<210> 164
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 164
ttcacctttg atgattatgc catgcac 27
<210> 165
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 165
Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Ile Val Lys Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 166
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 166
ggcatcagtt ggaatagtgg tattgtaaag tatgcggact ctgtgaaggg c 51
<210> 167
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 167
Val Lys Asp Gly Tyr Thr Ser Ser Trp His Ser Asp Tyr His Tyr Gly
1 5 10 15
Leu Asp Val
<210> 168
<211> 57
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 168
gtaaaagacg gttataccag cagttggcac tcggactacc actacggctt ggacgtc 57
<210> 169
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 169
gatattgtga tgactcagtc tccagccacc ctgtctctgt ctccagggga cagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gaatgttatc agcaacttgg cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatact gtatccacca gggccactgg tatcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag tataataact ggcctctcac tttcggcgga 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 170
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 170
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Asp Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asn Val Ile Ser Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Thr Val Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Asn Trp Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 171
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 171
Arg Ala Ser Gln Asn Val Ile Ser Asn Leu Ala
1 5 10
<210> 172
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 172
agggccagtc agaatgttat cagcaacttg gcc 33
<210> 173
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 173
Thr Val Ser Thr Arg Ala Thr
1 5
<210> 174
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 174
actgtatcca ccagggccac t 21
<210> 175
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 175
Gln Gln Tyr Asn Asn Trp Pro Leu Thr
1 5
<210> 176
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 176
cagcagtata ataactggcc tctcact 27
<210> 177
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 177
caggtccagc ttgtgcagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcgtc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggaga caccttcaac agttattcca tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggagga atcctcccta tgtttggttc gtcagactac 180
gcacagaagt tccagggcag actcacaatt accgcggacg aatccacgag gacagcctac 240
atggagctga acagtctgac atctgaggac acggccattt actactgtgc gagagacaat 300
tactatgttt ggactggtcg ttatcccgaa tttgacttct ggggccaggg aaccctggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 178
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 178
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Phe Asn Ser Tyr
20 25 30
Ser Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Leu Pro Met Phe Gly Ser Ser Asp Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Leu Thr Ile Thr Ala Asp Glu Ser Thr Arg Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Asn Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Asn Tyr Tyr Val Trp Thr Gly Arg Tyr Pro Glu Phe Asp
100 105 110
Phe Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 179
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 179
Asp Thr Phe Asn Ser Tyr Ser Ile Ser
1 5
<210> 180
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 180
gacaccttca acagttattc catcagc 27
<210> 181
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 181
Gly Ile Leu Pro Met Phe Gly Ser Ser Asp Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 182
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 182
ggaatcctcc ctatgtttgg ttcgtcagac tacgcacaga agttccaggg c 51
<210> 183
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 183
Ala Arg Asp Asn Tyr Tyr Val Trp Thr Gly Arg Tyr Pro Glu Phe Asp
1 5 10 15
Phe
<210> 184
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 184
gcgagagaca attactatgt ttggactggt cgttatcccg aatttgactt c 51
<210> 185
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 185
gaaattgtgt tgacacagtc tccaggcacc ctgtccttgt ctccagggga tgaagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttacc agcaattact tagcctggta ccagcagagg 120
cctggccagg ctcccaggct cctcatctct ggtgcatcca gaagggccac tgccgtccca 180
gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240
cctgaagatt ttgcagttta ttactgtcag caatatggaa gcacaccgat caccttcggc 300
caggggacac gactggagat taaa 324
<210> 186
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 186
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Asp Glu Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Thr Ser Asn
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Ser Gly Ala Ser Arg Arg Ala Thr Ala Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Thr Pro
85 90 95
Ile Thr Phe Gly Gln Gly Thr Arg Leu Glu Ile Lys
100 105
<210> 187
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 187
Arg Ala Ser Gln Ser Val Thr Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 188
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 188
agggccagtc agagtgttac cagcaattac ttagcc 36
<210> 189
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 189
Gly Ala Ser Arg Arg Ala Thr
1 5
<210> 190
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 190
ggtgcatcca gaagggccac t 21
<210> 191
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 191
Gln Gln Tyr Gly Ser Thr Pro Ile Thr
1 5
<210> 192
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 192
cagcaatatg gaagcacacc gatcacc 27
<210> 193
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 193
caggtccagc tggtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggata cactttcacc aatgatataa actgggtgcg acaggccact 120
ggacaagggc ttgagtggat ggggtggatg aaccctaaca atggtcacac aggctatgca 180
cagagcttcg agggcagagt cagcatgacc aggaactccg ccataaacac agcctacctg 240
gagctgagca gcctgagatt tgacgatacg gccatatatt attgtgtata caatttctgg 300
agtgattctt cagtctcctg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc a 351
<210> 194
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 194
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Asp
20 25 30
Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
35 40 45
Trp Met Asn Pro Asn Asn Gly His Thr Gly Tyr Ala Gln Ser Phe Glu
50 55 60
Gly Arg Val Ser Met Thr Arg Asn Ser Ala Ile Asn Thr Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Glu Leu Ser Ser Leu Arg Phe Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Tyr Asn Phe Trp Ser Asp Ser Ser Val Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 195
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 195
Tyr Thr Phe Thr Asn Asp Ile Asn
1 5
<210> 196
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 196
tacactttca ccaatgatat aaac 24
<210> 197
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 197
Trp Met Asn Pro Asn Asn Gly His Thr Gly Tyr Ala Gln Ser Phe Glu
1 5 10 15
Gly
<210> 198
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 198
tggatgaacc ctaacaatgg tcacacaggc tatgcacaga gcttcgaggg c 51
<210> 199
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 199
Val Tyr Asn Phe Trp Ser Asp Ser Ser Val Ser
1 5 10
<210> 200
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 200
gtatacaatt tctggagtga ttcttcagtc tcc 33
<210> 201
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 201
cagtctgtcg tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag tgtcgccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg ccaggttatg atgtacactg gtatcagcaa 120
cttccgggag cagcccccaa actcctcatc tatggtgaca gcaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctacctc caagtctggc acctcagttt ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct ccgtggttat 300
gtcttcggaa ctgggaccaa gctcaccgtc cta 333
<210> 202
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 202
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Ala Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Pro Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asp Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Thr Ser Lys Ser Gly Thr Ser Val Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Arg Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 203
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 203
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Pro Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 204
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 204
actgggagca gctccaacat cgggccaggt tatgatgtac ac 42
<210> 205
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 205
Gly Asp Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 206
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 206
ggtgacagca atcggccctc a 21
<210> 207
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 207
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Arg Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 208
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 208
cagtcctatg acagcagcct ccgtggttat gtc 33
<210> 209
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 209
caggtccagc ttgtacagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggttt cacctttact aattatggta taagttgggt gcgacaggcc 120
cctggacgag ggcttgagtg gatgggctgg atcagcgctt acaatggtaa cacagagtat 180
gcacagaagc tccaagacag actcaccatg accacagaca catctacgaa cacagcctac 240
atggagttga ggagcctgag atctgacgac acggccctat attattgtgc gagagagtca 300
ggtgtcgcag cagctgctac cttactttac tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360
tca 363
<210> 210
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 210
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Phe Thr Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Gly Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Glu Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Asp Arg Leu Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Ser Gly Val Ala Ala Ala Ala Thr Leu Leu Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 211
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 211
Phe Thr Phe Thr Asn Tyr Gly Ile Ser
1 5
<210> 212
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 212
ttcaccttta ctaattatgg tataagt 27
<210> 213
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 213
Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Glu Tyr Ala Gln Lys Leu Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 214
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 214
tggatcagcg cttacaatgg taacacagag tatgcacaga agctccaaga c 51
<210> 215
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 215
Ala Arg Glu Ser Gly Val Ala Ala Ala Ala Thr Leu Leu Tyr
1 5 10
<210> 216
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 216
gcgagagagt caggtgtcgc agcagctgct accttacttt ac 42
<210> 217
<211> 336
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 217
gaaacgacac tcacgcagtc tccactctcc ctgcccgtca cccttggaca accggcctcc 60
atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta tacagcgatg gaaacaccta cttgagttgg 120
tttcagcaga ggccaggcca atctccaagg cgcctaattt ataaggtttc taaccgggac 180
tctggggtcc cagacagatt cagcggcagt gggtcaggcg ctgatttcac actgaaaatc 240
agcagggtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaaggtat atactggcct 300
cggacgttcg gccaagggac caaagtggat atcaaa 336
<210> 218
<211> 112
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 218
Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Arg Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Ala Asp Phe Thr Leu Lys Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Gly
85 90 95
Ile Tyr Trp Pro Arg Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105 110
<210> 219
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 219
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Tyr Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser
1 5 10 15
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 220
aggtctagtc aaagcctcgt atacagcgat ggaaacacct acttgagt 48
<210> 221
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 221
Lys Val Ser Asn Arg Asp Ser
1 5
<210> 222
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 222
aaggtttcta accgggactc t 21
<210> 223
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 223
Met Gln Gly Ile Tyr Trp Pro Arg Thr
1 5
<210> 224
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 224
atgcaaggta tatactggcc tcggacg 27
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 225
caggtgcagc tggtggagtc tggggctgag gtgcagaagc ctggggcctc agtgaagatt 60
tcttgcaagg catctggata caagttcatc agctactcca tacactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag gacttgagtg gatgggagta atcaaccctg gtggcggtct cacaaactat 180
gcacagaagt tccaggacag actcaccatg accagggaca cgtccacggc cacagtgacc 240
atggaactga ggagcctgag atctgacgac agggccgtat atttttgtgg tagagaagac 300
tcatattgta gtggagacag ctgcttcaat tccggttcgg ggcgctgggt cgactcctgg 360
ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 390
<210> 226
<211> 130
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 226
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Gln Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Lys Phe Ile Ser Tyr
20 25 30
Ser Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Val Ile Asn Pro Gly Gly Gly Leu Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Asp Arg Leu Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ala Thr Val Thr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Arg Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Gly Arg Glu Asp Ser Tyr Cys Ser Gly Asp Ser Cys Phe Asn Ser Gly
100 105 110
Ser Gly Arg Trp Val Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 227
Tyr Lys Phe Ile Ser Tyr Ser Ile His
1 5
<210> 228
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 228
tacaagttca tcagctactc catacac 27
<210> 229
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 229
Val Ile Asn Pro Gly Gly Gly Leu Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Asp
<210> 230
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 230
gtaatcaacc ctggtggcgg tctcacaaac tatgcacaga agttccagga c 51
<210> 231
<211> 23
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 231
Gly Arg Glu Asp Ser Tyr Cys Ser Gly Asp Ser Cys Phe Asn Ser Gly
1 5 10 15
Ser Gly Arg Trp Val Asp Ser
20
<210> 232
<211> 69
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 232
ggtagagaag actcatattg tagtggagac agctgcttca attccggttc ggggcgctgg 60
gtcgactcc 69
<210> 233
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 233
gacatccagg tgacccagtc tccatcgtcc ctgtctgcat ctgtcggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gagcgttatc acctatttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctcaactcct ggtctatgct gcttccattt tgcaaagtgg ggtcccatcc 180
agcttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg caacttacta ctgtcaacag acttacagta cccctcatac ttttggccag 300
gggaccaaag tggatatcaa a 321
<210> 234
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 234
Asp Ile Gln Val Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ile Thr Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Gln Leu Leu Val
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ile Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Ser Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Thr Tyr Ser Thr Pro His
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 235
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 235
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ile Thr Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 236
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 236
cgggcaagtc agagcgttat cacctattta aat 33
<210> 237
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 237
Ala Ala Ser Ile Leu Gln Ser
1 5
<210> 238
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 238
gctgcttcca ttttgcaaag t 21
<210> 239
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 239
Gln Gln Thr Tyr Ser Thr Pro His Thr
1 5
<210> 240
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 240
caacagactt acagtacccc tcatact 27
<210> 241
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 241
gaggtgcagc tggtggagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggtta cacctttgcc aactatggta tcacctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagta catgggatgg atcagcgctt acaatggtaa cacaaactat 180
gcacagaagt tccagggcag agtcaccatg accacggaca catccacgag cacagcgtac 240
atggagctga ggagcctgag atctgacgac acggccattt attactgtgc gagagatccc 300
ggtgttacgg ctgctgtgct acttgactac tggggccagg gagccctggt caccgtctcc 360
tca 363
<210> 242
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 242
