Способ получения олеандомицинов

 

./

ОПИСАН

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз Соявтскик

Социалистических

Республик

<,731901

К ПАТЕНТУ (6!) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 2302,77(21) 2454447/23-04 (23) Приоритет — (32) 030376 (3I ) 663467 (33) США

Опубликовано 3004.80. Бюллетень ла 16

Дата опубликования описания 30.04.80 (51) М. Кл.

С 07 Н 17/08//

А 61 К 31/70

Государственный комитет

СССР но делам изобретений и открытий (53) УДЫ 547. 07 (088. 8) ) 1 . .(;1 Ь

Иностранец

Фрэнк С.Скьяволино (США) (72) Автор изобретения

Иностранная фирма Пфайзер Инк (США) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОЛЕАНДОМИЦИНОВ

О (в)а

R0.. о р, (ю

II

О !(С )а

0!!

Изобретение относится к способу получения новых производных олеандомицина, обладающих ценными фармакологическими свойствами.

Цель и з о брет ени я — получен и е . новых полезных соединений, расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм, достигается путем синтеза последних, Ьснованного на .известной реакций восстановления эпоксидной группы flj.

Описывается способ получения олеандомицинов общей формулы 1 lS (I) -а

1 25 осн, где Rs Н„,R — водород или алканоил, имеющий от 2 до 3 атомов углерода, 30 заключающийся в том, что соединение общей формулы П где R-R имеет приведенные выйе|эначения, йли его соль подвергают взаимодействию с хлеридом хрома in situ в среде, инертного органического растворителя, в качестве которого обычно используют смешивающийся с водой растворитель, например, ацетон, низший алканоил, тетрагидрофуоан или их смеси. Хлорид хрома получают in situ. хлористого хрома восстановлением.

Фармацевтически пригодные присоединенные соли кислот полусинтетических олеандомицинов могут быть получены путем контактирования раствора соединения формулы I в растворителе, таком как ацетон, со стехиометрически эквивалентным количеством мине-731901 грам-положительных микроорганизмов °

Высокая активность против грам-голоительных микроорганизмов, демонстрируемая этими соединениями, находится в некотором контрасте по отношению к меньшей активности против грам-отрицательных микроорганизмов.

В проводимой далее таблице указаны данные, иллюстрирующие антибиотический спектр соединений, являющихся предметом настоящего изобретения в условиях in vitro (т.е. в пробирке). Испытания проведены в соответ.ствии с методикой, основанной на использовании минимальных ингибиторных концентраций, разработанной Эриксоном и Шеррисом. Результаты даны в таблице.

Олендомициновые соединения являются эффективными ингибиторами роста микроорганизмов и в особенности г

Золотистый Золотистый В. subtiIis Е.coIi KIebsieIIa p.n.SaIm.typh

R к R стафилококк стафилококк 51А266 534009 58Д009

01А005 OA400 R

) 200

3,12 )200

)200

)200

)200

I Ac Н Ас

I Н Н Н

I . .Ac Ac Ac

3,12

6,25

)200

200 ю 200

)200 200

25 ральной кислоты, такой как хлористоводородная; бромистоводородная, фосфорная или серная кислоты; или органической кислоты, выбранной из группы, включающей аспаргиновую, лимонную, винную, глюконовую, янтарную стеариновую кислоты или алкилсерную

5 кислоту, такую как лаурилсерная кислота. Соль осаждается в вице осадка после реакции нейтрализации или,если необходимо, после частичного выпаривания реакционного раствора. Продукт может быть извлечен путем фильтрации, центрифугирования или лиофилизации.

Грам-положительный.

+ — Грам-отрицательный.

Способность олеандомицинов противостоять инфекции в живом организме (т.e in vivo) установлена путем ввода подкожно и во внутрь мышам, зараженным золотистым стафилококком (Staph.aureus 01A005). Используя методику испытаний, описанную Restema е1 aI., установлено, что соединения, 40 в особеиности формул II и III, в которых R, R и R — каждый водород, оба они обеспечивают защиту от инфекции, которая по своей эффективности сравнима с защитой, обеспечиваемой природным олеандомицином.

Для эффективного профилактического и противоинфекционного использования в живом организме полусинтетические олеандомициновые соединения, являющиеся предметом изобретения, могут быть введены в чистом виде или в сочетании с фармакологическими пригодными носителями как при подкожном, парэнтеральном вводе, так и при приеме, через рот. Выбор того или иного типа приема лекарства и его дозировка определяются врачом, исходя из состояния пациента.

