Способ получения протеолитического фермента

 

(ii) 436086

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Соеегсяа

Соцкалиотичеещд

1"6Cfi g6ri8IC (61) Зависимое от авт. свидетельства (22) Заявлено 06.12.72 (21) 1857143/31-16 с присоединением заявки № (32) Приоритет

Опубликовано 15.07.74. Бюллетень № 26

Дата опубликования описания 18.12.74 (51) М. Кл. С 12d 13/10

Гасударственный камнтет

Саветв Министрав СССР

fl0 делам иеааретений и аткрытий (53) УДК 615.779.94 (088.8) (72) Авторы изобретения

Н. С. Егоров, Н. С. Ландау, P. В. Михайлова и В. И. Ушакова

Московский государственный университет им, М. В. Ломоносова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОТЕОЛИТИЧЕСКОГО ФЕРМЕНТА

Предмет изобретения

Изобретение относится к,производству ферментных препаратов.

Известен способ получения протеолитического фермента, заключающийся в том, что на пшеничные отруби производят посев

Bacillus subtilis с последующим подсевом через 24 час культуры-продуцента Aspergillus

oryzae или Penicillium sp. и выращивают поверхностным способом.

Однако указанный способ дает недостаточно высокий выход целевого продукта.

Интенсификация биосинтеза целевого продукта обеспечивается за счет того, что культуру-продуцент выращивают с близкородственным видом, не образующим фермента.

Пример. В синтетическую среду Орловой после стерилизации вносят одновременно

1,25 об % жидкого посевного материала Act.

rimosus и 5 об. % жидкого посевного материала Act. violaceus. Совместное культивирование осуществляют глубинным способом в колбах на 750 мл со 100 мл среды на качалках (200 об/мин) при 30 С в течение 96 час.

По ходу развития ассоциативной культуры визуально легко установить нормальное развитие как Act, rimosus, так и Act. violaceus.

По истечении 96 час в колбу с чистыми и смешанными культурами определяют рН, биомассу, казеинолитичсскую и фибринолитическую активность.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что в смешанной культуре актиномицетов происходит образование протеаз с казеинолитическим действием в 3 раза, а с фибринолитическим действием в 2,5 раза больше, чем в чистой культуре Act. rimosus.

10 Биомасса смешанной культуры по своей величине очень близка к биомассе чистой культуры Act. rimosus, т. е. помимо общего увеличения ферментативной активности наблюдается такое же значительное (в 2,5 — 3 ра15 за) увеличение продуктивности каждой клетки.

20 Способ получения протеолитического фермента путем совместного выращивания двух видов микроорганизмов и последующего выделения целевого продукта, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что, с целью интенсификации биосин25 теза целевого продукта, культру-продуцент выращивают с близкородственным видом, не образующим фермента.