Адъювант
O ll H C А Н И Е 833245
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Сею з Советекмх
Сецмалмстмческмх
Респубттитт (6l) Дополнительное к авт, свид-ву— (22) Заявлено 19.06.79 (21) 2816304/28-13 (51) М. К . с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет—
А 61 К 31/00
Йвударетией кемнтет
СССР аю делхтт кзебретений н еткрмтхй
М (53) УДК ь 576 8...097.4 (088.8) Опубликовано 30.05,81. Бюллетень №20
Дата опубликования описания 31.05.81 (72) Авторы изобретения
Н. Г. Морозова, Л. В. Волкова, P. П. Евстигнеева и А, H. Мац (71) Заявитель
Московский ордена Трудового Красного Знамени институт тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова (54) АДЬЮВАНТ
Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно получению иммуноадъюва нтов, испол ьзуемых для приготовления гипериммунных антисывороток и при иммунизации животных.
Известен адъювант, содержащий жидкий парафин, маннитанмоноолеат и стимулирующую добавку (1).
Однако адъювант обладает повышенной реактогенностью, возможны абсцессы в месте введения, развитие туберкулиновой чувствительности.
Цель. изобретения — снижение реактогенности адъюванта при сохранении иммуностимулирующих свойств.
Эта цель достигается тем, что адъювант содержит жидкий парафин, маннитанмоноолеат и стимулирующую добавку, в качестве стимулирующей добавки он содержит 1,2-диФпальмитаил-3-0- (ф-D-глюкопиранозил) -гли.
;церин при следующем количественном соот(ношении компонентов, вес, %:
l,2-ди-0-пальмитоил-3-0-(P -D-глюкопнранозил)-глицерин 0,001-0,002
Маннитанмоноолеат, 17,0 -19,0
Жидкий парафин Остальное.
Пример l. Для получения иммуноадьюванта 1 мг 1,2-ди-О-пальмитоил-3-0-(Я-0-глюкопиранозил) -глицерина растворяют в
1 мл смеси, состоящей из жидкого парафина
82,999 (вес. %) и маннитанмоиоолеата
17 (вес. %) при 60 С. При остывании образуется мелкодисперсная суспензия
СНкОИ
00 Сйа он
8 „0 HCOCOCsH31 !
ИкСОСОСе
Перед иммунизацией раствор антигена смешивают с равным обьемом адъюванта пропуская через шприц.
Испытание проводят на мышах F,, (СВА. X С5781/6J). Каждое животное получает внутрибрюшинно 0,1 мл водномасляной эмульсии, состоящей из 0,05 мл суспензии (5 10 ) эритроцитов барана в 0,85%-ном астворе NaCI и 0,05 мл адъюванта (О,l мг .2-ди-О-пальмитоил-3-О-(/т -D-глюкопиранотил) -глицерина). Кровь берут из ретроор битального синуса,на 5-, 12- и 19-ый день после иммунизации. Титр антител, аглюти833245
Лень после иммунизации
1»оличество животных
Л, .;11. вэфов(п т
19
217
И11ь1т
176
19
1» он т р с ль
1J(f.ОЛП1И1(О/т1»ЮВОНт
Ео1(rpnst (, Полный альювант (2-8) (64-128) (8-64) 19
256
256 (128-512) (16-32) (132-300) 1,2-ди -0-п ал ьм итоил-3-0- (ф-D-глюкопиранозил)-глицерин
Маннитанмоноолеат
Жидкий парафин
0;001-0,002
l 7,,0-19,0
Остальное
Составитель В. Дроздов
Редактор Е, Лушникова Техред А. Бойкас Корректор С. Щомак
Заказ 3645/4 Тираж 687 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР. но делам изобретений и открытий
I 13035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4 нирук1щих эритроциты, определяют в микротитр;1тзр(: Такачи в объеме 0,05 мл в v-образных лунках с 0,5%-ной суспензией эритроц11п>в ftptt добавлении 0,5% íîé нормальной кроличьей сыворотки.
Дtt(группы животных .были контролем 2-я группа получала неполный адъювант (т, е.. tt(. содержащий стимулирующей добавки), а 3 » группа животных получала полный ад.ьювант Фрей нда, содержащий в качестве стимулирующей добавки микробактерии туберкулеза. (..ol ласпо по1у 1снным данным, испытуемое соединение, прибавленное в масляную фазу»1у.1ь(11и, обладает адъювантным эф-. фс кьом микр(1бактер/ий туберкулеза. На
ПЯтЫй ДС1П ПОСЛЕ ИММУНИЗаЦИИ ИСПЫТУЕМОЕ сое,(инеtltt(ttJ08ttляет больший иммуноадь1ов а 11 (it l t lt -кафф (Кт, чем M tf K p063KT(.
Ф.1/1му. }а пзобретс нпл
Лдьк11(111т, содержащий жидкий парафин, »1аии1таи; — 11(ю,1сат и стимулирующую добавиi, or tè÷àþè èéït тем, что, с целью сниж(lltlit J) tкT(tt(ttttoct tt здъ1ованта ftpH сохранении имму1гостимулирующих свойств, в „,.1 ": " (т11» улирующей добавки он (.одержит 1,2-д11-0-иальмитоил-3-0- (/р -0-глюк(>111р, 11(.11(л) -t 1ицерин ftpft следующем ко ли явственном соотношении компонентов
ttc(., В таблицее приведены данные средних обратных титров гемагглютининов в сыворотке мышей, иммунизированных эритроцитами барана с адъювантами.
5 Пример 2 и 3.. Примеры аналогичны примеру l. Количество стимулирующей добавки составляет соответственно 1,5 мг/мл (0,0015 вес. %) .и 2 мг/мл (0,002 вес. %) при аналогичном биологическом действии.
По сравнению с известным адъювантомпредлагаемый не вызывает достоверной задержки привеса мышей, т. е. не проявляет отложенной токсичности. Ни одно животное не погибло в ходе опыта, что свидетельствует об отсутствии острой токсичности, Предложенный адъювант позволяет сни зить реактогенность при сохранении иммуностимулирующих свойств.
Й
1 (128-256) (128-512) (128-256) 10 Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Воробьев А. А., Васильев H. H. Адъювапты. М., «Медицина», 1969.