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ala Asn Tyr
20 25 30
Gly Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Tyr Met
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Pro Gly Val Thr Ala Ala Val Leu Leu Asp Tyr Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Ala Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 243
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 243
Tyr Thr Phe Ala Asn Tyr Gly Ile Thr
1 5
<210> 244
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 244
tacacctttg ccaactatgg tatcacc 27
<210> 245
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 245
Trp Ile Ser Ala Tyr Asn Gly Asn Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 246
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 246
tggatcagcg cttacaatgg taacacaaac tatgcacaga agttccaggg c 51
<210> 247
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 247
Ala Arg Asp Pro Gly Val Thr Ala Ala Val Leu Leu Asp Tyr
1 5 10
<210> 248
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 248
gcgagagatc ccggtgttac ggctgctgtg ctacttgact ac 42
<210> 249
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 249
gatattgtgt tgacccagtc tccactctcc ctgcccgtca cccttggaca gccggcctcc 60
atctcctgca ggtctagtca aagcctcgta ttcagtgatg gaaacaccta cttgagttgg 120
tttcagcaga ggccaggcca atctccaagg cgcctacttt ataaggtttc taaccgggac 180
tctggggtcc cagacagatt cagcggcagt gggtcaggca ctgatttcac actgacaatc 240
agcagggtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgct tgcaaggtac acccccttac 300
acttttggcc aggggaccaa agtggatatc aaa 333
<210> 250
<211> 111
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 250
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly
1 5 10 15
Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Phe Ser
20 25 30
Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Arg Arg Leu Leu Tyr Lys Val Ser Asn Arg Asp Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly
85 90 95
Thr Pro Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105 110
<210> 251
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 251
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val Phe Ser Asp Gly Asn Thr Tyr Leu Ser
1 5 10 15
<210> 252
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 252
aggtctagtc aaagcctcgt attcagtgat ggaaacacct acttgagt 48
<210> 253
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 253
Lys Val Ser Asn Arg Asp Ser
1 5
<210> 254
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 254
aaggtttcta accgggactc t 21
<210> 255
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 255
Leu Gln Gly Thr Pro Pro Tyr Thr
1 5
<210> 256
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 256
ttgcaaggta caccccctta cact 24
<210> 257
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 257
caggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaagtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatccta tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcgcgg ggctggagtg gatggccgta atctcatatg atggagccaa taaatactat 180
gaagactcct taaagggccg attcaccatc tccagagaca attccaagga cactctgttt 240
ctgcaaatga acaacctgag acctgaggac acggctgtct attactgtgc gagagggagg 300
acttcgcata taaatacacc cgagactaag tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360
tca 363
<210> 258
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 258
Gln Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Pro Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Ala Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Ala Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ala Asn Lys Tyr Tyr Glu Asp Ser Leu
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asp Thr Leu Phe
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Arg Thr Ser His Ile Asn Thr Pro Glu Thr Lys Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 259
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 259
Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Pro Met His
1 5
<210> 260
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 260
ttcaccttca gtagctatcc tatgcac 27
<210> 261
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 261
Val Ile Ser Tyr Asp Gly Ala Asn Lys Tyr Tyr Glu Asp Ser Leu Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 262
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 262
gtaatctcat atgatggagc caataaatac tatgaagact ccttaaaggg c 51
<210> 263
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 263
Ala Arg Gly Arg Thr Ser His Ile Asn Thr Pro Glu Thr Lys
1 5 10
<210> 264
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 264
gcgagaggga ggacttcgca tataaataca cccgagacta ag 42
<210> 265
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 265
gaaattgtgt tgacgcagtc tccaacctta gtgtctgcat ctacaggaga cacagtcacc 60
atcagttgcc ggatgagtca gggcattaac ggttatttag cctggtttca gaaaaaacca 120
gggaaagccc ctgacctcct gatctatggt gcatccactt tgcaagatgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagtcg cctgcagtct 240
gaagatttgg caacttatta ttgtcaacag tattacagtt tgccgtggac gttcggccaa 300
gggaccaaag tggatatcaa a 321
<210> 266
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 266
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Thr Leu Val Ser Ala Ser Thr Gly
1 5 10 15
Asp Thr Val Thr Ile Ser Cys Arg Met Ser Gln Gly Ile Asn Gly Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Phe Gln Lys Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asp Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Leu Gln Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Tyr Ser Leu Pro Trp
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 267
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 267
Arg Met Ser Gln Gly Ile Asn Gly Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 268
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 268
cggatgagtc agggcattaa cggttattta gcc 33
<210> 269
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 269
Gly Ala Ser Thr Leu Gln Asp
1 5
<210> 270
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 270
ggtgcatcca ctttgcaaga t 21
<210> 271
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 271
Gln Gln Tyr Tyr Ser Leu Pro Trp Thr
1 5
<210> 272
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 272
caacagtatt acagtttgcc gtggacg 27
<210> 273
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 273
caggtccagc ttgtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggata cagcttcacc gactactata tacactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gataggatgg atcaacccta acagtggtgg cacaaccttt 180
gcacagaact ttcagggcag ggtcaccatg accagggaca cgtccatcag cacagccttc 240
ctggagctga gcaggctaaa atctgacgac acggccgtat attattgtgc gagagacgtt 300
ctctggttaa acggattctg gggcctggga accctggtca ccgtctcttc a 351
<210> 274
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 274
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr
20 25 30
Tyr Ile His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Thr Phe Ala Gln Asn Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Phe
65 70 75 80
Leu Glu Leu Ser Arg Leu Lys Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Val Leu Trp Leu Asn Gly Phe Trp Gly Leu Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 275
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 275
Tyr Ser Phe Thr Asp Tyr Tyr Ile His
1 5
<210> 276
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 276
tacagcttca ccgactacta tatacac 27
<210> 277
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 277
Trp Ile Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Thr Phe Ala Gln Asn Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 278
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 278
tggatcaacc ctaacagtgg tggcacaacc tttgcacaga actttcaggg c 51
<210> 279
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 279
Ala Arg Asp Val Leu Trp Leu Asn Gly Phe
1 5 10
<210> 280
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 280
gcgagagacg ttctctggtt aaacggattc 30
<210> 281
<211> 339
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 281
cagtctgtgg tgacgcagcc gccctcagtg tctgcggccc caggacagaa ggtcaccatc 60
tcctgctctg gaagcagctc caacattggg aataattatg tatcctggta tcagcagttc 120
cgaggaacag cccccaaagt cctcatttat gaaaataata agcgaacctc agggattcct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacg tcagccaccc tgggcatcac cggactccag 240
actggggacg aggccgatta ttactgcgga acatgggata gcagcctgag tactggcccc 300
tatgtggtat tcggcggagg gaccaagctg accgtccta 339
<210> 282
<211> 113
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 282
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Phe Arg Gly Thr Ala Pro Lys Val Leu
35 40 45
Ile Tyr Glu Asn Asn Lys Arg Thr Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu
85 90 95
Ser Thr Gly Pro Tyr Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val
100 105 110
Leu
<210> 283
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 283
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 284
<211> 39
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 284
tctggaagca gctccaacat tgggaataat tatgtatcc 39
<210> 285
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 285
Glu Asn Asn Lys Arg Thr Ser
1 5
<210> 286
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 286
gaaaataata agcgaacctc a 21
<210> 287
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 287
Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu Ser Thr Gly Pro Tyr Val Val
1 5 10
<210> 288
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 288
ggaacatggg atagcagcct gagtactggc ccctatgtgg ta 42
<210> 289
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 289
caggtccagc tggtgcagtc tggggctgag gcgaagaagc ctggggcctc agtgaaggtt 60
tcctgtaagg catctggata tacctttacc agctactatt tgcactgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcctgagtg gatgggaata atcaaccctg gtggtggtag cacagagttg 180
tcacagaagt tccagggcag agtcaccttg actagggaca cgtccacgag cacagtctac 240
atggaggtga ccagcctgac atctgaggac acggccgtct attactgtgc gagagcccgg 300
atacagctct gggcaccaaa ttactacggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctctt ca 372
<210> 290
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 290
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Ala Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Glu Leu Ser Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Arg Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Val Thr Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Arg Ile Gln Leu Trp Ala Pro Asn Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 291
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 291
Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Tyr Leu His
1 5
<210> 292
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 292
tataccttta ccagctacta tttgcac 27
<210> 293
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 293
Ile Ile Asn Pro Gly Gly Gly Ser Thr Glu Leu Ser Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 294
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 294
ataatcaacc ctggtggtgg tagcacagag ttgtcacaga agttccaggg c 51
<210> 295
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 295
Ala Arg Ala Arg Ile Gln Leu Trp Ala Pro Asn Tyr Tyr Gly Met Asp
1 5 10 15
Val
<210> 296
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 296
gcgagagccc ggatacagct ctgggcacca aattactacg gtatggacgt c 51
<210> 297
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 297
gacatccagt tgacccagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggccagtca tggcattacc agttatttag cctggtatca gcaaaaacca 120
gggaatgccc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagcg gcagtgggtc tgagacacag ttcactctca caatcagcgg cctgcagcct 240
gaagattttg caacttatta ctgtcaacag cttaatcgtt accctctaac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 298
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 298
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser His Gly Ile Thr Ser Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Asn Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Glu Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Gly Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Leu Asn Arg Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 299
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 299
Arg Ala Ser His Gly Ile Thr Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 300
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 300
cgggccagtc atggcattac cagttattta gcc 33
<210> 301
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 301
Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser
1 5
<210> 302
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 302
gctgcatcca ctttgcaaag t 21
<210> 303
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 303
Gln Gln Leu Asn Arg Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 304
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 304
caacagctta atcgttaccc tctaacg 27
<210> 305
<211> 360
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 305
caggtccagc ttgtgcagtc tggagctgag gtgaagaagc ctggggcctc agtgaagatc 60
tcctgcaaga cctctggtta cacctttacg agctctgtga tcagctgggt gcggcaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg ggtgggatgg atcaccggtc acagaagtag cacaaactat 180
gcacagagac tccagggtag agtcaccatg accacagaca catccacgag cacagcctat 240
atggagctga ggagcctgag gtctgacgac acggccgtgt attactgtgc gagagccgat 300
ggtggttcgg ggagttatta tagcgcctgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca 360
<210> 306
<211> 120
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 306
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Ser
20 25 30
Val Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Trp Ile Thr Gly His Arg Ser Ser Thr Asn Tyr Ala Gln Arg Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Asp Gly Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Ser Ala Trp Gly Gln
100 105 110
Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 307
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 307
Tyr Thr Phe Thr Ser Ser Val Ile Ser
1 5
<210> 308
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 308
tacaccttta cgagctctgt gatcagc 27
<210> 309
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 309
Trp Ile Thr Gly His Arg Ser Ser Thr Asn Tyr Ala Gln Arg Leu Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 310
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 310
tggatcaccg gtcacagaag tagcacaaac tatgcacaga gactccaggg t 51
<210> 311
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 311
Ala Arg Ala Asp Gly Gly Ser Gly Ser Tyr Tyr Ser Ala
1 5 10
<210> 312
<211> 39
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 312
gcgagagccg atggtggttc ggggagttat tatagcgcc 39
<210> 313
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 313
tcctatgagc tgacacagcc accctcagcg tcagtggccc caggaaagac ggccaggatc 60
tcctgtgggg gaaacaacat tggaactaag agtgtccact ggtaccagca gaagccaggc 120
caggcccctg tcttggtcat ctatcatgat agccaccggc cctcagggat ccctgagcga 180
ttctctggct ccaactctgg gaacacggcc accctgacca tcagtagggt cgaagccggg 240
gatgaggccg actattattg tcagctgtgg gatagtagta gtgattccca tgtcttcgga 300
actgggacca agctcaccgt ccta 324
<210> 314
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 314
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Ser Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Thr Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Ile Tyr
35 40 45
His Asp Ser His Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Leu Trp Asp Ser Ser Ser Asp Ser
85 90 95
His Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 315
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 315
Gly Gly Asn Asn Ile Gly Thr Lys Ser Val His
1 5 10
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 316
gggggaaaca acattggaac taagagtgtc cac 33
<210> 317
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 317
His Asp Ser His Arg Pro Ser
1 5
<210> 318
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 318
catgatagcc accggccctc a 21
<210> 319
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 319
Gln Leu Trp Asp Ser Ser Ser Asp Ser His Val
1 5 10
<210> 320
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 320
cagctgtggg atagtagtag tgattcccat gtc 33
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 321
caggtgcagc tggtgcagtc tgggggaggc ctggtcaagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctcgggatt caccatcagt ggttataaca tgttctgggt ccgccagcct 120
ccggggaagg ggctggagtg ggtctcatcc attactgctg gtagtagtta tttaaactat 180
gcagactcag tgaagggccg tttcatcgtc tccagagaca acgccaagaa ttcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgttt atttctgtgc gagagcacct 300
cttttacccg ctatgatgga cctctggggc caagggacca cggtcaccgt ctcctca 357
