Способ диагностики амилоидозов

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N1/38 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

О П И С А Н И Е < >593IGS

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-вувЂ” (22) Заявлено 03.02.76 (21) 2320716/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) ПриоритетвЂ” (43) Опубликовано 15.02.78. Бюллетень № 6 (45) Дата опубликования описания 20.02.78 (51) М Кл G 01 N 1/28

Государственный комитет

Совета Министрцв СССР (53) УДК 615.475 (088.8) по аелам изобретений н открытий (72) Автор изобретения

А. Е. Сиваков (71) Заявитель Первый московский ордена Ленина и ордена Трудового

Красного Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АМИЛОИДОЗОВ

Изобретение относится к области,медицины, а именно к терапии.

Известен способ диатноствки амилоидозов путем исследования биопсийного и аутопсийного материала (1).

Одна ко известный способ не обеспечивает дифференциальной диагностики различных форм амилоидозов.

Для дифференциальной, диагностики идиопатического, приобретенного и наследственного амилоидозов по предлагаемому способу гистологические срезы обрабатывают забуференньем гексамин-серебряньом раствором при температуре 50 вЂ” 70 С с последующей их докраской.

Способ осуществляют следующим образом.

Полученные биапсийный и аутопсийный материалы фиксируют в 10%-ном нейтральном формалине, заливают в парафин. Срезы готовят толщиной 4 вЂ” 6 лкм, наклеивают на чистые стекла, депарафинируют и доводят до воды ка к î о ыч но.

Затем готовят растворы красителей.

1. Забуференный комплекс гексагмина и азотнокислого серебра.

К 95 мл 5%-ного гексамина добавляют

5 мл 5%-ного азотнокислого серебра и 10 л л боратного буфера (рН 8,2 вЂ” 8,6), который готовят следующим образом: к 100 ил 3%-ной борной кислоты добавляют 1 каплю фенолфталеина, оттитровывают 1 н. раствором ед" кого натра до стойкой розовой окраски. При добавлении азотнэкислого серебра в растворе гексамина появляется молочный осадок, который при встряхивании растворяется. Раствор готов к употреблению.

2. Забуференный раствор конго красного.

К 100 мл раствора боратного буфера добавляют 500 мг красного конго, размешивают, 10 помещают в термостат при температуре 56 С на 30 вЂ” 60 мин до появления равномерного прозрачного окрашивания.

3. Раствор перийо дата,калия:

70 мг KIO> растворяют в 100,ил дистил15 лированной воды, добавляют 0,5 мл 35%-ной азотной кислоты.

Затем готовят 5%-ную хромовую кислоту, 0,05 вЂ” 0,1%-ный раствор хлорного золота, 1,0вЂ”

2,0%-ный триосульфат натрия.

20 Окраску гистологических срезов производят следующим образом.

Препарат ополаскивают в дистиллированной воде, обрабатывают растворам перийодата калия в течение 20 мин, затем промывают в проточной воде 10 иин и помещают в рас твор 5%-ной хромовой кислоты на 30 мин, снова промывают в проточной воде 5 мин, споласкивают в 2 вЂ” 3 сменах дистиллированЗ0 ной воды.

593168

Формула изобретения

1. БМЭ, т. 1, 1974, с. 354.

Составитель С. Малютина

Техред И. Михайлова Корректор В. Гутман

Редактор Л. Емельянова

Заказ 975/22 Изд. Хо 193 Тираж 1109 Подписное

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Тип. Харьк. фил. пред. <Патент»

После этого обрабатывают забуференным гексамин-серебряным раствором в течение 2вЂ”

3 ч при 56 С (контроль под микроскопом до появления однородного черно-коричневого тона). Споласкивают в двух сменах дистиллированной воды. Выдерживают в 0,05 вЂ” 0,1%нам растворе хлорного золота 3 вЂ” 5 мин (контроль,под микроскопом вЂ” волокнистые структуры черно коричневые, фон прозрачный) .

Ополаскивают,в дистиллированной воде. Затем памещают в 1 вЂ” 2%-ный раствор тиосульфата натрия на 3 мин. Про мывают в проточной ваде 2 мин, cBQJIaclKHBBIoT в дистиллированной воде. После этого докрашивают препарат в нагретом 0,5%-ном забуференном растворе;канто красного при 56 С в течение

15 мин, затем снова споласкивают в,дистиллированной воде. Днфференцируют в 70%-ном аммиачном спирте 1 вЂ” 2 с. Отмывают краситель в дистиллированной воде (контроль под микроскопом) и (проводят через .спирты, просветляют,в кислоте не более 5 мин и оканчивают как обычно.

Предлагаемый способ обеспечивает дифференциацию различных форм амилоидоза, что позволяет разработать эффективные средства борьбы с каждой формой заболева5 ния.

10 Способ диагностики амилоидозов п утем исследований биопсийного и аутопсийного материала на гистологических срезах, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью дифференциальной диагностики идиапатическаго, приоб15 ретенного и наследственно1го амилондозов, гистологические срезы обрабатывают забуференным гекса мин-серебряным раствором при

50 вЂ” 70 С.

20 Источник информации, принятый во внимание,при экспертизе: