Штамм клубеньковых бактерий люцерны -15(вниисхм)-активный симбиотический азотофиксатор

 

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (1 11 682490

Союз Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 10.05.78 (21) 2616952/30-15 с присоединением заявки ¹ (51) М. Кл. С 05F 11/08 (53) УДК 631.461.52 (088.8) (43) Опубликовано 30.08,79. Бюллетень № 32 (45) Дата опубликования описания 30.08.79 по делам изобретений и открытий (72) Авторы изобретения

Л. Ф. Васюк, И. Б. Иванова и Н. И. Корженевская (71) Заявитель

Всесоюзный научно-исследовательский институт сельскохозяйственной микробиологии (54) ШТАММ КЛУБЕНЪКОВЪ|Х БАКТЕРИЙ ЛЮЦЕРНЫ

RHIZOB1UM МЕЫ1.OTI-15- (ВН И ИСХМ)-АКТИ ВНЪ|Й

СИМБИОТИЧЕСКИЙ АЗОТОФИКСАТОР

Гасударственный комитет (23) Приоритет

СССР

Изобретение относится к области микробиологических средств повышения урожая бобовых растений и представляет собой штамм, предназначенный для производства бактериального препарата нитрагина под люцерну.

В настоящее время широко используют азотфиксирующие микроорганизмы для производства бактериальных удобрений (1) 10

Известен штамм Rhizobium meliloti 425 a, обладающий способностью к азотфиксации в симбиозе с растениями люцерны,(2).

Он используется при производстве нитрагина под люцерну и обеспечивает прибавку 15 урожая.

Однако его азотфиксирующая способность недостаточно высока.

Цель изобретения — получение штамма

Rhizobium meliloti-15, обладающего более 20 высокой азотфиксирующей способностью, повышающего еще более урожай люцерны и содержание в ней протеина.

Штамм выделен из клубеньков люцерны сорта Херсонская-l, произраставшей на по- 25 ливной темно-каштановой остаточно слабосолонцеватой среднесуглинистой почве Херсонской области и хранится в музее типовых культур Всесоюзного научно-исследовательского института сельскохозяйственной микробиологии.

Штамм растет на следующих питательных средах.

Бобовый агар, г/л: горох 100,0; сахароза

20,0; агар 20,0; рН среды 6,8 — 7,0.

Маннитно-дрожжевой агар (среда Райта), г/л: NaC1 0,2; К НРО4 0,5; MgSO

7НеО; СаСОз 0,1; CaSO4 2Н О 0,1; маннит 10,0; дрожжевой экстракт 1,0; агар

20,0; рН среды 6,8.

Морфолого-культуральные признаки.

Величина клеток двух-, трехсуточной культуры на бобовом агаре 0,5 — 0,7)(1,2—

2,0 мкм.

Клетки имеют вид палочек. Перитрихи.

В молодом возрасте подвижны, при старении бактерии теряют подвижность, образуют бактероиды. Бактероиды имеют вильчатую форму, нередко образуя звездчатые скопления, бактерии грамоотрицатсльные.

Штрих на бобовом агаре обильный, слизистый, блестящий, колонии круглые, беловатые, блестящие с четкими краями до

8 мм в диаметре (большинство) и слизистые мутные растекающиеся (встречаются в меньших количествах) .

682490

На МПА бактерии растут. Штрих на

МПА более скудный, слизистый, кремоватого оттенка, Физиологические признаки. Молоко с лакмусом нс пептонизирует, подщелачивает, затем подкисляет, на 18-е сутки образует прозрачную зону на поверхности. 7Келатин слегка разжижает. Клетчатку не использует. Аэроб. Оптимум температуры

26 — 28 С. Оптимальное значение рН 6,8 — 10

7,2.

Отношение к углеводам. Растет на средах с углеводами, подкисляя среду. Активно усваивает арабинозу, ксилозу, глюкозу, сахарозу, мальтозу, лактозу, слабее фрук- 15 тозу. Маннит, сорбит, раффинозу не использует.