<210> 322
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 322
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Asn Met Phe Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Thr Ala Gly Ser Ser Tyr Leu Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Pro Leu Leu Pro Ala Met Met Asp Leu Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 323
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 323
Phe Thr Ile Ser Gly Tyr Asn Met Phe
1 5
<210> 324
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 324
ttcaccatca gtggttataa catgttc 27
<210> 325
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 325
Ser Ile Thr Ala Gly Ser Ser Tyr Leu Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 326
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 326
tccattactg ctggtagtag ttatttaaac tatgcagact cagtgaaggg c 51
<210> 327
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 327
Ala Arg Ala Pro Leu Leu Pro Ala Met Met Asp Leu
1 5 10
<210> 328
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 328
gcgagagcac ctcttttacc cgctatgatg gacctc 36
<210> 329
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 329
cagtctgtct tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacactg gtaccagcaa 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatactaaca acaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ctattactgc cagtcctatg acagaagcct gaatggttat 300
gtcttcggaa ctgggaccaa gctcaccgtc cta 333
<210> 330
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 330
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Thr Asn Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Ser
85 90 95
Leu Asn Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 331
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 331
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 332
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 332
actgggagca gctccaacat cggggcaggt tatgatgtac ac 42
<210> 333
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 333
Thr Asn Asn Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 334
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 334
actaacaaca atcggccctc a 21
<210> 335
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 335
Gln Ser Tyr Asp Arg Ser Leu Asn Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 336
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 336
cagtcctatg acagaagcct gaatggttat gtc 33
<210> 337
<211> 351
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 337
caggtccagc ttgtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctggggcctc actgatggtc 60
tcctgctcgg cttctggata cattttcaac agtgacatca actgggtgcg acaggcccct 120
ggacaagggc ttgagtggat ggggtggatg aaccctaaga atggtcacac aggctatgca 180
caggaattcg agggcagagt cagcatgacc aggaactcct ccaaaactat tgcctatctg 240
cagctgagca gcctgacata tgaagacacg gccgtctatt attgtgttta cgatttctgg 300
agtgatgatt cagtcaagtg gggccgggga accctggtca ccgtctcctc a 351
<210> 338
<211> 117
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 338
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Leu Met Val Ser Cys Ser Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Asn Ser Asp
20 25 30
Ile Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met Gly
35 40 45
Trp Met Asn Pro Lys Asn Gly His Thr Gly Tyr Ala Gln Glu Phe Glu
50 55 60
Gly Arg Val Ser Met Thr Arg Asn Ser Ser Lys Thr Ile Ala Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Leu Ser Ser Leu Thr Tyr Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Val
85 90 95
Tyr Asp Phe Trp Ser Asp Asp Ser Val Lys Trp Gly Arg Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 339
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 339
Tyr Ile Phe Asn Ser Asp Ile Asn
1 5
<210> 340
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 340
tacattttca acagtgacat caac 24
<210> 341
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 341
Trp Met Asn Pro Lys Asn Gly His Thr Gly Tyr Ala Gln Glu Phe Glu
1 5 10 15
Gly
<210> 342
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 342
tggatgaacc ctaagaatgg tcacacaggc tatgcacagg aattcgaggg c 51
<210> 343
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 343
Val Tyr Asp Phe Trp Ser Asp Asp Ser Val Lys
1 5 10
<210> 344
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 344
gtttacgatt tctggagtga tgattcagtc aag 33
<210> 345
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 345
cagtctgtgg tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag tgtcgccatc 60
tcctgctctg ggagcagctc caacatcggg ccaggttatg atgtacactg gtaccagcaa 120
cttccgggat cagcccccaa actcctcatc tacggtgaca acaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgagcgat tctctacctc caagtctggc acctcagcct cactggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctttg acagcagcct gcgtggttat 300
gtcttcggaa ctgggaccaa ggtgaccgtc cta 333
<210> 346
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 346
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Ala Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Pro Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Ser Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asp Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Glu Arg Phe
50 55 60
Ser Thr Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Phe Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Arg Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 347
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 347
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Pro Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 348
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 348
tctgggagca gctccaacat cgggccaggt tatgatgtac ac 42
<210> 349
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 349
Gly Asp Asn Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 350
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 350
ggtgacaaca atcggccctc a 21
<210> 351
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 351
Gln Ser Phe Asp Ser Ser Leu Arg Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 352
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 352
cagtcctttg acagcagcct gcgtggttat gtc 33
<210> 353
<211> 381
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 353
caggtccagc tggtacagtc tggagcagcg gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaagatc 60
tcctgtaagg gttttggata cagctttacc aagtattgga tcggctgggt gcgccaggtg 120
cccgggaaag gcctggagtg gatagggatc atctctccta ctgactctaa taccagatac 180
agcccgtcct tccgaggcca ggtcaccatg tcagccgaca agtccatcag tgccgcctac 240
ctgcagtgga gcagcctgaa ggcctcggac accgccatgt attactgtgc gagacacagc 300
agtccgtata gcagtggctg gtacggagat acatacttct ttgactcctg gggccaggga 360
accctggtca ccgtctcctc a 381
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 354
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Ala Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Phe Gly Tyr Ser Phe Thr Lys Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ile Ile Ser Pro Thr Asp Ser Asn Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Arg Gly Gln Val Thr Met Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Ala Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg His Ser Ser Pro Tyr Ser Ser Gly Trp Tyr Gly Asp Thr Tyr
100 105 110
Phe Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 355
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 355
Tyr Ser Phe Thr Lys Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 356
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 356
tacagcttta ccaagtattg gatcggc 27
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 357
Ile Ile Ser Pro Thr Asp Ser Asn Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Arg
1 5 10 15
Gly
<210> 358
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 358
atcatctctc ctactgactc taataccaga tacagcccgt ccttccgagg c 51
<210> 359
<211> 20
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 359
Ala Arg His Ser Ser Pro Tyr Ser Ser Gly Trp Tyr Gly Asp Thr Tyr
1 5 10 15
Phe Phe Asp Ser
20
<210> 360
<211> 60
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 360
gcgagacaca gcagtccgta tagcagtggc tggtacggag atacatactt ctttgactcc 60
<210> 361
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 361
cagcctgtgc tgactcagcc accctcagcg tctgggaccc ccgggcagag ggtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcaactc caacatcggg actaatactg tgaactggta ccagcagctc 120
cctggaacgg cccccaaagt cctcatccat aataataatg agcggccctc aggggtccct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcacc tcagcctccc tggccatcag tgggctccag 240
tctgaggatg aggctgatta ttactgtgca gcatgggatg acagcctgag aggttatgtc 300
ttcggaactg ggaccaaggt gaccgtccta 330
<210> 362
<211> 110
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 362
Gln Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Thr Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Asn Ser Asn Ile Gly Thr Asn
20 25 30
Thr Val Asn Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Val Leu
35 40 45
Ile His Asn Asn Asn Glu Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Gln
65 70 75 80
Ser Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Arg Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 363
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 363
Ser Gly Ser Asn Ser Asn Ile Gly Thr Asn Thr Val Asn
1 5 10
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 364
tctggaagca actccaacat cgggactaat actgtgaac 39
<210> 365
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 365
Asn Asn Asn Glu Arg Pro Ser
1 5
<210> 366
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 366
aataataatg agcggccctc a 21
<210> 367
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 367
Ala Ala Trp Asp Asp Ser Leu Arg Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 368
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 368
gcagcatggg atgacagcct gagaggttat gtc 33
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 369
caggtgcagc tggtgcaatc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc ggtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggagg caccttcggc agctatgcta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag gacttgagtg gatgggaggg accatcccta tctttggtac agcagaccac 180
gcacagaagt tccagggcag agtcacgata accgcggaca aatccacgag cacagcgtac 240
atggaactga gcagcctgag atctgaggac acggccgtgt attactgtgc gagaggtgtt 300
ttccgcgtag gttgtagtga taccagctgc ctcaaaaact actacggtac ggacgtctgg 360
ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 390
<210> 370
<211> 130
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 370
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Gly Thr Phe Gly Ser Tyr
20 25 30
Ala Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Thr Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asp His Ala Gln Lys Phe
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Val Phe Arg Val Gly Cys Ser Asp Thr Ser Cys Leu Lys
100 105 110
Asn Tyr Tyr Gly Thr Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 371
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 371
Gly Thr Phe Gly Ser Tyr Ala Ile Ser
1 5
<210> 372
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 372
ggcaccttcg gcagctatgc tatcagc 27
<210> 373
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 373
Gly Thr Ile Pro Ile Phe Gly Thr Ala Asp His Ala Gln Lys Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 374
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 374
gggaccatcc ctatctttgg tacagcagac cacgcacaga agttccaggg c 51
<210> 375
<211> 23
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 375
Ala Arg Gly Val Phe Arg Val Gly Cys Ser Asp Thr Ser Cys Leu Lys
1 5 10 15
Asn Tyr Tyr Gly Thr Asp Val
20
<210> 376
<211> 69
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 376
gcgagaggtg ttttccgcgt aggttgtagt gataccagct gcctcaaaaa ctactacggt 60
acggacgtc 69
<210> 377
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 377
cagtctgttc tgattcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccgtc 60
tcctgcactg gatccagcgg tgacgttggt gcttataagt atgtctcctg gtaccaacaa 120
cacccaggca gaggccccaa actcataatt tatgatgtca gtgctcggcc ctcagggatt 180
tctgatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ctattactgc agctcatatt caagcagcag cactctcgta 300
gtattcggcg gagggaccaa ggtgaccgtc cta 333
<210> 378
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 378
Gln Ser Val Leu Ile Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Val Ser Cys Thr Gly Ser Ser Gly Asp Val Gly Ala Tyr
20 25 30
Lys Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Arg Gly Pro Lys Leu
35 40 45
Ile Ile Tyr Asp Val Ser Ala Arg Pro Ser Gly Ile Ser Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Ser Ser Ser
85 90 95
Ser Thr Leu Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 379
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 379
Thr Gly Ser Ser Gly Asp Val Gly Ala Tyr Lys Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 380
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 380
actggatcca gcggtgacgt tggtgcttat aagtatgtct cc 42
<210> 381
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 381
Asp Val Ser Ala Arg Pro Ser
1 5
<210> 382
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 382
gatgtcagtg ctcggccctc a 21
<210> 383
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 383
Ser Ser Tyr Ser Ser Ser Ser Thr Leu Val Val
1 5 10
<210> 384
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 384
agctcatatt caagcagcag cactctcgta gta 33
<210> 385
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 385
caggtccagc tggtgcagtc tgggggaggg ttggtgcagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcttgtgtag gctctggatt caccttcagt acctatagta tgaactgggt ccgtcaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtttcacac attagtagta gtagtgttac catgtactac 180
gcagactttg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga ccagcctgag agccgaggac acggctgtgt attactgtgc gagagatgcg 300
ggaccagttt ggagtggtta ttacgactac ggtatggacg tctggggcca agggaccacg 360
gtcactgtct cctca 375
<210> 386
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 386
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser His Ile Ser Ser Ser Ser Val Thr Met Tyr Tyr Ala Asp Phe Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Thr Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Ala Gly Pro Val Trp Ser Gly Tyr Tyr Asp Tyr Gly Met
100 105 110
Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 387
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 387
Phe Thr Phe Ser Thr Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 388
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 388
ttcaccttca gtacctatag tatgaac 27
<210> 389
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 389
His Ile Ser Ser Ser Ser Val Thr Met Tyr Tyr Ala Asp Phe Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 390
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 390
cacattagta gtagtagtgt taccatgtac tacgcagact ttgtgaaggg c 51
<210> 391
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 391
Ala Arg Asp Ala Gly Pro Val Trp Ser Gly Tyr Tyr Asp Tyr Gly Met
1 5 10 15
Asp Val
<210> 392
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 392
gcgagagatg cgggaccagt ttggagtggt tattacgact acggtatgga cgtc 54
<210> 393
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 393
gaaacgacac tcacgcagtc tccagccacg ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcctcttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catttttgat gcatccaaga gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtctatta ctgtcagcag cgttacaact ggcctccgct cactttcggc 300
ggagggacca aggtggaaat caaa 324
<210> 394
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 394
Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Asp Ala Ser Lys Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Tyr Asn Trp Pro Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 395
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 395
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Leu Leu Ala
1 5 10
<210> 396
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 396
agggccagtc agagtgttag cagcctctta gcc 33
<210> 397
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 397
Asp Ala Ser Lys Arg Ala Thr
1 5
<210> 398
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 398
gatgcatcca agagggccac t 21
<210> 399
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 399
Gln Gln Arg Tyr Asn Trp Pro Pro Leu Thr
1 5 10
<210> 400
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 400
cagcagcgtt acaactggcc tccgctcact 30
<210> 401
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 401
