Способ получения лидазы
(i ц 827068
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ н
Союз Соввтоких
Социалистических
Реслублик
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 03.05.78 (21) 2620821/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 07.05.81. Бюллетень № 17 (45) Дата опубликования описания 07.05.81 (51) М. Кл.
А 61К 37/48
Государственный комитет (53) УДК 61545:615. .34 (088.8) ло делам изобретений и OTKpblTHM
И. В. Лазарева, Н. Д. Сидорова, О. В. Чайка, В. А. Иванова, Н. Ф. Говорова, T. Е. Шестакова и В. Л. Константиноф с
Ленинградское ордена Ленина, ордена Трудового Красного
Знамени производственное объединение мясной промышленности им. С. М. Кирова (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИДАЗЫ
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и касается производства лекарственных препаратов.
Известен способ получения лидазы путем обработки семенников крупного рогатого скота в присутствии уксусной кислоты, осаждения ацетоном, растворения осадка в воде с последующей фильтрацией и сублимационной сушкой (1).
Однако препарат, полученный известным способом, обладает недостаточно высокой усл. ед. активностью 0,85 мг
Целью изобретения является повышение активности целевого продукта.
Эта цель достигается тем, что экстрагирование проводят 0,1 N уксусной кислотой при температуре 5 — 10 С, перед фильтрацией проводят переосаждение при 0 — 1 С и после фильтрации — диализ при 0 — 10 С в течение 12 — 16 час.
Пример. К измельченным в замороженном виде семенникам крупного рогатого скота добавляют 2 объема (по отношению к весу сырья) 0,1 N уксусной кислоты. Смесь перемешивают и проводят экстракцию при температуре не выше 10 С, рН 4,6 и периодическом перемешивании в течение 4 час.
Экстракт отделяют от мезги, охлаждают до температуры 2 — 3 С и тонкой струей при непрерывном перемешивании приливают к
- 4 объемам охлажденного до 0 С ацетона.
Смесь отстаивают. Осадок отделяют, над. осадочную жидкость отфильтровывают.
Осадок сырца лидазы помещают в марлевый мешок, закрепляют в емкости с дистиллированной водой при рН 6,0 — 6,3 (230 — 250 мл на 1 кг исходного сырья) и вращают, суспендируя осадок в воде.
Экстракт охлаждают до 2 — 3 С и проводят отделение балластных веществ путем фильтрации до получения прозрачного фильтр ата.
Прозрачный фильтрат охлаждают до 2—
3 С и тонкой струей при помешивании приливают к 5 объемам охлажденного до 0 С ацетона — проводят переосаждение фермента.
Осадок отстаивают, отделяют от надосадочной жидкости, промывают охлажденным ацетоном и отфильтровывают. Еще раз промывают ацетоном и подсушивают. Осадок растирают и высушивают, В полученном порошке лидазы проверяют активность, растворяют в дистиллированной воде и проводят диализ в течение 12 — 16 час при
0 — 10 С против воды, меняя ее не менее
3 раз. Затем стерильно фильтруют, разли827068
Составитель С. Малютина
Техред И. Заболотнова
Корректоры: О. Данишева и А. Степанова
Редактор П. Горькова
Заказ 732/19 Изд. № 316 Тираж 694 Подписное
НПО «Поиск» Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
d вают во флаконы и проводят сублимационную сушку.
Предложенный способ обеспечивает высокое качество препарата, активность препаусл. ед. 1 рата в 3 раза больше 2,55 ), чем мг по известному способу.
Выход порошка лидазы, полученного предлагаемым способом, увеличивается с
0,9 % до 1,2 /о с 1 кг, т. е. 1,2 г/кг.
Формула изобретения
Способ получения лидазы путем обработки семенников крупного рогатого скота в присутствии уксусной кислоты, осаждения ацетоном, растворения осадка в воде с последую цсй фильтрацией и сублимационной сушкой, отличающийся тем, что, с
5 целью повышения активности целевого продукта, экстрагирование проводят 0,1 N уксусной кислотой при температуре 5 — 10 С, перед фильтрацией проводят переосаждение при Π— 1 С и после фильтрации диализ
10 при Π— 10 С в течение 12 — 16 час.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Гуров В. А. «Органопрепараты». Пищевая пром. 1968, с. 160.
