Способ получения фибрин-мономера
ОП ИКАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Соввтекми
Соцмьлмстммюскми
Республмк
1) 6634О4 (61) Дополнительное к авт, свид-ву (22) Заявлено 30.12.76 (21) 2437992/28-13 (51) М. Кл.
А 61 К 37/12 с присоединением заявки №
Гасударственный комитет сссР но делам изооретений и открытий (23) Приоритет
Опубликовано 25.05.79. Бюллетень № 19 (53) УДК 615.45:
:612.115 (088.8) Дата опубликования описания 25.05.79 (72) Авторы изобретения
Л. А. Ляпина, А. М, Ульянов и Е. С. Житникова
Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени государственный университет им. М. В. Ломоносова (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ФИБРИН вЂ” МОНОМЕРА
Изобретение относится к области медицины, а именно получению аналитических препаратов, и может быть использовано в биохимии, физиологии и фармакологии.
Известен способ получения фибрин-мономера путем добавления к раствору фибриногена S раствора тромбина, отделения образовавшегося сгустка и обработки его раствором мочевиHbl.
Однако такой способ длителен (до 3 суток), а выход целевого продукта невысокий- 10
1 — 10 o.
Целью изобретения является повышение выхода целевого продукта и ускорение способа.
Это цель достигается тем, что перед добав- т5 лением раствора тромбина к раствору фибриногена добавляют монойодацетамид или монойодуксусную кислоту, в концентрации
0,001 — 0,05 М на 1 л раствора и эпсилонаминокапроновую кислоту. 20
Способ осуществляют следующим образом.
К 1000 мл 0,2%-ного раствора фибриногена добавляют монойодуксусную кислоту или мо2 нойодацетамид в конечной концентрации
0,001 — 0,05 М и эпсилонаминокапроновую кислоту в концентрации 0,3 — 0,6% с последующим добавлением к фибриногену 100 — 200 ед. активности тромбина в объеме 10 мл физиологического раствора. Образующийся сгусток собирают стеклянной палочкой, отжимают, промывают в физиологическом растворе и переносят в 100 мл 10 — 20 o-ного раствора мочевины в ацетатном буфере (рН 5,2). Сгусток растворяют, например, с помощью магнитной мешалки при комнатной температуре, После растворения сгустка раствор белка разбавляют
800 мл физиологического раствора и добавляют 200 мл буфера Палитча. Сгусток снова собирают, отжимают, промывают в физиологическом растворе и растворяют в минимальном объеме раствора мочевины. Эту операцию повторяют 3 — 4 раза. В результате получают
50 — 100 tvaa 0,5-1 i ного раствора f èáðèíмономера, который хранят при 4 — 5 С. Все операции по выделению фибрин- моно мера можно проводить при комнатной температуре.
663404
Составитель С. Малютина
Техред С Мигай Корректор B. Бутяга
Тираж 671 Подписное
ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, М кква, Ж- 35, Раушская наб„д. 4/5
Редактор А. Бер
Заказ 2 120/4
Филиал 1!П П "11атент", г. Ужтород, ул. Проектная, 4
Лля длительного (более 1,5 мес) использования полученного препарата последнюю операцию по растворению фибрин-мономера проводят не в 10 — 207-ном растворе мочевины в ацетатном буфере, а в 0,025-0,002 М растворе уксусной кислоты, раствор белка замораживают и высушивают в вакууме.
Предлагаемый способ позволяет сократить процедуру выделения с 3 суток до 4 — 6 час, увеличить выход фибрин-мономера в 5 — 7 раз, а также повысить степень чистоты более, чем на 2% по сравнению с известным способом. Способ осуществляют без применения дорогостоящих нрепаратов и аппаратуры в условиях биохимических лабораторий, Формула изобретения
Способ получения фибрин-мономера путем добавления к раствору фибриногена раствора тромбина, отделения образовавшегося сгустка и обработки его раствором мочевины, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта и ускорения способа, перед добавлением раствора тромбина к раствору фибриногена добавляют монойодацетамид или монойодуксусную кислоту в концентрации 0,001-0,05 М на 1 л раствора и эпсилонаминокапроновую кислоту.
