Способ выделения лептоспир из спермы
О П И С A Н И E 420665
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (6!) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 16,06.72 (21) 1799320/30-15 (51) М. Кл. С 12 1/00 с нрисоед.шением заявки J¹
Государственный комнте, Совета 1йинистров СССР по делам изооретений и открытий (32) Приоритет
Опубликовано 25.03.74. Бюллетень X" 11
Дата опубликования описания 14.II.74 (53) УДК 619:576.8.093.1:
:591.463.1 (088.8) (72) Авторы изобретения (71) Заявитель
Н. Г. Балашов и В. Н. Родина
Государственный научно-контрольный институ ветеринарных препаратов (54) СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ЛЕПТОСПИР ИЗ СПЕРМЫ
Изобретение относится к лабораторным методам выделения возбудителей заболеваний сельскохозяйственных животных.
Известные способы выделения лептоспир от больных или переболевших животных, например путем за ражения лабораторных животных, мало приемлемы при исследовании спермы .прежде всего в силу ее токсичности для лабораторных животных.
Предложенный способ отличается от известных тем, что с целью предварительной детоксикации спермы перед парентеральным введением животным, ее предварительно детоксифицируют путем нейтрализации буферным раствором, представляющим собой смесь пептонной среды или желтка куриных яиц с 1—
3 цитрата натрия, причем объем буферного раствора по отношению к объему спермы составляет 1 — 3.
Пример. Исследуемую сперму быков, полученную в стерильных условиях, разбавляют буферным раствором, который может представлять собой сыворотную (пептонную) среду для выращивания лептоспир, которая содержит 1 — 2% цитрата натрия и 10 — 20% желтка куриных яиц, или 2 — 3%-ный раствор цитрата натрия с 10 — 20% желтка. В эти растворы может быть добавлен сахар в количестве 10 — 30%.
Для приготовления раствора дистиллированную воду кипятят 10 — 15 мин и в горячую воду всыпают цитрат натрия или его смесь с глюкозой, стерилизуют на водяной бане, охлаждают до 50 — 60 С и добавляют 10 — 20% желтка.
Оптимальным соотношением объема разбавляемой спермы и буферного раствора является
1: 2 (от 1: 1 до 1: 3). При введении 1—
2,5 мл внутриб рюшин но наиболее чувстви10 тельным лабораторным животным, например хомякам, возраст которых не превышает 1 месяц, сперма, нейтрализованная описанным способом, не вызывает коллапса и гибели животных. Последующее выделение лептоспир
15 проводят, путем посева из внутренних органов павших или убитых на 14 — 21 день лабораторных животных на питательные среды и инкуби!рования при оптимальной температуре (28+1 Ñ) в течение 50 дней.
20 Описанный способ обладает более высокой чувствительностью по сравнению с известными, позволяет провести исследование за более короткий срок и может найти широкое применение при исследовании спермы от живот25 ных-доноров на станциях искусственного осеменения.
Предмет изобретения
Способ выделения лептоспир из спермы
30 сельскохозяйственных животных, например
420665
Составитель А. Леонов
Техред Е. Борисова
Корректор Л. Царькова
Редактор Д. Пинчук
Заказ 2308/2 Изд, Хз 713 Тираж 456 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 быков, путем введения ее после разбавления лабораторным животным и,последующего высева материала от лабораторных животных на искусственные питательные среды, отл ич а ю шийся тем, что, с целью детоксикации, обеспечивающей введение спермы наиболее чувствительным видам лабораторных животных, например хомякам, сперму перед введением нейтрализуют буферным раствором, представляющим собой смесь пептонной среды или желтка куриных яиц с 1 — 3% нитрата натрия, причем объем буферното раствора по отношению к сперме составляет 1 — 3.
