Способ цитадсорбции

 

Всес о-.,оэ, и и т е . т ! но-теx..ччеон;,g би Ол и ое.:,. пу,,— А

ОЛИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

406883

Союз Советских

Социалистииеских

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Зависимое от авт. свидетельства ¹

М, Кл. С 12k 7/00

Заявлено 19.V11.1972 (№ 1813347/31-16) с присоединением заявки № 1813348/31-16

Приоритет

Опубликовано 21.XI.1973. Бюллетень № 46

Дата опубликования описания 2.IV.1974

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

УДК 611-018,1(088.8) Автор изобретения

О. В. Давыдов

Белорусский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии

Заявитель

СПОСОБ ЦИТАДСОРБЦИИ

Изобретение относится к области вирусологии.

Известен способ адсорбции различных вируссодержащих материалов на культурах клеток путем нанесения исследуемого материала на чувствительные первичные или перевиваемые клетки, с последующим внесением флуорохрома в качестве индикатора.

Однако указанный способ имеет длительные сроки постановки реакции, не дает возможности получения информации о природе рецепторов, обеспечивающих связь между вирусом и клеткой, имеет нестабильные условия проведения опыта.

Для стабилизации получаемых результатов исследуемый материал наносят на клетки, фиксированные в формалине.

Пример 1. Испытуемый препарат — культуральная жидкость парагриппозного вируса

3 типа (штамм НАЛ-ЕА-106), лишенная инфекционных свойств обработкой твином — 80 и эфиром. Различные ее разведения по 2 мл вносят в предварительно отмытые пробирки с формалинизированным монослоем перевиваемых клеток почки морской свинки. После двухчасового контакта при 20 С содержимое сливают, промывают 5 мл физраствора, затем вносят 0,2 мл 0,5%-ных эритроцитов морской свинки, оставляют при 20 С на 20 мин, вносят и сливают 10 мл физраствора и проводят учет реакции. При микроскопировании гемадсорбцию обнаруживают в разведениях испытуемого препарата от 1: 2 до 1; 32.

Пример 2. Вирусный препарат — диагностикум гриппа типа А (Шклявер) — взят в дозе, превышающей в два раза разведение, дававшее гемадсорбцию на пробирках с формалинизированной перевиваемой тканью почки морской свинки. Его инкубируют 2 час в

10 смеси с равными объемами формалина в концентрации 20; 10; 1; 0,1; 0,01%. Со смесью ставят реакцию гемадсорбции и устанавливают, что двухчасовой контакт с 20%-ным и

10%-ным формалином нейтрализует гемадсор1s бирующие свойства вируса гриппа A.

Пример 3. Различные разведения аллантоисной жидкости вируса гриппа А, лишенной инфекционных свойств, в объеме 0,5 мл вносят в предварительно отмытые пробирки с

20 формалинизированной культурой перевиваемых клеток почки морской свинки (клетки до опыта хранились в 5%-ном формалине более

1,5 месяцев). После часового контакта при комнатной температуре в наклонном положе25 нии содержимое сливают и вносят по 0,25 мл взвеси окрашенных клеток (взвесь перевиваемых клеток почки морской свинки в концентрации 1 млн. клеток на 1 мл среды за 2 месяца до постановки реакции окрашивают нейт30 ральротом и хранят при 4 С), 406883

Предмет изобретения

Составитель С. Щеиева

Корректор Н. Аук

Техред Е, Борисова

Редактор К. Шанаурова

Заказ 1374/16 Изд. № 1026 Тираж 467 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений. и открытий

Москва, К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 з

После двухчасового контакта в наклонном положении добавляют 2 мл физраствора. Перед учетом результатов штатив с опытными и контрольными (вместо вируса — физраствор) пробирками встряхиваютдля смывки непрочно прикрепившихся клеток. Микроскопирование показывает, что в пробирках, имевших вирусный материал в разведении до 1: 8, наблюдает прикрепление окрашенных клеток взвеси к монослою.

Способ цитадсорбции путем нанесения исследуемого материала на чувствительные клетки с последующим внесением индикатора степени адсорбции, отличпющийся тем, что, с целью стабилизации результатов, исследуемый материал наносят на клетки, фиксированные в формалине.