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtccagc ctggcaggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctttggatt cacctttgat gattatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120
ccagggaagg gcctggagtg ggtctcaggt attagttgga atagtggttt cataggctat 180
gcggactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa ctccctgtct 240
ctgcaaatga acagtctgag aactgaggat acggccttgt attactgtgc aaaaactgat 300
ggagcagtgg ctgtcgacgg gccctttgac tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 402
<211> 122
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 402
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Phe Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Phe Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Thr Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Thr Asp Gly Ala Val Ala Val Asp Gly Pro Phe Asp Tyr Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 403
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 403
Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Ala Met His
1 5
<210> 404
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 404
ttcacctttg atgattatgc catgcac 27
<210> 405
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 405
Gly Ile Ser Trp Asn Ser Gly Phe Ile Gly Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 406
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 406
ggtattagtt ggaatagtgg tttcataggc tatgcggact ctgtgaaggg c 51
<210> 407
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 407
Ala Lys Thr Asp Gly Ala Val Ala Val Asp Gly Pro Phe Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 408
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 408
gcaaaaactg atggagcagt ggctgtcgac gggccctttg actac 45
<210> 409
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 409
gaaattgtgt tgacacagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc ggctatttaa gttggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatccattct acatctagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcaccag tctgcaacct 240
gaggattttg caacttacta ctgtcaacag agttacattg cccctccgac ttttggccag 300
gggaccaagg tggaaatcaa a 321
<210> 410
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 410
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Tyr
20 25 30
Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
His Ser Thr Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Thr Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Pro
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 411
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 411
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Gly Tyr Leu Ser
1 5 10
<210> 412
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 412
cgggcaagtc agagcattag cggctattta agt 33
<210> 413
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 413
Ser Thr Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 414
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 414
tctacatcta gtttgcaaag t 21
<210> 415
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 415
Gln Gln Ser Tyr Ile Ala Pro Pro Thr
1 5
<210> 416
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 416
caacagagtt acattgcccc tccgact 27
<210> 417
<211> 348
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 417
caggtccagc tggtacagtc tggggctgag gtgaagaagc ctgggtcctc gatgaaggtc 60
tcctgccagg cttctggagg ccccttcagc acctatacta tcagctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcttgagtg gatgggaggt atcatccctg tctttggtac accaaactac 180
gcgcagaagt tccacggcag agtcacgatt accgcggacc aatccacgag cacagcctac 240
atggagttga gtagcctgag atctgaggac accgccgttt attactgtgc gggagccccc 300
taccctatgg acgtctgggg ccaagggacc acggtcaccg tctcctca 348
<210> 418
<211> 116
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 418
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Met Lys Val Ser Cys Gln Ala Ser Gly Gly Pro Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Thr Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Gly Ile Ile Pro Val Phe Gly Thr Pro Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50 55 60
His Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Gln Ser Thr Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Gly Ala Pro Tyr Pro Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 419
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 419
Gly Pro Phe Ser Thr Tyr Thr Ile Ser
1 5
<210> 420
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 420
ggccccttca gcacctatac tatcagc 27
<210> 421
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 421
Gly Ile Ile Pro Val Phe Gly Thr Pro Asn Tyr Ala Gln Lys Phe His
1 5 10 15
Gly
<210> 422
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 422
ggtatcatcc ctgtctttgg tacaccaaac tacgcgcaga agttccacgg c 51
<210> 423
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 423
Ala Gly Ala Pro Tyr Pro Met Asp Val
1 5
<210> 424
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 424
gcgggagccc cctaccctat ggacgtc 27
<210> 425
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 425
gaaattgtat tgacacagtc tccagccacc ctgtctttgt ctccagggga gagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttgcc agctccttag cctggtacca acagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctatgat gcatccaaca gggccactgg catcccagcc 180
aggttcagtg gcagtgggtc tgggacagac ttcactctca ccatcagcag cctagagcct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag cgtaccaact ggcaggggct ctctttcggc 300
ggagggacca aagtggatat caaa 324
<210> 426
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 426
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ala Ser Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Glu Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Arg Thr Asn Trp Gln Gly
85 90 95
Leu Ser Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 427
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 427
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ala Ser Ser Leu Ala
1 5 10
<210> 428
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 428
agggccagtc agagtgttgc cagctcctta gcc 33
<210> 429
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 429
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr
1 5
<210> 430
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 430
gatgcatcca acagggccac t 21
<210> 431
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 431
Gln Gln Arg Thr Asn Trp Gln Gly Leu Ser
1 5 10
<210> 432
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 432
cagcagcgta ccaactggca ggggctctct 30
<210> 433
<211> 366
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 433
caggtccagc ttgtgcagtc tggaggtgag gtcaagaagc ctggggcctc agtgaaggtc 60
tcctgcaagg cttctggtta cacctttatc agttatggta tcacctgggt gcgacaggcc 120
cctggacaag ggcctgagtg gatgggatgg atcagccctt acaacggtga cacaaactat 180
gcacagaagc tccagggcag agtcaccatg accacagaca catccacgac cacagcctac 240
atggaactga ggagcctgag atctgacgac acggccatat attattgtgc gagacggtac 300
gatattttga ctggcggggg ctggttcgac tcctggggcc agggaaccct ggtcaccgtc 360
tcctca 366
<210> 434
<211> 122
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 434
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Ser Tyr
20 25 30
Gly Ile Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Pro Glu Trp Met
35 40 45
Gly Trp Ile Ser Pro Tyr Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Thr Asp Thr Ser Thr Thr Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Arg Ser Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Arg Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Gly Gly Trp Phe Asp Ser Trp
100 105 110
Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 435
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 435
Tyr Thr Phe Ile Ser Tyr Gly Ile Thr
1 5
<210> 436
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 436
tacaccttta tcagttatgg tatcacc 27
<210> 437
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 437
Trp Ile Ser Pro Tyr Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Leu Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 438
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 438
tggatcagcc cttacaacgg tgacacaaac tatgcacaga agctccaggg c 51
<210> 439
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 439
Ala Arg Arg Tyr Asp Ile Leu Thr Gly Gly Gly Trp Phe Asp Ser
1 5 10 15
<210> 440
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 440
gcgagacggt acgatatttt gactggcggg ggctggttcg actcc 45
<210> 441
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 441
gatattgtga tgactcagtc tccttcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcaattgcc gggcaagtca gagcattatc agctatttaa attggtatca gcaaaaacca 120
gggaaagccc ctgagctcct aatctatgct gcgtccagtt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagag ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg caacgtacta ctgtcaacag agttacagta cccctcttag tttcggccct 300
gggaccaagg tggagatcaa a 321
<210> 442
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 442
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Asn Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ile Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Glu Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Leu
85 90 95
Ser Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 443
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 443
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ile Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 444
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 444
cgggcaagtc agagcattat cagctattta aat 33
<210> 445
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 445
Ala Ala Ser Ser Leu Gln Ser
1 5
<210> 446
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 446
gctgcgtcca gtttgcaaag t 21
<210> 447
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 447
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Pro Leu Ser
1 5
<210> 448
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 448
caacagagtt acagtacccc tcttagt 27
<210> 449
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 449
caggtccagc ttgtgcagtc tggagcagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaagatc 60
tcctgtaaga cttctggata caaatttacc aattactgga tcggctgggt gcgccagatg 120
cccgggaaag gcctggagtg gatggggatc atctatcctg gtgactctga tgccagatac 180
agcccgtcct tccaaggcca ggtcaccttc tcagccgaca agtccatcag caccgcctac 240
ctgcagtgga gcagcctgaa ggcctcggac accgccatgt attactgtgc gagacaagat 300
aacagtggct gggccgactt ctttcccttt gactactggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctca 369
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 450
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Thr Ser Gly Tyr Lys Phe Thr Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Ala Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Phe Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Asp Asn Ser Gly Trp Ala Asp Phe Phe Pro Phe Asp Tyr
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 451
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 451
Tyr Lys Phe Thr Asn Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 452
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 452
tacaaattta ccaattactg gatcggc 27
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 453
Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Ala Arg Tyr Ser Pro Ser Phe Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 454
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 454
atcatctatc ctggtgactc tgatgccaga tacagcccgt ccttccaagg c 51
<210> 455
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 455
Ala Arg Gln Asp Asn Ser Gly Trp Ala Asp Phe Phe Pro Phe Asp Tyr
1 5 10 15
<210> 456
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 456
gcgagacaag ataacagtgg ctgggccgac ttctttccct ttgactac 48
<210> 457
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
ctctcctgca gggccagtca cagttttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gctgcatcca acagggccac tggcatccca 180
gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240
cctgaagatt ttgcagtgta tttctgtcag cagtatgata gctcaccgtg gacgttcggc 300
caagggacca aggtggagat caaa 324
<210> 458
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 458
Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser His Ser Phe Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Phe Cys Gln Gln Tyr Asp Ser Ser Pro
85 90 95
Trp Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 459
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 459
Arg Ala Ser His Ser Phe Ser Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 460
agggccagtc acagttttag cagcagctac ttagcc 36
<210> 461
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 461
Ala Ala Ser Asn Arg Ala Thr
1 5
<210> 462
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 462
gctgcatcca acagggccac t 21
<210> 463
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 463
Gln Gln Tyr Asp Ser Ser Pro Trp Thr
1 5
<210> 464
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 464
cagcagtatg atagctcacc gtggacg 27
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 465
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaaatc cctgagactc 60
tcctgtgccg cgtcgggatt catcttcagt ggctatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcgttt atatggtttg atggaagttc tacatattat 180
gcagactccg tgaagggccg tttcaccatc tccaaagacg attccaagca gacggtatat 240
ttgcaaatga acaggctgag agccgaggac acggctgtct actactgtgc gagagacccc 300
ttatttttat acaattataa tgacgaacct tttgactact ggggacaggg aaccctggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 466
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 466
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Phe Ile Trp Phe Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Asp Ser Lys Gln Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Arg Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Pro Leu Phe Leu Tyr Asn Tyr Asn Asp Glu Pro Phe Asp
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 467
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 467
Phe Ile Phe Ser Gly Tyr Gly Met His
1 5
<210> 468
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 468
ttcatcttca gtggctatgg catgcac 27
<210> 469
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 469
Phe Ile Trp Phe Asp Gly Ser Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 470
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 470
tttatatggt ttgatggaag ttctacatat tatgcagact ccgtgaaggg c 51
<210> 471
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 471
Ala Arg Asp Pro Leu Phe Leu Tyr Asn Tyr Asn Asp Glu Pro Phe Asp
1 5 10 15
Tyr
<210> 472
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 472
gcgagagacc ccttattttt atacaattat aatgacgaac cttttgacta c 51
<210> 473
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 473
tcctatgagc tgacacagcc accctcagcg tctggttccc ccgggcagag cgtcaccatc 60
tcttgttctg gaagcagctc caatatcggg ggtaattttg tgtactggta ccagcaactg 120
cccggaacgg cccccaaagt cctcatctat aggaataatc agcggccctc aggggtccct 180
gaccgattct ctggctccaa gtctggcact tcagcctccc tggccatcag tgggctccgg 240
tccgacgatg aggctgatta ttattgttca gtatgggatg acagcctaaa tggtcggctg 300
ttcggcggag ggaccaagct gaccgtccta 330
<210> 474
<211> 110
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 474
Ser Tyr Glu Leu Thr Gln Pro Pro Ser Ala Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Gly Asn
20 25 30
Phe Val Tyr Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Val Leu
35 40 45
Ile Tyr Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Ser Gly Leu Arg
65 70 75 80
Ser Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Val Trp Asp Asp Ser Leu
85 90 95
Asn Gly Arg Leu Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 475
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 475
Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Gly Asn Phe Val Tyr
1 5 10
<210> 476
<211> 39
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 476
tctggaagca gctccaatat cgggggtaat tttgtgtac 39
<210> 477
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 477
Arg Asn Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 478
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 478
aggaataatc agcggccctc a 21
<210> 479
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 479
Ser Val Trp Asp Asp Ser Leu Asn Gly Arg Leu
1 5 10
<210> 480
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 480
tcagtatggg atgacagcct aaatggtcgg ctg 33
<210> 481
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 481
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggt gtggtccggc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caagtttgat gattatggca tgagctgggt ccgccaagct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctctgca attatttgga atagtggtag cacaggttat 180
