Способ получения инсулина-сырца

 

351547

ОП ИСАНИ Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетель«тва чв

Заявлено 13.Х.1969 (№ 1369958/31-16) с присоединением заяьки ¹

Приоритет

Опуоликовано 21.1Х.1972. Бюллетень ¹ 28

М. Кл. А 61k 17/02

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров

СССР

УДК 615.45:615.361.37 (088.8) Дата опубликования описания 1!.Х.1972

Авторы изобретения

Ф. Ю. Рышка и P. И. Каратеева

Институт химии природных соединений АН СССР

3аявител ь

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНСУЛИНА-СЫРЦА

Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринной промышленности.

Известен способ получения инсулина-сырца из инсулинсодержащего сырья, согласно которому пропускают через колонку обезбелоченный сернокислый спиртовой экстракт, затем спирт, раствор аммиака с последующим подкислением элюата, фильтрованием, подщелачиванием до рН 4,5 для отделения примесей, добавлением 10 -ного ацетата цинка и установлением рН 6,0 для осахкденггя цинк-инсулина.

Предлагаемый способ отличается тем, что к спиртовому экстракту после отделения осадка добавляют уксуснокислый цинк с >последующей обработкой известным образом. Такой способ помогает повысить выход целевого продукта и упростить технологию производства. Целесообразно производить инсулин от каждого вида животного отдельно.

Кроме того, для удаления балластных веществ к спиртовому экстракту можно добавлять 1 — 2 г уксуснокислого цинка на 1 кг железы при рН от 3,8 до 7,6 и к надосадочной жидкости после отделения осадка — 4,8 г на

1 кг железы при рН от 4,2 до 6,2.

Пример 1. 100 г замороженной свино "I поджелудочной железы измельчают на мя"арубке, заливают 400 мл 70%-ного спирта, содержащего 2,4 лт» концентрипованггой серной кислоты, и перемешивают в течение двух— трех часов; рН экстракционной массы 1,7—

1,9; концентрация спирта 57 — 59%.

Экстракт фильтруют и в фильтрате рН доводят до 7,2 — 7,6 прибавлением 5 н. раствора едкого патра, затеil Tiда же добавляют при перемсш гванигг 1 лг.г 10%-ного водного раствора уксуснокислого цинка, Выпавший осадок удаляют фильтрацией или цснтрифугиро10 ванисм. В надосадочной жидкости устанавливают р11 4,2 — 4,5 и прн нсрсмсшивании добавляют 8 лг» 10%-ного водного раствора уксуснокислого цинка. Чсрсз одигг — два часа осадок отделяют центрифугированием или

15 фильтрацией, промывают спиртовоэфнрной смесью и сушат на воздухе. Выход сухого порошка 520 лг:., активггость 2,5 сд >Ifd>

1044 ед. из 100 г сырой поджелудочной железы (око Io 1000 сд. из 1 кг).

20 Пример 2. К 100 а поджелудочной железы крупного рогатого скота, измельченной на мясорубке, добавляют 400 н» 80 спи р га, подкисленного 4,5 лг» ортофосфорной кислоты. Реакционную смесь перемсшивают,в те25 ченис двух — трех часов, фильтруют, устанавливают в фильтратс рН 4,5 — 4,7, отделяют балластные вещества, 5 и. раствором Ма01-1 доводят рН до 7,6 — 7,8 и прибавляют к раствору 0,8 лг» 10% íîãî раствора уксуснокисло30 го цинка. Осадок отделяют и отбрасывают, а

351547

Составитель T. Головина

Текред Л. Камышпнкова

Редактор T. Каранова

Корректоры: В, Петрова и Е. Давыдкина

Заказ 3455/7 Изд. № 1395 Тираж 406 Подписное

ЦНИЙПИ Комитета по делам изобретений н открытий при Совете Министров СССР

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 в экстракте устанавливают pF 5,4 — 5,5 " снова добавляют 6,4 мл 10%-ного раствора уксуснокислого цинка для осаждения белковой фракции, содержащей инсулин. Через 10 —18 час осадок отделяют, промывают дистиллированной водой и растворяют в воде, подкисленной соляной кислотой. Высаливание инсулина-сырца проводят 20 — 25%-ным раствором NaC1. Полученный препарат промывают ацетоном, эфиром и сушат на воздухе. Выход инсулина-сырца составляег 600 ед. при активности 5 ед мг, Предмет изобрете ния

1. Способ получения инсулина-сырца путем экстрагирования поджелудочной железы подкисленным спиртовым раствором, очистки, высаливания целевого продукта из фильтрата, промывания его и высушивания, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и упрощения технологии производства, к спиртовому экстракту после отделения осадка добавляют уксуснокнслый цинк с последующей обработкой известным образом.

2, Способ по п. 1, отличающийся тем, что к спиртовому экстракту добавляют 1 — 2 г vK суснокислого цинка на 1 кг железы при рН от 3,8 до 7,8 и к надосадочной жидкости после отделения осадка добавляют 4 — 8 г уксус15 нокнслого цинка на 1 кг железы при рН от

4,2 до 6,2.