Способ получения хлорангидридов нуклеозид-5" -монофосфорных кислот

 

1п 487887

СПИ, .:ИЗОБР ЕТ Е Н И Я

Сосзз Советских

Сокнавнстическнх

Респфвнк

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 ф, (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 12.12.73 (21) 1974868!23-4 с присоединением заявки ¹ (23) Приоритет

Опубликовано 15,10.75. Бюллетень № 38

Дата опубликования описания 12.03.76 (51) М. Кл. С 07d 51/50

Государственный комитет

Совета Министров СССР,. т « венам изобретений

1 е отнрсчтни (53) УДК 547.963.32 (088.8) (72) Авторы изобретения (71) Заявитель

У. Я. Микстайс и И. Р. Чаксте

Латвийский филиал

Всесоюзного ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательского института химических реактивов и особо чистых химических веществ (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХЛОРАНГИДРИДОВ

НУКЛЕОЗИД-5 -МОНОФОСФОРНЫХ КИСЛОТ

Изобретение относится к способу получения хлорангидридов нуклеозид-5 -монофосфорных кислот, которые используются для получения производных нуклеозид-5 -фосфатов, широко применяемых в биологических, биохимических и медицинских исследованиях.

Известны способы получения хлорангидридов нуклеозид-5 -монофосфорных кислот путем фосфорилирования производных нуклеозидов оксихлоридами фосфора в присутствии соединений, активирующих фосфорилирующий агент. B качестве активаторов фосфорилирующего агента применяют дициклогексилкарбодиимид, триалкилфосфаты, спирты и другие соединения. При этом выход хлорангидридов нуклеозид-5 -монофосфорных кислот и селективность фосфорилирования недостаточны. Выход хлорангидридов нуклеозид-5 монофосфорных кислот зависит от строения фосфорилируемого нуклеозида.

Увеличение активности фосфорилирующего агента нарушает селективность фосфорилирования, так как реакционная способность первичной 5 -гидроксильной группы лишь незначительно превышает реакционную способность вторичных 2 - и 3 -гидроксильных групп.

С целью увеличения выхода и селективности фосфорилирования в качестве производных нуклеозидов применяют анионы ну.клеозидов. В отличие от известных способов в данном процессе активируют не фосфорилирующий агент, а соответствующий нуклеозид.

Анионы нуклеозидов получают путем об5 работки нуклеозпдов основными соединениями, например алкоголятамп, гидроокисями или карбонатами щелочных металлов.

В качестве фосфорилирующего агента применяют хлорокись фосфора. Реакционная спо10 собность хлорокиси фосфора в этом случае вполне достаточна, поэтому нет необходимости применять более активный, но менее доступный пирофосфорилтетрахлорид, который также дает хорошие результаты. Кроме того

15 анионы нуклеозидов лучше неионных или протонированных нуклеозидов растворяются в органических растворителях, что также способствует более быстрому протеканию реакции фосфорилирования.

Пример 1. 0,1 г (0,35 ммоль) калиевой соли уридина при +5 С прибавляют к 2 мл (21,80 ммоль) хлорокиси фосфора в 2,5 мл диоксана, перемешивают 5 ч при той же тем25 пературе. Выливают в 150 мл абсолютного эфира, отделяют выпавший осадок, который после гидролиза 0,5 мл воды и добавления к раствору 2 н. раствора гидроокиси калия до рН 7 исследован методами хроматографии и

487887

Формула изобретения

Составитель Е. Николаева

Техред О. Луговая

Корректор А. Степанова

Редактор Е. Хорина

Заказ 320(15 Изд. № 1875 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, )К-35, Раушская наб., д. 4 5

Типография, пр. Сапунова, 2 электрофореза на бумаге и методом перйодатного окисления.

Выход дикалиевой соли уридин-5 -монофосфорной кислоты 85%, содержание основного вещества 99,5%, высшие фосфаты не обнаружены.

Пример 2. 0,17 г (0,62 ммоль) натриевой соли аденозина при +5 С прибавляют к

0,15 мл (1,64 ммоль) хлорокиси фосфора в

1,5 мл триметилфосфата, перемешивают

35 мин при той же температуре. Выливают в

50 мл абсолютного эфира, отделяют выпавший осадок, который после гидролиза 0,5 мл воды и добавления к раствору 2 н. раствора гидроокиси натрия до рН 7 исследован, как описано в примере 1.

Выход натриевой соли аденозин-5 -монофосфорной кислоты 95%, содержание основного вещества 99,0%, высшие фосфаты не обнаружены.

Пример 3. 0,22 г (0,72 ммоль) натриевой соли гуанозина при +5 С прибавляют к

0,2 мл (2,18 ммоль) хлорокиси фосфора в

1,5 мл триметилфосфата, перемешивают 2 ч при той же температуре. Выливают в 60 мл абсолютного эфира, отделяют выпавший осадок, который после гидролиза 0,5 мл воды и добавления к раствору 2 н. раствора гидроокиси натрия до рН 7 исследован, как описано в примере 1.

Выход динатриевой соли гуанозин-5 -монофосфорной кислоты 96%, содержание основного вещества 100%, высшие фосфаты не обнаружены.

5 Пример 4. 0,5 r (2,13 ммоль) литиевой соли дезоксиуридина при +5 С прибавляют к

0,5 мл (5,46 ммоль) хлорокиси фосфора в

5 мл триметилфосфата, перемешивают 1,5 ч при той же температуре. Выливают в 200 мл

10 абсолютного эфира, отделяют выпавший осадок, который после гидролиза 1 мл воды и добавления к раствору 2 н. раствора гидроокиси лития до рН 7 исследован, как описано в примере 1. Выход дилитиевой соли дезоксиури15 дин-5 -монофосфорной кислоты 93%, содержание основного вещества 99%, высшие фосфаты не обнаружены.

Способ получения хлорангидридов нуклеозид-5 -монофосфорных кислот путем фосфорилирования производных нуклеозидов окси25 хлоридами фосфора с последующим выделением целевого продукта известными способами, отличающийся тем, что, с целью увеличения выхода и селективности фосфорилирования, в качестве производных нуклеозидов применяют анионы нуклеозидов.