gcagactctg tgaagggccg attcatcatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240
ctgcaaatga atagtctgag agccgaagac acggccttgt attactgtgc gagagtcggg 300
gggataacga agtggtggta ctacggtatg gacctctggg gccaagggac cacggtcacc 360
gtctcctca 369
<210> 482
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 482
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Lys Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ala Ile Ile Trp Asn Ser Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ile Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Val Gly Gly Ile Thr Lys Trp Trp Tyr Tyr Gly Met Asp Leu
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 483
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 483
Phe Lys Phe Asp Asp Tyr Gly Met Ser
1 5
<210> 484
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 484
ttcaagtttg atgattatgg catgagc 27
<210> 485
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 485
Ala Ile Ile Trp Asn Ser Gly Ser Thr Gly Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 486
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 486
gcaattattt ggaatagtgg tagcacaggt tatgcagact ctgtgaaggg c 51
<210> 487
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 487
Ala Arg Val Gly Gly Ile Thr Lys Trp Trp Tyr Tyr Gly Met Asp Leu
1 5 10 15
<210> 488
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 488
gcgagagtcg gggggataac gaagtggtgg tactacggta tggacctc 48
<210> 489
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 489
gaaacgacac tcacgcagtc tccatccttc ctgtctgcat ctgtcggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggccagtca gggcttgagc aattatttag cctggtatca gcaaaaacca 120
gggagagccc ccaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagag gcagtggatc tgggacagag ttcactctca caatcagcag cctgcagcct 240
gaagatcttg caacttatta ctgtcaacac cttaatagtt accctctcac tttcggcgga 300
gggaccaagg tggagatcaa a 321
<210> 490
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 490
Glu Thr Thr Leu Thr Gln Ser Pro Ser Phe Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Leu Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Arg Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Arg Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Leu Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln His Leu Asn Ser Tyr Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 491
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 491
Arg Ala Ser Gln Gly Leu Ser Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 492
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 492
cgggccagtc agggcttgag caattattta gcc 33
<210> 493
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 493
Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser
1 5
<210> 494
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 494
gctgcatcca ctttgcaaag t 21
<210> 495
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 495
Gln His Leu Asn Ser Tyr Pro Leu Thr
1 5
<210> 496
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 496
caacacctta atagttaccc tctcact 27
<210> 497
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 497
gaggtgcagc tggtggagtc gggccccgga ctggtgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
atctgcagag tctttggtgg gtccgtcagg aggggggact acaactggaa ttggatccgg 120
cagcccccag ggaagggact ggagtggatt ggctatatcg attatagtgg gaccaccaag 180
tacaatccct ccctcaagag ccgagtgacc atatcagaag acacgtccag gaatcagttc 240
tccctggagc tgaggtctgt gaccgccgcg gacacggcca tgtattactg tgcgagagac 300
gttggaagta ctccctacaa ctattacggt atggacgtct ggggccaagg gaccacggtc 360
accgtctcct ca 372
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 498
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Ile Cys Arg Val Phe Gly Gly Ser Val Arg Arg Gly
20 25 30
Asp Tyr Asn Trp Asn Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu
35 40 45
Trp Ile Gly Tyr Ile Asp Tyr Ser Gly Thr Thr Lys Tyr Asn Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Val Thr Ile Ser Glu Asp Thr Ser Arg Asn Gln Phe
65 70 75 80
Ser Leu Glu Leu Arg Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Met Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Arg Asp Val Gly Ser Thr Pro Tyr Asn Tyr Tyr Gly Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 499
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 499
Gly Ser Val Arg Arg Gly Asp Tyr Asn Trp Asn
1 5 10
<210> 500
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 500
gggtccgtca ggagggggga ctacaactgg aat 33
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 501
Tyr Ile Asp Tyr Ser Gly Thr Thr Lys Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 502
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 502
tatatcgatt atagtgggac caccaagtac aatccctccc tcaagagc 48
<210> 503
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 503
Ala Arg Asp Val Gly Ser Thr Pro Tyr Asn Tyr Tyr Gly Met Asp Val
1 5 10 15
<210> 504
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 504
gcgagagacg ttggaagtac tccctacaac tattacggta tggacgtc 48
<210> 505
<211> 327
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 505
gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtccttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgta gggccagtca gactattaaa aacaactact tagcctggta ccaacagaaa 120
cctggccagg ctcccaggct cctcatgtat ggtgtatcca gcaggccgac tggcatccca 180
gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcagtc tcaccatcga cagactggag 240
cctgaagatt ttgcagtata ttactgtcag cagtttggta ggtcaccgga gctcactttc 300
ggcggaggga ccaaggtgga aatcaaa 327
<210> 506
<211> 109
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 506
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Ile Lys Asn Asn
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Met Tyr Gly Val Ser Ser Arg Pro Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Ser Leu Thr Ile Asp Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Gly Arg Ser Pro
85 90 95
Glu Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 507
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 507
Arg Ala Ser Gln Thr Ile Lys Asn Asn Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 508
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 508
agggccagtc agactattaa aaacaactac ttagcc 36
<210> 509
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 509
Gly Val Ser Ser Arg Pro Thr
1 5
<210> 510
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 510
ggtgtatcca gcaggccgac t 21
<210> 511
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 511
Gln Gln Phe Gly Arg Ser Pro Glu Leu Thr
1 5 10
<210> 512
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 512
cagcagtttg gtaggtcacc ggagctcact 30
<210> 513
<211> 354
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 513
caggtgcagc tacagcagtg gggcgcagga ctgttgaagc cttcggagac cctgtccctc 60
acctgcgctg tctatggtgg gtccttcagt ggttactact ggggctggat ccgccagccc 120
ccagggaagg ggctggagtg gattggggaa gtcaatcata gtggaacctc caattacaac 180
ccgtccctca cgagtcgagt caccatatca gtagacccgt ccaagaaaca gttgtccctg 240
aagctgaact ctgtgaccgc cgcggacacg gctgtctatt actgtgcgag agctccttgg 300
tatactcacg ccatggacgt ctggggccaa gggaccacgg tcaccgtctc ctca 354
<210> 514
<211> 118
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 514
Gln Val Gln Leu Gln Gln Trp Gly Ala Gly Leu Leu Lys Pro Ser Glu
1 5 10 15
Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ala Val Tyr Gly Gly Ser Phe Ser Gly Tyr
20 25 30
Tyr Trp Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Glu Val Asn His Ser Gly Thr Ser Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Thr
50 55 60
Ser Arg Val Thr Ile Ser Val Asp Pro Ser Lys Lys Gln Leu Ser Leu
65 70 75 80
Lys Leu Asn Ser Val Thr Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Ala Pro Trp Tyr Thr His Ala Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr
100 105 110
Thr Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 515
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 515
Gly Ser Phe Ser Gly Tyr Tyr Trp Gly
1 5
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 516
gggtccttca gtggttacta ctggggc 27
<210> 517
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 517
Glu Val Asn His Ser Gly Thr Ser Asn Tyr Asn Pro Ser Leu Thr Ser
1 5 10 15
<210> 518
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 518
gaagtcaatc atagtggaac ctccaattac aacccgtccc tcacgagt 48
<210> 519
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 519
Ala Arg Ala Pro Trp Tyr Thr His Ala Met Asp Val
1 5 10
<210> 520
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 520
gcgagagctc cttggtatac tcacgccatg gacgtc 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 521
cagtctgtcc tgactcagcc tgcctccgtg tctgggtctc ctggacagtc gatcaccatc 60
tcctgcacta gaaccagcag tgacgttggt gcttatagtt atgtctcctg gtaccaacaa 120
cacccaggca aagcccccaa actcatgatt tatgatgtca ataatcggcc ctcaggggtt 180
tctaatcgct tctctggctc caagtctggc aacacggcct ccctgaccat ctctgggctc 240
caggctgagg acgaggctga ttattactgc agctcatata caaacagcaa cactctcggg 300
gtgttcggcg gagggaccaa gctgaccgtc cta 333
<210> 522
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 522
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Arg Thr Ser Ser Asp Val Gly Ala Tyr
20 25 30
Ser Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Asn Ser
85 90 95
Asn Thr Leu Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 523
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
Thr Arg Thr Ser Ser Asp Val Gly Ala Tyr Ser Tyr Val Ser
1 5 10
<210> 524
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 524
actagaacca gcagtgacgt tggtgcttat agttatgtct cc 42
<210> 525
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 525
Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 526
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 526
gatgtcaata atcggccctc a 21
<210> 527
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 527
Ser Ser Tyr Thr Asn Ser Asn Thr Leu Gly Val
1 5 10
<210> 528
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 528
agctcatata caaacagcaa cactctcggg gtg 33
<210> 529
<211> 363
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 529
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggactc gtggtacagc ctggggggtc cctgagactg 60
tcctgtgcag cctctggatt catctttgat gattatacca tgcactgggt ccgtcaagct 120
ccggggaagg gtctggagtg gatctctctt attagttggg atagtcttga cacatactat 180
gcaggctctg tgcagggccg cttcaccatc tccagagaca acagcagaaa ctccctctat 240
ctgcgaatga acagtctgag acctgaggac accgccttgt attactgtgc aaaaacaaag 300
tataggggta cttattacta ctttgactcg tggggccagg gaaccctggt caccgtctcc 360
tca 363
<210> 530
<211> 121
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 530
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Leu Val Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Ile Phe Asp Asp Tyr
20 25 30
Thr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Ser Leu Ile Ser Trp Asp Ser Leu Asp Thr Tyr Tyr Ala Gly Ser Val
50 55 60
Gln Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Arg Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Thr Lys Tyr Arg Gly Thr Tyr Tyr Tyr Phe Asp Ser Trp Gly
100 105 110
Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 531
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 531
Phe Ile Phe Asp Asp Tyr Thr Met His
1 5
<210> 532
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 532
ttcatctttg atgattatac catgcac 27
<210> 533
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 533
Leu Ile Ser Trp Asp Ser Leu Asp Thr Tyr Tyr Ala Gly Ser Val Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 534
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 534
cttattagtt gggatagtct tgacacatac tatgcaggct ctgtgcaggg c 51
<210> 535
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 535
Ala Lys Thr Lys Tyr Arg Gly Thr Tyr Tyr Tyr Phe Asp Ser
1 5 10
<210> 536
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 536
gcaaaaacaa agtatagggg tacttattac tactttgact cg 42
<210> 537
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 537
gacatccggg tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc aggcgagtca ggacattagc aactatttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaagctcct gatctacgat gcatccaatt tggaaacagg ggtcccatca 180
aggttcagtg gacgtggatc tgggacagat tttactttca ccatcagcag cctgcagcct 240
gaagatattg caacatatta ctgtcaacaa tatgataatc tccctccggt cactttcggc 300
cctgggacca aggtggaaat caaa 324
<210> 538
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 538
Asp Ile Arg Val Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Arg Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Phe Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Pro
85 90 95
Val Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 539
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 539
Gln Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 540
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 540
caggcgagtc aggacattag caactattta aat 33
<210> 541
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 541
Asp Ala Ser Asn Leu Glu Thr
1 5
<210> 542
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 542
gatgcatcca atttggaaac a 21
<210> 543
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 543
Gln Gln Tyr Asp Asn Leu Pro Pro Val Thr
1 5 10
<210> 544
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 544
caacaatatg ataatctccc tccggtcact 30
<210> 545
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 545
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ctggtcaagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agttatggca tgcactgggt ccgccaggcg 120
ccagggaagg ggctagagtg ggtctcatcc attactgctg gtagtagtta catggactac 180
gcagactcag tgaagggccg attcaccgtc tccagagaca acggcaagaa ctcactgtac 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtct acttctgtgc gagagaggac 300
tatgatagtc gtgtttatta ccttaagtgg ttcgacccct ggggccaggg aaccctggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 546
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 546
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Thr Ala Gly Ser Ser Tyr Met Asp Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Gly Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
85 90 95
Ala Arg Glu Asp Tyr Asp Ser Arg Val Tyr Tyr Leu Lys Trp Phe Asp
100 105 110
Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 547
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 547
Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly Met His
1 5
<210> 548
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 548
ttcaccttca gtagttatgg catgcac 27
<210> 549
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 549
Ser Ile Thr Ala Gly Ser Ser Tyr Met Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 550
tccattactg ctggtagtag ttacatggac tacgcagact cagtgaaggg c 51
<210> 551
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 551
Ala Arg Glu Asp Tyr Asp Ser Arg Val Tyr Tyr Leu Lys Trp Phe Asp
1 5 10 15
Pro
<210> 552
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 552
gcgagagagg actatgatag tcgtgtttat taccttaagt ggttcgaccc c 51
<210> 553
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 553
cagtctgtct tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag agtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg acaggttatg atgtacactg gtaccagcag 120
cttccaggat cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca gcaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctgggtc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgaggctga ctattattgc cagtcctatg acagcagtcg gagtggttat 300
gtcttcggaa ctgggaccaa gctgaccgtc cta 333
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 554
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Thr Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Ser Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser
85 90 95
Arg Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 555
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 555
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Thr Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 556
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 556
actgggagca gctccaacat cgggacaggt tatgatgtac ac 42
<210> 557
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 557
Gly Asn Ser Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 558
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 558
ggtaacagca atcggccctc a 21
<210> 559
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 559
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Arg Ser Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 560
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 560
cagtcctatg acagcagtcg gagtggttat gtc 33