Прибавка

Прибавка

Сбор сырого протеина, ц/га

Урожай

Вариант опыта

Год ц/га ц/га оо сена

36,0

Контроль (ннокуляцня шт. 425=а) Инок уля пи я шт. = 15

8,21

1974

38,9

2,9

8,42

0,21

52,9

11,42

Контроль (инокуляция шт. 425=а)

Инокуляцня шт.=15

1975

61,9

12,28

9,0

0,86

23,15

1976 весь вегетационный период

123,9

Контроль (ннокуляцня шт.=425 а) 16

Инокуляцня шт,=15

144,2

20,3

30,81

7,66

ЗЗ тящий, колонии круглые, беловатые, блестящие, с четкими краями до 8 мм в диа20 метре (большинство) и слизистые, мутные, растекающиеся (встречаются в меньших количествах).

Физиологические признаки. Аэроб. Оптимум температуры 26 — 28 С. Оптимальное

25 значение рН 6,8 — 7,2.

Отношение к источникам углерода. Растет на средах с углеводами, подкисляя среду. Активно усваивает арабинозу, ксилозу, глюкозу, сахарозу, лактозу, слабее

Ç0 фруктозу. Маннит, сорбит, раффинозу не усваивает.

Отношение к источникам азота. Использует азотнокислый натрий, аммонийные соли, мочевину, аспарагин. На мясопептон35 ном агаре растет. Молоко с лакмусом не пептонизирует, подщелачивает, затем подкисляет.

Штамм не патогенен, признаки устойчивы.

40 Рекомендуется для производства нитрагина под люцерну.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

Из таблицы видно, что предлагаемый штамм выгодно отличается от штамма-прототипа 425-а более высокой эффективностью. Прибавка урожая сена люцерны от

2,9 до 20,3 ц/га (от 8 до 17 о/о), содержание сырого протеина повышается от 0,21 до

7,66 ц/га (от 3 до 33О/о). Еще более значительна прибавка урожая по сравнению с неинокулированным контролем.

Формула изобретения

Штамм клубеньковых бактерий люберцы

Rhizobium meliloti-15. (ВНИИСХМ) — активный симбиотический азотофиксатор.

Хранится в коллекции ВНИИ сельскохозяйственной микробиологии под № 15.

Морфолого-культуральные признаки. Величина клеток двух-, трехсуточной культуры на бобовом агаре 0,5 — 0,7к,1,2 — 2,0мкм.

Клетки имеют вид палочек. Перитрихи. В молодом возрасте подвижны, при старении теряют подвижность и образуют бактероиды. Бактероиды имеют вильчатую форму, нередко образуя звездчатые скопления.

Бактерии грамотрицательные. Штрих на бобовом агаре обильный, слизистый, блесОтношение к источникам азота. Использует азотнокислый натрий, аммонийныесоли, мочевину, аспарагин.

Признаки штамма устойчивы. Штамм не патогенен.

Эффективность штамма проверена в вегетационных и полевых опытах.

Испытание штамма-15 в полевых условиях проведено на Павловской опытной станции ВИР, а на дерново-слабоподзолистой глееватой среднесуглинистой почве на карбонатной морене.

Влияние штамма клубеньковых бактерий люцерны Rhizobium meliloti-15 на урожай люцерны и содержание в ней протеина приведено в таблице.

682490

СССР, (протоСоставитель М. Мирзаев

Техред Н. Строганова

Редактор А. Соловьева

Корректоры; О. Данишева и T. Добровольская

Заказ 1797/9 Изд. № 524 Тираж 497 Подписное

НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

1.Доросинский Л. М. Клубеньковые бактерии и нитрагин. «Колос» Л., 1970.

2. Авторское свидетельство № 549454, кл. С 05F 11/08, 1977 тип).