Однако обычная дозировка для людей составляет примерно от 500 до 60

2000 мг/день и предпочтительное коли. чество приемов от одного до четырех раз. Однако эта дозировка может изме= няться в зависимости от веса пациента и может составлять в общем случае 65 от 10 до 40 мг на 1 кг живого веса в день.

Для использований соединения по1 лученных по изобретению, очи могут быть соединены с инертными фармацевтическими пригодными наполнителями, такими как лактоза, маннитол (маннит) и крахмал. Эти препараты могут быть приготовлены в виде различных дозировок, т.е.в форме таблеток, капсул и т.д. Для парэнтереального применения соединения могут быть приготовлены вместе с инертными, парэнтерально пригодными носителями, такими как вода, соляной раствор, кунжутное (сезамовое) масло, пропиленгликоль и т,д.

Пример 1, 8,8а-Деокси8,8а-метилен-2,4 -диацетилолеандомицин.

Трехгорлую колбу с круглым основанием емкостью 5 л загружают цинковой пылью в количестве 200 г и хлоридом ртути в количестве 20 r. После того, как твердые компоненты хорошо перемешаны, добавляют 1 н. раствора соляной кислоты в количестве 50 мл и смесь подвергают интейсивному перемешиванию в течение 15 мин. Верхний водный слой отделяют и производят добавление свежего однонормального раствора соляной кислоты в количестве 500 мл и колбу помещают в атмо;сферу двуокиси углерода.Отфильтро731901

ЬО ванный раствор треххлористого хрома (в количестве 1 кг и 1300 мл одно нормальной соляной кислоты) быстро добавляют к амальгаме цинка. Смесь подвергают перемешиванию в атмосфере двуокиси углерода в течение 1 ч, за это время смесь окрашивается в светло-голубой цвет, что свидетельствует о присутствии хлорида хрома (CrCI ), Перемешивание прекращают спустя 1 ч и цинковую амальгаму подвергают осаждению в нижней части колбы.

) ))

Раствор 2, 4-диацетилолеандомицина гидрохлорида .в количестве 500 r в ацетоне (3,5 л) и в воде (1,75 л) помещают в воронку с капельницей, присоединенную к трехгорлой колбе с круглым основанием, емкостью 12 л, оснащенной механической мешалкой.

В эту колбу производят добавление в атмосфере двуокиси углерода и при

) ) перемешивании раствора 2,4-диацетилолеандомицина гидрохлорида и предварительно полученного раствора хлорида хрома. Растворы добавляют одновременно с такой скоростью подачи, чтобы полностью вводить к одному и тому же моменту времени. Период ввода указанных растворов занимает примерно 12 мин. Спустя 35 мин после перемешивания при комнатной температуре вода, в количестве 2 л и этилацетат также в количестве 2 л добавляются к реакционной смеси и перемешивание продолжают в течение 15 мин. Этилацетатный слой отделяют и промывают водой в количестве 1600 мл. Этилацетат далее отделяют и водные экстракты смешивают и промывают свежим этилацетатом в количестве 2 л. Этилацетатный слой отделяют и промывают водой в количестве 1,7 л. Органическую фазу отделяют, водные экстракты смешивают и обрабатывают хлоридом натрия, в количестве 1500 r. Дополнительный этилацетат, который отделяют, выводят с помощью сифона и смешивают с другими этилацетатными экстрактами.

Воду добавляют к соединенным этилацетатным экстрактам, и величину водородного показателя рН доводят до 8,5 добавлением бикарбоната натрия. Органический слой отделяют промывают

Г водой, насыщенным хлоридом натрия и сушат безводным сульфатом натрия.

Фильтрация и выпаривание растворителей при пониженном давлении позволяет получить белый твердый продукт, который кристаллизуют.из смеси этилацетат — гептана, в результате получают соединение в количестве

237 г; т.пл. 184-186 С.

Вычислено, % : С 61,96; Н 8,67;

N 1,85.

Найдено, Ъ : С 61,78; Н 8,54, N 1,87.

С помощью аналогичной методики:

I Ф могут быть получены другие 2,4-ациS

S5 ловые эфиры 8,8а-метиленолеандомицина из соответствующих 2,4 - ациловых эфиров природных эпоксидных соединений, имеющих от двух до трех атомов углерода в ацильной группе.

Пример 2. 8,8а-Деокси-8,8а) метилен-2, я, 11-триацетилолеандомицин.