<210> 561
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 561
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggcgcc ttggtaaagc cgggggggtc ccttagactc 60
tcctgtgtag gcactggact cactttcact actgcctaca tgagctgggc ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggtcgc attaagagca aaagtgatgg tgggacaaca 180
gagtacccta cacccgtcaa aggcagattc accatctcaa gagatgaatc caaaaacacc 240
ctgtatctgc aaatgaacag cctgaaaatc gaggacacag ccgtctatta ttgtaccaca 300
gataggggga taacagctcg tcctatcttc gactcctggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctca 369
<210> 562
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 562
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Ala Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Gly Thr Gly Leu Thr Phe Thr Thr Ala
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ala Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Ile Lys Ser Lys Ser Asp Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Pro Thr
50 55 60
Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Glu Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ile Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Thr Thr Asp Arg Gly Ile Thr Ala Arg Pro Ile Phe Asp Ser
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 563
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 563
Leu Thr Phe Thr Thr Ala Tyr Met Ser
1 5
<210> 564
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 564
ctcactttca ctactgccta catgagc 27
<210> 565
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 565
Arg Ile Lys Ser Lys Ser Asp Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Pro Thr Pro
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 566
<211> 57
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 566
cgcattaaga gcaaaagtga tggtgggaca acagagtacc ctacacccgt caaaggc 57
<210> 567
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 567
Thr Thr Asp Arg Gly Ile Thr Ala Arg Pro Ile Phe Asp Ser
1 5 10
<210> 568
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 568
accacagata gggggataac agctcgtcct atcttcgact cc 42
<210> 569
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 569
cagtctgtct tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc tagggcggag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacattg gtacaggcaa 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatt tatggtaaca ccaaacggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtatgcc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgagg atgacgctga ttattactgc cagtcctatg acggcggcct gagtggttat 300
gtcttcggaa ctggcaccca gctgaccgtc ctc 333
<210> 570
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 570
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Leu Gly Arg
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Tyr Ala Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Asp Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Gly
85 90 95
Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Gln Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 571
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 571
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 572
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 572
actgggagca gctccaacat cggggcaggt tatgatgtac at 42
<210> 573
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 573
Gly Asn Thr Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 574
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 574
ggtaacacca aacggccctc a 21
<210> 575
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 575
Gln Ser Tyr Asp Gly Gly Leu Ser Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 576
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 576
cagtcctatg acggcggcct gagtggttat gtc 33
<210> 577
<211> 381
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 577
caggtccagc ttgtgcagtc tgggggaggc ctggtcaggc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt catgttcagt acctacagca tgaactggct ccgcacggtc 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatcc attagtggta gtagcagtca catatactac 180
gcagactcag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acaccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag acccgaagac acggctttat attactgtgc gagatatttt 300
ggtgactact cagggttggg gaactactac tactacggta tggacgtctg gggccagggg 360
accacggtca ccgtctcctc a 381
<210> 578
<211> 127
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 578
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Arg Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Met Phe Ser Thr Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Leu Arg Thr Val Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Gly Ser Ser Ser His Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Thr Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Phe Gly Asp Tyr Ser Gly Leu Gly Asn Tyr Tyr Tyr Tyr
100 105 110
Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 579
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 579
Phe Met Phe Ser Thr Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 580
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 580
ttcatgttca gtacctacag catgaac 27
<210> 581
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 581
Ser Ile Ser Gly Ser Ser Ser His Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 582
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 582
tccattagtg gtagtagcag tcacatatac tacgcagact cagtgaaggg c 51
<210> 583
<211> 20
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 583
Ala Arg Tyr Phe Gly Asp Tyr Ser Gly Leu Gly Asn Tyr Tyr Tyr Tyr
1 5 10 15
Gly Met Asp Val
20
<210> 584
<211> 60
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 584
gcgagatatt ttggtgacta ctcagggttg gggaactact actactacgg tatggacgtc 60
<210> 585
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 585
gatattgtga tgacgcagtc tccagtctcc ctgcccgtca cccctggaga gccggcctcc 60
atctcctgca ggtctagtca gagcctcctg cattctaatg gaaacaacta tttggattgg 120
tacctgcaga ggccagggca gtctccacag ctcctcatct atttgggttc taatcgggcc 180
tccggggtcc ctgacaggtt cagtggcagt ggatcaggca cagattttac actgagaatc 240
agcagagtgg aggctgagga tgttggggtt tattactgca tgcaagctct acaaactcct 300
cgcttcggcg gagggaccaa ggtggaaatc aaa 333
<210> 586
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 586
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Val Ser Leu Pro Val Thr Pro Gly
1 5 10 15
Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser
20 25 30
Asn Gly Asn Asn Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser
35 40 45
Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser Gly Val Pro
50 55 60
Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Arg Ile
65 70 75 80
Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gln Ala
85 90 95
Leu Gln Thr Pro Arg Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 587
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 587
Arg Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Asn Tyr Leu Asp
1 5 10 15
<210> 588
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 588
aggtctagtc agagcctcct gcattctaat ggaaacaact atttggat 48
<210> 589
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 589
Leu Gly Ser Asn Arg Ala Ser
1 5
<210> 590
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 590
ttgggttcta atcgggcctc c 21
<210> 591
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 591
Met Gln Ala Leu Gln Thr Pro Arg
1 5
<210> 592
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 592
atgcaagctc tacaaactcc tcgc 24
<210> 593
<211> 390
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 593
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggacac ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatagta tgaactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg gatttcatac attagtagta gtagtagtac catgtactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatg tccagagaca atgccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agacgaggac acggctttgt attactgtgc gagagatttc 300
ccccctatta atctagcagc gacaacccga aactactact actatgttat ggacgtctgg 360
ggccaaggga ccacggtcac cgtctcctca 390
<210> 594
<211> 130
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 594
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly His Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Met Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Met Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Asp Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Phe Pro Pro Ile Asn Leu Ala Ala Thr Thr Arg Asn Tyr
100 105 110
Tyr Tyr Tyr Val Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 595
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 595
Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ser Met Asn
1 5
<210> 596
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 596
ttcaccttca gtagctatag tatgaac 27
<210> 597
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 597
Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Met Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 598
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 598
tacattagta gtagtagtag taccatgtac tacgcagact ctgtgaaggg c 51
<210> 599
<211> 23
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 599
Ala Arg Asp Phe Pro Pro Ile Asn Leu Ala Ala Thr Thr Arg Asn Tyr
1 5 10 15
Tyr Tyr Tyr Val Met Asp Val
20
<210> 600
<211> 69
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 600
gcgagagatt tcccccctat taatctagca gcgacaaccc gaaactacta ctactatgtt 60
atggacgtc 69
<210> 601
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 601
gacatccagt tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtaggaga cagagtcacc 60
atcacttgcc gggcaagtca gagcattagc agctatttaa attggtatca gcagaaacca 120
gggaaagccc ctaacctcct aatctatgct acatccaatt tgaaaagtgg ggtcccatca 180
aggttcagtg gcagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag tctgcaacct 240
gaagattttg caacttacta ctgtcaacag agttacagta cctcgtacac ttttggccag 300
gggaccaaag tggatatcaa a 321
<210> 602
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 602
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Ala Thr Ser Asn Leu Lys Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Ser Tyr
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Asp Ile Lys
100 105
<210> 603
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 603
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Ser Ser Tyr Leu Asn
1 5 10
<210> 604
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
cgggcaagtc agagcattag cagctattta aat 33
<210> 605
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 605
Ala Thr Ser Asn Leu Lys Ser
1 5
<210> 606
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 606
gctacatcca atttgaaaag t 21
<210> 607
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 607
Gln Gln Ser Tyr Ser Thr Ser Tyr Thr
1 5
<210> 608
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 608
caacagagtt acagtacctc gtacact 27
<210> 609
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
gaggtgcagc tggtggagtc cggccctact ctggtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60
acctgcacct tctctgggtt ctcactcacc actattggag tgggtgtggg ctggatccgt 120
cagcccccag gaaaggccct ggagtttctt ggaatcgttt attgggatga tgataagcgg 180
tacagcccat ctctgaagag caggctcacc atcaccaagg acacctccaa aaaccaggtg 240
gtccttacga tgaccacgtt ggcccctgag gacacaggca catattactg tacatacgcc 300
cgctatagca gtgccttgtt cgggggttac tactttcact cgtggggcca gggaaccctg 360
gtcaccgtct cctca 375
<210> 610
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 610
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Pro Thr Leu Val Lys Pro Thr Gln
1 5 10 15
Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Thr Thr Ile
20 25 30
Gly Val Gly Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Leu Glu
35 40 45
Phe Leu Gly Ile Val Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Ser Pro Ser
50 55 60
Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Thr Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val
65 70 75 80
Val Leu Thr Met Thr Thr Leu Ala Pro Glu Asp Thr Gly Thr Tyr Tyr
85 90 95
Cys Thr Tyr Ala Arg Tyr Ser Ser Ala Leu Phe Gly Gly Tyr Tyr Phe
100 105 110
His Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 611
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 611
Phe Ser Leu Thr Thr Ile Gly Val Gly Val Gly
1 5 10
<210> 612
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 612
ttctcactca ccactattgg agtgggtgtg ggc 33
<210> 613
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 613
Ile Val Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Ser Pro Ser Leu Lys Ser
1 5 10 15
<210> 614
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 614
atcgtttatt gggatgatga taagcggtac agcccatctc tgaagagc 48
<210> 615
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 615
Thr Tyr Ala Arg Tyr Ser Ser Ala Leu Phe Gly Gly Tyr Tyr Phe His
1 5 10 15
Ser
<210> 616
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 616
acatacgccc gctatagcag tgccttgttc gggggttact actttcactc g 51
<210> 617
<211> 327
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 617
cagtctgtcc tgacgcagcc gccctcggtg tcagtggccc caggacagac ggccaagatt 60
acctgtgggg gaaacgacat tggaagtaga agtgtgcact ggtaccagca gaagccaggc 120
caggcccctg tgctggtcgt ctatgataat agcgaccggc cctcagggat ccctgaacga 180
ttctctggct ccaattctgg agacacggcc accctgacca tcagcagggt cgaagccggg 240
gatgaggccg tctattactg tcaggtgtgg gagagtagtg gtgatcatcc gaggatattc 300
ggcggaggga ccaagctcac cgtccta 327
<210> 618
<211> 109
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 618
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Thr Ala Lys Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asp Ile Gly Ser Arg Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
35 40 45
Asp Asn Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asp Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Glu Ser Ser Gly Asp His
85 90 95
Pro Arg Ile Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 619
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 619
Gly Gly Asn Asp Ile Gly Ser Arg Ser Val His
1 5 10
<210> 620
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 620
gggggaaacg acattggaag tagaagtgtg cac 33
<210> 621
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 621
Asp Asn Ser Asp Arg Pro Ser
1 5
<210> 622
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 622
gataatagcg accggccctc a 21
<210> 623
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 623
Gln Val Trp Glu Ser Ser Gly Asp His Pro Arg Ile
1 5 10
<210> 624
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 624
caggtgtggg agagtagtgg tgatcatccg aggata 36
<210> 625
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 625
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggcgcc ctggtaaagc cgggggggtc ccttagactc 60
tcctgtgtag gcactggact cactttcact actgcctaca tgagctgggc ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggttggtcgt attctgagca aaagtgatgg tgggacaaca 180
gactacccta cacccgtcaa aggcagattc accatctcaa gagatgaatc taaaaacacc 240
ctgtatctgc aaatgaacag cctgaaaatc gaggacacag ccgtctatta ttgtaccaca 300
gataggggga taacagctcg tcctatcttc gactcctggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctca 369
<210> 626
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 626
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Ala Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Gly Thr Gly Leu Thr Phe Thr Thr Ala
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ala Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Arg Ile Leu Ser Lys Ser Asp Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Pro Thr
50 55 60
Pro Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Glu Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ile Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Thr Thr Asp Arg Gly Ile Thr Ala Arg Pro Ile Phe Asp Ser
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 627
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 627
Leu Thr Phe Thr Thr Ala Tyr Met Ser
1 5
<210> 628
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 628
ctcactttca ctactgccta catgagc 27
<210> 629
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 629
Arg Ile Leu Ser Lys Ser Asp Gly Gly Thr Thr Asp Tyr Pro Thr Pro
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 630
<211> 57
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 630
cgtattctga gcaaaagtga tggtgggaca acagactacc ctacacccgt caaaggc 57
<210> 631
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 631
Thr Thr Asp Arg Gly Ile Thr Ala Arg Pro Ile Phe Asp Ser
1 5 10
<210> 632
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 632
accacagata gggggataac agctcgtcct atcttcgact cc 42
<210> 633
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 633
cagtctgtgc tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc tagggcggag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacattg gtacaggcaa 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatt tatggtaaca ccaaacggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtatgcc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgacg atgacgctga ttattactgc cagtcctatg acggcggcct gagtggttat 300
gtcttcggaa ctgggaccaa ggtcaccgtc cta 333
<210> 634
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 634
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Leu Gly Arg
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Arg Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Thr Lys Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Tyr Ala Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Asp Asp Asp Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Gly Gly
85 90 95
Leu Ser Gly Tyr Val Phe Gly Thr Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 635
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 635
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 636
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 636
actgggagca gctccaacat cggggcaggt tatgatgtac at 42
<210> 637
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 637
Gly Asn Thr Lys Arg Pro Ser
1 5
<210> 638
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 638
ggtaacacca aacggccctc a 21
<210> 639
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 639
Gln Ser Tyr Asp Gly Gly Leu Ser Gly Tyr Val
1 5 10
<210> 640
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 640
cagtcctatg acggcggcct gagtggttat gtc 33
<210> 641
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 641
caggtccagc tggtgcagtc tgggggaggc ctggtcaagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag gctctggatt caccttcagt agctataccc tgaactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcatcc attagtagta gtagtactta catatactac 180
gcagactcag tgaagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctcactgcat 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggctgtgt attattgtgc gagagctgac 300
tatgatagaa gtgtttatca cctcaattgg ttcgacccct ggggccaggg aaccctggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 642
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 642
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Thr Leu Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Ser Ile Ser Ser Ser Ser Thr Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu His
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ala Asp Tyr Asp Arg Ser Val Tyr His Leu Asn Trp Phe Asp
100 105 110
Pro Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 643
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 643
Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Thr Leu Asn
1 5
<210> 644
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 644
ttcaccttca gtagctatac cctgaac 27
<210> 645
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 645
Ser Ile Ser Ser Ser Ser Thr Tyr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
Gly
<210> 646
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 646
tccattagta gtagtagtac ttacatatac tacgcagact cagtgaaggg c 51
<210> 647
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 647
Ala Arg Ala Asp Tyr Asp Arg Ser Val Tyr His Leu Asn Trp Phe Asp
1 5 10 15
Pro
<210> 648
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 648
gcgagagctg actatgatag aagtgtttat cacctcaatt ggttcgaccc c 51
<210> 649
<211> 336
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 649
cagtctgtgt tgacgcagcc gccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcagctc caacatcggg gcaggttatg atgtacactg gtaccagcaa 120
cttccaggag cagcccccaa actcctcatc tatggtaaca ccaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tttctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggctgacg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acagcagcct gagtggcact 300
tgggtgttcg gcggagggac caagctcacc gtccta 336
<210> 650
<211> 112
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 650
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Ala Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Gly Asn Thr Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Asp Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser Ser
85 90 95
Leu Ser Gly Thr Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 651
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 651
Thr Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 652
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 652
actgggagca gctccaacat cggggcaggt tatgatgtac ac 42
<210> 653
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 653
Gly Asn Thr Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 654
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 654
ggtaacacca atcggccctc a 21
<210> 655
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 655
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Leu Ser Gly Thr Trp Val
1 5 10
<210> 656
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 656
cagtcctatg acagcagcct gagtggcact tgggtg 36
<210> 657
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 657
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc cagggcggtc cctgagactc 60
tcttgttcag gttctggatt cacctttggg gattatgctc tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtaggtttc attagaagca aagcctatgg tgggacaaca 180
gaatacgccg cgtctgtgaa aggcagattc accatctcaa gagatgattc caaaagcatc 240
gcctatctgc aaatgaacag cctgaaaacc gaggacacag ccgtgtatta ctgtactatg 300
gctgtagtgg tgccaggtgc tacagatgct tttgatatct ggggccaagg gacaatggtc 360
accgtctctt ca 372
<210> 658
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 658
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Gly Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr
20 25 30
Ala Leu Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Gly Phe Ile Arg Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Ala Ala
50 55 60
Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ile
65 70 75 80
Ala Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Val Tyr
85 90 95
Tyr Cys Thr Met Ala Val Val Val Pro Gly Ala Thr Asp Ala Phe Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 659
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 659
Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Ala Leu Ser
1 5
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 660
ttcacctttg gggattatgc tctgagc 27
<210> 661
<211> 19
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 661
Phe Ile Arg Ser Lys Ala Tyr Gly Gly Thr Thr Glu Tyr Ala Ala Ser
1 5 10 15
Val Lys Gly
<210> 662
<211> 57
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 662
ttcattagaa gcaaagccta tggtgggaca acagaatacg ccgcgtctgt gaaaggc 57
<210> 663
<211> 15
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 663
Thr Met Ala Val Val Val Pro Gly Ala Thr Asp Ala Phe Asp Ile
1 5 10 15
<210> 664
<211> 45
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
actatggctg tagtggtgcc aggtgctaca gatgcttttg atatc 45
<210> 665
<211> 333
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 665
aattttatgc tgactcagcc ccactctgtg tcggagtctc cggggaagac ggtaaccatc 60
tcctgtaccc gcagcagtgg cagcattgcc agcgactatg tgcagtggtt ccagcagcgc 120
ccgggcagtt cccccgccac tgtgatctat caggataacc aaagaccctc tggggtccct 180
gatcggttct ctggctccat cgacacctcc tccaactctg cctccctcac catctctgga 240
ctgaagactg aggacgaggc tgactactac tgtcactctt atgatagtag caatccttgg 300
gtgttcggcg gagggaccaa gctcaccgtc cta 333
<210> 666
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 666
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Thr Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Ser Asp
20 25 30
Tyr Val Gln Trp Phe Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ser Pro Ala Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Gln Asp Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ile Asp Thr Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys His Ser Tyr Asp Ser
85 90 95
Ser Asn Pro Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 667
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 667
Thr Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Ser Asp Tyr Val Gln
1 5 10
<210> 668
<211> 39
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 668
acccgcagca gtggcagcat tgccagcgac tatgtgcag 39
<210> 669
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 669
Gln Asp Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 670
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 670
caggataacc aaagaccctc t 21
<210> 671
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 671
His Ser Tyr Asp Ser Ser Asn Pro Trp Val
1 5 10
<210> 672
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 672
cactcttatg atagtagcaa tccttgggtg 30
<210> 673
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 673
gaggtgcagc tggtggagtc cggaggaggc ttgatccagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag tctctgggtt cagcgtcagc agcaactata taagttgggt ccgccagcct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcagtt agttatagta gtggtgtcac agactacgca 180
gactccgtga agggccgatt caccacctcc agagacaact ccaagaacac gctgtatctt 240
caaatgaaca gcctgagagg cgaagacacg gccgtctatt actgtgcgag agagttggtg 300
ccaaatttct atgaaagtca tggttatttt tccgtgtggg gccagggaac cctggtcacc 360
gtctcctca 369
<210> 674
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 674
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ile Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Phe Ser Val Ser Ser Asn
20 25 30
Tyr Ile Ser Trp Val Arg Gln Pro Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Val Ser Tyr Ser Ser Gly Val Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Thr Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Gln Met Asn Ser Leu Arg Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Arg Glu Leu Val Pro Asn Phe Tyr Glu Ser His Gly Tyr Phe Ser Val
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 675
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 675
Phe Ser Val Ser Ser Asn Tyr Ile Ser
1 5
<210> 676
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 676
ttcagcgtca gcagcaacta tataagt 27
<210> 677
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 677
Val Ser Tyr Ser Ser Gly Val Thr Asp Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly
1 5 10 15
<210> 678
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 678
gttagttata gtagtggtgt cacagactac gcagactccg tgaagggc 48
<210> 679
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 679
Ala Arg Glu Leu Val Pro Asn Phe Tyr Glu Ser His Gly Tyr Phe Ser
1 5 10 15
Val
<210> 680
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 680
gcgagagagt tggtgccaaa tttctatgaa agtcatggtt atttttccgt g 51
<210> 681
<211> 321
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 681
gatattgtga tgactcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagagttgac agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtggatcca gcagggccac tggcatccca 180
gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag caggctggag 240
cctgaagatt ttgcgttgta ttactgtcag cagtatggtt tctcacagac gttcggccaa 300
gggaccaagg tggagatcaa a 321
<210> 682
<211> 107
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 682
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Val Asp Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Gly Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Leu Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Phe Ser Gln
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 683
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 683
Arg Ala Ser Gln Arg Val Asp Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 684
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 684
agggccagtc agagagttga cagcagctac ttagcc 36
<210> 685
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 685
Gly Gly Ser Ser Arg Ala Thr
1 5
<210> 686
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 686
ggtggatcca gcagggccac t 21
<210> 687
<211> 8
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 687
Gln Gln Tyr Gly Phe Ser Gln Thr
1 5
<210> 688
<211> 24
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 688
cagcagtatg gtttctcaca gacg 24
<210> 689
<211> 378
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 689
gaggtgcagc tgttggagac tgggggaggc ttggttaagc cgggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgaag ccactggatt cactttcagc gactttgcca tgagctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtctcactg attaaaagta gtgattatcc atactatgca 180
gactccgtga ggggccgctt caccatctcc agagacaatt ccaagaacac cctgtatctg 240
cgaatggaca acctgagagc cgacgacacg gccgtgtatt actgtgccaa ggacgccgat 300
ttttggagtg gtgaggccta caatggaggg tacaactttg actcctgggg ccagggaacc 360
ctggtcaccg tctcctca 378
<210> 690
<211> 126
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 690
Glu Val Gln Leu Leu Glu Thr Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Glu Ala Thr Gly Phe Thr Phe Ser Asp Phe
20 25 30
Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Leu Ile Lys Ser Ser Asp Tyr Pro Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Arg
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu
65 70 75 80
Arg Met Asp Asn Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Ala Asp Phe Trp Ser Gly Glu Ala Tyr Asn Gly Gly Tyr Asn
100 105 110
Phe Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 691
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 691
Phe Thr Phe Ser Asp Phe Ala Met Ser
1 5
<210> 692
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 692
ttcactttca gcgactttgc catgagc 27
<210> 693
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 693
Leu Ile Lys Ser Ser Asp Tyr Pro Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly
1 5 10 15
<210> 694
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 694
ctgattaaaa gtagtgatta tccatactat gcagactccg tgaggggc 48
<210> 695
<211> 20
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 695
Ala Lys Asp Ala Asp Phe Trp Ser Gly Glu Ala Tyr Asn Gly Gly Tyr
1 5 10 15
Asn Phe Asp Ser
20
<210> 696
<211> 60
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 696
gccaaggacg ccgatttttg gagtggtgag gcctacaatg gagggtacaa ctttgactcc 60
<210> 697
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 697
gaaattgtat tgacacagtc tccagccacc ctgtctgtct ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtattggc accaacttgg cctggtacca gcaaaaacct 120
ggccaggctc cccggctcct catctttggt gcctcaacca gggccacggg tatcccagcc 180
aggttcactg gcagtgggtc tgggacagag ttcactctca ccatcggcag cctccagtct 240
gaagattttg cagtttatta ctgtcagcag tacaatcagt ggcctccgat cactttcggc 300
ggagggacca aggtggaaat caaa 324
<210> 698
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 698
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Phe Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala Arg Phe Thr Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile Gly Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Asn Gln Trp Pro Pro
85 90 95
Ile Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 699
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 699
Arg Ala Ser Gln Ser Ile Gly Thr Asn Leu Ala
1 5 10
<210> 700
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 700
agggccagtc agagtattgg caccaacttg gcc 33
<210> 701
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 701
Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr
1 5
<210> 702
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 702
ggtgcctcaa ccagggccac g 21
<210> 703
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 703
Gln Gln Tyr Asn Gln Trp Pro Pro Ile Thr
1 5 10
<210> 704
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 704
cagcagtaca atcagtggcc tccgatcact 30
<210> 705
<211> 372
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 705
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc gtggtccagc ctgggaagtc cctgagactc 60
tcctgtgtag cctctggatt caccttcggt gactatggca tgcactgggt ccgccaggct 120
ccaggcaagg ggctggagtg ggtggcagtt atatcagatg gtggaagcac taaatactat 180
gcagactccg tgaagggccg attcaccatc gccagagaca attccaagaa cacgctgaat 240
ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggctgtgt attactgtgc gaaagatttg 300
gcttggattt ttggactggg tgcttcatat atggacgtct ggggccaagg gaccctggtc 360
accgtctcct ca 372
<210> 706
<211> 124
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 706
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gln Pro Gly Lys
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Asp Tyr
20 25 30