) ))

Раствор 2, 4, 11-триацетилолеандомицина в количестве 500 r, в ацетоне (3,25 л) и воде (1,73 л) подвергают обработке раствором хлорида хрома, приготовленного в соответствии с методикой, описанной в примере 1 из треххлористого хрома (1000 г) цинковой пыли (200 г) и хлорида ртути (20 г), в атмосфере двуокиси углерода, как описано в примере 1. Конечные этилацетатные экстракты, в количестве 2500 мл подвергают концентрированию до 800 мл и производят добавление 3 объемов гептана и далее в течение ночи проводят процесс кристаллизации. В результате получают в виде двух порций соединение о в количестве 426 г; т.пл.132-134 С, Вычислено,Ъ: С 61,71; Н 8,46;

N 1,76

Найдено,Ъ: С 61,59; Н 8,42;N 1,72, II р и м е р 3. 8,8а-Деокси-8,8а() метилен-2-ацетилолеандомицин.

Раствор 2-ацетилолеандомицина (29,2 г) в ацетоне в количестве

200 мл и воде (100 мл) подвергают перемешиванию с раствором хлорида хрома, полученного в соответствии с методикой, изложенной в примере 1 из треххлористого хрома (50 r), цинковой пыли (10 г) и хлорида ртути (1 г) в атмосфере двуокиси углерода. Конечные этилацетатные экстракты подвергают концентрированию до получения сухого продукта при пониженном давлении и остаток кристаллизуют из эфира (петролейного) с последующей рекристаллизацией из этилацетата— петролейного эфира. В результате получают соединение в количестве

8,4 г; т.пл. 183,5-185ОС.

Вычислено,Ъ: С 62,16; Н 9,02;

N 1,95.

Найдено, Ъ : С 61,97; Н 8,91;

N 2,01.

С помощью аналогичной методики получены другие 2-ациловые эфиры

8,8а-метиленолеандомицина из соответствующих 2-ациловых эфиров природного эпоксидного соединения,содержащего от двух до трех атомов углерода в ацильной группе.

Пример 4. 8,8а-Деокси-8,8аметиленолеандомицин.

Раствор олеандомицина (5 r) в воде (25 мл) подвергают добавлению 1 н. соляной кислоты с тем, чтобы довести величину рН 3,5, далее этот раствор смешивают с раствором хлорида хрома (полученного в соответствии с методикой, изложенной в примере 1, из

731901

10 2

II

lI

ОСН

Составитель k .Êîwèîìà

Редактор Л.Герасимова Техред Л.Теслюк

Корректор M.Êoñòà

Эакаэ 2877/44 Тираж 495

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5

Подписное

Филиал ППП Патент, г.Ужгород, ул.Проектная,4

13 г треххлористого хрома, 8 г цинковой пыли и 700 мг хлорида ртути) .

Этот процесс проводят в атмосфере двуокиси углерода. Примерно через половину последующей стадии переме.шивания (общее время которой составляет 4 5 мин) к смеси добавляют ацетон в количестве 20 мл, перемешивание продолжают. Спустя 45 мин от начала перемешивания при комнатной температуре производят добавление метиленхлорида (100 мл). Величину рН доводят. до 8,5 путем сбавления 8 н. раствора гидроокиси натрия. Органическую фазу далее отделяют, водный слой экстрагируют второй порцией метиленхлорида в количестве 100 мл.

Экстракты метиленхлорида подвер,гают перемешиванию, промывают водой (в количестве 100 мл), насыщенным хлоридом натрия (200 мл) и сушат безводным сульфатом натрия и выпаривают при пониженном давлении. Остаток кристаллизуют из хлороформа путем вытеснения гептаном и в результате получают соединение, указанное в названии, в количестве 2,28 г; т.пл.120-123оC.

Строение получейных соединений подтверждено данными ЯМР-,УФ- и ИКспектров.

Формула изобретения

1. Способ получения олеандомицинов общей формулы I сн Х(СН )

О ВО.

О О где R, R<, В означает водород или лканоил, имеющий от 2 до 3 атомов . глерода, отличающийся тем, что соединение общей формулы(I где R — R имеет приведенные выше значения, или его соль подвергают взаимодействию с хлоридом хрома in situ в среде инертного органического растворителя.

2. Способ по п.1, о т л и ч а ю шийся тем, что в качестве инер-, тного органического растворителя применяют растворитель, смешивающийся с водой.

3. Способ по п.2, о т л и ч а юшийся тем, что в качестве смеши,вающегося с водой растворителя приме,няют ацетон, низший алканоил, тетрагидрофуран или их смеси.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

40 1. Бюлер К., Пирсон Д. OpraHH ec кие синтезы, M. 1973, т.1. с.116.