Gly Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Val Ile Ser Asp Gly Gly Ser Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ala Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Asn
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Asp Leu Ala Trp Ile Phe Gly Leu Gly Ala Ser Tyr Met Asp
100 105 110
Val Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 707
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 707
Phe Thr Phe Gly Asp Tyr Gly Met His
1 5
<210> 708
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 708
ttcaccttcg gtgactatgg catgcac 27
<210> 709
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 709
Val Ile Ser Asp Gly Gly Ser Thr Lys Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 710
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 710
gttatatcag atggtggaag cactaaatac tatgcagact ccgtgaaggg c 51
<210> 711
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 711
Ala Lys Asp Leu Ala Trp Ile Phe Gly Leu Gly Ala Ser Tyr Met Asp
1 5 10 15
Val
<210> 712
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 712
gcgaaagatt tggcttggat ttttggactg ggtgcttcat atatggacgt c 51
<210> 713
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 713
gacatccagt tgacccagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gactgttagt agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat gatgcatcca gcagggccac tggcatccca 180
gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240
cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtatggta gctcaccttt cgggctcact 300
ttcggcggag ggaccaaggt ggaaatcaaa 330
<210> 714
<211> 110
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 714
Asp Ile Gln Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Thr Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro
85 90 95
Phe Gly Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105 110
<210> 715
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 715
Arg Ala Ser Gln Thr Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10
<210> 716
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 716
agggccagtc agactgttag tagcagctac ttagcc 36
<210> 717
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 717
Asp Ala Ser Ser Arg Ala Thr
1 5
<210> 718
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 718
gatgcatcca gcagggccac t 21
<210> 719
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 719
Gln Gln Tyr Gly Ser Ser Pro Phe Gly Leu Thr
1 5 10
<210> 720
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 720
cagcagtatg gtagctcacc tttcgggctc act 33
<210> 721
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 721
caggtccagc tggtgcagtc tgggggaggc ttggtacagc cgggggggtc cctgcgactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttggg agacatgcca tgacgtgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtcgcaggc attactgcta ctggggaccc cacatactac 180
ccagactccg tgaagggccg gttcgccgtc tccagagaca actcccggaa cacgctttat 240
ctgcaaatgg acagtctgag agtcgaggac acggccctat attactgtgc gagaagttgg 300
gatgactacg gtgacctgga ctggtacttc gctctctggg gccgtggcac aatggtcacc 360
gtctcttca 369
<210> 722
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 722
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Gly Arg His
20 25 30
Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Gly Ile Thr Ala Thr Gly Asp Pro Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Val Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Val Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Ser Trp Asp Asp Tyr Gly Asp Leu Asp Trp Tyr Phe Ala Leu
100 105 110
Trp Gly Arg Gly Thr Met Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 723
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 723
Phe Thr Phe Gly Arg His Ala Met Thr
1 5
<210> 724
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 724
ttcacctttg ggagacatgc catgacg 27
<210> 725
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 725
Gly Ile Thr Ala Thr Gly Asp Pro Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 726
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 726
ggcattactg ctactgggga ccccacatac tacccagact ccgtgaaggg c 51
<210> 727
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 727
Ala Arg Ser Trp Asp Asp Tyr Gly Asp Leu Asp Trp Tyr Phe Ala Leu
1 5 10 15
<210> 728
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 728
gcgagaagtt gggatgacta cggtgacctg gactggtact tcgctctc 48
<210> 729
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 729
gaaattgtga tgacacagtc tccagccatc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagcttgg cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ctaggctcct catctacggt gcatccacca gggccactgg tatcccaccc 180
cggttcagtg gcagtgggtc tgggacacaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagatgttg cagtatatta ctgtcagcag tatagtgact ggcctccgct cactttcggc 300
ggggggacca aggtggaaat caaa 324
<210> 730
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 730
Glu Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Trp Pro Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 731
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 731
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Leu Ala
1 5 10
<210> 732
<211> 33
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 732
agggccagtc agagtgttag cagcagcttg gcc 33
<210> 733
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 733
Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr
1 5
<210> 734
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 734
ggtgcatcca ccagggccac t 21
<210> 735
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 735
Gln Gln Tyr Ser Asp Trp Pro Pro Leu Thr
1 5 10
<210> 736
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 736
cagcagtata gtgactggcc tccgctcact 30
<210> 737
<211> 375
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 737
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtcaagc ctggagggtc cctgagactc 60
tcctgtggag cctctggatt caagttcagt gactactaca tgagttggat ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctagagtg ggtttcacac attagtagta gtaatagtta cataaactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagggaca acgccaggaa ctcactgtct 240
ctgcaaatga acagcctgag agccgaggac acggccgtgt attactgtgc gagattcccc 300
ctttactgta gtcgttcctc ctgctcccat tacgttgact actggggcca gggaaccctg 360
gtcaccgtct cctca 375
<210> 738
<211> 125
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 738
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Gly Ala Ser Gly Phe Lys Phe Ser Asp Tyr
20 25 30
Tyr Met Ser Trp Ile Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser His Ile Ser Ser Ser Asn Ser Tyr Ile Asn Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Arg Asn Ser Leu Ser
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Phe Pro Leu Tyr Cys Ser Arg Ser Ser Cys Ser His Tyr Val
100 105 110
Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120 125
<210> 739
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 739
Phe Lys Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Ser
1 5
<210> 740
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 740
ttcaagttca gtgactacta catgagt 27
<210> 741
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 741
His Ile Ser Ser Ser Asn Ser Tyr Ile Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
<210> 742
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 742
cacattagta gtagtaatag ttacataaac tacgcagact ctgtgaaggg c 51
<210> 743
<211> 18
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 743
Ala Arg Phe Pro Leu Tyr Cys Ser Arg Ser Ser Cys Ser His Tyr Val
1 5 10 15
Asp Tyr
<210> 744
<211> 54
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 744
gcgagattcc ccctttactg tagtcgttcc tcctgctccc attacgttga ctac 54
<210> 745
<211> 330
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 745
cagtctgtcc tgactcagcc tccctcagtg tctggggccc cagggcagag ggtcaccatc 60
tcctgcactg ggagcggctc caacatcggg gcaggttatg atgtacactg gtaccagcag 120
cttccaggaa cagcccccaa actcctcatc tatgataaca acaatcggcc ctcaggggtc 180
cctgaccgat tctctggctc caagtctggc acctcagcct ccctggccat cactgggctc 240
caggttgagg atgaggctga ttattactgc cagtcctatg acaggagcct gagtgtggta 300
ttcggcggag ggaccaaggt caccgtccta 330
<210> 746
<211> 110
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 746
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Gly Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Arg Val Thr Ile Ser Cys Thr Gly Ser Gly Ser Asn Ile Gly Ala Gly
20 25 30
Tyr Asp Val His Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Leu Ile Tyr Asp Asn Asn Asn Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Ser Leu Ala Ile Thr Gly Leu
65 70 75 80
Gln Val Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Arg Ser
85 90 95
Leu Ser Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Thr Val Leu
100 105 110
<210> 747
<211> 14
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 747
Thr Gly Ser Gly Ser Asn Ile Gly Ala Gly Tyr Asp Val His
1 5 10
<210> 748
<211> 42
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 748
actgggagcg gctccaacat cggggcaggt tatgatgtac ac 42
<210> 749
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 749
Asp Asn Asn Asn Arg Pro Ser
1 5
<210> 750
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 750
gataacaaca atcggccctc a 21
<210> 751
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 751
Gln Ser Tyr Asp Arg Ser Leu Ser Val Val
1 5 10
<210> 752
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 752
cagtcctatg acaggagcct gagtgtggta 30
<210> 753
<211> 357
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 753
caggtgcagc tggtgcaatc tggaccagag gtgaaaaagc ccggggagtc tctgaagatc 60
tcctgtaagg gttctggata tacgtttact acctactgga tcggctgggt gcgccagagg 120
cccgggaagg gcctggagtg gatgggaatc atccatcccg gtgactctga taccagatac 180
agtccgtcct tacaaggcca ggtcaccatc tcagtcgaca agtccatcaa taccgcctac 240
ctgcagtgga ggagtttgaa ggcctcggac accggcatgt attattgtgc gagattcgaa 300
tacggtgact tcgggaatga cttctggggc cagggaaccc tggtcactgt ctcctca 357
<210> 754
<211> 119
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 754
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Arg Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile His Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Leu
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Val Asp Lys Ser Ile Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Arg Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Gly Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Phe Glu Tyr Gly Asp Phe Gly Asn Asp Phe Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 755
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 755
Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Trp Ile Gly
1 5
<210> 756
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 756
tatacgttta ctacctactg gatcggc 27
<210> 757
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 757
Ile Ile His Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Leu Gln
1 5 10 15
Gly
<210> 758
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 758
atcatccatc ccggtgactc tgataccaga tacagtccgt ccttacaagg c 51
<210> 759
<211> 12
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 759
Ala Arg Phe Glu Tyr Gly Asp Phe Gly Asn Asp Phe
1 5 10
<210> 760
<211> 36
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 760
gcgagattcg aatacggtga cttcgggaat gacttc 36
<210> 761
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 761
aattttatgc tgactcagcc ccactctgtg tcggagtctc cggggaagac ggtaaccatc 60
tcctgctccc gcagcagtgg cagcattgcc aacaactatg tgcagtggta ccagcagcgc 120
ccgggcagtt cccccaccac tgtgatctat gaggataacc aaagaccctc tggggtccct 180
gatcggttct ctggctccat cgacagctcc tccaactctg cctccctcac catctctgga 240
ctgaagactg aggacgaggc agactactac tgtcagtctt atgatagtag caatcatagg 300
gtgttcggcg gagggaccaa gctcaccgtc cta 333
<210> 762
<211> 111
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 762
Asn Phe Met Leu Thr Gln Pro His Ser Val Ser Glu Ser Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Val Thr Ile Ser Cys Ser Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Asn Asn
20 25 30
Tyr Val Gln Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Ser Ser Pro Thr Thr Val
35 40 45
Ile Tyr Glu Asp Asn Gln Arg Pro Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Ile Asp Ser Ser Ser Asn Ser Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly
65 70 75 80
Leu Lys Thr Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Ser Tyr Asp Ser
85 90 95
Ser Asn His Arg Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 763
<211> 13
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
Ser Arg Ser Ser Gly Ser Ile Ala Asn Asn Tyr Val Gln
1 5 10
<210> 764
<211> 39
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L1
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 764
tcccgcagca gtggcagcat tgccaacaac tatgtgcag 39
<210> 765
<211> 7
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 765
Glu Asp Asn Gln Arg Pro Ser
1 5
<210> 766
<211> 21
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L2
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 766
gaggataacc aaagaccctc t 21
<210> 767
<211> 10
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 767
Gln Ser Tyr Asp Ser Ser Asn His Arg Val
1 5 10
<210> 768
<211> 30
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR L3
синтетической вариабельной области легкой цепи»
<400> 768
cagtcttatg atagtagcaa tcatagggtg 30
<210> 769
<211> 369
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 769
gaggtgcagc tgttggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgcgactc 60
tcctgtgcag cctctggatt cacctttagg agatatgcca tgacctgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtcgcagct attactgcta ctggtgatac cacatactac 180
ccagactccg taaagggccg gttcgccgtc tccagagaca attcccggaa cacgctttat 240
ctgcaaatgg acagtctgag agccgaggac acggccctat attactgtgc gaaaagttgg 300
gatgactacg gtgacctgga ctggtacttc gctctctggg gccgtggcac cctggtcacc 360
gtctcctca 369
<210> 770
<211> 123
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область тяжелой цепи»
<400> 770
Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Arg Arg Tyr
20 25 30
Ala Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ala Ala Ile Thr Ala Thr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Ala Val Ser Arg Asp Asn Ser Arg Asn Thr Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asp Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Leu Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Lys Ser Trp Asp Asp Tyr Gly Asp Leu Asp Trp Tyr Phe Ala Leu
100 105 110
Trp Gly Arg Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser
115 120
<210> 771
<211> 9
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 771
Phe Thr Phe Arg Arg Tyr Ala Met Thr
1 5
<210> 772
<211> 27
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H1
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 772
ttcaccttta ggagatatgc catgacc 27
<210> 773
<211> 17
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 773
Ala Ile Thr Ala Thr Gly Asp Thr Thr Tyr Tyr Pro Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly
<210> 774
<211> 51
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H2
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 774
gctattactg ctactggtga taccacatac tacccagact ccgtaaaggg c 51
<210> 775
<211> 16
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 775
Ala Lys Ser Trp Asp Asp Tyr Gly Asp Leu Asp Trp Tyr Phe Ala Leu
1 5 10 15
<210> 776
<211> 48
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: CDR H3
синтетической вариабельной области тяжелой цепи»
<400> 776
gcgaaaagtt gggatgacta cggtgacctg gactggtact tcgctctc 48
<210> 777
<211> 324
<212> ДНК
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 777
gatattgtga tgacccagtc tccagccatc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagcttgg cctggtacca gcagaaacct 120
ggccaggctc ccaggctcct catctacggt gcatccacca gggccactgg tatcccaccc 180
cggttcagtg gcagtgggtc tgggacacaa ttcactctca ccatcagcag cctgcagtct 240
gaagattttg cagtgtatta ctgtcagcag tatagtgact ggcctccgct cactttcggc 300
ggggggacca aggtggagat caaa 324
<210> 778
<211> 108
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>
<221> Источник
<223> /примечание=«Описание искусственной последовательности: синтетическая
вариабельная область легкой цепи»
<400> 778
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Val Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu Ile
35 40 45
Tyr Gly Ala Ser Thr Arg Ala Thr Gly Ile Pro Pro Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Ser
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Asp Trp Pro Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105
<210> 779
<211> 11
<212> PRT
<213> Искусственная последовательность
<220>